Xác định methanol, ethanol và các sản phẩm chuyển hóa của chúng trong rượu và huyết tương người vật chất 604401

TRƢỜNG ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN THỊ NGÂN XÁC ĐỊNH METANOL, ETANOL VÀ CÁC SẢN PHẨM CHUYỂN HÓA CỦA CHÚNG TRONG RƢỢU VÀ HUYẾT TƢƠNG NGƢỜI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN THỊ NGÂN XÁC ĐỊNH METANOL, ETANOL VÀ CÁC SẢN PHẨM CHUYỂN HÓA CỦA CHÚNG TRONG RƢỢU VÀ HUYẾT TƢƠNG NGƢỜI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Chuyên ngành: Hóa Phân Tích Mã số: 60440118 HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Tạ Thị Thảo TS Phạm Quang Trung Hà Nội – 2018 LỜI CÁM ƠN Lời đầu tiên, xin đƣợc thể lòng biết ơn trân trọng tới PGS.TS Tạ Thị Thảo TS Phạm Quang Trung tận tình hƣớng dẫn tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Tôi xin đƣợc gửi lời cảm ơn chân thành tới ban lãnh đạo toàn thể nhân viên Trung tâm Chống Độc – Bệnh viện Bạch Mai, đặc biệt anh chị bạn đồng nghiệp Phòng xét nghiệm – Trung tâm Chống độc giúp đỡ tạo điều kiện cho đƣợc học tập nhƣ làm nghiên cứu suốt thời gian qua Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới thầy giáo giảng dạy khoa Hố Học, trƣờng Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội, đặc biệt thầy cô môn Hố Phân tích nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cám ơn khoa Hóa Pháp – Viện Pháp y Quốc gia giúp đỡ cho tơi hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn anh chị, bạn bè tập thể lớp cao học hoá K27, đặc biệt ngƣời bạn nhóm hố phân tích K27 giúp đỡ, chia sẻ khó khăn suốt q trình tơi học tập thực đề tài Cuối xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè động viên, chia sẻ suốt trình thực luận văn Hà Nội, ngày tháng Học viên Nguyễn Thị Ngân năm 201 MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH 10 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT 12 ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan metanol etanol 1.1.1 Giới thiệu chung metanol etanol 1.1.2 Chuyển hóa metanol etanol thể, chế gây độc 1.1.2.1 Chuyển hóa metanol etanol thể 1.1.2.2 Cơ chế bệnh sinh ngộ độc metanol 1.1.3 Liều gây độc 1.1.4 Triệu chứng ngộ độc metanol 10 1.2 Các phƣơng pháp phân tích metanol, etanol sản phẩm chuyển hóa 11 1.2.1 Các phƣơng pháp phân tích phịng thí nghiệm 11 1.2.2 Các phƣơng pháp xác định nhanh metanol 13 1.2.3 Phƣơng pháp H – NMR 19 1.2.3.1 Nguyên tắc phƣơng pháp phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 19 1.2.3.2 Sơ đồ khối nguyên tắc hoạt động 20 1.2.3.3 Nguyên tắc định tính định lƣợng phổ H - NMR 20 1.2.3.4 Nghiên cứu loại tín hiệu dung mơi nƣớc 21 1.2.3.5 Ƣu nhƣợc điểm phƣơng pháp so với sắc ký 23 1.2.3.6 Một số nghiên cứu định lƣợng phổ H- NMR .23 1.3 Các kỹ thuật tủa protein xử lý mẫu sinh học 25 1.4 Tổng kết chung phần tổng quan 26 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Trang thiết bị hoá chất 28 2.1.1 Hoá chất 28 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ 31 2.2 Đối tƣợng phân tích 32 2.2.1 Chất phân tích 32 2.2.2 Mẫu nghiên cứu 32 2.2.2.1 Loại mẫu 32 2.2.2.2 Chuẩn bị mẫu phân tích 33 2.3 Phƣơng pháp phân tích 33 2.3.1 Phƣơng pháp phân tích quang phổ hấp thụ phân tử 33 2.3.2 Phƣơng pháp thử nhanh metanol 34 2.3.3 Phƣơng pháp định lƣợng metanol, etanol sản phẩm chuyển hóa H – NMR 36 2.3.3.1 