Nghiên cứu xây dựng panel lympho và bộ sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp mô lớp 1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH [”””\ THÁI HỒNG HÀ LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Thành Phố Hồ Chí Minh - Năm 2008 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH [”””\ THÁI HỒNG HÀ Chuyên ngành: SINH LÝHỌC Mã số: 62.72.04.05 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: GS Phạm Hoàng Phiệt Thành Phố Hồ Chí Minh - Năm 2008 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình khác Thái Hồng Hà NHỮNG TỪ VIẾT TẮT aa: axit amin BC: Bạch cầu CD: Cluster differential CTL: cytotoxic T lymphocyte CTL: cytotoxic T lymphocyte (lympho T độc tế bào) DNA: Deoxyribonucleic-acid ĐƯMD: Đáp ứng miễn dòch ĐTB: Đại thực bào FITC: Fluoescein Isothiocyanate conjugate HLA: Human lymphocyte antigen Ig: Immunoglobulin IgS: Immunoglobulin surface KHTK: Kháng huyết kháng KIR: Killer cell Ig like receptor KN: Kháng nguyên KT: Kháng thể MEM: Minimun Essential Medium MHC: Major compatibility complex.( phức hợp hòa hợp mô chính) NK: Natural killer cell ( tế bào diệt tự nhiên) PBS: Phosphate buffer Saline PCR-SSOP: Polymerase chain reaction - sequence specific oligonucleotides primers PCR-SSP: Polymerase chain reaction - sequence specific primers TCR: T cell receptor.( thụ thể tế bào lympho T) Th: T helper ( tế bào lympho T giúp đỡ) TNF: Tumor necrosis factor ( yếu tố hõai tử u) UTVH: Ung thư vòm hầu W/S:Workshop Lời cam đoan Những từ viết tắt MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU NỘI DUNG TIẾN HÀNH .4 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái quát phân tử HLA 1.1.1 Các gien lớp I 1.1.2 Các gien lớp II 1.1.3 Các gien lớp III 1.2 Haplotype di truyền gien HLA: 10 1.2.1 Haplotype: 10 1.2.2 Sự di truyền hệ thống HLA 11 1.2.3 Sự cân liên kết 12 1.3 Cấu trúc phân tử HLA 13 1.3.1 Cấu trúc phân tử HLA lớp I 13 1.3.2 Cấu trúc phân tử HLA lớp II 16 1.3.3 Sự phân bố phân tử HLA 18 1.4 Chức phân tử HLA: 18 1.4.1 Chức phân tử HLA lớp I: 18 1.4.2 Chức phân tử HLA lớp II: 19 1.5 HLA-G: 19 1.6 Kiểu hình phân tử HLA: 21 1.7 Mối liên quan kiểu hình kiểu gien nhóm HLA: 23 1.8 Ý nghóa sinh học phân tử HLA lãnh vực y học: 24 1.8.1 Vai trò phân tử HLA ghép: 25 1.8.2 HLA nhân chủng học: 26 1.8.3 HLA pháp y 27 1.8.4 HLA tính nhạy cảm bệnh lý 27 1.8.5 HLA truyền tiểu cầu 30 1.9 Các kỹ thuật để xác đònh phân tử HLA ứng dụng 31 1.9.1 Kỹ thuật độc tế bào 31 1.9.2 Kỹ thuật PCR 32 1.10 Tình Hình Nghiên Cứu HLA Việt Nam CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiện cứu để xây dụng dàn Panel 37 39 39 39 2.1.2 Đối tượng nghiện cứu để phân lập huyết thanh, tạo mẫu huyết đơn đặc hiệu 2.2 Phương pháp nghiên cứu 39 40 2.2.1 Phương pháp tiếh hành lấy mẫu xác đònh HLA mẫu thử kỹ thuật PCR-SSO 40 2.2.2 Phương pháp tạo Panel Lympho 41 2.2.3 Phương pháp tạo sinh phẩm chẩn đoán HLA kỹ thuật độc tế bào Terasaki 46 2.2.4 Phương pháp kiểm chứng độ đặc hiệu độ nhạy kháng huyết thanh, sau chiết