so sánh phương pháp định lượng hba1c bằng kỹ thuật điện di mao quản với kỹ thuật sắc ký lỏng cao áp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN THỊ THANH DIỄM SO SÁNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG HbA1c BẰNG KỸ THUẬT ĐIỆN DI MAO QUẢN VỚI KỸ THUẬT SẮC KÝ LỎNG CAO ÁP Chuyên ngành: XÉT NGHIỆM Mã số: 8720601 Luận văn Thạc sĩ Y học Kỹ thuật xét nghiệm Y học NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS.BS LÊ ĐÌNH THANH PGS.TS.BS HUỲNH NGHĨA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2020 LỜI CAM ĐOAN ******* Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các kiện, kết nêu luận văn trung thựcvà chưa công bố cơng trình khác Tác giả NGUYỄN THỊ THANH DIỄM DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CHỮ VIẾT ĐẦY ĐỦ VIẾT TẮT ADA NGHĨA Hiệp hội đái tháo đường Mỹ American Diabetes Association Bộ Y tế CE Capillary electrophoresis Điện di mao quản CLSI Clinical and Laboratory Standards Viện tiêu chuẩn Lâm sàng Institute Xét nghiệm Hoa Kỳ CV Coeficient of variation Hệ số biến thiên DCCT Diabetes Control and Complication Trial ĐTĐ Đái tháo đường EASD EOQC The European Asociation for the Hiệphộinghiêncứu Study of Diabetes ChâuÂu European Hb Organization for ĐTĐ Tổ chức kiểm soát chất Quality Control lượng Châu Âu Hemoglobin Huyết sắc tố HbA1c Hemoglobin glycolsylat hóa HCL Hồng cầu lưới CHỮ VIẾT ĐẦY ĐỦ VIẾT TẮT HPLC High Performance NGHĨA Liquid Sắc ký lỏng cao áp Chromatography IFCC International of Liên đồn quốc tế hóa and học lâm sàng xét nghiệm Federation emistry Laboratory Medicine IQC Internal quality control KTV y khoa Nội kiểm tra chất lượng Kỹ thuật viên LDL Low density lipoprotein Lipoprotein tỷ trọng thấp MCH Mean Corpuscular Hemoglobin Lượng Hemoglobin trung bình hồng cầu MCHC Mean Corpuscular Hemoglobin Nồng độ Hemoglobin Concentration trung bình hồng cầu MCV Mean Corpuscular Volume Thể tích trung bình hồng cầu NGSP National Glycohemoglobin Standardization Program QMS Quality management systems Hệ thống quản lý chất lượng SD Standard deviation Độ lệch chuẩn CHỮ VIẾT ĐẦY ĐỦ VIẾT TẮT NGHĨA Strengthening Laboratory SLMTA Management Toward Accreditation WHO World Health Organization Tiêu chuẩn Việt Nam Tổ chức Y tế giới Viện Khoa học Y tế Công WIV - ISP Scientific Institute for Public Health cộng Brussels(Bỉ) DANH MỤC CÁC BẢNG Số thứ tự TÊN BẢNG TRANG 1.1 Các phương pháp xét nghiệm HbA1c 11 1.2 So sánh phương pháp xét nghiệm HbA1c 16 n giới 2.1 Bảng Hằng số C xác định từ xác suất sai lầm loại I 20 25 sai lầm loại II 2.2 Các thông số đánh giá nghiên cứu 27 2.3 Sơ đồ nghiên cứu 28 2.4 Bảng chuẩn bị mẫu trộn 32 2.5 Các điều kiện hai phương pháp áp dụng để so sánh 33 3.1 Đặc điểm nhân trắc đối tượng nghiên cứu 38 3.2 Đặc điểm xét nghiệm mẫu nghiên cứu 38 3.3 Các đặc điểm liên quan đến ĐTĐ 262 bệnh nhân 39 3.4 3.5 3.6 Đặc điểm ba nhóm bệnh nhân theo phân nhóm kiểm sốt đường huyết Khảo sát độ đúng: Kết HbA1c lượt đo (µ = 5,03) Khảo sát độ đúng: Kết HbA1c lượt đo 38 41 42 (µ = 8,1) 3.7 Khảo sát độ đúng: Giá trị HbA1c lượt đo 43 Số thứ tự 3.8 TÊN BẢNG Khảo sát độ đúng: so sánh kết với giá trị đích TRANG 44 tiêu chí TEa NGSP 3.9 Khảo sát độ chụm: nồng độ HbA1c nhóm 45 3.10 Khảo sát độ chụm: nồng độ HbA1c nhóm 