Quy trình đo mẫu triệt tiêu dung môi 36 2.3.3.2 Phƣơng pháp định lƣợng theo công thức 36 2.3.3.3 Phƣơng pháp định lƣợng theo đƣờng chuẩn 37 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 3.1 Nghiên cứu xác định nhanh methanol phƣơng pháp (UV - Vis) 38 3.1.1 Khảo sát điều kiện để thử nhanh metanol phƣơng pháp quang 38 3.1.1.1 Lựa chọn thuốc thử tạo phức màu 38 3.1.1.2 Lựa chọn chất oxy hóa 39 3.1.1.3 Xác định bƣớc sóng hấp thụ cực đại 40 3.1.1.4 Ảnh hƣởng lƣợng dung dịch axit chromotropic 0,1% lên độ hấp thụ quang 41 3.1.1.5 Xác định thời gian oxi hóa metanol 42 3.1.1.6 Xác định thời gian tạo phức màu 42 3.1.2 Khoảng tuyến tính đƣờng chuẩn xác định metanol phƣơng pháp đo quang phịng thí nghiệm 43 3.2 Nghiên cứu chế tạo test kit thử nhanh metanol rƣợu 45 3.2.1 Ảnh hƣởng nồng độ etanol 45 3.2.2 Ảnh hƣởng lƣợng chất oxy hóa KMnO4 – H3PO4 46 3.2.3 Xây dựng thành phần kit thử metanol rƣợu 47 3.2.3.1 Ảnh hƣởng chất độn 47 3.2.3.2 Thành phần thuốc thử kit thử methanol rƣợu 48 3.2.4 Ảnh hƣởng thứ tự thêm thuốc thử đến độ hấp thụ quang cuả kít thử metanol rƣợu 48 3.2.5 Khảo sát thời gian ổn định màu phức sử dụng kit thử 49 3.2.6 Ảnh hƣởng hàm lƣợng fomandehit rƣợu 50 3.2.7 Quy trình khoảng hoạt động kít thử nhanh metanol rƣợu .51 3.2.6.1 Chế tạo kít thử metanol rƣợu 51 3.2.6.2 Quy trình thử metanol rƣợu 51 3.2.6.3 Khoảng hoạt động bảng màu kit thử metanol rƣợu 52 3.2.7 Đánh giá độ xác dùng kit thử metanol rƣợu 55 3.3 Xây dựng test kit huyết tƣơng 56 3.3.1 Ảnh hƣởng protein huyết tƣơng 56 3.3.2 Khảo sát ảnh hƣởng lƣợng KMnO4 30g/l lƣợng protein thay đổi 57 3.3.3 Khảo sát thời gian ổn định màu phức sử dụng kit thử metanol huyết tƣơng ngƣời 58 3.3.4 Quy trình xác định khoảng hoạt động xác định metanol huyết tƣơng 59 3.3.5.1 Chế tạo kít thử metanol huyết tƣơng 59 3.3.5.2 Quy trình thử metanol huyết tƣơng 60 3.3.5.3 Khoảng tuyến tính bảng màu kit thử metanol huyết tƣơng 60 3.3.6 Đánh giá độ xác dùng kit thử metanol huyết tƣơng .62 3.4 Nghiên cứu định lƣợng etanol, metanol chất chuyển hóa H– NMR 64 3.4.1 Nghiên cứu ảnh hƣởng dung môi 64 3.4.2 Nghiên cứu định lƣợng chất 65 3.4.2.1 Nhận dạng chất qua phổ H – NMR 65 3.4.3.2 Đƣờng chuẩn khoảng tuyến tính xác định chất H - NMR 67 3.4.4 Nghiên cứu định lƣợng etanol metanol chất chuyển hóa huyết tƣơng ngƣời 71 3.4.4.1 Nhận dạng chất huyết tƣơng không xử lý mẫu qua phổ H – NMR 71 3.4.4.2 Khảo sát phƣơng pháp xử lý mẫu 72 3.4.4.3 Xây dựng đƣờng chuẩn chất mẫu huyết tƣơng 73 3.4.4.4 Xác nhận giá trị sử dụng phƣơng pháp định lƣợng mẫu huyết tƣơng 78 3.5 Áp dụng phân tích mẫu thực tế 79 3.5.1 Mẫu rƣợu 79 3.5.2 Mẫu huyết tƣơng ngƣời 80 KẾT LUẬN 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84 PHỤ LỤC 90 DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Độ hấp thụ quang phức màu thời gian oxi hóa metanol thay đổi 42 Bảng : Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ metanol 44 Bảng 3: Ảnh hƣởng thể tích KMnO4 thay đổi nồng độ etanol 46 Bảng 4: Độ hấp thụ quang chất thêm chất độn etanol .47 Bảng 5: Ảnh hƣởng thứ tự thêm thuốc thử đến độ hấp thụ quang xác định 49 Bảng 6: Độ hấp thụ quang metanol mẫu rƣợu 53 Bảng 7: Độ hấp thụ quang mẫu trắng xác định metanol rƣợu .54 Bảng 8: Độ chụm phƣơng pháp xác định metanol mẫu etanol 55 Bảng 9: Đánh giá độ tái lặp xác định