... tố cần thiết < /b> cho việc biểu < /b> gen tế b o vi khuẩn N eoài yếu tố cần thiết < /b> vector < /b> biểu < /b> E c o lỉ, vector < /b> biểu < /b> B s u b tilis cần phải có thêm đoạn tương đồng với nhiễm sắc thể vi khuân B s u b tilis ... việc thiết < /b> kế < /b> vector < /b> tái tổ hợp biểu < /b> kháng nguyên rotavirus kháng nguyên b o vệ (protective antigen - PA) B a n th r a c is tế b o sinh dưỡng hay b mặt b o tử B s u b tilis [8, 27], Do B s u b ... khuân B s u b íilis giúp làm giảm ăn mòn thép mức độ nhẹ [30] 1.2 Vector < /b> biểu < /b> cài nhập gen vào nhiễm sắc thể vi khuẩn 1.2.1 Vector < /b> biểu < /b> E colì Nhiều hệ vector < /b> nhân dòng biểu < /b> thiết < /b> lập cải biến...
... trúc biểu < /b> xylB hph vector < /b> trung gian (pKS_xylB_hph) .55 3.2 Thiết < /b> kế < /b> Ti plasmid mang hai cấu trúc biểu < /b> xylB hph 56 3.2.1 Lắp ghép đoạn gen mang hai cấu trúc biểu < /b> xylB hph vector < /b> ... trình thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> gen mã hóa xylanase nấm mốc thể chi tiết qua sơ đồ sau: 40 41 42 3.1 Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> trung gian (pKS_xylB_hph) mang hai cấu trúc biểu < /b> xylB hph 3.1.1 Lắp ghép xylB vào vector < /b> ... tiến hành thiết < /b> kế < /b> vector < /b> trung gian mang cấu trúc biểu < /b> xylB dựa vector < /b> pAN7.1 – GluA, tạo thành vector < /b> tái tổ hợp kí hiệu pAN_xylB 3.1.1.1 Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> tái tổ hợp pAN_xylB mang xylB Muốn gen...
... vector < /b> pGEM -3Z 2.1.4.2 Vector < /b> biểu < /b> pET -32 a(+) (hình 5) Vector < /b> pET-32 có kích thước 5899bp thiết < /b> kế < /b> cho biểu < /b> protein vi khuẩn E.Coli Vị trí tách dòng dùng cho việc sản xuất fusionproteins bao ... sinh novobiocin Vì vậy, việc nghiên cứu tạo vector < /b> tách dòng để giải trình tự gen thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> gen novS có vai trò quan trong < /b> trình nghiên cứu nghiên cứu kháng sinh novobiocin Trong < /b> tuơng ... lỏng có chế độ lắc LB đặc tử ấm 37 0C, với chủng chuyển gen sống mơi trường LB có b sung thêm kháng sinh ( 1mg/ml) 2.1.4 Vector < /b> biểu < /b> vector < /b> tách dòng Vector < /b> pGEM -3Z dùng làm vector < /b> tách dòng pET...
... kí AB 002097 DDBJ Như việc tách dòng gen hFGF-10 thực Gắn gen hFGF-10 vào vector < /b> biểu < /b> pcDNA3.1()Myc-His: pcDNA3.1(-) Myc-His (Invitrogen) vector < /b> 5.5 kb thiết < /b> kế < /b> để biểu < /b> protein tái tổ hợp tế b o ... MiniPrep Kit (PE Applied Biosystem) Xác định trình tự ADN sử dụng thiết < /b> b ABI 310 PRISM Genetic Analyzer (Perkin Elmer) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Thiết < /b> kế < /b> cặp mồi để biểu < /b> hFGF-10 tế b o động vật có vú: ... trình tự tồn đoạn gen hFGF-10 (số đăng kí Gen Bank AB 002097 DDBJ), cặp mồi để nhân hFGF-10 thiết < /b> kế < /b> sử dụng vector < /b> pcDNA3.1(-) Myc-His để biểu < /b> tế b o động vật có vú với đầu 5' gắn thêm vị trí...
