1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

nghiên cứu bệnh thối thân lúa (sclerotium oryzae) và biện pháp phòng trừ tại xã ái quốc, thành phố hải dương, tỉnh hải dương vụ mùa năm 2014

73 1K 1

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 73
Dung lượng 3,23 MB

Nội dung

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa gieo trong nhà lưới và trên ruộng sản xuất .... Kết quả nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo của nấ

Trang 1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

-  -

THÂN NHẬT THẮNG

NGHIÊN CỨU BỆNH THỐI THÂN LÚA

(SCLEROTIUM ORYZAE) VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỪ

TẠI XÃ ÁI QUỐC, THÀNH PHỐ HẢI DƯƠNG, TỈNH HẢI DƯƠNG VỤ MÙA NĂM 2014

LUẬN VĂN THẠC SĨ CHUYÊN NGÀNH: BẢO VỆ THỰC VẬT

HÀ NỘI , NĂM 2015

Trang 2

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

-  -

THÂN NHẬT THẮNG

NGHIÊN CỨU BỆNH THỐI THÂN LÚA

(SCLEROTIUM ORYZAE) VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỪ

TẠI XÃ ÁI QUỐC, THÀNH PHỐ HẢI DƯƠNG, TỈNH HẢI DƯƠNG VỤ MÙA NĂM 2014

Chuyên ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT

Mã số: 60.62.01.12

Người hướng dẫn khoa học:

PGS.TS NGUYỄN VĂN VIÊN

HÀ NỘI, NĂM 2015

Trang 3

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Kết quả nghiên cứu trong luận văn là kết quả lao động của chính tác giả Các số liệu

và kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công

bố trong bất cứ công trình nào khác

Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này

đã được cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc

Tác giả luận văn

Thân Nhật Thắng

Trang 4

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành đề tài tốt nghiệp ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi đã nhận được rất nhiều sự quan tâm giúp đỡ nhiệt tình của thầy cô, bạn bè và người thân

Trước tiên, tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Văn Viên - Bộ môn Bệnh cây - Khoa Nông học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài và hoàn thành bản luận văn này

Tôi xin được gửi lời chân thành cảm ơn tới các thầy cô giáo trong Khoa Nông học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam

Tôi xin gửi lời cảm ơn tới lãnh đạo, cán bộ, bà con nhân dân xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương; Cán bộ phòng kỹ thuật Chi cục bảo vệ thực vật tỉnh Hải Dương - Sở Nông nghiệp & PTNT Hải Dương đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian thực hiện đề tài

Bên cạnh đó tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới tất cả người thân, bạn

bè và những người luôn bên cạnh động viên giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và thực hiện bản luận văn này

Hà Nội, ngày 12 tháng 4 năm 2015

Tác giả luận văn

Thân Nhật Thắng

Trang 5

MỤC LỤC

Lời cam đoan i

Lời cảm ơn ii

Mục lục iii

Danh mục chữ viết tắt vi

Danh mục các bảng vii

Danh mục hình ix

MỞ ĐẦU 1

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 4

1.1 Tình hình nghiên cứu về nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân lúa trên thế giới 4

1.1.1 Một số đặc điểm về nấm Sclerotium oryzae 5

1.1.2 Một số đặc điểm bệnh thối thân lúa do nấm Sclerotium oryzae 5

1.1.3 Tình hình nghiên cứu bệnh thối thân lúa 6

1.2 Những nghiên cứu ở trong nước 14

Chương 2 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊU CỨU 17

2.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu 17

2.1.1 Đối tượng 17

2.1.2 Vật liệu 17

2.1.3 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 19

2.2 Nội dung 20

2.2.1 Phân lập nấm Sclerotium oryzae từ các mẫu lúa bị bệnh đã thu thập được 20

2.2.2 Quan sát, mô tả đặc điểm hình thái của nấm Sclerotium oryzae 20

2.2.3 Nghiên cứu một số đặc điểm nuôi cấy nấm Sclerotium oryzae 20

2.2.4 Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa gieo trong nhà lưới và trên ruộng sản xuất 20

2.2.5 Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo và đối với bệnh thối thân lúa trong nhà lưới và trên ruộng 21

Trang 6

2.3 Phương pháp nghiên cứu 21

2.3.1 Phân lập nấm Sclerotium oryzae 21

2.3.2 Quan sát, mô tả đặc điểm hình thái của nấm Sclerotium oryzae 21

2.3.3 Nghiên cứu một số đặc điểm nuôi cấy nấm Sclerotium oryzae 22

2.3.4 Phương pháp lây bệnh nhân tạo 22

2.3.5 Phương pháp nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo 22

2.3.6 Phương pháp nghiên cứu khả năng phát triển của bệnh 22

2.3.7 Phương pháp nghiên cứu hiệu lực của thuốc đối với nấm và bệnh thối thân, thối hạch trên cây lúa 23

2.4 Xử lý số liệu 23

Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24

3.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương vụ mùa năm 2014 24

3.1.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa nếp cái hoa vàng cấy ở chân đất cao và trũng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương 24

3.1.2 Kết quả điều tra bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa vàng cấy ở các mật độ khác nhau vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương 26

3.2 Kết quả phân lập nấm Sclerotium oryzae từ mẫu lúa bị bệnh thu thập được tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương vụ mùa năm 2014 28

3.3 Kết quả nghiên cứu một số đặc điểm hình thái, phát triển của nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo 29

3.3.1 Đặc điểm hình thái nấm Sclerotium oryzae 29

3.3.2 Kết quả nghiên cứu khả năng phát triển của nấm Sclerotium oryzae khi nuôi cấy trên môi trường nhân tạo 30

3.4 Kết quả nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo của nấm Sclerotium oryzae đối với lúa 37

Trang 7

3.4.1 Kết quả nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo của nấm

Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa nếp gieo trong chậu

vại ở nhà lưới 37

3.4.2 Kết quả nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo của nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa tẻ gieo trong chậu vại ở nhà lưới 38

3.4.3 Kết quả nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo của nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa gieo trong ô xi măng ở nhà lưới 40

3.4.4 Kết quả nghiên cứu khả năng lây lan của bệnh thối thân trong nhà lưới khi lây bệnh nhân tạo 41

3.4.5 Kết quả nghiên cứu khả năng phát triển của vết bệnh trên gốc lúa sau khi lây nhiễm nhân tạo trong chậu vại ở nhà lưới 46

3.5 Kết quả nghiên cứu phòng trừ bệnh thối thân lúa 48

3.5.1 Kết quả nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường PSA 48

3.5.2 Kết quả nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với bệnh thối thân lúa trồng trong chậu vại ở nhà lưới 49

3.5.3 Kết quả nghiên cứu hiệu lực của thuốc Fuji-one 400WP và Ketomium đối với bệnh thối thân lúa trên đồng ruộng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương 51

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 52

Kết luận 52

Đề nghị 52

TÀI LIỆU THAM KHẢO 53

Trang 8

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

STT Chữ viết tắt Giải thích chữ viết tắt

1 BNNPTNT Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn

14 PSA Khoai tây-đường sacarose-agar

Trang 9

DANH MỤC CÁC BẢNG

3.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa vàng cấy ở

chân đất cao và trũng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành

3.2 Kết quả điều tra bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa vàng cấy ở các mật

độ khác nhau vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải

3.3 Kết quả phân lập nấm Sclerotium oryzae từ mẫu lúa bị bệnh thu thập

được tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương vụ

3.4 Kích thước hạch nấm trong mô bẹ lá và trong thân ống rạ thu thập

được ở xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương năm

3.5 Đường kính tản nấm sau 2, 4, 6, 8 ngày nuôi cấy trên một số môi

3.6 Đường kính tản nấm sau 2, 4, 6, 8 ngày nuôi cấy trên môi trường có

3.7 Số lượng hạch nấm trên một số môi trường sau 10, 15 ngày nuôi cấy 33

3.8 Kết quả nghiên cứu sự phát triển số lượng hạch nấm Sclerotium

oryzae trên một số bộ phận của cây lúa sau các ngày nuôi cấy 35 3.9 Khả năng nhiễm bệnh của các giống lúa nếp ở các giai đoạn sinh

trưởng khác nhau trồng trong chậu vại ở nhà lưới 37 3.10 Khả năng nhiễm bệnh của các giống lúa tẻ ở các giai đoạn sinh

trưởng khác nhau trồng trong chậu vại ở nhà lưới 39 3.11 Khả năng nhiễm bệnh của các giống lúa nếp, lúa tẻ ở các giai đoạn

sinh trưởng khác nhau trồng trong ô xi măng ở nhà lưới 40

Trang 10

3.12 Khả năng lây lan của bệnh thối thân lúa sau 15 ngày lây bệnh nhân

tạo trong chậu vại ở nhà lưới giai đoạn lúa đẻ nhánh 42 3.13 Khả năng lây lan của bệnh thối thân lúa sau 15 ngày lây bệnh nhân

tạo trong chậu vại ở nhà lưới giai đoạn lúa làm đòng 43 3.14 Khả năng lây lan của bệnh thối thân lúa sau 15 ngày lây bệnh nhân

tạo trong chậu vại ở nhà lưới giai đoạn lúa trỗ 45 3.15 Kích thước vết bệnh sau khi lây lúa ở các giai đoạn trồng trong

