Nghiên cứu chiết rút phlorotannin từ rong mơ sagassum oligocystum thu mẫu tại ninh thuận

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM NGUYỄN THỊ BÍCH LỢI NGHIÊN CỨU CHIẾT RÚT PHLOROTANNIN TỪ RONG MƠ SARGASSUM OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (Ngành: Công nghệ thực phẩm) CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: 1) ThS Nguyễn Thị Mỹ Trang 2) TS Đặng Xuân Cường Nha Trang – Năm: 2017 i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành Đồ án này, Trước hết, xin chân thành cảm ơn tới Ban Giám hiệu Trường Đại học Nha Trang, Ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ thực phẩm, Phòng Đào tạo niềm kính trọng, tự hào học tập Trường năm qua Lòng biết ơn sâu sắc xin giành cho thầy: PGS TS Vũ Ngọc Bội - Trưởng khoa Công nghệ thực phẩm, ThS Nguyễn Thị Mỹ Trang - Bộ môn Công nghệ thực phẩm, TS Đặng Xuân Cường - Viện Nghiên cứu Ứng dụng Công nghệ Nha Trang, tận tình hướng dẫn tài trợ kinh phí suốt trình thực Đồ án Tôi xin chân thành cảm ơn quý thầy cô Khoa Công nghê thực phẩm cán quản lý phòng thí nghiệm - Trung tâm Thực hành Thí nghiệm tận tình bảo dạy dỗ suốt thời gian học tập nghiên cứu trường Đặc biệt, xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cha mẹ gia đình tạo điều kiện cho học tập xin ghi nhớ giúp đỡ bạn bè động viên giúp đỡ thời gian nghiên cứu Nha Trang, ngày… tháng… năm… Người thực Nguyễn Thị Bích Lợi ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN I DANH MỤC VIẾT TẮT .VI DANH MỤC BẢNG VII DANH MỤC HÌNH VIII MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ RONG MƠ 1.1.1 Giới thiệu rong mơ 1.1.2 Đặc điểm hình thái rong mơ 1.1.3 Thành phần hóa học rong mơ 1.1.3.1 Sắc tố 1.1.3.2 Glucid 1.1.3.3 Protein 10 1.1.3.4 Chất khoáng 10 1.2 PHLOROTANNIN VÀ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG 11 1.2.1 Cấu tạo pholorotannin………………………………………………… 12 1.2.2 Hoạt tính sinh học phlorotannin 14 1.2.3 Ứng dụng phlorotannin: 15 1.2.4 Tình hình nghiên cứu Phlorotannin 15 1.2.4.1 Tình hình nghiên cứu phlorotannin Thế giới 15 1.2.4.2 Tình hình nghiên cứu phlorotannin Việt Nam 17 1.3 KỸ THUẬT CHIẾT RÚT MỘT SỐ CHẤT SINH HỌC TỪ RONG MƠ 19 1.3.1 Cơ sở trình chiết 19 1.3.2 Chọn dung môi chiết 19 1.3.3.1 Chiết phương pháp ngấm kiệt (Percolation) 23 iii 1.3.3.2 Chiết phương pháp ngâm dầm (Maceration) 23 1.3.3.3 Tách chiết phương pháp chiết hồi lưu 23 1.3.3.4 Chiết phương pháp lôi nước 24 1.3.3.5 Chiết phương pháp có hỗ trợ sóng siêu âm 24 1.3.4 Một số phương pháp khác 24 1.3.4.1 Chiết chất chất lỏng siêu tới hạn (Supercritical fluid extraction) 24 1.3.4.2 Phương pháp sử dụng lượng lò vi sóng 25 1.3.4.3 Dùng chất lỏng ion 26 1.3.4.4 Sử dụng enzyme 26 1.3.4.5 Sử dụng áp lực thủy tĩnh cao (HHP) 27 1.3.5 PHƯƠNG PHÁP KHUẾCH TÁN “LÀM GIẦU”: 27 1.4 MỘT SỐ QUÁ TRÌNH XẢY RA TRONG KHI CHIẾT 28 1.4.1 Quá trình khuếch tán 28 1.4.1.1 Khuếch tán phân tử: 29 1.4.1.2 Khuếch tán đối lưu: 30 1.4.2 Quá trình thẩm thấu 30 1.4.3 Quá trình thẩm tích 31 1.5 CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH CHIẾT 31 1.6 TÌM HIỂU MỘT SỐ DUNG MÔI SỬ DỤNG 32 1.6.1 Nước 32 1.6.2 Etanol 33 CHƯƠNG II.NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 NGUYÊN LIỆU 34 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.2.1 Phương pháp phân tích 35 2.2.1.1 Phương pháp định lượng phlorotannin 35 2.2.1.2 Phương pháp xác định hoạt tính chống oxy hóa 35 iv 2.2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 36 2.2.2.1 Phương pháp tiếp cận nội dung nghiên cứu 36 2.2.3 Bố trí thí nghiệm 38 2.2.3.1 Xác định thời gian chiết 38 2.2.3.2 Bố trí thí nghiệm xác định số lần chiết 39 2.2.3.3 Bố trí thí nghiệm lựa chọn dung môi chiết 40 2.2.3.4 Bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ DM/NL 42 2.2.3.5 Bố trí thí nghiệm khảo xác nồng độ dung môi: 43 2.2.3.6 Bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ chiết 44 2.2.3.7 Bố trí thí nghiệm xác định nhệt độ cô đặc 45 2.3 HÓA CHẤT VÀ CÁC THIẾT BỊ CHỦ YẾU ĐÃ SỬ DỤNG 46 2.3.1 Hóa chất 46 2.3.2 Thiết bị chủ yếu sử dụng 46 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 47 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 NGHIÊN CỨU LỰA CHỌN PHƯƠNG PHÁP CHIẾT RÚT PHLOROTANNIN TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN 48 3.2 XÁC ĐỊNH CÁC ĐIỀU KIỆN THÍCH HỢP CHO QUÁ TRÌNH CHIẾT RÚT PHLOROTANNIN TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN 51 3.2.1 Ảnh hưởng thời gian đến khả chiết rút phlorotannin từ rong mơ S oligocystum 51 3.2.2 Ảnh hưởng số lần chiết đến khả chiết rút phlorotannin từ rong mơ S oligocystum 56 3.2.3 Ảnh hưởng dung môi chiết đến khả chiết phlorotannin 61 3.2.4 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL đến khả chiết phlorotannin 66 v 3.2.5 Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả chiết phlorotannin 71 3.2.6 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến khả chiết 75 3.2.7 Ảnh hưởng nhiệt độ cô đặc đến khả chiết 80 3.3 ĐỀ XUẤT QUY TRÌNH CHIẾT PHLOROTANNIN TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN 84 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 88 TÀI LIỆU THAM KHẢO 89 PHỤ LỤC – CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 2- KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 3- MỘT SỐ HÌNH ẢNH NGHIÊN CỨU vi DANH MỤC VIẾT TẮT DM/NL : dung môi/nguyên liệu TA : hoạt tính chống oxy hóa tổng TPc : hàm lượng phlorotannin RP : hoạt tính khử Fe AA : Acid Ascorbic V : thể tích mẫu v/p : vòng/phút vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Diện tích rong mơ tỉnh Bảng 1.2 Trữ lượng rong Mơ vùng biển Bảng 1.3 Hàm lượng Manitol loài rong vùng biển miền Trung Việt Nam … Bảng 1.4 Hàm lượng axit amin số loại rong Nâu vùng biển Jeddah, Saudi Arabia (mg %) 10 Bảng 1.5 Hàm lượng phlorotannin số loài rong 17 Bảng 1.6 Bảng tính chất số dung môi phổ biến chiết xuất hợp chất tự nhiên 20 Bảng 3.1 Tỷ lệ chất phối trộn sản xuất nước giải khát 86 viii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu tạo rong Mơ Sargassum Hình 1.2 Cấu trúc hóa học phlorogluciol (1) nhóm phlorotannin [tetrafucol A (2), fucodiphloroethol B (3), fucodiphlorethol A (4), tetrafuhalol A (5), tetraisofuhalol (6), phlorofucofuroeckol 13 Hình 2.1 Hình ảnh rong mơ Sargassum oligocystum 34 Hình ảnh rong mơ S oligocystum khô 35 Hình 2.3 Phương pháp tiếp cận nội dung nghiên cứu chiết xuất phlorotannin từ rong Sargassum oligocystum 36 Hình 2.4 Sơ đồ bô trí thí nghiệm xác định thời gian chiết 39 Hình 2.5 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định số lần chiết 40 Hình 2.6 Sơ đồ bố trí thí nghiệm lựa chọn dung môi chiết 41 Hình 2.7 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ DM/NL 42 Hình 2.8 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nồng độ dung môi 43 Hình 2.9 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ chiết 45 Hình 2.10 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ cô đăc 46 Hình 3.1 Hàm lượng phlorotannin từ phương pháp chiết thu nhận từ rong mơ S oligocystum 48 Hình 3.2 Hoạt tính chống oxy hóa tổng phlorotannin từ phương pháp chiết thu nhận từ rong mơ S oligocystum 49 Hình 3.3 Hoạt tính khử Fe phlorotannin từ phương pháp chiết thu nhận từ rong mơ S oligocystum 49 Hình 3.4 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 52 Hình 3.5 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 52 ix Hình 3.6 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hoạt tính khử Fe của dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 52 Hình 3.7 Sự tương quan hàm lượng phlorotannin hoạt tính chống oxy hóa 55 Hình 3.8 Sự tương quan hàm lượng phlorotannin hoạt tính khử Fe 56 Hình 3.10 Ảnh hưởng số lần chiết cồn đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 57 Hình 3.11 Ảnh hưởng số lần chiết cồn đến hoạt tính khử Fe dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 58 Hình 3.12 Sự tương quan hàm lượng phlorotannin hoạt tính chống oxy hóa tổng 60 Hình 3.13 Sự tương quan hàm lượng phlorotannin hoạt tính khử Fe 61 Hình 3.14 Ảnh hưởng dung môi chiết đến hàm lượng phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 62 Hình 3.15 Ảnh hưởng dung môi chiết đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết phlortannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 62 Hình 3.16 Ảnh hưởng dung mối đến hoạt tính khử Fe của dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 63 Hình 3.17 Sự tương quan hàm lượng phloritannin với hoạt tính chống oxy hóa tổng 64 Hình 3.18 Sự tương quan hàm lượng phlorotannin hoạt tính khử Fe 65 Hình 3.20 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL đến hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 67 Hình 3.21 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL đến hoạt tính khử Fe dịch chiết phlorotannin thu nhận từ rong mơ S oligocystum 67 Hình 3.22 Sự tương quan hàm lượng phlorotannin hoạt tính chống oxy hóa tổng 69 Hình 3.23 Sự tương quan hàm lương phlorotannin hoạt tính khử Fe 70 87 Thành phần Tỷ lệ % Khối lượng (g) Acid ascorbic 0.04 0.08 Acid citric 0.07 0.14 Caragenan 0.05 0.1 Xanthan gum 0.05 0.1 Saccarose 17 26 Phlorotannin 30mg/200ml 4.305 Hương