Nghiên cứu đặc điểm thực vật, đặc điểm giải phẫu và tác dụng kháng khuẩn của cây xuân hoa lá hoa

Vì vậy việc nghiên cứu các cây thuốc này một cách khoa học nhằm làm sáng tỏ kinh nghiệm dân gian, đẩy mạnh việc khai thác, trồng và sử dụng, nâng cao tính an toàn, hiệu quả điều trị là m

BỘ Y TẾTRƯỜNG ĐẠI HỌC D ư ợ c HÀ NỘI

NGUYỄN THỊ PHƯỢNG

N G H IÊN CỨU ĐẶC Đ lỂ M T H ự C VẬT,

ĐẶC Đ IỂM G IẢ I PHẪU VÀ TÁC DỤNG KHÁ NG KHUẨN

CỦA CÂY XUÂN HOA LÁ H OA

(KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ KHÓA lO O p ^Ị

Người hướng dẫn : GS.TS PHẠM XUÂN

DS VŨ CÔNG THỌ Nơi thực hiện : BỘ MÔN Dược HỌC c ổ TRUYỂN

BỘ MÔN THựC VẬT • • •

BỘ MÔN VI SINH - SINH HỌC TRƯỜNG ĐH DƯỢC HÀ NỘI 'Thời gian : 03/2007 - 05/2007

HÀ NỘI, 05/2007

jQ jằ i e ả ễ ề t đếL

Çîre4tjg, qtLÓ trinh, tíuie kiều úA hjờìut thành khoÁ luậtt ttàụ tồi Luồn, điiố^ iự ehỉ bÁja im ạỉứft it& nkiêl tinh eủcL eáe ihầự eồ- giÓM^ Çîèi æitt

đvCổe Ịỉùụ- tẲ lònụ biá đ n ehâ*i Ih ă tih ãAu 1ÆC lớ i:

^ítẨỊnt (Xjuăn Sinh - chủ nhiỀm bẠ mjần ^ưổe kjơ^ eâ truụền ^Njtòng, ^'X> n)ưiổ^ '3ÔCL Qtặi.

nữS.^ũ Qòềtq, ~ (Bênh úiệti ^ hợ^ Cjầ IruụỀn (Bắe Qũnh

j£à nhứnạ ttạttòi thầụ đã leưe lìêịi tutâng tiÂn »à đốnụ géịt nlùỀu

tị Uiên qnụ tì ú lí OỈIÚ tòi.

Q ịum đâụ, ỈM eủng æin ehân thành eảtn ổtt:

(ĩỳăti Çîhti — ehủ n h iê n i hà tn è n (7)ỉ iin h - ã itih hjỌ^

Q^eưỀỉttạ n)ưđ^ '3ôà Qíậi.

ÇîhS.'Jôeàng, (Văn Mãnt - (Bậ mền ^hựa ơật níứiổe ^í^ưềnạ ^'30

<T)ưựe^ '3ỗà Qtặi.

^ÙJiiq lơòn thề eáe thầụ, eà gẦúứ^, eẵn bA kỷ, thuãt tùên eủa, eáe bò^

m ở tt: n)ưổe hjỌ^ e¿ tvn ự ền , liỀií, ^ĩhưe ơ à i n)ưjổe., (Zĩỉ linh,- ẤÌnh hũ^

itã tọa itiỀu hùỀtt thuôn Uii giújfL đẵ ỉầi ttơă*L thành khơá ÌMỘn nAụ,.

(Xjin eẩnt ổn mẹ eha, ihầụ, eồ- ạiáô^f hạn bề đã LuÂn ạiành nhữttạ tình eảm ihâtL ihưđnụ, nhéứ eha tềi m ếl 5 năm hợ^ qtut.

Œîo- điều kiỀJn thài ạùut eùnụ như nhĩùtạ hẹut ehê eÙẨL bẩn thăn

râí mmtạ đkiỷe iự đmtg ạéft ý- kiùt eủa, quẬ úịĩ

Ọũưt ehAtt th àn h eảm ổn ĩ

7ôà Qlội 20/05/2007

MỤC LỤC

ĐẶT VẤN Đ Ể 1

PHẦN 1: TỔNG QUAN 2

1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CHI PSEUDERANTHEMUM 2

1.1.1 Vị trí phân lo ại 2

1.1.2 Đặc điểm chung của họ Ô rô - Acanthaceae 2

1.1.3 Đặc điểm chung của chi Pseuderanthemum 3

1.1.4 Các loài trong chi Pseuderanthemum 3

1.2 PHÂN BỐ SINH T H Á I 6

1.3 THÀNH PHẦN HOÁ H Ọ C 7

1.4 TÁC DỤNG SINH HỌC .8

1.4.1 Tác dụng kháng khuẩn và Iháng nấm .8

1.4.2 Hoạt tính thuỷ phân Protein (Proteinase) 9

1.4.3 Tác dụng ức chế MAO 9

1.4.4 Tác dụng bảo vệ gan 9

1.4.5 Độc tính 10

1.5 CÔNG DỤNG 10

PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 12

2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP TH ựC NGHIỆM 12 2.1.1 Nguyên vật liệu 12