3.16 Kết quả nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm

3.17 Kết quả nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với bệnh thối

3.18 Kết quả nghiên cứu hiệu lực của thuốc Fuji-one 400WP và

Ketomium đối với bệnh thối thân lúa trên đồng ruộng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương 51

Trang 11

DANH MỤC HÌNH

3.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa vàng cấy ở

chân đất cao và trũng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành

3.2 Kết quả điều tra bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa vàng cấy ở các mật

độ khác nhau vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải

3.3 Đường kính tản nấm (mm) sau 2, 4, 6, 8 ngày nuôi cấy trên môi

3.4 Số lượng hạch nấmtrên các môi trường sau 10, 15 ngày cấy 34

3.5 Kết quả nghiên cứu sự phát triển số lượng hạch nấm Sclerotium

oryzae trên một số bộ phận cây lúa sau 20 ngày nuôi cấy 36 3.6 Khả năng nhiễm bệnh của các giống lúa Nếp, lúa tẻ ở các giai đoạn

sinh trưởng khác nhau trồng trong ô xi măng ở nhà lưới 41 3.7 Khả năng lây lan của bệnh thối thân lúa sau 15 ngày lây bệnh nhân

tạo trong chậu vại ở nhà lưới giai đoạn lúa đẻ nhánh 42 3.8 Khả năng lây lan của bệnh thối thân lúa sau 15 ngày lây bệnh nhân

tạo trong chậu vại ở nhà lưới giai đoạn lúa làm đòng 44 3.9 Khả năng lây lan của bệnh thối thân lúa sau 15 ngày lây bệnh nhân

tạo trong chậu vại ở nhà lưới giai đoạn lúa trỗ 46 3.10 Kích thước vết bệnh sau khi lây trên giống Nếp cái hoa vàng giai

Trang 12

MỞ ĐẦU

1 Đặt vấn đề

Cây lúa (Oryza sativa L.) là một trong những cây lương thực chính cung

cấp lương thực cho hai phần ba dân số thế giới Hiện nay có trên 100 quốc gia sản xuất lúa gạo Trên thế giới, cây lúa được khoảng 250 triệu nông dân trồng, là lương thực chính của hơn 1,3 tỉ người trên thế giới, là sinh kế chủ yếu của nông dân, là nguồn cung cấp năng lượng lớn nhất cho con người Châu Á là nơi gắn liền với văn minh lúa nước, sản xuất lúa gạo chiếm phần lớn trên thế giới về diện tích và sản lượng.Việt Nam, với dân số trên 90 triệu người, có khoảng 70% là nông dân, sản xuất nông nghiệp trồng lúa là cây lương thực chính.Theo thống kê của Hiệp hội Lương thực Việt Nam (VFA), năm 2009,

cả nước xuất khẩu hơn 6,052 triệu tấn gạo các loại, với giá trị 2,464 tỉ USD Những năm gần đây nước ta luôn đứng vị trí thứ 2 trên thế giới về xuất khẩu gạo sau Thái Lan

Trong những năm gần đây, sản xuất lúa gạo đạt được mức tăng trưởng tăng đáng kể Tuy nhiên, cùng với sự gia tăng dân số mạnh mẽ, vấn đề an ninh lương thực vẫn đang là một bài toán đang cần tìm lời giải Theo dự báo của FAO (Food and Agricuture Organization) thế giới đang có nguy cơ thiếu hụt lương thực do dân số tăng nhanh, sức mua lương thực, thực phẩm tại nhiều nước tăng, biến đổi khí hậu toàn cầu gây hiểm họa khô hạn, bão lụt, quá trình đô thị hoá làm giảm đất trồng lúa… những vấn đề trên đã và đang khiến thế giới rơi vào nguy cơ thiếu hụt lương thực trầm trọng Theo FAO để đảm bảo mức tiêu dùng lương thực ổn định, mức tăng sản lượng lương thực hàng năm phải gấp 2 lần so với mức tăng dân số Đến năm 2030, toàn thế giới phải sản xuất lúa gạo nhiều hơn khoảng 60% so với những năm gần đây để đáp ứng nhu cầu tăng dân số

Bên cạnh đó, ở Việt Nam quá trình công nghiệp hóa, hiện đại hóa ngày

Trang 13

càng diễn ra mạnh mẽ kéo theo đó là diện tích đất nông nghiệp bị thu hẹp dần,

vì vậy nhu cầu lương thực ngày càng tăng cao, do đó vấn đề về lương thực ngày càng cấp thiết và là một trong những mối quan tâm lớn nhất cho mục tiêu lương thực trước mắt cũng như lâu dài của nước ta Điều đáng chú ý nhất

ở nền nông nghiệp Việt Nam là ngày càng phát triển, đạt được những thành tựu to lớn về năng suất cũng như chất lượng sản phẩm Điều đáng chú ý nữa, Việt Nam không những đảm bảo được an ninh lương thực toàn quốc mà còn vươn lên trở thành nước xuất khẩu gạo với sản lượng trên 6 triệu tấn/năm Tuy nhiên năng suất lúa ở nước ta luôn bấp bênh theo từng mùa vụ, theo từng năm do nhiều vùng sản xuất lúa được nông dân sở hữu rất manh mún, khó cơ giới hóa, khí hậu thời tiết bất thuận, do thiên tai, quá trình áp dụng giống mới chưa thâm canh, phát triển thành những vùng sản xuất hàng hóa là điều kiện thuận lợi để các loại dịch hại mới nguy hiểm, khó phòng trừ đặc biệt là do các bệnh hại gây ra Hiện nay tình hình dịch bệnh trên cây lúa cũng ngày càng tăng và có nhiều biến đổi phức tạp gây thiệt hại lớn cho ngành trồng lúa Trong đó bệnh thối thân lúa là bệnh hại được các nước trên thế giới nghiên cứu nhiều, có ý nghĩa kinh tế ở các nước trồng lúa, ở Việt Nam bệnh mới xuất

hiện nhưng đã làm thiệt hại năng suất rất lớn Bệnh do nấm Sclerotium oryzae

gây ra Bệnh mới xuất hiện ở một số nơi như Hải Dương, Bắc Giang, Thái Nguyên… đặc biệt bệnh gây hại nặng đối với lúa nếp trong vụ mùa Đến nay bệnh này chưa được nghiên cứu nhiều ở Việt Nam

Xuất phát từ vấn đề nêu trên, được sự phân công của bô môn Bệnh cây, Khoa Nông học – Học viện Nông Nghiệp Việt Nam Dưới sự hướng dẫn của

PGS TS Nguyễn Văn Viên, tôi tiến hành thực hiện đề tài: “Nghiên cứu bệnh thối thân lúa (Sclerotium oryzae) và biện pháp phòng trừ tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương vụ mùa năm 2014”

Trang 14

2 Mục đích và yêu cầu

2.1 Mục đích

Tìm hiểu tình hình phát sinh, phát triển của nấm Sclerotium oryzae tại

Hải Dương và biện pháp phòng trừ

2.2 Yêu cầu

- Thu thập mẫu lúa bị bệnh và phân lập nấm Sclerotium oryzae từ các

mẫu lúa bị bệnh đã thu thập được

- Mô tả đặc điểm hình thái của nấm Sclerotium oryzae

- Tìm hiểu một số đặc điểm nuôi cấy nấm Sclerotium oryzae

- Lây bệnh nhân tạo để xác định khả năng kháng, nhiễm bệnh thối

thân do nấm Sclerotium oryzae đốivới một số giống lúa đang được gieo cấy

phổ biến trong sản xuất

- Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo và đối với bệnh thối thân lúa trong nhà lưới và trên ruộng sản xuất

