Nghiên cứu thu nhận fucoidan từ rong mơ sargassum oligocystum thu mẫu tại ninh thuận

BỘ GIÁO VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG LÊ THỊ MINH HIẾU NGHIÊN CỨU THU NHẬN FUCOIDAN TỪ RONG MƠ SARGASSUM OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHÁNH HÒA - 2018 BỘ GIÁO VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG LÊ THỊ MINH HIẾU NGHIÊN CỨU THU NHẬN FUCOIDAN TỪ RONG MƠ SARGASSUM OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN LUẬN VĂN THẠC SĨ Ngành: Công nghệ Sinh học Mã số: 8420201 Quyết định giao đề tài: 551/QĐ-ĐHNT ngày 21/06/2017 Quyết định thành lập HĐ: 1367/QĐ-ĐHNT ngày 19/11/2018 Ngày bảo vệ: 01/12/2018 Người hướng dẫn khoa học: PGS TS VŨ NGỌC BỘI Chủ tịch Hội đồng: TS NGƠ THỊ HỒI DƯƠNG Phịng Đào tạo Sau đại học: KHÁNH HÒA - 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi hồn thành tài trợ đề tài: “Nghiên cứu sản xuất số sản phẩm từ rong mơ Sargassum Ninh Thuận” Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận văn ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành Luận văn Trước hết tơi xin gửi tới Ban Giám hiệu Trường Đại học Nha Trang, Ban Chủ nhiệm Khoa Công nghệ Thực phẩm Khoa Sau đại học kính trọng, niềm tự hào học tập nghiên cứu trường năm qua Sự biết ơn sâu sắc xin giành cho thầy PGS TS Vũ Ngọc Bội Trưởng khoa Công nghệ Thực phẩm - Chủ nhiệm đề tài: “Nghiên cứu sản xuất số sản phẩm từ rong mơ Sargassum Ninh Thuận” tận tình hướng dẫn, động viên hỗ trợ kinh phí cho tơi suốt trình thực luận văn Xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu - Trường Cao đẳng Kỹ thuật Công nghệ Nha Trang tạo điều kiện cho phép học để nâng cao trình độ Xin cám ơn q thầy giáo khoa Công nghệ Thực phẩm cán - phịng Hóa phân tích Triển khai Cơng nghệ - Viện Nghiên cứu Ứng dụng Công nghệ Nha Trang - Viện Công nghệ Sinh học & Môi trường tận tình giúp đỡ tạo điều kiện cho suốt thời gian qua Đặc biệt, xin ghi nhớ tình cảm, giúp đỡ gia đình bạn bè ln ln chia sẻ kịp thời tơi q trình nghiên cứu iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH ix TRÍCH YẾU LUẬN VĂN xi MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ RONG BIỂN 1.2 TỔNG QUAN VỀ RONG MƠ 1.3 TỔNG QUAN VỀ FUCOIDAN 12 1.3.1 Giới thiệu fucoidan 12 1.3.2 Cấu trúc fucoidan 13 1.3.3.Thành phần fucoidan rong mơ 15 1.3.4 Hoạt tính sinh học fucoidan 17 1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU FUCOIDAN TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC 23 1.4.1 Tình hình nghiên cứu fucoidan ngồi nước 23 1.4.2 Tình hình nghiên cứu fucoidan nước 24 1.5 MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT FUCOIDAN 27 1.5.1 Cơ sở trình tách chiết 27 1.5.2 Giới thiệu số phương pháp chiết 27 1.5.