tách 50 2.2.5 Bước đầu ứng dụng sản phẩm việc chẩn đoán bệnh dầy dính cột sống liên quan đến HLA- B27 51 2.2.6 Phương pháp xử lý số liệu 51 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 52 3.1 Kết thu góp mẫu kết HLA lớp I 150 người tình nguyện 52 3.2 Kết tạo panel lympho 150 mẫu phân tích 64 3.3 Kết tạo sinh phẩm từ trình chiết tách kháng thể kháng HLA lớp I từ máu âm đạo sản phụ sau sổ 66 3.4 Kết kiểm chứng độ đặc hiệu độ nhạy kháng huyết HLA lớp I chiết tách CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 66û 70 4.1 Đặc điểm dàn panel HLA lớp I 70 4.2 Tỷ lệ đặc điểm kháng huyết kháng HLA lớp I 84 4.2.1 Về kháng huyết kháng HLA-A 86 4.2.2 Về kháng huyết kháng HLA-B 88 4.3 Về kỹ thuật xét nghiệm 90 4.4 Kiểm chứng 90 Ứng dụng 90 5.1 Dàn Panel HLA lớp I 90 5.2 Ứng dụng sinh phẩm chẩn đoán HLA 91 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 92 Kết luận 92 Kiến nghò 93 Danh mục công trình nghiên cứu tác giả Tài liệu tham khảo Danh mục biểu đồ Danh mục sơ đồ Danh mục hình Danh mục bảng Phụ lục DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 1.1: Các kiểu hình alen phân tử HLA đặt tên từ năm 1968 đến tháng 10/2006 trang 21 Biểu đồ 3.2: Những kiểu hình HLA-A có tần suất cao 150 người tình nguyện trang 61 Biểu đồ 3.3: Những kiểu hình HLA-B có tần suất cao 150 người tình nguyện trang 63 Biểu đồ 4.4: So sánh tỷ lệ kháng thể kháng HLA-A tìm 297 mẫu huyết sản phụ sau sanh với kiểu hình HLA-A 91 người Kinh Việt nam trang 87 Biểu đồ 4.5: So sánh tỷ lệ kháng thể kháng HLA-B tìm 297 mẫu huyết sản phụ sau sanh với kiểu hình HLA-B 91 người Kinh Việt nam trang 89 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1 : Sự phân phối Haplotype từ cha mẹ sang con, hệ F1 trang 11 Sơ đồ 2.2: Sơ đồ tiến trình chiếât tách DNA trang 43 Sơ đồ 2.3: Sơ đồ khuếch đại DNA qua máy luân nhiệt trang 44 Sơ đồ 2.4: Quá trình thực kỹ thuật độc tế bào Terasaki trang 49 STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 65 Lý thò M 1962 2002 Phú Châu, Tân Phú , Tiền Giang 66 Ng Thò D 1979 1001 Bến Chương Dng Q4 67 Kim T 1979 1001 ? 68 Thúy T 1978 1001 ? 69 Hà Vân A 1980 1001 ? 70 Ng Thò Kim B 1975 2011 Cao Thắng Q3 71 Đinh T Ngọc Q 1967 1001 Võ Văn Tần F6 Q3 72 Ngô T Minh Đ 1972 1001 Đinh Tiên Hòang F3 QBT 73 Lê T Mạt T 1980 1001 Xóm Chiếu Q4 74 Ng Thò H 1971 1001 Tân Thạnh Tây Củ Chi 75 Dương thò Cẩm H 1979 1001 Châu Thành Hậu Giang 76 Ng Thò P 1978 1001 Tân Phước Gò Công TG 77 Lê Kim Đ 1979 1001 Bình Thạnh, Trảng Bàng, TN 78 Ng Thò Q 1964 6006 Bến Chương Dương Q1 79 Trần T P 1971 1001 Hòa thành Tây Ninh 80 Trần Thò Thu T 1974 3003 Phan Chu Trinh ĐN 81 Ng Thò Kim T 1973 1001 Cần Đước, LA 82 Trần Thanh B 1962 1001 Cần Đước LA 83 Linh Mỹ H 1976 2002 Bình Hưng Hòa BC 84 Ng Thò Kim N 1972 1001 Gò Công Tiền Giang 85 Đặng Thò Thanh V 1970 2002 Tôn Đản Q4 86 Lý T Phương L 1977 1001 Thôn Tây Giang Đài Lộc QN STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 87 Mai T Hoài Đ 1974 2002 Võ Văn Tần Q3 88 Dương thò T T 1971 2002 Lạc Long Quân Q11 89 Trần T S 1962 3003 Phạm vă Chiêu GV 90 Ng Thò H 1972 1001 Ng T Tàn Q8 91 Phan t Ngọc H 1967 2002 Đông LA 92 Trương t Tuyết N !