Luận văn phân lập vi khuẩn escherrichia coli gây tiêu chảy ở lợn con trước, sau cai sữa tại hà nam và xác định một số yếu tố độc lực của vi khuẩn phân lập được

luận văn

B GIÁO D C VÀ ðÀO T O TRƯ NG ð I H C NÔNG NGHI P HÀ N I - ð - TH THU HI N PHÂN L P VI KHU N ESCHERICHIA COLI GÂY TIÊU CH Y L N CON TRƯ C, SAU CAI S A T I HÀ NAM VÀ XÁC ð NH M T S Y UT ð C L C C A VI KHU N PHÂN L P ðƯ C LU N VĂN TH C SĨ NÔNG NGHI P Chuyên ngành : Thú y Mã s : 60.62.50 Ngư i hư ng d n khoa h c: PGS.TS CÙ H U PHÚ PGS.TS NGUY N H U NAM HÀ N I – 2011 L I CAM ðOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên c u c a riêng Các s li u, k t qu nêu lu n văn trung th c chưa t ng ñư c cơng b b t kì cơng trình khác Tơi xin cam đoan r ng thơng tin trích d n lu n văn ñ u ñã ñư c ch rõ ngu n g c Hà Nam, ngày tháng năm 2011 Tác gi lu n văn ð Th Thu Hi n Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… i L I C M ƠN Tôi xin chân thành c m ơn s giúp ñ c a th y giáo khoa Thú y Vi n đào t o sau ñ i h c – trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i ñã truy n t i nh ng ki n th c b ích cho tơi su t q trình h c t p ð hoàn thành lu n văn này, tơi ln nh n đư c s hư ng d n t n tình, trách nhi m c a PGS.TS Cù H u Phú, PGS.TS Nguy n H u Nam t p th cán b B môn Vi trùng –Vi n thú y Qu c gia, xin ñư c bày t lòng c m ơn chân thành nh t ð ng th i, xin c m ơn lãnh ñ o Chi c c Qu n lý Ch t lư ng Nông Lâm s n Th y s n, Chi c c Thú y Hà Nam, b n bè, ñ ng nghi p, thú y viên s , h chăn nuôi t o ñi u ki n thu n l i nh t cho tơi, đ c bi t tơi r t bi t ơn gia đình ln t o u ki n giúp đ tơi su t q trình th c hi n lu n văn Hà Nam, ngày tháng năm 2011 Tác gi lu n văn ð Th Thu Hi n Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… ii M CL C L i cam ñoan i L i c m ơn ii M cl c iii Danh m c ch vi t t t vi Danh m c b ng vii Danh m c bi u đ viii M ð U 1.1 Tính c p thi t c a ñ tài 1.2 M c tiêu nghiên c u 1.3 Ý nghĩa khoa h c th c ti n c a ñ tài T NG QUAN TÀI LI U 2.1 M t s hi u bi t chung v h i ch ng tiêu ch y 2.2 M t s nghiên c u v vi khu n E.coli gây b nh tiêu ch y 2.3 Tình hình nghiên c u ngồi nư c v vai trị c a vi khu n E.coli h i ch ng tiêu ch y 15 25 ð I TƯ NG, NGUYÊN LI U, N I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 28 3.1 N i dung nghiên c u 28 3.2 ð i tư ng, ñ a ñi m th i gian nghiên c u 28 3.3 Nguyên li u dùng nghiên c u 29 3.4 Phương pháp nghiên c u 29 K T QU VÀ TH O LU N 40 4.1 K t qu nghiên c u m t s ñ c ñi m d ch t h i ch ng tiêu ch y l n trư c sau cai s a t i t nh Hà Nam 4.1.1 Tình hình chăn nuôi l n t i Hà Nam m t s năm g n ñây Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 40 40 iii 4.1.2 T l l n trư c sau cai s a m c t vong tiêu ch y theo ñ a ñi m 4.1.3 Hà Nam 41 T l l n trư c sau cai s a m c t vong tiêu ch y theo mùa v t i m t s huy n c a t nh Hà Nam 4.1.4 44 Phương th c chăn nuôi nh hư ng t i t l l n trư c sau cai s a m c tiêu ch y t i m t s huy n c a t nh Hà Nam 4.1.5 T l l n trư c sau cai s a m c t vong tiêu ch y theo ki u chu ng nuôi t i m t s huy n c a t nh Hà Nam 4.1.6 53 K t qu nghiên c u xác đ nh vai trị c a vi khu n E.coli h i ch ng tiêu ch y 4.2.1 l n trư c sau cai s a 56 K t qu phân l p vi khu n E.coli t m u phân l n tiêu ch y t i t nh Hà Nam 4.2.2 56 K t qu giám ñ nh ñ c tính sinh h c