sâm dứa 0.8 1.6 ml Bảng 3.1 Tỷ lệ chất phối trộn sản xuất nước giải khát Hình 3.38 Sản phẩm nước giải khát sâm dứa có bổ sung phlorotannin chiết từ rong mơ S oligocystum 88 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu trên, cho phép rút số kết luận sau: 1) Đã xác định thông số thích hợp cho qui trình chiết phlorotannin từ rong nâu Sargassum oligocystum Ninh Thuận kỹ thuật chiết khuếch tán làm giầu: cồn dung môi chiết thích hợp, tỷ lệ cồn/nguyên liệu rong thích hợp cho trình chiết là: 34/1, thời gian chiết thichw hợp là: 120 phút (2h), Nhiệt độ chiết: 43÷45oC, nồng độ dung môi: 75%, số lần chiết:1 2) Đã tiến hành thử nghiệm thu nhận phlorotannin từ rong mơ S oligocystum theo quy trình đề xuất thu phlorotannin với hiệu thu nhận: hàm lượng phlorotannin 2.099.mg/g rong, hoạt tính chống oxy hóa tương đương 3.132mg AA/g ron, hoạt tính khử Fe 1.519 mg FeSO4/g rong 3) Thông số thích hợp cho trình cô đặc dịch chiết phlorotannin từ rong mơ S oligocystum sau: Sử dụng thiết bị cô quay chân không, nhiệt độ cô đặc: 40oC, áp suất chân không: 65÷68mbar, tốc độ vòng quay 40 v/p Thực cô đặc điều kiện hàm lượng phlorotanninthu 2.961 mg/g rong với hoạt tính chống oxy hóa tương đương 4.79mg AA/g rong, hoạt tính khử Fe 3.038 mg FeSO4/g rong KIẾN NGHỊ Qua trình nghiên cứu, đề tài đề xuất số ý kiến sau: - Cần nghiên cứu thêm phương pháp sấy khô bảo quản rong nguyên liệu, để hạn chế tổn thất thành phần rong, đồng thời đảm bảo nguồn nguyên liệu thời gian trái vụ - Cần nghiên cứu khả ứng dụng chế phẩm phlorotannin vào lĩnh vực như: thực phẩm, dược phẩm, y học, mỹ phẩm, từ có hướng sản xuất sản phẩm cụ thể cung cấp cho thị trường 89 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT [1] Đặng Xuân Cường (2015), Nghiên cứu thu nhận phlorotannin từ rong mơ Sargassum serratum Nha Trang thử nghiệm sử dụng đồ uống có hoạt tính chống oxy hóa, Luận án tiến sĩ kỹ thuật chuyên ngành Công nghệ Chế biến Thủy sản, Trường Đại học Nha Trang [2] Đặng Xuân Cường, Trần Thị Thanh Vân, Vũ Ngọc Bội, Bùi Minh Lý (2012), Nghiên cứu chiết phlorotannin có hoạt tính chống oxy hóa từ rong nâu sargassum mcclurei phương pháp ngâm chiết có hỗ trợ vi sóng [3] Nguyễn Hữu Dinh (1993), Rong Biển Việt Nam- Phần Phía Bắc, Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội [4] Nguyễn Hữu Đại (1997), Rong Mơ Việt Nam Nguồn Lợi Và Sử Dụng, NXB Nông Nghiệp TP Hồ Chí Minh [5] Đỗ Như Đồng (2016), Nghiên u thu nh ậ n phlorotannin th nghi ệ m s ả n xu ấ t b ộ t phlorotannin, Luận án thạc sỹ, Trường Đại Học Nha Trang [6] Lê Minh Đức (2013), Nghiên cứu xây dựng quy trình thu nhận phlorotannin từ số loài rong nâu sargassum vùng biển nam trung bộ, đạt tiêu chuẩn làm dược liệu, Luận án thạc sỹ, Trường Đại Học Nha Trang [7] Trần Thị Luyến, Đỗ Minh Phụng, Ngô Đăng Nghĩa, Nguyễn Anh Tuấn, (2004), Chế biến rong biển, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [8] Phạm Thị Bích Phượng (2012), Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết tách phlorotannin thô từ số loài rong nâu thuộc chi rong