2.1.2 Phương pháp thực nghiệm 13

2.2 KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 14

2.2.1 Nghiên cứu về thực vật 14

2.2.2 Thăm dò tác dụng kháng khuẩn trên invitro 24

2.3 BÀN LUẬN 31

2.3.1 Về các kết quả nghiên cứu thực v ậ t 31

2.3.2 Mối quan hệ giữa tác dụng kháng khuẩn và kinh nghiệm sử dụng XHLH trong dân g ian 32

PHẦN 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 33

3.1 KẾT LUẬN 33

3.1.1 Về kết quả nghiên cứu thực vật 33

3.1.2 Về tác dụng kháng khuẩn trên invitro 33

3.2 ĐỂ XUẤT 34

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHU LUC

DANH MỤC CÁC HÌNH.

1 Hình 1: Dược liệu XHLH 12

2 Hình 2: Ảnh hình thai thực vật 16

3 Hình 3: Cấu tạo chi tiết cuống lá XHLH 17

4 Hình 4: Cấu tạo chi tiết lá XHLH 19

5 Hình 5: Cấu tạo chi tiết thân XHLH 21

6 Hình 6: Cấu tạo chi tiết rễ XHLH 21

7 Hình 7: Đặc điểm bột phần trên mặt đất XHLH 22

8 Hình 8: Đặc điểm bột lá XHLH 23

9 Hình 9: Một số hình ảnh vòng vô khuẩn điển hình 31

DANH MỤC CÁC BẢNG 1 Bảng 1: Đường kính vòng vô khuẩn của chế phẩm thử XHLH 29

ĐẶT VẤN ĐỂ

Nước ta nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, có hệ sinh thái thực vật

đa dạng và phong phú Đó là nguồn tài nguyên vô cùng quý giá của nhân dân

ta Nguồn tài nguyên này đã và đang được các cộng đồng thuộc 54 dân tộc khác nhau sử dụng trong chăm sóc sức khoẻ chữa trị bệnh tật cũng như phục

vụ các nhu cầu kinh tế khác Tuy nhiên, có nhiều loại cây thuốc còn dùng trong phạm vi kinh nghiệm dân gian, lưu truyền từ đời này qua đời khác Vì vậy việc nghiên cứu các cây thuốc này một cách khoa học nhằm làm sáng tỏ kinh nghiệm dân gian, đẩy mạnh việc khai thác, trồng và sử dụng, nâng cao tính an toàn, hiệu quả điều trị là một vấn đề cần thiết

Bệnh nhiễm khuẩn là một bệnh khá phổ biến và hiện nay đang phát triển mạnh Đặc biệt điều kiện khí hậu của nước ta nóng ẩm rất thích hợp cho sự phát triển của vi khuẩn Thuốc Y học cổ truyền có những đóng góp đáng kể vào việc trị các bệnh nhiễm khuẩn nói chung Do đó việc phát hiện các cây thuốc trong dân gian để điều trị bệnh này là một vấn đề đáng được quan tâm

Cây Xuân hoa lá hoã(Pseuderanthemum bracteatum Imlay, họ Ô rô -

Acanthaceae) là một cây thuốc được sử dụng trong phạm vi dân gian với các tác dụng chữa viêm đại tràng, trĩ xuất huyết, chữa đầy hơi chướng bụng vói các tên địa phương khác nhau như: Hoàn ngọc đỏ, Hồng ngọc Nhưng những tài liệu nghiên cứu về cây thuốc này cho đến nay rất khiêm tốn Do vậy chúng

tôi tiến hành thực hiện đề tài: “ Nghiên cứu đặc điểm thực vật, đặc điểm giải phẫu và tác dụng kháng khuẩn của cây Xuân hoa lá hoa”

Trong khuôn khổ của khoá luận này, chúng tôi nghiên cứu một số nội dung sau:

- Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây Xuân hoa lá hoa, trên cơ sở đó góp phần làm rõ tên khoa học của vị thuốc Xuân hoa lá hoa

- Nghiên cứu về đặc điểm giải phẫu của cây Xuân hoa lá hoa

- Sơ bộ nghiên cứu tính kháng khuẩn của cây Xuân hoa lá hoa

P H Ầ N 1: T Ổ N G Q U A N

1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT c m PSEUDERANTHEMUM

1.1.1 Vị trí phân loại [9], [16], [36]

Theo các tài liệu phân loại về thực vật, chi Pseuderanthemum có vị trí phân

loại như sau:

Qứ Pseuderanứiemum1.1.2 Đặc điểm chung của họ Ô rô- Acanthaceae Juss [9], [15], [16], [20], [35] Cây cỏ nhiều năm, cây nửa bụi hoặc bụi, ít khi là cây gỗ Lá đơn nguyên

mọc đối, không có lá kèm Hoa mọc liêng lẻ hoặc mọc thành cụm hoa xim hoặc chùm ở kẽ lá hay ở ngọn Hoa lưỡng tính, đối xứng hai bên, có lá bắc và thưòng có

cả lá con Đài 4-5 tìiuỳ, hai môi Tràng 5, dứủi nhau, thường chia làm 2 môi, môi trên đôi khi không phát triển Nhị 4-2, đính vào ống tràng, đôi khi có nhị lép Đĩa mật hình vòng hoặc tuyến rời Bộ nhụy gồm 2 lá noãn, tạo ứiành bầu trên, hai ô, mỗi

ô có hai hoặc nhiều noãn đảo, một vòi hạt ở mỗi ô Mỗi hạt có cuống do cán lá noãn hoá gỗ, tác dụng như một cái lò xo để tung hạt đi Hạt tìiường có phôi lớn và không

có nội nhũ

Đặc điểm giải phẫu: ừong ửiân và lá của nhiều loài có nhiều túi đá (nang thạch) Một số ít loài có libe quanh tủy

1.1.3 Đặc điểm chung của chi Pseuderanthemum [35], [36]

Cây thảo hoặc nhỡ Lá mọc đối Hoa mọc riêng lẻ hoặc mọc thành cụm đơn, không cuống hoặc cuống ngắn Hoa đơn hoặc lưỡng tính mọc ở nách lá bắc nhỏ đối xứng bỏi trục hoa Đài 5 lá đài rời hoặc gần rời Tràng hình ống dài, hẹp có khi mở rộng xuống phía dưới, chia 5 thuỳ Nhị thường 2, chỉ nhị ngắn Bộ nhụy gồm 2 lá noãn tạo thành bầu 2 ô

1.1.4 Các loài trong chỉ Pseuderanthemum [1], [2], [11], [12], [13], [14], [31]

Theo tài liệu [1] chi Pseuderanthemum ở Việt Nam có 10 loài.

Theo tài liệu [19] chi p senderanthemum à Việt Nam có 9 loài 2 thứ

trong đó chỉ có 4 loài 2 thứ có tên Việt Nam

Theo tài liệu [31] chi Pseuderanthemum ở Việt Nam có 10 loài.

Theo tài liệu [23] đã xác định được tên khoa học của cây con khỉ là

Pseuderanthemum palatiferum và đặt tên Việt Nam là Xuân hoa Trong dân

gian cây này còn được gọi là Nhật Nguyệt, Hoàn Ngọc, Nội đồng, Tu linh, Trạc nhã, Thần tượng linh

> Pseuderanthemum caruthersỉi ( Seem.) GuilLvar atropurpureum

(Bull.) Forb (Xuân hoa đỏ) [11], [13], [14], [18], [19],[31]

Tên khác Ô rô đỏ, Nhớt tím

Cây nhỏ cao 1-2 m, phân nhánh nhiều, không lông Lá có phiến xoan,

bầu dục, mỏng không lông, dài 4-10 cm đỏ bầm có bớt đậm, ít khi vàng có bớt

đỏ cuống ngắn Qiùm ở ngọn, hoa trắng có trung tâm hồng, thuỳ thường có đốm đỏ, nhị 2, thò

xoan bầu dục, có thể thon dài, to 10-12x3-4 cm, không lông mặt trên, có lông mịn mặt dưới; cuống dài 1-1,5 cm Gié ở ngọn, dài 10-15 cm; lá hoa, tiền diệp nhỏ, không lông; lá đài 5 mm, không lông, vành tím, cao vào 1,5 cm, môi trên

2 răng, môi dưói 3 thuỳ; tiểu nhụy thụ 2, lép 2; noãn sào không lông

Phân bố ở Việt Nam: Bắc Cạn và Thái Nguyên,

> Pseuderanthemumpalatiferum Radlk [2], [11], [12], [14], [17], [23],

[26], [30], [31], [32], [36]

Cây bụi, cao từ 1-3 m, sống nhiều năm Thân non màu xanh lục, rải

rác có lông che chở đa bào, phần thân già hoá gỗ màu nâu, nhẵn, phân nhánh nhiều cành mảnh

Lá mọc đối, phiến lá hình mũi mác, hai đầu nhọn, dài 12-17 cm, rộng

3,5-5 cm Mép lá nguyên, gốc lá hơi men xuống, hai mặt phiến lá có lông che chở đa bào ngắn và lông tiết có chân đơn bào đầu đa bào, dọc gân giữa có nhiều lông hctti Cuống lá dài 1,5-3 cm, có nhiều lông che chở đa bào

