Nghiên cứu tác dụng bảo vệ và hiệu quả phục hồi suy giảm chức năng buồng trứng của bài thuốc HV trên mô hình thực nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM LỮ ĐOÀN HOẠT MƢỜI NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG BẢO VỆ VÀ HIỆU QUẢ PHỤC HỒI SUY GIẢM CHỨC NĂNG BUỒNG TRỨNG CỦA BÀI THUỐC HV TRÊN MƠ HÌNH THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SỸ Y KHOA HÀ NỘI – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM LỮ ĐOÀN HOẠT MƢỜI NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG BẢO VỆ VÀ HIỆU QUẢ PHỤC HỒI SUY GIẢM CHỨC NĂNG BUỒNG TRỨNG CỦA BÀI THUỐC HV TRÊN MƠ HÌNH THỰC NGHIỆM Chun ngành: Y học cổ truyền Mã số: 8720115 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y KHOA Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Hoàng Ngân PGS TS Đoàn Minh Thụy HÀ NỘI - 2020 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, tơi xin trân trọng bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới: Đảng ủy, Ban Giám đốc, Phòng đào tạo Sau Đại học, Bộ mơn Ngoại, Khoa phịng Học viện Y dược học cổ truyền Việt Nam, Bộ môn Dược lý – Học viện Quân Y, Khoa giải phẫu bệnh – Bệnh viện 103 tạo điều kiện vật chất lẫn tinh thần cho tơi hồn thành khóa học Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Nguyễn Hoàng Ngân, PGS TS Đoàn Minh Thụy hai người Thầy trực tiếp hướng dẫn vơ tận tình, trang bị cho tơi kiến thức chun ngành, giúp đỡ tơi sửa chữa thiếu sót luận văn, động viên tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn thầy cô Hội đồng thông qua đề cương luận văn cho tơi ý kiến đóng góp q báu q trình hồn thiện luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới bố mẹ, gia đình người thân, bạn bè đồng nghiệp ln động viên, khích lệ tơi để vượt qua khó khăn q trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Xin trân trọng cảm ơn ! Học viên Lữ Đoàn Hoạt Mƣời ỜI C M ĐO N Tơi Lữ Đồn Hoạt Mười, học viên cao học khóa 11 Học viện Y Dược học Cổ truyền Việt Nam, chuyên ngành Y học cổ truyền, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn Thầy PGS.TS Nguyễn Hoàng Ngân PGS.TS Đoàn Minh Thụy Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 30 tháng 10 năm 2020 Học viên Lữ Đoàn Hoạt Mƣời DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AFC : Antral Follicle Count BMI : Body Mass Index E2 : Estradiol FSH : Follicle stimulating Hormone GALT : Galactose-1-phosphate uridine transferase GnRH : Gonadotropin Releasing Hormone hCG : Human Chorionic Gonadotropin hMG : Human Menopausal Gonadotropin KO : Mơ hình loại trực tiếp LH : Luteinizing Hormone POI : Premature ovarian insufficience SGCNBT : Suy giảm chức buồng trứng TG : Tripterygiumglycoside YHCT : Y học cổ truyền YHHĐ : Y học đại ZP : Zona pellucida MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 Suy giảm chức buồng trứng theo YHHĐ 1.1.1 Vai trò trục đồi - tuyến yên - buồng trứng chức sinh sản 1.1.2 Hội chứng SGCNBT 1.2 Tổng quan suy buồng trứng sớm theo YHCT 1.2.1 Bệnh danh suy buồng trứng sớm theo YHCT 1.2.2 Bệnh nguyên bệnh suy buồng trứng sớm theo YHCT 10 1.2.3 Phương pháp điều trị suy buồng trứng sớm theo YHCT 13 1.2.4 Tổng quan vị thuốc thuốc HV 14 1.2.5 Tổng quan nghiên cứu thực thuốc HV 17 1.3 Tổng quan số mơ hình gây SGCNBT .18 1.3.1 Mơ hình gây SGCNBT tự miễn dịch 18 