... Nội dung 1: Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> pET28-iEIB Cắt với XbaI EcoRI Cắt với XbaI EcoRI Hình 3.2 Sơ đồ thiết < /b> kế < /b> vector < /b> pET28-iEIB 24 • Biến nạp vector < /b> tái tổ hợp vào chủng E coli DH5α khả biến • Chọn ... thước ≈3397bp tương ứng với gene EIB Như gen EIB khuếch đại đặc hiệu Kết luận dòng mang gen cần gắn nối 4.2 Kết biểu < /b> pET28-iEIB E coli BL21 (DE3) Để biểu < /b> sản phẩm, vector < /b> pET28-iEIB biến nạp vào ... có biểu < /b> enzyme nhiều so với pET28 nên sản phẩm cuối có màu đậm 39 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận - Đã thiết < /b> kế < /b> thành cơng vector < /b> pET-iEIB có kích thước 9220bp dựa vector < /b> pR-iEIB với vector < /b> biểu...
... Cấu trúc vector < /b> pTZ-gltA Vector < /b> pET2 2b( +) Đây vector < /b> biểu < /b> có yếu tố cần thiết < /b> cho biểu < /b> gen gltA, ech, fcs từ chủng Pseudomonas fluorescens VTCC -B- 668 Hình 3.3 Cấu trúc vector < /b> biểu < /b> pET2 2b( +) Các ... EcoRI, BamHI, NcoI, MscI, BseRI, BspMI, NdeI, XbaI, cho phép gắn gen quan tâm vào vector < /b> biểu < /b> sản phẩm mong muốn Tất cho vị trí cắt vector,< /b> đảm b o việc gắn gen đặc hiệu gen gắn không b mắt b ớc ... aGGATCCAGGAGGtgctgcacATGCGCTCGCT BamHI Fcs-R aGAATTCTCATGGCTTGGGCTCGGCG EcoRI 34 AGGAGG: Vị trí b m ribosome tgctgcac:Khoảng trống vị trí b m ribosome với ba mở đầu ATG: B ba codon mở đầu TTA: B ba codon kết thúc...
... gen xbxs vào vector < /b> pET 32a(+) + Cắt kiểm trapET32-xbx enzyme hạn chế XhoI + XbaI + Biến nạp pET32xbx vào E coli BL21 chọn lọc dòng biến nạp mang gen xbxs - Biểu < /b> gen xbxs tế b o E coli BL21 để ... học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ sinh học 1.2.3 Vector < /b> biểu < /b> pET 32a(+) Để biểu < /b> gene E coli vector < /b> biểu < /b> dùng plasmid, phage, cosmid Vector < /b> biểu < /b> plasmid thiết < /b> kế < /b> nhằm mục đích sản xuất protein với lượng ... ngiên cứu biểu < /b> xylanase vi khuẩn E coli BL21 Và để thực điều chúng tơi tiến hành cơng việc sau: - Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> pET32xbx + Khuếch đại gen xbxsbằng PCR + Cắt sản phẩm PCR, pET 32a(+) b ngNcoI...
... thành công vào vector < /b> pET2 2b( +) Như Nh vậy, tiếnn hành bbước biểu < /b> n SENP2 chủng ch E coli BL21 Trần Thị Thanh Tuyền 33 Lớp 1102 K18 3.3 Biểu < /b> pET2 2b( +)-senp2 BL21 Trong < /b> biểu < /b> gen, b ớc quan trọng ... hai mức nhiệt độ để biểu < /b> hiệnn pET2 2b( +) pET2 2b( +)-senp2 BL21 20oC 37oC Sau phân tích kết chọnn dòng, chúng tơi tiến ti hành biểu < /b> nhiệt độ này.Các b ớc bbiểu < /b> cụ thể đãã trình b y ph phần phương ... kiện biểu < /b> chưa phù hợp Vì cần có thí nghiệm thay đổi điều kiện biểu < /b> để lựa chọn điều kiện biểuhiện thích hợp để thu SENP2 dạng tan KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Thiết < /b> kế < /b> thành công vector < /b> biểu...
... pET28 gọi vector < /b> pET- iEIBY 4.2 Kết đánh giá biểu < /b> pET- iEIBY E coli BL21 Để biểu < /b> sản phẩm, dòng plasmid pET- iEIBY chọn dòng để biểu < /b> hiện,< /b> tơi sử dụng dòng để đánh giá biểu < /b> Plasmid dòng số biến nạp ... thể thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> tảng vector < /b> pQE 30 Do tơi chuyển sang thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> tảng vector < /b> pET 28 21 Plasmimid pLUG-crtY Vector < /b> pET 28 Đoạn gene crtY Vector < /b> pET28 mở vòng Plasmid pRiEIB Cụm ... 2370 bp, nên cắt văng hai b ng: 4593 bp 5782 bp Từ kết khẳng định: Cụm gene iEIB gắn chiều vector < /b> pET- iEIBY 38 Như kết luận thiết < /b> kế < /b> thành công vector < /b> mang gene tổng hợp provitamin A tảng vector...