Cụm hoa dài 10-16 cm, ở kẽ lá hay ở đầu cành, gồm các xim ngắn ở các mấu Hoa lưỡng túứi, không đều, 5 đài rời tồn tại đến khi quả già Tràng họfp, màu trắng, ống tràng hẹp và dài khoảng 2,5-2,7 cm, có 5 thùy, chia làm 2 môi Môi trên gồm hai thùy nhỏ đính liền nhau đến nửa chiều dài của thuỳ Môi dưới gồm 3 thuỳ to Thuỳ giữa của môi dưới có các chấm màu tím, hai nhị lép nhỏ dính ở gốc hai chỉ nhị Bầu trên, nhẵn, dài khoảng 1,5 mm, 2 lá noãn liền nhau tạo thành bầu 2 ô, vòi nhụy dài 2,5-2,7 cm, nửa dưói của vòi có lông, 2/3 vòi về phía trên có màu tím nhạt

Quả nang, 2 ô, mỗi ô chứa 2 hạt

Mùa hoa: tháng 4-5 Cây mọc hoang ra hoa gần như quanh năm

Phân bố ở Lào, Trung Quốc, ở Việt Nam được thấy có ở các rừng bình nguyên mấy năm gần đây được trồng rộng rãi trong nhân dân

Phân bố ở Nha Trang.

> Pseuderanthemum reniculatum Radlk (Xuân hoa mạng) [19], [31],

[34], [36]

Tiểu mộc cao đến 2,5 m; nhánh già tròn, vỏ mốc, tróc thành mày Lá

có phiến bầu dục, to vào 11x5,5 cm, dày, nâu đỏ lúc khô, gân phụ 9-10 cặp;

cuống dài 1 cm Chùm tụ tán ờ ngọn, lá hoa thon; cọng hoa dài 3-5 mm; lá đài

2 mm; vành đỏ, thơm, ống dài 1,2 cm, môi trên 2 tai, môi dưới 3, gần như bằng nhau, tiểu nhụy 2

Phân bố ở Lào, Indonesia, ở Việt Nam thấy có ở Bà Nà

> Pseuderanthemum carruthersii var ovatifolium ( Brem.) Brem (Nấp

Vũm) [19], [31]

Tiểu mộc khác thứ trên ờ lá bầu dục, to 8,5 x4,5 cm, đàu tà, gân phụ 7-8

cặp; phát hoa là chùm- tụ tán hẹp; hoa thành tụ tán ngắn; vành cao 2 cm, tai xoan như nhau

Phân bố ở Việt Nam thấy có ở Sài Gòn, Sông Bé.

> Pseuderanthemum acuminaãssimum Miq (Xuân hoa nhọn) [19], [35]

Tiểu mộc; nhánh non vuông, không lông Lá có phiến thon nhọn to đến

25x9 cm, đáy tù tù hẹp trên cuống, mỏng, bìa nguyên, gân phụ 6 cặp, cuống dài 4-5 cm Phát hoa dài đến 30 cm, không nhánh, như có râu vì vòi nhụy dài còn lại; hoa như chụm ở mỗi mắt; lá đài 3,5 mm, không lông; vành 2,5-3,7 cm,

có lông ở mặt ngoài, thuỳ 1 cm; tiểu nhụy thụ 2 Nang dài 3,5 cm, không lông.Phân bố ở Lào, Thái Lan ở Việt Nam có ở Bảo Lộc, Sài Gòn

> Pseuderanthemum crenulatum (Lindl.) R Ben (Xuân hoa răng) [19],

Phân bố ở Campuchia, Việt Nam

> Pseuderanthemum tonkinense R Ben (Xuân hoa bắc bộ) [31], [35]

Tiểu mộc cao đến 1 m, nhánh có 4 rãnh Lá có phiến thon, to đến 22x9 cm;đầu nhọn, đáy tù hẹp trên cuống, không lông, gân phụ 8-10 cặp, cuống dài 1

cm ơiùm đơn ở ngọn cao đến 30 cm cọng hoa 4-7 mm có tiền diệp ở giữa lá

đài không lông; vành tím đậm, ống cao 2,7 cm, có lông tiết mặt ngoài, thuỳ dài 1,3 cm, tiểu nhụy thụ 2, lép 2, noãn sào không lông

Phân bố ở Cẩm Giàng, Quý Đức, Kim Bôi.