Trang 15

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU

1.1 Tình hình nghiên cứu về nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân lúa trên

thế giới

Bệnh thối thân lúa do nấm Sclerotium oryzae là một trong những bệnh

hại quan trọng ở các nước trồng lúa trên thế giới đã được nhiều tác giả nghiên cứu Bệnh đã gây thiệt hại năng suất đáng kể ở các nước trồng lúa trên thế giới

Thối thân lúa ( Oryza sativa L.) , do Sclerotium oryzae Catt , Từ lâu đã

được biết là gây ra thiệt hại nghiêm trọng cho người trồng lúa cả ở Mỹ và ở nước ngoài Lần đầu tiên được phát hiện ở Ý vào năm 1876 bởi Cattaneo Metcalf (1907) báo cáo rằng nó đã được tìm thấy bệnh thối thân lúa ở Bắc Carolina và nó gây ra bệnh thối thân trên lúa nước

Miyake (1910) báo cáo sự xuất hiện của bệnh thối thân ở Nhật Bản và ông cho rằng thiệt hại năng suất lớn là do bệnh này

Tisdale (1921) đã báo cáo sự xuất hiện của bệnh và ông nghi ngờ nó xuất hiện của ở Arkansas Đồng thời ông tiến hành các thí nghiệm trong phòng thí nghiệm để chứng minh khả năng gây bệnh của nấm

Bockus et all (1977) đã nghiên cứu khả năng cạnh tranh hoại sinh của

Sclerotium oryzae có nguồn gốc từ hạch nấm

Hussain S và Ghaffar A (1993) đã nghiên cứu ảnh hưởng của việc phơi

ải đến khả năng sống và tồn tại của hạch nấm Sclerotium oryzae trong đất

Cother E (1998), đại hội quốc tế về bệnh học thực vật họp lần thứ 7 (1998) Cother - Tính nhạy cảm của giống lúa Úc đối với nấm bệnh thối thân

Sclerotium oryzae

Cintas N.A Webstervà R.K (2001) đã tìm ra được ảnh hưởng của việc

quản lý rơm rạ trên ruộng đối với nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân

và năng suất của lúa ở California, Mỹ

Năm 2009, nấm gây bệnh thối thân cây lúa được xác định là Sclerotium

Trang 16

hydrophilum dựa trên đặc điểm hình thái và đặc tính sinh học của nó (Cedeno

et all 1997)

Elliot T Maschmann et al (2010), đã nghiên cứu tỷ lệ, thời gian bón phân Kali và thuốc diệt nấm ảnh hưởng đến năng suất lúa và bệnh thối thân

lúa do nấm Sclerotium oryzae gây ra

Prakash (2013) đã nghiên cứu phát triển biện pháp thân thiện với môi trường bằng sàng lọc các tác nhân kiểm soát sinh học chống lại nấm

Sclerotium oryzae

1.1.1 Một số đặc điểm về nấm Sclerotium oryzae

Loài Sclerotium hình thức là hạch nấm và sợi nấm vô trùng không có quả thể hay bào tử Sclerotium bao gồm hơn 40 loài thực vật gây bệnh (Farr et all 2008) Nhiều loài Sclerotium hiếm khi sinh sản hữu tính (Punja 1988, Punja và Rahe 2001, Kohn 2004) Tên Sclerotium lần đầu tiên được giới thiệu bởi Tode (1790)

1.1.2 Một số đặc điểm bệnh thối thân lúa do nấm Sclerotium oryzae

Triệu chứng: Thường quan sát thấy ở giai đoạn đẻ nhánh Ban đầu bệnh thối thân xuất hiện là các vết bệnh nhỏ, màu đen không đều trên bẹ lá bên ngoài gần mực nước Khi bệnh tiến triển, bẹ lá bị nhiễm chết và bung ra Cuối cùng bệnh có thể xâm nhập vào thân ống rạ Khi thân ống rạ bị nhiễm bệnh dẫn đến cây lúa yếu, dễ đổ, bông lép, trường hợp nghiêm trọng có thể cây sẽ

bị chết Khi mở bẹ lá hoặc thân bị bệnh có thể tìm thấy vô số hạch nấm màu đen được gắn trên các mô bẹ lá bị bệnh, hạch nấm và sợi nấm là nguồn bệnh chủ yếu Hạch nấm được tìm thấy trong các mô thối của bẹ lá và các thân ống

rạ lúa bị bệnh, cây lúa bị bệnh thường bị đổ Nguồn bệnh bảo tồn thường tìm thấy trong rơm rạ sau khi thu hoạch lúa Sự xuất hiện của hạch nấm thường là

cách dễ dáng nhất để chuẩn đoán bệnh do nấm Sclerotium oryzae gây hại

Tác nhân gây bệnh: Bệnh do nấm Sclerotium oryzae Có sợi nấm màu

trắng xám, hạch nấm hình cầu màu đen sáng bóng có thể nhìn thấy bằng mắt

Trang 17

thường như một khối đen

Điều kiện thuận lợi bệnh phát triển: Lúa bị nhiễm rầy, sâu đục thân, bón quá nhiều phân đạm

Bảo tồn: Các hạch nấm tồn tại trong rơm rạ, lan truyền nhờ nước tưới Hạch nấm tồn tại ở tầng trên của đất thời gian dài Thời gian phân hủy của hạch nấm là khoảng 2 năm, hạch khả thi có thể tồn tại 6 năm Bệnh thối thân lan truyền nhờ dòng nước, các hạch nấm nổi trên bề mặt theo dòng nước đi tới vùng khác tiếp tục quá trình nảy mầm và lây nhiễm sang cây kí chủ khác

Quản lý: Bằng cách cày sâu, bừa kỹ Trong mùa hè thì đốt rơm rạ để loại bỏ hạch nấm Bón phân cân đối hạn chế bón quá nhiều đạm, tránh sự lây lan theo dòng nước từ nơi có nguồn bệnh đến các ruộng xung quanh Cần phải tháo bớt nước khi bị ngập để cho đất khô, hạn chế sự lây nhiễm

1.1.3 Tình hình nghiên cứu bệnh thối thân lúa

Năm 1993, S.Hussain và A.Ghaffar đã nghiên cứu ảnh hưởng của việc

phơi ải đến khả năng sống và tồn tại của hạch nấm Sclerotium oryzae trong

đất Sau 3 ngày ngày xử lý đất bằng cách phủ nilon lên đã làm giảm sức sống

100% của hạch nấm Sclerotium oryzae ở độ sâu 5cm Hạch nấm vẫn còn tồn

tại ở độ sâu 20cm cũng đã chết sau khi chuyển vụ Tháng sáu, năm 1984 tại các khu vực có cấu trúc đất khác nhau Karachi (thịt pha cát), đất Sakrand (đất sét pha cát) và đất Lahore (đất sét) cũng đã sử dụng nilon để phủ sau 3 đến 7 ngày đã làm giảm khả nảng sống của hạch nấm Khả năng sống của hạch nấm liên quan đến tăng nhiệt độ đất do lớp phủ, đất được phơi ải làm gia tăng số

lượng vi khuẩn đối kháng với Sclerotium oryzae cũng như pH, tăng chất hữu

cơ và Kali nhưng làm giảm Nitơ và Phốt pho

Nấm Sclerotium oryzae, nguyên nhân của bệnh thối thân lúa xảy ra ở

hầu hết các nước sản xuất lúa gạo trên thế giới Tại Pakistan và Arkans bệnh thối thân làm thiệt hại năng suất cao lên tới 72% - 75% Ở Philippines (Ou, 1972) thiết hại năng suất từ 30 - 38%, 10 - 70% ở Ấn Độ (Singh and Pavgi,

Trang 18

1966) Các khu vực trồng lúa còn lại trên thế giới ước tính thiệt hại năng xuất

từ 5% - 10% (Ou, 1972) Hạch nấm Sclerotium oryzae hình thành trong các

mô bẹ lá lúa tồn tại trong đất là nguyên nhân của bệnh thối thân lúa (Keim và Webster, 1974) Giống kháng bệnh thối thân không có sẵn Trong thực tế để hạn chế bệnh thối thân người ta đã sử dụng thuốc diệt nấm nhưng phương pháp này thường gây ô nhiễm môi trường, để lại dư lượng trên nông sản (Hori

và Izuka, 1951; Shioyama và cộng sự, 1964) Gần đây, kỹ thuật phơi ải đất đã phát triển bởi Katan et al (1976) đã được sử dụng thành công để loại bỏ hạch

nấm của Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân lúa (Usmani và Ghaffar, 1982)

