Nghiên cứu chiết alginate từ rong mơ sagassum oligocystum thu mẫu tại ninh thuận

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM LÊ THỊ QUỲNH NHƯ NGHIÊN CỨU CHIẾT ALGINATE TỪ RONG MƠ SARGASSUM OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (Ngành: Công nghệ thực phẩm) CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: 1) ThS Nguyễn Thị Mỹ Trang 2) Ts Đặng Xuân Cường Nha Trang – Năm: 2017 ii DANH MỤC VIẾT TẮT DM: dung môi DW: đương lượng khô NL: nguyên liệu TA: hoạt tính chống oxy hóa tổng RP: hoạt tính khử sắt iii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành Đồ án này, Trước hết xin gửi tới Ban Giám hiệu Trường Đại học Nha Trang, Ban Chủ nhiệm khoa Công nghệ Thực phẩm, Phòng Đào tạo niềm kính trọng, tự hào học tập Trường năm qua Sự biết ơn sâu sắc xin giành cho thầy: ThS Nguyễn Thị Mỹ Trang - Bộ môn Công nghệ Thực phẩm TS Đặng Xuân Cường - Viện Nghiên cứu Ứng dụng Công nghệ Nha Trang tài trợ kinh phí, tận tình hướng dẫn động viên suốt trình thực đồ án tốt nghiệp Xin cám ơn PGS TS Vũ Ngọc Bội - Trưởng khoa Công nghệ Thực phẩm Trường Đại học Nha Trang, TS Thái Văn Đức - Trưởng Bộ môn Công nghệ Thực phẩm thầy cô phản biện cho lời khuyên quí báu để công trình nghiên cứu hoàn thành có chất lượng Đặc biệt, xin ghi nhớ tình cảm, giúp đỡ của: thầy cô giáo Bộ môn Công nghệ Thực phẩm tập thể cán phòng thí nghiệm - Trung tâm Thực hành Thí nghiệm - Trường Đại học Nha Trang giúp đỡ nhiệt tình tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực đồ án Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè tạo điều kiện, động viên khích lệ để vượt qua khó khăn trình học tập vừa qua Nha Trang, ngày…tháng…năm 2017 Sinh viên thực Lê Thị Quỳnh Như iv MỤC LỤC DANH MỤC VIẾT TẮT i LỜI CẢM ƠN iii DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC BẢNG ix PHẦN 1: TỔNG QUAN .1 1.1 TỔNG QUAN VỀ RONG MƠ SARGASSUM OLIGOCYSTUM 1.1.1 Giới thiệu rong mơ Sargassum oligocystum 1.1.2 Phân bố 1.1.3 Thành phần dinh dưỡng rong mơ .2 1.1.4 Ứng dụng rong mơ 1.2 GIỚI THIỆU VỀ ALGINATE 1.2.1 Nguồn gốc .6 1.2.2 Đặc điểm cấu trúc alginate .7 1.2.3 Phân loại alginate 1.2.4 Tính chất alginate 1.2.5 Ứng dụng alginate 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC 13 1.3.1 Nghiên cứu nước 13 1.3.2 Nghiên cứu nước 13 1.4 CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT 14 1.4.1 Cơ sở trình chiết 14 1.4.2 Các phương pháp chiết dung môi 15 1.4.3 Một số phương pháp tách chiết khác 16 v 1.4.4 Phương pháp chiết khuếch tán làm giàu .17 1.4.5 Một số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết .18 PHẦN NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 NGUYÊN LIỆU 20 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .20 2.2.1 Phương pháp phân tích .20 2.2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 24 2.3 HÓA CHẤT VÀ CÁC THIẾT BỊ CHỦ YẾU ĐÃ SỬ DỤNG .34 2.3.1 Hóa chất 34 2.3.2 Thiết bị chủ yếu sử dụng .35 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 35 PHẦN 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH CÁC ĐIỀU KIỆN THÍCH HỢP CHO QUÁ TRÌNH CHIẾT RÚT ALGINATE TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN 36 3.1.1 Ảnh hưởng nồng độ HCl dùng xử lý rong đến hàm lượng hoạt tính sinh học dịch chiết alginate 36 3.1.3 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm hượng hoạt tính sinh học dịch chiết alginate 43 3.1.4 Ảnh hưởng pH môi trường chiết đến hàm hượng hoạt tính sinh học dịch chiết alginate 48 3.1.3 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL chiết đến hàm hượng hoạt tính sinh học dịch chiết alginate 52 3.1.4 Ảnh hưởng số lần chiết đến hàm hượng hoạt tính sinh học dịch chiết alginate 57 3.2 ĐỀ XUẤT QUY TRÌNH CHIẾT RÚT ALGINATE TỪ RONG MƠ SARGASSUM OLIGOCYSTUM 61 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1: Cấu tạo alginic acid .4 Hình 2: Đặc trưng cấu trúc alginate Hình 3: Công thức cấu tạo alginate Natri Hình 4: Công thức cấu tạo alginate Canxi Hình 5: Cấu tạo alginate Propylen glycon Hình 2.Sargassum oligocystum nghiền nhỏ 20 Hình Sargassum oligocystum 20 Hình 3.Sơ đồ cách tiếp cận nội dung nghiên cứu 24 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiêm xác định nồng độ HCl dùng xử lý rong .26 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiêm xác định nhiệt độ chiết .27 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiêm xác định thời gian chiết 28 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiêm xác định pH môi trường chiết 29 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ DM/NL 30 Hình Sơ đồ bố trí thí nghiêm xác định số lần chiết 31 Hình 10 Sơ đồ quy trình dự kiến chiết alginate từ rong mơ 32 Hình Ảnh hưởng nồng độ HCl dùng xử lý rong đến hàm lượng alginate thu 36 Hình Ảnh hưởng nồng độ HCl dùng xử lý rong đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginic acid 37 Hình 3: Ảnh hưởng nồng độ HCl dùng xử lý rong đến hoạt tính khử sắt dung dịch alginic acid .37 Hình 4: Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 38 vii Hình 5: Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 39 Hình Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hàm hượng alginate thu 40 Hình Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginic acid .41 Hình Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hoạt tính khử Fe dịch chiết alginic acid 41 Hình Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 42 Hình 10 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính khử sắt dịch chiết 43 Hình 11 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm hượng alginatethu 44 Hình 12 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết alginic acid .45 Hình 13 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hoạt tính khử Fe dịch chiết alginic acid 45 Hình 14 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 47 Hình 15 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính khử sắt dịch chiết 48 Hình 16 Ảnh hưởng pH môi trường chiết đến hàm hượng alginate thu 49 Hình 17: Ảnh hưởng môi trường pH đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginic acid 49 Hình 18.