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết 28 1.6 GIỚI THIỆU VỀ KỸ THUẬT CHIẾT KHUẾCH TÁN LÀM GIÀU 30 iv 1.7 GIỚI THIỆU VỀ ỨNG DỤNG CỦA SĨNG SIÊU ÂM TRONG TRÍCH LY FUCOIDAN 30 1.8 GIỚI THIỆU VỀ QUÁ TRÌNH SẤY 31 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 34 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.2.1 Phương pháp phân tích 34 2.2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 38 2.2.2.1 Cách tiếp cận nội dung nghiên cứu chiết rút fucoidan từ rong mơ S oligocystum 38 2.2.2.2 Bố trí thí nghiệm 40 2.3 HÓA CHẤT VÀ CÁC THIẾT BỊ CHỦ YẾU ĐÃ SỬ DỤNG 51 2.3.1 Hóa chất 51 2.3.2 Thiết bị chủ yếu sử dụng 51 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 52 3.1 NGHIÊN CỨU LỰA CHỌN PHƯƠNG PHÁP CHIẾT RÚT FUCOIDAN TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM THU MẪU TẠI NINH THUẬN 52 3.2 NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HÓA QUÁ TRÌNH CHIẾT RÚT FUCOIDAN TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM 55 3.2.1 Xác định thời gian chiết rút 55 3.2.2 Ảnh hưởng pH dung môi đến khả chiết rút fucoidan 60 3.2.3 Ảnh hưởng tỉ lệ DM/NL đến khả chiết rút fucoidan từ rong mơ S oligocystum 64 3.2.4 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết rút fucoidan từ rong mơ S oligocystum 69 3.2.5 Ảnh hưởng số lần chiết đến hàm lượng fucoidan 74 v 3.2.6 Tối ưu hóa trình chiết rút fucoidan từ rong mơ 76 3.3 NGHIÊN CỨU CHẾ ĐỘ SẤY PHUN THU BỘT FUCOIDAN CHIẾT RÚT TỪ RONG MƠ S OLIGOCYSTUM 84 3.3.1 Nghiên cứu chế độ cô đặc dịch chiết fucoidan 84 3.3.2 Xác định chế độ sấy khô thu hoạt chất sinh học tan nước 87 3.3.2.1 Xác định chất trợ sấy 87 3.3.2.2 Xác định nhiệt độ khơng khí đầu vào 89 3.3.2.3 Xác định áp suất khí nén 92 3.3.2.4 Xác định tốc độ bơm dịch 95 3.3.3 Đề xuất quy trình sấy phun thu bột fucoidan từ rong mơ S oligocystum 98 3.4 NGHÊN CỨU SẢN XUẤT TRÀ HÒA TAN TỪ BỘT FUCOIDAN 102 3.4.1 Xác định tỷ lệ bột fucoidan 102 3.4.2 Xác định tỷ lệ đường bổ sung 104 3.4.3 Xác định tỷ lệ hỗn hợp acid citric acid ascorbic bổ sung 104 3.4.4 Sản xuất thử sản phẩm trà hòa tan đánh giá chất lượng sản phẩm 106 3.5 ĐỀ XUẤT QUY TRÌNH CHIẾT RÚT FUCOIDAN TỪ RONG MƠ VÀ TRÀ FUCOIDAN HÒA TAN 109 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 112 KẾT LUẬN 112 ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 112 TÀI LIỆU THAM KHẢO 114 PHỤ LỤC 121 vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT DM : dung môi NL : nguyên liệu TA : hoạt tính chống oxy hóa tổng RP : hoạt tính khử sắt DW : khối lượng rong khơ C2 : Vị trí cacbon số FDA: Food and Drug Administration HIV: Human Immunodeficiency Virus HGF: Hepatocyte Growth Factor DNA: Acid Deoxyribo Nucleic vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hố học (%) số lồi rong biển Bảng 1.2 Các giống loài rong mơ tìm thấy phân bố Bảng 1.3 Hàm lượng thành phần monosacarit fucoidan từ 08 loài rong nâu Việt Nam .14 Bảng 1.4 Thành phần hóa học số fucoidan .16 Bảng 2.1 Điều kiện thí nghiệm chọn 46 Bảng 2.2 Bảng bố trí thí nghiệm tối ưu hóa q trình chiết 46 Bảng 2.3 Bảng bố thí thí nghiệm tâm tối ưu hóa q trình chiết 47 Bảng 3.1 Kết bố trí thí nghiệm theo phương pháp quy hoạch thực nghiệm .76 Bảng 3.2 Hệ số bj 77 Bảng 3.3 Kết thí nghiệm tâm .78 Bảng 3.4 Kết tính S bj 78 Bảng 3.5 Kết tính tj 78 Bảng 3.6 Kết kiểm định tương thích phương trình theo .79 Bảng 3.7 Bảng kết thí nghiệm tối ưu hóa 80 Bảng 3.8 Sự thay đổi số tiêu dịch chiết trước sau cô đặc 84 Bảng 3.9 Kết ảnh hưởng chất trợ sấy đến số tiêu chất lượng chế phẩm sau sấy phun .87 Bảng 3.10 Kết đánh