Kết quả sơ bộ đã được công bố (Hussain và Ghaffar, 1987)

Thí nghiệm được thực hiện tại ba địa điểm khác nhau với các khu vực

có cấu trúc đất khác nhau Mùa hè năm 1984 làm thí nghiệm với 3 loại đất khác nhau, đất Karachi (thịt pha cát), đất Sakrand (đất sét pha cát) và đất

Lahore ( đất sét) Hạch ba tháng tuổi Sclerotium oryzae với 100% khả năng

sống được sử dụng để nhiễm nhân tạo trong đất Túi nilon có chứa 10g đất bị nhiễm khuẩn nhân tạo với 10 hạch nấm/g đất, chôn vùi vào trong đất tại các khu vực có cấu trúc đất khác nhau tại các độ sâu tương ứng khác nhau 5cm và 15cm, 20cm sau đó phủ tấm nilon trong suốt lên trên, đất được tưới nước trước khi phủ Có bốn lần lặp lại cho mỗi thí nghiệm và các ô được chọn ngẫu nhiên Nhiệt độ đất đo bằng cách chèn nhiệt kế ở độ sâu 5cm và 20cm đã được ghi lại cứ hai giờ một lần giữa 8 giờ đến 16 giờ Trong một túi nilon thử nghiệm riêng biệt với độ sâu 20cm được đưa trở lại mức độ sâu 5cm Túi đã được gỡ bỏ sau ba ngày phơi ải và hạch nấm được phân cách bằng sàng và kỹ thuật nổi trên mặt nước (Usmani và Ghaf-xa, 1974) Khả năng sống của các hạch đã được thử nghiệm bằng cách cấy chúng trên môi trường Water- Agar

Kỹ thuật pha loãng dung dịch đất (Waksman và Fred, 1922) đã được sử dụng

để nghiên cứu số lượng vi sinh vật trong đất trên môi trường thạch với mức

pH 5,3 bổ sung thêm các chất kháng sinh penicillin và streptomycin 100 ppm

Trang 19

sử dụng để phân lập nấm Xạ khuẩn và vi khuẩn được phân lập trên cùng một môi trường không có thêm các chất kháng sinh ở mức pH 7,2 Vi sinh vật hoạt động đối kháng trong ống nghiệm được thử nghiệm khi cấy, phân lập ngẫu nhiên của các xạ khuẩn và vi khuẩn gần rìa của đĩa petri

pH của đất được xác định trong hỗn hợp của đất và nước cất Phốt pho

có sẵn được chiết xuất với NaHCO3 và đo bằng phương pháp molypden Hàm lượng chất hữu cơ được xác định khi đốt Kali được đo bằng quang phổ hấp thụ nguyên tử Nitơ tổng số được tính toán bằng phương pháp Kjeldahl’s

Ở thí nghiệm sử dụng đất sét (Lahore) và đất thịt pha cát (karachi), đất sét pha cát (Sakrand) không sử dụng nilon phủ, làm giảm khả năng sống của hạch nấm 16% ở đất thịt pha cát và 46% tại đất sét pha cát Trong thí nghiệm

sử dụng lớp phủ, hạch nấm ở độ sâu 20cm làm giảm khả năng sống 87% và 62% tương ứng với đất sét pha cát và đất sét Hạch nấm trong đất sét pha cát

và đất sét dễ mất khả năng năng sống hơn vì nhiệt độ trong đất thường cao hơn Còn ở đất thịt pha cát thì khả năng sống của hạch nấm vẫn còn khoảng 84% ở độ sâu 15 - 20cm, sau khi phơi ải 4 ngày hạch nấm cũng mất hoàn toàn khả năng tồn tại

Hạch mất khả năng tồn tại là do đất ướt càng làm tăng nhiệt độ đất (Usmani và Ghaffar, 1984) Sau khi sử dụng lớp phủ nilon trong đất ẩm ướt nhiệt độ đất từ 14h – 16h ở độ sâu 5cm đạt tối đa là 560C ở đất sét pha cát,

500C ở đất sét và 490C ở đất thịt pha cát Khi tăng nhiệt độ dưới đất lớp phủ

đã làm giảm khả năng tồn nấm Sclerotium oryzae (Usmani và Ghaffar, 1986)

Khi sử dụng nilon để làm lớp phủ trên đất đã loại bỏ được rất nhiều vi sinh

vật gây bệnh trong đất như Verticillium dahlia, Fusarium oxysporum Sp Lycopersici (Katan et al 1976), Sclerotium rolfsii (Grinstein et al 1979) Plasmodiophora brassicae (White and Buzacki,1979), Rhizoctonia solani, Thielaviopsis basicola và pythium spp (Pullman et al 1981), Macrophomina phaseolina (Sheikh and Ghaffar, 1984) đã được báo cáo

Trang 20

Trong nghiên cứu này cho thấy đất được phơi ải làm tăng số lượng vi sinh vật có ích trong đất, gia tăng trong hoạt động đối kháng chống lại nấm

Sclerotium oryzae Có báo cáo rằng sau khi phơi ải đất một năm sau, các vi

khuẩn gram dương vẫn làm giảm tối đa sự phát triển của nấm Tuy nhiên loại

trực khuẩn bacillus spp., phát triển mạnh mẽ trong đất phơi ải (Stapleton và

Postassium ppm

Phosphorus Ppm

Karachi

( thịt pha cát) 0.89* 0.76 8.18 8.08 1350* 1372 84* 66 80* 91 Lahore

(đất Sét) 0.56* 0.44 8.84 8.75 1000 1000 17 16 16 18 Sakrand

Trang 21

Trên thực tế sử dụng lớp phủ bằng nilon để hạn chế sự phát triển của bệnh thối thân lúa và tăng năng xuất, lớp phủ nilon có thể sử dụng được 3 – 4 lần nhưng cũng cần có sự tính toán chi phí hợp lý để có lợi ích cao nhất Ngoài ra cũng cần phát triển sử dụng lớp phủ bằng nilon trên diện tích lớn trồng lúa

Năm 1998, đại hội quốc tế về bệnh học thực vật họp lần thứ 7 (1998) Cother - Tính nhạy cảm của giống lúa Úc đối với nấm bệnh thối thân

Sclerotium oryzae

Các vùng trồng lúa của Úc nằm ở phía tây nam New South Wales giữa sông Murray và Murrumbidgee Bởi vì đây là khu vực bị cô lập, nó không bị mắc những bệnh nghiêm trọng ảnh hưởng đến các quốc gia sản xuất lúa gạo

khác Bệnh thối do Sclerotium oryzae lần đầu tiên quan sát thấy ở New South

Wales vào năm 1995 Ở nước ngoài đó, là một căn bệnh nghiêm trọng tấn công thân của cây lúa nhờ dòng nước và tiến vào các bẹ lá bên trong, gây thiệt

hại lớn đến năng suất Vì bệnh này mới với khu vực trồng lúa của Úc Ba thí

nghiệm đã được tiến hành để xếp hạng các giống lúa theo sự mẫn cảm đối với

nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân Mười ba giống lúa Amaroo,

Bogan, Doongara, Goolarah, Illabong, Jarrah, Kyeema, Langi, millin, Pelde, Namage, YRL 101 và YRL 38 được trồng trong nhà kính ở nhiệt độ 25oC Sử dụng các thí nghiệm riêng biệt, các giống lúa sử dụng một trong hai phương

pháp lây bệnh

Phương pháp thứ 1: Sử dụng một đĩa môi trường có đường kính 6cm có hạch nấm 14 ngày tuổi dùng que cấy cắt các miếng thạch có kích thước 3x3mm theo phương pháp áp miếng thạch có sợi nấm vào bẹ lá lúa tại mực nước, dùng băng nilon mỏng quấn để miếng thạch không bị rơi, sử dụng cây lúa 64 ngày tuổi thân cây lúa không bị thương Thí nghiệm này được lặp lại 4 lần trong một thiết kế tách khối tiến hành hai lần