... thành β-carotene Vector < /b> pET2 2b( +) Đây vector < /b> biểu < /b> có yếu tố cần thiết < /b> cho biểu < /b> gene sinh tổng hợp β-carotene 28 Hình 3.2: Cấu trúc vector < /b> biểu < /b> pET2 2b( +) Vector < /b> pET2 2b( +) thiết < /b> kế < /b> có vùng đa tách ... Một số hệ thống vector < /b> biểu < /b> vi khuẩn E coli Vector < /b> biểu < /b> pRSET Vector < /b> pRSET có nguồn gốc vector < /b> biểu < /b> pUC, với kích thước nhỏ (~ 2,9kb) số lượng cao (200-500 sao); chúng thiết < /b> kế < /b> cho biểu < /b> protein ... Nội dung 1: Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> mang policistron gồm gene idi-crtE-crtI- crtB-crtY tảng vector < /b> biểu < /b> pRSET-A tạo vector < /b> tái tổ hợp pR-iEIBY Gắn gene crtY vào vector < /b> biểu < /b> pRiEI tạo vector < /b> tái...
... gene iEIB vector < /b> pET22iEIBY .51 n di ki m tra chi u g n c m iEIB vector < /b> pET22-iEIBY 52 Hình 4.15: K t qu bi u hi n vector < /b> pR-iEIBY ch ng E coli BL21 (DE3) 53 Hình 4.16: K t qu bi u hi n vector < /b> ... i di n cho h vector < /b> có s b n cao H vector < /b> pET2 2b( +) có 15-20 b n copy - i di n cho h vector < /b> có s b n th p Vector < /b> pR-iEI (a) Vector < /b> pR-iEI Vector < /b> pRSET-A Hình 3.1: C u trúc vector < /b> bi u hi n pRSET ... k vector < /b> bi u hi n mang policistron g m gene idi-crtE-crtI-crtB-crtY n n t ng vector < /b> bi u hi n pET2 2b( +) t o vector < /b> tái t h p pET22-iEIBY 46 4.2.1 K t qu g n gene crtY vào vector < /b> pET2 2b( +)...
... rệt tế b o phải chịu ức chế Legumain biểu < /b> tế b o b mặt tế b o tế b o khối u khối u liên kết màng tế b o Nó tìm thấy đặc biệt túi màng liên kết tập trung chân xâm lấn tế b o ung thư Đáng ý b mặt ... plasmid (pBT) chứa đoạn gen mã hóa legumain vector < /b> chứa biểu < /b> pET-32c(+), quy trình thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> mang gen mã hóa legumain tiến hành sau: • B ớc 1: Cắt tinh đoạn gen mã hóa legumain vector < /b> biểu < /b> ... EcoRI Legumain 900bp pBTlegumain HindIII pET32c+ 6800bp Legumain 900bp EcoRI + pET32c 5900bp HindIII Hình 3.1: Sơ đồ thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> 3.1.1 Kết xử lý vector < /b> tách dòng pBT-legumain với enzyme...
... NK1 biểu < /b> chúng hai hệ vector < /b> pCDNA3.1 pEGFP-N1 cho kết tốt Đây tiền đề cho lựa chọn thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> pCDNA3 pEGFP-N1 đề tài pCDNA3 pEGFP-N1 vector < /b> biểu < /b> tế b o động vật với đặc điểm trình b y ... Thiết < /b> kế < /b> mồi Để biểu < /b> cDNA mã hóa cho thụ thể neurokinin-1 người, sử dụng hai vector < /b> biểu < /b> tế b o động vật pCDNA3 pEGFP-N1 B ớc cần chuyển đoạn cDNA tách dòng vector < /b> pJET1.2 sang hai hệ thống vector < /b> ... neurokinin-1 vector < /b> biểu < /b> Để khẳng định có mặt cDNA-NK1 vector < /b> biểu < /b> hiện,< /b> hai vector < /b> biể u hiê ̣n pCDNA3-NK1-11 peGFP -N1-NK1-5 được giải trình tự m ột chiề u t đầu 5’ đoạn chèn NK1 b ̀ ng mồ...