giá số tiêu chất lượng chế phẩm sấy nhiệt độ khí đầu vào khác từ 110oC  140oC .90 Bảng 3.11 Ảnh hưởng áp suất khí nén đến số tiêu chất lượng chế phẩm fucoidan sau sấy 93 Bảng 3.12 Ảnh hưởng tốc độ bơm nhập liệu đến số tiêu chất lượng chế phẩm sau sấy .95 Bảng 3.13 Kết đánh giá tiêu lý hóa hoạt tính chống oxy bột fucoidan từ rong mơ S oligocystum 100 Bảng 3.14 Kết đánh giá chất lượng cảm quan bột sấy phun hợp chất sinh học tan nước từ rong mơ .101 Bảng 3.15 Kết phân tích thành phần kim loại nặng sản phẩm .101 Bảng 3.16 Kết kiểm tra tiêu vi sinh vật chế phẩm .101 viii Bảng 3.17 Tỷ lệ phối chế thành phần tạo trà hòa tan (100ml) 106 Bảng 3.18 Kết đánh giá tiêu hố lý sản phẩm trà rong mơ hịa tan 106 Bảng 3.19 Kết đánh giá trạng thái cảm quan sản phẩm trà hòa tan 107 Bảng 3.20 Kết đánh giá tổng điểm trung bình cảm quan sản phẩm trà hoà tan 107 Bảng 3.21 Kết kiểm tra tiêu vi sinh sản phẩm trà hòa tan 107 Bảng 3.22 Chi phí nguyên vật liệu cho 1kg bột fucoidan từ rong mơ S oligocystum dùng sản xuất trà hòa tan .108 Bảng 3.23 Kết sơ tính tốn chi phí ngun vật liệu sử dụng cho gói trà hịa tan (trong 200ml nước) 108 118 40 Maruyama H., Tamauchi H., Iizuka M (2006), "The role of NK cells in antitumor activity of dietary fucoidan from Undaria pinnatifida sporophylls (Mekabu)", Planta Med, 72(15), 1415–1417 41 Merrill JE, Waaland JR The seaweed resources of the United State of America (1998), In: Seaweed resources of the world JICA, 303-323 42 Mourao P (2004), "Use of Sulfated Fucans as Anticoagulant and Antithrombotic Agents: Future Perspectives'', Curr Pharm Des, 10(9), 967–981 43 Nishino T., Nishioka C., Ura H (1994), "Isolation and partial characterization of a noval amino sugar-containing fucan sulfate from commercial Fucus vesiculosus fucoidan'', Carbohydr Res, 255(C), 213–224 44 Ohno M., A T Critchley (1997), Seaweed cultivation and marine ranching, Bull Mar Sci Fish, 45 O’Leary R., Rerek M., Wood E J (2004), "Fucoidan modulates the effect of transforming growth factor (TGF)-beta1 on fibroblast proliferation and wound repopulation in in vitro models of dermal wound repair'', Biol Pharm Bull, 27(2), 266–270 46 Ponce N M A, Pujol C A, Damonte E B (2003), "Fucoidans from the brown seaweed Adenocystis utricularis: Extraction methods, antiviral activity and structural studies'', Carbohydr Res, 338(2), 153–165 47 Riou D., Colliec Jouault S., Pinczon du Sel D., Bosch S., Siavoshian S., Le Bert V Tomasoni C., Sinquin C., Durand P R C (1996), "Antitumor and antiproliferative effects of a fucan extracted from ascophyllum nodosum against a non-small-cell bronchopulmonary carcinoma line" 1213–8 48 Rocha De Souza M C, Marques C T, Guerra Dore C M (2007), "Antioxidant activities of sulfated polysaccharides from brown and red seaweeds", J Appl Phycol, 19(2), 153–160 49 Saito A., Yoneda M., Yokohama S (2006), "Fucoidan prevents concanavalin A-induced liver injury through induction of endogenous IL-10 in mice'', Hepatol Res, 35(3), 190–198 119 50 Shibata H., Kimura Takagi I., Nagaoka M (2000), "Properties of fucoidan from Cladosiphon okamuranus tokida in gastric