> Pseuderanthemum bracteatum Imlay [19], [31]

Cây cỏ cao 50-60 cm, ít nhánh; thân vàng đỏ, có 4 cạnh, có lông mịn lúc non Lá có phiến thon, to 5-9X 3-5 cm, có lông mịn hai mặt, gân phụ 5-6 cặp; cuống dài 2-3 cm Phát hoa cao 8-10 cm, lá hoa như lá, to 2x0,7 cm, có lông mịn; vành nhỏ, cao 1,5 cm, thuỳ cao 6-7 mm; tiểu nhụy 2 Nang cao 2 cm, có lông mịn

Phân bố ở Thái Lan, ở Việt Nam thấy có ở Núi Dinh, Vũng Tàu

Trong đề tài này chúng tôi tập trung nghiên cứu cây này

1.2 PHÂN BỐ, SINH THÁI [1], [9], [19], [29], [33], [34]

Họ Ô rô (Acanthaceae) trên Thế giới có khoảng 250 chi và 2600 loài có trung tâm phân bố chủ yếu ở Nam và Đông Nam Á, Châu Phi và Nam Mỹ

Một số chi thấy phân bố à vùng ôn đới Một số loài thuộc chi Acanthus thấy

có ở Địa Trung Hải ở Việt Nam họ Ô rô có khoảng 47 chi và 217 loài, chủ

yếu mọc hoang, một số trồng làm cảnh (Thanh táo, Hoa chuông, Bạch hạc), nhuộm (Chàm, Lá diễn, cẩm) làm hương liệu (Cơm nếp) [9], [33], [34]

Chi Pseuderanthemum chưa xác định chính xác hiện nay ở Việt Nam có

bao nhiêu loài Một số tác giả cho rằng hiện nay có 10 loài [31], 9 loài 2 thứ [19], 10 loài [1] Song tất cả các tài liệu của các tác giả trên đều ghi nhận các

cây thuộc chi Pseuderanthemum là cây dễ trồng vài năm gần đây có một số

cây được trồng rộng rãi trong phạm vi nhân dân

Đặc biệt cây Xuân hoa (Pseuderanthemum palatiferum) thuộc cây ưa ẩm

ưa sáng và có thể hoi chịu bóng, nhất là khi còn nhỏ Cây trồng sinh trưẻỉng mạnh trong mùa xuân hè, mùa đông có hiện tượng nửa rụng lá Xuân hoa trồng trên một năm tuổi mới có quả, tái sinh tự nhiên chủ yếu từ hạt, có khả năng tái sinh cây chồi khỏe sau khi chặt Ngoài ra cách cắm cành giâm cành đều có thể cho cây mới

Với XHLH thấy cổ ở Núi Dinh- Vũng Tàu Ngoài ra còn thấy có ở Thái Lan [31]

Trên thực tế thấy có ở Thái Bình, Nam Định, Ninh Bình, Hưng Yên, Hoà Bình, Thái Nguyên Cây XHLH cũng là một cây thuốc trồng phát triển mạnh đặc biệt mùa xuân, hạ Cây đặc biệt ưa ẩm ưa sáng Trồng bằng cách giâm cành

1.3 THÀNH PHẦN HOÁ HỌC [23], [26], [30]

Theo tài liệu [23], [26] đã sơ bộ nghiên cứu thành phần hoá học trong lá

Xuân hoa (Pseuderanthemum palatiferum) trên cả hai mẫu: mẫu lá ở vườn

thực vật trường ĐH Dược Hà Nội (XHl) và mẫu lá ở Cúc Phưofng (XH2) thì thấy trong dịch chiết lá Xuân hoa có: acid hữu cơ, carotenoid, coumarin, đường khử và sterol So sánh thành phần hoá học trong hai mẫu XHl và XH2 bằng sắc ký lớp mỏng cho thấy các vết tách ra của chúng có Rf bằng nhau Khi phân tích dịch chiết XHl bằng sắc ký cột tác giả đã phân lập được 3 chất: + ơiất Fi chất rắn màu ừắng chiêm 0,005 % ùỊong lá khô Cấu ữúc hoá học chưa rõ

+ Chất F2tinh thể hình kim không màu tỷ lệ 0,1% trong lá khô Cấu trúc hoá học được sơ bộ kết luận là ß- Sitosterol.

+ Qiất F3: chất rắn màu đỏ gạch, chưa rõ cấu trúc

Theo tài liệu [30] trong lá Xuân hoa (Pseuderanthemum palatiferum) có:

chất béo, carotenoid, sterol, flanovoid, acid hữu cơ, saponin và đường tự do.+ Từ dịch chiết n- Hexan tác giả đã phân lập được 7 chất và xác định được cấu trúc hoá học của 4 chất là: phytol (2-hexadecen-l-ol 3,7,11,15- tetramethyl); ß-sitosterol; hỗn hợp đồng phân epimer của stigmasterol và poiferasterol; ß-D-glucopepanosyl 3-O-sitosterol

- Với XHLH cho tới nay với các tài liệu chúng tôi thu thập được thì chưa có tài liệu nào đề cập đến thành phần hoá học

1.4 TÁC DỤNG SINH HỌC [25], [26], [27], [30]

Nói chung các loài trong chi Pseuderanthemum còn ít được nghiên cứu và

sử dụng ở Việt Nam mới chỉ có một số tài liêu công bố về tác dụng sinh học

của cây Xuân hoa {Pseuderanthemum palatiferum).