c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.2.3 51 T l l n trư c sau cai s a m c t vong tiêu ch y theo l a tu i t i m t s huy n c a t nh Hà Nam 4.2 48 59 K t qu xác ñ nh serotype kháng nguyên O c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 60 3.2.4 K t qu xác ñ nh y u t gây b nh c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.2.5 63 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng vi khu n E.coli chu t b ch 4.2.6 66 K t qu xác ñ nh kh m n c m v i kháng sinh c a 67 ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.3 K t qu th nghi m phác ñ ñi u tr b nh tiêu ch y l n K T LU N VÀ ð NGH 73 5.1 K t lu n 73 5.2 ð ngh 74 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 70 iv TÀI LI U THAM KH O PH L C Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 75 85 v DANH M C CÁC CH VI T T T AEEC : Adhenicia Enteropathogenic Escherichia coli BHI : Brain-heart infusion cs : C ng s CPU : Colinial Forming Unit ED : Endema disease EDP : Endema disease pathogenic EHEC : Entero haemarrhagic EMB : Eosin Methylene Blue Agar EPEC : Enteropathogenic Escherichia coli ETEC : Enterotoxigenic Escherichia coli HEM : Heamolysin KN : Kháng nguyên LT : Heat-Lable toxin NXB : Nhà xu t b n PCR : Polymerase Chain Reaction RR : Relative Risk SLT : Shiga-like toxin SLT1 : Shiga-like toxin SLT2 : Shiga-like toxin ST (a,b) : Heat- STable toxin (a,b) ST1 : Heat- STable Stx2e : Shiga toxin 2e tr : trang TSI : Triple Sugar Iron TT : Th tr ng VP : Voges Pros Kauer VT2e : Verotoxin 2e VTEC : Verotoxigenic Escherichia coli Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… vi DANH M C B NG STT Tên b ng Trang 4.1 Tình hình phát tri n đàn l n t i Hà Nam giai ño n 2006 - 2010 4.2 40 T l l n m c tiêu ch y t vong tiêu ch y theo ñ a 41 ñi m 4.3 So sánh nguy m c tiêu ch y l n theo ñ a ñi m 43 4.4 T l l n m c t vong tiêu ch y theo mùa v 45 4.5 So sánh nguy l n m c tiêu ch y gi a mùa 47 4.6 T l l n tiêu ch y t vong tiêu ch y theo phương th c chăn nuôi 48 4.7 So sánh nguy l n tiêu ch y theo phương th c chăn nuôi 50 4.8 T l l n m c t vong tiêu ch y theo ki u chu ng nuôi 52 4.9 T l l n m c t vong tiêu ch y theo l a tu i 54 4.10 K t qu phân l p vi khu n E.coli t m u phân l n tiêu ch y (n=165) 4.11 56 K t qu giám đ nh đ c tính sinh h c c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.12 59 K t qu xác ñ nh serotype kháng nguyên O c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.13 T l ch ng vi khu n E.coli mang gen 61 quy ñ nh sinh t ng h p y u t gây b nh 4.14 K t qu ki m tra ñ c l c c a m t s ch ng vi khu n E.coli chu t b ch 4.15 64 66 K t qu xác đ nh tính m n c m v i kháng sinh c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.16 68 K t qu th c nghi m phác ñ ñi u tr b nh tiêu ch y cho l n 71 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… vii DANH M C BI U ð STT Tên bi u ñ Trang 4.1 So sánh t l l n m c t vong tiêu ch y theo ñ a ñi m 43 4.2 So sánh t l l n m c t vong tiêu ch y theo mùa v 46 4.3 So sánh t l l n m c t vong tiêu ch y theo phương th c chăn nuôi 4.4 50 So sánh t l l n m c t vong tiêu ch y theo ki u chu ng nuôi 52 4.5 So sánh t l l n m c t vong tiêu ch y theo l a tu i 55 4.6 T l phân l p vi khu n E.coli theo huy n 57 4.7 T l serotype kháng nguyên O c a ch ng vi khu n E.coli phân l p ñư c 4.8 62 T l ch ng vi khu n E.coli