SOUKANYA SOULINTHONG NGHIÊN cứu CHIẾT XUẤT EMODIN và PHYSCION từ cốt KHÍ củ (RADIX POLYGONI CUSPIDATI) KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI SOUKANYA SOULINTHONG NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT EMODIN VÀ PHYSCION TỪ CỐT KHÍ CỦ (RADIX POLYGONI CUSPIDATI) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI- 2021 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI SOUKANYA SOULINTHONG MÃ SINH VIÊN: 1601671 NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT EMODIN VÀ PHYSCION TỪ CỐT KHÍ CỦ (RADIX POLYGONI CUSPIDATI) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Phạm Thái Hà Văn Nơi thực hiện: Bộ môn Dược học cổ truyền Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI- 2021 LỜI CẢM ƠN Trong trình nghiên cứu hồn thành khóa luận này, em nhận nhiều giúp đỡ quý báu từ thầy cơ, bạn bè gia đình Trước hết, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới ThS Phạm Thái Hà Văn, người thầy tận tình hướng dẫn, hết lòng bảo tạo điều kiện giúp đỡ em trình học tập, nghiên cứu, hồn thành khóa luận Em xin cảm ơn thầy cô Bộ môn Dược cổ truyền tạo điều kiện thuận lợi cho em nghiên cứu thực nghiệm môn Em xin cảm ơn thầy Phịng Đào tạo, Phịng Quản lý sinh viên tạo điều kiện thuận lợi cho em học tập nghiên cứu trường Em xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy Trường Đại học Dược Hà Nội truyền đạt cho em kiến thức quý báu giúp em học tập phát triển thân Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến người thân gia đình, bạn bè quan tâm, ủng hộ, động viên suốt thời gian học tập, nghiên cứu thực đề tài Một lần nữa, em xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu Hà Nội, ngày 31 tháng năm 2021 Sinh viên Soukanya SOULINTHONG MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Cốt khí củ 1.1.1 Tên khoa học 1.1.2 Đặc điểm thực vật 1.1.3 Phân bố, sinh thái 1.1.4 Cách trồng 1.1.5 Bộ phận dùng 1.1.6 Thành phần hóa học 1.1.7 Tác dụng dược lý 1.1.8 Một số thuốc có Cốt khí củ 1.2 Tổng quan emodin, physcion 1.2.1 Emodin 1.2.2 Physcion CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Nguyên vật liệu thiết bị nghiên cứu 11 2.1.1 Nguyên liệu 11 2.1.2 Thiết bị hóa chất 11 2.2 Nội dung nghiên cứu 12 2.3 Phương pháp nghiên cứu 12 2.3.1 Phân lập emodin physcion sắc ký lớp mỏng điều chế 12 2.3.2 Phân lập emodin physcion sắc kí cột 13 2.3.3 Định lượng emodin physcion phương pháp TLC - UV 15 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 17 CHƯƠNG KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 18 3.1 Phân lập emodin physcion sắc ký lớp mỏng điều chế 18 3.2 Chiết xuất Emodin Physcion sắc kí cột 22 3.2.1 Chiết hỗn hợp anthranoid từ cốt khí củ 22 3.2.2 Phân lập emodin physcion sắc kí cột 22 3.3 Định lượng emodin physcion cắn EtOAc cắn phân đoạn Toluen 27 3.3.1 Xây dựng phương pháp 27 3.3.2 Định lượng emodin physcion mẫu cắn 35 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CKC: Cốt khí củ DĐVN: Dược điển Việt Nam MeOH: Methanol EtOH: Ethanol EtOAc: Ethyl acetat TB: Trung bình SD: Độ lệch chuẩn (Standard Deviation) RSD: Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Deviation) UV: Ultraviolet HPLC: High-performance liquid chromatography SKLM: Sắc kí lớp mỏng DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Khối lượng cao toàn phần thu từ dịch chiết bột cốt khí củ 18 Bảng 3.2 Khảo sát tỉ lệ khối lượng cao chiết dung môi 18 Bảng 3.3 Các phân đoạn thu từ sắc kí cột thứ 22 Bảng 3.4 Các phân đoạn thu từ sắc kí cột thứ hai 23 Bảng 3.5 Peak hấp thụ emodin phân lập từ Cốt khí củ 25 Bảng 3.6 Peak hấp thụ physcion phân lập từ Cốt khí củ 25 Bảng 3.7 Kết đo độ hấp thụ quang khảo sát khoảng tuyến tính emodin 28 Bảng 3.8 Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống - emodin 29 Bảng 3.9 Kết đo quang khảo sát khoảng tuyến tính Physcion 32 Bảng 3.10 Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống - physcion 33 Bảng 3.11 Kết định lượng emodin mẫu cắn 35 Bảng 3.12 Kết định lượng physcion mẫu cắn 35 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơng thức số anthraquinon naphthoquinon rễ Cốt khí củ Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo số stilben rễ Cốt khí củ Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo emodin Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo physcion Hình 2.1 Hình ảnh dược liệu Cốt khí củ 11 Hình 3.1 Sắc kí đồ khảo sát tỉ lệ cao:dung môi 19 Hình 3.2 Sắc kí đồ cao tồn phần cốt khí củ (366nm) 20 Hình 3.3 Phổ hấp thụ UV emodin phân lập từ cốt khí củ sắc ký lớp mỏng 20 Hình 3.4 Phổ hấp thụ UV physcion phân lập từ cốt khí củ sắc ký lớp mỏng 20 Hình 3.5 Sơ đồ quy trình phân lập emodin physcion từ cốt khí củ sắc ký lớp mỏng 21 Hình 3.6 Sắc kí đồ (366nm) kiểm tra phân đoạn từ sắc kí cột thứ 22 Hình 3.7 Sắc kí đồ (366nm) kiểm tra phân đoạn từ sắc kí cột thứ hai 24 Hình 3.8 Sắc kí đồ (HPLC) emodin phân lập từ Cốt khí củ 25 Hình 3.9 Sắc kí đồ (HPLC) physcion phân lập từ Cốt khí củ 25 Hình 3.10 Sơ đồ quy trình chiết xuất emodin physcion từ Cốt khí củ sắc kí cột theo hai phương pháp 26 Hình 3.11 Sắc kí đồ khảo sát khoảng tuyến tính Emodin 27 Hình 3.12 Đồ thị phụ thuộc độ hấp thụ quang theo nồng độ emodin 28 Hình 3.13 Sắc kí đồ khảo sát tính phù hợp hệ thống – emodin 30 Hình 3.14 Sắc kí đồ khảo sát khoảng tuyến tính Physcion 31 Hình 3.15 Đồ thị phụ thuộc độ hấp thụ quang theo nồng độ physcion 32 Hình 3.16 Sắc kí đồ khảo sát tính phù hợp hệ thống – Emodin 34 Hình 3.17 Sắc kí đồ định lượng emodin physcion mẫu cắn 36 ĐẶT VẤN ĐỀ Hợp chất anthranoid nằm nhóm lớn hydroxyquinon, dẫn chất 1,8-dihydroxyquinon có nhiều hoạt tính sinh học mạnh nhuận tẩy, thơng mật, kích thích miễn dịch, chống ung thư….Các tác dụng phụ thuộc nhiều vào hàm lượng liều dùng Lượng nhỏ hỗ trợ tiêu hóa, lượng trung bình tác dụng nhuận, lượng cao gây xổ, nên việc xác định hàm lượng chất dược liệu cần thiết Để phục vụ việc nghiên cứu, đánh giá chất nhóm anthranoid dược liệu cần thiết phải có chất đối chiếu tương ứng, chúng điều chế hay phân lập từ nguồn dược liệu có chứa hàm lượng cao chất Các hợp chất thường gặp họ thực vật Polygonaceae, Saesalpiniaceae, Rhamnaceae, ngồi cịn có nấm địa y Tại Việt Nam có Polygona cuspidatum tên thường gọi Cốt khí củ thuộc họ Rau răm (Polygonaceae) loại mọc hoang trồng nhiều nơi, nguồn nguyên liệu giàu hợp chất anthranoid, bật emodin physcion