Xác định dư lượng ochratoxin a trong cà phê bột bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC MS MS) và đề xuất giải pháp nhằm đảm bảo chất lượng an toàn thực phẩm tại địa bàn buôn mê thuột

ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ PHƯƠNG THU XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG OCHRATOXIN A TRONG CÀ PHÊ BỘT BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) VÀ ĐỀ XUẤT GIẢI PHÁP NHẰM ĐẢM BẢO CHẤT LƯỢNG AN TỒN THỰC PHẨM TẠI ĐỊA BÀN BN MA THUỘT LUẬN VĂN THẠC SĨ CHẾ BIẾN LƯƠNG THỰC, THỰC PHẨM VÀ ĐỒ UỐNG Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm HUẾ - 2019 ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ PHƯƠNG THU XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG OCHRATOXIN A TRONG CÀ PHÊ BỘT BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) VÀ ĐỀ XUẤT GIẢI PHÁP NHẰM ĐẢM BẢO CHẤT LƯỢNG AN TOÀN THỰC PHẨM TẠI ĐỊA BÀN BUÔN MA THUỘT LUẬN VĂN THẠC SĨ CHẾ BIẾN LƯƠNG THỰC, THỰC PHẨM VÀ ĐỒ UỐNG Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số: 8540101 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS NGUYỄN VĂN HUẾ HUẾ - 2019 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: "Xác định dư lượng Ochratoxin A cà phê bột phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) đề xuất giải pháp nhằm đảm bảo chất lượng an toàn thực phẩm địa bàn Buôn Ma Thuột” công trình nghiên cứu độc lập khơng có chép người khác Đề tài sản phẩm mà Tôi nổ lực nghiên cứu trình học tập Trường Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác.Trong q trình viết có tham khảo số tài liệu có nguồn gốc rõ ràng Nếu khơng trên, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm đề tài Huế, tháng năm 2019 Người thực Nguyễn Thị Phương Thu ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp cố gắng nỗ lực thân, nhận giúp đỡ, động viên sâu sắc Thầy Cô, bạn bè người thân, tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn đến: Ban Lãnh đạo Viện vệ sinh Dịch tễ Tây Nguyên, cô anh chị bạn đồng nghiệp Trung tâm kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm khu vực Tây Nguyên quan tâm tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực nghiên cứu đề tài luận văn Bằng tình cảm chân thành nhất, tơi xin cảm ơn tồn Quý Thầy Cô giáo trường Đại Học Nông Lâm Huế đặc biệt Q Thầy Cơ Khoa Cơ Khí Công Nghệ, cho kiến thức quý giá, tạo điều kiện cho học tập nghiên cứu môi trường đại Đặc biệt xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến: Thầy TS Nguyễn Văn Huế Người động viên, giúp đỡ hướng dẫn trực tiếp tơi hồn thành báo cáo luận văn tốt nghiệp Cuối xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè tập thể lớp CNTP K23 đóng góp ý kiến xây dựng để tơi hồn thành báo cáo luận văn Huế, tháng năm 2019 Học viên Nguyễn Thị Phương Thu iii TÓM TẮT Ochratoxin A chất chuyển hóa thứ cấp sinh chủng nấm mốc thuộc giống Aspergilus ochraceus Penicillium verrucusum Theo tổ chức nghiên cứu ung thư Quốc tế (IARC) Ochratoxins xếp vào loại chất có khả gây ung thư nhóm IIB Độc tố phát nhiều nông sản khác bao gồm ngũ cốc sản phẩm chúng loại độc tố có tiềm gây ung thư viêm thận người động vật Điều đáng lo ngại ăn phải thức ăn bị nhiễm Ochratoxins khơng gây