mucosal protection'', Biofactors, 11(4), 235–245 51 Shimizu J., Wada Funada U., Mano H (2005), "Proportion of Murine Cytotoxic T Cells is Increased by High Molecular-Weight Fucoidan Extracted from Okinawa mozuku (Cladosiphon okamuranus)'', J Heal Sci., 51(3), 394-397 52 Tako M., Yoza E., Tohma S (2000), "Chemical characterization of acetyl fucoidan and alginate from commercially cultured Cladosiphon okamuranus'', Bot Mar, 43(4), 393–399 53 Usov A I, Bilan M I (2009), Fucoidans-sulfated polysaccharides of brown algae, Russian Chemical Reviews, 78 (8), 785-799 54 Usov A I (2012), Structural diversity of brown algal fucoidans The 1st Symposium on Marine Enzymes and Polysaccharides, Abstract book, Nhatrang 55 Usui T, Asari K, Mizuno T (1980), "Isolation of Highly Purified “Fucoidan” from Eisenia bicyclis and Its Anticoagulant and Antitumor Activities", Agric Biol Chem, 44(8), 1965–1966 56 Veena C K., Josephine A., Preetha S P (2006), "Renal peroxidative changes mediated by oxalate: The protective role of fucoidan", Life Sci, 79(19), 1789–1795 57 Verdrengh M., Erlandsson Harris H., Tarkowski A (2000), "Role of selectins in experimental Staphylococcus aureus induced arthritis'', Eur J Immunol, 30(6), 1606–1613 58 Yu G., Zhao X., Yang B (2006), "Sequence determination of sulfated carrageenan-derived oligosaccharides by high-sensitivity negative-ion electrospray tandem mass spectrometry'', Anal Chem, 78(24), 8499–8505 59 Zhang Q., Li N., Zhao T (2005) "Fucoidan inhibits the development of proteinuria in active heymann nephritis'', Phyther Res, 19(1), 50–53 60 Zvyagintseva Tatiana N, Nataliya M Shevchenko, Alexander O Chizhov, Tatiana N Krupnova, Elena V Sundukova, Vladimir V Isakov (2003), Water- 120 soluble polysaccharides of some far-eastern brown seaweeds Distribution, structure, and their dependence on the developmental conditions, J Exp Mar Biol Ecol, 294, 1-13 61 Zvyagintseva, Mikailovna T (2005) "Method for processing seaweed", WO2005014657 Trang web tham khảo 62 http://www.algaebase.org 63.http://devi-renewable.com/2012/03/05/potential-of-seaweed-for ethanol production-in-vietnam/ 64.http://www.drbvitamins.com/products/best_fucoidan_300mg_60vc#sthash dzDDAG9.dpbs 121 PHỤ LỤC Phụ lục Phương pháp định lượng fucoidan theo John Peter Paul (2014) Hút xác 1ml dịch fucoidan cho vào ống nghiệm làm lạnh dung dịch nước đá, thêm vào dung dịch 4,5ml axit sunfuric 0,5M (1V nước : 6V H2SO4), lắc Sau đó, hỗn hợp trước tiên nâng lên nhiệt độ 25oC giữ nhiệt độ 3-4 phút, sau tiếp nhúng vào nước sơi tục giữ phút Sau làm lạnh hỗn hợp nước máy Sau làm lạnh, cho vào hỗn hợp 0,1ml dung dịch cysteine hydrochlorid 5%, trộn đo độ hấp thụ quang hỗn hợp bước song 396nm 427nm Độ hấp thụ quang fucoidan tính cơng thức: Afucose = A396 – A427 Dựa vào đường chuẩn fucose tính tốn hàm lượng fucoidan theo công thức sau: Hàm lượng fucoidan tính theo cơng thức: Fucoidan = fucose*2 Phụ lục 2: Xác định hoạt tính chống oxy hóa tổng Cách pha đường chuẩn: pha dung dịch acid ascorbic 1mg/1ml sau lấy 10, 20, 30, 40, 50, 80, 90 (µl) bổ sung nước cất tương ứng cho đủ 1ml sau thêm 3ml