... codon mãhóa cho histidine (codon 12 ; 32; 10 5 12 1) Tác giả Savransky cs sau năm (20 04) khẳng định SEB mang đột biến thay histidine tyrosine vị trí codon 12 ; 32; 10 5 12 1 tạo khángnguyêntáitổhợp ... 16 2 .1. 2 Các kít 16 2 .1. 3 Hóa chất, máy móc thiết bị 16 2 .1. 4 Môi trƣờng đệm 17 2 .1. 5 Cặp mồi sử dụng 17 2 .1. 6 Phần mềm 17 2.2 Phƣơng ... 24 2.2 .2. 8 Biểu protein staphylococcal enterotoxin B táitổhợp tế bào vi khuẩn Escherichia coli chủng BL 21 ( DE3) 26 2.2 .2. 9 Phƣơng pháp điện di protein gel polyacrylamide 26 2.2 .2 .10 ...
... 40 3 .2 KẾT QUẢ BIỂUHIỆN VÀ TINH SẠCH PROTEIN ESAT6/CFP10 41 iii 3 .2 .1 Biến nạp vector táitổhợp pET21a+/ESAT6-CFP10 vào E.coli chủng BL 21 ( DE3) 41 3 .2. 2 Kiểm tra biểugen CFP10/ESAT6 ... khuếch đại gene mãhóa protein CFP10 ESAT6 M: Thang ADN chuẩn 10 0 bp (a)- 1: Chứng âm (b)- 1: Genmãhóa protein CFP10 2: Genmãhóa protein ESAT6/CFP10 2: Genmãhóa protein ESAT6 Kết hình 3 .2 cho ... chứa genmãhóa cho protein ESAT6/CFP10 3 .1. 2. 3 Kết thiết kế vector biểu pET21a+ mang gen ESAT6-CFP10 3 .1. 2. 3 .1 Xử lý enzym hạn chế tạo đầu cắt so le gen pET21a+ -Chuẩn bị vector biểu pET21a+...
... plasmid táitổhợp số 4, 10 , 12 Gen gp 120 B_EX vector biểu pET32a(+) giải trình tự Kiểm tra khung đọc gen gp 120 B vector pET32a(+) Biểugen gp 120 B vi khuẩn E.coli chủng BL 21 Star ĐC 1: Thang Protein ... mang gen gp 120 B Khuếch đại gen gp 120 B_EX cặp mồi biểu ĐC1: Thang DNA chuẩn 1kb ĐC2: sản phẩm PCR Tạo vector táitổhợp pET32a(+) mang gen gp 120 B_EX ĐC 1: Plasmid gốc vector pET32a(+) ĐC1: Thang ... ứng GP 120 táitổhợp với kháng thể kháng HIV huyết bệnh nhân HIV Western blot Hình A: Phản ứng protein táitổhợp gp 120 B với huyết dương tính với HIV Hình B: Phản ứng protein táitổhợp gp 120 B...
... Urakawa cs năm (20 01) [ 32] , khángnguyêntáitổhợpRoTAT1.2 sản xuất dựa chức biểugenmãhóakhángnguyên vào tế bào côn trùng dòng Sf Dòng tế bào táitổhợp có khả tổng hợp tiết khángnguyên vào ... gel 12 % dH2O vô trùng 30% Acrylamid Tris – HCl 1, 5 M; pH 8,8 10 % SDS 10 % APS TEMED 5% 0 ,13 M 0 ,1% 0 ,1% 0,0 01% 10 ml 2, 6 3 ,2 2,04 0,08 0,08 0,00 32 10 ml 1, 4 0,33 0 ,25 0, 02 0, 02 0,0 02 2.4.4 .2 Phương ... Doanh cs (19 97) cho biết, thuốc an toàn, tỷ lệ khỏi bệnh 10 0% 1. 1.7 GenRoTAT1.2 tiên mao trùng Theo Urakawa cs, (20 01) [ 31] dựa trình tự mãhóagen T evanci khángnguyên bề mặt RoTAT1.2 không...
... Vector pET32a(+) mang gen gp 120 B_EX đặt tên pETgp 120 B 3 .2 Biểugen gp 120 B vi khuẩn 3 .2 .1 Biểugen gp 120 B vi khuẩn E.coli chủng BL 21 StarTM (DE3) Chúng sử dụng chủng biểu E.coli BL 21 StarTM (DE3) ... mã (Hình 3.8) cho thấy, trình tự đoạn gen đích hoàn toàn thông suốt, không xuất mã kết thúc (stop codon) gen gắn vào hệ vector pET32a(+) 31 61 91 1 21 M E I K H S W D V H 15 1 L G 18 1 21 12 41 2 71 ... protein GP 120 phân type B virus HIV tiến hành biểu kí hiệu gp 120 B_EX 3 .1. 1 Khuếch đại gen gp 120 B cặp mồi biểu Vùng genmãhóa protein gp 120 phân type B khuếch đại từ vector pCR 2 .1 mang gen gp 120 B...