(&& 1001 Hiệp Hòa , Long An 93 Hồ Xây T 1958 3003 XVNT F22 QBT 94 Ngô rthò Mỹ P 1973 1001 Xuân Lộc, Đ N 95 Nguyễn thò T 1961 1011 nguyễn F.14, Q 96 Châu Nọc H 1975 1001 Liên tỉnh 15 Q7 97 Ng Thò N 1960 2002 Châu Đốc An Giang 98 Nguyễn thò K.T 1966 1001 thò Nhà Bè 99 Nã thò H 1975 1001 F13 Q.TB 100 Lê thò Y 1962 3003 Bến Vân Đồn F6 Q.4 101 Lê thò P 1974 1001 Phù Châu Tân phù Thủ Đức 102 Nguyễn thò H 1963 3003 Trần Quốc Toản F7 Q.3 103 Khưu thò Ngọc H 1975 1001 Nguyễn Hữu Thoại Q BT 104 Lương thò H 1977 1001 Phan Tôn , Đa Kao Q.1 105 Trần thò Thu N 1965 10011 Tam Hà Tam Phú , Thủ Đức 106 Nguyễn t Kim Ph 1964 1001 Linh Tây, Thủ Đức 107 Phan thò Thanh H 1981 1001 Long An 108 Bùi thò L 1977 1001 Châu Đức Vũng Tàu STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 109 Hùynh thò Mỹ H 1966 1001 p1 ,Vạn Cân Thủ Đức 110 Trương thò Tuyết V 1966 3003 Ngô Tất Tố F2, Q BT 111 Phạm Nhục L 1972 1001 u Cơ F9 Q Tân Bình 112 Nguyễn t Lệ T 1964 4004 Thanh Nhơn Trạch ĐN 113 Trần thò Thu T 1962 1011 Linh Tây, TĐ 114 Trần thò Hồng V 1978 1001 Nguyễn Quang Trung, Tân An, LA 115 Lê thò Thu P 1967 3023 u Dương Lân F2 Q.8 116 Nguyễn thò M 1969 2002 Chánh Mỹ Bình Dương 117 Lưu thò Thanh X 1971 1001 Ng Ngọc Phương BT 118 Ng thò Bích T 1973 2002 Bùi Môn Hóc Môn 119 Trương thò Ngọc D 1969 2002 Bàu Cát F13, Q TB 120 Lê Xuân T 1963 5023 Nguyễn Đình Chiểu,F4, Q3 121 Phạm thò M 1958 3003 Thới An ,Q.12 122 Lê thi Thúy H 1980 1001 Trảng Bàng , Tây Ninh 123 Ng Mộng H 1970 2002 Đoàn văn Bơ, Q4 124 Trần thò Lệ T 1968 1021 QuốcLộ22 Đông HưngThuận Q.12 125 Lê thò Tuyết L 1982 1001 Bùi Viện , Q1 126 Ng thò Bạch M 1971 1001 Nguyễn Lâm ,BT 127 Nguyễn thò Yến N 1965 3003 Bùi Đình Túy 128 Ng thò Trinh T 1959 3003 CM T Biên hoa ĐN 129 Trần Ngọc V 1965 1001 Nguyễn Khoái Q4 130 Trần thò Kim L 1967 1001 An Hữu, Cái Be,ø TG STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 131 Lâm thò Tuyết T 1972 2002 Trần Xuân Soạn Q7 132 Phạm T Bích P 1971 1001 F Bình Chánh, Q 12 133 Nguyễn T Ngọc C 1968 2002 Lý Thái Tổ F1, Q3 134 Nguyễn Tố H 1971 1021 Hiệp Hòa, Đức Hòa 135 Bùi Thò Ngọc Đ 1979 1001 Phạm Thế Hiển, F3, Q8 136 Khiếu T Thu V 1962 1001 CMT8, F12, Q10 137 Huỳnh Thò G 1964 1001 Phước Vónh An ,Củ Chi 138 Nguyễn thò Thu T 1976 1001 Nguyễn Ngọc Phương F19 QBT 139 Ng Ngọc Hồng T 1973 1001 Tân Phú Trung , Củ Chi 140 Nguyễn kim M 1974 1001 Ng Tất Thành F18, Q4 141 Phạm Thò T 1977 0010 Trương Vónh Ký, F17, QTB 142 Vũ Thò thý H 1969 1001 Ng Thanh Tuyên F2, QTB 143 Đòan Thò H 1975 2002 Lê Quốc Hưng ,F12, Q4 144 Ng Thò Lệ T.û 1962 1001 Lạc Long Quân, F8, TB 145 Lê Thò Ngọc P 1977 0010 Cầu Kho Q1 146 Dương T Lệ H 1975 2002 Đức Hòa, LA 147 Nguyễn thò L 1977 1001 ? 148 Ngô Thò Thúy L 1970 1001 ? 149 Bùi Thò Mỹ L 1965 1001 ? 