dạng tự dạng glycosid Phương pháp chiết xuất anthranoid đơn giản nhiên để tách riêng dẫn chất lại khơng dễ dàng Có thể sử dụng độ hịa tan khác môi trường kiềm khác nhau, phân chia khơng tách bạch mà thường cịn lẫn chất với chất khác Hơn emodin physcion có tính chất giống nhiều, pKa xấp xỉ nên việc điều chế riêng chất tinh khiết với lượng lớn nghiên cứu Xuất phát từ điều đó, nhóm nghiên cứu đề xuất đề tài “Nghiên cứu chiết xuất emodin physcion từ cốt khí củ (Radix Polygoni cuspidati)” với mục tiêu: Chiết xuất, phân lập emodin physcion từ cốt khí củ Định lượng emodin physcion phương pháp TLC-UV CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Cốt khí củ 1.1.1 Tên khoa học Cốt khí củ có tên khoa học Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc., họ Rau răm (Polygonaceae) có tên khoa học đồng nghĩa khác Reynoutria japonica Houtt., Polygonum reynoutria Mak., Reynoutria elata Nak Một số tên gọi khác Cốt khí củ Việt Nam điền thất, hổ trượng căn, phù linh, nam hoàng cầm, co hớ hườn (Thái), mèng kẻng (Tày), hồng lìu (Dao) [2], [4] Theo phân loại thực vật học [31] Cốt khí củ thuộc Giới Thực vật Ngành Magnoliophyta Lớp Magnoliopsida Bộ Polygonales Họ Polygonaceae Phân họ Polygonoideae Chi Reynoutria 1.1.2 Đặc điểm thực vật Cây nhỏ, sống lâu năm Rễ phình thành củ cứng, mọc bị nghiêng đất, vỏ ngồi màu nâu đen, ruột màu vàng Thân hình trụ, nhẵn, mọc thẳng đứng, cao 0,5 – 1m, thường có đốm màu tím hồng Lá mọc so le, cuống ngắn, hình trứng, đầu tù, nhọn, mép nguyên, dài – 12cm, rộng 3,5 – cm, mặt màu lục sẫm, có nâu đen; bẹ chìa ngắn [2], [4] Cụm hoa ngắn lá, mọc thành chùm kẽ lá; hoa nhỏ màu trắng, hoa đực hoa riêng; bao hoa có phiến; hoa đực có nhị; hoa có bầu ba góc [2], [4] Quả cạnh, màu nâu đỏ [2], [4] Mùa hoa quả: tháng 10 – 11 [2], [4] Cây dễ nhầm lẫn: Nhiều mang tên “cốt khí” cốt khí muồng hay cốt khí hạt (Cassia occidentalis L.) thuộc họ Vang (Caesalpiniaceae), cốt khí thân tím (T purpurea 3.3 Định lượng emodin physcion cắn EtOAc cắn phân đoạn Toluen 3.3.1 Xây dựng phương pháp a) Khảo sát khoảng tuyến tính emodin: Tiến hành triển khai sắc ký lớp mỏng mục 2.3.3.1 dung dịch chất đối chiếu emodin nồng độ C₀ 3.93µg/µl Kết sắc ký đồ thể Hình 3.11 Hình 3.11 Sắc kí đồ khảo sát khoảng tuyến tính Emodin 27 Trên sắc kí đồ, ánh sáng 366nm vết emodin cho màu vàng đậm, vết gọn, rõ nét, khơng có vết lạ, Rf tương đương Tiếp tục tiến hành cạo vết, đo quang bước sóng 250nm để xây dựng đường tuyến tính cho kết Bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết đo độ hấp thụ quang khảo sát khoảng tuyến tính emodin Băng Vch (µl) 15 25 50 75 100 Cđ (µg/ml) 3.93 6.55 13.10 19.65 26.20 A 0.171 0.259 0.414 0.647 0.823 Chú thích: Vch: Thể tích chấm (µl) Cđ: Nồng độ đo quang, Cđ= 𝐶₀∗𝑉𝑐ℎ 5∗3 (µg/ml) A: Độ hấp thụ quang Từ kết xây dựng đường tuyến tính (Hình 3.12) với: Phương trình đường tuyến tính: y=0.0294x+0.0551 Trong đó: y: độ hấp thụ x: nồng độ emodin Độ hấp thụ A Đường tuyến tính Emodin 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.00 y = 0.0294x + 0.0551 R² = 0.9965 5.00 10.00 15.00 20.00 Nồng độ C (µg/ml) 25.00 30.00 Hình 3.12 Đồ thị phụ thuộc độ hấp thụ quang theo nồng độ emodin Đường