Mức độ ô nhiễm E. coli và Salmonella trong thịt lợn bày bán tại chợ trung tâm thành phố Việt Trì

Để kiểm tra chỉ tiêu vi sinh vật E.coli và Salmonella, tiến hành lấy 80 mẫu thịt lợn tại 10 quầy hàng tại chợ Trung tâm thành phố Việt Trì tỉnh Phú Thọ. Sử dụng phương pháp cấy láng trên thạch và kiểm tra đặc tính sinh hóa.

KHOA HỌC NÔNG - LÂM NGHIỆP MỨC ĐỘ Ô NHIỄM E coli VÀ Salmonella TRONG THỊT LỢN BÀY BÁN TẠI CHỢ TRUNG TÂM THÀNH PHỐ VIỆT TRÌ Hồng Thị Phương Thúy, Nguyễn Thị Quyên, Hoàng Thị Hồng Nhung, Trần Thị Ngọc Diệp Khoa Nông - Lâm - Ngư, Trường Đại học Hùng Vương TÓM TẮT Để kiểm tra tiêu vi sinh vật E.coli Salmonella tiến hành lấy 80 mẫu thịt lợn 10 quầy hàng chợ Trung tâm thành phố Việt Trì tỉnh Phú Thọ Sử dụng phương pháp cấy láng thạch kiểm tra đặc tính sinh hóa Kết cho thấy: E.coli: Có 76 mẫu đạt chiếm tỷ lệ 95%; mẫu không đạt chiếm tỷ lệ 5% Tỷ lệ nhiễm trung bình 17,36 vk/g Salmonella: Có 75 mẫu đạt chiếm tỷ lệ 93,75%; mẫu không đạt chiếm tỷ lệ 6,25% Tỷ lệ nhiễm trung bình 5,34 vk/g Key: E.coli, Salmonella, Chợ Trung tâm TP Việt Trì I Đặt vấn đề II Mục tiêu Nước ta thời kỳ hội nhập phát triển, sống người dân ngày cải thiện nâng cao nên nhu cầu sử dụng thực phẩm sản phẩm có chất lượng cao thịt, cá…Trong thịt lợn nguồn thức ăn hàng đầu người tiêu dùng số sản phẩm thịt Năm 2014 nhu cầu thịt lợn Việt Nam vào khoảng 2,245 triệu tấn, tăng 1,8% so với năm 2013 Điều tạo điều kiện thuận lợn cho chăn nuôi phát triển Tuy nhiên vấn đề đặt nhu cầu tăng nhanh, nhà sản xuất muốn cung cấp nhiều sản phẩm thị trường sản phẩm có đảm an tồn thực phẩm hay không? Đây điều mà xã hội ngày quan tâm Việt Trì thành phố đơ thị loại trực thuộc tỉnh Phú Thọ Thành phố thời kỳ phát triển dịch vụ, du lịch cội nguồn, đồng thời cửa ngõ vùng Tây Bắc, đầu mối giao thông nối tỉnh trung du miền núi phía bắc với thủ đô Hà Nội tỉnh đồng Bắc Tuy nhiên, Việt Trì hoạt động chăn ni chủ yếu gia trại, nhỏ lẻ, manh mún Thực phẩm cung cấp cho chợ chủ yếu vận chuyển từ huyện, thành phố lân cận Trong chợ Trung tâm Thành phố Việt Trì chợ đầu mối thành phố Nguồn hàng chuyển vô phong phú, đa Chính nên việc kiểm tra chất lượng thịt đảm bảo vệ sinh an tồn thực thực phẩm khó khăn Đánh giá mức độ an toàn vệ sinh thực phẩm tiêu vi sinh vật: E.coli Salmonella 82 III Nội dung phương pháp nghiên cứu 3.1 Nội dung nghiên cứu Phân lập, xác định số lượng giám định đặc tính sinh hóa E.coli thịt lợn lấy chợ Trung tâm thành phố Việt Trì Phân lập, xác định số lượng giám định đặc tính sinh hóa Salmonella thịt lợn lấy chợ Trung tâm thành phố Việt Trì 3.2 Phương pháp nghiên cứu 3.2.1 Phương pháp lấy mẫu Theo TCVN 4833-2002: Dụng cụ lấy mẫu, vật chứa phải sạch, vô trùng không ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật sản phẩm Lấy đơn vị mẫu với khối lượng từ 30gr - 40gr Nhiệt độ bảo quản mẫu từ 20C-40C, kiểm tra vòng 24 3.2.2 Phương pháp xét nghiệm * Phương pháp xét nghiệm tổng số vi khuẩn E.coli Salmonella: - Bước 1: Chuẩn bị mẫu thử pha loãng mẫu: Cân 25g mẫu, tiến hành cắt nhỏ, nghiền nát bổ sung 225 ml nước sinh lý để nồng độ 10-1, tiếp tục pha loãng thành nồng độ 10-2 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ • Số (1) - 2015 KHOA HỌC NÔNG - LÂM NGHIỆP - Bước 2: Hút 0,1 ml dung dịch pha loãng nồng độ 10-1, 10-2 vào đĩa thạch EMB SS chuẩn bị trước, sử dụng phương pháp cấy láng thạch Sau cấy láng, để tủ ấm 24 N= ∑C V ( N1 + 0,1n ) d - Bước 3: Tính kết theo công thức: Σ C: Tổng số khuẩn lạc đặc trưng đếm đĩa chọn V: Thể tích chất cấy sử dụng đĩa n1, n2: Số đĩa hai độ pha loãng liên tiếp chọn thứ 1, thứ d: Hệ số pha loãng đậm độ pha loãng chọn thứ * Kiểm tra đặc tính sinh hóa Chúng tơi tiến hành kiểm tra đặc tính lên men đường Lactose, mantose, glucose, galactose thử loại phản ứng sinh Idol, sinh H2S, MR, VP, Citrat theo phương pháp thường quy phịng thí nghiệm 3.2.3 Phương pháp xử lý số liệu Các số liệu thu xử lý phần mềm Excel 2013 IV Kết thảo luận 4.1 Kết phân lập, xác định số lượng giám định đặc tính sinh hóa E.coli thịt lợn TCVN 7046-2002 quy định giới hạn số lượng vi khuẩn E.coli 1g thịt ≤ 102 vk/g Kết kiểm tra 80 mẫu thịt lợn chợ Trung tâm thành phố Việt Trì thể bảng Bảng 1: Kết kiểm tra mức độ nhiễm E.coli thịt lợn Quầy lấy mẫu Mức độ ô nhiễm TB (vk/g) Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy 10 Đánh giá chung 66,48 2,5 16,25 6,25 45,85 6,25 17,5 7,5 17,36 Đánh giá (Địa điểm thu mẫu) Tỷ lệ đạt Không đạt (%) (>102 vk/g) 87,5 100 100 100 100 75 100 100 87,5 100 95 Đạt (≤102 vk/g) 8 8 8 76 Tỷ lệ không đạt (%) 12,5 0 0 25 0 12,5 Theo bảng ta thấy, có 76 mẫu đạt tiêu chuẩn chiếm tỷ lệ 95%, mẫu không đạt tiêu chuẩn tỷ lệ chiếm 5% Mức độ nhiễm E.coli trung bình thịt lợn 17,36 vk/g Trong 10 quầy lấy mẫu tỷ lệ nhiễm E.coli khác nhau, thể rõ qua đồ thị số Quầy số có mẫu khơng đạt chiếm tỷ lệ cao 25% Quầy số số có mẫu khơng đạt chiếm tỷ lệ 12,5% Các quầy số 2, số 3, số 5, số 7, số 8, số số 10 100% số mẫu kiểm tra đạt tiêu chuẩn vệ sinh an toàn thực phẩm tiêu E.coli Kết kiêm tra đặc tính sinh hóa chủng E.coli phân lập thể qua bảng 2, bảng Đồ thị 1: Tỷ lệ nhiễm E.coli quầy xét nghiệm Tạp chí Khoa học Cơng nghệ • Số (1) - 2015 83 KHOA HỌC NÔNG - LÂM NGHIỆP Bảng 2: Kết xác định đặc tính sinh hóa chủng E.coli phân lập TT Loại phản ứng Indol MR VP Citrat H 2S Số chủng dương tính/ Tổng số chủng kiểm tra 28/28 28/28 0/28 0/28 0/28 Tỷ lệ (%) 100 100 0 Qua bảng cho thấy tất chủng