1.4.1 Tác dụng kháng khuẩn và kháng nấm [26]

Nghiên cứu cao đặc chiết bằng methanol từ lá khô mẫu Xuân hoa: XHj và

XH2 cho thấy:

- Cả hai mẫu Xuân hoa đều có tác dụng trên vi khuẩn Escherichia coli và

vi khuẩn Gr(-) đường tiêu hoá, chưa có tác dụng trên Pseudomonas aeruginosa, mẫu XHi có hoạt tính mạnh hơn (MIC 200 ụg/ml với E.colĩ) còn

mẫu XH2 (MIC 400 ụg/ml với E.coli).

- MIC của cao XHj trên Bacillus subtỉlỉs và Staphylococcus aureus là

200 pg/ml, trên Streptococcus pyogenes là 400 ụg/ml Cao của mẫu XHj có tác dụng yếu hơn Có một số phân đoạn tác dụng rất mạnh, MIC trên s aureus

chỉ là 10 Mg/ml

- Đối với nấm, cao không có tác dụng trên Aspergillus niger ờ nồng độ

400 pg/ml, các nấm Fusarium oxyporum, Rhezotonia solanii, Sacchromyces cerevisiae và Candida albicans có MIC là 400 ụg/ml, riêng Pyricularia oryzae thì MIC là 200 ụg/ml Có phân đoạn chiết có tác dụng hơn cao 4-5 lần.

1.4.2 Hoạt tính thuỷ phân protein (proteinase) [27]

Dựa vào kinh nghiệm dân gian, dùng lá xuân hoa giã nát đắp vết thương

để tiêu mủ và làm tan mụn lồi, một nhóm tác giả đã xác định hoạt tmh thuỷ phân protein của lá tưoíi Xuân hoa, Kết quả cho thấy dịch chiết bằng dung dịch đệm phosphat 0,05-0,10 M có tác dụng thuỷ phân protein khá, mạnh nhất ở pH7,5vànhiệtđộ70®C

Enzym bền khi phơi, phcd lá khô ở 60®c, hoạt tính còn 30% Dịch chiết proteinase từ lá để một tháng ở 4°c, hoạt tính giảm ít

Tinh chế proteinase làm tăng hoạt tính lên 5 lần, đạt mức 1,912 lU/mg protein

1.4.4 Tác dụng bảo vệ gan [30]

Dùng chế phẩm là cao toàn phần lá Xuân hoa đã loại bỏ chlorophyl Cho chuột nhắt trắng uống cao 3 ngày liền, liều mỗi ngày 250 mg/kg Gây tổn thương gan bằng tiêm i.p tetrachlorid carbon (CCI4) vào ngày thứ ba sau khi cho uống thuốc được 1 giờ Tổn thương gan sẽ làm tăng quá trình peroxy hoá lipid màng tế bào gan, làm tăng hàm lượng malonyl dialdehyd (MDA) trong gan Ngày thứ tư, lấy máu xét nghiệm enzym gan thấy lô dùng thuốc chỉ làm

tăng lượng nhỏ rất ít so với lô không dùng thuốc Hoạt tính của enzym gan chỉ tăng nhẹ.

Như vậy kết luận sơ bộ Xuân hoa có tác dụng bảo vệ gan

1.4.5 Độc tính [27]

Cho chuột nhắt trắng uống cao đặc ở các nồng độ thấp 0,83-3,13 g/kg thấy

chuột hoạt động bình thường Tăng nồng độ lên 5,56-11,5 g/kg chuột giảm hoạt động, nhưng sau một giờ chuột trở về trạng thái hoạt động bình thường

1.5 CÔNG DỤNG [13], [18], [20], [32]

ở Vân Nam, Trung Quốc người ta dùng rễ của cây Xuân hoa để chữa chấn thương Rễ, lá và hoa của cây Xuân hoa đỏ chữa lở miệng làm lành vết thương [13], [18]

Trong dân gian, cây Xuân hoa được dùng như sau: phục hồi sức khoẻ cho người ốm yếu, chữa suy nhược thần kinh; chữa rối loạn tiêu hoá tiêu chảy, lỵ, táo bón, đau bụng không rõ nguyên nhân; chấn thương chảy máu; chữa đau dạ dày loét hành tá tràng, chảy máu đường ruột, viêm loét đại tràng, đái ra máu, đái buốt, đái rắt; điều chỉnh huyết áp trong những trường hợp huyết áp cao hay thấp; chữa u xơ ở phổi u xơ tuyến tiền liệt [30]

Theo tài liệu [32] lá tưoi Xuân hoa không mùi không vị, hơi nhớt vào tỳ, vị, gan, thận, Tác dụng bổ tỳ, dưỡng vị, sinh tân, kháng khuẩn đường tiêu hoá, chữa sưng tấy do dập té