ngộ độc cấp tính mà tích lũy dần thể - nguy tiềm ẩn đe dọa sức khỏe cho người Nước ta nước nhiệt đới có khí hậu nóng ẩm, thuận lợi cho nấm mốc phát triển Hàng năm, tổn thất lượng chất cà phê nông sản khác nấm mốc gây chiếm phần đáng kể rào cản thương mại ảnh hưởng đến kinh tế nước Ochratoxin A độc tố phát sau độc tố aflatoxin độc tố nguy hiểm thường nhiễm cà phê Để kiểm soát mức độ nhiễm Ochratoxins thực phẩm, Việt Nam giới có nhiều phương pháp phân tích nghiên cứu ứng dụng Nhưng với đặc điểm ưu việt độ xác cao nên phương pháp phân tích sắc ký lỏng khối phổ coi phương pháp phân tích có giá trị pháp lý để phát định lượng nồng độ Ochratoxins lượng vết hay siêu vết Vì lý đó, chúng tơi chọn đề tài: "Xác định dư lượng Ochratoxin A cà phê bột phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) đề xuất giải pháp nhằm đảm bảo chất lượng an tồn thực phẩm địa bàn Bn Ma Thuột” Nhằm xây dựng phương pháp phân tích dư lượng Ochratoxin A cà phê bột kỹ thuật sắc ký lỏng ghép khối phổ đạt độ nhạy cao, đáp ứng nhu cầu phân tích đơn vị kiểm nghiệm nước Đồng thời khảo sát mức độ tồn lưu dư lượng Ochratoxin A cà phê bột đề xuất giải pháp đảm bảo chất lượng cà phê bột địa bàn Buôn Ma Thuột với mong muốn góp phần với quan chức đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm cho người tiêu dùng nước Từ kết nghiên cứu lựa chọn điều kiện phân tích phù hợp để định lượng Ochratoxin A cà phê bột: Tối ưu hoá điều kiện MS/MS, tối ưu hoá điều kiện chạy sắc ký lỏng hiệu cao, khảo sát quy trình xử lý mẫu thẩm định phương pháp (Phương pháp có LOD=0,63 ng/ml, LOQ=2,11 ng/ml, hiệu suất thu hồi Ochratoxin A mẫu cà phê bột mức 2,5; 10 µg/kg thu nằm khoảng 70 đến 110%) Áp dụng vào phân tích mẫu thực tế, thực trạng nhiễm Ochratoxin A cịn hữu có cảnh báo khả nhiễm độc độc tính cao loại độc tố Kết phân tích cho thấy có mẫu nhiễm Ochratoxin A tổng số 55 mẫu (chiếm 16,36%) Các mẫu nhiễm Ochratoxin A nằm giới hạn cho phép Bộ Y tế iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG BIỂU viii DANH MỤC HÌNH ẢNH ix MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài nghiên cứu 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1 Tình hình sản xuất tiêu thụ cà phê 1.1.1 Tình hình sản xuất tiêu thụ cà phê địa bàn tỉnh Đăk Lăk 1.1.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ cà phê Việt Nam 1.1.3 Tình hình sản xuất tiêu thụ cà phê giới 1.2 Ochratoxins 1.2.1 Các loại độc tố Ochratoxins 1.2.2 Tính chất hố lý độc tố Ochratoxins 1.2.3 Sự tạo độc tố Ochratoxin A nấm mốc 1.2.4 Độc tính Ochratoxin A 1.3 Giới hạn tồn dư tối đa cho phép (MRL) 10 1.4 Các phương pháp phân tích 12 1.5 Lí thuyết phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ 14 1.5.1 Sắc ký lỏng hiệu cao 14 v 1.5.2 Thiết bị sắc ký lỏng hiệu cao 14 1.5.3 Sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC-MS) 15 1.6 Một số quy định Châu Âu phương pháp phân tích mẫu LC-MS/MS (theo định 2002/657/EC) 21 1.6.1 Quy định lựa chọn thông số thẩm định 21 1.6.2 Quy định hiệu suất thu hồi 21 1.6.3 Quy định tỉ lệ ion xác định so với ion định lượng 22 1.6.4 Quy định quy tắc điểm nhận danh 22 1.7 Mức độ nhiễm nấm mốc sinh độc tố độc tố Ochratoxin A cà phê Việt Nam 22 1.8 