Đang tải... (xem toàn văn)
Các phương pháp chủ yếu sử dụng trong nghiên cứu xác định tỷ lệ tiêu hóa, Phương pháp xác định tỷ lệ tiêu hóa Invtro, Phương pháp tiêu hóa toàn phần (phương pháp cổ truyền), Phương pháp đánh giá tỷ lệ tiêu hóa hồi tràng (Thu dưỡng chấp), Các phương pháp xác định mất mát N nội sinh, Phương pháp đánh giá tỷ lệ tiêu hóa hồi tràng tiêu chuẩn
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN CHĂN NUÔI PHAN VĂN SỸ CHUYÊN ĐỀ LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên đề số TÊN CHUYÊN ĐỀ: CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH TỶ LỆ TIÊU HÓA THỨC ĂN DINH DƯỠNG TRÊN GÀ VÀ LỢN HÀ NỘI – 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN CHĂN NUÔI PHAN VĂN SỸ Chuyên đề số TÊN CHUYÊN ĐỀ: CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH TỶ LỆ TIÊU HÓA THỨC ĂN DINH DƯỢNG TRÊN GIA CẦM Tên luận án tiến sĩ: Nghiên cứu chế biến, bảo quản sử dụng mỡ cá tra làm thức ăn cho gà Chuyên ngành: Dinh dưỡng thức chăn nuôi Mã số: 962.01.07 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS Lã Văn Kính TS Vương Nam Trung HÀ NỘI – 2019 Nội dung chuyên đề I Mở đầu II Các phương pháp chủ yếu sử dụng nghiên cứu xác định tỷ lệ tiêu hóa 2.1 Phương pháp xác định tỷ lệ tiêu hóa Invtro 2.1.1 Phương pháp thử nghiệm enzyme 2.1.1.1 Nguyên lý phương pháp .2 2.1.1.2 Các bước tiến hành .3 2.1.2 Phương pháp Quang phổ cận hồng ngoại (Near Infrared Reflectance Spectroscopy - NIRS) 2.2 Phương pháp tiêu hóa tồn phần (phương pháp cổ truyền) 2.2.1 Nguyên lý phương pháp 2.1.2 Các bước tiến hành: .4 2.3 Phương pháp đánh giá tỷ lệ tiêu hóa hồi tràng (Thu dưỡng chấp) 2.3.1 Nguyên lý phương pháp 2.3.2 Phương pháp tiến hành 2.4 Phương pháp đánh giá tỷ lệ tiêu hóa hồi tràng tiêu chuẩn 2.4.1 Nguyên lý phương pháp 2.5 Các phương pháp xác định mát N nội sinh 10 2.5.1 Khẩu phần không chứa N (Nitrogen free diet –NFD) 10 2.5.2 Sử dụng phần có protein tiêu hóa cao (Casein hay gluten hạt mì) 11 2.5.3 Phương pháp hồi quy 12 2.6 Phương pháp xác định giá trị lượng thức ăn 12 2.7 Một số yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ tiêu hóa gia cầm 14 2.7.1 Giống gia cầm 14 2.7.2 Tuổi gia cầm 14 2.7.4 Kỹ thuật chế biến thức ăn –kích kỡ thức ăn 17 2.7.5 Chất bổ sung - Enzyme 17 2.8 Ứng dụng số giá trị tính tốn tỷ lệ tiêu hóa thiết lập phần 18 III Kết luận 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO 21 I Mở đầu Thức ăn sản phẩm thực vật, động vật khoáng vật thể gia súc ăn vào, tiêu hóa, hấp thu sử dụng cho mục đích khác thể Trong thực tế tất vật liệu ăn vào tiêu hóa hay hồn tồn tiêu hóa vật ni khác Sự khác khả tiêu hóa sử dụng làm cho giá trị dinh dưỡng thức ăn khác Ví dụ, cỏ khơ cỏ tự nhiên thức ăn khó tiêu hóa cám gạo, bột cá dễ tiêu hóa lợn Trong khi, cỏ rơm khó tiêu hóa lợn dễ tiêu hóa bị, trâu… Điều cho thấy, giá