Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg

Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg Nghiên cứu bào chế viên nén simvastatin 20 mg

Trường ĐH Dược Hà Nội : Từ 1/ 2006 - 5/ 2006

Ẩ L ò i e ẩ m O i l tfứ<‘ /tMy em xi/u rtfửĩe ế à y ỈỎ lũHỹ ểiM Ổ'H ếđíi áắc <ãa m ê / nỹf/ừ ỉ hoe Itũ /ứi lỉtắ y

ỹíắũ^ ễỉSfí tAT^^i/ỵến % ăn^- lítfíy đ ã r ũ ỉ ếẳũ tă u iìn ể t eỉtũ em lừ <ár/t fĩfi< /à i

ũêu, kiừĩìtỹ dẫn cÂũ mri ầũHỹ U íếỉ (ị^ud lũn/t íà/yyt l/trử- ìtỹ/dê^í, dưa 't.u m V ‘ ẩln ỉiíửĩì t^ eũrt^ rtÂư da/tỷ 0nt {‘ắ€Ỉí niM đê em hũà/ìt ỉhmi đưưc ềhũắ iumi của nãìvli ^.nt X¿H eỉtđit /Âmt h rủm đít ikầt^!

íẳỀê hũà/H ÌÂà/ìt ảỉtũẩ ỉíiđny em emtỹ ảhêìệỹ /Âê /ihêitỹ ảê ẩmỉ cmtỹ ỉa€ cãa /Âắt^ ỹiắũ^ ễFSfSP, &SP JV^^€i/ỵền '^ằn Œon^ đã ^íii^ỉ ent ìệjf iền fài ùêii có Í<‘ r/t<i /i/tũd Itimty cểtỉ í‘/ưi em ntêl ếê' ẩínk kưếrt^ của ẩê ỉà i -nà điền /ihêrt^ /céni ^thmt f^fíO/H ftmtÿ /à

lỉíầ t^ ír iê n ừm đ íề ri /d ê n f ufî/it Ỉổf eỉt€ ừ ứ củ (‘h ú fỉỹ €^ 1 ế u ũ ĩ {Ịịuấ h ìn h là m f/trù ‘

rt^Jtrmn.

j\Tỹr€ổl /Âử ểa em muến ìtÂắe ẩmt ỉ/ímtỹ' ềểưìú ỉuSrt của mì/ìt ỉà cỉd &¿n/i 9 ÏU ^ ủ i

^ ì n / i - ìt^ưừl đ ã €Ỉí/rt^ €Wi ỈÂưe ỉù êyt đ ê ừ ù ^ riết rtẢữrt^ ỈÂ áìtỹ qua rầm ưit

(ũ ỉ ìiÂỉềĩl.

jVïtM'U đđỹ, em €mt^ xln đưưe ỹử ỉ Ỉổi cẩnt ứH ỉối tâ^ eẩ eắc Ihầy eê ^iáũy <‘ắc /ìỹ

fJt/fiâ ï idm t ể ê m ê n ỉ^ à ũ <‘¡1€ - n ổ i <mí /Â(ứ‘ ỉdềm đ ê / à í n ũ i tỉê n ỹ nà ỉíO itỹ <ầ

//UửPìtỹ n ũ í cỉtyỊiìtỹ c m tỹ €ắe tó ckứcỵ đũà^t tííê đ ã ỉaũ đ iề ỉi ỉà m t ỈÍŨC ỉạ^ t {‘Âũ em Itm t/J U tê/

rtam qna

Q ßiim rìm y^ HỈỉ/ỉềrty^ /iỉtSyệy^ íà ÍẨ ìỉÂđĩỵ ừ ìi xi/H đf€ư€ cẳnt đ'H cue ếun củu fêr\ đ ă c

ểiM ià cắc ểfẮ/H ỉà m tíỉ/f€e đ ểũ m ền 3 ià ũ {‘/tế, ỉĩo i đ ã h er Âũi đưổc í đ ĩ n /tiề ỉi

ẩ íề ỉi ỉừ eảe ếo/n jV^íừĩ {‘ắc ểo/H m à ff ữrtỹ ìfỹ m j ỉà/yyt tÂf€e ìtỹ ũ iê^ í của ữ/t rUtỹ ỉa Iriỹ r ă ĩ

'nả ếmỉỹ- eãrt^ l/d e u ìỉÁ ữrt^ ừ ếỵt^ cười.

jVoíy rt^à/ỵ J 9 l/tártỹ 5 nãm 2 (J 0 G

ÕÂl ưi^a.

C H Ú G IẢ I C Á C C H Ữ V IẾ T T Ắ T

M ỤC LỤC

Trang

ĐẶT VẤN Đ Ể 1

P H Ầ N l: TỔNG Q U A N 2

1.1 Giới thiệu chung về các statin 2

1.2 Sim vastatin 2

1.2.1 Công thức 2

1.2.2 Nguồn gốc, tính chất 3

1.2.3 Tác dụng và cơ chế tác d ụ n g 4

1.2.4 Dược động học 5

1.2.5 Chỉ định, liều dùng, cách dùng 6

1.2.6 Tác dụng không mong muốn 6

1.2.7 Chống chỉ định 6

1.2.8 Tương tác thuốc 6

1.2.9 Một số chế phẩm kết hợp có simvastatin 7

1.2.10 Một số nghiên cứu về simvastatin 7

1.3 Một số yếu tô ảnh hưởng đến độ ổn định của dược chất trong viên n én 7

1.3.1 Dung môi phân 8

1.3.2 Sự phân huỷ oxy hoá 9

1.4 Một sô yếu tô ảnh hưởng đến khả năng giải phóng của dược chất từ viên n én 13

1.4.1 Các vếu tố thuộc về công thức 13

1.4.2 Các vếu tố thuộc về phương pháp, quv trình bào chế viên 14

PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT Q U Ả 16

2.1 Nguyên liệu, phương tiện và phương pháp nghiên cứ u 16

2.1.1 Nguvên liệu và phương tiện nghiên cứu 16

2.1.2 Phương pháp nghiên cứu 17

2.2 Kết quả thực nghiệm và nhận xét 21

2.2.1 Đường chuẩn của dung dịch simvastatin trong hai môi trường hoà tan khác nhau 21