metanol etanol 20% 55 Bảng 10: Độ phƣơng pháp kit thử xác định nhanh methanol rƣợu 56 Bảng 11: Ảnh hƣởng thể tích KMnO4 30 g/l thay đổi lƣợng huyết tƣơng 58 Bảng 12: Độ hấp thụ quang metanol mẫu huyết tƣơng 60 Bảng 13: Độ lặp lại phƣơng pháp xác định metanol mẫu huyết tƣơng 62 Bảng 14: Đánh giá độ tái lặp xác định metanol mẫu huyết tƣơng 63 Bảng 15: Độ kit thử xác định nhanh methanol huyết tƣơng .63 Bảng 16: Độ dịch chuyển hóa học chất 67 Bảng 17: Tỉ lệ diện tích pic chất nồng độ khác 67 Bảng 18: Phƣơng trình hồi quy xác định chất H – NMR 68 Bảng 19: LOD LOQ chất 69 Bảng 20:Nồng độ chất tính theo cơng thức 69 Bảng 21: Phƣơng trình tuyến tính nồng độ thực nồng độ tính theo cơng thức 70 Bảng 22: Độ dịch chuyển hóa học tƣơng ứng chất huyết tƣơng 73 Bảng 23: Tỉ lệ diện tích pic nồng độ khác huyết tƣơng 74 Bảng 24: Phƣơng trình hồi quy xác định chất H – NMR huyết tƣơng 75 Bảng 25: LOD LOQ chất huyết tƣơng 75 Bảng 26:Nồng độ chất huyết tƣơng tính theo cơng thức 76 Bảng 27: Phƣơng trình tuyến tính nồng độ thực nồng độ tính theo công thức 77 Bảng 28: Hiệu suất thu hồi chất mẫu huyết tƣơng 78 Bảng 29: Kết phân tích mẫu rƣợu bệnh nhân 79 Bảng 30:Kết phân tích mẫu huyết tƣơng bệnh nhân 81 DANH MỤC HÌNH Hình 1: Chuyển hóa metanol thể ngƣời Hình 2: Chuyển hóa etanol thể ngƣời Hình 3: Quá trình nhận biết etanol metanol 13 Hình 4: Sơ đồ khối máy NMR 20 Hình 5: Sơ đồ chƣơng trình xung ZGPR 22 Hình 6: Sơ đồ chƣơng trình xung NOESYPR1D 23 Hình 1: Sự thay đổi màu s Hình 2: Ảnh hƣởng ch Hình 3: Độ hấp thụ quang dung dịch phức màu nồng độ metanol khác Hình 4: Độ hấp thụ quang phụ thuộc vào thể tích thuốc thử axit chromotropic 0,1% Hình 5: Ảnh hƣởng thời gian oxi hóa đến độ hấp thụ quang phức màu Hình 6:Ảnh hƣởng thời gian tới độ hấp thụ quang Hình 7: Đƣờng chuẩn xác định metanol với thuốc thử axit chromotropic 0,1% Hình 8: Ảnh hƣởng nồng độ etanol Hình 9: Màu methanol etanol 20% thay đổi chất độn Hình 10: Độ ổn định màu phức theo thời gian Hình 11: Ảnh hƣởng nồng độ HCHO tới màu dung dịch Hình 12: Kít thử methanol rƣợu Hình 13: Quy trình xác định metanol rƣợu Hình 14: Đƣờng chuẩn metanol Hình 15: Bảng màu bán định lƣợng metan Hình 16: Độ ổn định phức màu KẾT LUẬN Với mục tiêu đặt nghiên cứu quy trình xác định nhanh metanol, etanol chất chuyển hóa chúng rƣợu huyết tƣơng, Đề tài đạt đƣợc số kết nhƣ sau -Nghiên cứu chế tạo thành công kit thử phân tích nhanh metanol rƣợu với thuốc thử axit chromotropic 0,1% việc sử dụng KMnO làm chất oxy hóa Khoảng hoạt động kit thử từ 50 – 1185mg/l Nồng độ thấp thấy khác biệt màu sắc 50 mg/l LOD kit thử sử dụng thiết bị UV – Vis 7mg/l LOQ 24mg/l - Tối ƣu hóa đƣợc điều kiện xây dựng kit thử nhanh metanol huyết tƣơng Trong KMnO4 vừa chất oxi hóa metanol vừa chất làm keo tụ protein Nồng độ thấp xác định mắt thƣờng 100mg/l, giới hạn tƣơng đối phù hợp áp dụng định lọc máu với nồng độ thấp có định lọc với bệnh nhân ngộ độc metanol 200mg/l - Xây dựng đƣờng chuẩn chất metanol, etanol, axetandehit, axit fomic axit axetic phƣơng pháp cộng hƣởng tử hạt nhân proton H-NMR , sử dụng chất nội chuẩn IS axit maleic Dung mơi phân tích H 2O:D2O = 9:1 Độ dịch chuyển hóa học chất etanol (∆ = 1,19ppm) metanol (∆ = 3,37ppm), axetandehit (∆ = 1,22 ppm), axit axetic (∆ = 1,96ppm), (∆ = 8,27ppm) Với khoảng tuyến tính rộng 15mg/l – 10800mg/l giới hạn phát thấp - Nghiên cứu thành công việc xây dựng đƣờng chuẩn chất huyết tƣơng Độ dịch chuyển hóa học chất etanol (∆ = 1,04 – 1,00ppm) metanol ((∆ = 3.20ppm) , axit fomic (∆ = 8,08ppm) axit axetic (∆ = 1,93ppm) Mẫu huyết tƣơng đƣợc xử lý dụng dịch TCA 25% để kết tủa protein trƣớc tiến hành phân tích máy Khoảng tuyến tính rộng giới hạn phát thấp 0,68 – 0,91 mg/l - Phân tích mẫu huyết tƣơng bệnh nhân ngộ độc metanol mẫu rƣợu bệnh nhân mang tới Trung tâm Chống độc – Bệnh viện Bạch Mai Mẫu bệnh nhân đƣợc lấy xử lý đem phân tích kit thử nhanh 82 phƣơng pháp H – NMR Kết phân tích đƣợc so sánh với phƣơng pháp GC –FID, cho thấy phƣơng pháp có độ tin cậy tốt Việc xây dựng kit thử nhanh metanol rƣợu huyết tƣơng có ý nghĩa quang trọng việc chẩn đoán đƣa phác đồ điều trị sớm cho bệnh nhân tuyến sở Phƣơng pháp H – NMR cho kết phân tích nhanh với lƣơng mẫu rẻ tiền, phân tích đồng thời nhiều chất Phƣơng pháp thay phần cho phƣơng pháp sắc ký truyền thống 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO TCVN 9637-7:2013,"Ethanol sử dụng công nghiệp - phƣơng pháp thử - phần 7: xác định hàm lƣợng methanol [hàm lƣợng methanol từ 0,01 % đến 0,20 % (theo thể tích)] - phƣơng pháp đo quang" British national formulary : BNF 69 (2015), British Medical Association, 42, 838 Ahmad Y al-Hassan (2001), Science and Technology in Islam: Technology and applied sciences, UNESCO, 65-69 Barceloux D G, Bond G R, Krenzelok E P, Cooper H,Vale J A (2002),"American Academy of Clinical Toxicology practice guidelines on the treatment of methanol poisoning", J Toxicol Clin Toxicol, 40(4), 0731-3810 (Print) & 0731-3810 (Linking), 415-46 Bennett I L., Cary F H., Mitchell G L.,Cooper M N (1953),"Acute methyl alcohol poisoning: a review based on experiences in an outbreak of 323 cases", Medicine, 32(4), 0025-7974 (Print) & 0025-7974 (Linking), 431-63 D.L Rabenstein,D.A Keire (1991), Pract Spectrosc, 11, 323-369 S Geibprasert, M Gallucci,T Krings (2010),"Alcohol-induced changes in the brain as assessed by MRI and CT", Eur Radiol, 20(6), 14321084 (Electronic) & 0938-7994 (Linking), 1492-501 J W Goodman,D S Goldfarb (2006),"The role of continuous renal replacement therapy in the treatment of poisoning", Semin Dial, 19(5), 08940959 (Print) & 0894-0959 (Linking), 402-7 Guang-chouTu, BhushanKapur,Yedy Israel (1992),"Characteristics of a New Urine, Serum, and Saliva Alcohol Reagent Strip", Alcoholism: Clinical and Experimental Research, 16(2), 222 - 227 10 K E Hovda, O H Hunderi, A B Tafjord, O Dunlop, N Rudberg,D Jacobsen (2005),"Methanol outbreak in Norway 2002-2004: epidemiology, clinical features and prognostic signs", J Intern Med, 258(2), 0954-6820 (Print) & 0954-6820 (Linking), 181-90 11 IPCS (1997),"Health and Safety guide No 105: Methanol", World Heath Organization: Geneva, 105 12 Jai Moo Shin, George Sachs,Jeffrey A Kraut (2008),"Simple diagnostic tests to detect toxic alcohol intoxications", Translational Research 152(4), 194-201 13 Lewis R Goldfrank ,Neal E Flomenbaum (2008),"Toxic alcohols", Toxicologic Emergency 6th edition, 64, 1051-1070 14 M.L Martin, G.J Martin,J.