kỹ thuật tái tổ hợp dna

Recombinant DNA2  kỹ thuật tái tổ hợp DNA  bản dịch đính kèm

Recombinant DNA2 kỹ thuật tái tổ hợp DNA bản dịch đính kèm

... blot (???) Southern blot (DNA) Southern Blot: DNA-DNA* Uses gel electrophoresis together with hybridization probes to characterize restriction fragments of genomic DNA (or DNA from other sources, ... hybridization Transfer the DNA in the plaque or colony to a Nylon or nitrocellulose membrane Phage DNA bind to the membrane directly Bacterial colonies must be lysed to release DNA on the membrane surface ... nitrocellulose – usually has a slight positive charge • Identify DNA sequence (gene) of interest General Scheme for Southern Blot Southern Steps DNA to be analyzed is digested to completion with a restriction

Ngày tải lên: 24/10/2017, 19:02

91 194 0
kĩ thuật tái tổ hợp dna

kĩ thuật tái tổ hợp dna

... bào sống, được gọi là DNA tái tổ hợpkỹ thuật này được gọi là kỹ thuật tái tổ hợp DNA. Sự tái tổ hợp DNA được xem là thành công chỉ sau khi đưa được phân tử DNA tái tổ hợp vào trong tế bào ... hành trong kĩ thuật tái tổ hợp DNA 5.1 Tạo DNA tái tổ hợp 5.1.1 DNA tái tổ hợp là gì? DNA gồm 3 thành phần chính: base nitơ... plasmid tái tổ hợp có hai chuỗi ... tạo DNA tái tổ hợp 1,2: Cắt DNA của tế bào cho và plasmid bằng cùng một loại enzyme giới hạn 3 : Đưa DNA tái tổ hợp vào trong tế bào nhận 4 : Nhân dòng 2. Các enzyme sử dụng trong kĩ thuật tái tổ

Ngày tải lên: 12/04/2015, 10:14

47 786 3
KỸ THUẬT TÁI TỔ HỢP ADN

KỸ THUẬT TÁI TỔ HỢP ADN

... đề KỸ THUẬT TÁI TỔ HỢP ADN TRƯỜNG ĐẠI HỌC BẠC LIÊU KHOA NÔNG NGHIỆP - MÔN DI TRUYỀN ĐẠI CƯƠNG LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN KỸ THUẬT TÁI TỔ HỢP ADN LÀ GÌ? Khái niệm: ADN tái tổ ... CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT ... V: KỸ THUẬT DI TRUYỀNLỚP 2NT1 – TỔ 1 [...]... được tạo dòng LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN Sự tạo ADN tái tổ hợp LỚP 2NT1 – TỔ 1 CHƯƠNG V: KỸ THUẬT DI TRUYỀN LỚP 2NT1 – TỔ

Ngày tải lên: 10/02/2014, 14:39

28 3K 6
Nghiên cứu các biện pháp kỹ thuật trên tổ hợp lai ngô triển vọng tại đan phượng, hà nội

Nghiên cứu các biện pháp kỹ thuật trên tổ hợp lai ngô triển vọng tại đan phượng, hà nội

... 4.1.2 Một số đặc điểm hình thái tổ hợp lai 28 4.1.3 Các yếu tố cấu thành suất suất tổ hợp lai 30 4.2 Ảnh hưởng mật dộ phân bón đến sinh trưởng suất tổ hợp lai ưu tú tuyển chọn ... Thời gian sinh trưởng tổ hợp lai vụ Xuân 2020 26 Bảng 4.2 Khả chống chịu mức độ nhiễm sâu bệnh tổ hợp lai vụ Xuân 2020 27 Bảng 4.3 Một số đặc điểm hình thái tổ hợp lai vụ Xuân 2020 ... THL1 tơt hợp cơng thức phân bón mật độ nghiên cứu vụ Thu 2020 Đan Phượng - Hà Nội 48 vii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Bùi Đức Hải Tên luận văn: Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật tổ hợp lai