trị thức ăn khác theo đối tượng sử dụng Thức ăn chứa nguyên tố hoá học C, H, O, N, P, S, Na, Cl, Mg, Fe, Cu, Zn, Co, Mn , nguyên tố tham gia cấu tạo nên nhiều hợp chất khác nhau, chất dinh dưỡng có cấu trúc chức khác Dựa cấu trúc chức chất dinh dưỡng người ta phân chia thành phần dinh dưỡng thức ăn theo sơ đồ thành phần chất dinh dưỡng thức ăn Sơ đồ 1: Thành phần chất dinh dưỡng thức ăn Giá trị dinh dưỡng thức ăn đánh giá thông qua hàm lượng (tỷ lệ) protein, mỡ, carbohydrate lượng có thức ăn Để biết giá trị dinh dưỡng thức ăn, tỷ lệ tiêu hóa chúng nhà khoa học dinh dưỡng có nhiều phương pháp xác định tỷ lệ tiêu hóa thức ăn như: (i) Nhóm phương pháp xác định trực tiếp thể sống (in vivo), ví dụ phương pháp tiêu hóa tồn phần (phương pháp cổ truyền), phương pháp tiêu hóa hồi tràng (ii) Nhóm phương pháp xác định phịng thí nghiệm (in vitro), ví dụ phương pháp sử dụng enzyme tiêu hố pepsin, trypsin (iii) Nhóm phương pháp vừa thể sống vừa phịng thí nghiệm (in sacco) Trong có 02 phương pháp thường sử dụng nhiều nghiên cứu dinh dưỡng cho gà để xác định tỷ lệ tiêu hóa nguyên liệu/khẩu phần phương pháp xác định trực tiếp thể sống động vật bao gồm phương pháp tiêu hóa tồn phần phương pháp tiêu hóa hồi tràng II Các phương pháp chủ yếu sử dụng nghiên cứu xác định tỷ lệ tiêu hóa 2.1 Phương pháp xác định tỷ lệ tiêu hóa Invtro Các kỹ thuật in vitro nhiều nhà nghiên cứu quan tâm ưu điểm đơn giản, chi phí thấp khơng cần sử dụng động vật thí nghiệm Tuy nhiên, kết in vitro đến chưa chấp nhận để ứng dụng lập phần Các phương pháp in vitro bao gồm thử nghiệm hóa học, thử nghiệm enzyme, thử nghiệm vi sinh vật, kỹ thuật quang phổ cận hồng ngoại (NIRS) xét nghiệm miễn dịch Các phương pháp chủ yếu để sử dụng đánh giá tiêu hóa tinh bột protein gia cầm 2.1.1 Phương pháp thử nghiệm enzyme 2.1.1.1 Nguyên lý phương pháp Trộn thức ăn/nguyên liệu với dịch tiêu hóa (Enzyme dày, tụy ruột) Hỗn hợp enzyme dạng tương đối tinh dịch tiêu hóa non Phương pháp thường sử dụng để đánh giá tỷ lệ tiêu hóa/phân giải protein 2.1.1.2 Các bước tiến hành Chuẩn bị chất đêm: Nhiều chế phẩm đệm đánh giá nghiên cứu sơ để kiểm tra tương tác chúng với thuốc thử so màu tác động chúng tính ổn định enzyme Các chất đệm natri acetate có pH 12,5 6,5 phù hợp để trì hoạt động enzyme dịch tụy dựa glycerol khả tương thích với thuốc thử ninhydrin sử dụng nghiên cứu Chuẩn bị enzyme/hỗn hợp enzyme: Enzyme lấy trực tiếp từ vật điều chế từ công nghiệp Trộn hỗn hợp enzyme với chất đệm nguyên liệu thức ăn: Thường giữ 370C thời gian tối thiểu 30 phút Có thể kéo dài thời gian thử nghiệm lên đến 96 Sau lấy mẫu, phân tích đánh giá kết phân giải/tiêu hóa 2.1.2 Phương pháp Quang phổ cận hồng ngoại (Near Infrared Reflectance Spectroscopy - NIRS) NRIS kỹ thuật dùng để xác định thành phần hóa học mẫu sinh học nguyên