2.2.2 Kết quả thăm dò tác động của một số tá dược đến độ ổn định của simvastatin 23

2.2.3 Kết quả thăm dò tác động của một số tá dược đến khả năng giải phóng simvastatin từ viên nén nghiên cứu 25

2.2.4 Thiết kế và tối ưu hoá công thức bào chế 31

2.2.5 Sơ bộ đánh giá độ ổn định của viên nén simvastatin 20 m g 38

PHẦN 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ X U Â T 40

3.1 Kết lu ậ n 40

3.2 Đề x u ấ t 40

ĐẶT VẤN ĐỂ

Hội chứng tăng lipid máu nằm trong mô hình bệnh tật của các nước phát triển nhưng đã có ở nước ta với tỉ lệ ngày càng cao Hội chứng tăng lipid máu cũng là biểu hiện của nhiều bệnh như đái tháo đường, hội chứng thận hư, xơ gan tắc mật

Và đặc biệt, tăng lipid máu được xác định là yếu tố nguv cơ lớn nhất của bệnh xơ vữa động mạch, với hậu quả trực tiếp là nhồi máu cơ tim, tai biến mạch máu não, tắc động mạch chi dưới, hẹp động mạch thận Các thuốc hạ lipid máu liên tục được phát hiện, đưa vào lâm sàng và là một trong những loại thuốc được kê đơn nhiều

nhất trên thế giới Do hiệu quả và sự dung nạp thuốc tốt mà các statin thường là chỉ

định đầu tiên của bác sĩ trong liệu pháp điều trị cholesterol máu cao Kể từ cuối những năm 1980, các statin đã thể hiện vai trò to lớn trong việc chăm sóc sức khoẻ Năm 2004, các statin đều thuộc vào tốp 200 thuốc bán chạy nhất trên thế giới với doanh thu lên đến 25 tỉ đô la Hai biệt dược đứng đầu là Lipitor (atorvastatin) và Zocor (simvastatin) [16], Giá của các statin luôn cao trong khi người bệnh lại phải điều trị lâu dài Nhu cầu về nhóm thuốc nàv hiện nay rất lớn

Để góp phần phát triển sản xuất thuốc trong nước, vừa đảm bảo chất lượng, vừa

làm hạ giá thành, chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu bào ch ế viên nén

simvastatin 20 m g’\ Việc hoàn thành đề tài không dễ bởi simvastatin là một dược

chất không ổn định và rất ít tan Do đó, mục tiêu của đề tài là bước đầu xây dựng

được công thức bào ch ế viên nén simvastatin 20 mg đảm bảo độ ổn định và khả năng giải phóng dược chất Để đạt được mục tiêu trên, đề tài đã thực hiện ba nội

dung nghiên cứu sau:

1 Lựa chọn các tá dược và trình tự bào chế viên nén simvastatin 20 mg

2 Thiết kế và tối ưu hoá công thức bào chế viên nén simvastatin 20 mg

3 Sơ bộ đánh giá độ ổn định của viên nén đã bào chế

PHẦN 1: TỔNG QUAN1.1 SIM VASTATIN

1.1.1 Giới thiệu chung về các statin

Năm 1976, nhà nghiên cứu người Nhật Akira Endo sau hai năm thử nghiệm

6000 chất tách từ nấm, đã phát hiện ra chất ký hiệu là ML-236B có tác dụng hạ

cholesterol ở chuột Chất này được chiết xuất từ môi trường nuôi cấy Pénicillium

citrinum, còn gọi là mevastatin nhưng không dùng được do tác dụng phụ gây khối u,

huỷ hoại cơ và tử vong ỏ chó thí nghiệm Sau đó, một loạt các chất tương tự chất này được phát hiện với tên gọi là các statin [15],

Hiện tại ỏ Mỹ có 6 statin được sử dụng trên lâm sàng với năm được chấp nhận là: lovastatin (1987), simvastatin (1991), pravastatin (1991), fluvastatin (1993), atorvastatin (1996), rosuvastatin (2004) Ngoài ra, còn có 2 statin khác là pitavastatin (được chấp nhận sử dụng ở Nhật năm 2003) và cerivastatin (bị rút khỏi thị trường năm 2001 do tác dụng phụ) [15], [16]

Statin được phân thành các loại: chiết xuất từ nấm men (lovastatin), bán tổng hợp (simvastatin, pravastatin) và tổng hợp (fluvastatin, cerivastatin, atorvastatin, rosuvastatin, pitavastatin) [4], [16] Cũng có thể phân loại dựa vào tính thân dầu hoặc thân nước của thuốc Theo đó, atorvastatin, lovastatin và simvastatin là các chất thân dầu còn pravastatin, rosuvastatin, fluvastatin được coi là các chất thân nước hơn

do có nhóm hydroxy phân cực và nhóm methan Sulfonamid Riêng lovastatin và simvastatin là tiền thuốc còn các statin khác đều ở dạng có hoạt tính Cấu trúc hoá học khác nhau dẫn đến sự khác nhau về tác dụng của các statin [15], [16]

1.1.2 Công thức

Simvastatin (SIM) còn có các tên khác là: simvastatina, simvastatinum,

synvinolin, velastatin [28]; công thức phân tử: C25H38O5; khối lượng phân tử: 418,6

và công thức cấu tạo như sau [23]:

Tên khoa học: 2,2- Dimethyl butanoic acid (IS, 3R, 7S, 8S, 8aR)- l,2,3J,8,8a-

hexahydro- 3,7- dimethyl -8- {2- [(2R,4R)- tetrahydro -4- hvdroxy -6- 0X0 -2H- pvran- 2yl] ethyl} - 1- naphtalenyl ester

1.1.3 Nguồn gốc, tính chất

- SIM được bán tổng hợp từ lovastatin nhờ quá trình lên men Aspergillus terreus

Cấu trúc của SIM tương tự lovastatin, chỉ khác ở nhóm methyl thêm vào gốc butvrvl của dây nối ester Sự thav đổi nàv làm tăng hoạt tính ức chế HMG- CoA reductase của SIM so với lovastatin, tuy nhiên, nó cũng làm tăng tính thân dầu của SIM: logP

octanol/nước ờ 25°c của SIM là 115, của lovastatin là 50 [21]

- SIM tồn tại ở dạng bột trắng hoặc gần trắng, không hút ẩm, nhiệt độ nóng chảy:

135 - 138°c [21], [23],

- Dạng bột kết tinh của SIM thực tế không tan trong nước (độ tan là 0,0014 mg/ml

ở 23°C), dễ tan trong cloroform, methanol, ethanol [22], [23] Độ tan trong nước rất thấp đòi hỏi phải áp dụng nhiều biện pháp trong thiết kế công thức để đảm bảo tốc

độ giải phóng của SIM từ dạng bào chế

- SIM có góc quay cực: [oc]d^^ = +292° (C = 0,5%/ acetonitril), có khả năng hấp thụ ư v với 3 bước sóng cực đại là 231, 238, 247 nm [23],

- Trong công thức phân tử có nhóm chức ester và vòng lacton nên SIM dễ bị thuỷ phân Tuy nhiên, ở pH từ 4 - 6, SIM ít bị thuv phân nhất [10], [24}, [25]

- Trong cấu trúc của SIM có liên kết dien ở nhân napthenyl là vị trí dễ bị oxv hoá

bởi gốc tự do Thêm vào đó, nhóm -OH trong vòng lacton cũng dễ bị oxv hoá thành dạng 0X0 làm mất hoạt tính của SIM [14], [25] Dược điển châu Âu (2002) quy định

bảo quản nguyên liệu SIM trong bình kín với khí nitơ, tránh ánh sáng [9] Từ đây có thể thấy giải quyết vấn đề chống oxy hoá dược chất là một yêu cầu trong việc xây dựng công thức bào chế viên nén SIM.

- SIM trong viên nén có thể được định lượng bằng phương pháp HPLC hoặc quang phổ đạo hàm bậc hai [10], [31], [36]

1.1.4 Tác dụng và cơ chê tác dụng

SIM có tác dụng làm giảm nồng độ LDL - cholesterol, apolipoprotein B, triglycerid huyết tương, làm tăng vừa phải HDL - cholesterol Hiệu lực của SIM cao gấp 2 lần lovastatin nhưng yếu hơn atorvastatin [3], [5]

Nghiên cứu 4S (Scandinavian Simvastatin Survival Studv) dùng SIM 20 - 40mg/ngày cho 4444 người bệnh tăng cholesterol máu và đau thắt ngực hoặc bị nhồimáu cơ tim trước đó, cho kết quả: giảm được tổng số tử vong toàn bộ (30%), tử vong bệnh mạch vành (42%), tử vong do nhồi máu cơ tim (37%) so với nhóm dùng thuốc placebo trong thời gian theo dõi trung bình 5,4 năm [5]

Thử nghiệm HPS (Heart Protection Study) kéo dài hơn 6 năm trên 20536 người tại Anh, uống SIM với liều 40 mg/ngày, placebo hoặc vitamin chống oxy hoá hàng ngày Kết quả cho thấy, điều trị bằng SIM để hạ cholesterol làm giảm được cơn tim

và đột quỵ ít nhất là 1/3 và giảm nhu cầu phải phẫu thuật mạch vành [3], [5]

SIM là một tiền thuốc Trong cơ thể, nhờ enzym carboxyesterase ở gan và ruột, SIM chuvển đổi thuận nghịch thành dạng p - hydroxy acid có hoạt tính Với pH của gan và máu, dạng acid không thể chuyển đổi lại thành dạng lacton làm mất tác dụng dược lý được [25]

Dạng acid của SIM cũng như các statin khác có cùng cơ chế tác dụng như sau:Trong giai đoạn đầu tiên của quá trình tổng hợp cholesterol nội sinh, có sự biến đổi 3 - hydroxv- 3 - methyl glutarvl coezym A (HMG - CoA) thành mevalonat - tiền chất của cholesterol [3],

Các statin ức chế tổng hợp cholesterol ngoại vi, làm giảm lượng cholesterol tới gan, làm tăng hoạt tính receptor của lipoprotein tỉ trọng thấp (LDL), dẫn đến tăng thải LDL Nhóm này làm giảm từ 20 - 45% LDL tuỳ theo liều, ở liều bình thường, HMG - CoA reductase không bị ức chế hoàn toàn nên vẫn có đủ mevalonat cho nhiều quá trình chuyển hoá [3].

Ngoài ra, SIM còn có tác dụng; làm thoái lui, ổn định mảng xơ vữa, bảo vệ chức năng nội mạc, chống viêm (đặc biệt là viêm đa khớp dạng thấp), chống stress, chống huvết khối, kìm hãm tiêu xương và kích thích tạo xương mới, làm giảm nguv cơ thoái hoá hoàng điểm [4], [5], [8], [12],

1.1.5 Dược động học

- Do tính thân dầu cao nên SIM qua được hàng rào máu não

- Là một tiền thuốc, SIM có sinh khả dụng thấp (< 5%)

- SIM được hấp thu tương đối nhanh (85%), chủ yếu ở ruột, rất ít ở dạ dày, không

bị ảnh hưởng bởi thức ãn, đạt nồng độ đỉnh trong huvết tương trong vòng 1 - 3 h.Cũng do khả năng hấp thu tốt hơn dạng acid mà dạng lacton được sử dụng nhiều

- Liều lượng SIM khác nhau dẫn tới sự phân bố thuốc ở gan và mô ngoại vi khác nhau SIM liên kết với protein huyết tương cao (95%), Ti/2 huyết tương là 1,9 - 3,0 h

- SIM chuyển hoá lần đầu ở gan đáng kể (50 - 60%), qua CYP3A4

- SIM thải trừ chủ yếu ở dạng chuyển hoá Chất chuyển hoá có Ti/2 lớn hơn chất ban đầu 85% SIM thải qua phân theo đường mật, 10 - 15% theo đường niệu (dạng không hoạt tính) [3], [15], [16], [30],

1.1.6 Chỉ định, liều dùng, cách dùng

- SIM được chỉ định cho 2 mục đích:

+ Điều trị: tăng cholesterol máu nguyên phát hay rối loạn lipid máu hỗn hợp, tăng cholesterol máu nguồn gốc gia đình đồng hợp tử

+ Dự phòng các nguy cơ của bệnh mạch vành

- Liều lượng; 5 - 8 0 mg/ngày tuỳ theo chỉ định Người lớn, liều khởi đầu 5 - 1 0 mg/ngày, nên uống vào buổi tối Điều chỉnh liều cứ 4 tuần 1 lần Liều duv trì 5 - 4 0 mg/ngày Có thể uống vào bữa ăn hoặc khi đói [3], [5]

