Nguyên tắc
Dưới tác dụng của KI bão hào với peroxide trong môi trường acid acetic và chloroform sinh ra I2 tự do. Sau đó chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3
0.01 N với chất chỉ thị màu là hồ tinh bột. Điểm nhận biết từ dung dịch màu xanh tím chuyển sang không màu.
Phương trình phản ứng:
R1— CH—CH — R2 + 2KI + 2CH3COOH R1— CH—CH — R2 + I2
l l \ /
Dụng cụ và hoá chất Dụng cụ Cân 4 số lẻ Bình tam giác 250 ml Ống ly tâm 50 ml Ống ly tâm 15 ml Máy nghiền mẫu Máy lắc ngang Máy ly tâm Hoá chất Methanol Chloroform Acid acetic Na2S2O3 0.01 N KI bão hoà Hồ tinh bột Nước cất Cách tiến hành
Cân 5g mẫu cho vào ống ly tâm 50 ml. Sau đó, thêm 10 ml methanol + 5 ml chloroform + 5 ml nước cất.
Nghiền mẫu bằng máy nghiền (thời gian nghiền 20 giây, lập lại 4 lần, tốc độ tăng dần).
Thêm 5 ml chloroform và rửa sạch phần mẫu bám trên cây nghiền mẫu. Tiếp tục cho 5 ml nước cất vào và cũng rửa máy nghiền mẫu nghiền mẫu. Tiếp tục đem mẫu đi lắc ngang trong 15 phút.
Phân đều ra 3 ống ly tâm 15 ml, ly tâm 5 phút, vận tốc 4000 vòng/phút, nhiệt độ phòng.
Hút 6 ml dung dịch lớp dưới cho vào bình tam giác 250 ml, cho tiếp 25 ml dung dịch acid acetic / chloroform với (3/2 v : v).
Thêm 1ml dung KI bảo hoà lắc đều trong 1 phút (dung dịch KI bão hoà phải được pha mới hoàn toàn). Sau đó ủ mẫu trong tối 5 phút cho phản ứng xảy ra hoàn toàn. Lấy ra và thêm 75 ml nước cất lắc đều. Sau đó cho hồ tinh bột vào lắc đều.
Tiến hành chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3 0.01 N, chuẩn độ đến khi dung dịch mẫu từ màu xanh tím chuyển sang mất mầu thì dừng, ghi kết quả thể tích dung dịch Na2S2O3 0.01 N.
Khi cho hồ tinh bột vào phải chuẩn độ ngay, vì Iod hấp thụ mạnh lền bề mặt của hồ tinh bột và thời gian ngấm sâu vào cấu trúc của hồ tinh bột, do đó sẽ dễ bị sai số. Sau 5 giây xuất hiện màu xanh tím nhạt thì tiến hành chuẩn độ để xác định.
Tính kết quả
Trong đó:
PV: chỉ số Peroxide cần xác định (meq/kg).
V: thể tích dung dịch Na2S2O3 0.01 N chuẩn độ mẫu thử (ml). Vo: thể tích dung dịch Na2S2O3 0.01 N chuẩn độ mẫu trắng (ml). mo: khối lượng mẫu ban đầu (g).
N: nồng độ Na2S2O3.