Định lƣợng hàm lƣợng Nitơ tổng (protein thô)

Một phần của tài liệu khảo sát thành phần hóa học và điều kiện ly trích hoạt chất của nấm linh chi (ganoderma lucidum) được trồng ở miền nam việt nam (Trang 57 - 58)

Phƣơng pháp

Chúng tôi lựa chọn tiến hành định lƣợng Nitơ tổng theo phƣơng pháp Kjedalh đã đƣợc trình bày ở mục 2.3.2.5a.

Tiến hành

Phá mẫu (vô cơ hóa mẫu)

- Cân 0,5 g mẫu linh chi (đã xử lí) vào cốc.

- Thêm vào 2 g xúc tác hỗn hợp CuSO4, K2SO4 (tỉ lệ 1: 10)

- Tiếp tục cho cẩn thận 10 mL dung dịch H2SO4 đậm đặc vào cốc.

Chƣng cất mẫu

- Dung dịch thu đƣợc đƣa vào bình Kjedahl 500 mL, có thể cho thêm một ít bột MgO để quá trình sôi diễn ra đồng đều và nhanh hơn.

- Trong bình Kjedahl đã phá mẫu, thêm vào 200 mL nƣớc cất, lắp hệ thống chƣng cất kín , mở nƣớc hoàn lƣu, đun cho tới khi dung dịch mẫu chuyển sang màu xanh da trời nhạt.

- Đổ thật nhanh 30 – 40 mL dung dịch NaOH đặc (35 – 40%) vào bình, chƣng cất đến khi NH3 bay hết.

Chuẩn độ

- Cho 10 – 20 mL dung dịch H2SO4 (hoặc HCl) chuẩn 0,1 N vào erlen 250 mL, sau đó thêm 5 giọt thuốc thử Methyl đỏ. Ống dẫn NH3 phải ngập đầu ống trong hỗn

SVTH: Lê Trọng Quang

Nguyễn Thanh Tùng 43

hợp dung dịch đã chuẩn bị. Theo dõi erlen đến khi không còn khí sục lên thì dừng. Dùng quỳ tím ẩm để kiểm tra chắc rằng không còn NH3 thoát ra ở đầu ống.

- Lấy erlen ra và chuẩn độ lƣợng acid dƣ bằng NaOH 0,1 N.

Tính kết quả

Hàm lƣợng Nitơ có trong mẫu đƣợc tính theo công thức: ( ) Trong đó: V1 – số mL H2SO4 0,1 N cho vào erlen.

V2 – số mL NaOH dùng để chuẩn độ lƣợng acid dƣ.

f – hệ số điều chỉnh nồng độ H2SO4 ở erlen, f = 1 khi nồng độ chính xác 0,1N.

w – khối lƣợng mẫu dùng để vô cơ hóa mẫu.

Thực nghiệm

Tiến hành định lƣợng nitơ tổng của 3 mẫu linh chi (mỗi mẫu 1g) với các bƣớc thực hiện và tính toán kết quả nhƣ trên.

Một phần của tài liệu khảo sát thành phần hóa học và điều kiện ly trích hoạt chất của nấm linh chi (ganoderma lucidum) được trồng ở miền nam việt nam (Trang 57 - 58)