... 1 Vật liệu - Vector < /b> tái tổ hợp pBT mang gen mã hóa legumain phòng CNTBĐV - VCNSH cung cấp - trang thiết < /b> b phòng CNTBĐV – VCNSH Các loại hóa chất - Vector < /b> biểu < /b> pET-32c(+) phòng CNTBĐV - VCNSH ... HindIII 4 Kết biến nạp sản phẩm gắn kết pET-32c(+) gen legumain Đĩa Petri chứa khuẩn lạc sau biến nạp 5 Kết PCR từ khuẩn lạc chọn dòng vector < /b> pET-32c(+)/legumain 2000bp 1600bp 1500bp Giếng 1: ... phân liên kết asparaginyl + Hoạt động tối đa pH=5,5 + Tồn động vật thực vật + Legumain biểu < /b> cao số loại khối u như: tuyến tiền liệt, đại tràng ung thư vú Mục đích đề tài Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> gen...
... đƣợc bao b c DNA b n vào tế b o Một số ƣu điểm phƣơng pháp b n gen là: thao tác dễ dàng, b n lần đƣợc nhiều tế b o, nguyên liệu để b n gen đa dạng (hạt phấn, tế b o nuôi cấy, tế b o mơ biệt hóa ... amino acid đƣợc mã hóa ba khác Mức độ biểu < /b> ba đối tƣợng, loài khác Cùng amino acid, có ba biểu < /b> vi khuẩn mức độ cao nhƣng thực vật lại biểu < /b> mức độ thấp ngƣợc lại [24] Do vậy, để biểu < /b> protein cao trồng ... tài: Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> gen organophosphorus hydrolase (OPHC2) phục vụ tạo chuyển gen phân hủy thuốc trừ sâu” Mục tiêu nghiên cứu Thiết < /b> kế < /b> đƣợc cấu trúc mang gen OPHC2opt tối ƣu phù hợp với biểu...
... cDNA-NK1 hồn chỉnh vector < /b> Chuyển cDNA-NK1 vào vector < /b> biểu < /b> pCDNA3, pEGFP-N1 Tách dòng vector < /b> biểu < /b> pCDNA3, pEGFPN1 mang cDNA-NK1 Hình 5: Sơ đồ nghiên cứu tách dòng thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> cDNA mã hóa ... cho thụ thể neurokinin-1 49 3.2 THIẾTKẾVECTOR < /b> BIỂUHIỆN GEN MÃ CHO THỤ THỂ NEUROKININ-1 .49 3.2.1 Thiết < /b> kế < /b> mồi 49 3.2.2 Tách dòng vector < /b> biểu < /b> mang cDNA mã hóa cho th ụ ... Thiết < /b> kế < /b> mồi Để biểu < /b> cDNA mã hóa cho thụ thể neurokinin-1 người, sử dụng hai vector < /b> biểu < /b> tế b o động vật pCDNA3 pEGFP-N1 B ớc cần chuyển đoạn cDNA tách dòng vector < /b> pJET1.2 sang hai hệ thống vector...
... cứu thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> mang gen OsNAC1 đặt điều khiển promoter cảm ứng điều kiện b t lợi RD29A Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> biểu < /b> pCAMBIA1301 mang promoter điều khiển RD29A Trong < /b> nghiên cứu này, để thiết < /b> kế < /b> ... Fermentas b o quản -20oC Thiết < /b> kế < /b> vector < /b> pCAMBIA-RD29A: Vector < /b> tách dòng pGEM- RD29A vector < /b> pCAMBIA-Ubi xử lý đồng thời với HindIII BamHI Trình tự promoter RD29A ghép nối vector < /b> pCAMBIA1301 mạch ... promoter RD29A (0,8 kb) chèn vào vị trí promoter Ubiquitin (2,0 kb) cắt bvector < /b> biểu < /b> pCAM-Ubi tác dụng enzyme T4 ligase biến nạp vào tế b o khả biến E coli chủng DH5α Sau sàng lọc thể biến nạp dương...
... polyadenyl hóa 29 Trong < /b> b o này, chúng tơi trình b y kết nhân dòng promoter terminator HSP 18.2 từ Arabidopsis nhằm tạo nguồn nguyên liệu di truyền để thiết < /b> kế < /b> vector < /b> tăng cường biểu < /b> protein tái ... AccuPrep® Gel Purification (Bioneer, Hàn Quốc) Sau đó, promoter terminator HSP 18.2 ghép nối vào vector < /b> nhân dòng pBT Vector < /b> nhân dòng pBT-pHSP (18.2) pBT-tHSP (18.2) biến nạp vào chủng vi khuẩn ... lý thuyết Trên Hình 2B, đường chạy số 1, xuất hai b ng có kích thước 262 bp 2705 bp, kích thước tương ứng với kích thước terminator HSP 18.2 kích thước vector < /b> tách dòng pBT Kết phân lập terminator...