... Thành phần phản ứng RT- PCR 25 Bảng 3.3. Chu kỳ nhiệt cho phản ứng RT- PCR 26 Hình 4.1. Sản phẩm RT- PCR trên mẫu RNA chuẩn khi dùng với Taq Beat Hot Start 28 Hình 4.2. Sản phẩm RT- PCR trên mẫu RNA ... Phương pháp RT- PCR trên RNA virus 25 3.5.6. Điện di sản phẩm RT- PCR 27 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1. Kết quả RT- PCR trên mẫu chuẩn của PRRSV 28 4.1.1. RT- PCR với Taq beat hot start (Promega) ... THẢO LUẬN 4.1. Kết quả RT - PCR trên mẫu RNA chuẩn của PRRSV 4.1.1. RT- PCR với Taq beat Đầu tiên, để thiết lập quy trình RT- PCR, chúng tôi đã tiến hành phương pháp RT- PCR một bước trên mẫu...
... đoạn PCR . RT- PCR (Reverse Transcriptase- Polymerase Chain Reaction) Do Taq polymerase không hoạt động đƣợc trên RNA nên ngƣời ta sử dụng kĩ thuật phối hợp là RT- PCR (Reverse transcriptase- PCR) . ... qua phản ứng PCR nhƣ trình bày ở phần trên. Kĩ thuật RT- PCR cho phép nghiên cứu các mRNA tồn tại với hàm lƣợng rất thấp không thể phát hiện bằng các phƣơng pháp thông thƣờng nhƣ Northern blot ... sản phẩm PCR ban đầu bằng cách sử dụng sản phảm PCR đầu tiên này làm khuôn mẫu. Phƣơng pháp nested -PCR cũng có thể thực hiện với một cặp mồi đầu tiên và một mồi đơn cho phản ứng nested -PCR sau...
... triển kỹthuật multiplex. Nhƣ vậy, ở nhiệt độ 550C theo qui trình Single - Step RT - PCR là tối ƣu nhất cho hai mồi MrNV và XSV. 4.3. KẾT QUẢ ỨNG DỤNG QUI TRÌNH SINGLE - STEP RT - PCR KHẢO ... 6, 7, 8: sản phẩm RT - PCR từ mẫu tôm mẹ nhiễm MrNV và XSV. Giếng 9: sản phẩm RT - PCR từ mẫu tôm postlarvae nhiễm MrNV và XSV. Giếng 5: âm tính. Giếng 3: sản phẩm RT - PCR từ mẫu tôm mẹ ... - Step RT - PCR để khuếch đại RNA bằng PCR 17 Hình 4.1: Kết quả điện di các sản phẩm khuếch đại từ mẫu tôm càng xanh nhiễm MrNV, XSV 26 Hình 4.2: Kết quả điện di các sản phẩm RT - PCR từ mẫu...
... Thành phần phản ứng RT- PCR 25 Bảng 3.3. Chu kỳ nhiệt cho phản ứng RT- PCR 26 Hình 4.1. Sản phẩm RT- PCR trên mẫu RNA chuẩn khi dùng với Taq Beat Hot Start 28 Hình 4.2. Sản phẩm RT- PCR trên mẫu RNA ... THẢO LUẬN 4.1. Kết quả RT - PCR trên mẫu RNA chuẩn của PRRSV 4.1.1. RT- PCR với Taq beat Đầu tiên, để thiết lập quy trình RT- PCR, chúng tôi đã tiến hành phương pháp RT- PCR một bước trên mẫu ... năm gần đây, kỹthuật sinh học phân tử đã phát triển một cách mạnh mẽ và chứng minh được vai trò ưu việt, trong đó kỹthuậtPCR ngày càng được ứng dụng rộng rãi hơn. Đây là một kỹthuật có độ...
... trình biến tính và bắt cặp. 2.4.2 RT- PCR Kỹ thuật RT- PCR (Reverse transcriptase- PCR) thì tƣơng tự nhƣ kỹthuật PCR, nó cho phép khuếch đại một lƣợng nhỏ RNA. Kỹthuật này thƣờng đƣợc sử dụng để ... với sugarcane mild mosaic virus đều nhiễm SCBV (Lockhart và cộng sự, 1992). 27 2.4 KỹthuậtPCR và RT- PCR 2.4.1 PCR Kĩ thuậtPCR PCR (Polymerase Chain Reaction- phản ứng tổng hợp dây ... Những bó mạch bình thƣờng sẽ không phát huỳnh quang. 3.6 Phƣơng pháp phát hiện bằng kỹthuật RT- PCR Kỹ thuật RT- PCR đƣợc thực hiện là hai bƣớc (two steps): gồm giai đoạn tổng hợp cDNA và giai...