Ảnh hưởng môi trường pH đến hoạt tính khử sắt dung dịch alginic acid 50 viii Hình 19 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 51 Hình 20 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính khử sắt dịch chiết 52 Hình 21 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL đến hàm hượng alginatethu 53 Hình 22 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL đến hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginic acid .53 Hình 23 Ảnh hưởng tỷ lệ DM/NL đến hoạt tính khử Fe dịch chiết alginic acid 54 Hình 24 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 56 Hình 25 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính khử sắt dịch chiết 57 Hình 26 Ảnh hưởng số lần chiết đến hàm hượng alginatethu 58 Hình 27 Ảnh hưởng số lần chiết đến hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết alginic acid 59 Hình 28 Ảnh hưởng số lần chiết đến hoạt tính khử Fe dịch chiết alginic acid 59 Hình 29 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết 60 Hình 30 Sự tương quan hàm lượng alginate hoạt tính khử sắt dịch chiết 61 Hình 31 Sơ đồ quy trình chiết rút alginate từ rong mơ Sargassum oligocystum 62 Hình h Đường chuẩn xác định hoạt tính chống oxy hóa tổng 69 Hình h Đường chuẩn xác định hoạt tính khử Fe 69 ix DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Diện tích rong mơ theo vùng biển tỉnh .2 Bảng 2: Hàm lượng Manitol loài rong vùng biển miền Trung Việt Nam .4 Bảng Xây dựng đường chuẩn xác định hoạt tính chống oxy hóa tổng .22 Bảng 2 Xây dựng đường chuẩn xác định hoạt tính khử Fe 23 Bảng b Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum xử lý nồng độ HCl khác 70 Bảng b 2.Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum nhiệt độ chiết khác 70 Bảng b 3.Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum thời gian chiết khác 71 Bảng b Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum môi trường pH chiết khác 71 Bảng b 5.Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum với tỷ lệ DM/NL khác .72 Bảng b 6.Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum với số lần chiết khác 73 Bảng b 7.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum xử lý HCl nồng độ khác 74 Bảng b 8.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum nhiệt độ chiết khác 74 Bảng b 9.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum thời gian chiết khác 75 x Bảng b 10.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với môi trường pH chiết khác 75 Bảng b 11.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với tỷ lệ DM/NL khác 76 Bảng b 12.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với số lần chiết khác .76 Bảng b 13.Hoạt tính khử Fe algiante chiết từ rong mơ S oligocystum xử lý HCl nồng độ khác 77 Bảng b 14.Hoạt tính khử Fe algiante chiết từ rong mơ S oligocystum với nhiệt độ chiết khác .77 Bảng b 15.Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với thời gian chiết khác 78 Bảng b 16.Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với môi trường pH chiết khác 78 Bảng b 17.Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với tỷ lệ DM/NL chiết khác 79 Bảng b 18.Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với số lần chiết khác .79 65 1) Điều kiện thích hợp cho trình chiết rút alginate có hoạt tính chống oxy hóa từ rong nâu Sargassum oligocystum theo phương pháp khuếch tán làm giàu: dung môi chiết rút Na2CO3, nhiệt độ chiết thích hợp 70oC, thời gian chiết thích hợp 30 phút, tỉ lệ DM/NL thích hợp 35/1(v/w), pH chiết thích hợp số lần chiết thích hợp 2) Đã tiến hành chiết rút alginate theo quy trình đề xuất thu kết quả: hàm lượng alginate/DW đạt 0,0325 ± 0,001 g alginate/g DW với hoạt tính chống oxy hóa tổng 12,3519 ± 0,3671mg acid ascorbic/g DW hoạt tính khử sắt 1,6447 ± 0,022 mg FeSO4/g DW KIẾN NGHỊ Từ nghiên cứu cho phép đề xuất số ý kiến sau: - Cần nghiên cứu phương pháp sấy bảo quản rong mơ khô để chuẩn hóa nguyên liệu hạn chế tổn thất chất sinh học có rong mơ - Nghiên cứu tẩy màu alginatevà tinh chế alginate để thu alginate tinh thiết sử dụng lĩnh vực dược phẩm, mỹ phẩm 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt [1] Đặng Xuân Cường (2009), “Nghiên cứu thu nhận dịch chiết có hoạt tính kháng khuẩn từ rong nâu Dictyota dichotoma Việt Nam”, Luận văn thạc sĩ kỹ thuật, Trường Đại học Nha Trang [2] Đặng Xuân Cường, Trần Thị Thanh Vân, Vũ Ngọc Bội, Bùi Minh Lý (2014),“Nghiên cứu chiết Phlorotanin có hoạt tính chống oxy hóa từ rong nâu Sargassum mcclurei phương pháp ngâm chiết có hỗ trợ vi sóng”, Tạp chí Khoa học Công nghệ [3] Đặng Xuân Cường (2015), “Nghiên cứu thu nhận phlorotanin từ rong mơ (Sargassum serratum) Nha Trang thử nghiệm sử dụng đồ uống có hoạt tính chống oxy hóa”, Luận án tiến sĩ kỹ thuật chuyên ngành Công nghệ Chế biến Thủy sản, Trường Đại học Nha Trang [4] Huỳnh Trường Giang (2013), “Nghiên cứu khả sử dụng hỗn hợp chất chiết từ số loài rong nâu (phaeophyta) làm chất bổ sung giúp tăng trưởng phòng bệnh nhiễm khuẩn cho tôm sú, tôm chân trắng, cá tra nuôi đồng Sông Cửu Long”, Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ [5] Nguyễn Hữu Đại (1997), “Rong mơ Việt Nam, nguồn lợi sử dụng”, NXB Nông Nghiệp TP Hồ Chí Minh [6] Trần Thị Bích Thủy (2015), “Phân tích sản phẩm thủy sản”, Trường Đại học Nha Trang [7] Trần Thị Luyến cộng (2004), “Chế biến rong biển”, Nhà xuất nông nghiệp TP Hồ Chí Minh Tài liệu tiếng Anh [8] Bar, R (1987), “Ultrasound Enhanced Bioprocesses in: Biotechnology and Engineering”, 1(32), pp 655-663 67 [9] I.H Lone, E Kowsalya and L.J Rebecca (2016) “Alginate fiber from brom algae”, Der Pharmacia Lettre, (8):68-71 [10] Ioana, I.; Irina V and Valentin, I.P (2001), “A Critical review of methods for characterization of polyphenol compounds in fruits and vegetables”, Food Chemistry, 12(6), pp 1821-1835 [11] Kelman, D Posner, E.K Karla, J Dermid, J Tabandera, N.K Patrick, R.W and Anthony, D.W (2012), “Antioxidant Activity of Hawaiian Marine Algae”, 10(1), pp 403-416 [12] King, J.W (2002), “Supercritical Fluid Technology for Lipid Extraction, Fractionation and Reaction”, Lipid Biotechnology, pp 663-687 [13] Marthartha, J.M and Well, S (2003), “Principles of extraction and the extraction of semivolatile organics from liquids”, Sample Preparation Techniques in Analytical Chemistry, pp 37-138 [14] Spigno, G.; Tramelli, L and Faveri, D.M (2007), “Effects of extraction time, temperature and solvent on concentration and antioxidant