1.1.7 Tác dụng không mong muốn

Ngoài những tác dụng phụ thông thường ít gặp như nhức đầu, chóng mặt, rối loạn tiêu hoá đáng chú ý nhất là bệnh cơ do các statin nói chung và SIM nói riêng [5], [28] Cơ chế có thể là do statin làm giảm các protein kích thước nhỏ mà những protein nàv tham gia vào duv trì tế bào cơ [4}

Tác dụng không mong muốn sinh học bao gồm tăng enzvm gan transaminase, tăng phosphatase kiềm, tăng creatin phosphokinase [3], [28]

1.1.8 Chống chỉ định

- Quá mẫn với bất kv thành phần nào của sản phẩm

- Bệnh gan tiến triển hoặc tăng transaminase huyết thanh

- Thời kỳ mang thai hoặc cho con bú [3], [28],

1.1.9 Tương tác thuốc

- Gemfibrozil và các fibrat khác, niacin với liều làm hạ lipid 1 g/ngày làm tăng nguy cơ về bệnh cơ khi phối hợp với SIM Có thể do chính các thuốc nàv cũng có khả năng gây bệnh cơ ngay cả khi dùng chúng đơn độc [4],

- SIM là một cơ chất của CYP3A4 Vì vậy những chất nào ức chế được CYP3A4 nếu phối hợp với SIM cũng có thể làm tăng nguy cơ bệnh cơ do giảm chuvển hoá của SIM, làm tăng nồng độ của SIM trong huyết tương Những chất này bao gồm: itraconazol, ketoconazol, ervthromycin, fluoxetin, nefazodon, các chất ức chế protease HIV, warfarin [16], [28]

- Nước bưởi làm tăng độc tính trên cơ khi dùng đồng thời với SIM [5]

1.1.10 Một sô chê phẩm kết hợp có simvastatin

- Vytorin (ezetimible/ simvastatin) của Merck / Schering- Plough với dạng phân liều (mg/mg) là 10/10, 10/20, 10/40, 10/80 Liều trung bình có hiệu quả bằng liều lớn nhất của Lipitor (atorvastatin) [19], [20]

- Viên nén 200 mg fenofibrat dạng vi nang + 20 mg simvastatin: làm giảm 35,5% cholesterol toàn phần, 42,1% LDL - cholesterol, 59,6% triglycerid, an toàn và hiệu quả với bệnh nhân tăng lipid máu hỗn hợp [18]

- Dạng giải phóng kéo dài niacin/ simvastatin đang trong giai đoạn thử nghiệm Sự kết hợp này cho mức LDL - cholesterol thấp và làm giảm những bất lợi trên tim [4],

1.1.11 Một sô nghiên cứu về simvastatin

Dạng bào chế của SIM chưa nhiều, viên nén vẫn chiếm ưu thế

Ambike và cộng sự đã nghiên cứu chế tạo hệ phân tán rắn của SIM bằng kỹ thuật phun sấy rồi đánh giá khả năng giải phóng in vitro và in vivo Kết quả cho thấy, có thể đạt được độ ổn định dạng vô định hình của một chất có nhiệt độ chuyển trạng thái (T„) thấp như SIM bằng hệ phân tán rắn 1: 2: 2 (theo khối lượng) của SIM, Aerosil 200 và PVP Hệ phân tán rắn này không những cải thiện được tốc độ giải phóng mà còn có hiệu lực cao hơn cả SIM đơn độc [6]

Bok Ki Kang và cộng sự cũng đã nghiên cứu chế tạo được hệ phân tán vi nhũ tương của SIM rồi đưa vào nang cứng, thấy khả năng giải phóng in vitro cao hơn viên nén So sánh sinh khả dụng in vivo ở chó, khả năng hấp thu SIM từ hệ nàv gấp 1,5 lần viên Zocor (một biệt dược của SIM) [13]

Marko Vuletic và cộng sự đã phát hiện được 3 tạp trong nguyên liệu SIM và trong viên nén ở mức 0,2% Cấu trúc của các tạp liên quan đến sự biến đổi của vòng lacton Tạp phát hiện được trong viên nén là ethỵl ester Hai tạp kia phát hiện ở nguyên liệu SIM có cấu trúc methyl ester và methyl ether [35]

1.2 M ỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐÊN ĐỘ ổ N ĐỊNH CỦA D ư ợ cCHẤT TRO NG VIÊN NÉN

Viên nén (dạng thuốc rắn) là giải pháp kỹ thuật để nâng cao tuổi thọ cho các dược chất ít bền về mặt hoá học như SIM [2]

Dược chất đưa vào dạng bào chế có thể bị phân huv ngav trong quá trình sản xuất và trong quá trình bảo quản chế phẩm do bị: Phân huv hoá học bao gồm các phản ứng; dung môi phân, oxv hoá, quang phân, hydrat hoá, dehvdrat hoá, racemic hoá, decarboxylic hoá, các tương kỵ (giữa hai hay nhiều dược chất trong cùng một dạng bào chế, giữa thành phần có hoạt tính với tá dược) phân huv vật Iv bao gồm:

sự chuvển đổi giữa dạng kết tinh và dạng vô định hình, hiện tượng đa hình, sự bay hơi, sự già hoá, sự hấp phụ, sự tách pha (nhũ tương), sự đóng bánh (hỗn dịch) ; phân huv sinh học do vi khuẩn, nấm mốc [7]

1.2.1 Dung môi phân

Đây là loại phản ứng mà dược chất bị phân huv khi có mặt dung môi Dung môi thường là nước song cũng có thể là các dung môi khác như ethanol hay polyethylen glycol Những dung môi này tác động như những tác nhân ái nhân, tấn công vào các truns tâm ái điện tử của phân tử dược chất Khi dung môi là nước, phản ứng được gọi là phản ứng thuỷ phân

Gần 15% các dược chất đều bị thuỷ phân Các nhóm chức dễ bị thuỷ phân:

este, amid, lacton, lactam, oxim, imid, imin, malonic urea [7], [11]

* Với trạng thái rắn, phản ứng thuỷ phân xảy ra ở pha lỏng, trong lớp dung môi baoquanh tiểu phân chất rắn Nguồn dung môi có thể là:

- Bản thân dược chất bị chảy ra hoặc một thành phần nào đó trong công thức có điểm chảv thấp