liệu, thực phẩm, dược phẩm thức ăn chăn nuôi 2.1.2.1 Nguyên lý phương pháp Theo William (1998), có chùm ánh sáng tới chiếu qua mẫu sinh học, vùng ánh sáng cận hồng ngoại, bước sóng 750 – 2.500 nm liên kết C-H, N-H, OH có chất hữu mơ sinh học hấp phụ Đo phổ ánh sáng phản xạ từ mẫu sinh học thu thông tin thành phần hóa học mẫu Những giá trị phổ thu phân tích phần mềm máy tính cho ma trận giá trị phổ chất hữu cần phân tích (như protein thơ, lipit…) Áp dụng mơ hình thống kê nhiều biến mô tả mối quan hệ phổ hấp phụ thành phần hóa học; mối quan hệ sở để chẩn đốn thành phần hóa học máy phân tích (máy NIR) Một số tác giả cho biết NIRS kỹ thuật tiềm năng, tin cậy để dự đốn tiêu hóa amino acid (Van Leeuwen ctv 1991; Jackson ctv, 1996) Sử dụng phương pháp cho kết nhanh nhiều so với phương pháp in vitro khác Tuy nhiên, phương pháp phụ thuộc vào việc hiệu chuẩn thiết bị số lượng mẫu tương đối lớn với giá trị in vivo biết trước Đây lý làm chậm phát triển phương pháp NIRS Thêm vào đó, liệu hiệu chỉnh cần phải kiểm chứng so sánh thống kê với liệu độc lập (Ravindran ctv 1999) Hiện nay, nhiều nhà máy thức ăn chăn ni sử dụng cơng nghệ NIRS để dự đốn hàm lượng protein, độ ẩm, lipid khoáng tổng số nhằm có thơng tin cần thiết loại thức ăn 2.2 Phương pháp tiêu hóa tồn phần (phương pháp cổ truyền) 2.2.1 Nguyên lý phương pháp Vật nuôi cho ăn phần với khối lượng, hàm lượng dinh dưỡng biết xác định lượng phân thải Lượng chất dinh dưỡng tiêu hoá chênh lệch khối lượng, hàm lượng dinh dưỡng có thức ăn ăn vào khối lượng thải phân 2.1.2 Các bước tiến hành: Bước 1: Chuẩn bị Vật ni – gia cầm thí nghiệm: Xác định đối tượng nghiên cứu, từ chọn vật khỏe mạnh, nhanh nhẹn, đáp ứng độ tuổi ni thí nghiệm Chuồng ni cũi tiêu hóa riêng biệt có mang ăn máng uống có hệ thống thu phân nước tiểu riêng Cũi tiêu hóa nhốt con/lồng nhiều Nguyên liệu, thức ăn thí nghiệm: Nguyên liệu thức ăn thí nghiệm kiểm tra chất lượng trước làm thí nghiệm xay, nghiền, chế biến (độ mịn, mảnh , hạt … nguyên liệu, thức ăn) đảm bảo vật ăn Bước 2: Tiến hành Thí nghiệm tiến hành nhiều giai đoạn (tuỳ số lượng phần nghiên cứu), giai đoạn bao gồm: thời gian chuẩn bị (thích nghi) thời gian thí nghiệm (thu phân) Thời gian chuẩn bị - thích ghi mục đích để- thứ nhất: để vật làm quen với mơi trường sống tập thói quen cho vật phân chỗ; thứ hai: để vật thải hết thức ăn cũ đường tiêu hóa; thứ ba làm quen với thức ăn thí nghiệm xác định lượng ăn tối đa; cuối có điều kiện quan sát vật Trên gia cầm phương pháp thường gặp vấn đề chất thải có phân nước tiểu Hầu hết tác giả khuyến cáo sử dụng gà trống tơ, cắt bỏ manh tràng (Okumura, 1976, Paulson, 1969, Sibbald (1976), Farrell (1978) McNab Blair (1988) Theo phương pháp Farrell (1978), Gà huấn luyện để ăn hết lượng ăn vào ngày vòng giờ, lần/ngày, giờ/lần thời gian 10 ngày Thời gian