Phương pháp thứ 2: Tách hạch nấm từ bẹ lá và rắc lên trên mặt đất

Trang 22

xung quanh cây lúa ngay trước khi cho nước vào Rắc mỗi chậu khoảng 3,75

x 104 hạch, vượt quá số lượng có thể có trong một ruộng lúa bị nhiễm bệnh Thí nghiệm ở California (Mỹ) đã sử dụng 200 hạch nấm/cây Sau khi lây bệnh theo dõi cây trồng đến khi trưởng thành, thu hoạch và khi nhiễm bệnh đo chiều dài của bẹ lúa bị nhiễm, gióng bên ngoài và bên trong bị nhiễm bệnh và quan sát thời gian hình thành hạch

Kết quả thu được, tỷ lệ nhiễm trong cùng một cây là rất khác nhau, đặc biệt là lây bệnh bằng phương pháp rắc hạch nấm trên đất Một số cây bị nhiễm bệnh với chiều dài vết bệnh 200mm trong khi những cây khác không bị nhiễm Bẹ lá bên ngoài hiếm khi mang hạch nấm và có khác biệt đáng kể giữa chồi rễ của cùng một cây về chiều dài bên ngoài và bên trong mang hạch nấm

Lý do của điều này chưa được biết Phân tích từng phần thân lá cho thấy không có hướng phù hợp để dữ liệu được phân tích trên tổng chiều dài của mỗi phần thân mang hạch nấm cho tất cả các cây trong một ruộng Các giống không đồng nhất về tính kháng để ngăn chặn sự nhiễm bệnh Giống Amaroo, Kyeema, Millin và YRL38 bị giảm năng suất đáng kể khi lây nhiễm bệnh nhân tạo với năng suất giảm gần 30%, trong đó giống Kyeema và YRL38 giảm 9,5% Chiều dài vết bệnh không phản ánh năng suất Giống Lange và giống Pelde đều nhiễm hạch nấm nhưng năng suất của giống không bị ảnh hưởng đáng kể bởi bệnh thối thân Giống Amaroo có bẹ lá nhiễm ít hơn 45%

so với giống Lange nhưng lại giảm sản lượng 27% Sự nhiễm bệnh của cây lúa bị ảnh hưởng trực tiếp bằng phương pháp áp miếng thạch có hạch nấm rõ hơn phương pháp rắc hạch nấm trên đất xung quanh cây, mặc dù rắc hạch nấm trên đất là thực tế hơn Có thể thấy rằng áp lực của bệnh thối thân do

nấm Sclerotium oryzae thể hiện ở New South Wales là không nghiêm trọng

như các loại khác và do đó trong điều kiện hiện nay chỉ đặt ra một mối đe dọa cho một số giống

Năm 2001, N A Cintas and R K Webster đã tìm ra sự ảnh hưởng của

Trang 23

việc quản lý rơm rạ trên đồng ruộng đối với sự phát triển của nấm Slerotium oryzae ở California Trong các vụ lúa, người ta liên tục đốt cháy rơm rạ để giải quyết giảm thiểu lượng tác nhân gây bệnh Sclerotium oryzae, là nguyên

nhân chính gây ra bệnh thối thân lúa Năm 1993, một thử nghiệm liên tục được tiến hành trong năm ở Colusa Country để đánh giá tác động của chiến lược quản lý rơm rạ để loại bỏ hạch nấm tồn tại ở rơm rạ gây nên bệnh thối thân cây lúa, ảnh hưởng đến năng suất Phương pháp sử dụng được bố trí thiết

kế trên hai mảnh đất cùng 1 vùng : mảnh 1 được bố trí đốt rơm rạ, mảnh 2 không đốt rơm rạ Kết quả sau 5, 6 năm đạt được là khác biệt rõ rệt Tại các

mảnh ruộng đốt rơm rạ , nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân lúa có tỷ

lệ bệnh luôn thấp hơn sơ với các mảnh ruộng không đốt rơm rạ

Năm 2010, Elliot T Maschmann, Nathan A Slaton, Richard D Cartwright và Richard J Norman đã nghiên cứu tỷ lệ, thời gian bón phân Kali

và thuốc diệt nấm ảnh hưởng đến năng suất lúa và bệnh thối thân lúa do nấm

Sclerotium oryzae gây ra

Lúa thiếu Kali rất dễ bị bệnh nhất là bệnh thối thân cây lúa do nấm

Sclerotium oryzae gây ra Nông dân cần có kiến thức về cách quản lý phân

bón để Kali không bị thiếu nhằm giảm thiểu sự nhiễm bệnh thối thân cây lúa giảm thiệt hại năng suất Mục tiêu là để xác định ảnh hưởng của tỷ lệ Kali, thời gian ứng dụng thuốc diệt nấm azoxystrobin đến năng suất và chỉ số bệnh thối thân của lúa trồng trên đất có Kali thấp Bón phân Kali với 3 mức khác nhau 0 : 56 : 112 kg Kali/ha, các mức bón tương ứng với trước khi có lũ (PF), khi có sự khác biệt (PD), hoặc cuối giai đoạn khởi động (LB) Thuốc diệt nấm Azoxystrobin đã được áp dụng ở mức 0 và 0,23 kg/ ha, sau khi ứng dụng bón

ở mức 56 kg kali/ha thì thấy có sự khác biệt (PD) Thối thân được đánh giá mức độ bệnh và thể hiện như SRI trên thang điểm từ 1 đến 5, với 1 cho thấy không có triệu chứng bệnh (khỏe mạnh) và 5 là một gióng chết Bón phân Kali tăng năng suất của hạt 8-11% so với lúa không bón Kali Trong mỗi thời

Trang 24

điểm ứng dụng Kali, năng suất lúa tăng 0,23 kg/ha, khi lúa nhận được azoxystrobin thi năng xuất lúa lớn hơn lúa không nhận được azoxystrobin 6-12% Trong từng mức azoxystrobin, năng suất lúa đã thấp nhất khi không có Kali, năng suất trung bình khi sử dụng kali tại mức LB, và năng suất lớn nhất khi sử dụng Kali ở mức PF hoặc PD Khi sử dụng Kali và ứng dụng azoxystrobin mức độ bệnh SRI trung bình đã giảm đáng kể Phân bón Kali áp dụng giữa mức PD và LB có thể giảm thiệt hại năng suất khi thiếu Kali Nên bón phân Kali đủ để ngăn chặn thiệt hại PF tiềm năng làm giảm năng suất và giảm thiểu tỷ lệ mắc bệnh và mức độ nghiêm trọng bệnh thối thân

Prakash, Nishant và Puri, Smita (2013) đã nghiên cứu phát triển biện pháp thân thiện với môi trường bằng sàng lọc các tác nhân kiểm soát sinh học

chống lại nấm Sclerotium oryzae

Scleortium oryzae gây bệnh thối thân lúa là một bệnh quan trọng trên

lúa Trong một nghiên cứu để kiểm soát căn bệnh này đã phát triển biện pháp

sinh học thân thiện với môi trường, phân lập sàng lọc chủng Trichoderma harzianum và Trichoderma virens Biến đổi trong tất cả 15 chủng Trichoderma spp đã được thử nghiệm chống lại Sclerotium oryzae Tất cả các chủng Trichoderma spp và các hợp chất dễ bay hơi được sản xuất, ức chế tối đa sự phát triển sợi nấm của Sclerotium oryzae 28,88% Khi sử dụng Trichoderma spp ở nồng độ 50% ức chế sự tăng trưởng của sợi nấm Sclerotium oryzae 94,44 % Ở nồng độ 25% ức chế tối đa sự phát triển của sợi

nấm 94,44 % Thí nghiệm 1 và 2 ở nhà kính cho thấy rằng tất cả các chủng

Trichoderma phân lập được thử nghiệm là rất hiệu quả trong việc kiểm soát

dịch bệnh và thúc đẩy tăng trưởng thực vật

Thối thân do Sclerotium oryzae Catt là một trong những bệnh nghiêm

trọng trên lúa làm giảm đáng kể năng xuất Quản lý bệnh thối thân lúa là một vấn đề cần phải được quan tâm, vì trong thực tế chưa tìm ra giống kháng đối với bệnh này Có một số hóa chất hay thuốc diệt nấm sử dụng rất hiệu quả

Trang 25

nhưng việc sử dụng chúng để lại dư lượng trên gạo, ô nhiễm môi trường Đòi hỏi sự ra đời của tác nhân sinh học chống lại tác nhân gây bệnh thối thân Tuy nhiên, đến nay vẫn chưa có hệ thống nghiên cứu được thực hiện để tìm ra

những tác nhân sinh học chống lại tác nhân gây bệnh thối thân Trichoderma harzianum đã được sử dụng như một tác nhân kiểm soát sinh học có hiệu quả làm giảm khả năng nhiễm bệnh trên lạc do Sclerotium rolfsii và Rhizoctonia solani (Chet et al, 1979; Elad et al, 1980) Cuộc điều tra được tiến hành phân lập trên những chủng khác nhau của Trichoderma spp Nhằm tìm ra chủng hiệu quả nhất chống lại nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân lúa