46 3.11 Khảo sát độ chụm: nồng độ HbA1c nhóm 47 3.12 Giá trị HbA1c qua lượt đo 48 3.13 Khảo sát độ tuyến tính 48 3.14 Bảng giá trị phương trình hồi qui 49 3.15 So sánh HbA1c trungbìnhcủahaiphươngpháp 49 3.16 Tương quan CE HPLC 49 3.17 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ Hb 51 3.18 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ Bilirubin 52 3.19 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ Triglycerid 53 3.20 Giá trị HbA1c trước sau trộn với dung dịch 54 3.21 Glucose 30mg% So sánh điều kiện hai phương pháp 55 DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ Số thứ tự TÊN HÌNH, BIỂU ĐỒ TRANG 1.1 Hình: Các phân đoạn khác Glyco Hb 1.2 Hình: Máy HA 8180V 15 1.3 Hình: Máy Capillary Tera 15 1.4 Biểu đồ kết HbA1c theo phương pháp CE 19 1.5 Biểu đồ kết HbA1c theo phương pháp HPLC 19 Biểu đồ tương quan phương pháp CE với 1.2 phương pháp HPLC 50 MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Mục lục Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình biểu đồ ĐẶT VẤN ĐỀ CÂU HỎI NGHIÊN CỨU MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Bệnh đái tháo đường 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Tiêu chuẩn chẩn đoán Đái tháo đường 1.1.3 Phân loại ĐTĐ theo Hiệp hội Đái tháo đường Mỹ 2019 1.1.4 Dịch tễ học bệnh đái tháo đường 1.2 Huyết sắc tố 1.2.1 Cấu tạo huyết sắc tố 1.2.2 Các rối loạn sắc tố 1.3 HbA1c 1.3.1 Đặc điểm cấu thành 1.3.2 Ứng dụng lâm sàng HbA1c 1.3.3 Các phương pháp đo HbA1c 10 1.3.4 Các yếu tố ảnh hưởng kết xét nghiệm HbA1c 17 1.3.5 Tình hình nghiên cứu 20 1.4 Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp 21 1.4.1 Độ xác (Accuracy) 22 1.4.2 Khoảng tuyến tính 23 1.4.3 Tương quan 23 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Thiết kế nghiên cứu 25 2.2 Đối tượng nghiên cứu 25 25 2.2.2 Dân số chọn mẫu 25 2.2.3 Cở mẫu 25 2.2.4 Phương pháp chọn mẫu 26 2.3 Phương pháp nghiên cứu 27 2.3.1 Các thông số đánh giá nghiên cứu 27 2.3.2 Tiến trình nghiên cứu 28 2.3.3 Cách thu thập số liệu 33 2.3.4 Định nghĩa biến số 35 2.3.5 Kiểm soát sai lệch 36 2.4 Phương pháp quản lý phân tích số liệu 36 2.4.1 Thống kê mô tả 36 2.4.2 Thống kê phân tích 37 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 38 3.1 Đặc điểm chung mẫu nghiên cứu 38 3.1.1.Đặc điểm nhân trắc học 38 3.1.2 Đặc điểm xét nghiệm 38 3.1.3 Các đặc điểm liên quan đến đái tháo đường 262 bệnh nhân 39 20 Cas Wekamp, Garry John W, Andrea Mosca (5-2009), “A review of the challenge in measuring Hemoglobin A1c” Diabetes Science and Technology, 3(3),pp 439-445 21 Chih Hsun Chu, Hing Chung Lam, Jenn Kuen Lee, Me Chun Wang (2009), “Common hemoglobin variants in Southern Taiwan and their effect on the Determination of HbA1c by ion-exchange High romatography” J Chin Med Assoc, 72(7),pp 362-367 22 College of American Pathologists (CAP) GH5 Survey Data (2016) 23 David B Sacks (2012) “Measurement of the heamoglobin A new twist on the part to harmoney”,pp.2674-80 24 Diabetes care (2013), “Executive summary: Standards of medical care in diabetes” Diabetes care, 36, Suppl 1, pp s4-10 25 Diabetes care (2009),”International Expect Commitee report on the role of the A1c assay in the diagnosis of Diabetes”, pp.1327-34 26 Dubowitz, N., Xue, W., Long, Q., Ownby, J