Ngày tải lên: 11/07/2023, 21:21

106 0 0
Luận Án Tiến sĩ Đánh giá khả năng sinh trưởng, phát triển của một số tổ hợp ngô lai và biện pháp kỹ thuật cho tổ hợp lai triển vọng phục vụ sản xuất ngô vùng Đông Bắc

Luận Án Tiến sĩ Đánh giá khả năng sinh trưởng, phát triển của một số tổ hợp ngô lai và biện pháp kỹ thuật cho tổ hợp lai triển vọng phục vụ sản xuất ngô vùng Đông Bắc

... Randomized Complete Block Design (Khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh) THL Tổ hợp lai TGST Thời gian sinh trưởng SCA Specific Combining Ability (Khả kết hợp riêng) USDA United State Department of Agriculture (Bộ ... Cao Xá - huyện Lâm Thao - tỉnh Phú Thọ Đạm Đạm dễ tiêu tổng số (NH4 - N) (NO3 - N) (%) (mg/kg) 0,072 Lân Lân dễ Kali Kali dễ Hữu tổng số tiêu tổng số tiêu (mg/kg) % (mg/kg) % (mg/kg) % 5,6 2,1 0,056 ... of variation (Hệ số biến động) FAO Food Agriculture Oganization (Tổ chức Nông Lương thực) GCA General Combining Ability (Khả kết hợp chung) KL1000 Khối lượng 1000 hạt LAI Leaf area index (chỉ số

Ngày tải lên: 19/05/2017, 09:17

188 198 0
Đồ án tốt nghiệp cử nhân kỹ thuật ô tô: Hộp số sàn xe Ford ranger 2011

Đồ án tốt nghiệp cử nhân kỹ thuật ô tô: Hộp số sàn xe Ford ranger 2011

... tiêu chuẩn cho phép phải thay - Các lỗ bánh lồng khơng bị mịn ta ép bạc doa lại theo theo kỹ thuật phù hợp Bộ đồng tốc a Kiểm tra - Kiểm tra vòng đồng tốc:  Kiểm tra độ bám bề mặt vịng đồng tốc ... K57 51 ĐATN Cử nhân CNKT Ơ phương pháp phun kim loại hàn đắp gia công lại máy tiện theo kỹ thuật đảm bảo độ cứng ban đầu Nếu mịn q mức phải thay trục - Rãnh then hoa trục bị mịn nhiều thay ... Hiện loại xe khai thác sử dụng nước chủ yếu nhập nước lắp ráp nước, loại xe có thông số kĩ thuật phù hợp với điều kiện địa hình khí hậu Việt Nam Do đặc thù khí hậu nước ta nhiệt đới gió mùa ẩm,

Ngày tải lên: 31/08/2020, 22:30

59 484 9
Báo cáo tiểu luận kỷ thuật lắp ráp gen và tạo ra DNA tái tổ hợp

Báo cáo tiểu luận kỷ thuật lắp ráp gen và tạo ra DNA tái tổ hợp

... interferon Interferon anpha tái tổ hợp, thuốc kháng virus, dùng phòng chữa bệnh cho gia súc gia cầm Sản xuất insulin Cấu trúc phân tử insulin  Sản xuất insulin tái tổ hợp vói chuỗi A chuỗi B riêng ... vector: Cắt đoạn DAN loại enzyme cắt giới hạn_ cắt vị trí Nối hai đầu DNA hai đầu vector enzyme DNA ligase thu vector tái tổ hợp Enzyme giới hạn(RE) ‗ ‗ Là enzyme có khả nhận biết cắt trình tự ... Kĩ thuật lắp ráp gen Định nghĩa I Kĩ thuật lắp ráp gen tập hợp nhiều kĩ thuật gen gen cải biên cấu trúc gen, gen tạo gen gen A Một số thao tác kĩ thuật lắp ráp gen I II III