mang gen quy ñ nh sinh t ng h p y u t gây b nh Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 65 viii M ð U 1.1 Tính c p thi t c a ñ tài Trong nh ng năm g n ñây, ngành nơng nghi p kh ng đ nh vai trị ñóng góp h t s c quan tr ng vào s tăng trư ng chung c a ñ t nư c Ngành chăn ni, đ c bi t chăn ni l n tr thành m t ngành s n xu t chính, chi m t tr ng cao c u kinh t nông nghi p Chăn nuôi l n không ch d ng l i t p quán s n xu t ñơn thu n, mà ngày đư c ngư i chăn ni ý ñ u tư, áp d ng ti n b khoa h c vào s n xu t ñ nâng cao su t, ch t lư ng ð n nay, s n ph m t chăn nuôi l n khơng nh ng đáp ng đư c nhu c u tiêu dùng n i đ a mà cịn đư c xu t kh u th trư ng th gi i T i t nh Hà Nam, chăn nuôi l n mang nh ng ñ c ñi m chung v y Chăn nuôi l n t i t nh có lúc tăng lúc gi m, t ng bư c phát tri n theo hư ng chăn nuôi trang tr i t p trung theo hư ng s n xu t hàng hoá, g n v i an tồn d ch b nh đư c t nh ñ c bi t quan tâm Song song v i s phát tri n chăn ni tình hình d ch b nh di n bi n h t s c ph c t p, hàng năm làm ch t nhi u ñ u l n c a t nh Theo báo cáo d ch t c a Chi c c Thú y năm 2009 toàn t nh có 11 702 l n b m 1208 ch t; năm 2010 có 10 655 l n b m 1127 ch t gây thi t h i l n v kinh t , hay g p ph bi n h i ch ng tiêu ch y l n dư i tháng tu i ðã có nhi u cơng trình nghiên c u c a nhi u tác gi nư c t p trung nghiên c u v h i ch ng tiêu ch y c a l n h u h t ñ u ñi ñ n nh n xét chung: tiêu ch y m t h i ch ng b nh lý nhi u nguyên nhân liên quan ñ n v n ñ thu c v dinh dư ng, chăm sóc, th i ti t, khí h u,…liên quan ñ n s có m t c a m t s virus, vi khu n, ký sinh trùng…trong có y u t nguyên nhân nguyên phát, có y u t nguyên Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… Hà Nam s d ng phác ñ ñi u tr b nh tiêu ch y l n trư c sau cai s a 5.2 ð ngh - Ti p t c nghiên c u y u t gây b nh c a vi khu n E.coli phân l p ñư c ñ ch vaccin phòng b nh tiêu ch y vi khu n E.coli gây t i t nh Hà Nam - Có th s d ng r ng rãi phác đ III s d ng kháng sinh Enrofloxacin ñi u tr b nh tiêu ch y l n ñ a bàn t nh Hà Nam - ð chăn ni l n có hi u qu h n ch đư c d ch b nh, có b nh tiêu ch y c n khuy n khích đ u tư vào chăn ni theo phương th c công nghi p, xây d ng tr i chăn ni đ m b o u c u k thu t v v sinh an toàn d ch b nh Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 74 TÀI LI U THAM KH O I TI NG VI T Võ Th Trà An, ðào Th Phương Lan, Lê H u ng c, Nguy n Ng c Tuân (2010), “ð kháng kháng sinh c a Escherichia coli phân l p t v t nuôi s hi n di n c a β-Lactamse ph r ng (ESBL)”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XVII (2), tr.42-46 Archie H (2000), S tay d ch b nh ñ ng v t, (Ph m Gia Ninh Nguy n ð c Tâm d ch), NXB B n ñ , Hà N i, tr 53, 207- 204 ð ng Xuân Bình, ð Văn Chung (2008a), “ð c tính sinh h c c a vi khu n E.coli b nh phân tr ng l n m t s t nh mi n núi phía B c”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XV (4), tr 54-59 ð ng Xuân Bình, ð Văn Chung (2008b), “Hi u qu c a v c xin chu ng (auto vaccine) th nghi m phòng b nh phân tr ng l n th c ñ a”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XV (6), tr 50-55 Chi c c thú y t nh Hà Nam (2010), Các báo cáo d ch b nh năm (2008 – 2010) Lê Minh Chí (1995), “B nh tiêu ch y gia súc”, H i th o khoa h c, B Nông nghi p công nghi p th c ph m, Hà N i, tr 20 - 22 C c th ng kê t nh