-J Delpeuch (1980), Practical NMR Spectroscopy: Practical Aspects of Intensity Measurement and Quantitative Analysis, Heyden & Sons, ed, Chapter 9, London 15 Micromedex (2012), Methanol poisoning, Thomsonhc.com/micromedex2/librarian/PDFdefaultActionId/evidenceexpert Int, 1-96 84 16 R Paasma, K E Hovda, A Tikkerberi,D Jacobsen (2007),"Methanol mass poisoning in Estonia: outbreak in 154 patients", Clin Toxicol, 45(2), 1556-3650 (Print) & 1556-3650 (Linking), 152-7 17 Prashant Laxman Kole, Gantala Venkatesh, Jignesh Kotechac,Ravi Sheshalad (2011),"Recent advances in sample preparation techniques for effective bioanalytical methods", Biomedical Chromatography, 25, 199-217 18 S Lakshmana Prabu,T N K Suriyaprakash (2012), Appliedbiologicalengineering-principles-and-practice/extraction-of-the-drug from-thebiological-matrix, Chapter 21:Extraction of Drug from the Biological Matrix: A Review, truy cập ngày 9/9/2017, web http://www.intechopen.com.ololo.sci-hub.cc/books/applied-biologicalengineering-principles-and-practice/extraction-of-the-drug-from-thebiological-matrix 19 P Sharma,R Sharma (2011),"Toxic optic neuropathy", Indian J Ophthalmol, 59(2), 1998-3689 (Electronic) and 0301-4738 (Linking), 13741 20 S R Smith, S J Smith,B M Buckley Combined formate and lactate acidosis in methanol poisoning, Lancet 1981 Dec 5;2(8258):1295-6 21 Terken Baydar and et al (1995),"A method for the specific determination of Methanol on plasma", Pharmaceutical Sciences, 1, 345347 22 The Economist (2003), Liquid fire - The Arabs discovered how to distil alcohol They still it best, say some, 13/09/2017 23 Thomas J Mangos,Michael J Haas (1996),"Enzymatic Determination of Methanol with Alcohol Oxidase, Peroxidase, and the Chromogen 2,2′Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) and Its Application to the Determination of the Methyl Ester Content of Pectins", J Agric Food Chem, 44, 2977−2981 24 Jame F Winchester (1998), Methanol, Isopropyl Alcohol, Higher Alcohols, Ethylen Glycol, Cellosolves, Acetone and Oxalate, clinical management of poisoning and drug overdose 3rd edition, 35, 491-505 25 Zuccotti, Gian Vincenzo, Fabiano,Valentina (2011),"Safety issues with ethanol as an excipient in drugs intended for pediatric use", Expert Opinion on Drug Safety, 10(4), 499-502 26 Andrea C Gigante, Mara A Gotardo, Joao O Tognolli, Leonardo Pezza,Helena R Pezza (2004),"Spectrophotometric determination of formaldehyde with chromotropic acid in phosphoric acid medium assisted by microwave oven", Microchemical Journa, 77, 47 - 51 27 AOAC (1995),"AOAC Official Methods of Analysis", AOAC, Arlington, Va, USA 28 Artur Rydosz, Erwin Maciak, Krzysztof Wincza,Slawomir Gruszczynski (2016),"Microwave-based sensors with phthalocyanine films for acetone, ethanol and methanol detection", Sensors and Actuators B: Chemical, http://dx.doi.org/10.1016/j.snb.2016.06.168 85 29 Brett J Savary,Alberto Nuñez (2003),"Gas chromatography–mass spectrometry method for determining the methanol and acetic acid contents of pectin using headspace solid-phase microextraction and stable isotope dilution", Journal of Chromatography A, 1017, 151 - 159 30 C.W Lin, B.J Hwang,C.R Lee (1998),"Methanol sensors based on the conductive polymer composites from polypyrrole and poly (vinyl alcohol)", Materials Chemistry and Physics 55, 139-144 31 Xialin Chen, Yujie Guo, Yuanjia Hu, Boyang Yu,Jin Qi (2016),"Quantitative analysis of highly similar