- Hơi ẩm hoặc dung môi trong quá trình tạo hạt ướt

- Hơi ẩm hấp thụ ở một số tá dược như tinh bột biến tính, lactose, Avicel

- Hấp thụ hơi ẩm từ không khí vào thuốc

- Hiện tượng solvat hoá hay hydrat hoá theo thời gian và sự thay đổi của nhiệt độ

* Có 2 loại nước tồn tại trong hệ:

- Nước liên kết: là một phần không thể thiếu của phân tử, không có hoạt tính hoáhọc

- Nước không liên kết (hơi ẩm): liên kết lỏng lẻo với khối tiểu phân bột, có hoạt tính hóa học, tác động theo 2 cách: trực tiếp với dược chất hoặc gián tiếp qua tạo lớp hấp thụ để phản ứng xảy ra ở dạng hoà tan

Ngoài hơi ẩm ra phải kể đến các yếu tố pH, nhiệt độ, xúc tá c Ảnh hưởng của

pH dựa trên ảnh hưởng của ion hydroxyl và hydronium Phản ứng có thể được xúc tác bởi acid, base (thường là cả hai), ion kim loại (thường là các cation hoá trị hai), xúc tác ái nhân (đưa nhóm carbonyl vào tạo thành dạng trung gian dễ bị thuỷ phân) Nhiệt độ thav đổi dẫn đến sự thay đổi của hằng số tốc độ phản ứng Tốc độ phản ứng tăng 2 - 4 lần khi nhiệt độ tăng 10°c [14] Vì vậy, cần khống chế nhiệt độ trong quá trình sấv hạt cũng như trong quá trình bảo quản chế phẩm sau này

* Để hạn chế thuv phân, trong thiết kế công thức cần chú V [7], [11]:

Lựa chọn tá dược, kích thước tiểu phân, dạng thù hình của dược chất (chọn dạng

có điểm chảy cao bền vững hơn)

Dùng chất tạo phức, thêm chất diện hoạt, kiểm soát nhiệt độ, pH, lựa chọn đệm thích hợp để tạo vi môi trường

Đồ bao gói: dùng chất hút ẩm, chú ý đặc tính của vật liệu bao gói

* Về phương pháp, quy trình bào chế [7], [11]:

Phương pháp dập thẳng và tạo hạt khô có ưu điểm hơn phương pháp tạo hạt ướt

là tránh được tác động của ẩm và nhiệt đối với viên, do đó có thể được dùng cho các viên chứa dược chất không bền với ẩm và nhiệt

Cần hạn chế các tác động cơ học như xav, nghiền, lực dập viên để hạn chế chuyển dược chất sang dạng vô định hình dễ bị thuv phân

Có thể giảm tương tác của dược chất với tá dược bằng việc tăng kích thước tiểu phân dược chất và tá dược, tạo hạt riêng

1.2.2 Sự phân huỷ oxy hoá

Đây là kiểu phân huỷ dược chất thường gặp Phản ứng oxy hoá thường nhạy hơn phản ứng thuỷ phân [7] Các nhóm chức dễ bị oxy hoá là: phenol, catechol, ether, thiol, thioether, acid carboxylic, nitrit, aldehyd [7], [37]

1.2.2.1 Sự oxy hoá của dược chất rắn

Phần lớn các dược chất đều là các chất hữu cơ Khó có thể xác định sự oxv hoá dược chất xảy ra trong cả khối tinh thể, ở vị trí khiếm khuvết hay trên bề mặt - nơi

có năng lượng mạng tinh thể thấp hơn và dễ tiếp xúc với tác nhân oxy hoá hơn Oxv không khí có thể phản ứng với các tinh thể hữu cơ phụ thuộc vào dạng tinh thể vì có

liên quan đến sự thấm và khuếch tán của oxv trong mạng tinh thể Một số trường hợp, phản ứng giảm khi điểm chảy tăng cho thấv năng lượng mạng tinh thể cao ức chế sự khuếch tán của oxv Hiện tượng desolvat hoá cũng có thể xúc tiến sự oxy hoá

do tạo thành khe hổng trong mạng tinh thể, giúp oxv thấm qua [37]

1.2.2.2 Sự oxy hoá của dạng thuốc rắn

Có nhiều trường hợp dược chất tinh khiết khá ổn định nhưng khi đưa vào dạng bào chế lại bị oxy hoá đáng kể do [37]:

Trong quá trình tạo thành dạng bào chế rắn, có thể tạo ra dạng vô định hình là dạng có độ linh động cao hơn và thiếu sự ổn định của năng lượng mạng tinh thể, làm cho lượng oxv khuếch tán và hoà tan cao hơn

- Các tá dược solvat hoá trực tiếp dược chất hoặc mang hơi ẩm vào dạng bào chế Mặt khác, sự solvat hoá do tá dược có thể dẫn đến sự loại proton làm dược chất linh động hơn

Tá dược là một nguồn tạo ra chất oxy hoá và các ion kim loại nặng Tá dược có thể sinh ra các gốc chứa oxv linh động như gốc peroxyd, Superoxyd và gốc hydroxyl Điều này phụ thuộc vào liên kết với hydro và những nhóm cho electron (như nhóm amin) trong phân tử tá dược

1.2.2.3 Các yếu tô ảnh hưởng và biện pháp khắc phục

a) Các tạp chất

Tạp ảnh hưởng đến sự oxy hoá thường là ion kim loại nặng, peroxvd

lon kim loại nặng hầu như có ở khắp mọi nơi trong dạng bào chế và có thể ảnh

hưởng đến tốc độ phản ứng ngay ở mức rất thấp Điển hình là ion sắt và đồng Có thể làm giảm tạp ion kim loại bằng cách [37]:

Thêm chất tạo phức (còn gọi là các chất hiệp đồng chống oxy hoá [27]) như acid citric, EDTA, acid fumaric và acid malic Dù khó dự đoán hiệu quả của chất tạo phức khi sử dụng cho dạng rắn, song vẫn nên cho vào và dùng ở dạng dung dịch trong giai đoạn tạo hạt ẩm

Giảm hoặc loại bỏ những liên quan đến kim loại trong quá trình bào chế đặc biệt là các kim loại hàn và thép không gỉ

sử dụng các tá dược ghi rõ tạp kim loại, một số trường hợp phải dùng tá dược

có độ tinh khiết cao

Kiểm tra lượng ion kim loại ở các tá dược nghi ngờ với các hãng khác nhau

Tạp peroxid thường đi kèm với các tá dược polyme do sự phân huỷ của polyme

hoặc được tạo ra trong quá trình sản xuất (giai đoạn khởi đầu cần peroxyd song đến khi tinh chế lại không loại bỏ hết được) Khi peroxvd được cho là có vấn đề thì nên tính đến các giải pháp sau [37]:

Thay đổi tá dược: trong một số trường hợp, sự khác nhau về trọng lượng phân

tử ảnh hưởng đến lượng peroxyd có trong tá dược polvme

Các tá dược nghi ngờ chỉ nên dùng ở mức thấp

Lựa chọn tá dược của các hãng có lượng peroxyd thấp

Sử dụng chất chống oxy hoá để làm giảm lượng peroxyd tạo ra Biện pháp này kém hiệu quả trong việc loại bỏ peroxyd đã có sẵn ở dạng bào chế

b) pH và đệm

pH môi trường có vai trò đáng kể trong sự ổn định oxy hoá Cần nghiên cứu để xác định pH tối ưu cho độ ổn định của dược chất, lựa chọn hệ đệm thích hợp, dùng chất điều chỉnh pH Khi đệm là các acid, muốn hiệu quả hơn thì nó phải ở cùng pha với dược chất Nên thêm acid dưới dạng dung dịch như một phần của quá trình tạo hạt ẩm hoặc dịch bao tiểu phân Mặt khác, acid thêm vào trong dạng rắn phải không bav hơi để vẫn còn lại trong hệ sau quá trình bào chế và bảo quản Phải lưu V, các acid mạnh có thể đưa proton vào thuốc Ngoài ra, cần tính đến vếu tố độ tan của acid Với dược chất thân nước, có sự cân bằng giữa độ tan trong nước của acid và khuynh hướng tan trong pha của dược chất Ngược lại, với các dược chất thân dầu hơn thì cần ít acid tan trong nước hơn [37]

hydro nên có thể tác động vào giai đoạn nhân lên của phản ứng Tuv nhiên, quan trọng nhất vẫn là vai trò tạo ra các gốc ổn định làm cho phản ứng không nhân lên được.

Do phá vỡ phản ứng dâv chuvền nên các chất nàv rất hiệu quả, tác dụns ở nồng

độ rất thấp, ớ dạng bào chế rắn, các chất chống oxy hoá loại nàv có tác dụng tốt nhất khi tiếp xúc trực tiếp với dược chất hoặc các tá dược hoạt hoá Vì phản ứng dâv chuyền ở dạng rắn thường ngắn hơn dạng lỏng (dạng linh động hơn) nên nồng độ của các chất chống oxv hoá ỏ dạng nàv cao hơn Ngoài ra, bằng cách cho nguvên tử hydro, các chất này còn có tác dụng kết thúc sự vận chuyển electron của một số chất

oxv hoá như Superoxyd [37],

Cấc chất khử tha\ th ế {còn gọi là các tác nhân làm giảm oxv hoá [27]):

Đâv là các chất dễ bị oxy hoá hơn dược chất, có vai trò thu dọn oxv hiệu quả Loại này bao gồm các Sulfit và acid ascorbic, ở dạng bào chế rắn, các chất nàv có thể vẫn hiệu quả mà không cần tiếp xúc trực tiếp với dược chất khi lượng oxy trong môi trường thấp Tuy nhiên, với đồ bao gói có khả năng thấm khí thì các chất này bị oxy hoá hết nhanh chóng Do đó, cần phải chú ý đến khả năng nàv trong phương pháp đánh giá cấp tốc để tránh những dự đoán sai về tuổi thọ của thuốc [37],

Hiệu quả của các chất chống oxy hoá tuỳ thuộc vào từng hệ và có tác động hiệp đồng khi phối hợp các chất nhất định Ví dụ, phối hợp ascorbvl palmitat và tocopherol cho tác dụng mạnh hơn nhiều khi dùng riêng từng chất [37]

thuật hàn nhiệt với một lá kim loại ờ nắp để đảm bảo vừa chặt, vừa kín Có thể hạn

chế tác động của oxv ở khoảng không bằng cách đóng trong khí nitơ hoặc argon song quá trình này khá khó khăn với dạng bào chế rắn [37]

1.3 M ỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN KHẢ NÃNG GIẢI PHÓNG CỦA DƯỢC CHẤT TỪ VIÊN NÉN

1.3.1 Các yếu tố thuộc về công thức

Ngoài ra, còn phải kể đến các vếu tố: trạng thái kết tinh hay vô định hình, hiện tượng đa hình, solvat hoá Dạng kết tinh có cấu trúc mạng lưới tinh thể tưcfng đối bền vững nên khó hoà tan hơn dạng vô định hình Các dạng kết tinh khác nhau có tính chất vật lí khác nhau Dạng không bền dễ tan hơn dạng bền Dạng khan hoà tan trong nước nhanh hơn dạng ngậm nước [7],

1.3.1.2 Các tá dược

Tá dược độn: Khi chiếm tỉ lệ lớn trong viên (gấp khoảng 5 lần dược chất), tá

dược độn quvết định tính chất cơ lý đồng thời ảnh hưởng đến cơ chế giải phóng dược chất của viên Nhóm tan trong nước (nhóm bột đường) giải phóng dược chất theo cơ chế mài mòn, có xu hướng kéo dài thời gian rã của viên Nhóm không tan trong nước (các bột mịn vô cơ) khi dập viên sẽ tạo thành cốt trơ giải phóng dược chất theo cơ chế khuếch tán làm chậm quá trình giải phóng Nhóm tinh bột và cellulose vi tinh thể giải phóng dược chất khá nhanh theo cơ chế trương nở và vi mao quản Đây là nhóm tá dược độn thân nước có khả năng cải thiện tính sơ nước của dược chất ít tan [1], [2]

Tá dược rã\ Rã và hoà tan là hai quá trình liên quan chặt chẽ với nhau, đặc biệt

với dược chất ít tan Rã là bước giải phóng, tiền đề cho bước hoà tan tiếp theo của dược chất Tốc độ hoà tan của dược chất phụ thuộc vào mức độ rã của viên, nhưng không phải cứ viên rã nhanh thì tốc độ hoà tan cũng nhanh Chỉ có thể khẳng định viên càng rã mịn, tốc độ hoà tan càng nhanh Ngoài bản chất của dược chất, việc rã của viên phụ thuộc vào loại, lượng và cách phối hợp tá dược rã Một số tinh bột và tinh bột biến tính thường được chọn làm tá dược rã cho dược chất sơ nước do có khả năng cải thiện rõ rệt tính thấm của dược chất, làm tăng tốc độ hoà tan [1], [2],