1.3.2 Mơ hình gây SGCNBT biến đổi gen 19 1.3.3 Mơ hình gây SGCNBT hoá chất 20 1.4 Một số nghiên cứu tác dụng thuốc có nguồn gốc thảo dược mơ hình SGCNBT động vật thực nghiệm 21 Chƣơng 2: CHẤT LIỆU, ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU23 2.1 Chất liệu nghiên cứu .23 2.2 Động vật nghiên cứu .24 2.3 Thời gian địa điểm nghiêm cứu 24 2.4 Các trang thiết bị phục vụ cho nghiên cứu 24 2.5 Các hóa chất phục vụ cho nghiên cứu .25 2.6 Phương pháp nghiên cứu 25 2.6.1 Chỉ số nghiên cứu 25 2.6.2 Phương pháp tiến hành 25 2.7 Xử lý số liệu 31 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 33 3.1 Kết gây mơ hình suy buồng trứng TG chuột nhắt trắng .33 3.1.1 Kết đánh giá trọng lượng thể chuột nghiên cứu gây mơ hình 33 3.1.2 Kết đánh giá chu kỳ động dục chuột nghiên cứu gây mơ hình 34 3.1.3 Kết đánh giá nồng độ FSH, E2 huyết chuột nghiên cứu gây mơ hình 34 3.1.4 Kết qủa đánh giá số buồng trứng tử cung nghiên cứu gây mơ hình 35 3.1.5 Kết đánh giá mô bệnh học nhuộm HE buồng trứng tử cung chuột nghiên cứu gây mơ hình 35 3.1.6 Kết đánh giá mơ bệnh học nhuộm hóa mơ miễn dịch buồng trứng chuột nghiên cứu gây mơ hình 36 3.2 Đánh giá tác dụng bảo vệ thuốc HV mơ hình chuột gây suy buồng trứng 37 3.2.1 Kết đánh giá trọng lượng thể chuột 37 3.2.2 Kết đánh giá chu kỳ động dục chuột 37 3.2.3 Kết đánh giá nồng độ FSH, Estrogen huyết chuột 39 3.2.4 Kết qủa đánh giá số buồng trứng tử cung nghiên cứu đánh giá tác dụng bảo vệ cao lỏng HV 40 3.2.5 Kết đánh giá mô bệnh học buồng trứng tử cung nhuộm HE nghiên cứu tác dụng cao lỏng HV 40 3.2.6 Kết đánh giá mơ bệnh học nhuộm hóa mơ miễn dịch buồng trứng chuột nghiên cứu tác dụng bảo vệ cao lỏng HV 42 3.3 Đánh giá hiệu phục hồi chức buồng trứng thuốc HV mơ hình chuột gây suy buồng trứng TG dạng tiêm 43 3.3.1 Kết đánh giá trọng lượng thể chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 43 3.3.2 Kết đánh giá chu kỳ động dục chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 44 3.3.3 Kết đánh giá nồng độ FSH, E2 huyết chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 45 3.3.4 Kết qủa đánh giá số buồng trứng tử cung nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 46 3.3.5 Kết đánh giá mô bệnh học buồng trứng tử cung nhuộm HE nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 47 3.3.6 Kết đánh giá mơ bệnh học nhuộm hóa mơ miễn dịch buồng trứng 48 Chƣơng 4: BÀN LUẬN 50 4.1 Bàn luận luận mô hình gây SGCNBT .50 4.1.1 Bàn luận mơ hình gây suy giảm chức buồng trứng phương pháp tiêm TG da 50 4.1.2 Đánh giá chu kỳ động dục chuột phương pháp quan sát trực quan phiến đồ âm đạo 52 4.2 Bàn luận hiệu thuốc HV tử cung, buồng trứng chuột bị gây suy giảm chức buồng trứng TG tiêm da 54 4.3 Bàn luận tác dụng bảo vệ thuốc HV mơ hình chuột gây suy buồng trứng TG tiêm da 60 KẾT LUẬN 63 KHUYẾN NGHỊ 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Nguyên nhân SGCNBT Bảng 3.1 Trọng lượng thể chuột nghiên cứu gây mơ hình 33 Bảng 3.2 Kết đánh giá chu kỳ động dục chuột 21 ngày cuối tiêm TG nghiên cứu gây mơ hình 34 Bảng 3.3 Kết đánh giá nồng độ FSH, E2 huyết chuột nghiên cứu gây mơ hình 34 Bảng 3.4 Kết đánh giá số buồng trứng, tử cung chuột nghiên cứu gây mơ hình 35 Bảng 3.5 Trọng lượng thể chuột lô chuột nghiên cứu đánh giá tác dụng bảo vệ thuốc HV mơ hình chuột gây suy