salvianolic acids with 1H qNMR for quality control of traditional Chinese medicinal preparation Salvianolate Lyophilized Injection", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 124, https://doi.org/10.1016/j.jpba.2016.02.016, 07317085, 281-287 32 Chi Hung Tzang, Ruo Yuan,Mengsu Yang (2001),"Voltammetric biosensors for the determination of formate and glucose-6-phosphate based on the measurement of dehydrogenase-generated NADH and NADPH", Biosensors & Bioelectronics, 16(3), 211-219 33 Nicola D'Amelio, Elisabetta De Angelis, Luciano Navarini, Elisabetta Schievano,Stefano Mammi (2013),"Green coffee oil analysis by high-resolution nuclear magnetic resonance spectroscopy", Talanta, 110, https://doi.org/10.1016/j.talanta.2013.02.024, 0039-9140, 118-127 34 Deog-Su Park, Mi-Sook Won, Rajendra N Goyal,Yoon-Bo Shim (2012),"The electrochemical sensor for methanol detection using silicon epoxy coated platinum nanoparticles", Sensors and Actuators B: Chemical, 174, 45-50 35 Dethlefs R.,Naraqi S (1978),"Ocular manifestations and complications of acute methyl alcohol intoxication", Med J Aust, 2(10), 0025-729X (Print) 0025-729X (Linking), 483-5 36 Dominik R Haudenschild, Angela Eldridge, Pamela J Lein,Brett A Chromy (2014),"High abundant protein removal from rodent blood for biomarker discovery", Biochemical and Biophysical Research Communications, 455, 84 - 89 37 Elisangela F Boffo, Leila A Tavares, Antonio C.T Tobias, Márcia M.C Ferreira,Antonio G Ferreira (2012),"Identification of components of Brazilian honey by H NMR and classification of its botanical origin by chemometric methods", LWT - Food Science and Technology, 49, 55 - 63 38 Gloria del Campo, Inaki Berregi, Raúl Caracena,Juan Zuriarrain (2010),"Quantitative determination of caffeine, formic acid, trigonelline and 5-(hydroxymethyl)furfural in soluble coffees by 1H NMR spectrometry", Talanta, 81, 367 - 371 39 Guang-Chao Zhuang, Yu-Shih Lin, Marcus Elvert, Verena B Heuer,Kai-Uwe Hinrichs (2014),"Gas chromatographic analysis of methanol and ethanol in marine sediment pore waters: Validation and implementation of three pretreatment techniques", Marine Chemistry, 160, 82 -90 86 40 Hack et al (2000),"The Utility of an Alcohol Oxidase Reaction Test to Expedite the Detection of Toxic Alcohol Exposures", ALCOHOL OXIDASE REACTION TEST, 7(3), 295 - 297 41 Monika Hohmann, Christine Felbinger, Norbert Christoph, Helmut Wachter, Johannes Wiest,Ulrike Holzgrabe (2014),"Quantification of taurine in energy drinks using 1H NMR", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 93, https://doi.org/10.1016/j.jpba.2013.08.046, 07317085, 156-160 42 Inaki Berregi, Gloria del Campo, Raul Caracena,Jose Ignacio Miranda (2007),"Quantitative determination of formic acid in apple juices by 1H NMR spectrometry", Talanta, 72, 1049 - 1053 43 Ismail Hakki Boyaci, Hüseyin Efe Genis, Burcu Guven, Ugur Tamer,and Neslihan Alper (2012),"A novel method for quantification of ethanol and methanol in distilled alcoholic beverages using Raman spectroscopy", J Raman Spectrosc , DOI: 10.1002/jrs.3159 44 Jason B Hack, Jacqueline Early,Kori L Brewer (2007),"An Alcohol Oxidase Dipstick Rapidly Detects Methanol in the Serum of Mice", ACAD EMERG MED, 14(12), 1130 - 1134 45 Julien A Jendral, Yulia