150 Ng Thò Thuỳ L 1967 1001 Ng Đình Chiểu,F4, Q3 151 Chu Tú P 1974 1001 Hậu Giang , F5, Q6 152 Lê Thò Xuân T 1973 1001 Điện Biên Phủ, F15 STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 153 Phạm Xuân Đỗ Q 1972 1001 An Thạnh, Thuận An, BD 154 Dương t Hồng N 1972 1001 Thích Quảng Đức ,Phú Nhuậ 155 Trần Thò Bích L 1965 1001 ? 156 Ng Ngọc Phương L 1969 1001 Bùi Thò Xuân, TB 157 Đặng Thò Y 1001 1001 Phạm Văn Hai, F13, TB 158 Nguyễn t Phương C 1958 3003 ? 159 Tăng Mỹ H 1976 1001 130 Hùynh Mẫn Đạt F.3 Q1 160 Trần Thò B 1960 3003 Quãng Tân, Đắc Lắc 161 Nguyễn Ngọc T A 1969 1001 GV 162 Đặng thò Phng N 1971 2002 Nhà Bè 163 HuỳnhPhượngD T 1967 1001 Q8 164 Nguyễn thò Thu T 1973 1001 Q4 165 Nguyễn thò Đan T 1969 2002 Hùynh văn Bánh F4 Phú Nhuận 166 Đặng Thò Kim Q 1967 1001 Lái Thiêu 167 Nguyễn thò S 1961 4004 Vónh Thuận F Long Bình Q.9 168 Dng thò T 1965 2002 p2 Phú Xuân, Nhà Bè 169 Trương thò Tú L 1970 1001 Lê văn Sỹ F1 Q.TB 170 Đoàn thò T 1978 1001 Điện biên Phủ F1 q.10 171 Ng Thò Kim L 1969 1001 Linh Tủy TĐ 172 Ng Thò Mỹ X 1970 1001 Lê Quang Đònh QBT 173 Trần Thò Ngọc M 1980 1001 Cần Đước LA 174 Đặng Thanh T 1978 1001 xã Đốn Minh Kiều, Tháp 10, ĐT STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 175 Đinh Ngọc A 1975 1001 Yết Kiêu F3 Q5 176 Phạm Thò Phương A 1975 1001 Cống Quỳnh, Bình Chánh TĐ 177 Võ Thò T 1975 1001 Hương Phú Q9 178 Võ Thò X 1964 4004 HuyệnTam Kỳ,Quảng Nam 179 Ng Thò S 1968 1101 Tân Trạch Cần Đước LA 180 Nguyễn thò Hồng V 1977 1001 Tây Đức Hòa LA 181 Tô Kim N 1968 1011 F9 Q.8 182 Trần T Kim H 1966 1001 Nam Kỳ Khởi Nghóa Q3 183 Phùng Ng nh L 1979 1001 Trần Quang Diệu F14, Q3 184 Đặng thò Q 1968 3003 Nguyễn thò Tần F2 Q8 185 Ng Kim H 1955 1001 Trường Thạnh, Q9 186 Lê T Ngọc L 1978 1001 Đông Hòa BD 187 Nguyễn Thò Thu T 1970 2002 Lô D cc Lạc long Quân, Q11 188 Phan Thò Hồng Y 1971 1001 Tam phú TĐ 189 Vũ Hoàng D 1964 5005 Cao Thắng ,Q10 190 Phan Thò Thu T 1976 1001 Lộc Ninh , Bình Phước 191 Huỳnh Thò Ngọc H 1971 1001 đường số 9, F Tân Kiểng, Q7 192 Nguyễn T Thanh H 1974 1001 bếb Chương Dương Q1 193 Nguyễn Mộng Tr 1970 1001 Khu phộ thò trấn Hóc Môn 194 Trần kim H 1960 3003 Xô viết Nghệ tónh, F16,Q BT 195 Lê thò L 1965 3003 Long An 196 La Kim L 1978 1001 u Dương lân, F3, Q8 STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 197 Trần Nhụy P 1965 1011 Nhà Bè 198 Tần Thò M 1977 1001 Quang Trung, F12, Q Gò Vấp 199 Nguyễn thò P 1972 1001 p Phú Xuân Nhà bè 200 Nguyễn Thò L 1980 1001 Trảng Bàng , Tây ninh 201 Nguyễn t Kim N 1968 1001 Tôn Đản Q4 202 Võ Thò Ngọc T 1970 1001 Hưng Đònh Thuận an, BD 203 Lê Thò Hương H 1970 2002 Q4 HCM 204 Nguyễn Thò Hồng C 1971 1001 Trần quan Diệu, F14, Q3 205 Trần thò Thái L 1973 1001 Phan Đăng Lưu F2 Q Phú Nhuận 206 Nguyễn thò Đ 1967 4004 LongHải,BàRòaVũng Tàu 207 Lý Thò S 1968 1001 huyện Đức Huệ, LA 208 Phạm Thò X 1977 1001 ? 