1.2 Những nghiên cứu ở trong nước

Vấn đề nghiên cứu nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân lúa còn

nhiều hạn chế

Theo Đặng Vũ Thị Thanh (2008) sợi nấm đa bào, lúc non không màu, khi thành thục phân nhánh, góc nhọn màu vàng nhạt Hạch nấm hình cầu hay gần cầu khi non có màu trắng, khi thành thục có màu nâu, bề mặt trơn nhẵn, hạch cứng Nấm được phát hiện ở Hà Tây, Lạng Sơn, gây bệnh trên bẹ lá và thân cây lúa Vết bệnh thường phát sinh trên bẹ lá và thân ở gần mặt nước Ban đầu vết bệnh là những chấm nhỏ màu nâu đen, sau lớn dần và không có hình thành dạng nhất định Nấm xâm nhập vào thân, làm thân lúa biến màu đen hay nâu xám, mục thối và dễ đổ Trên bề mặt vết bệnh có những sợi nấm màu trắng và những hạch nấm màu nâu đen

Ở Hải Dương ngày 4/10/2010, các chuyên gia của Đại học Nông nghiệp I

và Chi cục Bảo vệ thực vật tỉnh Hải Dương đã đến xã Quyết Thắng (Thanh Hà) lấy mẫu xét nghiệm giống lúa nếp lai bị một loại bệnh lạ gây thối thân lúa

Trước đó, bệnh này gây hại khoảng 8 ha lúa nếp lai ở các xã Quyết Thắng, Thanh An, Tiền Tiến (Thanh Hà), trong đó có 2 ha bị nhiễm nặng Bệnh thường gây hại trên lúa nếp từ giai đoạn chắc xanh đến lúc thu hoạch ở những ruộng lúa quá tốt Khi nhiễm bệnh, cây lúa bị héo, sau đó thân cây bị mủn,

Trang 26

đổ rạp xuống ruộng

Vụ mùa năm 2010, bệnh này bắt đầu phát sinh trên lúa nếp cái hoa vàng

ở 2 huyện Kim Thành, Kinh Môn, với hàng chục ha bị nhiễm Tới vụ mùa năm ngoái có thêm giống lúa tẻ Nàng xuân nghi bị nhiễm bệnh

Năm 2011, lúa Thu Đông của tỉnh Bến Tre đang giai đoạn làm đòng sắp trổ Sau đợt triều cường, những vùng lúa trũng, thấp bị ngập Khi nước rút, một số bệnh hại có thể lây lan và phát triển mạnh đó là bệnh thối thân và bệnh khô vằn

Đáng quan tâm nhất sau đợt triều cường là bệnh thối thân, gây hại trên

lúa làm đòng, trổ Bệnh do nấm Sclerotium oryzae gây ra Hạch nấm là nguồn

tồn tại lây bệnh chủ yếu Hạch có thể sống trong đất ruộng từ 3- 4 tháng Hạch nổi trên mặt nước và theo dòng nước trôi đi, tiếp xúc với bẹ lá lúa và nảy mầm thành vòi bám vào cây lúa gây bệnh Bệnh chủ yếu gây hại bẹ và thân lúa Bệnh đầu tiên xuất hiện mặt ngoài bẹ lá gần mặt nước dưới dạng các vết nhỏ không đều màu nâu đen Bệnh nặng, vết bệnh phát triển lớn dần, xâm nhập sâu phía trong đốt thân Bẹ lá bị thối từng phần hoặc toàn bộ, thân bị thối mềm, cây dễ bị đổ ngã, rễ thối đen Thân lúa bị thối rỗng, bên trong ống

rạ hình thành nhiều hạch nấm nhỏ li ti như hạt cát, màu đen, rắn là triệu chứng đặc trưng của bệnh Trên những cây lúa có bẹ lá bị thối, ở chổ giáp mặt nước, phiến lá mềm rũ, trong khi đó phần bẹ lá dưới mặt nước vẫn còn xanh Bệnh phát triển mạnh trong điều kiện ruông ngập nước, yếm khí, mật độ cấy quá dày, bón thừa đạm, thiếu ánh sáng Bệnh phá hại nặng ở giai đoạn lúa có đòng trở đi Khi cây lúa bị xây xát, sinh trưởng yếu, bệnh thường xâm nhiễm dễ dàng Nguồn lây bệnh chủ yếu cho vụ sau là rơm rạ và nguồn đất ở ruộng lúa Biện pháp phòng trừ chủ yếu là thay nước khi ruộng có lúa bị bệnh, không để nước tù đọng trong ruộng; giữ đều mực nước không để có lúc sâu quá, lúc cạn quá; không gieo cấy quá dày; không bón quá nhiều phân đạm, tăng cường bón phân kali, phun thuốc trừ nấm bệnh như: Kisaigon 50ND, Agrozo 250EC,…

Trang 27

Trong trường hợp ruộng không rút cạn nước được, có thể rãi thuốc Kitazin 10H (liều lượng 20kg/ ha) Để ngăn ngừa bệnh phát triển vụ sau, nên dọn sạch rơm rạ và gốc rạ trên ruộng lúa sau khi thu hoạch

Ngoài bệnh thối thân, nông dân cũng cần chú ý sự xuất hiện và gây hại của bệnh khô vằn Vì sau đợt nước dâng, hạch nấm sẽ trôi theo dòng nước lây

lan mạnh Bệnh do nấm Rhizoctonia solani gây ra Đối với bệnh khộ vằn nên

quan sát kỹ phần gốc lúa vì bệnh bao giờ cũng phát triển từ những lá dưới, sau đó mới lan dần lên những lá trên Các bẹ lá sát mặt nước hoặc bẹ già ở dưới gốc thường là nới phát sinh bệnh đầu tiên

Vết bệnh loang lỗ màu xám xanh như da beo, nơi vết bệnh có những hạch nấm màu xám trắng và những sợi tơ nấm kết dính nhiều lá lại Hạch nấm dễ dàng rời khỏi vết bệnh và nổi trên mặt nước ruộng Gieo sạ dày làm cho ẩm độ không khí bên trong tán lúa tăng cao, góp phần làm cho bệnh trở nên trầm trọng hơn Bệnh xuất hiện thành từng ổ, từng chòm, sau đó có thể lan rộng ra Bệnh nặng toàn bộ cây lúa bị héo khô; hạt bị lép lửng; giảm năng suất

Phòng trừ bệnh khô vằn chủ yếu là áp dụng các biện pháp tiêu diệt nguồn bệnh ở trong đất và kỹ thuật canh tác thích hợp Tiêu diệt nguồn bệnh tồn tại trong đất tiến hành ngay sau khi thu hoạch, cày sâu để vùi lấp hạch nấm Sạ thưa hợp lý, bón phân cân đối, tránh bón thừa đạm, tăng cường bón thêm kali để tăng cường tính chống chịu của cây Chủ động tưới tiêu, không

để mực nước quá cao trong trường hợp bệnh đang lây lan mạnh

Trong trường hợp ngập nước, sau khi nước rút quan sát có bệnh xuất hiện nên phun thuốc kịp thời bằng các loại thuốc đặc trị như: Anvil 5SC, Validacin 3L, Opus 75EC ,

Trang 28

Chương 2 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊU CỨU

2.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu

2.1.1 Đối tượng

Nấm Sclerotium oryzae gây bệnh thối thân trên lúa

2.1.2 Vật liệu

2.1.2.1 Giống

- Giống nếp: Nếp cái hoa vàng, Nếp 97, Nếp 87, Nếp phú quý, Nếp DT52

- Giống tẻ: Q5, Khang dân, VS1, TH3-3, Bắc thơm 7

2.1.2.2 Môi Trường

- Các môi trường nuôi cấy nấm

a/ Môi trường PCA

Thành phần: + Agar :20gam

+ Nước cất : 1000ml

+ Khoai tây : 200 gam

+ Cà rốt : 20 gam

b/ Môi trường PSA (Khoai tây – đường saccarose – agar)