B Monakhova,Dirk W Lachenmeier (2011),"Formaldehyde in Alcoholic Beverages: Large Chemical Survey Using Purpald Screening Followed by Chromotropic Acid Spectrophotometry with Multivariate Curve Resolution", International Journal of Analytical Chemistry, 2011, 10.1155/2011/797604, 1-11 46 Shigetoshi Kage, Keiko Kudo, Hideaki Ikeda,Noriaki Ikeda (2004),"Simultaneous determination of formate and acetate in whole blood and urine from humans using gas chromatography–mass spectrometry", Journal of Chromatography B, 805(1), https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2004.02.029, 1570-0232, 113-117 47 Kenny Kuchta, Jutta Ortwein, Lothar Hennig,Hans Wilhelm Rauwald (2014),"1H-qNMR for direct quantification of stachydrine in Leonurus japonicus and L cardiaca", Fitoterapia, 96, https://doi.org/10.1016/j.fitote.2014.03.023, 0367-326X, 8-17 48 Laura O Péres, Rosamaria W.C Li, Elaine Y Yamauchi, Renata Lippi,Jonas Gruber (2012),"Conductive polymer gas sensor for quantitative detection of methanol in Brazilian sugar-cane spirit", Food Chemistry, 130, 1105 - 1107 49 Lei Jiang, Lin He,Michael Fountoulakis (2004),"Comparison of protein precipitation methods for sample preparation prior to proteomic analysis", Journal of Chromatography A, 1023, 317 - 320 50 Mei-Ling Wang, Jih-Terng Wang,Youk-Meng Choong (2004),"A rapid and accurate method for determination of methanol in alcoholic beverage by direct injection capillary gas chromatography", Journal of Food Composition and Analysis, 17, 187 - 196 87 51 Nairui Liu, Xiaoli Tian,Yu Sha (2009),"A Simple Method for Measuring Methanol Content in Gas Field Wastewater", IEEE, 1-4 52 Naser Nejadi, Setareh Mohammadpoor Masti, Mostafa Rezaei Tavirani, Taghi,Golmohammadi (2014),"Comparison of three routine protein precipitation methods: acetone, TCA/acetone wash and TCA/acetone.", Journal of Paramedical Sciences (JPS) 5(4), ISSN 2008-4978, 58 -60 53 Nguyen The Anh, Vu Truong Giang, Nguyen Thi Lan, Pham Quang Trung,Ta Thi Thao (2017),"Classification and identification of vietnamese honeys using chemometrics based on 1H-NMR data", The 5th Analytica Vietnam Conference Proceedings, 4-13 54 P Pantu˚ckovˇa, P Kub´a´n,P Boˇcek (2013),"Supported liquid membrane extraction coupled in-line to commercial capillary electrophoresis for rapid determination of formate in undiluted blood samples", Journal of Chromatography A, http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2013.05.058 55 Jianyang Pan, Xingchu Gong,Haibin Qu (2013),"Quantitative 1H NMR method for hydrolytic kinetic investigation of salvianolic acid B", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 85, https://doi.org/10.1016/j.jpba.2013.06.020, 0731-7085, 28-32 56 Pedro Afonso de Paula Pereira, Eliane Teixeira Sousa Santos, Tatiana de Freitas Ferreira,Jailson B de Andrade (1999),"Determination of methanol and ethanol by gas chromatrography following air sampling onto florisil cartridges and their concentrations at urban sites in the three largest cities in Brazil", Talanta, 49, 245–252 57 Polyana F Pereira, Raquel M.F Sousa, Rodrigo A.A Munoz,Eduardo M Richter (2013),"Simultaneous determination of ethanol and methanol in fuel ethanol using cyclic voltammetry", Fuel, 103, 725 729 58 Shigetoshi Kage, Keiko