Liều dùng theo kinh nghiệm dân gian: ăn nhai lá tươi 4-10 lá/ngày, ăn nhiều có thể có tác dụng phụ gây choáng

Với XHLH theo kinh nghiệm dân gian bộ phận trên mặt đất được dùng để chữa viêm đại tràng cấp và mạn tính; xuất huyết đi ngoài ra máu, chảy máu cam, chảy máu do chấn thương phần mềm; rối loạn tiêu hoá, đầy chướng bụng, đau bụng do co thắt Ngoài ra phần lá non tươi còn được dùng làm rau

ăn sống vói nem chạo, gỏi để tăng vị h d chua, chát phòng đầy bụng

Liều dùng 10-12g dược liệu khô.

12- 30g dược liệu tưoi

Cách dùng: dùng trong lá, thân phoi khô sắc lấy nước uống

Dùng ngoài lá tưcd giã nát đắp lên vết thương, băng lại

Chữa viêm đại tràng: dùng phối hợp với: nam mộc hương, hậu phác, thương truật, trần bì

- Noi ứiu hái: xã Bình Miiứi- huyện Kiến Xương - tỉnh Thái Bình.

- Thời điểm thu hái: 03/2006 và 03/2007

- Thu hái bộ phận ữên mặt đất, rửa sạch, cắt đoạn, phoi khô hoặc sấy khô ở

60°c Bảo quản để nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn

- Rễ, thân, lá bảo quản trong cồn 40-50°C để làm vi phẫu

- Tiêu bản phcd sấy khô bảo quản để kiểm tra tên khoa học

- Các môi trường dùng cho nghiên cứu kháng khuẩn được bào chế tìieo đúng tiêu chuẩn tại phòng thí nghiệm bộ môn Vi sinh- sinh học Trường ĐH Dược Hà Nội

❖ Đối tượng nghiên cứu

- Toàn cây XHLH, hoa, vi phẫu rễ, thân, lá, cuống lá, bột lá, bột toàn thân

- Dịch ép cây tươi, cao chiết từ dược liệu khô, tươi vói các dung môi cồn.Ethyl acetat tác dụng trên các chủng vi sinh vật

> Hoá chất dung môi

Hoá chất: xanh methylen, đỏ son phèn và các hoá chất để làm vi phẫu Dung môi: Ethanol, Ethyl acetat đều đạt tiêu chuẩn phân tích quy định.2.1.2 Phương pháp thực nghiệm

2.I.2.I Nghiên cứu về thực vật

các trung tâm khoa học lớn: Viện Dược liệu, Khoa Sinh ĐHQG Hà Nội, Viện Sinh thái và tài nguyên sinh vật (Hà Nội).

- Tham khảo ý kiến của chuyên gia

^ Nghiên cứu đặc điểm giải phẫu

Làm vi phẫu (rễ, thân, lá, cuống lá, soi bột) theo tài liệu [6], [8], [22]

2.1.2.2 Nghiên cứu về tác dụng kháng khuẩn [5], [7], [10]

Nguyên tắc dùng phương pháp khuếch tán trên thạch: các khoanh giấy đạt tiêu chuẩn quy định tẩm mẫu thử đặt trên mặt đĩa thạch dinh dưỡng đã cấy vi sinh vật (VSV) kiểm định Các hoạt chất có trong mẫu thử sẽ khuếch tán vào môi trường, tiêu diệt hoặc ức chế vi sinh vật phát triển tạo thành vòng vô khuẩn Đo kích thước vòng vô khuẩn cho thấy được khả năng kháng khuẩn của mẫu thử,

Cây bụi, cao 60-150 cm, sống lâu năm (H2a) Thân non trơn nhẵn, màu vàng đỏ, có lông rất mịn khi còn non đôi khi khó phát hiện Thân già hoá gỗ

bề mặt sần sùi màu nâu Lá đofn, nguyên, mọc đối, cuống lá dài khoảng 0,8-1

cm, phiến lá hình mũi mác, hai đầu thon nhọn dài 12-17 cm, rộng 2-3 cm, gân hình lông chim, gân phụ 5-6 cặp Lá non có màu vàng đỏ, lá già màu xanh, mặt trên xanh đậm, mặt dưới xanh nhạt Cụm hoa dạng bông, dài 3-4 cm, mọc

ở kẽ lá hay đầu cành, được phủ một lớp lông mịn (H2b) Hoa lưỡng tính,

không đều, mỗi bông được bọc bởi một lá bắc riêng Lá bắc màu xanh lục, kích thước 10-12 mm X 4-6 mm (H2c) Đài 5, liền 1/3 phía dưới, kích thước mỗi đài 10-11 mm X 1-1,2 mm (H2d) Tràng hợp, hình ống, màu tím nhạt;