E.coli dương tính với phản ứng sinh Indol, MR âm tính với phản ứng VP, Citrat, sinh H2S Qua bảng ta thấy tỷ lệ lên men đường Lactose, Glucose chủng E.coli 100% Phản ứng lên men đường Mantose, Galactose có mẫu âm tính với tỷ lệ thấp 7,14%; 10,71% Như vậy, chủng E.coli phân lập có đặc tính sinh hóa điển hình E.coli 4.2 Kết phân lập, xác đinh số lượng giám định đặc tính sinh hóa Salmonella Bảng 3: Đặc tính lên men đường số Theo FAO TCVN-2002 để đảm bảo sức khỏe chủng E.coli kiểm tra người tiêu dùng, yêu cầu đặt cho tất loại thực phẩm khơng có mặt vi khuẩn Salmonella Số chủng dương 25g Tuy nhiên mẫu thịt xét nghiệm cịn TT Loại đường tính/ Tổng số Tỷ lệ (%) xuất Salmonella Kết cụ thể trình chủng kiểm tra bày bảng Qua kết luận rằng, 80 Lactose 28/28 100 mẫu thịt lợn xét nghiệm chợ trung tâm thành phố Mantose 26/28 92,86 Việt trì tỉnh Phú thọ có 75 mẫu đạt tiêu chuẩn Glucose 28/28 100 tiêu Salmonella chiếm tỷ lệ 93,75%, mẫu không đạt Galactose 25/28 89,29 tiêu chuẩn chiếm tỷ lệ 6,25% Bảng 4: Kết kiểm tra mức độ nhiễm Salmonella thịt lợn Quầy lấy mẫu Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy Quầy 10 Đánh giá chung Mức độ ô nhiễm TB (vk/g) 30,68 3,13 18,31 0 0 1,25 5,34 Trong cửa hàng lấy mẫu có tỷ lệ nhiễm khác nhau, thể rõ qua đồ thị Trong 10 quầy hàng lấy mẫu xét nghiệm quầy có mẫu khơng đạt tiêu Salmonella chiếm tỷ lệ cao 25% Quầy số 1, số số có mẫu khơng đạt chiếm tỷ lệ 12,5% Các quầy lại mẫu xét nghiệm đảm bảo khơng có xuất vi khuẩn Salmonella đánh giá đạt tiêu chuẩn vệ sinh an toàn thực phẩm tiêu Salmonella Kết kiểm tra đặc tính sinh hóa chủng Salmonella phân lập thể qua bảng bảng 84 Đạt (≤102 vk/g) 7 8 8 8 75 Đánh giá (Địa điểm thu mẫu) Tỷ lệ đạt Không đạt (%) (>102 vk/g) 87,5 87,5 100 75 100 100 100 100 87,5 100 93,75 Tỷ lệ không đạt (%) 12,5 12,5 25 0 0 12,5 6,25 Đồ thị 2: Tỷ lệ nhiễm Salmonella quầy xét nghiệm Tạp chí Khoa học Cơng nghệ • Số (1) - 2015 KHOA HỌC NÔNG - LÂM NGHIỆP Bảng 5: Kết xác định đặc tính sinh hóa chủng Salmonella phân lập TT Loại phản ứng Số chủng dương tính/ Tổng số chủng kiểm tra Tỷ lệ (%) Indol 0/5 MR 5/5 100 VP 0/5 Citrat 5/5 100 H 2S 5/5 100 V Kết luận Từ kết nghiên cứu mức độ ô nhiễm vi khuẩn thịt lợn quầy bán thịt chợ Trung tâm thành phố Việt Trì Chúng tơi, rút số kết luận: Mức độ ô nhiễm E.coli: có tổng số 80 mẫu khơng đạt chiếm tỷ lệ 5% Trong quầy hàng số có mẫu khơng đạt chiếm tỷ lệ cao 25% Mức độ ô nhiễm Salmonella: có tổng số 80 mẫu khơng đạt chiếm tỷ lệ 6,25% Trong quầy hàng số có mẫu không đạt chiếm tỷ lệ cao 25% Đặc điểm sinh học chủng E.coli, Salmonella phân lập từ thịt lợn có đặc tính đặc trưng chủng gốc Bảng 6: Đặc tính lên men đường chủng Salmonella kiểm tra TT Loại đường