Hà Nam, Niên giám th ng kê t nh Hà Nam năm 2010, NXB th ng kê Hà N i Cù Xuân D n, Nguy n Xuân T nh, Ti t H ng Ngân, Nguy n Bá Mùi, Lê M ng Loan (1996), Sinh lý h c gia súc, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 122 – 141 Huỳnh Kim Di u (2009), “Thành ph n dinh dư ng xuân hoa, m t thu c ñi u tr b nh tiêu ch y l n con”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XVI (2), tr 61- 65 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 75 10 ðoàn Th Kim Dung (2004), S bi n ñ ng m t s vi khu n hi u khí đư ng ru t, vai trị c a E.coli h i ch ng tiêu ch y c a l n phác ñ ñi u tr Lu n án tiên s Nông nghi p, Vi n Thú y Qu c Gia, Hà N i, tr 55-86 11 Nguy n Lân Dũng, Nguy n Văn ð c, ð ng H ng Mai, Nguy n Vĩnh Phư c (1976), M t s phương pháp nghiên c u vi sinh v t, t p I II, NXB Khoa h c k thu t, Hà N i 12 Lê Văn Dương (2010), Phân l p, xác ñ nh vai trò gây b nh c a Escherichia coli (E.coli) gây tiêu ch y l n t i m t s huy n c a t nh B c Giang bi n pháp phòng tr , Lu n án th c sĩ khoa h c nông nghi p, ð i h c Nông Lâm, Thái Nguyên 13 ðào Tr ng ð t, Phan Thanh Phư ng (1985), B nh đư ng tiêu hố l n, NXB Nông nghi p, Hà N i 14 ðào Tr ng ð t, Phan Thanh Phư ng (1986), B nh gia súc non, t p II, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 5- 30 15 ðào Tr ng ð t, Phan Thanh Phư ng, Lê Ng c M , Huỳnh Văn Kháng (1996), B nh l n nái l n con, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 57 - 147 16 Erwin M Kohler (1996), C m nang chăn nuôi l n công nghi p, NXB Nông Nghi p, Hà N i 17 Nguy n Th Thanh Hà, Bùi Th Tho (2009), “Nghiên c u bào ch th nghi m cao m t bò ng d ng phòng b nh phân tr ng l n con”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XVI (2), tr 57 - 60 18 Nguy n Ng c H i (2010), “V c xin chu ng (autovaccine) phòng b nh tiêu ch y E.coli heo theo m ”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XVII (2), tr 47- 52 19 Khoo teng huat (1995), “Nh ng b nh đư ng tiêu hóa hô h p l n”, H i th o khoa h c t i C c thú y Qu c gia, tr -13 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 76 20 Bùi Quý Huy (2003), S tay phòng ch ng b nh t ñ ng v t lây sang ngư i - B nh E.coli, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 30 - 34 21 Vũ Kh c Hùng, M.pilipcinec (2004), “Nghiên c u so sánh y u t ñ c l c c a ch ng E.coli phân l p t l n b tiêu ch y c ng hoà Slovakia”, Báo cáo khoa h c chăn nuôi thú y, Hà N i, tr 45 - 46 22 Nguy n Th Kim Lan (2004), “Th nghi m phòng tr b nh E.coli dung huy t cho l n Thái Nguyên B c Giang”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XII (3), tr 35 - 39 23 Nguy n Th Kim Lan, Nguy n Th Ngân, Lê Minh (2006a), “Vai trò c a ký sinh trùng đư ng tiêu hố h i ch ng tiêu ch y l n sau cai s a t i Thái Nguyên”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XIII (3), tr 36 - 40 24 Nguy n Th Kim Lan, Nguy n Th Ngân, Lê Minh (2006b), “M t s ñ c ñi m d ch t h i ch ng tiêu ch y l n t i Thái Nguyên”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XIII (4), tr 92 - 96 25 Ph m S Lăng, Nguy n Văn Quang, B ch Qu c Th ng (2006), 17 b nh m i c a l n, NXB Lao ñ ng- Xã h i, tr 42- 50 26 Ph m S Lăng (2009), “B nh tiêu ch y vi khu n l n bi n pháp phòng tr ”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XVI (6), tr 80- 85 27 H Văn Nam, Nguy n Th ðào Nguyên, Trương