activity of grape marc phenolics”, Journal of Food Engineering, 8(1), pp 200208 [15] Thoudam Bhaigyabati, T Kirithika, T Kamala, S.K and Usha, D.K (2011), “Phytochemical screening and antioxidant activity of various extracts of Sargassum muticum”, 3(10), pp 25-30 [16] W Mushollaeni (2011), “The physicochemical characteristics of sodium alginate from Indonesian brown seaweeds”, pp 349-352 [17] Z Demirel, F Yilmaz-Koz, U Karabay-Yavasoglu et al (2009), “Antimicrobial and antioxidant activity of brown algae from the Algae Sea”, 74 (6) 619–628 Tài liệu từ website [18]https://www.google.com.vn/search?sclient=psyab&site=&source=hp&btnG=T%C3%ACm+ki%E1%BA%BFm&q=TC 68 VN+7602%3A2007 [19]https://www.google.com.vn/search?sclient=psyab&site=&source=hp&btnG=T%C3%ACm+ki%E1%BA%BFm&q=TC VN+7602%3A2007#q=AOAC+(1932)+ 69 PHỤ LỤC Độ hấp thụ bước sóng 695 nm PHỤ LỤC 1: Xây dựng đường chuẩn xác định hoạt tính chống oxy hóa tổng 1,4 y = 0,0137x - 0,1013 R² = 0,9968 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 20 40 60 80 100 Nồng độ acid ascorbic (mg/ml) Hình h Đường chuẩn xác định hoạt tính chống oxy hóa tổng Độ hấp thụ bước sóng 655 nm PHỤ LỤC 2: Xây dựng đường chuẩn xác định hoạt tính khử Fe 1,0 y = 0,0145x - 0,1139 R² = 0,9907 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0,0 10 20 30 40 50 60 70 80 Nồng độ FeSO4 (mg/ml) Hình h Đường chuẩn xác định hoạt tính khử Fe PHỤ LỤC 3: Xác định hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S.oligocystum 70 Sau tạo alginate Natri từ 5g rong khô (nghiền nhỏ) lọc giấy lọc (sấy đến khối lượng không đổi), cho phần giấy lọc phần kết tủa alginate Natri sấy đến khối lượng không đổi Kết phần alginate Natri tính theo công thức: m = mgiấy lọc + alginate Natri - mgiấy lọc Bảng b Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum xử lý nồng độ HCl khác Hàm lượng alginate (g) Nồng độ (%) Lần Lần Trung bình 31 0,0076 0,0098 0,0088±0,0015 32 0,0189 0,0197 0,0194±0,0005 33 0,0080 0,0097 0,0089±0,0011 Bảng b 2.Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum nhiệt độ chiết khác Hàm lượng alginate (g) Nhiệt độ ( C) o Lần Lần Trung bình 60 0,0063 0,0062 0,0063±0,000082 65 0,0075 0,0079 0,0077±0,000287 70 0,0135 0,0130 0,0133±0,000353 75 0,0053 0,0050 0,0050±0,000045 80 0,0046 0,0049 0,0048±0,00231 65 71.3 10 71 9231 077 67 1538 8225 71.7 692 80 6154 0059 769 0000 12 76.2 61 12 6115 10 9520 55.3 846 10 6936 0923 308 8462 10 84.0 74 .6248 11 2822 8 9677 0308 Bảng b Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum thời gian chiết khác Hàm lượng alginate (g) Thời gian (phút) Lần Lần Trung bình 210 0,0114 0,0118 0,0116±0,000231 240 0,0120 0,0124 0,0122±0,000281 270 0,0133 0,0137 0,0135±0,000274 300 0,0110 0,0085 0,0098±0,001735 330 0,0088 0,0093 0,0091±0,000372 360 0,0079 0,0078 0,0079±0,00007 Bảng b Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum môi trường pH chiết khác Ph Hàm lượng alginate (g) 72 Lần Lần Trung bình 0,0032 0,0029 0,0031±0,000135 0,0261 0,0289 0,0275±0,001948 10 0,0146 0,0149 0,0148±0,000231 11 0,0099 0,0101 0,0101±0,000135 73 Bảng b Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum với tỷ lệ DM/NL khác Hàm lượng alginate (g) Tỷ lệ DM/NL (v/w) Lần Lần Trung bình 20/1 0,0067 0,0069 0,0068±0,000104 25/1 0,0075 0,0080 0,0078±0,00032 30/1 0,0128 0,0134 0,0131±0,000406 35/1 0,0313 0,0306 0,0310±0,000466 40/1 0,0113 0,0106 0,0110±0,000504 Bảng b 6.Hàm lượng alginate dịch chiết rong mơ S oligocystum với số lần chiết khác Hàm lượng alginate (g) Số lần chiết Lần Lần Trung bình 0,0332 0,0317 0,0325±0,001061 0,0022 0,0018 0,0020±0,000246 0,0014 0,0012 0,0014±0,000123 PHỤ LỤC 5: Xác định hoạt tính chống oxy hóa tổng rong mơ Hút 100 µl mẫu bổ sung 900 µl nước cất thêm ml dung dịch A (H2SO4 0,6 M, sodium phosphate 28 mM ammonium Molybdate mM) Hỗn hợp giữ 90 phút 95oC Sau đo bước sóng 695 nm với chất chuẩn acid ascorbic Hoạt tính chống oxy hóa tổng tính theo đương lượng acid ascorbic 74 Bảng b 7.Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum xử lý HCl nồng độ khác Độ hấp thụ Nồng độ TA (mg acid ascorbic/g DW) bước sóng 695 nm (%) Lần Lần Lần Lần Trung bình 31 0,818 0,798 9,8969 9,6815 9,7892±0,1523 32 0,877 0,862 11,1342 10,9634 11,0488±0,1207 33 0,775 0,746 9,4338 9,1215 9,2777±0,2208 Bảng b Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum nhiệt độ chiết khác Độ hấp thụ Nhiệt độ bước sóng 695 TA (mg acid ascorbic/g DW) nm (oC) Lần Lần Lần Lần Trung bình 60 0,756 0,826 9,8225 10,6248 10,2237±0,5673 65 0,772 0,832 10,0059 10,6936 10,3498±0,4862 70 0,947 0,992 12,0923 12,6115 12,3519±0,3671 75 0,861 0,89 10,9520 11,2822 11,1171±0,2334 80 0,703 0,619 8,9677 8,4992±0,6625 8,0308 75 Bảng b Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum thời gian chiết khác Độ hấp thụ bước Thời gian TA (mg acid ascorbic/g DW) sóng 695 nm (phút) Lần Lần Lần Lần Trung bình 210 0,5479 0,491 10,4323 9,5175 9,9749±0,6468 240 0,589 0,564 11,0223 10,6229 10,8226±0,2823 270 0,679 0,59 12,3800 10,9674 11,6737±0,9988 300 0,601 0,576 11,0700 10,6758 10,8729±0,2787 330 0,563 0,576 10,4027 10,6063 10,5045±0,1440 360 0,524 0,555 9,7596 10,2437 10,0017±0,3422 Bảng b 10 Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với môi trường pH chiết khác Độ hấp thụ bước pH TA (mg acid ascorbic/g DW) sóng 695 nm Lần Lần Lần Lần Trung bình 0,542 0,501 9,8923 9,2615 9,5769±0,4460 0,487 0,537 11,2625 12,2202 11,7413±0,6771 10 0,495 0,55 9,4443 10,3158 9,8801±0,6162 11 0,403 0,434 9,3046 9,8769 9,5908±0,4046 76 Bảng b 11 Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với tỷ lệ DM/NL khác Tỷ lệ Độ hấp thụ bước sóng 695 nm TA (mg acid ascorbic/g DW) DM/NL (v/w) Lần Lần Lần Lần Trung bình 20/1 1,429 1,476 8,7092 0,9768 8,8430±0,1891 25/1 1,103 1,09 9,2615 9,1615 9,2115±0,0707 30/1 0,876 0,985 9,1688 10,1917 9,6802±0,7233 35/1 0,915 0,928 12,1920 12,3480 12,2700±0,1103 40/1 0,742 0,708 11,8668 11,3882 11,6275±0,3384 Bảng b 12 Hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với số lần chiết khác Độ hấp thụ bước Số lần sóng 695 nm TA (mg acid ascorbic/g DW) chiết Lần Lần Lần Lần Trung bình 1,214 1,224 11,6327 11,7212 11,6769±0,0625 0,161 0,168 2,7913 2,8659 2,8286±0,0527 0,154 0,12 2,7658 2,3970 2,5814±0,2607 PHỤ LỤC 6: Xác định hoạt tính