Tá dược dính: Phần lớn các tá dược dính là các keo thân nước có tác dụng làm

tăng liên kết tiểu phân, tạo độ bền cơ học cho viên nên có xu hướng kéo dài thời gian rã của viên, đặc biệt là các tá dược có khả năng dính mạnh như gôm, gelatin, methyl cellulose Cần tính toán, nghiên cứu để xác định đúng và vừa đủ tá dược dính cần dùng chứ không nên lạm dụng Hồ tinh bột, dịch thể PVP ít ảnh hưởng đến khả năng rã, giải phóng dược chất của viên nhất Các tá dược dính lỏng này có vai trò đáng kể đối với sự hoà tan của các dược chất sơ nước do tạo thành một màng thân nước bao quanh tiểu phân dược chất [1], [2]

Tá dược trơn: Các tá dược trơn sơ nước (acid stearic và muối, talc, Aerosil )

tạo thành một màng bao ngoài tiểu phân, làm giảm sự thấm nước Do đó, làm giảm tốc độ rã, tốc độ hoà tan dược chất trong viên theo các mức khác nhau tuv thuộc bản chất, chất lượng và số lượng của chúng Loại tá dược trơn dễ tan trong nước (natri laurylsulfat, một số polyethylenglycol ) có thể cải thiện tính thấm của viên và hạt, làm tăng tốc độ hoà tan Cần chọn đúng loại, xác định tỉ lệ tá dược trơn thích hợp cho mỗi công thức Đôi khi, trong cùng một viên nén, cần phải phối hợp nhiều loại

tá dược trơn [1], [2]

Tá dược bao: Tuỳ mục đích bao mà chọn tá dược bao thích hợp.

1.3.2 Các yếu tỏ thuộc về phương pháp, quy trình bào chê viên nén

Viên dập thẳng thường dễ rã và rã nhanh hơn so với viên được làm từ phương pháp tạo hạt

Phương pháp tạo hạt ảnh hưởng đến khả năng liên kết và độ rã của viên qua các thông số: kích thước hạt, độ trơn chảy của hạt [1],

Cần kiểm soát các thông số kỹ thuật trong quy trình bào chế viên nén ảnh hưởng đến khả năng giải phóng dược chất [1], [2], [7]:

Nghiền bột đơn: cần phân chia nguyên liệu đến mức độ quv định, đặc biệt với dược chất ít tan

- Trộn bột kép: áp dụng kỹ thuật trộn đồng lượng, chú ý thời gian trộn, loại máv nghiền trộn và lực trộn

- Tạo hạt: Cán ép để tạo hạt compact khắc phục nhược điểm cho hạt không đồng đều và hiệu suất tạo hạt thấp của phương pháp tạo hạt khô Trong phương pháp tạo hạt ướt, cần chú ý kiểm soát lượng tá dược dính, thiết bị và thời gian trộn khi tạo khối ẩm Có thể xát hạt qua râv hoặc bằng thiết bị tầng sôi Kiểu rây và cách xát ảnh hưởng đến hình dạng và mức độ liên kết của hạt Khi sấy phải kiểm soát nhiệt

độ và thời gian để hạt có độ ẩm thích hợp

Dập viên: Lực nén ảnh hưởng đến độ xốp, độ chắc và thời gian rã của viên Khi lực nén tăng, các tiểu phân được xếp sít nhau, lực liên kết tiểu phân tăng, bề mặt tiếp xúc liên tiểu phân giảm Trong lòng viên không còn hoặc còn rất ít các vi mao quản làm cho nước khó thấm vào Tốc độ hoà tan thường có xu hướng giảm khi tăng lực nén Tuy nhiên, lực nén tăng đến một mức nào đó cũng có thể làm vỡ tiểu phân thành tiểu phân nhỏ hơn, đường kính vi mao quản nhỏ hơn, không có bọt khí trong lỗ xốp mao quản Khi đó việc tăng lực nén lại làm tăng tốc độ hoà tan Lực nén cao hơn nữa thì tốc độ hoà tan lại giảm do các tiểu phân liên kết với nhau chặt chẽ, số vi mao quản giảm Nói chung, ảnh hưởng của lực nén đến tốc độ hoà tan của dược chất từ viên nén khá phức tạp

Công đoạn bao cũng ảnh hưởng đến tốc độ hoà tan nếu như bao không đồng đều, màng bao không toàn vẹn hoặc bị vón cục Bao đường kéo dài thời gian rã của viên nhưng không nhiều Bao film có nguvên liệu là các polvme thân nước sẽ

dễ thấm nước hơn Với bao tan ở ruột, việc giải phóng dược chất của vỏ bao thường không ổn định [1], [2],

PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ

2.1 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP T H ựC NGHIỆM

2.1.1 Nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu

Để thực hiện khoá luận, chúng tôi đã sử dụng các nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu sau:

2.1.1.1 Nguyên liệu

- Simvastatin (Trung Quốc) theo tiêu chuẩn ƯSP 24

- Các tá dược: Avicel PH 101, lactose monohydrat, polyvinyl pyrolidon (PVP)

K-30, magnesi stearat, natri starch glycolat (SSG), natri croscarmellose (NaC), butvl hydroxy toluen (BHT), acid citric monohydrat, acid ascorbic, a - tocoferol, ethanol tuyệt đối, nước cất đều đạt tiêu chuẩn dược dụng

- Các hoá chất phân tích: natri hydroxyd, natri dihydrophosphat, acid phosphoric, mangan dioxyd, natri lauryl sulfat (NLS) đều đạt tinh khiết phân tích

- Một số hoá chất và dung môi dùng cho HPLC;

+ Methanol, acid acetic băng: Prolabo (Pháp)

+ Acetonitril: Merck (Đức)

2.1.1.2 Phương tiện nghiên cứu

- Máy dập viên tâm sai Trung Quốc

- Máy đo lực gâv vỡ viên Erw eka TBH 200

- Hệ thống thử hoà tan Vankel- V arian

- Máy quang phổ UV-VIS HeAios y(Anh)