Quang, Phùng Qu c Chư ng, Chu ð c Th ng, Ph m Ng c Th ch (1997), “B nh viên ru t a ch y 28 l n”, T p chí khoa h c k thu t thú y, (1), tr 15 - 21 Nguy n Th Ng (2005), Nghiên c u tình hình h i ch ng tiêu ch y l n t i huy n Chương M - Hà Tây, xác ñ nh m t s y u t gây b nh c a vi khu n E.coli Salmonella, bi n pháp phòng tr , Lu n văn th c s Nông nghi p, Hà N i 29 Nguy n Kh Ng (2000), Xác ñ nh y u t gây b nh c a vi khu n Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 77 E.coli b nh phù ñ u l n ñ ng b ng sơng C u Long, ch vacxin phịng b nh, Lu n án ti n s Nông nghi p, Vi n Thú y, Hà N i 30 Nguy n Th N i (1985), Tìm hi u vai trị E.coli b nh phân tr ng l n vacxin d phòng, Lu n án PTS khoa h c, Hà N i 31 Nguy n Như Pho (2003), B nh tiêu ch y heo, NXB Nông nghi p, TP H Chí Minh 32 Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên, Vũ Bình Minh ð Ng c Thuý (1999) “K t qu phân l p vi khu n E.coli Salmonella l n m c tiêu ch y, xác đ nh m t s đ c tính sinh v t hoá h c c a ch ng vi khu n phân l p ñư c bi n pháp phịng tr ”, T p chí khoa h c k thu t thú y, tr 47 - 51 33 Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên, ð Ng c Thuý, Âu Xuân Tu n, Nguy n Xuân Huyên, Văn Th Hư ng, ðào Th H o (2004), “L a ch n ch ng E.coli ñ ch t o Autovacxin phòng b nh tiêu ch y cho l n theo m ”, Vi n thú y 35 năm xây d ng phát tri n (1969 - 2004), NXB Nông nghi p, Hà N i 34 Nguy n Vĩnh Phư c (1974), Vi sinh v t Thú y, t p I II, NXB Khoa h c k thu t, Hà N i 35 Nguy n Vĩnh Phư c (1978), B nh truy n nhi m gia súc, NXB Nông nghi p, Hà N i 36 Phan Thanh Phư ng, ð ng Th Th y (2008a), “Phòng b nh b ng kháng th E.coli ñư c chi t tách t lịng đ tr ng gà d ng b t”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XV (5), tr 95-96 37 Phan Thanh Phư ng, ð ng Th Th y (2008b), “Nghiên c u bi n ñ ng hi u giá kháng th th ñ ng th l n ñư c s d ng kháng th d ng b t d ng đơng khơ phịng tr b nh E.coli t huy t trùng l n, khoa h c kĩ thu t thú y t p XV s 6, trg 56-59 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 78 38 Tơ Th Phư ng (2006), Nghiên c u tình hình h i ch ng tiêu ch y l n ngo i hư ng n c t i Thanh Hóa bi n pháp phòng tr , Lu n văn th c sĩ nông nghi p, ð i h c nông nghi p Hà N i, Hà N i 39 Trương Quang (2005), “K t qu nghiên c u vai trò gây b nh c a E.coli h i ch ng tiêu ch y l n - 60 ngày tu i”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XII (1), tr 27 - 32 40 H Sối, ðinh Th Bích Lân (2005), “Xác ñ nh nguyên nhân ch y u gây b nh tiêu ch y l n t i xí nghi p l n gi ng Tri u H i - Qu ng Tr th nghi m phác ñ ñi u tr ”, T p chí khoa h c k thu t thú y, tr 26 - 34 41 Ph m Th Sơn, Ph m Kh c Hi u (2008a), “Tác d ng kháng khu n c a ch ph m EM-TK21 v i vi khu n E.coli, Salmonella, Cl.perfringens (in vitro) kh phòng tr tiêu ch y c a ch ph m EM-TK21 l n - 60 ngày tu i”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XV (1), tr 69-72 42 Ph m Th Sơn, Ph m Kh c Hi u, Cù H u Phú, Lê Văn T o (2008b), “ð c tính c a vi khu n E.coli, Salmonella, Cl.perfringens gây b nh l n tiêu ch y”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XV (1), tr 73-77 43 Lê Th Tài (1997), “Ô nhi m th c ph m v i s c kho ngư i gia súc Nh ng thành t u m i v nghiên c u phòng ch ng b nh v t nuôi”, Vi n Thú y qu c gia, tr 65 - 66 44 Lê Văn T o (1993) “Nghiên c u ch t o