cho q trình thí nghiệm Ngày Giờ Thời gian sau rút thức ăn (giờ) Công việc 8:00 Rút thức ăn 16:00 Cho ăn glucose 30 g/ (pha nước) 16:00 32 Cho ăn thức ăn thí nghiệm 8:00 48 Cho ăn thức ăn thí nghiệm – Thu phân 16:00 56 Cho ăn thức ăn thí nghiệm – Thu phân 8:00 72 Cho ăn thức ăn thí nghiệm – Thu phân 16:00 80 Cho ăn thức ăn thí nghiệm – Thu phân 8:00 96 Thu phân 16:00 104 Thu phân 8:00 120 Thu phân - Kết thúc Đảm bảo cho gà ăn hết vòng thu phân thải Phân thu lần/ngày lần thu phân xong cho ăn giờ, tiếp tục ngày thứ thu phân đến 32 sau lần cho ăn cuối Khay hứng phân đặt bên củi tiêu hóa (lồng) gà, trải giấy nylon (đã cân trọng lượng) lên khay để thu phân Hình 1: Thu chất thải gà thí nghiệm Mỗi lần thu phân lấy khay ra, nhặt lông, vảy cân trọng lượng phân giấy nylon, sau trừ trọng lượng giấy nylon ban đầu trọng lượng phân thải Phân thu ngày trộn chung, làm lạnh, sấy khô nhiệt độ 56oC ngày, sau đem bảo quản lạnh phân tích Bước 3: Lấy mẫu phân tích tính toán kết Các mẫu nguyên liệu, thức ăn mẫu chất thải sau phân tích giá trị dinh dưỡng tính tỷ lệ tiêu hóa phần, dinh dưỡng phần sau: Tỷ lệ tiêu hoá chất dinh dưỡng phần Tỷ lệ tiêu hố : (TLTH) TLTH = ((c-d)/c)*100 Trong đó: c giá trị dinh dưỡng phần ăn vào, d giá trị dinh dưỡng thải phân 2.3 Phương pháp đánh giá tỷ lệ tiêu hóa hồi tràng (Thu dưỡng chấp) 2.3.1 Nguyên lý phương pháp Vật nuôi cho ăn phần với khối lượng biết dinh dưỡng thu từ dịch tiêu hóa hồi tràng Lượng chất dinh dưỡng tiêu hố chênh lệch chất dinh dưỡng có thức ăn ăn vào dưỡng chất có dịch hồi tràng 2.3.2 Phương pháp tiến hành Bước 1: chuẩn bị Vật ni: xác định đối tượng nghiên cứu, từ chọn vật khỏe mạnh Chuồng nuôi cũi tiêu hóa riêng biệt có máng ăn máng uống đảm bảo cho vật sống bình thường Nguyên liệu, thức ăn thí nghiệm: Nguyên liệu thức ăn thí nghiệm kiểm tra chất lượng trước làm thí nghiệm xay, nghiền (độ mịn, mảnh , hạt … nguyên liệu, thức ăn) đảm bảo vật ăn Bước 2: Tiến hành - Gà ni cũi tiêu hóa, chuồng ni, thời gian cho gà thích ghi với thức ăn thí nghiệm từ 10-14 ngày: ngày cho ăn lần - Ờ ngày cuối sau gà ăn giết mổ thu mẫu: Gà cố định cách phá vỡ trung khu điều khiển vận động não (Engberg ctv, 2004; Nguyen Thi Kim Dong, 2005) - Sau mổ xoang bụng tách lấy đoạn hồi tràng dài từ 15 – 20 cm tính từ van hồi – manh tràng (Kadim and Moughan, 2008) hay từ túi thừa Meckel đến điểm cách van hồi – manh tràng cm (Jamroz ctv., 2001, Bryden and Li, 2010) thu dịch hồi tràng Đối với gia cầm: nhà khoa học thường tính đến giá trị lượng trao đổi có hiệu chỉnh nito: Năng lượng trao đổi hiệu chình tính theo cơng thức: (Theo Lammers ctv (2008) MEn = AME - 8,22 x NR với NR = (Nd-Ne x AIAd/AIAe) x 10 Trong đó: Nd lượng nito có phần thí nghiệm Ne lượng nito có chất thải 2.7 Một số yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ tiêu hóa gia