buồng trứng 37 Bảng 3.6 Kết đánh giá chu kỳ động dục chuột 21 ngày cuối tiêm TG uống thuốc HV 38 Bảng 3.7 Đánh giá nồng độ FSH, E2 huyết chuột 39 Bảng 3.8 Đánh giá số buồng trứng chuột sau 35 ngày 40 Bảng 3.9 Trọng lượng thể chuột lô nghiên cứu 43 Bảng 3.10 Kết đánh giá chu kỳ động dục chuột 20 ngày uống HV nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 44 Bảng 3.11 Nồng độ FSH, E2 huyết chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 45 Bảng 3.12 Chỉ số buồng trứng, tử cung chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 46 DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Máy xét nghiệm ELISA 24 Hình 2.2 Cân Điện tử 24 Hình 2.3 Các giai đoạn chu kỳ động dục 30 Hình 2.4 Các giai đoạn động dục chuột xác định bằng phiến đồ âm đạo 31 Hình 3.1 Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nghiên cứu gây mơ hình 35 Hình 3.2 Hình ảnh vi thể tử cung chuột nghiên cứu gây mơ hình 36 Hình 3.3 Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nhuộm hóa mơ miễn dịch AntiNOTCH-1 dương tính mạnh 36 Hình 3.4 Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nghiên cứu tác dụng bảo vệ cao lỏng HV 41 Hình 3.5 Hình ảnh vi thể tử cung chuột nghiên cứu tác dụng bảo vệ cao lỏng HV 41 Hình Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nghiên cứu tác dụng bảo vệ cao lỏng HV, nhuộm hóa mơ miễn dịch Anti-NOTCH-1 dương tính mạnh 42 Hình 3.7 Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 47 Hình 3.8 Hình ảnh vi thể tử cung chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 48 Hình 3.9 Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV, nhuộm hóa mơ miễn dịch AntiNOTCH-1 dương tính mạnh 48 65 KHUYẾN NGHỊ Kết nghiên cứu cho thấy cao lỏng thuốc HV thể rõ tác dụng bảo vệ điều trị suy buồng trứng mơ hình thực nghiệm Nghiên cứu trước cho thấy cao lỏng thuốc HV an toàn đánh giá độc tính cấp bán trường diễn Từ kết có được, chúng tơi xin kiến nghị: - Đánh giá sâu thêm tính an tồn sinh sản nhiễm sắc thể thuốc - Đánh giá tính an tồn hiệu thuốc lâm sàng TÀI LIỆU THAM KHẢO L Webber et al., “ESHRE Guideline: Management of women with premature ovarian insufficiency,” Hum Reprod., vol 31, no 5, pp 926–937, 2016 doi: 10.1093/humrep/dew027 Z Li-, “Effects of „ Bushen Huoxue Prescription ‟ on hormone levels and granulosa cells apoptosis regulated in premature ovarian Failure rat models na ZHENG Jin LIU Te ZHAO Wei Longhua Hospital Affiliated to Shanghai University of Traditional Chinese Medicine S p,” pp 2–6, 2015 D Y Guo et al., “Experimental study on protective effect and mechanism of Shengdihuang Decoction on ovary of rats with premature ovarian failure,” China J Chinese Mater Medica, vol 44, no 21, pp 4698–4703, 2019 doi: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20190827.403 L U Yan and J Han, “Clinical research of bushen tiaojing cream formula in the treatment of premature o-,” vol 14, no 3, pp 1–5, 2019 Biện chứng kỳ văn (1858), Nhà xuất Đồng Nai, tr.577-579 V T Tuyen, D M Thuy, N H Ngan, T T Son, and D X Canh, “The Effectiveness of Hoi kinh HV on Mice Induced Premature Ovarian Insufficience,” Res Gate, no November, 2019 Vũ Thanh Tuyền (2019) Đánh giá tác dụng thuốc HV chức sinh sản chuột nhắt cái, Luận văn thạc sỹ Y học, Học viện Y- Dược học cổ truyền Việt Nam Đại học Y Hà