vac xin E.coli u ng phòng b nh phân tr ng l n con”, T p chí Nơng nghi p cơng nghi p th c ph m, tháng 9/ 1993, Hà N i, tr 324 - 325 45 Lê Văn T o (1996), “Xác ñ nh y u t gây b nh di truy n b ng Plasmid vi khu n E.coli phân l p t l n b b nh phân tr ng ch n ch ng s n xu t vaccin”, Báo cáo t i H i th o REI, Hà N i Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 79 46 Lê Văn T o (1997), B nh Escherichia coli gây Nh ng thành t u m i v nghiên c u phòng ch ng b nh v t ni, tài li u gi ng d y sau đ i h c cho bác s thú y k sư chăn nuôi, Vi n Thú y qu c gia, Hà N i, tr 207 - 210 47 Nguy n Như Thanh, Nguy n Bá Hiên, Tr n Th Lan Hương (1997), Vi sinh v t thú y, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 81 - 84 48 Nguy n Như Thanh (2001), D ch t h c thú y, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 22 - 23 49 Ph m Ng c Th ch (1996), M t s ch tiêu lâm sàng, phi lâm sàng trâu viêm ru t a ch y bi n pháp phòng tr , Lu n án ti n s Nông nghi p, tr 20 - 32 50 Ph m Ng c Th ch (2005), H i ch ng tiêu ch y gia súc, Trư ng ð i h c Nông nghi p I Hà N i - Khoa chăn nuôi thú y, Hà N i, tr - 51 Nguy n Văn Thi n (1997), Phương pháp nghiên c u chăn nuôi, NXB Nông nghi p, Hà N i 52 Nguy n Văn Thi n, Nguy n Khánh Qu c, Nguy n Duy Hoan (2002), Giáo trình phương pháp nghiên c u chăn ni, NXB Nơng nghi p, Hà N i 53 Võ Thành Thìn, ð ng Văn Tu n, Nguy n H u Hưng (2009), “ ng d ng phương pháp PCR-RFLP ñ xác ñ nh bi n th c a kháng nguyên F4 F18 c a ch ng E.coli gây tiêu ch y l n con”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, T p XVI (5), tr 26-30 54 Tr nh Văn Th nh (1985a), B nh n i khoa ký sinh trùng thú y, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 78 - 82 55 Tr nh Văn Th nh (1985b), B nh l n c a Vi t Nam, NXB khoa h c k thu t, Hà N i, tr 90 - 95 56 Bùi Th Tho, Nguy n Thành Trung (2011), “Kh o sát tác d ng c a Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 80 xuân hoa (Pseuderanthemum Palatiferum) ñi u tr b nh tiêu ch y l n con”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XVIII (2), tr 58 – 64 57 ð Ng c Thuý, Darren Trot, Alan Front, Kirsty Townsend, Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên, Nguy n Xuân Huyên, Âu Xuân Tu n, Văn Th Hư ng Vũ Ng c Quý (2002), “Tính kháng kháng sinh c a ch ng Escherichia coli phân l p t l n tiêu ch y m t s t nh mi n B c Vi t Nam”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p IX (2), tr 21 - 27 58 ð Ng c Thúy, Lê Th Minh H ng, Lê Th Hồi (2008), “ð c tính c a m t s ch ng vi khu n E.coli phân l p t l n m c tiêu ch y t nh Hưng Yên”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XV (4), tr 49-53 59 Nguy n Trung Tr c, Nguy n Vi t Nga, Thái Qu c Hi u, Lê Thanh Hi u, Nguy n Ng c Tuân, Tr n Th Dân (2004), “Phân l p ñ nh type kháng nguyên vi khu n E.coli phân heo nái, heo t i t nh Ti n Giang”, T p chí khoa h c k thu t thú y, (1), tr 12 - 19 60 Hoàng Văn Tu n, Lê Văn T o, Tr n Th H nh (1998), “K t qu u tra tình hình tiêu ch y l n m t tr i gi ng hư ng n c”, T p chí khoa h c k thu t thú y, t p V (4) 61 Tr nh Quang Tuyên (2004), “Phân l p xác ñ nh y u t gây b nh c a vi khu n E.coli t l n b tiêu ch y nuôi t i tr i l n Tam ði p”, T p chí khoa h c k thu t thú y (4), tr 22 - 28 62 Tr nh Quang Tuyên (2006), Xác ñ nh y u t gây b nh c a E.coli b nh tiêu ch y phù