tuyến tính Emodin có hệ số tương quan R=0.998 đảm bảo thực phép định lượng với nồng độ emodin khoảng tuyến tính 3.93-26.20 (µg/ml) 28 b) Thẩm định tính phù hợp hệ thống - emodin Tiến hành sắc ký lớp mỏng mục 2.3.3.1 dung dịch chất đối chiếu emodin nồng độ C₀ 3.93µg/µl Kết sắc ký đồ thể Hình 3.10 Trên sắc kí đồ, ánh sáng 366nm vết emodin cho màu vàng đậm, vết gọn, rõ nét, khơng có vết lạ, Rf tương đương Tiếp tục tiến hành cạo vết, đo quang bước sóng 250nm để khảo sát độ lặp lại cho kết Bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống - emodin Băng Vch (µl) Cđ (µg/ml) A 16.6 13.3 0.435 16.6 13.3 0.449 16.6 13.3 0.483 16.6 13.3 0.448 16.6 13.3 0.453 16.6 13.3 0.464 TB 0.455 SD 0.015 3.3 RSD (%) Chú thích: Vch: Thể tích chấm (µl) Cđ: Nồng độ đo quang, Cđ= 𝐶₀∗𝑉𝑐ℎ 5∗3 (µg/ml) A: Độ hấp thụ quang Kết cho thấy, độ lệch chuẩn tương đối (RSD) phép đo nhỏ 5,0%, phương pháp phù hợp, áp dụng để định lượng emodin 29 Hình 3.13 Sắc kí đồ khảo sát tính phù hợp hệ thống – emodin 30 c) Khảo sát khoảng tuyến tính physcion: Tiến hành triển khai sắc ký lớp mỏng mục 2.3.3.1 dung dịch chất đối chiếu physcion nồng độ C₀ 0.98µg/µl thu kết Hình 3.14 Hình 3.14 Sắc kí đồ khảo sát khoảng tuyến tính Physcion 31 Trên sắc kí đồ, ánh sáng 366nm vết physcion cho màu vàng nhạt, vết gọn, rõ nét, Rf tương đương nhau, có vài vết lạ vết nhạt tách hoàn toàn với vết physicon Tiếp tục tiến hành cạo vết, đo quang bước sóng 250nm để xây dựng đường tuyến tính cho kết Bảng 3.9: Bảng 3.9 Kết đo quang khảo sát khoảng tuyến tính Physcion STT Vch (µl) 15 25 50 75 100 Cđ (µg/ml) 2.94 4.91 9.81 14.72 19.62 A 0.230 0.339 0.353 0.484 0.560 Chú thích: Vch: Thể tích chấm (µl) Cđ: Nồng độ đo quang, Cđ= 𝐶₀∗𝑉𝑐ℎ (µg/ml) A: Độ hấp thụ quang Từ kết xây dựng đường tuyến tính Hình 3.15 với hệ số tương quan R=0.970, phương trình y=0.0183x+0.2032 (Trong y: độ hấp thụ, x: nồng độ physcion) Có thể thực phép định lượng physcion với nồng độ physcion khoảng 2.94-19.62 (µg/ml) Độ hấp thụ A Đường tuyến tính Physcion 0.6 0.5 y = 0.0183x + 0.2032 R² = 0.9424 0.4 0.3 0.2 0.1 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 Nồng độ C (µg/ml) 25.00 Hình 3.15 Đồ thị phụ thuộc độ hấp thụ quang theo nồng độ physcion d) Thẩm định tính phù hợp hệ thống - Physcion 32 Tiến hành triển khai sắc ký lớp mỏng trình bày mục 2.3.3.1 dung dịch chất đối chiếu Physcion nồng độ C₀ 0.98µg/µl thu kết (Hình 3.13) Trên sắc kí đồ, ánh sáng 366nm vết physcion cho màu vàng nhạt, vết gọn, rõ nét, Rf tương đương Tiếp tục tiến hành cạo vết, đo quang bước sóng 250nm để khảo sát độ lặp lại cho kết Bảng 3.10 Bảng 3.10 Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống - physcion Băng Vch (µl) Cđ (µg/ml) A 50 9.81 0.353 50 9.81 0.331 50 9.81 0.348 50 9.81 0.341 50 9.81 0.353 50 9.81 0.321 TB 0.341 SD 0.012 3.5 RSD (%) Chú thích: Vch: Thể tích chấm (µl) Cđ: Nồng độ đo quang, Cđ= 𝐶₀∗𝑉𝑐ℎ (µg/ml) A: Độ hấp thụ qung Kết cho thấy, độ lệch chuẩn tương đối (RSD) phép đo nhỏ 5,0%, phương pháp phù hợp, áp dụng để định lượng physcion 33 Hình 3.16 Sắc kí đồ khảo sát tính phù hợp hệ thống – physcion 34 3.3.2 Định lượng emodin physcion mẫu cắn Áp dụng phương pháp xây dựng trên, tiến