dung dịch A vào giữ 90 phút 95oC Sau đo bước sóng 695nm Với kết đo vẽ đường chuẩn đưa phương trình So sánh kết mẫu chiết với đường chuẩn có hàm lượng tương ứng acid ascorbic TA y = 0.0137x - 0.1013 R² = 0.9968 1.5 0.5 0 10 Đường chuẩn: 20 30 40 50 60 70 80 90 100 122 Phụ lục 3: Xác định hoạt tính khử sắt Cách xác định đường chuẩn: pha dung dịch FeSO4 1g/100ml sau lấy 10, 20, 30, 40, 50, 80, 90 (µl), sau bổ sung 0,5ml đệm phosphate pH = 7,2 0,2ml K3[Fe(CN6] 1% Giữ hỗn hợp 20 phút 50oC Sau thêm vào 500µl CCl3COOH 10% bổ sung nước cất cho đủ 800µl 80µl FeCl3 0,1% Sau đo bước sóng 655nm Với kết đo vẽ đường chuẩn đưa phương trình So sánh kết mẫu chiết với đường chuẩn có hàm lượng tương ứng FeSO4 RP 0.5 y = 0.0145x - 0.1139 R² = 0.9907 0 10 20 30 40 50 60 70 Đường chuẩn: Phụ lục 4: Kết thí nghiệm Bảng 4.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum hai phương pháp chiết khác Phương pháp Độ hấp thụ bước sóng 695 nm TA (mg acid ascorbic/g DW) Lần Lần Lần Lần Trung bình Ngâm chiết 0.362 0.325 8.454 7.779 8.117 ± 0.477 Chiết làm giàu 0.498 0.551 5.741 6.249 5.995 ± 0.359 80 123 Bảng 4.2 Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum hai phương pháp chiết khác Phương pháp Độ hấp thụ bước sóng 655 nm RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần Lần Trung bình Ngâm chiết 0.41 0.366 1.807 1.655 1.731 ± 0.107 Chiết làm giàu 0.579 0.601 1.254 1.294 1.274 ± 0.028 Bảng 4.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum hai phương pháp chiết khác Phương pháp Hàm lượng fucoidan (mg/g DW) Lần Lần Trung bình Ngâm chiết 32.45 31.563 32.007 ± 0.627 Chiết làm giàu 27.003 26.961 26.982 ± 0.03 Phụ lục Bảng 5.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum thời gian chiết khác Thời gian Độ hấp thụ bước sóng 695 nm (phút) Lần TA (mg acid ascorbic/g DW) Lần Lần Lần Trung bình 4.162 ± 0.272a 45 0.362 0.321 4.354 3.969 60 0.402 0.387 4.822 4.678 4.75 ± 0.102b 75 0.405 0.388 4.851 4.688 4.77 ± 0.115b 90 0.41 0.396 4.852 4.719 4.786 ± 0.094b 124 Bảng 5.2 Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum thời gian chiết khác Thời gian Độ hấp thụ bước sóng 655 nm (phút) Lần RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần Trung bình 45 0.48 0.482 1.055 1.058 1.057± 0.002a 60 0.489 0.495 1.091 1.102 1.097 ± 0.008b 75 0.493 0.501 1.099 1.113 1.106 ± 0.01b 90 0.499 0.508 1.099 1.115 1.107 ± 0.011b Bảng 5.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum thời gian chiết khác Hàm lượng fucoidan (mg/g DW) Thời gian (phút) 45 Lần Lần 21.618 21.115 60 27.911 28.002 75 28.076 28.221 90 28.505 28.449 Trung bình 21.367 ± 0.356a 27.957 ± 0.064b 28.149 ± 0.103b 28.477 ± 0.04b Phụ lục Bảng 6.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum số lần chiết khác Độ hấp thụ bước Số lần chiết Lần Lần TA (mg acid ascorbic/g DW) sóng 695 nm 0.552 Lần 0.554 Lần 5.603 Lần 5.62 Trung bình 5.612 ± 0.012c 125 Lần 0.267 Lần 0.139 0.274 0.147 3.528 2.346 3.595 2.424 3.562 ±0.047b 2.385 ± 0.055a Bảng 6.2 Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum số lần chiết khác Số lần chiết Độ hấp thụ bước sóng 655 nm Lần Lần RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần 0.633 0.625 1.21 1.198 Lần 0.47 0.49 1.057 1.093 Lần 0.36 0.39 0.874 0.93 Trung bình 1.204 ± 0.008c 1.075 ± 0.025b 0.902 ± 0.04a Bảng 6.