Nội (2013) Bài Giảng Sản Phụ Khoa tập Nhà xuất y học, tr.118-225 R Islam and R Cartwright, “The impact of premature ovarian failure on quality of life: Results from the UK 1958 Birth Cohort,” Hum Reprod., 2011 10 K Maclaran and N Panay, “Current concepts in premature ovarian insufficiency,” Women’s Health pp 54–65, 2015 doi: 10.2217/whe.14.82 11 J L Luborsky, P Meyer, M F Sowers, E B Gold, and N Santoro, “Premature menopause in a multi-ethnic population study of the menopause transition,” Hum Reprod., 2003 doi: 10.1093/humrep/deg005 12 L Cox and J H Liu, “Primary ovarian insufficiency: An update,” International Journal of Women’s Health 2014 doi: 10.2147/IJWH.S37636 13 N T N Trang, “Điều trị suy sớm buồng trứng: mối nguy hại không điều trị đủ,” Bệnh viện Từ Dũ Hosrem.org.vn, 2016 14 N Lawrence, “Clinial manifestations and evaluation of spontaneous primary ovarion insuffcieny Ipremature ovarian failure,” up to Date online, 2014 15 R C, D S, and S S, “Hormone replacement therapy and the risk of venous thromboembolism: a population-based study,” J Thromb Haemost, vol 8, no 5, pp 979–986, 2010 doi: 10.1111/j.1538-7836.2010.03839.x 16 M Canonico et al., “Hormone therapy and venous thromboembolism among postmenopausal women: Impact of the route of estrogen administration and progestogens: The ESTHER study,” Circulation, vol 115, no 7, pp 840–845, 2007 doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.106.642280 17 M Mittal et al., “A randomised controlled trial comparing the effects of micronized progesterone to medroxyprogesterone acetate on cardiovascular health, lipid metabolism and the coagulation cascade in women with premature ovarian insufficiency: Study protocol and review o,” Menopause Int, vol 19, no 3, pp 127–132, 2013 doi: 10.1177/1754045313503635 18 P M Crofton et al., “Physiological versus standard sex steroid replacement in young women with premature ovarian failure: Effects on bone mass acquisition and turnover,” Clin Endocrinol (Oxf)., vol Oxf, no 73, pp 707– 714, 2010 doi: 10.1111/j.1365-2265.2010.03868.x 19 L M Nelson, “Clinical practice Primary ovarian insufficiency.,” The New England journal of medicine pp 606–614, 2009 doi: 10.1056/NEJMcp0808697 20 M Bidet, A Bachelot, and P Touraine, “Premature ovarian failure: Predictability of intermittent ovarian function and response to ovulation induction agents,” Current Opinion in Obstetrics and Gynecology pp 416– 420., 2008 doi: 10.1097/GCO.0b013e328306a06b 21 K Kawamura, “Infertility Treatment in Primary Ovarian Insufficiency: Fertility Preservation and In Vitro Activation,” J Gynecol Womens Heal., vol 7, no 1, 2017 doi: 10.19080/jgwh.2017.07.555704 22 A Hershlag and M W Schuster, “Return of fertility after autologous stem cell transplantation,” Fertil Steril., vol 77, pp 419–421, 2002, doi: 10.1016/S0015-0282(01)02987-9 23 A Bukovsky, “Can ovarian infertility be treated with bone marrow- or ovaryderived germ cells?,” Reprod Biol Endocrinol., no 3, p 36, 2005 doi: 10.1186/1477-7827-3-36 24 陈素庵, 陈素庵妇科补解 山西科学技术出版社, 2013 Chen Su An (2013) Chen Su An bổ giải Phụ khoa, Nhà xuất Khoa học Công nghệ Sơn Tây 25 佚名, 傅青主女科 1978 Khuyết Danh (1978) Phó Thanh chủ phụ khoa 26 佚名, 黄帝内经素问 2010 Khuyết Danh (2010) Hoàng đế nội kinh tố vấn 27 佚名, 景岳全书集要 2007 