hành sắc ký lớp mỏng mục 2.3.3.2, để đánh giá hàm lượng emodin physcion mẫu cắn thu được, kết thể Hình 3.17, Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.11 Kết định lượng emodin mẫu cắn Mẫu Cắn Cắn Cắn C₀ (µg/µl) 5 Vch (µl) 20 20 Cđ (µg/ml) 20 20 24 A 0.372 0.321 0.573 CEm (µg/ml) 6.21 5.29 9.87 HLEm (%) 31.05 26.45 41.13 Bảng 3.12 Kết định lượng physcion mẫu cắn Mẫu Cắn Cắn Cắn C₀ (µg/µl) 5 Vch (µl) 20 20 Cđ (µg/ml) 20 20 24 A 0.253 0.283 0.237 CPh (µg/ml) 2.72 4.36 1.85 HLPh (%) 13.6 21.8 7.71 Chú thích: Cₒ: nồng độ tương ứng với lượng cắn ban đầu mẫu (µg/µl) Vch: thể tích chấm (µl) Cđ: nồng độ đo quang Cđ= 𝐶₀∗𝑉𝑐ℎ (µg/ml) A: độ hấp thụ quang CPh: nồng độ emodin mẫu đo quang CPh= 𝐴−0.2032 0.0183 (µg/ml) HLPh: hàm lượng emodin cắn HLPh= (CPh/Cđ)*100 (%) CEm: nồng độ emodin mẫu đo quang CEm= 𝐴−0.0294 0.0551 (µg/ml) HLEm: hàm lượng emodin cắn HLEm= (CEm/Cđ)*100 (%) 35 Kết cho thấy, sắc kí đồ cắn 1, 2, gần quan sát hai vết emodin physcion, có vài vết khác nhạt, vết emodin physcion tách gọn, rõ nét Cắn cho thấy tượng kéo vết nhiều cắn 2, cắn hoàn tồn khơng kéo vết Hàm lượng emodin physcion mẫu cắn cao, chênh lệch hàm lượng cắn cắn không khác nhiều Cắn cho thấy hàm lượng emodin cao rõ rệt hàm lượng physcion lại thấp Như vậy, thấy, trình thủy phân dược liệu HCl 20% chiết EtOAc làm giàu đáng kể hàm lượng emodin physcion, nhiên tiến hành theo phương pháp cho lượng cắn nhiều tạp Sau tiến hành sắc kí cột thứ nhất, cắn phân đoạn Toluen thu sạch, gồm hỗn hợp emodin physcion hàm tỉ lệ emodin cao physcion thấp nhiều, tỉ lệ thay đổi so với cắn EtOAc lúc đầu, physcion bị thất nhiều phân đoạn khác Hình 3.17 Sắc kí đồ định lượng emodin physcion mẫu cắn 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã chiết xuất, phân lập hỗn hợp emodin physcion từ cốt khí củ sắc kí lớp mỏng điều chế sắc kí cột, emodin physcion phân lập có độ tinh khiết cao, dùng để làm chất đối chiếu kiểm nghiệm dược liệu Cả hai phương pháp điều chế cắn đưa lên cột cho cắn giàu hàm lượng emodin physcion, tạp, nhiên phương pháp tiến hành thủy phân trực tiếp HCl 20% từ bột dược liệu cho thấy lượng cắn thu nhiều hơn, nên tối ưu lượng chất chiết từ dược liệu Q trình sắc kí cột phải trải qua hai giai đoạn với hai hệ dung môi khác Hệ Toluen:EtOH (8:2) tách riêng emodin physcion lại cho phân đoạn gồm hỗn hợp emodin physcion tinh khiết Sử dụng cắn chạy tiếp cột sắc kí thứ hai với hệ dung môi N-hexan:EtOAc tách riêng emodin physcion Bên cạnh đó, xây dựng phương pháp định lượng emodin physcion áp dụng để đánh giá hàm lượng hai chất cắn thu từ việc làm giàu anthranoid từ bột dược liệu cắn phân đoạn Toluen chứa hỗn hợp emodin physcion Phương pháp ứng dụng để định lượng emodin physcion mẫu dược liệu khác KIẾN NGHỊ Qua việc quan sát kết từ nghiên cứu trên, đưa vài đề xuất sau: - Tiếp tục khảo sát, nghiên cứu quy trình chiết xuất, phân lập emodin physcion từ Cốt khí củ sắc kí cột để tối ưu hóa quy trình, rút gọn thời gian, tìm phương pháp tách riêng emodin physcion với lần chạy cột - Áp dụng qui trình xây dựng để chiết xuất phân lập emodin, physcion từ nguồn dược liệu khác giàu anthranoid 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Lê