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum mơ số lần chiết khác Số lần chiết Hàm lượng Fucoidan (mg/g DW) Lần Lần Lần 26.963 26.874 Lần 16.723 16.884 Lần 10.51 9.986 Trung bình 26.919 ± 0.063c 16.804 ± 0.114b 10.248 ± 0.371a 126 Phụ lục Bảng 7.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum pH dung môi chiết khác pH Độ hấp thụ bước sóng 695 nm Lần Lần TA (mg acid ascorbic/g DW) Lần Lần 1,5 0.161 0.165 2.513 2.551 0.156 0.152 2.629 2.588 2,5 0.145 0.157 2.382 2.498 0.162 0.166 2.354 2.39 3,5 0.152 0.149 2.219 2.192 Trung bình 2.532 ± 0.027cd 2.609 ± 0.029d 2.44 ± 0.082bc 2.372 ± 0.025b 2.206 ± 0.019a Bảng 7.2 Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum pH dung môi chiết khác pH Độ hấp thụ bước sóng 655 nm RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần Lần 0.217 0.193 0.599 0.556 0.275 0.206 0.751 0.618 2,5 0.225 0.217 0.619 0.605 0.177 0.189 0.492 0.512 3,5 0.179 0.174 0.485 0.477 Trung bình 0.578 ± 0.03abc 0.685 ±0.094c 0.612 ± 0.01bc 0.502 ± 0.014ab 0.481 ± 0.006a 127 Bảng 7.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum pH dung môi chiết khác pH Hàm lượng Fucoidan (mg/g DW) Lần Lần 25.671 26.232 27.679 28.112 2,5 23.935 22.261 20.794 21.001 3,5 19.073 18.19 Trung bình 25.952 ± 0.397d 27.896 ± 0.306e 23.098 ± 1.184c 20.898 ± 0.146b 18.632 ± 0.624a 128 Phụ lục Bảng 8.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum tỉ lệ DM/NL khác Tỉ lệ DM/NL Độ hấp thụ bước sóng 695 nm TA (mg acid ascorbic/g DW) Lần Lần Lần Lần 14/1 0.335 0.327 1.871 1.837 15/1 0.412 0.409 2.576 2.561 16/1 0.442 0.434 2.925 2.882 17/1 0.33 0.321 2.361 2.312 18/1 0.278 0.254 2.18 2.042 Trung bình 1.854 ± 0.024a 2.569 ± 0.011d 2.904 ± 0.03e 2.337 ± 0.035c 2.111 ± 0.098b Bảng Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum tỉ lệ DM/NL khác Tỉ lệ DM/NL Độ hấp thụ bước sóng 655 nm RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần Lần 14/1 0.468 0.43 0.472 0.441 15/1 0.495 0.477 0.577 0.56 16/1 0.712 0.865 0.84 0.996 17/1 0.478 0.482 0.612 0.616 18/1 0.403 0.399 0.561 0.557 Trung bình 0.457 ± 0.022a 0.569 ± 0.012ab 0.918 ± 0.11c 0.614 ± 0.003b 0.559 ± 0.003ab 129 Bảng 8.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum tỉ lệ DM/NL khác Hàm lượng Fucoidan (mg/g DW) Tỉ lệ DM/NL 14/1 Lần Lần 19.003 18.988 15/1 20.113 19.79 16/1 21.72 21.942 17/1 20.08 19.001 18/1 18.907 18.613 Trung bình 18.996 ± 0.011ab 19.952 ± 0.228b 21.831 ± 0.157c 19.541 ± 0.763ab 18.76 ± 0.208a Phụ lục Bảng 9.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum nhiệt độ chiết khác Nhiệt độ (oC) Độ hấp thụ bước sóng 695 nm Lần Lần TA (mg acid ascorbic/g DW) Lần Lần 70 0.336 0.342 2.155 2.184 75 0.372 0.352 2.332 2.233 80 0.342 0.362 2.346 2.452 85 0.437 0.474 2.505 2.677 90 0.462 0.471 2.673 2.715 95 0.584 0.627 3.126 3.323 Trung bình 2.17 ± 0.021a 2.283 ± 0.07ab 2.399 ± 0.075bc 2.591 ± 0.122cd 2.694 ± 0.03d 3.225 ± 0.139e 130 Bảng 9.2 Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum nhiệt độ chiết khác Nhiệt độ (oC) Độ hấp thụ bước sóng 655 nm RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần Lần 70 0.369 0.35 0.45 0.432 75 0.446 0.432 0.521 0.508 80 0.399 0.367 0.513 0.481 85 0.335 0.321 0.395 0.382 90 0.297 0.31 0.368 0.38 95 0.29 0.268 0.348 0.329 Trung bình 0.441 ± 0.013c 0.515 ± 0.009d 0.497 ± 0.023d 0.389 ± 0.009b 0.374 ± 0.008b 0.339 ± 0.013a Bảng 9.