G., Olson, D E., Barb, D., et al (2014), "Aging is associated with increased HbA1c levels, independently of glucose levels and insulin resistance, and also with decreased HbA1c diagnostic specificity" Diabetes Medicine, 31(8), 927-935 27 Emily Jane Gallagher, Derek Le Roith, Zachary Bloomgarden (2009), “Review of Hemoglobin A1c in the management of diabetes”, Diabetes, 1, pp.9-17 28 Farzana Yasmeen, Asim Mumtaz (2011) “Comparison of cation exchage HPLC and Immunoturbidimetric method for determination of HbA1c”, Biomadica Vol 27, p.161-165 29 Garrib A, Griffiths W, Eldridge P, Hatton R, Worsley A, Crook M (2003), “Artefactually low glycated haemoglobinin a patient with severe hypertriglyceridaemia” J Clin Pathol research report, pp 394-395 30 Goldstein David E, Little Randie R, Lorenz Rodney A, Malone John I, Nathan David, Peterson Charles M, Sacks David B (2004) "Tests of Glycemia in Diabetes" Diabetes Care, 27 (7): 1761 - 1773 31 Hare M J L, Shaw J E, Zimmet P Z (2012) “Current controversies in the use of haemoglobin A1c” Blackwell Publishing Ltd, pp 227-236 32 Herman W H, Ma Y, Uwaifo G, Haffner S, Kahn S E, Horton E S, Lachin in A1c by race and ethnicity among patients with impaired glucose tolerance in the Diabetes Prevention Program” Diabetes Care, 30(10), pp.2453-7 33 https://www.westgard.com/clia.htm 34 JayeshWarade (2017), “Comparison of glycated hemoglobin with HPLC and capillary electrophoresis”, Warde J Int J Res Med Sci 2017 May;5(5):1976-1979 35 John W G (2012), “Use of HbA1c in the diagnosis of dibetes mellitus in the UK The implementation of World Health Orgazination guidance 2011”, Diabetes Medicine, 29(11), pp.1350-1357 36 Ko, G T C., Wai, H P S., Tang, J S F (2006), "Effects of Age on Plasma Glucose Levels in Non-diabetic Hong Kong Chinese" Croatian medical journal, 47(5), 709-713 37 Latisha Hardy (11-2013), “Advantages of High Performance Liquid (HPLC) for HbA1c testing” Bio-rad 38 Little R R, Sacks D B (2009), “HbA1c: how we measure it and what does it mean?”, Curr Opin EndocrinolDiabetes Obes,16(2), pp.113-8 39 Louis Monnier, Helen Lapinnski, Claude Colette (2013), “Contributions of Fasting and Postprandial Plasma Glucose Increments to the Overall Dỉurnal Hyperglycemie of Type Diabetic Patients”, pp.881-885 40 Lynn Bry, Philip C Chen, David B Sacks (2001), “Effect of Hemoglobin variant and Chemically modified derivatives on glycohemoglobin” Clinical Chemistry,47(2), pp.153-63 assays for 41 Margaux Herpol, MD, Katrien Lanckmans (2016), “Evaluation of the Sebia Capillarys Tera and the Bio-Rad D-100 Systems for the Measurement of Hemoglobin A1c”, Am J Clin Patho, pp 146:67-77 42 Nathan David M, Kuenen Judith, Borg Rikke, Zheng Hui, Schoenfeld David, Heine Robert J (2008), “Translating the A1C Assay Into Estimated Average Glucose Values”, pp 1473-1478 Nordin, “Good Agreement Between Hba1c Analyzed Using Capillary Electrophoresis, HPLC, Immunological and Enzymatic Methods”, JDMC 2019.01.03 44 Olav Klingenberg, Torill Furuset (2017), “HbA1c analysis by Capillary electrophoresis- comparison with chromatography and an immunological method”, Pubmed, pp 458-464 45 Rene Rodriguez-Gutierrez, Leonardo G Mancillas-Adame, Giselle