Khuyết Danh (2007) Cảnh Nhạc toàn thư tập yếu 28 露红, “辨治闭经规律探析,” in 万氏女科, 新中医, pp 263–265 Lu Hồng Quy luật biện trị bế kinh Vạn thị phụ khoa, tân trung y, pp 263– 265 29 佚名, 新编中医妇科学 2001 Khuyết Danh (2001) Tân biên trung y phụ khoa học 30 佚名, 实用中医妇科学 1985 Khuyết Danh (1985) Thực dụng trung y phụ khoa học 31 张岩, 谈勇, and 夏桂成, “夏桂成调心补肾治疗卵巢早衰经验,” 广州中医药 大学学报, no 5, pp 934–936, 2015 Zhang Yan, Tan Yong Xia Guicheng (2015) Kinh nghiệm Hạ Quế Thành điều tâm bổ thận điều trị suy buồng trứng sớm Tạp chí đại học trung y dược Quảng Châu, no 5, pp 934–936, 2015 32 佚名, 妇人大全良方 1985 Khuyết Danh (1985) Phu nhân đại toàn lương phương 33 佚名, 灵枢经校释 1982 Khuyết Danh (1982) Linh khu kinh hiệu đính 34 温景荣 and 马晓辉, “对„任主胞胎‟理论的思考,” 天津中医药大学学报, vol 33, no 1, pp 9–10, 2014 Wen Jingrong Ma Xiaohui (2014) Suy luận với lý luận Nhân chủ bào thai Tạp chí đại học trung y dược Thiên Tân, vol 33, no 1, pp 9–10, 2014 35 柴嵩岩, 滕秀香，, 姚海洋，, and 刘丹，, “柴嵩岩辨证治疗早发性卵巢功 能不全经验,” Beijing J Tradit Chinese Med., vol 37, no 04, pp 292–294, 2018 Chai Songyan, Teng Xiuxiang, Yao Haiyang Liu Dan (2018) Chai Songyan biện chứng trị liệu theo kinh nghiệm với bệnh suy giảm chức buồng trứng sớm Beijing J Tradit Chinese Med., vol 37, no 04, pp 292– 294 36 J Oliver, 李丽芸, and 胡向丹． “李丽芸教授治疗卵巢早衰的经验擷要,” J Chem Inf Model., vol 53, no 9, pp 1689–1699, 2013 doi: 10.1017/CBO9781107415324.004 37 汪玉珍, “导师王翠霞教授治疗卵巢早衰经验总结,” 辽宁中医药大学, 2012 Wang Yuzhen (2012) Tổng kết kinh nghiệm điều trị suy giảm chức buồng trứng sớm giáo sư Wang Cuixia Đại học trung y dược Liễu Ninh 38 Hội dược điển việt Nam, Dược điển Việt Nam Nhà xuất y học, 2018 39 夏庆华 and 路千里, “熟地黄药理研宄进展,” 江西中医药大学学报, vol 20, no 6, pp 96–97, 2008 Xia Qinghua Lu Qianli (2008) Nghiên cứu phát triển dược lý thục địa hồng Tạp chí đại học trung y dược Giang Tây, vol 20, no 6, pp 96–97 40 H J Yuan et al., “Research Progress on Chemical Constituents ， Pharmacological Activity and Clinical Application ofChinese yam,” Res Cent ofNatural Drug，Jilin Univ 130021，China, vol 04, no 19, pp 98– 103, 2018 doi: 10.16720/j.cnki.tcyj.2018.04.019 41 Z Y., L J.-J., J B.-X., and X X.-Y., “Advances in research on chemical constituents, pharmacological actions and processing of atractylodes macrocephala,” Chinese Arch Tradit Chinese Med., vol 31, no 10, p 1012, 2019, [Online] Available: http://www.embase.com/search/results?subaction=viewrecord&from=export& id=L620923839 42 李岩, “白芍及其化学成分的药理研究进展,” Occup Heal., vol 31, no 15, pp 2153–2155, 2015 Li Yan (2015) Nghiên cứu phát triển thành phần hóa học, dược lý Bạch thược Occup Heal., vol 31, no 15, pp 2153–2155 43 杨小龙，, 珂，张, 许俊锋, and 王志超, “Research on Pharmacological Activities of Cortex Moutan,” 河南科技大学学报( 医学版), vol 30, no 2, pp 157–158, 2012 doi: 10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2012.02.041 Yang Xiaolong, Ke, Zhang, Xu Junfeng Wang Zhichao (2012) “Research on Pharmacological Activities of Cortex Moutan,” Tạp chí đại học khoa kĩ Hồ Nam vol 30, no 2, pp 157–158 doi: 10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2012.02.041 44 李倩, 陈云志, 柴艺汇, 张孟之, 洁高, and 文李, “人参现代药理作用研究进 展,” J Guiyang Univ Chinese Med., vol 41, no 5, pp 89–92, 2019 doi: 10 16588 / j cnki issn1002－1108 2019 05 022 Li Qian, Chen Yunzhi, Chai Yihui, Zhang Mengzhi, Jie Gao Wen Li (2019) Phát triển nghiên cứu tác dụng