quạt (Padina) vùng biển Nam Trung Bộ, định hướng sử dụng làm thực phẩm chức có hoạt tính chống oxy hóa kháng khuẩn, Luận án thạc sỹ, Trường Đại Học Nha Trang [9] Lê Ngọc Thụy (2009), Các trình công nghệ sản xuất thực phẩm, Khoa hóa thực phẩm công nghệ sinh học , Trường Đại học Bách khoa 90 Hà Nội TIẾNG ANH [10] A Altemimi, R Choudhary, D G Watson, and D A Lightfoot (2015), Effects of ultrasonic treatments on the polyphenol and antioxidant content of spinach extracts, Ultrason Sonochem., vol 24, pp 247–255 [11] Vũ Ngọc Bội, Đặng Xuân Cường, Phan Thị Khánh Vinh (2016), Effects of extraction conditions over the phlorotannin content and antioxidant activity of extract from brown algae Sargassum serratum, Free Radicals and Antioxidants, vol 7, no pp 115–122 [12] F Ferreres et al (2012), Phlorotannin extracts from fucales characterized by HPLC-DAD-ESI-MS n: Approaches to hyaluronidase inhibitory capacity and antioxidant properties, Marine Drugs, vol 10, no 12 pp 2766–2781, 2012 [13] I Muhammad Tanvir Hossain Chowdhury and N G P a Bangoura, Ji-Young Kang (2011), “Distribution of Phlorotannins in the Brown Alga Ecklonia cava and Comparison of Pretreatments for Extraction.” [14] Ioana Ignat, Irina Volf, Valentin I Popa (2011), A critical review of methods for characterization of polyphenolic compounds in fruits and vegetables, Food Chemistry, 126, 1821-1835 [15] Kim Châu (2011), Multiobjective optimization for phlorotannin extraction and antioxidant activity of brown algae Sargassum seratum collected in Nha Trang Bay, Vietnam Using Box-Behnken Model, J Sci Dev, vol 9, no pp 18–27 [16] Lopes, Graciliana, Sousa, Carla, Silva, Lui’s R, Pinto, Eugenia, Andrade, Paula B Bernardo, Joao, Mouga, Teresa, Valentao, Patricia, Holford, Mande (2012), Can Phlorotannins Purified Extracts Constitute a Novel Pharmacological Alternative for Microbial Infections with Associated Inflammatory Conditions, Plos one, 7(2), 1145 [17] Mayalen Zubia & Daniel Robledo & Yolanda Freile-Pelegrin (2007), Antioxidant 91 activities in tropiacal marine macroalgae from the Yucatan Peninsula, Mexico, J Appl Phycol, 19, (2007), 449-458 [18] Melody Dutot, Roxane Fagon, Marc Hemon and Patrice Rat (2012), Antioxidant, Anti-inflammatory, and Anti-senescence Activities of a Phlorotannin- Rich Natural Extract from Brown Seaweed Ascophyllum nodosum, Applied biochemistry and biotechnology, doi: 10.1007/sl 2010-012-9761-1 [19] Nagayama K, Iwamura Y, Shibata Y, Hirayama I, Nakamura T (2002), Bactericidal activity of phlorotannins from the brown alga Ecklonia kurome, J Antimicrob Chemother 50, 889-893 [20] Nalin Siriwardhana, Ki-Wan Lee and You-Jin Jeon (2005), Radical Seavenging Potential of Hydrophilic Phlorotannins of Hizikia fusiformis, Algae, 20, 1, 69-75 [21] Nedeljko T Manojlovic; Perica J Vasiljevic; Pavle Z Maskovic (2011), Chemical composition and antioxidant activity of lichen Toninia candida, Brazilian Journal of Pharmacognosy, Rev, bras, farmacogn, 22, [22] Riitta Koivikko (2008), Brown algal