Rodríguez-Tamez, Alejandro Diaz Gonzalez-Colmenero (2018),“ Hypertriglyceridemia and Its Association with HbA1c Test: A Prospective In Vivo Controlled Study”, International Journal of Endocrinology Published, 12 46 Rohlfing C, Wiedmeyer H M, Little R, Grotz V L, Tennill A (2002), “Biological variation of glycohemoglobin”, Clin Chem, 48(7), pp.1116-8 47 Schnedl W J, Krause R, Halwachs Baumann G, Trinker M, Lipp R W, Krejs G J (2000), “Evalution of HbA1c determination methods in patients with hemoglobinopathies”, pp.339-44 48 Segun Adeoye, Sherly Abraham, Irina Erlikh, Sylvester Sarfaz, Tomas Borde, Lap Yeung (3-2014), “Aneamia and Haemoglobin A1c levels isthere a case redefining reference ranges and therapeutic goals” Medical Practitioner,7 49 Sun Diagnostics, “Recommended total allowable error limits”, 2012 50 Sungeeta Argawal, MD, Steven E Reinert, (2018), “Comparing HbA1c by POC and HPLC”, pp 43-46 51 The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993), “The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of long-term complications in insulin-dependent diabetes mellitus” N Engl J Med, 329 (14), pp.977-86 (2016), “A comparative evaluation of the analytical performances of Capillarys Flex Piercing, Tosoh HLC-723 G8, Premier Hb9210, and Roche Cobas c501 Tina-quant Gen analyzers for HbA1c determination”, BiochemiaMedical, 26(3),353-64 53 Wetenschappelijk Instituut Volksgezondheid WIV information for analytical goals for measurement of HbA1c https:// www.wiv-isp.be/qml/activities/external_quality/rapports/_ down/hba1c/2014/JR-2014.pdf Accessed June 28, 2015 54 Weykamp Cas, John W Garry, Mosca Andrea (2009), “A Review of the Challenge in Measuring Hemoglobin A1c”, pp.439-445 55 Wild Sarah, Roglic Gojka, Green Anders, Sicree Richard, King Hilary (2004), “Global Prevalence of Diabetes : Estimates for the year 2000 and projections for 2030” Diabetes Care, 27(5), pp.1047-1053 56 Wilaiwan Sriwimol, Pensiri Choosongsang (2019), “Strong correlation and high comparability of capillary electrophoresis and three different methods for HbA1c measurement in a population without hemoglobinopathy”, Published online: 14 Dec 2019 57 World Heath Orgazination (2011), “Use of the glycated hemoglobin (HbA1c) in the diagnosis of Diabetes mellius” pp, 1-25 PHỤ LỤC PHIẾU THU THẬP SỐ LIỆU STT: NGÀY LẤY MẪU: HỌ VÀ TÊN BỆNH NHÂN: NĂM SINH: GIỚI: ĐỊA CHỈ: KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM NHÓM MÁU HỆ ABO: …… NHÓM MÁU HỆ Rh: ……… MCV: .fl MCH: pg MCHC: .…… g/l Hb: …… g/dl Bilirubintoànphần: .…… μmol/l Triglycerid: .…… mmol/1 HbA1c: .…… %(PP HPLC) ... cứu so sánh phương pháp (CE) với phương pháp chuẩn (HPLC) 3 CÂU HỎI NGHIÊN CỨU Có hay khơng khác biệt kết xét nghiệm HbA1c thực phương pháp điện di mao quản so với phương pháp sắc ký lỏng cao. .. pháp sắc ký lỏng cao áp bệnh nhân biến thể Hemoglobin ? MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU So sánh kết định lượng HbA1c bệnh nhân đái tháo đường phương pháp điện di mao quản sắc ký lỏng cao áp 4 CHƯƠNG 1: TỔNG... gọi điện di dung dịch tự hay điện di mao quản dòng tự - Điện di mao quản tụ đẳng điện (Capillary Isoelectric Focusing: CIEF) - Điện di mao quản đẳng tốc (Capillary Isotachophoresis: CITP) - Điện