Tình hình nhiễm Ochratoxin A cà phê nông sản khác giới 23 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 25 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu 25 2.2 Nội dung nghiên cứu 25 2.3 Phương pháp nghiên cứu 25 2.3.1 Thiết bị dụng cụ hóa chất 25 2.3.2 Tối ưu thông số kĩ thuật điều kiện chạy máy khối phổ MS/MS 28 2.3.3 Thẩm định phương pháp phân tích 33 2.4 Đánh giá thực trạng nhiễm dư lượng Ochratoxin A cà phê bột địa bàn Thành phố Buôn Ma Thuột đề xuất giải pháp đảm bảo chất lượng 37 2.5 Phương pháp xử lý số liệu - Thống kê mô tả: 38 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Kết tối ưu hóa điều kiện chạy máy sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) 39 3.2 Tối ưu điều kiện MS 39 3.3 Tối ưu điều kiện chạy sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 40 3.3.1 Khảo sát thành phần pha động 40 3.3.2 Khảo sát tốc độ pha động 42 3.4 Chọn quy trình xử lý mẫu 43 vi 3.5 Chọn cột chiết pha rắn 46 3.6 Thẩm định phương pháp phân tích 48 3.6.1 Tính đặc hiệu/ chọn lọc 48 3.6.2 Khoảng tuyến tính đường chuẩn 51 3.6.3 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) 55 3.6.4 Độ xác (độ chụm độ đúng) 57 3.6.5 Giới hạn lặp lại (r), giới hạn tái lặp nội phịng thí nghiệm (R) 58 3.7 Kết khảo sát mức độ tồn lưu dư lượng Ochratoxin A cà phê bột đề xuất giải pháp đảm bảo chất lượng cà phê bột địa bàn Buôn Ma Thuột 59 3.7.1 Kết khảo sát mức độ tồn lưu dư lượng Ochratoxin A cà phê bột địa bàn Buôn Ma Thuột 59 3.7.2 Đề xuất giải pháp đảm bảo chất lượng cà phê 64 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 66 I Kết luận 66 II Kiến nghị 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 PHỤ LỤC 72 vii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Ký hiệu ACN Tiếng Anh Tiếng Việt Acetonenitril Acetonenitril Association of Official Analytical Chemists Hiệp hội nhà hóa phân tích thức CE Collision energy Năng lượng va chạm EC European Commission Ủy ban Châu Âu EI Electron Ionization Ion hóa dịng electron ESI Eelectrospray ionization Chế độ ion hóa phun điện tử EU European Union Châu Âu ICO International Coffee Organization Tổ chức cà phê giới FDA Food and Drug Administration Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao IARC International Agency for Research oncancer Tổ chức nghiên cứu ung thư quốc tế Identification point Điểm nhận dạng International Union of Pure and Applied Chemistry Liquid chromatography mass spectrometry Liên minh quốc tế hóa học ứng dụng LOD Limit of detection Giới hạn phát LOQ Limit of quantity Giới hạn định lượng MeOH Methanol metanol MS/MS Mass spectrometry Khối phổ MRL Maximum Residue Limit Giới hạn dư lượng tối đa OTA Ochratoxin A Ochratoxin A AOAC IP IUPAC LC-MS Sắc ký lỏng khối phổ Quy chuẩn Việt Nam QCVN RSD Relative standard deviation Độ lệch chuẩn tương đối SPE solid phase extraction Chiết pha rắn TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam viii DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Đặc tính lý hóa Ochratoxins Bảng 1.2 Mức dư lượng tối đa cho phép Ochratoxin A Việt Nam, theo QCVN 8-1:2011/BYT, Quy chuẩn kỹ thuật Quốc Gia giới hạn ô nhiễm độc tố vi nấm thực phẩm 11 Bảng 1.3 Lựa chọn thông số thẩm