Thành phần: + Khoai tây : 200gam

+ Saccarose (đường ăn): 20gam

+ Agar : 20gam

+ Nước cất : 1000ml

Cách làm: 200g khoai tây gọt sạch vỏ, cắt lát mỏng luộc nhừ với 1 lít nước, sau đó lọc qua 4 lớp vải màn lấy nước trong Cho nước khoai tây, đường ăn, agar vào xoong và khuấy đều Cho xoong lên bếp vừa đun vừa khuấy đều rồi đổ vào lọ McCartney hấp khử trùng ở 1210C trong 15 phút, hấp xong cho môi trường vào hộp lồng đậy nắp lại, khi môi trường nguội, cho các hộp này vào túi nilon trắng sạch buộc lại bằng dây chun, để vào khay nhựa, cất vào trong tủ

Trang 29

c/ Môi trường PSA nghiêng trong ống nghiệm

Cách chuẩn bị: Nấu môi trường PSA như trên nhưng không cho vào lọ Scott mà dùng bơm để bơm môi trường vào ống nghiệm, mỗi ống 10 ml , đậy nút cao su vừa phải, cho vào giá ống nghiệm, hấp khử trùng ở 121oC trong 15 phút, hấp xong, lấy giá ống nghiệm ra để nằm nghiêng trên thanh đồng để tạo mặt phẳng nghiêng của môi trường trong ống nghiệm, khi nguội cất giá ống nghiệm vào tủ, dùng cấy nấm trong 2-3 ngày

d/ Môi trường cám – agar

20 gam thạch khuấy đều rồi cho vào xoong, cho xoong lên bếp đun nhỏ lửa, vừa đun vừa khuấy đều tay, sôi 2 phút là được, đổ môi trường vào chai McCartney, đậy nắp chai, hấp khử trùng ở 1210C trong 15 phút, hấp xong cho môi trường vào hộp lồng đậy nắp lại, khi môi trường nguội, cho các hộp này vào túi nilon trắng sạch buộc lại bằng dây chun, để vào khay ngựa, cất vào tủ

e/ Môi trường OMA (Oatmeal Agar)

Thành phần:

+ Bột lúa mạch : 50 g

+ Đường saccaroza : 20g

+ Agar : 20g

+ Nước cất không ion : 1000 ml

Cách làm: Cho 50g bột mạch và 500ml nước cất không ion vào trong xoong và khuấy đều Sau đó đặt lên bếp đun nhỏ lửa và cho thêm 20g đường

Trang 30

ăn vào xoong và khuấy đều Pha 20g agar vào trong 200ml nước cất không ion và lắc đều rồi đổ dung dịch này vào xoong dung dịch đang đun nêu trên

và khuấy đều Cho thêm 300ml nước cất không ion vào xoong cho đủ 1 lít môi trường, đổ môi trường vào chai McCartney, đậy nắp chai, hấp khử trùng

ở 1210C trong 15 phút, hấp xong cho môi trường vào hộp lồng đậy nắp lại, khi môi trường nguội, cho các hộp này vào túi nilon trắng sạch buộc lại bằng dây chun, để vào khay ngựa, cất vào tủ

f/ Môi trường PGA ( Khoai tây – glucose – agar)

để chống nhện và côn trùng xâm nhập, để vào khay nhựa, cất vào tủ

2.1.2.3 Hóa chất và dụng cụ

- Cồn, một số thuốc kháng sinh, …

- Que cấy, bình tam giác, đũa thủy tinh, panh, ống đong, dao cắt mẫu, đèn cồn, cốc thủy tinh, …

Tủ lạnh, tủ định ôn, buồng cấy, kính hiển vi, bình bơm, …

2.1.3 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

- Thời gian: Vụ mùa năm 2014

- Địa điểm: + Hải Dương

+ Bộ môn bệnh cây, khoa Nông Học, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam

Trang 31

2.2 Nội dung

2.2.1 Phân lập nấm Sclerotium oryzae từ các mẫu lúa bị bệnh đã thu thập được

2.2.2 Quan sát, mô tả đặc điểm hình thái của nấm Sclerotium oryzae

2.2.3 Nghiên cứu một số đặc điểm nuôi cấy nấm Sclerotium oryzae

Nghiên cứu khả năng phát triển của tản nấm và hình thành hạch nấm

Sclerotium oryzae trên một số môi trường nhân tạo

2.2.4 Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa gieo trong nhà lưới và trên ruộng sản xuất

2.2.4.1 Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa nếp gieo trong nhà lưới

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa nếp gieo trong nhà lưới ở giai đoạn mạ

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa nếp gieo trong nhà lưới ở giai đoạn đẻ nhánh

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa nếp gieo trong nhà lưới ở giai đoạn đòng

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa nếp gieo trong nhà lưới ở giai đoạn trỗ

2.2.4.2 Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối với một số giống lúa tẻ gieo trong nhà lưới

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa tẻ gieo trong nhà lưới ở giai đoạn mạ

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa tẻ gieo trong nhà lưới ở giai đoạn đẻ nhánh

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

với một số giống lúa tẻ gieo trong nhà lưới ở giai đoạn đòng

Nghiên cứu khả năng lây bệnh nhân tạo nấm Sclerotium oryzae đối

Trang 32

với một số giống lúa tẻ gieo trong nhà lưới ở giai đoạn trỗ

2.2.4.3 Nghiên cứu khả năng lây bệnh do nấm Sclerotium oryzae đối với một

số giống lúa gieo trên ruộng sản xuất

Nghiên cứu khả năng lây bệnh do nấm Sclerotium oryzae đối với

một số giống lúa nếp, lúa tẻ gieo trên ruộng sản xuất ở giai đoạn đẻ nhánh

Nghiên cứu khả năng lây bệnh do nấm Sclerotium oryzae đối với

một số giống lúa nếp, lúa tẻ gieo trên ruộng sản xuất ở giai đoạn đòng

Nghiên cứu khả năng lây bệnh do nấm Sclerotium oryzae đối với

một số giống lúa nếp, lúa tẻ gieo trên ruộng sản xuất ở giai đoạn trỗ

2.2.5 Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo và đối với bệnh thối thân lúa trong nhà lưới và trên ruộng

2.2.5.1 Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo

2.2.5.2.Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với bệnh thối thân lúa trong nhà lưới

2.2.5.3 Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với bệnh thối thân lúa trên đồng ruộng tại Hải Dương

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.3.1 Phân lập nấm Sclerotium oryzae

Tách hạch nấm từ bẹ lá lúa bị bệnh, khử trùng bằng cồn 70% trong 10-15 giây, rửa hạch qua nước cất vô trùng, cấy hạch nấm vào môi trường PSA, sau 2-3 ngày nấm mọc, cắt đầu non của sợi nấm cấy truyền để được nấm thuần, cấy nấm thuần vào ống nghiệm nghiêng PSA để giữ nguồn dung nghiên cứu

2.3.2 Quan sát, mô tả đặc điểm hình thái của nấm Sclerotium oryzae

Sử dụng kính hiển vi quang học và kính lúp điện soi nổi, quan sát,

mô tả đặc điểm hình thái của sợi nấm, tản nấm, hạch nấm Sclerotium oryzae, đo

Trang 33

kích thước hạch nấm

2.3.3 Nghiên cứu một số đặc điểm nuôi cấy nấm Sclerotium oryzae

Cấy nấm trên các môi trường nhân tạo, các mức pH, theo phương pháp đột khoanh nấm có cùng ngày tuổi, cấy vào giữa đĩa môi trường PSA, đo đường kính tản nấm sau khi cấy 2, 4, 6, 8,10 ngày, quan sát ngày có hạch nấm xuất hiện, đếm

số lượng hạch nấm/cm 2 môi trường sau khi cấy 10 ngày

2.3.4 Phương pháp lây bệnh nhân tạo

Cấy nấm trên môi trường PSA, khi nấm mọc kín đĩa, dùng que cấy cắt các miếng thạch có kích thước 3x3mm theo phương pháp áp miếng thạch có sợi nấm vào bẹ lá lúa, dùng băng nilon mỏng quấn để miếng thạch không bị rơi, sau 5 ngày cởi nilon hàng ngày theo dõi ngày bệnh xuất hiện

Phương pháp áp miếng thạch có hạch nấm vào bẹ lá lúa: cách làm và theo dõi như trên, chỉ khác là không dùng miếng thạch có sợi nấm mà dùng miếng thạch có hạch mấm

Mỗi công thức lây 10 dảnh x 3 lần nhắc lại = 30 dảnh

Công thức đối chứng không lây

Đánh giá mức độ bệnh sau khi lây

2.3.5 Phương pháp nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc đối với nấm Sclerotium oryzae trên môi trường nhân tạo