Kudo, Hideaki Ikeda,Noriaki Ikeda (2004),"Simultaneous determination of formate and acetate in whole blood and urine from humans using gas chromatography–mass spectrometry", Journal of Chromatography B, 805, 113 - 117 59 Andrey Shishov, Anastasia Penkova, Andrey Zabrodin, Konstantin Nikolaev, Maria Dmitrenko, Sergey Ermakov,Andrey Bulatov (2016),"Vapor permeation-stepwise injection simultaneous determination of methanol and ethanol in biodiesel with voltammetric detection", Talanta, 148(Supplement C), https://doi.org/10.1016/j.talanta.2015.05.041, 666-672 60 Christina Skiera, Panagiotis Steliopoulos, Thomas Kuballa, Bernd Diehl,Ulrike Holzgrabe (2014),"Determination of free fatty acids in pharmaceutical lipids by 1H NMR and comparison with the classical acid value", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 93, https://doi.org/10.1016/j.jpba.2013.04.010, 0731-7085, 43-50 61 Hana Vaskova (2012),"Quantitative Evaluation of Methanol Content in Beverages Based on Raman Spectral Data", Mathematics and Computers in Biology and Biomedical Informatics, ISBN: 978-960-474-333-9, 81-85 88 62 Jame Winchester (2008),"Extracorporeal removal of toxic substances ", critical Care Toxicology, 7, 65-67 63 Y.-L Li, J Liu,W.-S Guan (2009),"Determination of trace formaldehyde in alcoholic beverages by chromotropic acid spectrophotometry", in Proceedings of the 3rd International Conference on Bioinformatics and Biomedical Engineering(ICBBE ’09), p 1, IEEE Xplore, Beijing, China 64 Nael G Yasri, Hasan Seddik,Maha A Mosallb (2015),"Spectrophotometric determination of formaldehyde based on the telomerization reaction of tryptamine", Arabian Journal of Chemistry, 8(4), https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2011.02.005, 1878-5352, 487-494 65 Yi-Yun Chen, Shu-Yu Lin, Yuh-Ying Yeh, He-Hsuan Hsiao, Chi-Yue Wu, Shui-Tsung Chen,Andrew H.-J Wang (2005),"A modified protein precipitation procedure for efficient removal of albumin from serum", Electrophoresis, 26, 2117–2127 66 Jianping Zhao, Mei Wang, Bharathi Avula,Ikhlas A Khan (2018),"Detection and quantification of phenethylamines in sports dietary supplements by NMR approach", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 151, https://doi.org/10.1016/j.jpba.2018.01.025, 0731-7085, 347355 67 Ziwei Li, Hongbing Ma, Huihui Lu,Guanhong Tao (2008),"Determination of formaldehyde in foodstuffs by flow injection spectrophotometry using phloroglucinol as chromogenic agent", Talanta, 74, 788 - 792 89 PHỤ LỤC 0,5 ml 1,0ml KMnO4 + metanol – H3PO4 90 Huyết tƣơng trắng 0,5 ml 0,5ml KMnO4 + metanol – H3PO4 91 Huyết tƣơng trắng ml 0,4ml KMnO4 + metanol – H3PO4 92 ... - NGUYỄN THỊ NGÂN XÁC ĐỊNH METANOL, ETANOL VÀ CÁC SẢN PHẨM CHUYỂN HÓA CỦA CHÚNG TRONG RƢỢU VÀ HUYẾT TƢƠNG NGƢỜI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Chun ngành: Hóa Phân Tích Mã số: 6044011 8 HƢỚNG DẪN... cần phải phân tích định lƣợng đƣợc metanol, etanol sản phẩm chuyển hóa chúng sử dụng etanol làm chất giải độc Các phƣơng pháp định lƣợng metanol, etanol sản phẩm chuyển hóa chúng mẫu sinh học... dehydrogenase, axetadehid đƣợc chuyển hóa thành axit axetic Sản phẩm cuối dãy chuyển hóa CO2 nƣớc Hình 2: Chuyển hóa etanol thể người Tốc độ chuyển hóa etanol nhanh tốc độ chuyển hóa metanol gấp lần tồn