dược lý Nhân sâm J Guiyang Univ Chinese Med., vol 41, no 5, pp 89–92 doi: 10 16588 / j cnki issn1002－1108 2019 05 022 45 国辛, 赵昕彤, and 黄晓巍, “柴胡化学成分及药理作用研究进展,” Jilin J Chinese Med Oct., vol 38, no 10, pp 1196–1197, 2018, doi: 10.13463/j.cnki.jlzyy.2018.10.024 Guo Xin, Zhao Xintong, Huang Xiaowei (2018) Phát triển nghiên cứu tác dụng dược lý thành phần hóa học Sài Hồ Jilin J Chinese Med Oct., vol 38, no 10, pp 1196–1197, 2018 doi: 10.13463/j.cnki.jlzyy.2018.10.024 46 王玉, 杨雪, 夏鹏飞, 马肖, 杨蕊菁, and 王玉霞, “酸枣仁汤化学成分 、 药 理作用 、 临床应用的研究进展及质 量标志物的预测分析,” China J Chinese Mater Medica, pp 1–10, 2019, doi: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20190812.201 Wang Yu, Yang Xue, Xia Pengfei, Ma Xiao, Yang Ruijing Wang Yuxia (2019) Phát triển nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng dược lý, ứng dụng lâm sàng phân tích tiêu chuẩn thành phần toan táo nhân thang China J Chinese Mater Medica, pp 1–10 doi: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20190812.201 47 华王 and 娜孙, “当归的有效化学成分及药理作用研究进展分析,” 山 东 化 工 SHANDONG Chem INDUSTＲY, vol 46, pp 59–60, 2017, doi: 10.19319/j.cnki.issn.1008-021x.2017.18.021 Hua Wang Na Sun Phân tích nghiên cứu tác dụng dược lý, thành phần hóa học Đương Quy SHANDONG Chem INDUSTＲY, vol 46, pp 59–60, 2017 doi: 10.19319/j.cnki.issn.1008-021x.2017.18.021 48 涛张, 马艳杰, and 王晓琴, “沙参属植物化学成分与药理作用研究进展,” 北 方药学 2013, vol 10, no 6, pp 74–75, 2013 Tao Zhang, Ma Yanjie Wang Xiaoqin Nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng dược lý Sa Sâm Dược học Phương bắc 2013, vol 10, no 6, pp 74–75 49 Z Shuainan and L Xuzhao, “The Research Review of the Components and Pharmacological Action of the Bark of Eucommia ulmoides Oliv” Chinese J Ethnomedicine Ethnopharmacy, vol 26, no 10, pp 56–60, 2017 50 沈学英 and 蒋亚生, “枸杞子药理研宄进展,” 时珍国医国药, vol 10, no 10, pp 798–799, 1999 Shen Xueying Jiang Yasheng Nghiên cứu phát triển dược lý Cẩu kỳ tử Quốc dược quốc y Thời Chân vol 10, no 10, pp 798–799, 1999 51 林玉榕 and 郑丽燕, “中药冤丝子药理研究,” 生物技术世界, vol 4, p 84, 2014 Lin Yurong Zheng Liyan Nghiên cứu dược lý thỏ ty tử Thế giới khoa kỹ sinh vật vol 4, p 84, 2014 52 Đỗ Tất Lợi, “Những Cây thuốc vị thuốc Việt Nam.” Nhà xuất y học, 2004 53 R Meng-yun, “Research advances in medicinal plants of Cynomorium songaricum,” J Biol., vol 35, no 5, pp 95–98, 2018 doi: 10． 3969 / j issn 2095 － 1736． 2018 05 095 54 Bộ Y Tế, “„Hướng dẫn thử nghiệm lâm sàng thuốc đông y‟,” Quyết định số 4313/QĐ-BYT ngày 19/10/2015, pp 13–21, 2015 55 L Ar, M MM, and O C et al “Autoimmune etiology in premature ovarian failure ［J］ Am J Reprod Immunol Microbiol,1988，16( 3) : 115 - 122． 56 J Horejsi, D Novakova, and J Martinek, “Circulating ovarian autoantibodies and FSH and LH levels in adolescent girls with primary menstrual cycle disorders,” J Pediatr Adolesc Gynecol., vol 9, no 2, pp 74–78, 1996 doi: 10.1016/s1083-3188(96)70014-1 57 V K Tuohy and C Z Altuntas, “Autoimmunity and premature ovarian failure,” Current Opinion in Obstetrics and Gynecology pp 366–369, 2007, doi: 10.1097/GCO.0b013e328220e90c 58 O Taguchi, Y Nishizuka, T Sakakura, and A Kojima, “Autoimmune oophoritis in thymectomized mice: Detection of circulating antibodies against oocytes,” Clin Exp Immunol., vol 40, no 3, pp 540–553, 1980 59 Z Bin Tong and L M Nelson, “A mouse gene encoding