ống tràng hẹp dài khoảng 20-25 mm, không đều, chia 5 thuỳ phía trên Bộ nhị

4 gồm 2 dài, 2 ngắn, dài khoảng 11-14 mm, chỉ nhị đính trên ống tràng; bao phấn dính lưng dài 2-3 mm (H2e, H2f) Nhụy gồm vòi dài khoảng 18-20 mm, núm nhụy chia 2, hình mũi mác dài 2-3 mm (H2g, H2h) Bầu trên, 2 ô đường kính khoảng 1-1,2 mm (H2i)

Mẫu cây tươi được GS Vũ Văn Chuyên giám định tên khoa học là

Pseuderanthemum bracteatum Imlay họ Ô rô (Acanthaceae) (phụ lục 1)

Làm mẫu khô, đem đối chiếu vói mẫu lưu giữ tại Viện Dược liệu, khoa Sinh Trường ĐH Khoa học tự nhiên ĐHQG Hà Nội, Viện Sinh thái và tài nguyên sinh vật (Hà Nội) nhưng cho tói nay tại các trung tâm này chưa có mẫu cây này

Lưu mẫu tiêu bản tại phòng tiêu bản bộ môn Thực vật Trường ĐH Dược Hà Nội SỐ hiệu phòng tiêu bản HNIP/15218/07 (phụ lục 2)

H2a: Cây XHLH chụp tại thực địa H2b: Cụm hoa

H2c:Lábắc H2d: Đài H2f: Nhị H2e:Nhị trên tràng

H2g: Nhụy H2h: Núm nhụy H2i: Bầu

2.2.I.2 Đặc điểm giải phẫu

- Làm vi phẫu lá, cuống lá, thân, rẻ xuân hoa lá hoa

- Quan sát tiêu bản dưứi kữứi hiển vi ở vật kửứi 4,10,40.

> Vi phẫu cuống lá (Hình 3)

- Cuống lá lồi lên ở cả hai mặt, mặt dưới lồi hơn mặt trên

- Từ ngoài vào trong có:

Biểu bì gồm một hàng tế bào hình chữ nhật xếp theo chiều dài của cuống

lá khá đều đặn Mô dày góc gồm 5-6 hàng tế bào xếp thành vòng tròn khép kín quanh trục lá, tương đối đều đặn Mô mềm gồm các tế bào hình đa giác nhiều cạnh hoặc hình tì-òn, càng vào sâu bên trong các tế bào giảm dần kích

thước Bó libe-gỗ 3, bó chính giữa hình vòng cung, libe ờ ngoài gỗ ở trong

Libe gồm 3-4 hàng tế bào Gỗ gồm các tế bào màng hoá gỗ, bắt màu xanh Bó libe gỗ nhỏ ở hai đầu bó libe gỗ chúứi, thiết diện hình tròn hoặc hình trứng

Hình 3: Cấu tạo chi tiết cuống lá XHLH

> Vi phẫu lá (Hình 4)

Quan sát từ trên xuống dưới có:

■ Phần gân lá: lồi lên ở cả hai mặt, mặt trên lồi hơn mặt dưói.

Biểu bì trên cấu tạo bởi một hàng tế bào hình tròn, nhỏ xếp tưofng đối đều đặn Mô dày trên cấu tạo bởi 4-5 hàng tế bào, sát biểu bì trên là một hàng mô dày phiến xếp khá đều đặn, vào trong là mô dày góc xếp lộn xộn Mô mềm gồm các tế bào hình đa giác 4-6 cạnh góc hơi tròn, ở phần mô mềm sát mô dày trên có dấu tích của mô giậu gồm các tế bào xếp sít nhau sang hai bên Bó

libe-gỗ gồm bó chính ở giữa làm thành hình vòng cung, mặt lõm quay về phía trên hơi lệch xuống phía dưới Libe ở ngoài, gỗ ở trong Xung quanh libe có

sợi riêng lẻ hoặc tụ đám hình thoi thành dày, giữa có khoang hẹp Bó libe-gỗ nhỏ ở hai bên bó libe gỗ chính, hình trứng Mô dày dưới là mô dày góc tương

tự mô dày trên nhưng ít hơn và xếp lộn xộn hcfn Biểu bì dưới tương tự biểu bì trên

■ Phần phiến lá

Biểu bì trên cấu tạo gồm một hàng tế bào hình chữ nhật, xếp đều đặn, có lông tiết chân đơn bào đầu đa bào Hạ bì trên gồm một lớp tế bào nằm ngay sát dưới biểu bì trên có màng hoi dày Mô giậu cấu tạo bởi một hàng tế bào hình trụ xếp vuông góc vói bề mặt lá Mô khuyết nằm giữa phần thịt lá vói những tế bào hình tròn để hở những khe trống Hạ bì dưới và biểu bì dưới cũng cấu tạo như hạ bì trên và biểu bì trên nhưng mỏng hơn Hạ bì dưới rất khó phát hiện