cầm 2.7.1 Giống gia cầm Điều thể rõ, giống gà ta, gà địa phương có tỷ lệ lợi dụng thức ăn nói chung tiêu hóa lượng nói riêng thấp gà cơng nghiệp Khả tiêu hóa gà thịt cao gà đẻ ( Mtei ctv, 2019) 2.7.2 Tuổi gia cầm Tuổi gia cầm có liên quan chặt chẽ tới q trình tiêu hóa lượng, q trình phát triển đường tiêu hóa gắn liền với giai đoạn tuổi giai đoạn tuổi gia cầm Ruột non phát triển nhanh hoàn thiện tất giống gia cầm sau 6-7 ngày tuổi (Nitsan ctv., 1991; Obst Diamond, 1992) Ngồi ra, enzyme tiêu hóa tăng 14 ngày đầu (Nitsan ctv., 1991; Sell ctv, 1991) Uni ctv (1995) báo cáo chiều cao lông nhung chiều rộng tăng 25 đến 100% tất phân khúc nhỏ ruột từ đến 10 ngày tuổi Do đó, q trình phát triển trưởng thành hệ thống tiêu hóa gia cầm non, chất dinh dưỡng sử dụng kém, đặc biệt đến 10 ngày Nghiện cứu nhóm tác giả Zelenka Ceresnakova, 2005 đối tượng gà thịt gà đẻ tỷ lệ tiêu hóa tinh bột lứa tuối khác có tiêu hóa khác (Bảng 3) 14 Bảng 3: Tỷ lệ tiêu hóa tinh bột gà thịt gà đẻ Ngày tuổi Tỷ lệ tiêu hóa tinh bột Tỷ lệ tiêu hóa tinh bột gà thịt (Ross 208) -% gà đẻ (Isa Brown) -% 0,9495 0,8092 0,9636 0,9046 0,9732 0,9862 0,9735 0,9814 0,9678 0,9763 0,9745 0,9760 0,9917 0,9784 0,9815 0,9807 10 0,9877 0,9923 11 0,9836 0,9857 12 0,9817 0,9875 13 0,9836 0,9908 14 0,9965 0,9936 15 0,9858 0,9869 16 0,9928 0,9937 17 0,9884 0,9914 18 0,9925 0,9945 19 0,9868 0,9908 20 0,9887 0,9903 21 0,9874 0,9911 22 0,9936 0,9907 2.7.3 Thành phần –nguyên liệu thức ăn Nguyên liệu sử dụng tổ hợp phần sử dụng chăn ni có liên quan chặt chẽ tới khả tiêu hóa vật Ngồi tỷ lệ tiêu hóa phần khơng bị ảnh hưởng thành phần hóa học mà cịn bị ảnh hưởng loại thức ăn 15 Hàm lượng xơ khầu phần: Hệ tiêu hóa động vật gồm có ngăn khác miệng, dày, ruột non, ruột già quan cung ứng gan, tụy tạng bao hàm q trình tiêu hóa hấp thu Tất phận kết hợp với quan ngoại biên nhờ tập hợp rộng thụ cảm (căng phồng, xúc giác, hóa học) giám sát q trình tiêu hóa hấp thu qua tín hiệu phản hồi hormone hệ thần kinh Bằng cách này, thay đổi lượng dinh dưỡng máu tối thiểu hóa việc cung cấp chất dinh dưỡng đến quan khác điều hòa tối ưu hóa Hàm lương xơ phần nhân tố quan trọng, trước tác động đến trình tiêu hóa hấp thu, điều tiết cung cấp chất dinh dưỡng đến quan mô không theo cách tiếp cận trực tiếp với đường tiêu hóa Hàm lượng xơ phần làm giảm AID (Mosenthin cs., 1994; Lenis cs., 1996), thí nghiệm khác, lại có kết khơng có ảnh hưởng việc bổ sung chất xơ (Sauer ctv., 1991; Li ctv., 1994) Lý cho bất đồng nguồn xơ khác sử dụng Mosenthin ctv., (1994) sử dụng pectin phần, nguồn xenlulose sử dụng thí nghiệm khác Các xơ hòa tan pectin thường làm giảm khả tiêu hóa chất dinh dưỡng ruột non, xơ khơng hịa tan có ảnh hưởng nhỏ đến hấp thu chất dinh dưỡng cuối hồi tràng (Eggum, 1995) Lý giảm AID phần có chứa xơ hịa tan mát nội sinh axit amin