ñ u l n chăn nuôi t p trung, Lu n án ti n sĩ nông nghi p,Vi n thú y, Hà N i 63 Nguy n Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh v t Thú y, NXB Nông nghi p, tr 72- 81 64 Nguy n H u Vũ, Nguy n ð c Lưu (2000), Thu c thú y cách s Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 81 d ng, NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 326 - 328 65 Nguy n H u Vũ, Hoàng Bùi Ti n, Tr n Th Thu Hi n (2010) “Kháng th HANVET KTEHI phòng tr b nh tiêu ch y E.coli gây l n”, T p chí khoa h c kĩ thu t thú y, t p XVII (3), tr 94-95 II TI NG ANH 66 Carter G.R, Chengapa.M.M, Rober T.S.A.W (1995), Essentials of veterinary Microbiology Awarerly Company, 1995, p 45-49 67 Cravioto, A., R J Gross, S M Scotland, and B, Rowe (1979), An adhesive factor fould in strains of Escherichia coli belonging to the traditional infantile Lenteropathogenic serotypes Curr Microbiol 3:95-99 68 Dean E.A, Whipp S.C & Moon H.W.(1989), Age-specificcolonization of porcine intestinal epithelium by 987P-piliated enterotoxigenic Escherichia coli Infection and Immunity 57, 82-87 69 Dean-Nystrom E.A.&Samuel,J.E.(1994), Age-related resistance to 987P fimbria-mediated colonization correlates with specific glycolipid receptors in intestial mucus in swine Infection and Immunity 62, 47894794 70 Do.T.N, Cu.H.P, Van.H.T, Tran.N.P.T & Trott.D.J (2006), Virulence factors of E.coli isolates obtained from pigs with post-weaning diarrhoea or oedema disease in Vietnam In IPVS, p 336 Copenhagen, Denmark 71 DuPont, H L., S B Formal, R B Hornick, M J Snyder, J P Libonati, D.G.Sheahan, E H LaBrec, and J.P.Kalas (1971), Pathogenesis of Escherichia coli diarrhea N Engl J Med 285:1-9 72 Fairbrother.J.M (1992), Enteric colibacillosis Diseases of swine IOWA State University Press/AMES,IOWA U.S.A 7th Edition, 1992, p 489-496 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 82 73 Falkow, S.(1975), Plasmid which contribute to pathogenity In infection multile drug resistance Pion Ltd London 74 Giannella, R.A.(1976), Suckling mouse model for detection of heatstable Escherichia coli enterotoxin:characteristics of the model Infection and Immunity14, 95-99 75 Guinee, P.A.M.& Jansen,W.H.(1979), Behavior of Escherichia coli K antigens K88ab,K88ac,and K88ad in immunoelectrophoresis,double diffusion, and haemagglutination Infection and Immunity 23,700-705 76 Ketyle I.Emodyl, Kentrohrt (1975), Mouse lang Oedema caused by atoxin substance of Escherichia coli strains Acta Mcrobiol,A cadSci.Hung-25, P.307-317 77 Konowalchuk, J.,Speirs, J.I.& Stavic, S (1977), Vero response to a cytotoxin of Escherichia coli Infection and Immunity 18, 775-779 78 Links, I., Love, R.&Greenwood, P (1985), Colibacillosis in newborn piglets associated with class enterotoxigenic Escherichia coli In Infectious diarrhoea of the young: strategies for control in humans and animals, pp 281-287 Edited by S Tzipori Geelong, Australia: Elsevier Science Publishers 79 Levine, M M (1987), Escherichia coli that cause diarrhea: enterotoxigenic, enteropathogenic, enteroinvasive, enterohemorrhagic, and enteroadherent J Infect Dis 155: 377-389 80 Nagy, B., Awad-Masalmed, M., Bodoky, T., Munch, P.