Chương 2 ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP 2.1 VẬT LIỆU & THIẾT BỊ
2.2. KIỂM NGHIỆM VIÊN GLICLAZID SR 30MG
Viên nén Gliclazid SR 30 mg được kiểm nghiệm theo các tiêu chuẩn sau:
Tính chất
Quan sát bằng mắt thường, các viên Gliclazid SR 30 mg phải có đặc điểm là viên nén dài, dẹp, màu trắng ngà.
Định tính gliclazid
Cân một lượng bột viên Gliclazid SR 30 mg đã nghiền mịn tương đương với 0,3 g gliclazid đem hòa tan với 20 ml dicloromethan, ly tâm, lọc và làm bay hơi dịch lọc đến cắn. Lấy cắn đem đo phổ hồng ngoại và so sánh với phổ hồng ngoại của gliclazid chuẩn.
Độ đồng đều khối lượng
Tiến hành theo DĐVN III, Phụ lục 8.3 (trang PL - 132). Tiêu chuẩn: ± 7,5% so với khối lượng trung bình viên.
Độ phân tán khối lượng
Áp dụng đối với sản phẩm của 14 mô hình công thức. Tiến hành lấy 100 viên tại một thời điểm cố định (sau khi dập viên có khối lượng và độ cứng ổn định 5 phút), xác định hệ số phân tán CV%.
Độ hòa tan
- Thiết bị thử nghiệm: máy thử độ hòa tan dùng cánh khuấy. - Số lượng: 6 viên.
- Nhiệt độ 36,5 - 37,5 oC; tốc độ quay 50 vòng/ phút.
- Môi trường: 750 ml dung dịch acid hydrocloric 0,1N. Sau 2 giờ, rút chính xác 10 ml dịch môi trường đem lọc và định lượng. Bổ sung vào trong mỗi bình thử nghiệm 230 ml dung dịch natri phosphat (Na3PO4.12H2O) và 30 ml nước cho đủ 1000 ml tạo thành dung dịch đệm pH 6,8. Rút chính xác 10 ml dịch môi trường tại các thời điểm sau 6 giờ và sau 12 giờ (sau 6 giờ, bổ sung lại bằng 10 ml dung dịch đệm), lọc và định lượng.
- Định lượng gliclazid đã hòa tan bằng phương pháp quang phổ tử ngoại: đo độ hấp thu của dung dịch lọc ở bước sóng 226 nm và 290 nm. Độ hấp thu chính xác thu được bằng cách lấy độ hấp thu 226 nm trừ đi độ hấp thu ởû bước sóng 290 nm. Nồng độ hoạt chất phóng thích ở mỗi thời điểm được xác định dựa trên đường chuẩn đã được xác lập trước đó.
- Tiêu chuẩn: lượng gliclazid được hòa tan phải nằm trong các khoảng: Sau 2 giờ: 10 - 30%
Sau 6 giờ: 30 - 65% Sau 12 giờ: ≥ 75%
Định lượng gliclazid bằng phương pháp HPLC
- Điều kiện sắc ký
Pha động: acetonitril - nước (43 : 57), pH 3. Cột: 4 x 150 mm, nhồi pha tĩnh C18 (4 μm).
Tốc độ dòng: 0,9 ml/ phút. Lượng mẫu tiêm: 10 μl. Detector: UV - VIS (230 nm).
- Dung dịch thử: Lấy 20 viên Gliclazid SR 30 mg, tán thành bột mịn. Cân một
lượng bột viên tương đương với 30 mg gliclazid vào bình định mức 50 ml, thêm 30 ml acetonitril và lắc siêu âm. Pha loãng bằng acetonitril đến vạch, lọc. Hút chính xác 5 ml dung dịch lọc vào bình định mức 100 ml, pha loãng thành 100 ml bằng pha động (30 μg/ ml). Lọc qua màng lọc 0,45 μm vào một ống sạch, kín.
- Dung dịch chuẩn: Cân chính xác khoảng 60 mg gliclazid chuẩn vào bình định
mức 100 ml, hòa tan và làm đầy đến vạch trong acetonitril. Lấy chính xác 5 ml dung dịch trên vào bình định mức 100 ml, pha loãng bằng pha động đến vạch (30 μg/ ml). Lọc qua màng lọc 0,45 μm vào một ống sạch, đậy kín. - Tiến hành: Lần lượt tiêm dung dịch thử và dung dịch chuẩn vào cột sắc ký,
ghi lại sắc ký đồ, đo độ đáp ứng của các đỉnh chính. - Cách tính lượng gliclazid (trong một viên):
c c t t S C S C = × 1.000 5 Q 0 1 50 M C P(mg) t tb × × × × × = 0 (2.12) Trong đó:
St, Sc: diện tích đỉnh của mẫu thử và mẫu chuẩn
Ct , Cc: nồng độ gliclazid có trong dung dịch mẫu thử và mẫu chuẩn (μg/ ml) Mtb: khối lượng trung bình của viên (mg)
P: hàm lượng gliclazid trong một viên
Q: lượng mẫu thử cân để pha dung dịch thử (mg)