định 21 Bảng 1.4 Quy định Châu Âu hiệu suất thu hồi 21 Bảng 1.5 Qui định Châu Âu tỉ lệ ion xác định so với ion định lượng 22 Bảng 1.6 Qui định số điểm nhận danh kết hợp kỹ thuật phân tích 22 Bảng 1.7 Mức nhiễm ochratoxin A số đối tượng 24 Bảng 2.1 Bảng pha dung dịch chuẩn chạy máy 28 Bảng 2.2 Cơng thức tính tốn đặc trưng phân tích số liệu 38 Bảng 3.1 Kết khảo sát ion mẹ Ochratoxin A 39 Bảng 3.2 Các thông số tối ưu cho ESI-MS/MS 39 Bảng 3.3 Kết khảo sát dung môi pha động 41 Bảng 3.4 Kết khảo sát tốc độ pha động 43 Bảng 3.5 Kết khảo sát quy trình xử lý mẫu 44 Bảng 3.6 Kết trình chiết mẫu 47 Bảng 3.7 Bảng kết khảo sát ion mẹ ion Ochratoxin A 49 Bảng 3.8 Kết phân tích chất chuẩn, mẫu trắng mẫu trắng thêm chuẩn 49 Bảng 3.9 Sự phụ thuộc diện tích vào nồng độ 51 Bảng 3.10 Kết đường chuẩn 52 Bảng 3.11 Kết xác định LOD, LOQ OTA 56 Bảng 3.12 Kết xác định RSD, H OTA 57 Bảng 3.13 Qui định độ độ chụm phương pháp phân tích định lượng phụ thuộc nồng độ chất theo 2002/657/EC 58 Bảng 3.14 Kết đánh giá độ tái lặp Phịng thí nghiệm 59 Bảng 3.15 Kết phân tích mẫu thực tế 60 73 Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ tối ưu CE mảnh 358 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.469 135 RT 2.949 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start End 3.203 135 RT End Collision Energy Height 596 Area 100 Area Ionization Mode 2.389 2.415 2.442 17 1.02 2.629 2.706 2.764 22 99 6.04 2.764 2.948 3.149 146 1642 100 6.165 6.205 6.232 18 1.12 8.113 8.146 8.18 26 1.57 135 Collision Energy ESI Area % Fragmentor Voltage ESI Area % 7945 Collision Energy Height Ionization Mode 10 Ionization Mode ESI 74 Integration Peak List Peak Start RT End Height Area Area % 2.352 2.427 2.512 33 1.11 2.552 2.927 3.286 214 2946 100 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.555 Fragmentor Voltage Integration Peak List 135 RT 2.965 End 3.209 135 Collision Energy Height 208 Area 15 ESI Area % 2590 Collision Energy Ionization Mode 100 20 Ionization Mode ESI 75 Peak Start RT End Height 2.239 Start 2.429 RT 2.465 End Height 2.545 2.983 3.226 63 974 100 3.84 3.867 3.92 11 36 3.67 5.855 5.918 5.948 14 1.41 6.749 6.789 6.816 14 1.43 Peak Area Area % 50 5.14 Area % Area Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ tối ưu CE mảnh 239 Fragmentor Voltage Integration Peak List Star Peak t 2.88 Fragmentor Voltage 13 RT 3.13 End 3.462 13 Collision Energy Heigh t 6094 Area ES I Area % 71894 Collision Energy Ionization Mode 100 Ionization Mode ES I 76 Integration Peak List Star Peak t 2.85 RT 3.13 Fragmentor Voltage Integration Peak List Star Peak t 2.89 3.415 13 RT 3.15 Heigh t End 4048 Area Area % 47187 100 Collision Energy End 3.49 Heigh t 2038 Area Ionization Mode ES I Area % 24225 100 Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ chuẩn OTA 2,5ppb-1 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.913 Fragmentor Voltage 135 RT 3.130 End 3.476 135 Collision Energy Height 546 Area ESI Area % 6202 Collision Energy Ionization Mode 100 20 Ionization Mode ESI 77 Integration Peak List Peak Start RT 2.913 3.15 Fragmentor Voltage End 3.524 135 Height 381 Area Area % 4731 Collision Energy 100 10 Ionization Mode