khử Fecủa dịch chiết alginate từ rong mơ S.oligocystum 77 Lấy 500 µl dịch mẫu bổ sung 0,5 ml đệm phosphate pH = 7,2 0,2 ml K3[Fe(CN)6] 1% Giữ hỗn hợp 20 phút 50oC Sau thêm vào 500 µl CCl3COOH 10% bổ sung 300 µl nước cất, 80 µl FeCl3 0,1 % Tiếp theo đo bước sóng 655 nm với chất chuẩn FeSO4 Hoạt tính khử sắt tính theo đương lượng FeSO4 Bảng b 13 Hoạt tính khử Fe algiante chiết từ rong mơ S oligocystum xử lý HCl nồng độ khác Độ hấp thụ bước Nồng độ RP (mgFeSO4/g DW) sóng 655 nm (%) Lần Lần Lần Lần Trung bình 31 0,028 0,029 0,5640 0,5680 0,5660±0,0028 32 0,039 0,038 0,6427 0,6385 0,6406±0,0029 33 0,04 0,041 0,6120 0,6160 0,6140±0,0028 Bảng b 14 Hoạt tính khử Fe algiante chiết từ rong mơ S oligocystum với nhiệt độ chiết khác Độ hấp thụ bước Nhiệt độ RP (mgFeSO4/g DW) sóng 655 nm (oC) Lần Lần Lần Lần Trung bình 60 0,249 0,215 0,7499 0,6794 0,7146±0,0498 65 0,241 0,228 0,7282 0,7015 0,7149±0,0189 70 0,276 0,226 0,8336 0,8121 0,8229±0,0151 75 0,21 0,229 0,6921 0,7264 0,7093±0,0242 80 0,216 0,227 0,6768 0,7035 0,6902±0,0189 78 Bảng b 15 Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với thời gian chiết khác Độ hấp thụ bước Thời gian RP (mgFeSO4/g DW) sóng 655 nm (phút) Lần Lần Lần Lần Trung bình 210 0,269 0,284 1,1405 1,1853 1,1629±0,0316 240 0,274 0,308 1,1481 1,2490 1,1985±0,0713 270 0,389 0,392 1,4869 1,4958 1,4913±0,0062 300 0,361 0,36 1,3881 1,3852 1,3867±0,0020 330 0,327 0,332 1,2802 1,2947 1,2875±0,0102 360 0,341 0,332 1,2971 1,2714 1,2843±0,0181 Bảng b 16 Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với môi trường pH chiết khác Độ hấp thụ bước RP (mgFeSO4/g DW) sóng 655 nm pH Lần Lần Lần Lần Trung bình 0,217 0,201 2,3571 2,2429 2,3000±0,0808 0,273 0,222 3,4326 2,9791 3,2059±0,3206 10 0,311 0,230 3,1194 2,5235 2,8215±0,4213 11 0,168 0,177 2,4086 2,4857 2,4471±0,0545 79 Bảng b 17 Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với tỷ lệ DM/NL chiết khác Độ hấp thụ Tỷ lệ bước sóng 655 RP (mgFeSO4/g DW) nm DM/NL Lần Lần Lần Lần Trung bình 20/1 0,842 0,85 1,0096 1,0180 1,0138±0,0059 25/1 0,735 0,768 1,2114 1,2586 1,2350±0,0333 30/1 0,642 0,686 1,3159 1,3925 1,3542±0,0542 35/1 0,618 0,632 1,6291 1,6603 1,6447±0,0220 40/1 0,472 0,438 1,5294 1,4405 1,4849±0,0628 Bảng b 18 Hoạt tính khử Fe dịch chiết alginate từ rong mơ S oligocystum với số lần chiết khác Độ hấp thụ bước Số lần RP (mgFeSO4/g DW) sóng 655 nm chiết Lần Lần Lần Lần Trung bình 0,568 0,573 1,1188 1,1270 1,1229±0,0058 0,315 0,322 0,8468 0,8607 0,8538±0,0097 0,205 0,201 0,6405 0,6325 0,6365±0,0056 ... chiết rút alginate từ rong mơ S oligocystum thu mẫu Ninh Thu n 2) Đề xuất quy trình chiết rút alginate từ rong mơ S oligocystum thu mẫu Ninh Thu n Do bước đầu tiếp cận với nghiên cứu khoa học kiến... học có rong mơ Ninh Thu n có alginate chưa quan tâm mực Do vậy, đồng ý khoa Công nghệ Thực phẩm, em giao thực đề tài Nghiên cứu chiết alginate từ rong mơ Sargassum oligocystum thu mẫu Ninh Thu n”... 35 PHẦN 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH CÁC ĐIỀU KIỆN THÍCH HỢP CHO QUÁ TRÌNH CHIẾT RÚT ALGINATE TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THU N 36