& Szekrenyi, M T (1996), Associationof shiga-like toxin type II (SLTII) and heat stable enterotoxins with F18ab, F18ac, K88 and F41 fimbriae of Escherichia coli from weaned pigs In Proceedings of 14th Congress International Pigs Veterinary Society, pp 264 Bologna Italy 81 Nagy, B & Fekete, P.Z (1999), Enterotoxigenic Escherichia coli Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 83 (ETEC) in farm animals Veterinary Research 30, 259-284 82 NCCLS (1999), Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; Approved Standard Pennsylvania, USA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards 83 Orskov, I Orskov, F.Sojka, W.J.Wittig, W (1964), K antigens K88ab (L) and K88ac (L) in E.coli A new O antigen: O147 and a new K antigen K89 (B) Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica sect, B62, P.439-449 84 Polotsky, Y E., E M Dragunskaya, V G Seliverstova, T A Avdeeva, M G Chakhutinskaya, I Ke’tyi, A Verte’nyi, B Ralovich, L Emody, I Ma’lovics, N V Safonva, E S Snigirevskaya, and E I Karyagina (1977), Pathogenic effect of enterotoxigenic Escherichia coli and Escherichia coli causing infantile diarrhea Acta Microbiol Acad Sci Hung 24: 221-236 85 Riley, L W., R S Remis, S D Helgerson, H B McGee, J G Wells, B R Davis, R.J Hebert, E S Olcott, L M Johnson, N T Hargrett, P A Blake, and M L Cohen (1983), Hemorrhagic colitis associated with a rare Escherichia coli serotype N EngI J Med 308: 68-685 86 Rippinger.P., Bertschinger.H.U., Imberechts.H., Nagy.B., Sorg.I.,Stamm.M., Wild.P.& Wittig W (1995), Designations F18ab and F18ac for the related fimbrial types F107, 2134P and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine postweaning diarrhoea and from oedema disease Veterinary Microbiology 45, 281-295 87 Smith.H.W.& Halls.S (1967), Observations by the ligated segment and oral inoculation methds on Escherchia coli infections in pigs,calves’lambs and rabbits Journal of Pathology and Bacteriology 93, 499-529 Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 84 PH L C M TS HÌNH NH MINH H A nh 1: ðàn l n b tiêu ch y phân tr ng n n chu ng sàn nh 2: M khám b nh tích l n b tiêu ch y Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 85 ảnh 3: Hình thái vi khuẩn E coli kính hiển vi (x 1500 lần) nh 4: Phản ứng lên men đờng xác định vi khuẩn E.coli Tr ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nơng nghi p …………………… 86 nh 5: KÕt qu¶ thư ph¶n øng sinh Indol nh : E.coli mơi trư ng th ch Macconkey Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 87 nh 7: K t qu kháng sinh ñ M nh 8: Các sản phẩm phản ứng PCR phức hợp sau trình điện di M: 100 bp DNA marker Giếng 1, 2, 6: STa, LT d−¬ng tÝnh GiÕng 3, 7: STb, LT d−¬ng tÝnh GiÕng 5: STa, STb d−¬ng tÝnh GiÕng 4: ¢m tÝnh Trư ng ð i h c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 88 ... i vi khu n E .coli gây cho l n con, ti n hành nghiên c u ñ tài: ? ?Phân l p vi khu n Escherichia coli gây tiêu ch y l n trư c sau cai s a t i Hà Nam xác ñ nh m t s y u t ñ c l c c a vi khu n phân. .. K t qu nghiên c u xác đ nh vai trị c a vi khu n E .coli h i ch ng tiêu ch y 4.2.1 l n trư c sau cai s a 56 K t qu phân l p vi khu n E .coli t m u phân l n tiêu ch y t i t nh Hà Nam 4.2.2 56 K t... M c tiêu nghiên c u - Xác ñ nh m t s ñ c ñi m d ch t h i ch ng tiêu ch y l n trư c sau cai s a t i m t s huy n thu c t nh Hà Nam - Xác ñ nh vai trò gây b nh c a vi khu n E .coli h i ch ng tiêu