... III: 15 0 l 12 50 l CH3COOK 3M 23 , 52 g CH3COOH 28 ,6 l 50 ml Dung dịch TAE 50X: 10 ml Nước cất: 490ml Agarose 1% 1g Bổ sung TAE đến Loading Dye 50 l H2O khử ion tới Gel agarose 1% 1% 12 1 g ... dNTP 10 mM ml 0,0 31 g H2O khử ion 1, 3 ml EDTA 14 , 61 g H2O khử ion EDTA (0,5 M; pH 8) IPTG 10 0 ml Chỉnh pH NaOH Dung dịch đệm SDS – PAGE 10 X Tris base 15 ,14 g Glycine 72 ,1 g SDS 20 % 25 ml ... RNAse 10 mg/ ml 0 ,15 ml NaOH 1M 0, 022 ml H2O khử ion Marker Tris (0,1M; pH 7,5) 1, 328 ml Dye 6X l 34 Lê Thu Trang 04-04 Khóa luận tốt nghiệp Marker 20 l H2O khử ion 90 l IPTG 10 0mM 25 mg...
... giả với kháng thể khác Trong khángnguyêntáitổhợp khắc phục hạn chế 2 Theo nghiên cứu Urakawa cs (20 01) [30], khángnguyêntáitổhợpRoTAT1.2 sản xuất dựa chức biểugenmãhóakhángnguyên ... khuẩn táitổhợpgenROTAT1.2 Lên men: (xác định điều kiện lên men chủng táitổ hợp: IPGT, pH, t0C) Tách tinh protein táitổhợp Đánh giá tính khángnguyên Protein táitổhợpgenRoTAT1.2 Xây ... độ biểukhángnguyênRoTAT1.2 theo thời gian cảm ứng 50 Hình 3.6 Mức độ biểukhángnguyênRoTAT1.2 nhiệt độ nuôi cấy 51 Hình 3.7 Mức độ biểukhángnguyênRoTAT1.2 giá trị OD khác 52 Hình...
... .19 1.2 VECTOR TÁCH DÒNG 22 1.2 .1 Khái niệm 22 1.2.2 Các loại vector tách dòng 23 1.2. 3 Plasmid pCR 2 .1 24 1. 3 VECTOR BIỂUHIỆN 27 1. 3 .1 Khái ... 1.2 kỹ thuật PCR Tạo vector tách dòng genRoTAT1.2 Tạo chủng táitổhợp chứa genRoTAT1.2 Xác định trình tự genRoTAT1.2 Tách dòng genRoTAT1.2 Tạo vector táitổhợpbiểu vector tách dòng gen ... plasmid táitổhợp hiệu Hình 1.2 Sơ đồ thiết kế vector táitổhợp pJET1 .2 -RoTAT 1.2 Theo thiết kế, vector pJET1 .2/ blunt có chứa genmãhóakhángkháng sinh ampicillin cho phép dễ dàng phát vector tái...
... III: 15 0 l 12 50 l CH3COOK 3M 23 , 52 g CH3COOH 28 ,6 l 50 ml Dung dịch TAE 50X: 10 ml Nước cất: 490ml Agarose 1% 1g Bổ sung TAE đến Loading Dye 50 l H2O khử ion tới Gel agarose 1% 1% 12 1 g ... dNTP 10 mM ml 0,0 31 g H2O khử ion 1, 3 ml EDTA 14 , 61 g H2O khử ion EDTA (0,5 M; pH 8) IPTG 10 0 ml Chỉnh pH NaOH Dung dịch đệm SDS – PAGE 10 X Tris base 15 ,14 g Glycine 72 ,1 g SDS 20 % 25 ml ... RNAse 10 mg/ ml 0 ,15 ml NaOH 1M 0, 022 ml H2O khử ion Marker Tris (0,1M; pH 7,5) 1, 328 ml Dye 6X l 34 Lê Thu Trang 04-04 Khóa luận tốt nghiệp Marker 20 l H2O khử ion 90 l IPTG 10 0mM 25 mg...
... vo nỏch lỏ mm ging u tng T 12 LụTN S mu bin np S mu to chi S chi kộo S chi di r S cõy sng trờn giỏ th 25 0 80 30 16 12 22 0 70 25 25 10 18 0 55 20 14 10 Tng 650 20 5 65 45 32 Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn ... HA1 vo nỏch lỏ HA1 mm ging u tng T 12 T 12 Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn Kt qu kim tra cõy chuyn gen HA bng phn ng PCR Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn KT LUN S dng phng phỏp chuyn gen ... chuyn gen mang cu trỳc biu hin gen mó húa khỏng nguyờn b mt ca virut H5N1 Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn VT LIU V PHNG PHP NGHIấN CU Ging u tng T 12 Trung tõm Nghiờn cu Phỏt trin T 12 cõy...
