NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.5.3Phương pháp nghiên cứu ựặc ựiểm sinh học
2.5.3.1 Phương pháp nghiên cứu thời gian phát triển, khả năng sinh sản của bọ ựuôi kìm E. annulipes nuôi trong các ựiều kiện thức ăn khác nhau
Thu bọ ựuôi kìm E. annulipes tuổi 3-4 trên ựồng ruộng mang về phòng nuôi trong 2 ựiều kiện thức ăn là cám mèo và rệp xám, mỗi loại thức ăn nuôi 20 cặp, mỗi cặp nuôi trong 1 hộp nhựa loại nhỏ có ghi số thứ tự. đến khi bọ ựuôi kìm ựẻ trứng
thì ựánh dấu các cặp bọ ựuôi kìm ựẻ cùng ngày ựể theo dõi ngày nở. Tách trưởng thành ựực ra khỏi hộp ựể bọ ựuôi kìm ựực không ăn trứng và con non.
Khi trứng nở hết chuyển thiếu trùng sang các hộp nhựa loại nhỏ riêng rẽ và cung cấp thức ăn là rệp xám hoặc cám mèo (theo 2 công thức) với lượng dư thừa: 50 rệp xám hoặc 0,1g cám mèo/cá thể bọ ựuôi kìm/ngày ựêm. Hàng ngày thay thức ăn dư thừa, quan sát cho ựến khi thiếu trùng lột xác, ghi nhận ngày lột xác ở từng tuổi. Theo dõi với ắt nhất 30 cá thể.
Khi thiếu trùng tuổi 5 lột xác thì tiến hành ghép cặp cho giao phối ựẻ trứng, mỗi cặp trong 1 hộp nhựa và tiếp tục cung cấp thức ăn như với pha thiếu trùng. hàng ngày quan sát ghi nhận ngày ựẻ quả trứng ựầu tiên ựể xác ựịnh vòng ựời; theo dõi tiếp ựến khi trưởng thành chết sinh lý ựể tắnh ựời bọ ựuôi kìm. Theo dõi với ắt nhất 30 cá thể.
Quan sát ghi nhận ngày ựẻ trứng, số ổ trứng/trưởng thành cái, số quả/ổ và số trứng ựẻ ựược của từng cặp và tỷ lệ trứng nở.
Theo dõi ghi chép nhiệt ựộ, ẩm ựộ trong phòng hàng ngày.
* Chỉ tiêu theo dõi: thời gian phát triển pha trứng, từng tuổi của thiếu trùng, vòng ựời, thời gian sống của trưởng thành, khả năng ựẻ trứng, tỷ lệ trứng nở.
2.5.3.2 Phương pháp nghiên cứu thời gian phát triển, khả năng sinh sản của bọ ựuôi kìm nuôi trong các ựiều kiện nhiệt ựộ khác nhau
Tiến hành nuôi bọ ựuôi kìm E. annulipes trong tủ ựịnh ôn ở 2 ngưỡng nhiệt ựộ 250C và 300C với thức ăn là cám mèo. Phương pháp nuôi và theo dõi tương tự thắ nghiệm nuôi bọ ựuôi kìm trong phòng thắ nghiệm với 2 loại thức ăn (mục 2.5.3.1). Nuôi thế hệ thứ nhất cho ựến khi bọ ựuôi kìm ựẻ trứng nở thành con tuổi 1 lại nuôi tiếp thế hệ thứ 2, làm tương tự ựể nuôi ở thế hệ thứ 3.
* Chỉ tiêu theo dõi: thời gian phát triển pha trứng, pha thiếu trùng, vòng ựời, thời gian sống của trưởng thành, khả năng ựẻ trứng, tỷ lệ trứng nở, tỷ lệ sống sót.
Nuôi bọ ựuôi kìm E. annulata trong tủ ựịnh ôn ở 2 ngưỡng nhiệt ựộ 250C và 300C với thức ăn là cám mèo. Phương pháp nuôi và theo dõi tương tự thắ nghiệm nuôi bọ ựuôi kìm E. annulipes.
* Chỉ tiêu theo dõi: thời gian phát triển pha trứng, pha thiếu trùng, vòng ựời, thời gian sống của trưởng thành
2.5.3.3 Phương pháp xác ựịnh tỷ lệ giới tắnh của bọ ựuôi kìm
Thu mẫu ngoài ựồng: trong quá trình thu mẫu ngoài ựồng ựể xác ựịnh thành phần loài và thu mẫu nhân nuôi tiến hành ghi chép số lượng cá thể ựực và cái ở pha trưởng thành của cả 2 loài bọ ựuôi kìm E. annulipes và
E. annulata ựể xác ựịnh tỷ lệ ựực cái.
Nuôi trong phòng: ở các thắ nghiệm nuôi sinh học khi bọ ựuôi kìm hóa trưởng thành tiến hành ghi chép số lượng cá thể ựực và cái thu ựược ựể xác ựịnh tỷ lệ ựực cái theo từng ựiều kiện thắ nghiệm.
2.5.3.4 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của thuốc trừ sâu tới trưởng thành bọ ựuôi kìm E. annulipes
a/ Nghiên cứu ảnh hưởng của thuốc trừ sâu tới bọ ựuôi kìm
Tiến hành thắ nghiệm trong phòng với 5 loại thuốc (nồng ựộ): Reasgant 1.8EC hoạt chất Abamectin (nồng ựộ 0,04%), Abatimec 3.6EC hoạt chất Abamectin (nồng ựộ 0,038%), Tasieu 5WG hoạt chất Emamectin benzoate (nồng ựộ 0,125%), Peran 50EC hoạt chất Permerthrin (nồng ựộ 0,188%) và Vithadan 95WP hoạt chất Nereistoxin (nồng ựộ 0,10%). Công thức ựối chứng phun nước cất, thắ nghiệm nhắc lại 3 lần, mỗi lần nhắc là 20 cá thể bọ ựuôi kìm trưởng thành. Thuốc ựược phun bằng tháp phun Spray Tower. Sau khi tiến hành phun thuốc tiến hành tách từng cá thể bọ ựuôi kìm ra các ựĩa petri riêng, cho bọ ựuôi kìm ăn cám mèo trong thời gian theo dõi.
b/ Nghiên cứu ảnh hưởng của vật mồi nhiễm thuốc trừ sâu tới bọ ựuôi kìm E. annulipes
Sử dụng 3 loại thuốc và nồng ựộ ở thắ nghiệm trên, phun lên sâu tơ tuổi 1-2 rồi cho trưởng thành bọ ựuôi kìm E. annulipes ăn, theo dõi số bọ ựuôi kìm còn sống ở 1; 3; 5 và 7 ngày sau khi cho ăn. Thắ nghiệm với 20 cá thể bọ ựuôi kìm trưởng thành.
* Chỉ tiêu theo dõi: Số bọ ựuôi kìm sống sau 1; 3; 5 và 7 ngày.