Ngọc Duy (2017), Xây dựng phương pháp định lượng polydatin rễ Cốt khí củ sắc ký lỏng hiệu cao, Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Dược Hà Nội Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y Học, Hà Nội, pp 506-507 Đồng Văn Thành (2018), Nghiên cứu xây dựng phương pháp định lượng đồng thời Polydatin, Resveratrol Emodin Cốt khí củ (Reynoutria japonica Houtt) sắc kí lỏng hiệu cao, Luận văn Thạc sĩ Dược học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Viện Dược liệu (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, pp 529-530 Tiếng Anh A Basile D Rigano, S Loppi, A Di Santi, A Nebbioso, S Sorbo, B Conte, L Paoli, F De Ruberto, A.M Molinari, L Altucci, P Bontempo (2015), "Antiproliferative, antibacterial and antifungal activity of the lichen Xanthoria parietina and its secondary metabolite parietin", Int J Mol Sci, 16, pp 7861–7875 Chong J Poutaraud A., Hugueney P (2009), "Metabolism and roles of stilbenes in plants", Plant Science, 177, pp 143-155 Chukwujekwu J Coombes P., Mulholland D (2006), "Emodin, an antibacterial anthraquinone from the roots of Cassia occidentails", South African Journal of Botany, 72(2), pp 295-297 College Editor Committee of Jiangsu New Medical (2001), "Encyclopedia of Traditional Chinese Medicine", Shanghai Science and Technology Press, pp 1329 Committee China Pharmacopoeia (1995), "Pharmacopoeia of the People’s Republic of China", China Chemical Industry Press, BeiJing, pp 167 10 Fei Gao Wenjun Liu, Qulian Guo, Yongqi Bai, HongYang, Hongying Chen (2017), "Physcion blocks cell cycle and induces apoptosis in human B cell precursor acute lymphoblastic leukemia cells by downregulating HOXA5", Biomedicine & Pharmacotherapy, 94, pp 850-857 11 Guo J Li W., Shi H (2013), "Synergistic effects of curcumin with emodin against the proliferation and invasion of breast cancer cells through upregulation of miR-34a", Molecular and cellular biochemistry, 382(1-2), pp 103-111 12 H Chen D Wu, L Bao, T Yin, D Lei, J Yu, X Tong (2019), "6PGD inhibition sensitizes hepatocellular carcinoma to chemotherapy via AMPK activation and metabolic reprogramming", Biomed Pharmacother, 111, pp 1353–1358 13 H Guo Z Xiang, Y Zhang, D Sun (2018), "Inhibiting 6-phosphogluconate dehydrogenase enhances chemotherapy efficacy in cervical cancer via 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 AMPK-independent inhibition of RhoA and Rac1", Clin Transl Oncol., 21, pp 404-411 Han J H Koh W., Lee H J (2012), "Analgesic and anti-inflammatory effects of ethyl acetate fraction of Polygonum cuspidatum in experimental animals", Immunopharmacology and immunotoxicology, 34(2), pp 191195 Hegde V R Pu H., Patel M., (2004), "Two new bacterial DNA primase inhibitors from the plant Polygonum cuspidatum", Bioorganic & medicinal chemistry letters, 14, pp 2275-2277 Hsu C Y Chan Y P., Chang J (2007), "Antioxidant activity of extract from Polygonum cuspidatum", Biological research, 40(1), pp 13-21 J.Y Hong H.J Chung, S.Y Bae, T.N Trung, K Bae, S.K Lee (2014), " Induction of cell cycle arrest and apoptosis by physcion, an anthraquinone isolated from rhubarb (Rhizomes of Rheum