... tương ứng JX4449 92 .1, JX444993 .1 JX444994 .1 3 .2 NGHIÊN CỨU BIỂUHIỆNGENMÃHÓA VP28 3 .2 .1 Biểu P28 b ng hệ thống vector pET28b E coli Ve t r táitổhợp đượ k hiệu pGEM – VP28 đượ tá h dạng tinh ... định khángnguyên VP28 cần quan tâm nghiên cứu số 23 trình tự gen vp28 có khác biệt đáng lưu với ký hiệu 05VN.VP28.HCM2 . 12 , VN.VP28.BD2 . 12 đượ đăng k 06VN.VP28.BD1 .11 , enBank với mã số (accession ... thể, 20 04; Witteveldt tập thể 20 04; Jha tập thể, 20 05; Caipang tập thể, 20 08; Hou tập thể, 2 011 ; Syed-Musthaq tập thể, 2 011 ; Mu tập thể, 2 0 12 ) Sử dụng VP28 táitổhợp biện pháp giúp tăng khả ống...
... đặc hiệu Diện tích 10 0% đường cong 0,9 82 PSA 2, 5ng/mL (p< 0,00 01) sinh thiết (-) – UTTTL 1. 3 Biểugenmãhóakhángnguyên UTTTL sớm (EPCA -2) 1. 3 .1 Vector biểu Vector biểu (expression ... vector biểu nêu trên, để biểugenmãhóa polyepitop khángnguyên UTTTL sớm (EPCA -2) sử dụng vector pET -28 a(+) làm vector biểu1. 3 .2 Lựa chọn chủng biểu Có nhiều hệ thống biểu khác biểugen hệ biểu ... hiệu với kháng thể Hiện nay, nhà khoa học công bố đoạn peptid cho epitop EPCA -2 đoạn EPCA -2. 22, EPCA -2 .19 EPCA -2. 4 [11 8] Bảng 1. 7 Trình tự acid amin epitop EPCA -2 [11 8] Số Epitop lượng EPCA -2 acid...
... shrimp", Virology 26 6, pp 22 7 -23 6 10 6 Van Hulten M C., Vlak J M (20 01) , "Identification and phylogeny of a protein kinase gene of white spot syndrome virus", Virus Genes 22 , pp 2 0 12 07 10 7 Van Hulten ... defined 3 .1. 3 Xác định trình tự nghiên cứu tính đa hình genmãhóa VP28 Error! Bookmark not defined 3 .2 NGHIÊN CỨU BIỂUHIỆNGENMÃHÓA VP28Error! Bookmark not defined 3 .2 .1 Biể u hiê ̣n VP28 hệ ... Cường NHÂN DÕNG VÀ BIỂUHIỆN TRÊN BỀ MẶT BÀO TỬ Bacillus subtilis GENMÃHÓAKHÁNGNGUYÊN VP28 CỦA VIRUS GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG Ở TÔM Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 62 42 01 16 LUẬN ÁN TIẾN SĨ...
... triệu chứng bệnh cúm A/H5N1 [6] Bảng 1.1 Tổng số trường hợp nhiễm cúm gia cầm A/H5N1 người báo cáo cho WHO từ tháng 12 /20 03 đến 19 /6 /20 08 [ 12 ] 12 1.2 Virus cúm A 1.2 .1 Đặc điểm hình thái cấu trúc ... tự genmãhóakhángnguyên HA virus H5N1, trình tự phân tích genmãhóakhángnguyên HA virus cúm H5N1 phân tích phần mềm PC -Gen 39 Giải trình tự gene H5 so sánh với chủng gốc VN 119 4 NIBRG -14 ... trình tự gen xếp gen hệ gen, hệ gen virus cúm A có độ dài tổng số khoảng 13 .500 nucleotit [16 ] 14 Các genmãhóa cho protein chức chúng sau: - Phân đoạn 1: Là genmãhóa cho protein PB2 với kích...
... 27 3 .1 Chuẩn bị vectơ pBI1 21 gen glyP 27 3 .1. 1 Tách vectơ pBI1 21 từ chủng E Coli Top 10 27 3 .1. 2 Khuyếch đại gen GlyP kỹ thuật PCR 28 3 .2 Thiết kế ti-plasmid táitổhợp ... pBI1 21 35S SacI gus NOST pBI1 21 Bam HI & Sac I Sac I BamH I pBI1 21 35S gus GlyP NOST pBI1 21 T4 - ligase BamHI pBI1 21 35S GlyP SacI NOST pBI1 21 Hình Sơ đồ thiết kế Ti-plasmid táitổhợp ... 18 18 2.2 .1 PCR nhân gen đặc hiệu 19 2.2 .2 Phơng pháp điện di 20 2. 2.3 Thôi gel tinh sản phẩm PCR 20 2. 2.4 Cắt enzym giới hạn 22 2. 2.5 Phản...