Ngày tải lên: 10/06/2021, 20:50

36 26 0
Đánh giá sự biểu biểu hiện gen mã hóa pheromone lai alpha (MF(ALPHA)1) ở các chủng pichia pastoris tái tổ hợp sinh amylase và interleukin 2 bằng kỹ thuật real time PCR

Đánh giá sự biểu biểu hiện gen mã hóa pheromone lai alpha (MF(ALPHA)1) ở các chủng pichia pastoris tái tổ hợp sinh amylase và interleukin 2 bằng kỹ thuật real time PCR

... pastoris tái tổ hợp; phương pháp tách chiết tinh mRNA từ P Pastoris; kỹ thuật PCR; kỹ thuật Real-time PCR; xử lý số liệu sử dụng phần mềm LightCycler 4.0 Đưa kết thảo luận: Lên men chủng P pastoris tái ... pastoris tái tổ hợp Vì chúng tơi tiến hành thực đề tài “Đánh giá biểu biểu gen mã hóa Pheromone lai alpha (MF(ALPHA)1) chủng Pichia pastoris tái tổ hợp sinh Amylase Interleukin-2 kỹ thuật Real-time ... thẳng giúp ổn định trình biến nạp vào P pastoris nhờ sát nhập hay tái tổ hợp với trình tự tương đồng gene nấm men DNA tái tổ hợp tồn ổn định với dạng đa gene tế bào chủ Ở chủng Mut+ (Muts), gene

Ngày tải lên: 10/02/2014, 15:15

18 497 0
Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng Escherichia coli O157H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu

Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng Escherichia coli O157H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu

... Khảo sát nhiệt độ biểu kháng thể tái tổ hợp 84 Hình ảnh điệ 3.26 - kháng thể tái tổ 86 hợp Hình ảnh kết điện di SDS-PAGE trình tinh protein tái tổ 3.27 87 hợp phƣơng pháp Hybrid Hình ảnh điện ... thể tái tổ hợp 77 3.21 Hình ảnh điện di sản phẩ 80 3.22 Thiết kế vector pET28a-TRX biểu gen mã hóa kháng thể 81 -PAGE 3.23 82 3.24 kháng thể tái tổ hợp 83 3.25 Khảo sát nhiệt độ biểu kháng thể tái ... COLI O157:H7 14 1.2.1 Phƣơng pháp PCR dựa DNA 14 1.2.2 Kỹ thuật LAMP 18 1.2.3 Sử dụng kháng thể tái tổ hợp phát E coli O157:H7 19 1.3 KHÁNG THỂ

Ngày tải lên: 17/07/2014, 09:51

128 473 0
Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng Escherichia coli O157H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu (tóm tắt)

Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng Escherichia coli O157H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu (tóm tắt)

... triển kỹ thuật phát chủng vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu” Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu kỹ thuật phát chủng vi khuẩn E coli O157:H7 tạo kháng thể tái tổ hợp ... THỂ TÁI TỔ HỢP 3.4.1 Trước tinh sạch, kháng thể tái tổ hợp kiểm tra độ hòa nhiệt độ 30o 37oC Kết kiểm tra cho thấ 30o 37o Để sử dụng protein tái tổ hợp phục vụ cho mục đích chẩn đốn, protein tái ... O157:H7 kỹ thuật phage display; (iii) Thu nhận kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu vi khuẩn E coli O157:H7; (iv) Xác định độ nhạy, tính đặc hiệu kháng thể tái tổ hợp Những điểm đề tài: (i) Tạo kháng thể tái