ESI Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ chuẩn OTA 2,5ppb-2 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.838 Fragmentor Voltage 135 RT 3.137 End 3.564 135 Collision Energy Height 590 Area ESI Area % 6555 Collision Energy Ionization Mode 100 20 Ionization Mode ESI 78 Integration Peak List Peak Start 2.885 Fragmentor Voltage RT 3.137 End 3.503 135 Height 360 Area Area % 4524 Collision Energy 100 10 Ionization Mode ESI 79 Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ mẫu trắng –1 Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ Mẫu trắng -2 80 Phụ lục Hình ảnh Sắc kí đồ Mẫu trắng thêm chuẩn 2,5ppb-1 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.75 RT 3.204 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.75 Fragmentor Voltage RT 3.204 135 Collision Energy End Height 3.537 337 Area Ionization Mode Area % 6361 100 135 Collision Energy 20 End 3.49 Height 245 Area % 135 Collision Energy Area 4350 ESI Ionization Mode ESI 100 10 Ionization Mode ESI 81 Phụ lục 10 Hình ảnh Sắc kí đồ Mẫu trắng thêm chuẩn 2.5ppb-4 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.722 135 RT 3.225 Fragmentor Voltage Integration Peak List Peak Start 2.736 Fragmentor Voltage End 3.476 135 RT 3.225 End 3.537 135 Collision Energy Height 402 Area Area 4902 Collision Energy Ionization Mode ESI Area % 7211 Collision Energy Height 277 100 20 Ionization Mode ESI Area % 100 10 Ionization Mode ESI 82 Phụ lục 11 Bảng kết đường chuẩn Các dd Nồng độ, ppb Diện tích Peak std1 std1 std1 std2 std2 std2 std3 std3 std3 Std Std Std Std Std Std Std Std Std 1 2.5 2.5 2.5 5 10 10 10 20 20 20 50 50 50 1817 1836 1869 5033 5064 5135 9323 9244 9315 20666 20461 20051 36183 36280 36026 91722 93841 96324 Diện tích Peak, 239 1652 1669 1699 4575 4604 4668 8475 8404 8468 18787 18601 18228 32894 32982 32751 83384 85310 87567 Nồng độ thực tế Độ chệch Kết luận 0.852183031 0.862189883 0.879849034 2.572772943 2.589843455 2.62751631 4.868462528 4.826669205 4.86434206 10.93850125 10.82901451 10.60945241 19.24242252 19.2942227 19.15824724 48.96277307 50.09649055 51.42504731 15% 14% 12% 3% 4% 5% 3% 3% 3% 9% 8% 6% 4% 4% 4% 2% 0% 3% Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đường chuẩn OTA 100000 90000 80000 70000 y = 1698;8x + 204;28 R² = 0;9987 60000 50000 40000 30000 Series1 Linear (Series1) 20000 10000 0 20 40 60 83 Phụ lục 12 Bảng kết LOD, LOQ Lần phân tích m(g) 10 12.5022 12.5271 12.5047 12.5036 12.5229 12.5050 12.5065 12.5150 12.5009 12.5075 Trung bình (Xtb) Độ lệch chuẩn (SD) LOD (ng/ml) LOD (ng/ml) F Kết luận Nồng độ Diện tích chuẩn thêm Peak (ng/ml) 5 5 5 5 5 7313 7492 7581 7092 8060 7607 7313 7492 7581 7092 Hàm lượng theo đường Hàm lượng chuẩn mẫu (ng/ml) (ng/ml) 4,17 4,17 4,30 4,29 4,37 4,37 4,00 4,00 4,73 4,72 4,39 4,39 4,17 4,17 4,30 4,30 4,37 4,37 4,00 4,00 4,28 0,21 0,63 2,11 6,75 Phù hợp 84 Phụ lục 13 Bảng Kết xác định RSD, H OTA Nồng độ thêm chuẩn, ng/ml Lần phân tích Khối lượng cân (g) Diện tích Peak C ng/ml C mẫu ng/ml 12.5922 4731 2,23473 2,22 12.5071 5064 2,48433 2,48 12.5047 4998 2,43486 2,43 12.5036 4828 2,30744 2,31 12.5229 4731 2,23473 2,23 12.5050 5064 2,48433 2,48 12.5260 7313 4,17007 4,16 12.5530 