an oocyte antigen associated with autoimmune premature ovarian failure,” Endocrinology, vol 140, no 8, pp 3720–3726, 1999 doi: 10.1210/endo.140.8.6911 60 S Smith and S Hosid, “Premature ovarian failure associated with autoantibodies to the zona pellucida,” Int J Fertil Menopausal Stud., vol 39, no 6, pp 316–319, 1994 61 S H Rhim et al., “Autoimmune disease of the ovary induced by a ZP3 peptide from the mouse zona pellucida,” J Clin Invest., vol 89, no 1, pp 28– 35, 1992 doi: 10.1172/JCI115572 62 付莉，赵怡璇，李守柔, “卵巢早衰实验动物模型的建立,” 生殖医学杂志, vol 15, no 3, pp 179–183, 2006 Fu Li, Zhao Yixuan, Li Shourou Thành lập mơ hình thực nghiệm suy buồng trứng sớm động vật Tạp chí y học sinh sản vol 15, no 3, pp 179–183, 2006 63 K Jagarlamudi, P Reddy, D Adhikari, and K Liu, “Genetically modified mouse models for premature ovarian failure (POF),” Mol Cell Endocrinol., vol 315, no 1–2, pp 1–10, 2010 doi: 10.1016/j.mce.2009.07.016 64 D Schmidt et al., “The murine winged-helix transcription factor Foxl2 is required for granulosa cell differentiation and ovary maintenance,” Development, vol 131, no 4, pp 933–942, 2004 doi: 10.1242/dev.00969 65 F Gücer et al., “Effect of paclitaxel on primordial follicular reserve in mice,” Fertil Steril., vol 76, no 3, pp 628–629, 2001 doi: 10.1016/S0015-0282(01)01959-8 66 M S Yucebilgin et al., “Effect of chemotherapy on primordial follicular reserve of rat: An animal model of premature ovarian failure and infertility,” Aust New Zeal J Obstet Gynaecol., vol 44, no 1, pp 6–9, 2004, doi: 10.1111/j.1479-828X.2004.00143.x 67 P A Phillips et al., “Triptolide induces pancreatic cancer cell death via inhibition of heat shock protein 70,” Cancer Res., vol 67, no 19, pp 9407– 9416, 2007 doi: 10.1158/0008-5472.CAN-07-1077 68 R Chugh et al., “A preclinical evaluation of minnelide as a therapeutic agent against pancreatic cancer,” Sci Transl Med., vol 4, no 156, pp 156–159, 2012 doi: 10.1126/scitranslmed.3004334 69 秦万章, “雷公藤治疗红斑性狼疮等结缔组织病的研究体会,” 江苏医药, vol 13, no 12, p 655, 1987 Qin Wanzhang Nghiên cứu Lôi công đằng điều trị bệnh luput ban đỏ bệnh lý hệ thống Giang Tô y dược, vol 13, no 12, p 655, 1987 70 Y Fu et al., “Therapeutic mechanisms of Tongmai Dasheng Tablet on tripterygium glycosides induced rat model for premature ovarian failure,” J Ethnopharmacol., vol 139, no 1, pp 26–33, 2012, doi: 10.1016/j.jep.2011.08.077 71 高慧，杨涓，韩冰，等．, “药物型卵巢早衰动物模型的研究,” 国医论坛, vol 22, no 3, pp 22–26, 2007 Gao Hui, Yang Juan, Han Bing Nghiên cứu mơ hình suy buồng trứng sớm dược vật Quốc y luận biên vol 22, no 3, pp 22–26, 2007 72 X Y Chen et al., “A mouse model of premature ovarian insufficiency induced by tripterygium glycoside via subcutaneous injection,” Int J Clin Exp Pathol., vol 7, no 1, pp 144–151, 2014 73 N V Guerrero, R H Singh, A Manatunga, G T Berry, R D Steiner, and L J Elsas, “Risk factors for premature ovarian failure in females with galactosemia,” J Pediatr., vol 137, no 6, pp 833–841, 2000, doi: 10.1067/mpd.2000.109148 74 S Bandyopadhyay et al., “Prenatal exposure to high galactose adversely affects initial gonadal pool of germ cells in rats,” Hum Reprod., vol 18, no 2, pp 276–282, 2003 doi: 10.1093/humrep/deg058 75 L Wen, T People, and H Wuhan, “D( + ) 半乳糖对小鼠卵巢功能影响的 实 验性研,” 中国优生与遗传杂志, vol 14, no 12, pp 98–100, 