Ngày tải lên: 18/07/2014, 11:29

27 465 0
BÁO CÁO SEMINAR KỸ THUẬT DI TRUYỀN CHỦ ĐỀ: SẢN XUẤT VACCINE TÁI TỔ HỢP

BÁO CÁO SEMINAR KỸ THUẬT DI TRUYỀN CHỦ ĐỀ: SẢN XUẤT VACCINE TÁI TỔ HỢP

... dạng mới xuất hiện gọi là dạng tái tổ hợp (recombinant). Để đánh giá mức độ liên kết, dùng khái niệm tần số tái tổ hợp. % tái tổ hợp = Số cá thể tái tổ hợp / tổng số cá thể x 100% ( giống công ... New York Medical College đã sáng chế ra kỹ thuật tái tổ hợp di truyền ngược nhằm tạo ra chủng virus tái tổ hợp phát triển tốt hơn trong trứng gà. Kỹ thuật này cho phép 6 gene (mã hóa cho các ... còn sử dụng DNA tổng hợp bằng phương pháp hóa học hoặc tổng hợp từ mRNA nhờ enzyme sao chép ngược theo cơ chế nuclease S1 hoặc kỹ thuật Gubler-Hoffman. Các enzyme để cắt, nối các đoạn DNA lại với

Ngày tải lên: 19/12/2014, 00:51

12 848 5
báo cáo kỹ thuật di truyển- sản xuất vaccine tái tổ hợp

báo cáo kỹ thuật di truyển- sản xuất vaccine tái tổ hợp

... dạng mới xuất hiện gọi là dạng tái tổ hợp (recombinant). Để đánh giá mức độ liên kết, dùng khái niệm tần số tái tổ hợp. % tái tổ hợp = Số cá thể tái tổ hợp / tổng số cá thể x 100% ( giống công ... New York Medical College đã sáng chế ra kỹ thuật tái tổ hợp di truyền ngược nhằm tạo ra chủng virus tái tổ hợp phát triển tốt hơn trong trứng gà. Kỹ thuật này cho phép 6 gene (mã hóa cho các ... sử dụng DNA tổng hợp bằng phương pháp hóa học hoặc tổng hợp từ mRNA nhờ enzyme sao chép ngược theo cơ chế nuclease S1 hoặc kỹ thuật Gubler-Hoffman. Các enzyme để cắt, nối các đoạn DNA lại với

Ngày tải lên: 06/01/2015, 21:50

12 722 2
Ứng dụng kháng nguyên tái tổ hợp p24, GP41, GP120 trong chẩn đoán HIV  bằng kỹ thuật ngưng kết hạt latex

Ứng dụng kháng nguyên tái tổ hợp p24, GP41, GP120 trong chẩn đoán HIV bằng kỹ thuật ngưng kết hạt latex

... Protein tái tổ hợp dạng lai mã hóa từ gen trx dung hợp với gen gp120, tổng hợp E.coli Protein tái tổ hợp dạng lai mã hóa từ gen trx dung hợp với gen gp41, tổng hợp E.coli Protein tái tổ hợp dạng ... hạt latex có gắn protein tái tổ hợp gp120; mẫu 2: hạt latex có gắn protein tái tổ hợp gp41; mẫu 3: hạt latex có gắn protein tái tổ hợp p24 Kết quả trên cho thấy ... Protein tái tổ hợp được đo bằng máy Nanodrops Protein tái tổ hợp Nồng độ( mg/ml) () Gp120 0,614 Gp41 0,630 P24 0,661 3.1.2 Kiểm tra độ tinh sạch của Protein tái tổ hợp Để

Ngày tải lên: 10/06/2016, 22:34

44 763 2
Bài giảng các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật, thực vật, vi sinh vật và tạo ADN tái tổ hợp

Bài giảng các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật, thực vật, vi sinh vật và tạo ADN tái tổ hợp