7492 4,30424 4,29 12.5609 7581 4,37095 4,35 12.5145 7092 4,00442 4,00 12.5023 8060 4,72999 4,73 12.5171 7607 4,39044 4,38 12.5137 12896 8,35482 8,35 12.5045 13406 8,73709 8,73 12.5238 12859 8,32709 8,31 12.5250 13742 8,96053 8,96 12.5260 12975 8,3846 8,38 12.5980 12580 8,05184 8,05 2,36 2,5 10 Xtb ng/ml SD RSD (%) H (%) 0,118826738 5,027782804 94,5361 4,32835 0,243945016 5,635977718 86,5671 8,48574 0,313920301 3,699384712 84,8574 85 Phụ lục 14 Bảng kết đánh giá độ tái lặp phịng thí nghiệm mức 2,5 ng/ml Mức nồng Người/ Khối Diện độ ngày thực lượng tích thực hiện cân (g) Peak Kết 12,3113 4731 (ng/ml) 2,27 12,6071 5064 2,46 Thu 12,7047 4998 Ngày 21/2/2019 12,5436 4828 12,2329 4731 2,40 12,5050 5004 2,44 12,9922 4848 2,23 12,8989 4878 Ngân 12,9994 4805 Ngày 2,5 (ng/ml) 21/2/2019 12,8926 4759 12,9998 4834 2,27 12,9892 5025 2,36 12,1920 4988 2,49 12,1235 4878 Hùng 12,1347 4951 Ngày 21/2/2019 12,1233 4764 12,1236 4968 2,42 12,0005 4806 2,39 2,30 x trung SDr RSDr SD R RSD R Sr bình 2,36 0,08 3,59 0,24 SR H% 94,33 2,28 2,20 2,19 2,25 0,06 2,84 0,09 3,94 0,18 0,26 89,88 2,22 2,47 2,33 2,49 2,43 0,06 2,64 0,18 97,21 86 Phụ lục 15 Bảng kết đánh giá độ tái lặp phịng thí nghiệm mức ng/ml Mức Kết Người/ Khối Diện x nồng độ RSDr RSD R ngày lượng tích trung SDr SD R Sr SR thực % % thực cân (g) Peak bình (ng/ml) 12,3222 7313 4,23 12,5071 7492 Thu 12,5047 7581 Ngày 22/2/2019 12,2036 7092 12,9229 8060 4,30 12,5050 7607 4,39 12,0022 7313 4,34 12,0107 7492 Ngân 12,1945 7581 (ng/ml) Ngày 22/2/2019 12,0032 7092 12,5220 8060 4,48 12,5055 7607 4,39 12,8592 7313 4,05 12,9235 7492 Hùng 12,8347 7581 Ngày 22/2/2019 12,7233 7092 13,2236 8060 4,16 12,9005 7607 4,25 4,37 4,10 4,33 0,16 3,70 0,45 HSTH (%) 86,56 4,58 4,48 4,17 4,43 0,18 4,12 0,12 2,81 0,51 0,34 88,61 4,72 4,26 3,93 4,47 4,19 0,19 4,43 0,52 83,78 87 Phụ lục 16 Bảng kết đánh giá độ tái lặp phịng thí nghiệm mức 10 ng/ml Mức nồng Người/ Khối Diện độ ngày thực lượng tích thực hiện cân (g) Peak Kết (ng/ml) 12,9922 12896 8,04 10 (ng/ml) 12,9071 13406 8,46 Thu 12,8047 12859 Ngày 26/2/2019 12,9036 13728 12,9229 12959 8,13 12,9951 12576 7,81 12,5022 12896 8,35 12,507 13406 8,73 Ngân 12,5345 12859 Ngày 26/2/2019 12,5132 13728 12,5220 12959 8,30 12,5055 12576 8,11 12,2392 12896 8,53 12,1735 13406 Hùng 12,2147 12859 Ngày 26/2/2019 12,1833 13728 12,0936 12959 8,97 12,0105 12576 8,45 8,70 x trung SDr RSDr SD R RSD R Sr bình 8,21 0,32 3,88 0,89 SR H % 82,10 8,13 8,97 8,48 0,31 3,71 0,26 3,06 0,88 0,73 84,76 8,39 8,52 9,21 8,68 8,73 0,30 3,46 0,85 87,28 ... THỊ PHƯƠNG THU XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG OCHRATOXIN A TRONG CÀ PHÊ BỘT BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) VÀ ĐỀ XUẤT GIẢI PHÁP NHẰM ĐẢM BẢO CHẤT LƯỢNG AN TỒN THỰC PHẨM TẠI Đ? ?A BÀN BN MA THUỘT... (LC-MS/MS) đề xuất giải pháp nhằm đảm bảo chất lượng an toàn thực phẩm đ? ?a bàn Buôn Ma Thuột? ?? Nhằm xây dựng phương pháp phân tích dư lượng Ochratoxin A cà phê bột kỹ thuật sắc ký lỏng ghép khối phổ đạt... Ochratoxin A cà phê bột đề xuất giải pháp đảm bảo chất lượng cà phê bột đ? ?a bàn Buôn Ma Thuột 59 3.7.1 Kết khảo sát mức độ tồn lưu dư lượng Ochratoxin A cà phê bột đ? ?a bàn Buôn Ma Thuột