tanguticum), in MDA-MB-231 human breast cancer cells", Journal of Cancer Prevention, 19(4), pp 273278 Jia X Yu F., Wang J (2014), "Emodin suppresses pulmonary metastasis of breast cancer accompanied with decreased macrophage recruitment and M2 polarization in the lungs", Breast cancer research and treatment, 148(2), pp 291-302 Jia X.M Jin G.Z (2007), "Chemical constituents in root and rhizome of Polygonum cuspidatum", Chinese Traditional and Herbal Drugs, 38(10), pp 1446 Junjie Gao Fangli Wang, Weisong Wang, Zhiguo Su, Canghui Guo, Shuyi Cao (2014), "Emodin Suppresses Hyperglycemia-Induced Proliferation and Fibronectin Expression in Mesangial Cells via Inhibiting cFLIP", PLoS ONE, 9(4), pp K.D Beattie R Rouf, L Gander, T.W May, D Ratkowsky, C.D Donner, M Gill, I.D Grice, E Tiralongo (2010), "Antibacterial metabolites from Australian macrofungi from the genus Cortinarius", Phytochemistry 71, pp 948–955 K.S Kwon J.H Lee, K.S So, B.K Park, H Lim, J.S Choi, H.P Kim, (2018), "Aurantioobtusin, an anthraquinone from cassiae semen, ameliorates lung inflammatory responses", Phytother Res, 32, pp 1537– 1545 Kim J R Oh D.R., Cha M H (2008), "Protective effect of Polygoni cuspidati radix and emodin on Vibrio vulnificus cytotoxicity and infection", The Journal of Microbiology, 46(6), pp 737-743 Kimura Y Kozawa M., Baba K., (1983), "New constitutents of root of Polygonum cuspidatum", Planta medica, 48, pp 164-168 M.Bačkorová M.Bačkor, J.Mikeš, R.Jendželovský, P.Fedoročko (2011), "Variable responses of different human cancer cells to the lichen compounds parietin, atranorin, usnic acid and gyrophoric acid", Toxicology in Vitro, 25, pp 37-44 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 Murakami T Ikeda K., Takido M (1968), "Uber die Strukturen der Anthraglykoside aus den Rhizomen von Polygonum cuspidarum SIEB et Zucc", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 16, pp 2299-2300 Ni Q Sun K., Chen G (2014), "In vitro effects of emodin on peritoneal macrophages that express membrane-bound CD14 protein in a rat model of severe acute pancreatitis/systemic inflammatory response syndrome", Molecular medicine reports, 9(1), pp 355-359 Nonomura S Kanagawa H., Makimoto a (1963), "Chemical constitutents of polygonaceous plants I studies on the components of kojokon (Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc.", Yakugaku Zasshi: Journal of the Pharmaceutical Society of Japan, 83, pp 988-990 Park C.-S Lee Y.C., Kim J.-D (2004), "Inhibitory effects of Polygonum cuspidatum water extract (PCWE) and its component rasveratrol on acylcoenzyme A-cholesterol acyltransferase activity for cholesteryl ester synthesis in HepG2 cells", Vascular pharmacology, 40(6), pp 279-284 R Lin S Elf, C Shan, H.B Kang, Q Ji, L Zhou, T Hitosugi, L Zhang, S Zhang, J.H Seo, J Xie, M Tucker, T.L Gu, J Sudderth, L Jiang, M Mitsche, R.J DeBerardinis, Wu, Y Li, H Mao, P.R Chen, D Wang, G.Z Chen, S.J Hurwitz, S Lonial, M.L Arellano, H.J Khoury, F.R., Khuri, B.H Lee, Q Lei, D.J Brat, K Ye T.J Boggon, C He, S Kang, J Fan, J Chen (2015), " 6-Phosphogluconate dehydrogenase links oxidative PPP, lipogenesis and tumour