- Máv li tâm Hermle z 200 A

- Máv siêu âm Ultrasonic LC 60H

- Hệ thống sắc kv lỏng hiệu năng cao Spectra System (Thermo Finnigan- Mỹ)

- Tủ vi khí hậu Climacell (Đức)

- Máy đo pH Eutech Instruments pH510

- Cân phân tích Satorius, cân kỹ thuật, tủ sấy, tủ ấm

2.1.2 Phương pháp nghiên cứu

2.1.2.1 Phương pháp sơ bộ lựa chọn các tá dược có tác dụng ổn định simvastatin

Tạo các hỗn hợp (HH) bột kép có thành phần như ở bảng 1

Bảng 1 Thành phần của một sô hỗn hợp bột kép

Khối lượng (g) trong hỗn hợp bột tương ứng

Trộn bột SIM, lactose monohydrat, Avicel PH 101 thành hỗn hợp bột đồng nhất,

a - tocoferol, BHT được hoà tan trong ethanol tuvệt đối Acid ascorbic và acid citric monohydrat được hoà tan trong nước cất Tuv từng trường hợp mà thêm nước cất hoặc ethanol tuyệt đối để tạo thành ethanol 65° Sau đó thêm PVP tạo thành dung dịch tá dược dính

Phối hợp dung dịch tá dược dính vào hỗn hợp bột trên Rây qua rây 800 cho đều Hạt của các hỗn hcíp trên được cho vào túi polvethylen và bảo quản trong cùng điều kiện: ngày đầu cho vào tủ có nhiệt độ 70°c, 6 ngày sau để ngoài trời

Định lượng hàm lượng SIM trong các hỗn hợp bột bằng phương pháp HPLC ở thời điểm vừa trộn và thời điểm sau khi bảo quản như trên, để đánh giá tác động của các tá dược có tác dụng ổn định SIM [37]

2.1.2.2 Phương pháp bào ch ế viên nén simvastatin

Công thức ban đầu của viên nén simvastatin 20 mg (tính cho 100 viên):

Tá dược ổn định dược chất: nghiên cứu để lựa chọn

Tá dược siêu rã (một nửa rã trong, một nửa rã ngoài); nghiên cứu để lựa chọn Lactose monohydrat vừa đủ 18,5 g (để có khối lượng trung bình viên là 185 mg) Ethanol tuyệt đối, nước cất vừa đủ

Viên nén simvastatin được bào chế bằng phương pháp xát hạt ướt theo sơ đồ:

- LGVV: 5-7 kPHình 1: Sơ đồ các giai đoạn bào chê viên nén simvastatin 20 mg

2.1.23 Phương pháp đánh giá một số tiêu chuẩn chất lượng của viên nén

sỉmvastatin

a) Phương pháp thử độ hoà tan simvastatin từ viên nén

Tiến hành theo ƯSP 28 trên hệ thống thử độ hoà tan Vankel-Varian với các thông số [31]:

- Máy cánh khuấv, tốc độ khuấy: 50 + 2 vòng/phút

- Môi trường hoà tan; 900 ml dung dịch đệm phosphat 0,01M; pH 7,0

có thêm hoặc 0,25% hoặc 0,5% natri lauryl Sulfat (NLS)

Nhiệt độ môi trường hoà tan: 37 ± 0,5°c

Tại các thời điểm 5, 10, 20, 30, 40, 50 phút, rút 10 ml dịch hoà tan, bổ sung

10 ml môi trường hoà tan mới Lọc vào ống li tâm có sẵn 100 mg Mn02 (đã được rửa sạch bằng môi trường hoà tan và sấy khô trước), lắc đều Để 30 phút (thỉnh thoảng lắc) Li tâm với tốc độ 3000 vòng/phút, thời gian 20 phút Gạn lấv phần dịch trong Đo quang ở hai bước sóng 247 nm và 257 nm Tính hiệu số độ hấp thụ rồi so sánh với chuẩn

b) Phương pháp định lượng simvastatin trong mầu nghiên cứu

Tiến hành bằng phương pháp HPLC theo chuyên luận viên nén SIM với các điều kiện sắc ký và cách tiến hành như trong USP 28 Cụ thể [31]:

Cột C18 (4,6 mm X 25 cm), kích thước hạt nhồi 5 ịuim

Pha động: 35% đệm natri dihydro phosphat 0,025M; pH 4,5 và 65% acetonitril Tốc độ dòng: 1,5 ml/phút

- Nhiệt độ cột: 45°c.

Detector tử ngoại diode aưay được đặt ở bước sóng A, = 238 nm

Thể tích tiêm mẫu: 10 ịil

Dung môi pha mẫu: 20% đệm acetat 0,05M; pH4,0 và 80% acetonitril

Pha mẫu chuẩn: Cân chính xác khoảng 20 mg SIM nguvên liệu, cho vào bình định mức 25 ml Thêm khoảng 20 ml dung môi pha mẫu để hoà tan SIM Siêu âm 15 phút rồi để nguội đến nhiệt độ phòng Thêm dung môi pha mẫu tới vạch Lắc đều Lấy chính xác 1 ml dung dịch này, pha vào bình định mức 10 ml bằng chính dung môi pha mẫu

Pha mẫu thử: Nghiền hạt của các hỗn hợp (làm theo mục 2.1.2.1) hoặc khoảng

10 viên nén SIM nghiên cứu Cân chính xác một lượng bột tương ứng với khối lượng trung bình viên, cho vào bình định mức 25 ml Thêm khoảng 20 ml dung môi pha mẫu, lắc đều Siêu âm 15 phút rồi để nguội đến nhiệt độ phòng Thêm dung môi pha mẫu tới vạch, lắc đều Đem li tâm với tốc độ 3000 vòng/phút, thời gian 20 phút Lấy chính xác 1 ml phần dịch trong, pha vào bình định mức 10 ml bằng chính dung môi pha mẫu

Phần trăm SIM có trong mẫu thử được tính theo công thức:

'"■ b v ie n ig ọ

Trong đó; Sc : diện tích pic của mẫu chuẩn

Q : nồng độ của mẫu chuẩn (mg/ml)

lĩitbvièn : khối lượng trung bình viên (mg)

rricân thử • khối lượng bột đã cân của mẫu thử (mg) lĩis : hàm lượng SIM có trong viên theo Iv thuyết (mg)

- Với các điều kiện HPLC đã nêu, SIM được tách gọn ra khỏi các thành phần khác