209 Nguyễn Thò U M 1965 1001 Phạm Thế Hiển, F 5, Q1 210 Huỳnh Hồng T 1978 1001 Chương Phùng Xuân, khóm CM 211 Vũ Thò Thanh V 1968 2002 Q10 212 Thái Thò Dạ N 1973 1001 P.10 ,Q4 213 Huỳnh t Thuỳ T 1979 1001 F3 Thò xã Bạc Liêu 214 Trần Thò L 1979 1001 Ngô Tất To,á F 22, Q BT 215 Lê Thò D 1973 1001 Dương Văn Can , TĐ 216 Nguyễn thò Bé C 1968 2002 Thới Đại Điền Bến Tre 217 Nguyễn Lệ 1968 1001 Tam phú , TĐ 218 Nguyễn thò T 1960 3003 Phạm Thế Hiển F4 Q.8 STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 219 Nguyễn Thò L 1981 1001 Long Bình, TĐ 220 Bùi Thò Thu H 1972 1001 Trương Đònh, Q3 221 Huỳnh t Tuyết N 1973 3003 Nhà Bè 222 Dương thò V 1980 3003 Điện Biên Phủ Q.3 223 Lê Thò Thu Ng 1001 5041 nguyễn Trãi, FBT ,Q1 224 Lê Ngọc T 1972 3003 Thò xã Vónh long 225 Nguyễn Thò H 1987 1001 Q3 226 Võ Thò Tr 1978 2002 Cô Giang, Q1 227 Lê Thò Thu H 1969 1001 F1, Mỹ Tho , Tiền Giang 228 Trần Thò Tuyết N 1965 3003 Trần Văn ,Q3 229 Nguyễn Ngọc T 1966 1001 Nguyễn Kiệm, Phú Nhuận 230 Lê thò Mỹ T 1965 1001 Tôn Thất Thuyết, Q4 231 Đỗ thò H 1975 1001 Khu Phố Tân Hòa, Biên Hòa 232 Trần Thò Ngọc D 1970 1001 35 p Đình – Tân Chánh – Cần Đước – Long An 233 Châu Thò T 1979 0000 11/5a Phường Tân Thuận Đông – Q7 234 Nguyễn Thò Ngọc Ngh 1980 0000 75/82 Lê Văn Lượng Kp1 Phường Tân Kiễng Q7 235 Nguyễn Thò H 1983 0000 Thành Công – Vónh Thành - Nhơn Trạch - Đồng Nai 236 Nguễn Thò Ngọc H 1972 1021 p Bình Tây – Cẩm Sơn – Mỏ Cày STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai – Bến Tre 237 Nguyễn Thò H 1970 1001 Tổ Đông Bắc – Vónh Hải – Khánh Hòa – Nha Trang 238 Nguyễn Thò V 1986 0010 47 Đỗ Xuân Hợp Q2 TPHCM 239 Nguyễn Thò H 1968 1011 / 36 Bis Tổ 22 Đông Hưng Thuận Quận12 TPHCM 240 Nguyễn Thò Kim Ph 1986 0000 6/2 Huỳnh Tấn Phát Phường Tân Thuận Đông Q7 TPHCM 241 Chứng m 242 Tô Thò Trường A 1986 0000 p Mũi Lớn - Tân An Hội - Củ Chi 243 Lương nh H 1970 0000 p Mới 2- Mỹ Hạnh – Đức Hòa – Long An 244 Võ Thò Cẩm T 1984 1021 p 3a Hưu Thạnh – Đức Hòa – Long An 245 Lâm Thò M 1971 1001 21/3 Đường Số Phường Tân Kiểng Q7 246 Huỳnh Thò Thu Tr 1976 1001 119A/11 Phạm Thế Hiển - TPHCM 247 Đỗ Thò Hồng Th 1985 1010 49 p Bình Hòa Huyện Tân Tụ Tỉnh Long An 248 Võ Thò Yến Nh 1973 1001 103/2 Lầu Phường Cô Giang Q1TPHCM 249 Lê Thò Th 1970 0000 124/20 Nguyễn Văn Cừ - Phường Cư Trinh Q1 TPHCM STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 250 Trần Thò Hải L 1979 0010 B66/18 Tôn Thất Thuyết- F10- Q4 251 Huỳnh Thò Thanh H 1969 1001 490/26 Điện Biên Phủ Phường 12 Quận Bình Thạnh 252 Lê Thò Minh Ph 1972 0000 554/159 B1 Nguyễn Đình Chiểu TPHCM 253 Hồ Thò Thu Tr 1986 0000 103/9 Bis Kp Phường Tân Thuận Tây Q7 TPHCM 254 Mai Thò Mộng Th 1982 0000 p Trung Lân – Bà Điểm – Hóc Môn 255 Nguyễn Thò Ngọc Th 1973 1001 181/62 Phường Đường u Dương Lân Q8 TPHCM 256 Nguyễn Thò Ngọc D 1984 0000 Phạm Văn Chiêu Phường 12 Quận Gò Vấp TPHCM 257 Nguyễn Thò Ngọc L 1979 0000 p – Hưng Nhượng – Giồng Trâm – Bến Tre 258 Hồ Thò Kim T 1984 1001 96 Kp Long Sơn Phường Long Bình Q9 TPHCM 259 Ngô Thò Xuân H 1977 0000 325/21 Đường Bạch Đằng Phường 15 Quận Bình Thạnh TPHCM 260 Trần Thò 1985 0000 p Bình Long – Bình Phước 261 Phạm Thanh X 1979 1001 8/10 Phú Mỹ Thò Xã Thủ Dầu Một – Bình Dương 262 Nguyễn Thò Hồng Ch 1974 0010 70/3 Phường Nguyễn Thế Nhất STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai Đường Trường Chinh Q12 263 Nguyễn Thò Minh Ng 1979 0000 140 Đường Nguyễn Văn Tăng Phường Long Thành Mỹ Q9 264 Phan Thò Bích M 1987 0000 2/1 Huỳnh Tấn Phát Phường Phú Mỹ 265 Hố Thò Mỹ H 1978 0010 11/12 Nguyễn An Ninh Thò Trấn Thủ Dầu – Bình Dương 266 Mai Thò Giáng Th 1981 0000 450/44 Dương Bá Trạc 267 Bùi Thò Kim Kh 1979 0000 16/3 Kp3 Đường Bửu Long TPHCM 268 Dương Thò Cẩm D 1972 0000 p Tân Phú Tân – Hoà Thành – Tân Phước – Tiền Giang 269 Tống Thò H 1983 0010 79/16 Trần Văn Đang Phường Quận TPHCM 270 Nguyễn Thò Tuyết Th 1979 0000 73/5 B Đào Trí Phường Phú Thuận Q7 TPHCM 271 Lê Thò Kim H 1972 0010 5a Nguyễn Trung Ngạn Phường Bến Nghé Q1 TPHCM 272 Phạm Thò Mai L 1983 0000 290b/21/15t Dương Bá Trạc 273 Lê Thò Lệ Th 1983 0000 p Trà Ngoa- Trà n – Vónh Long 274 Nguyễn Thò C 1982 0000 218/9 Tổ p Hiệp Phước- Nhà Bè 275 Nguyễn Thò Hồng L 1978 0000 67/8 Phạm Ngọc Thạch Phường STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai Quận TPHCM 276 Nguyễn Thò D 1983 0001 18/4 Kp 22 Phường Thới An Q12 277 Ngô Thò L 1968 3003 4/8 Lê Lai Phường Bến Thành Quận TPHCM 278 Trần Thò Ngọc D 1980 0000 Quận TPHCM 279 Quách Ngọc Loan Ph 1985 0010 607/19 Bến Ba Đình Phường Q8 TPHCM 280 Phùngthò Th 1982 0000 Xóm Tả Xã – Phú Sơn – Ba Vì – Hà Tây 281 Phạm Thò H 1980 0000 Thôn Phố Phường Quang Trung Buốc Sơn – Thanh Hóa 282 Chứng Dương 283 Trần Thò G 1971 0000 28 Phan Chu Trinh Phường Hiệp Phú Q9 284 Nguyễn Hồng Tuyết Tr 1975 0000 05 Khu B Thò Trấn Hồng Nghóa – Đức Hòa – Long An 285 Nguyễn Thò Lệ Th 1969 0000 40/7 B Phạm Văn Chiêu Phường 13 Quận Gò Vấp 286 Đỗ Thò Thanh Th 1970 1001 Bàu Cá – Trung Hòa- Thống NhấtĐồng Nai 287 Thạch Kim L 1976 2002 146 p Đông – Bình Chương Đông Q2 TPHCM 288 Quách Phương M 1970 1001 Bến Sắn – Nhơn Trạch – Đồng Nai STT Họ tên Năm Số Sanh lần Đòa mang thai 289 Từ Ngọc Th 1979 1021 63/F Phó Đức Chính Quận1 TPHCM 290 Nguyễn Thò Kim H 1986 0000 173/31 A Bình Thới – Phường 11Quận 11 291 Trần Kim L 1979 1101 62/4 A Linh Đông- Thủ Đức 292 Thái Lê H 1978 1001 P17, Q Gò Vấp 293 Nguyễn Thò Q 1964 1001 Tô Hiến Thành Q10 294 Nguyễn Thò N 1975 1001 Ngô Tất Tố, P19, Q Tân Bình 295 Nguyễn Thò Ngọc M 1973 1001 Bùi Viện, Q1 296 Nguyễn Thò N 1961 3003 Xuân Lộc, Đồng Nai 297 Thái Thò Kim T 1976 1001 P9, Q10 PHỤ LỤC 7: DANH SÁCH CÁC PHÒNG THỰC HIỆN CHIẾT TÁCH KHÁNG THỂ KHÁNG HLA Mrs C COMERFORD, Histocompatibility Testing Lab Blood Transfusion Service Massachusetts General Hospital, BOSTON – MASSACHUSETTS 02114 U.S.A Miss L RATNER, C/O TISSUE TYPING LAB, BRIGHMAN AND WOMEN’S HOSPITAL, 75 Ranicfrances Street, BOSTON, MASSACHUSETTS 0211 SM U.S.A Dr T Ray, U.K TRANSPLANT SERVICE, Southmead Road BRISTOL BS10 5ND ENGLAND BTC JETTE, Laarbeeklaan, 105, 1090 BRUXELLES Dr M ANDRIEN Service d’Immunologie, HOPITAL ERASME, Route de Lennik, 808, 1070 BRUXELLES Dr E DUPONT, Lab Immunologie/Transfusion – 6è étage HOPITAL ERASME, Route de Lennik, 808, 1070 BRUXELLES Algemeene Ziekenhuis V.U.B Laboratoire Immunologie, Laarbeeklaan, 103, 1090 