2006 76 T Xia, Y Fu, H Gao, Z Zhao, L Zhao, and B Han, “Recovery of ovary function impaired by chemotherapy using Chinese herbal medicine in a rat model,” Syst Biol Reprod Med., vol 60, no 5, pp 293–303, 2014 doi: 10.3109/19396368.2014.920057 77 H A, Y S, A M, S F, and E M., “Ovarian protection in cyclophosphamidetreated mice by fennel.,” Toxicol Rep, vol 4, no 1, pp 160–164, 2017 doi: 10.1016/j.toxrep.2017.03.002 78 J Of, P Traditional, and C Medicine, “Journal of practical traditional chinese medicine 2013.Vol.29 No.11,” J Pract Tradit CHINESE Med., vol 35, no 2, p 200, 2019 79 宋坤琨 et al., “补肾活血方改善卵巢早衰小鼠卵巢储备的作用及机制研究 ,” China Acad J Electron Publihing House All rights reseved., pp 102–103, 2019 Song Kunkun Nghiên cứu chế tác dụng thuốc bổ thận hoạt huyết cải thiện chức buồng trứng mơ hình suy giảm chức buồng trứng chuột nhắt China Acad J Electron Publihing House All rights reseved., pp 102–103, 2019 80 X Xu et al., “Effects of Bushen Tianjing Recipe in a rat model of tripterygium glycoside-induced premature ovarian failure,” Chinese Med (United Kingdom), p 10:12, 2017 doi: 10.1186/s13020-017-0131-3 81 M Ma, X Y Chen, B Li, and X T Li, “Melatonin protects premature ovarian insufficiency induced by tripterygium glycosides: Role of SIRT1,” Am J Transl Res., vol 9, no 4, pp 1580–1602, 2017 82 S L Byers, M V Wiles, S L Dunn, and R A Taft, “Mouse estrous cycle identification tool and images,” PLoS One, vol 7, no 4, pp 1–5, 2012 doi: 10.1371/journal.pone.0035538 83 C Caligioni, “ARV and Nutrition Interactions,” Curr Protoc Neurosci., vol 48, no 1, p A.4I.1-A.4I.8, 2009, doi: 10.1002/0471142301.nsa04is48.Assessing 84 游方, “调经助孕方对DOR模型大鼠卵泡发育障碍影响的实验研究,” 2015 You Fang (2015) Nghiên cứu ảnh hưởng thuốc điều kinh trợ sản đến buồng trứng chức sinh cản chuột cống mơ hình thực nghiệm 85 李成婷, “补肾活血方调节雷公藤多甙致卵巢储备功能下降大鼠卵巢免疫 功能的实验研究,” 南京中医药大学, 2014 Li Cheng Ting Nghiên cứu thực nghiệm phương bổ thận hoạt huyết điều tiết chức miễn dịch chuột Lôi công đằng gây suy giảm chức buồng trứng Luận án tiến sỹ Đại học trung y dược Nam Kinh, 2014 86 XU Wen-jun, G Hui, and L Yang, “Effect of Bushen Tiaochong Prescription on sex hormone level and TNF-α and IFN-γ protein expression in rats with premature ovarian failure,” North China Univ Sci Technol Tangshan 063000, China, pp 953–957, 2016, doi: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.06.007 Phụ lục MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG NGHIÊN CỨU Máy xét nghiệm Elisa Cân chia lô chuột Kĩ thuật tiêm TG dƣới da chuột Phết phiến đồ âm đạo chuột Lấy máu hốc mắt chuột Mổ lấy tử cung buồng trứng chuột Hình ảnh tử cung buồng trứng chuột lô chứng ... VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM LỮ ĐOÀN HOẠT MƢỜI NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG BẢO VỆ VÀ HIỆU QUẢ PHỤC HỒI SUY GIẢM CHỨC NĂNG BUỒNG TRỨNG CỦA BÀI THUỐC HV TRÊN MƠ HÌNH THỰC NGHIỆM... tác dụng thuốc, đề tài thực với hai mục tiêu sau: Đánh giá tác dụng bảo vệ thuốc HV buồng trứng tử cung chuột nhắt trắng mô hình thực nghiệm Đánh giá hiệu phục hồi suy giảm chức buồng trứng thuốc. .. 42 Hình 3.7 Hình ảnh vi thể buồng trứng chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng cao lỏng HV 47 Hình 3.8 Hình ảnh vi thể tử cung chuột nghiên cứu hiệu phục hồi chức buồng trứng