... Khả tiếp nhận đoạn DNA lạ lớn plasmid Tuy nhiên, việc sử dụng phage có nhiều bất lợi - Thao tác ghép DNA lạ phức tạp, - DNA tái tổ hợp không tạo thành khuẩn lạc DNA tái tổ hợp plasmid, mà thành ... vector tái tổ hợp, - Đưa vector tái tổ hợp vào tế bào chủ nuôi cấy điều kiện thích hợp để tạo dòng, - Xác định dòng cần tìm thành lập ngân hàng cDNA Mục đích việc thiết lập ngân hàng cDNA nhằm ... cắt enzyme EcoRI Trong trường hợp này, có đoạn nối bị cắt cDNA nguyên vẹn (do metyl hóa) Đưa cDNA vào vector tạo DNA tái tổ hợp, - Ghép cDNA đầu dính vào vector thích hợp mở EcoRI khử nhóm phosphat,

Ngày tải lên: 14/06/2016, 20:34

58 727 0
Ứng dụngkháng nguyên tái tổ hợp p24, GP41, GP120 trong chẩn đoán HIV  bằng kỹ thuật ngưng kết hạt latex

Ứng dụngkháng nguyên tái tổ hợp p24, GP41, GP120 trong chẩn đoán HIV bằng kỹ thuật ngưng kết hạt latex

... Protein tái tổ hợp dạng lai mã hóa từ gen trx dung hợp với gen gp120, tổng hợp E.coli Protein tái tổ hợp dạng lai mã hóa từ gen trx dung hợp với gen gp41, tổng hợp E.coli Protein tái tổ hợp dạng ... Protein tái tổ hợp được đo bằng máy Nanodrops Protein tái tổ hợp Nồng độ( mg/ml) () Gp120 0,614 Gp41 0,630 P24 0,661 3.1.2 Kiểm tra độ tinh sạch của Protein tái tổ hợp Để ... HIV phải trải qua hai lần kiểm tra kỹ thuật Elisa cho kết dương tính Và khẳng định cuối kỹ thuật western-blot, kỹ thuật có tính chuyên sâu độ đặc hiệu cao Kỹ thuật western-blot kết luận dương

Ngày tải lên: 26/11/2016, 22:38

44 730 0
Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng vi khuẩn scherichia coli O157 H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu

Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng vi khuẩn scherichia coli O157 H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu

... Khảo sát nhiệt độ biểu kháng thể tái tổ hợp 84 Hình ảnh điệ 3.26 - kháng thể tái tổ 86 hợp Hình ảnh kết điện di SDS-PAGE trình tinh protein tái tổ 3.27 87 hợp phƣơng pháp Hybrid Hình ảnh điện ... thể tái tổ hợp 77 3.21 Hình ảnh điện di sản phẩ 80 3.22 Thiết kế vector pET28a-TRX biểu gen mã hóa kháng thể 81 -PAGE 3.23 82 3.24 kháng thể tái tổ hợp 83 3.25 Khảo sát nhiệt độ biểu kháng thể tái ... COLI O157:H7 14 1.2.1 Phƣơng pháp PCR dựa DNA 14 1.2.2 Kỹ thuật LAMP 18 1.2.3 Sử dụng kháng thể tái tổ hợp phát E coli O157:H7 19 1.3 KHÁNG THỂ

Ngày tải lên: 10/03/2017, 05:57

128 302 0
Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng Escherichia coli O157H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu (LA tiến sĩ)

Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát hiện chủng Escherichia coli O157H7 và tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu (LA tiến sĩ)

... IPTG cảm ứng biểu hiện kháng thể tái tổ hợp Khảo sát nhiệt độ biểu hiện của kháng thể tái tổ hợp Hình ảnh điện di SDS-PAGE kiểm tra độ hịa tan của kháng thể tái tổ hợp Hình ảnh kết quả điện di SDS-PAGE ... protein tái tổ hợp bằng phương pháp Hybrid Hình ảnh điện di kết quả phản ứng Western blot của kháng thể tái tổ hợp voi anti His-tag Hình ảnh kết quả phản ứng Dot blot của kháng thể tái tổ hợp với ... thể tái tổ hợp với các protein đích Kháng thể tái tổ hợp phage display cĩ nhiều ưu điểm hơn so với kháng thể đơn dịng được tạo ra bởi kỹ thuật hybridoma [22] Trong khi sản xuất kháng thể bằng kỹ