Cân thuốc theo lượng cần thí nghiệm, hòa vào 3 ml nước cất vô trùng, lắc cho thuốc tan đều

Môi trường PSA đã hấp khử trùng, để nguội 50-600C, đổ thuốc vào môi trường lắc đều, đổ môi trường có thuốc vào đĩa, để nguội cấy khoanh nấm cùng ngày tuổi vào, hàng ngày đo đường kính tản nấm, ngày hình thành hạch, sau 10 ngày đếm số hạch/cm2

2.3.6 Phương pháp nghiên cứu khả năng phát triển của bệnh

Theo dõi cây đã được lây bệnh nhân tạo Ngày ủ bệnh và ngày xuất hiện bệnh, tỉ lệ bệnh

Trang 34

Khả năng phát triển của bệnh, đo kích thước vết bệnh sau khi xuất hiện bệnh 5, 10, 15 ngày

Theo dõi tỷ lệ cây mạ (lúa) bị chết

Thời gian từ khi lây bệnh => Bệnh xuất hiện => Khi cây lúa bị chết héo khô

2.3.7 Phương pháp nghiên cứu hiệu lực của thuốc đối với nấm và bệnh thối thân, thối hạch trên cây lúa

Gây bệnh nhân tạo vào lúa, sau đó xử lý thuốc theo các lượng cần thí nghiệm

Công thức đối chứng không xử lý thuốc

Theo dõi số dảnh lúa bị bệnh

C: Số cây bị bệnh công thức đối chứng

T: Số cây bị bệnh công thức xử lý thuốc

- Công thức tính hiệu lực thuốc đối với thí nghiệm ngoài đồng : dùng công thức Henderson Tilton

Trong đó : Ta là mức độ bệnh ở công thức xử lý thuốc sau phun

Tb là mức độ bệnh ở công thức xử lý thuốc trước phun

Ca là mức độ bệnh ở công thức đối chứng sau phun

Cb là mức độ bệnh ở công thức đối chứng trước phun

2.4 Xử lý số liệu

Dùng chương trình IRRISTAT 4.0 xử lý thống kê và so sánh DUNCAN số liệu thí nghiệm

Trang 35

Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương vụ mùa năm 2014

Bệnh thối thân lúa dần trở nên phổ biến tại các vùng trồng lúa đặc biệt

là lúa nếp Để có những đánh giá chính xác về tình hình bệnh thối thân lúa trên giống Nếp cái hoa vàng trong vụ mùa 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương chúng tôi tiến hành điều tra trên các địa hình khác nhau và với những mật độ cấy khác nhau để đánh giá mức độ nhiễm bệnh thối thân lúa của giống Nếp cái hoa vàng

3.1.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa nếp cái hoa vàng cấy ở chân đất cao và trũng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương

Bệnh thối thân hại lúa là một trong những bệnh nguy hiểm gây thiệt hại tới năng suất trồng lúa Nguồn bệnh được bảo tồn dưới dạng hạch nấm Các hạch nấm tồn tại trong rơm rạ, lan truyền nhờ nước tưới Để biết được diễn biến bệnh thối thân hại lúa trên đồng ruộng ở các địa hình khác nhau chúng tôi tiến hành điều tra bệnh thối thân hại lúa trên 2 địa hình đất cao và đất trũng Điều tra theo Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (QCVN 01-166: 2014/BNNPTNT phương pháp điều tra phát hiện dịch hại lúa) Kết quả được

thể hiện ở bảng 3.1

Trang 36

Bảng 3.1: Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa vàng cấy ở chân đất cao và đất trũng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc, thành

phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương

Ngày

điều tra Thời kì điều tra

Số dảnh điều tra

Số dảnh

bị bệnh

Tỷ lệ dảnh bị bệnh (%)

Số dảnh điều tra

Số dảnh

bị bệnh

Tỷ lệ dảnh bị bệnh (%)

29/8/14 Phân hóa đòng 1398 29 2,07 1364 31 2,27 6/9/14 Phát triển đòng 1365 31 2,27 1311 46 3,51

Hình 3.1 Kết quả điều tra tình hình bệnh thối thân lúa Nếp cái hoa

vàng cấy ở chân đất cao và đất trũng vụ mùa năm 2014 tại xã Ái Quốc,

thành phố Hải Dương, tỉnh Hải Dương

Ngày đăng: 17/09/2015, 18:27

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
5. Cedeno L, Nass H, Carrero, Cardona R, Rodriguez H, Aleman L, 1997. Sclerotium hydrophilium en arroz en Venezuela. Fitopatologia Venezolana 10, 9-12 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium "hydrophilium
11. Grinstein, A., Katan, J., Razik, A.A., Zeydan, O. and Elad, Y. 1979. Control of Sclerotium rolfsii and weeds in peanuts by solar heating of the soil. Plant dis.reptr. 63 : 1056-1059 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium rolfsii
13. Hussain, S. and Ghaffar, A. 1987. Effect of soil solarization on Sclerotium oryzae at defferent field locations. 24 th Natl. Sci. Con. Karachi.pp.10 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
19. Cintas, N. A. and Webster, R. K. 2001, Effects of rice straw management on Sclerotium oryzae inoculum,stem rot severity, and yield of rice in California Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
22. Pullman, G.S., De Vay, J.E, Garber, R.H. and weinhold, A.R. 1981. Soil solarizition: Effects on Verticillium wilt on cotton and soil borne population of Verticillim dahlia, Pythium spp.. Rhizotonia solani and thielaviopsis basicola.Phytopathology, 71 : 954-959 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Verticillium" wilt on cotton and soil borne population of "Verticillim dahlia, Pythium" spp.. "Rhizotonia solani" and "thielaviopsis basicola
23. Punja Z.K. 1988. Sclerotium (Athelia) rolfsii, a pathogen of many plant species. Plant pathol. 6:523-533 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium (Athelia) rolfsii
25. S. Hussain and A. Ghaffar, 1993. Effect of tillage practices on the population and viability of sclerotia of Sclerotium oryzae and yeil of rice Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
32. Usmani, S.M.H and Ghaffar, A. 1974. Biological control of Sclerotium oryzae Catt., the cause of stem rot of rice. 1. Population and viability of sclerotia in soil.Pakistan J. Bot. 6 : 157-162 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
33. Usmani, S.M.H. and Ghaffar, A. 1982. Polythylene muclching of soil to reducw viability of sclerotia of Sclerotium oryzae. Soil boil.biochem. 14 : 203-206 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
35. Usmani, S.M.H. and Ghaffar, A. 1986. Time temperature relation-ships for the inactivation of sclerotia of Sclerotium oryzae. Soil bio. Biochem. 18 : 493-496 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
36. W. W. Bockus, R. K. Webster, and T. Kosuge, 1977. The competitive saprophytic ability of Sclerotium oryzae derived from Sclerotia Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sclerotium oryzae
1. Đặng Vũ Thị Thanh (2008), Các loài nấm gây bệnh hại cây trồng ở Việt Nam, Nhà xuất bản Nông Nghiệp. Trang 160-161 Khác
2. Vũ Triệu Mân (2007). Giáo trình bệnh cây chuyên khoa, NXB Đại học Nông Nghiệp I. 2007. Trang 11 – 13 Khác
4. Baker, K.F. and Cook, R.J. 1974. Biological control of plant pathogens. San Fransisco W.H. Freenman press Khác
6. Chen, Y. and Katan, J. 1980. Effect of solar heating of soil by transparent polyethylene mulching on their chemical properties. Soil science, 130 : 271-277 Khác
7. Cother, E. 1998, International congress of plant pathology susceptibility of Australian . section 3.6 Khác
8. Elad, Y., J. Katan, and I. Chet. 1980. Physical, biological and chemical control integrated for soilborne diseases in potatos. Phytopathology 70:418-422 Khác
9. Elliot, T. Maschmann. Nathan A. Slaton. Richard D. Cartwright. and Richard J. Norman, 2010. Rate and timing of potassium fertilization and fungicide influence rice yield and stem rot. Agron. J., 102: 163-170 Khác
10. Farr DF, Rossman AY, Palm ME, McCray EB. 2008. Fungal databases. Systematic botany & mycology laboratory, ARS, USDA Khác
12. Hori, M. and Izuka, K. 1951. Control affect of ceresan against rice stem rot. Nogyo gijitsu, 6 : 35-37 Khác

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TRÍCH ĐOẠN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w