growth by inhibiting LKB1-AMPK signalling", Nat Cell Biol, 17, pp 1484–1496 Takhtajan A (2009), Flowering plants, Springer Science & Business Media Tsukida K Yoneshige M (1954), "Studies on the constituents of polygonaceous plants constituents of kojokon (Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc)", Yakugaku Zasshi: Journal of the Pharmaceutical Society of Japan, 74, pp 379-382 W Liu J He, Y Yang, Q Guo, F Gao (2016), "Upregulating miR-146a by physcion reverses multidrug resistance in human chronic myelogenous leukemia K562/ADM cells", Am J Cancer Res, 6, pp 2547–2560 W.W May Zin S Buttachon, T Dethoup, J.A Pereira, L Gales, A Inacio, P.M Costa, M Lee, N Sekeroglu, A.M.S Silva, M.M.M Pinto, A Kijjoa (2017), "Antibacterial and antibiofilm activities of the metabolites isolated from the culture of the mangrove-derived endophytic fungus Eurotium chevalieri KUFA 0006", Phytochemistry, 141, pp 86-97 Way T.D Huang LT., Chou C.H (2014), "Emodin represses TWIST I induced epithelial-mesenchyntal transitions in head and neck squamous cell carcinoma cells by inhibiting the β-catenin and Akt pathways", European journal of cancer, 502(2), pp 366-378 XunLia Yingjiao Liua, Shifeng Chub, Songwei Yanga, Ye Penga, Siyu Rena, Birui Wena, Naihong Chena (2019), "Physcion and physcion 8-O-βglucopyranoside: A review of their pharmacology, toxicities and pharmacokinetics", Chemico-Biological Interactions, 310, pp 1-4 37 38 39 40 41 Y.-M Kim C.-H Lee, H.-G Kim, H.-S Lee, (2004), "Anthraquinones isolated from Cassia tora (leguminosae) seed show an antifungal property against phytopathogenic fungi", J Agric Food Chem, 52, pp 6096–6100 Yun J.M Chien A., Jialal I (2012), "Resveratrol up-regulates SIRTI and inhibits cellular oxidative stress in the diabetic milieu: mechanistic insights", The Journal of nutritional biochemistry, 23(7), pp 699-705 Zhang H Zhang Q.W., Wang L (2012), "Two new anthraquinone malonylglucosides from Polygonum cuspidatum", Natural product research, 26(4), pp 1323-1327 Zhang H Zhang Q.W., Wang L., et al (2012), "Two new anthraquinone malonylglucosides from polygonum cuspidatum", Natural product research, 26, pp 1323-1327 M.Y Shen Y.J Liu, M.J Don, H.Y Liu, Z.W Chen, C Mettling, P Corbeau, C.K Chiang, Y.S Jang, T.H Li, P Young, C.L Chang, Y.L Lin, W.C Yang (2011), "Combined phytochemistry and chemotaxis assays for identification and mechanistic analysis of anti-inflammatory phytochemicals in Fallopia japonica", PLoS One ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI SOUKANYA SOULINTHONG MÃ SINH VIÊN: 1601671 NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT EMODIN VÀ PHYSCION TỪ CỐT KHÍ CỦ (RADIX POLYGONI CUSPIDATI) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng... tài ? ?Nghiên cứu chiết xuất emodin physcion từ cốt khí củ (Radix Polygoni cuspidati)? ?? với mục tiêu: Chiết xuất, phân lập emodin physcion từ cốt khí củ Định lượng emodin physcion phương pháp TLC-UV... trình phân lập emodin physcion từ cốt khí củ sắc ký lớp mỏng 21 3.2 Chiết xuất Emodin Physcion sắc kí cột 3.2.1 Chiết hỗn hợp anthranoid từ cốt khí củ Với 100g bột cốt khí củ ban đầu, chiết hỗn hợp