Ngày tải lên: 25/07/2017, 10:18

128 149 0
Tổ chức kế toán tập hợp chi phí và tính giá dịch vụ trong quy hoạch tại trung tâm kỹ thuật tài nguyên và môi trường

Tổ chức kế toán tập hợp chi phí và tính giá dịch vụ trong quy hoạch tại trung tâm kỹ thuật tài nguyên và môi trường

... điểm tổ chức máy quản lý trung tâm Tổ chức máy quản lý Trung tâm theo sơ đồ 2.1 sau Giám đốc Phó giám đốc Phó giám đốc Phịng Phịng Phịng Phịng Quy hoạch Hành Kỹ thuật Đo đạc -Địa giới -Tổng hợp ... toán viên Sơ đồ 2: Tổ chức máy kế toán Trung tâm Kỹ thuật Tài Nguyên Môi Trường Nghệ an 1.1.3.2 Đặc điểm kế tốn Trung tâm: Hình thức tổ chức cơng tác kế toán mà Trung tâm Kỹ thuật Tài nguyên Mơi ... Tổ chức kế tốn tập hợp chi phí tính giá dịch vụ quy hoạch Trung tâm Kỹ thuật Tài nguyên Môi trường” Đối tượng nghiên cứu: Luận văn tốt nghiệp với đề tàiTổ chức kế tốn tập hợp chi phí tính giá

Ngày tải lên: 21/05/2019, 13:48

48 51 0
Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm vaccine phòng chống cúm a h5n1 bằng kỹ thuật di truyền ngược tt

Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm vaccine phòng chống cúm a h5n1 bằng kỹ thuật di truyền ngược tt

... đề tài: “Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm vaccine phòng chống cúm A/H5N1 kỹ thuật di truyền ngược” Mục tiêu nghiên cứu Tạo chủng virus cúm tái tổ hợp làm giống gốc cho sản xuất vaccine ... mặt phức hợp PolI-PolII plasmid cho phép sinh tổng hợp mRNA virus (nhờ PolII) vRNA (nhờ PolI) tế bào động vật từ phân đoạn cDNA virus dòng hóa vào plasmid, cho phép hạt virus tái tổ hợp tái tạo ... thực để tái tạo virus tái tổ hợp rg-A/H5N1 clade 1.1 rg-A/H5N1 clade 2.3.2.1c Các đĩa tế bào sau chuyển nhiễm plasmid ủ 37ºC, 5% CO 48h để thu nhận dịch sau biến nạp chứa hệ P0 virus tái tổ hợp Tương

Ngày tải lên: 20/12/2019, 08:16

28 128 0
Luận án tiến sĩ sinh học: Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm vaccine phòng chống cúm AH5N1 bằng kỹ thuật di truyền ngược

Luận án tiến sĩ sinh học: Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm vaccine phòng chống cúm AH5N1 bằng kỹ thuật di truyền ngược

... 117 4.3 Tổng hợp nhân tạo phân đoạn gen HA mã hóa protein khơng chứa amino acid kiềm độc 120 vi 4.4 Ảnh hƣởng loại tế bào biến nạp đến tái tạo virus cúm A tái tổ hợp ... Lipofectamine-2000 440 l thể tích cuối hỗn hợp Lipo-OM Ủ hỗn hợp nhiệt độ phòng phút - Bổ sung 440 l hỗn hợp Lipo-OM vào 440 l hỗn hợp DNA Plasmid-OM, trộn hỗn hợp ủ nhiệt độ phòng 30 phút - Loại ... 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Luận án “Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm vaccine phòng chống cúm A/H5N1 kỹ thuật di truyền ngƣợc” cơng trình nghiên cứu tơi số kết cộng tác với cộng

Ngày tải lên: 10/06/2020, 09:34

186 54 0

Bạn có muốn tìm thêm với từ khóa:

w