đường amino tăng lên tăng hàm lượng chất xơ (Schultze ctv., 1994; Seve ctv., 1994; Schultze ctv., 1995) Nguồn chất xơ chứng minh có ảnh hưởng đáng kể đến mát nội sinh axit amin (Leterme ctv., 1996) độ nhớt chất xơ (Larsen ctv., 1993) Trong thí nghiệm liên quan đến ba nguồn chất xơ khơng hịa tan, MariscalLandin ctv., (1995) nhận thấy mát nội sinh axit amin bị ảnh hưởng mức xơ phần đến khoảng 4% xơ đưa vào Ở mức xơ cao hơn, gia tăng thêm mát nội sinh Các quan sát tương tự thực thí nghiệm khác (de Lange ctv., 1989; Leterme ctv., 1992) 16 2.7.4 Kỹ thuật chế biến thức ăn –kích kỡ thức ăn Kỹ thuật chế biến nguyên liêu sử dụng rộng rãi sản xuất thức ăn Các thức ăn có chứa protein thức ăn hỗn hợp thường xử lý nước nhiệt độ Các protein axit amin thường bị hư hại nhiệt trình chế biến làm giảm tỷ lệ tiêu hóa (giảm hữu dụng) lợn Điều xử lý xảy phản ứng hóa học như: phản ứng Maillard, racemic hóa, phản ứng phân giải, liên kết chéo Việc đánh giá tỷ lệ tiêu hóa axit amin hồi tràng cho phép đánh giá tốt axit amin hữu dụng động vật so với hàm lượng tổng số tiêu hóa phân Tuy nhiên, hư hại nhiệt xảy số axit amin q trình chế biến khơng đo xác kỹ thuật tiêu hóa hồi tràng Mặc dù axit amin hấp thu khơng thể góp phần tạo phản ứng trao đổi chất hư hại cấu trúc Sự khả tham gia vào trình trao đổi chất ước lượng cách đo axit amin hoạt động sinh lý Xay nghiền làm cho hạt ngũ cốc bị phá vỡ, nứt làm tăng khả tiếp cận enzyme tiêu hóa làm tăng tỷ lệ tiêu hóa thức ăn Một nghiên cứu gần Mtei ctv, 2019 đối tượng gà thịt gà đẻ với kích cỡ nghiền khác hạt ngơ: mịn, trung bình thơ tương ứng với mắt mưới sàng có kích thước 2, mm Cho thấy, tỷ lệ tiêu hóa vật chất khô, tinh bột, lượng không ảnh hưởng kích thước thức ăn, nhiên tỷ lệ tiêu hóa N chất béo có ảnh hưởng kích thước thức ăn Trên gà đẻ kích thước thức ăn ảnh hưởng rõ rệt tới khả tiêu hóa vật chất khơ, tinh bột, lượng Q trình ép đùn (Extrusion) ảnh hưởng lớn đến tỷ lệ tiêu hóa thức ăn gà, q trình liên quan chặt chẽ với tinh bột có hạt ngũ cốc sử dụng phần thức ăn liên quan đến enzyme amylose amylopectin có đường tiêu hóa gia cầm (Muhammad ctv, 2015 Nayak, Berrios, & Tang, 2014; Lankhorst ctv., 2007) 2.7.5 Chất bổ sung - Enzyme Việc bổ sung enzyme ngoại sinh nhắm vào chất xơ khơng hịa tan hịa tan tạo điều kiện giải phóng chất dinh dưỡng từ vách thành tế bào, dẫn đến 17 khả tiếp cận enzyme tiêu hóa cải thiện (Stefanello ctv 2016; Cowieson, 2013) Enzyme Xylanase thủy phân hemicellulose thành tế bào, cải thiện khả tiếp cận enzyme nội sinh đến thành tế bào (Meng et al., 2005; Francesch Geraert, 2009) làm giảm axit amin nội sinh (AA), đặc biệt thông qua thay đổi amylase chất nhầy (Jiang ctv, 2008; Cowieson Bedford, 2009) Một nghiên cứu gần Stefanello ctv 2016 cho thấy tỷ lệ tiêu hóa protein thơ lượng trao đổi tăng tuyến tính (P