phlorotannins improving and applying chemical methods, Ph D Thesis, University of Turku, Turku, Finland [23] Reum Kim, Min-Sup, Ji-Young Park, Sun Shin, Kyoung-Eun Park, Na-Young YoonJong-Soon Kim, Choi Jae-Sue (2009), Isolation and identification of 72 phlorotannins from Ecklonia stolonifera with antioxidant and anti-inflammatory properties, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 57, 3483-3489 [24] Sigma-Aldrich (1993), 47641 Folin-Ciocalteu’ s phenol reagent, Prod Inf., vol 52, no 1954, pp 47641–47641 [25] Toshiyuki Shibata, Kanji Ishimaru, Shigeo Kawaguchi, Hiromichi Yoshikawa Yoichiro Hama (2003), Antioxidant activities of phlorotannins isolated from Japanese Laminariaceae, Journal of applied phycology 20, (2008), 705-711 [26] T Shibata, K Nagayama, S Sugiura, and S Makino(2015), Analysis on Composition and Antioxidative Properties of Phlorotannins Isolated from 92 Japanese Eisenia and Ecklonia Species, American Journal of Plant Sciences, vol pp 2510–2521 [27] T Shibata, K Nagayama, R Tanaka, K Yamaguchi, and T Nakamura (2003), Inhibitory effects of brown algal phlorotannins on secretory phospholipase A2s, lipoxygenases and cyclooxygenases, Journal of Applied Phycology, vol 15, no pp 61–66 [28] Wang T, Jonsdottir R, Liu H, Gu L, Kristinsson HG, Raghavan S, Olafsdottir G (2012), Antioxidant Capaccities of Phlorotannins Extracted from the Brown Algae Fucus vesiculosus, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2012 Jun [29] Y L Yong-Xin Li, Isuru Wijesekara, “Phlorotannis as bioactive agents from brown algae.” [30] Young Min Ham, Jong Seok Baik, Jin Won Hyun, and Nam Ho Lee (2007), Isolation of a New Phlorotannin, Fucodiphlorethol G from a Brown Alga Ecklonia cava, department of Chemistry and Research Institute of Basic Sciences, Cheju National University, Korean Chem Soc, 28, 9, 1595 PHỤ LỤC – CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU  Xác định độ ẩm phương pháp sấy khô đến khối lượng không đổi a Nguyên lý: Dùng lượng nhiệt làm bay hết nước mẫu thử, sau dựa vào hiệu số khối lượng mẫu thử trước sau sấy khô, từ tính hàm lượng nước mẫu(%) b Dụng cụ: - Tủ sấy, cốc sấy - Cân phân tích, độ xác 10-4 g - Bình hút ẩm c Tiến hành: Rửa cốc nung, để ráo, sau sấy nhiệt độ 1050C÷1300C đến khối lượng không đổi Sau giờ, lấy làm nguội bình hút ẩm mang cân sấy đến khối lượng hai lần cân liên tiếp sai khác không 5.10-4g (khối lượng không đổi) Cân xác lượng rong cắt nhỏ vào cốc sấy khô đến khối lượng không đổi Dùng đũa thủ tinh đánh tơi mẫu dàn mẫu đáy cốc Chuyển cốc vào tủ sấy, sấy 600C÷ 800C Sau nâng nhiệt độ lên 1000C÷1050C, sấy liên tục Chú ý, trình sấy sau đảo mẫu lần Lấy mẫu để nguội bình hút ẩm, sau mang cân cân phân tích sấy tiếp nhiệt độ 1050C đến khối lượng không đổi d Tính kết Công thức xác định độ ẩm: W= 𝐺1−𝐺2 𝐺1−𝐺 ∗ 100% Trong đó:  W: độ ẩm nguyên liệu (%)  G: khối lượng cốc sau sấy đến khối lượng không đổi(g)  G1: khối lượng mẫu cốc trước sấy(g)  G2: khối lượng mẫu cốc sau sấy đến khối lượng không đổi (g) PHỤ LỤC 2- KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Bảng 2.1 Kết lựa chọn phương pháp chiết Phương pháp Ngâm chiết Khuếch tán làm giàu Mg Mg Mg phloroglucino/ AA/g FeSO4/g g rong rong rong 675ml 2.369 2.354 0.837 596 ml 2.464 2.628 0.871 Mg Mg Mg phloroglucino/ AA/g FeSO4/g g rong rong rong Khối lượng V sau cô (g) đặc 80 80 Bảng 2.2 Kết thí nghiệm xác định thời gian chiết Khối lượng Nhiệt độ (g) (oC) 30 10 45 oC 8.92 8.47 2.24 60 10 45 oC 10.80 10.54 2.44 90 10 45 oC 11.51 10.64 2.57 120 10 45 oC 13.03 10.95 3.32 150 10 45 oC 11.59 10.92 3.12 180 10 45 oC 11.51 10.50 3.10 Thời gian (phút) Bảng 2.3 Kết thí nghiệm xác định số lần chiết Khối Số lần lượng chiết (g) Thời gian Nhiệt độ Mg/g Mg AA/g (phút) (oC) rong rong Mg FeSO4/g rong 120 45 oC 7.89 5.41 1.37 120 45 oC 3.19 3.53 1.08 120 45 oC 1.88 2.41 0.97 Bảng 2.4 Kết thí nghiệm xác định dung môi chiết: Khối Dung môi lượng chiết (g) Thời gian Nhiệt độ Mg/g Mg AA/g (phút) (oC) rong rong Mg FeSO4/g rong Cồn 120 45 oC 7.33 6.51 1.77 Nước 120 45 oC 6.95 6.12 1.22 Bảng 2.5 Kết xác định tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu: Khối Tỷ lệ lượng DM/NL (g) Thời gian Nhiệt độ Mg/g Mg AA/g (phút) (oC) rong rong Mg FeSO4/g rong 30/1 120 45 oC 4.45 7.80 1.27 32/1 120 45 oC 7.41 8.64 1.46 34/1 120 45 oC 9.09 9.56 1.55 36/1 120 45 oC 8.96 9.01 1.49 Bảng 2.6 Kết xác định nồng độ dung môi: Nồng độ Khối lượng Thời gian Nhiệt độ Mg/g Mg AA/g (phút) (oC) rong rong dung môi (g) Mg FeSO4/g rong 60 120 45 oC 4.93 5.39 1.14 65 120 45 oC 5.45 5.87 1.21 70 120 45 oC 5.78 6.22 1.29 75 120 45 oC 6.75 8.19 2.12 80 120 45 oC 5.28 7.91 2.08 85 120 45 oC 3.60 6.28 2.02 Bảng 2.7 Kết xác định nhiệt độ chiết Nhiệt độ chiết o C Khối lượng (g) Thời gian chiết (phút) Mg phloroglucino/ g rong Mg AA/g rong Mg FeSO4/g rong 30 oC 120 4.94 4.37 1.03 35 oC 120 4.13 4.76 1.31 40 oC 120 5.00 5.87 1.65 45 oC 120 6.08 7.78 1.98 50 oC 120 5.58 6.88 1.84 55 oC 120 4.32 5.98 1.29 Bảng 2.8 Kết xác định nhiệt độ cô đặc Nhiệt độ cô đặc Khối lượng Thời gian Mg Mg Mg chiết phloroglucino/ AA/g FeSO4/g (phút) g rong rong rong C (g) 40 oC 20 120 1.15 0.98 0.29 50 oC 20 120 0.79 0.74 0.16 60 oC 20 120 0.77 0.81 0.15 70 oC 20 120 0.69 0.71 0.16 o PHỤ LỤC 3- MỘT SỐ HÌNH ẢNH NGHIÊN CỨU Hình 3.1 Mẫu rong S.oligicystum sau nghiền Hình 3.2 Dịch chiết sau lọc Hinh 3.3 Mẫu xác định hàm lượng Hình 3.4 Thiết bị cô quay chân không Hình 3.5 Máy quang phổ UV-Vis Hình 3.6 Cân phân tích ... nhận phlorotannin từ rong mơ Sargassum oligocystum thu mẫu Ninh Thu n Nội dung nghiên cứu: 1) Nghiên cứu lựa chọn phương pháp chiết rút phlorotannin từ rong mơ S oligocystum thu mẫu Ninh Thu n... trình chiết rút phlorotannin từ rong mơ S oligocystum thu mẫu Ninh Thu n 3) Đề xuất quy trình tách chiết phlorotannin từ rong mơ S oligocystum thu mẫu Ninh Thu n Do bước đầu tiếp cận với nghiên cứu. .. Nghiên cứu sản xuất số sản phẩm từ rong mơ (Sargassum) Ninh Thu n”, em thực đề tài Nghiên cứu chiết rút phlorotannin từ rong mơ Sargassum oligocystum thu mẫu Ninh Thu n” Mục tiêu đề tài: Thu