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum nhiệt độ chiết khác Hàm lượng Fucoidan (mg/g DW) Nhiệt độ (oC) Lần Lần Trung bình 70 18.043 18.129 18.086 ± 0.061a 75 18.97 19.021 18.996 ± 0.036b 80 19.707 19.58 19.644 ± 0.09b 85 20.092 20.87 20.481 ± 0.55c 90 20.094 20.881 20.488 ± 0.556c 95 22.003 21.975 21.989 ± 0.02d 131 Phụ lục 10 Bảng 10.1 Kết xác định hoạt tính oxy hóa dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum hai mẫu rong khác Mẫu rong Mẫu (bã chiết Phlorotanin) Mẫu (rong ban đầu) Độ hấp thụ bước sóng 695 nm TA (mg acid ascorbic/g DW) Lần Lần Lần Lần 0.188 0.198 1.447 1.497 0.357 0.383 2.191 2.315 Trung bình 1.472 ± 0.035 2.253 ± 0.088 Bảng 10.2 Kết xác định hoạt tính khử sắt dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum hai mẫu rong khác Mẫu rong Mẫu 1(bã chiết Phlorotanin) Mẫu (rong ban đầu) Độ hấp thụ bước sóng 655 nm RP (mg FeSO4/g DW) Lần Lần Lần Lần 0.31 0.275 0.668 0.612 0.436 0.465 0.828 0.872 Trung bình 0.64 ± 0.04 0.85 ± 0.031 Bảng 10.3 Kết xác định hàm lượng fucoidan dịch chiết rong mơ Sargassum oligocystum hai mẫu rong khác Mẫu rong Hàm lượng fucoidan (mg/g DW) Lần Lần Trung bình 16.0024 15.9691 15.986 ± 0.024 16.7033 16.6011 16.652 ± 0.072 Mẫu (bã chiết Phlorotanin) Mẫu (rong ban đầu) 132 Phụ lục 11 Bảng 11.1 Bảng mô tả điểm cảm quan cho sản phẩm trà hòa tan STT Tên tiêu HSQT Điểm Yêu cầu Màu sáng, đặc trưng Màu vàng sáng, đặc trưng Màu vàng nâu Màu sẫm Màu vàng sẫm tối Màu nhạt đen nâu Mùi thơm đặc trưng, hài hịa, khơng có mùi lạ Mùi thơm đặc trưng, khơng có mùi lạ Mùi thơm nhẹ, hài hịa, khơng có mùi lạ Khơng có mùi đặc trưng sản phẩm, hài hịa Khơng có mùi đặc trưng sản phẩm, có mùi lạ Mùi khét sản phẩm màu sẫm Có kết hợp hài hịa vị đặc trưng rong mơ vị dịu theo tỷ lệ phối trộn Vị nhẹ Sản phẩm có vị khơng hài hịa, nhiều gắt Sản phẩm có vị q q gắt Sản phẩm khơng có vị đặc trưng Sản phẩm có vị lạ Rất trong, khơng cặn Trong, có cặn Trong, có vón cục Kém trong, lẫn cặn Khơng trong, lẫn nhiều cặn Lẫn nhiều cặn vón cục Màu sắc Mùi 3 Vị Độ ... đề tài ? ?Nghiên cứu thu nhận fucoidan từ rong mơ Sargassum oligocystum thu mẫu Ninh Thu? ??n” Mục tiêu luận văn Xây dựng quy trình thu nhận fucoidan từ rong mơ Sargassum oligocystum - lồi rong theo... fucoidan từ rong mơ Sargassum oligocystum sản xuất trà fucoidan hòa tan 114 xii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên đề tài ? ?Nghiên cứu thu nhận fucoidan từ rong mơ Sargassum oligocystum thu mẫu Ninh. .. thích hợp cho trình chiết fucoidan từ rong mơ Sargassum oligocystum Ninh Thu? ??n 2) Đã xác định thông số tối ưu cho trình chiết fucoidan từ rong mơ S oligocystum Ninh Thu? ??n kỹ thu? ??t chiết khuếch tán