BRUXELLES Inst Fur Klinische Immunologie, Dr E KRAPF, Krankenhausstrasse, 12, D – 8520 ERLANGEN DEUTSCHLAND Dr Tracey REES, Deputy Head of Tissue Typing, Natl Blood Transfusion Service (Wales), Rhydlafar, St Fagans, CARDIFF CF5 6XF ENGLAND 10.Dr Cora L DEJELO, Supervisor HLA Laboratory, Case Western Res Univ INST OF PATHOLOGY RM 418, 2085 Adelbert Rd CLEVELAND, OHIO 44106, U.S.A 11.Mr A.R SMERGLIA, Laboratory DESK L12, CLEVELAND CLINIC FOUNDATION, Euclid Avenue 9500, CLEVELAND, OHIO 44195-5131 U.S.A 12.M D P STASTNY, The University of Texas, Dept Internal Medicine, 5323 Harry Hines Blvd, DALLAS, TEXAS 75235 U.S.A 13.Dr J L MOLENAAR, Afd Klinische Immunologie, Stiching Samenwerking Delftse Ziekenhuis, Reynier de Graafweg, 7, 2625 AD DELFT THE NETHERLANDS 14.Dr LENHARD – BIOTEST A.G P.O BOX 401108, Landsteiner Str 5, D – 6072 DREIEICH 40, DEUTSCHLAND 15.Natl Institute of Immunology, Dr HAMMOND, PO BOX 2356, 4000 DURBEN, Rep of South Africa 16.Dr L MUYLLE, BTC, Wilrijkstraat, 8, 2520 EDEGEM 17 BTC ANTWERPEN, Het Belgische Rode Kruis, Prof M PEETERMANS, Wilrijkstraat, 8, 2520 EDEGEM [...]... Nghiên cứu xây dựng panel lympho và bộ sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp mô lớp I” 3 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU [”””\ 1 Nghiên cứu xây dựng dàn panel lympho HLA lớp I cho người Việt Nam tại Thành phố Hồ Chí Minh 2 Nghiên cứu tạo bộ sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp HLA lớp I 4 NỘI DUNG TIẾN HÀNH [”””\ 1 Để xây dựng panel lympho: 1. 1 Xác đònh kháng nguyên hòa hợp mô HLA lớp I của 15 0 người... hiến mô bằng kỹ thuật PCR-SSO 1. 2 Thiết lập dàn panel lympho HLA lớp I trên các người tình nguyên hiến mô 2 Để tạo bộ sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp HLA lớp I: 2 .1 Sử dụng dàn panel để phân tích sự hiện diện của kháng thể kháng HLA lớp I từ huyết thanh, chiết tách ở máu sản phụ hứng được sau sổ nhau 2.2 Phân lập huyết thanh, tạo mẫu huyết thanh đơn đặc hiệu, dùng để xác đònh phân tử HLA lớp. .. ký hiệu là 1 β2, domain α 2 và β2 của lớp II (giống như domain α3 và β2M của lớp I) giống với vùng hằng đònh của Ig và vì thế chúng cũng thuộc gia đình các siêu cấu trúc Ig Vùng gắn peptid liên quan đến 2 chuỗi 1 và 1 Khác với lớp I, 1 và 1 gập lại tạo thành nền là lá β có 8 lớp Hai cánh 1 và 1 tạo nên rãnh peptid Tính đa kiểu hình của gien HLA lớp II tập trung trong cấu trúc 1 và 1 của rãnh... nhiều nhóm kháng nguyên đáng chú ý, vì có khả năng tạo phản ứng chéo Nhóm thường tạo phản ứng chéo (cross-creative groups: CREGs), được mô tả trong bảng sau: Nhóm phản ứng chéo ở HLA lớp I thường gặp: Creg Phân phối HLA 1C A1, A36, A3, A9, A10, A 11, A28, A19 2C A 11, A28, A9 4C A9, A 25, A32, Bw4 5C B5, B15, B17, B18, B35, B53, B70 6C A 11, Cw1, Cw3, Cw7, Bw6 7C B7, B13, B22, B27, B40, B 41, B42, B47,... HLA lớp I, bằng kỹ thuật độc tế bào 2.3 Tạo bộ sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp mô HLA lớp I 2.4 Ứng dụng bộ sinh phẩm 5 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU [”””\ Phân tử HLA (Human Lymphocyte Antigen) được kiểm soát bởi hệ thống gien nằm trên nhánh ngắn nhiễm sắc thể số 6, thuộc thành phần của một vùng gien mã hóa cho phân tử thuộc nhóm phức hợp hòa hợp mô chính: MHC (Major Histocompatility Complex)... Phụ Kiểu Phụ hình nhóm hình nhóm hình nhóm hình nhóm B5 B 51 B22 B54 Cw1 B55 Cw2 B56 Cw3 A1 A2 B52 A3 A9 A10 B7 A23 B8 A24 B10 A25 B12 A26 A34 B13 A66 B14 A 11 A19 Cw4 B72 B35 Cw5 B44 B37 Cw6 B45 B39 Cw7 B40 B64 B65 A29 B15 A30 B15 B 41 B42 B62 B46 A 31 B63 B47 A32 B75 B48 A33 B76 B 51 A74 B77 B53 B38 B59 B39 B67 A24 A28 B27 B16 A68 B60 Cw8 B 61 Cw9 Cw10 23 [49]HLA – A HLA – B HLA - C Kiểu Phụ Kiểu Phụ Kiểu... đầu tiên và sau 14 tuần mang thai Tuy nhiên, không phải sản phụ nào cũng có kháng thể kháng HLA trong thời kỳ này, ước lượng xác suất chỉ vào khoảng 1/ 100 Kỹ thuật độc tế bào trực tiếp với lympho người cha, có thể phát hiện nhanh sự hiện 21 diện của kháng thể này trong máu sản phụ, nồng độ kháng thể này sẽ giảm dần khoảng 6 tháng sau sinh [16 ], [19 ],[20],[22],[42],[ 51] ,[ 61] , [66][68][70][77] 1. 6 Kiểu... protein) [4], [11 ], [15 ], [23], [24], [10 1] Bảng1 .1: Tóm tắt các lớp HLA và sản phẩm của từng lớp “Nguồn: Ragoussis and Campbell, 19 91 Phức HLA hợp Nhóm HLA Vùng II DDD D P MQ R III I C4, C2, Hsp70, BF B C E A G F Heat Sản D D D D phẩm P M Q R gene Complement Shock TNF proteins Proteins HLA HLA HLA HLA HLA HLA (Protein bổ (Protein TNF -B thể) -C -E -A -G -F sốc nhiệt) 1. 2 Haplotype và sự di truyền... B 41, B42, B47, B48 8C B8, B14, B16, B18 12 C B12, B13, B 21, B40, B 41 Trong gia đình, con cái nhận một alen từ cha và một alen từ mẹ, không nhận hơn một alen và haplotypes riêng biệt từng locus tái kết hợp Sự tái kết hợp có thể xảy ra bằng một tiến trình gọi là phản ứng chéo [3][4][6][84] 1. 3.2 Cấu trúc phân tử HLA lớp II: Mỗi phân tử lớp II bao gồm 2 chuỗi glycoprotein α β kết hợp không đồng hóa trò Chuỗi... 21- hydroxylase là CYP21A và CYP21B, do sự nhân lên cùng với C4 Gien 21- hydroxylase liên kết với C4A là 1 gien giả, trong khi gien 21- 10 hydroxylase liên kết với C4B lại là 1 gien có chức năng Sản phẩm của chúng là một enzym tham gia vào sự tổng hợp các steroid của tuyến thượng thận Nằm giữa các locus của bổ thể và locus HLA-B là các gien TNF α và TNF β mã cho các yếu tố hoại tử u TNF α và TNF β và ... hành nghiên cứu: Nghiên cứu xây dựng panel lympho sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp mô lớp I” 3 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU [””” Nghiên cứu xây dựng dàn panel lympho HLA lớp I cho người Việt Nam... Hồ Chí Minh Nghiên cứu tạo sinh phẩm chẩn đoán kháng nguyên hòa hợp HLA lớp I 4 NỘI DUNG TIẾN HÀNH [””” Để xây dựng panel lympho: 1. 1 Xác đònh kháng nguyên hòa hợp mô HLA lớp I 15 0 người tình... HLA: 10 1. 2 .1 Haplotype: 10 1. 2.2 Sự di truyền hệ thống HLA 11 1. 2.3 Sự cân liên kết 12 1. 3 Cấu trúc phân tử HLA 13 1. 3 .1 Cấu trúc phân tử HLA lớp I 13 1. 3.2 Cấu trúc phân tử HLA lớp II 16 1. 3.3