... 6, 7, 8: sản phẩm RT - PCR từ mẫu tôm mẹ nhiễm MrNV và XSV. Giếng 9: sản phẩm RT - PCR từ mẫu tôm postlarvae nhiễm MrNV và XSV. Giếng 5: âm tính. Giếng 3: sản phẩm RT - PCR từ mẫu tôm mẹ ... với nhau. 2.3.6. Phƣơng pháp RT - PCR (Reverse Transcription Polymerase Reaction) Phƣơng pháp RT - PCR là sự kết hợp giữa phƣơng pháp phiên mã ngƣợc và phƣơng pháp PCR. Phƣơng pháp này có thể ... tồn tại với lƣợng rất thấp, mà không thể phát hiện bằng phƣơng pháp nhƣ Northern blot. Ngoài ra, RT- PCR kết hợp với kỹthuật RFLP có thể dễ dàng phát hiện ra các đột biến và sự đa hình trong đoạn...
... tái sinh từ ĐST được kiểm tra PMWaV-1 bằng kỹthuật RT- PCR 24 Bảng 3.2 Thành phần mix phản ứng RT- PCR 27 Bảng 3.3 Chu trình nhiệt của phản ứng RT- PCR 28 Bảng 4.1 Kết quả kiểm tra PMWaV-1 trên ... THANH ỨNG DỤNG KỸTHUẬT RT- PCR PHÁT HIỆN VIRUS PMWaV-1 (Pineapple mealybug wilt associated virus-1) GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH ... từ đỉnh sinh trưởng đã qua xử lý nhiệt ở 370C trong thời gian 40 ngày và 50 ngày bằng kỹthuật RT- PCR. * Khảo sát sự tăng trưởng của cây dứa in vitro sạch virus PMWaV-1 và các chồi dứa...
... khẳng định kết quả của những kỹthuật phân biệt giới tính khác.2.3.4 Sử dụng đoạn dò DNA chuyên biệt NST Y để phân biệt giới tính phôiNguyên tắc cơ bản của kỹthuật này là việc lai DNA tổng ... pháp xác định giới tính phù hợp vẫn còn tiếp tục.2.3.5 Phân biệt giới tính bằng kỹthuật polymerase chain reaction (PCR) Vào năm 1985, Karl Mullis và ctv đã phát minh ra phương pháp tổng hợp DNA ... sát thông qua những kỹthuật phân tách và điện di DNA (Hồ Huỳnh Thuỳ Dương , 2002).Theo Schorder và ctv (1990), việc sử dụng đoạn mồi chuyên biệt NST Y trong phản ứng PCR giúp khuếch đại đoạn...
... O157:H7 122.4. KỹthuậtPCR 142.4.1. Khái niệm 142.4.2. Nguyên tắc 142.4.3. Các thành phần cần thiết của phản ứng PCR 152.4.4. Phân tích kết quả PCR 162.4.5 Multiplex – PCR 162.4.6. Ứng ... được phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy của bò, heo, bê và 9 mẫu bề mặt thịt bò bằng kỹthuật multiplex – PCR. Quan sát và ghi nhận trên môi trường MAC chỉ có một loại khuẩn lạc hồng, trên môi ... sát 32xĐÀM THỊ MINH THƠ, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, tháng 9/2005. “ỨNG DỤNG KĨ THUẬT MULTIPLEX – PCR ĐỂ PHÁT HIỆN MỘT SỐ GEN ĐỘC LỰC CỦA NHÓM E. COLI SẢN SINH ĐỘC TỐ SHIGA (STEC) PHÂN...
... lập.Multiplex – PCR là một cải tiến của kỹthuậtPCR mà trong đó có thể nhân lên đồng thời nhiều đoạn DNA mong muốn bằng cách sử dụng nhiều cặp primer trong một phản ứng. Multiplex – PCR đầu tiên ... việc phát hiện các gen gây độc của E. coli bằng kỹthuậtPCR là bước cần thiết góp phần đánh giá nguy cơ gây bệnh trên vật nuôi và con người. PCR là phương pháp nhanh, đặc hiệu, cho kết quả ... người đã chứng minh được điều này. Khía cạnh này của PCR đã được chứng minh là rất quan trọng trong các phân tích pháp lý, cho phép kỹthuật genetic fingeprinting được sử dụng chỉ với một sợi...