Số chủng dương tính/ Tổng số chủng kiểm tra Tỷ lệ (%) Lactose 0/5 Mantose 4/5 80 Glucose 5/5 100 Galactose 4/5 80 Tài liệu tham khảo Qua bảng kết xác định phản ứng sinh hóa tất chủng Salmonella phân lập có phản ứng Indol, VP âm tính; phản ứng MR, phản ứng Citrat, sinh H2S dương tính Qua bảng ta thấy 100% chủng Salmonella phân lập không lên men đường Lactose, 100% lên men đường Glucose 80% chủng Salmonella lên men đường Mantose Galactose Như vậy, chủng Salmonella phân lập có đặc tính sinh hóa đặc trưng vi khuẩn Salmonella Bộ Y tế (2005) Các văn pháp qui phạm pháp luật vệ sinh an toàn thực phẩm, tập 1, NXB Y học, Hà Nội Tiêu chuẩn Việt Nam (2002) Thịt sản phẩm thịt, lấy mẫu chuẩn bị mẫu thử, TCVN - 4833 Trần Đáng (2005) Vệ sinh an toàn thực phẩm, NXB Y học, Hà Nội Đỗ Ngọc Thúy, Cù Hữu Phú, Văn Thị Hường, Đào Thị Hảo, Nguyễn Xuân Huyên Nguyễn Bạch Huệ (2006) Đánh giá tình hình nhiễm số loại vi khuẩn gây bệnh thịt tươi địa bàn Hà Nội, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tập VIII, số - 2006, tr.48 - 54 Tô Liên Thu (2005) Nghiên cứu trạng ô nhiễm sô vi khuẩn thịt lợn, thịt gà Hà Nội áp dụng biện pháp hạn chế phát triển chúng, Luận án Tiến sỹ khoa học Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc Gia SUMMARY DETERMINE THE CONTAMINATION OF E.coli AND Salmonella IN PORK SOLD AT VIET TRI CENTRAL MARKET Hoang Thi Phuong Thuy, Nguyen Thi Quyen, Hoang Thi Hong Nhung, Tran Thi Ngoc Diep Faculty of Agriculture - Forestry - Aquaculture, Hung Vuong University To examine microoganism indices of E.coli and Salmonella, we took 80 samples of pork from 10 meat stalls at Viettri Central Market, Phu Tho Province We used the plante count agar method and checked some biological characteristics The result showed that: E.coli: 76 qualified samples, making up 95%; unqualified samples, 5%; infection rate averaging at 17.36 vk/g Salmonella: 75 qualified samples, making up 93.75%; unqualified samples, 6.25%; infection rate averaging at 5.34 vk/g Keywords: E.coli, Salmonella, Viettri Central Market Tạp chí Khoa học Cơng nghệ • Số (1) - 2015 85 ... nghiên cứu mức độ ô nhiễm vi khuẩn thịt lợn quầy bán thịt chợ Trung tâm thành phố Việt Trì Chúng tơi, rút số kết luận: Mức độ nhiễm E .coli: có tổng số 80 mẫu không đạt chiếm tỷ lệ 5% Trong quầy... hóa E .coli thịt lợn TCVN 7046-2002 quy định giới hạn số lượng vi khuẩn E .coli 1g thịt ≤ 102 vk/g Kết kiểm tra 80 mẫu thịt lợn chợ Trung tâm thành phố Việt Trì thể bảng Bảng 1: Kết kiểm tra mức độ. .. 95%, mẫu không đạt tiêu chuẩn tỷ lệ chiếm 5% Mức độ nhiễm E .coli trung bình thịt lợn 17,36 vk/g Trong 10 quầy lấy mẫu tỷ lệ nhiễm E .coli khác nhau, thể rõ qua đồ thị số Quầy số có mẫu không đạt