ĐẶT VẤN ĐỀProbiotic được biết đến là các lợi khuẩn có nhiều giá trị thiết thực đối với sức khỏe con người như: chống nhiễm trùng đường tiêu hóa, cải thiện khả năng dung nạp lactose, tăng cường miễn dịch, giảm cholesterol… 23. Probiotic đã được sửdụng từ rất lâu trước đây, trong vài thập kỷ trở lại đây, số lượng nghiên cứu vềprobiotic cũng như số chế phẩm probiotic có mặt trên thị trường xuất hiện ngày càng nhiều 22.Trong số các probiotic được sử dụng, không thể không kể đến Lactobacillus sporogenes, đây là một chủng vi khuẩn có rất nhiều đặc tính nổi trội: có khả năng sinh bào tử giúp chống chịu tốt với các điều kiện bất lợi của môi trường, làm tăng tỉlệ sống sót và tăng hiệu quả điều trị; có khả năng lên men đồng hình tạo acid L (+) lactic mà cơ thể có thể chuyển hóa hoàn toàn được… 6.Tại Việt Nam, vi khuẩn Lactobacillus sporogenes đã bắt đầu được nghiên cứu trong những năm gần đây, tuy nhiên, số lượng nghiên cứu chưa nhiều và tập trung chủ yếu vào nhóm ngành thực phẩm và thú y. Với mong muốn góp phần nhỏ vào nghiên cứu L. sporogenes ở Việt Nam, đề tài “Bƣớc đầu khảo sát điều kiện nuôi cấy Lactobacillus sporogenes” được thực hiện với các mục tiêu:1. Phân lập vi khuẩn Lactobacillus sporogenes từ chế phẩm Estromineral và nhận biết một số đặc điểm của vi khuẩn trong quá trình nuôi cấy. 2. Khảo sát sơ bộ ảnh hưởng của các điều kiện nuôi cấy đến lượng sinh khối tế bào thu được của Lactobacillus sporogenes.
B ộ YTÉ T R Ư Ờ N G ĐẠI H Ọ C DƯ Ợ C HÀ N Ộ I • • • • LÊ THU GIANG NGHIÊN CỨU BÀO CHÉ VIÊN NÉN VITAMIN TÁC DỤNG KÉO DÀI BẰNG PHƯƠNG PHẲp d ậ p t h ẳ n g VỚI TÁ DƯỢC HPMC c K H Ó A LUẬN T Ó T N G H IỆ P D ợ c s ĩ Người hướng dân: TS Nguyễn Thanh Hải DS Phan Văn Ngọc Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp Du’Ọ 'c HÀ N Ộ I - 2010 L Ờ Ĩ CẢ M ƠN Trước hết, em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến: TS Nguyễn Thanh Hải - Bộ môn Công nghiệp Dưọ’c - Trường Đại học Dược Hà nội, người thầy trục tiếp hướng dẫn, dìu dắt, bảo cho em ý kiến quý báu trình thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình thầy cơ, anh chị kỹ thuật viên mơn Cơng nghiệp Dược q trình em làm thực nghiệm mơn Để có kết xác, kịp thời phạm vi khóa luận này, em xin chân thành cảm ơn phối hợp giúp đỡ của: Bộ mơn Bào chế, Bộ mơn Hóa phân tích, Phịng Thí nghiệm trung tâm - Trường Đại học Dưọ’ Hà Nội Em xin gửi lời cảm ơn tới Công ty c ổ phần dược phẩm c Quảng Bình tạo điều kiện cung cấp nguyên liệu sử dụng nghiên cứu khóa luận Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè người thân, người động viên giúp đỡ em suốt thời gian qua Hà Nội, ngày 15 tháng 05 năm 2010 Sinh viên Lê Thu Giang M Ụ C LỤC ĐẶT VẤN Đ È PHẦN I: TỎNG Q UAN I Thuốc tác dụng kéo dài dùng qua đưịng tiêu h ó a 1.1 Khái niệm ưu nhược điểm thuổc tác dụng kẻo dài 1.2 Cơ chế giải phóng dược chất từ thuốc tác dụng kéo dài 1.3 Cốt thân nước II So’ lu'Ọ vitaiĩiin c 11 ’c 2.1 Nguồn gốc cổng thức 11 2.2 Tỉnh chát 12 2.3 Tác dụng vitamin c 13 2.4 Phương pháp định lượng .14 2.5 Các dạng bào chế thường gặp 15 PHẦN II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIỀN c ú (NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU) 16 2.1 Nguyên vật liệu phương pháp thực 16 2.1.1 Nguyên liệu 16 2.1.2 Mảy móc thiết b ị .16 2.2 Nội dung nghiên u 17 2.3 Phương pháp nghiên cứu 17 2.3.1 Phương pháp bào chế mẫu viên 17 2.3.2 Các phương pháp phân tích 18 PHẦN III: THựC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .22 3.1 Xác định độ nhạy phương pháp định lưọ'ng vitamin c 22 3.2 Bào chế mẫu v iên 23 3.3 Đánh giá yếu tố ảnh hưỏng đếnkhả giảiphóng dược chất từ mẫu viên 24 33.1 Ảnh hưởng yếu tố thuộc công thức viên 24 3.3.1.1 Khả kiểm sốt giải phóng vitamin c HPMC K 24 3.3.1.2 Khả kiểm sốt giải phóng vitamin c HPMC lOOK 25 3.3.1.3 Khả kiểm sốt giải phóng vitamin c HPMC lOOK kết hợp với íiPMC 4K 27 3.3.1.4 Hàm lượng vitamin c viên khả kiểm sốt giải phóng HPM C .29 3.2.2 Anh hưởng yếu tổ lực dập tới khả giải viên nén 31 3.4 Lựa chọn công thức đánh giá số tiêuchuẩn củaviên 33 3.4.1 Độ cứng viên 33 3.4.2 Độ đồng khối lượng 34 3.4.3 Hàm lượng vitamin c ĩ 3.4.4 Độ mài mòn viên .35 3.4.5 Thử độ hòa tan viền 55 3.5 Bàn luận; 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 Kết luận 38 Kiến ngliị .39 DANH M ỤC CÁ C C H Ữ V IÉ T TẮ T DĐVNIV: TDKD: Dược điển Việt Nam IV Tác dụng kéo dài GPDC: Giải phóng dược chất KTPT: Kích thước phân tử KTTP DC: Kích thước tiểu phân dược chất HPMC 4K: Hydroxypropyl Methyl cellulose 4.000 cps HPMC lOOK: Hydroxypropyl Methyl cellulose 100.000 cps NaCMC: Natricarboxy Methyl cellulose EC: Ethyl cellulose VitC: Vitamin c ddA: dung dịch iod 0,1N pha loãng 100 lần ddB: dung dich natrithiosulfat 0, IN chuẳn pha loãng 100 lần DANH M ỤC BẢNG BIẺU , H ÌN H VẼ BẢNG BIỂU Bảng 1: Nguyên phụ liệu sử dụng .16 Bảng 2: Kết định lượng mẫu vitamin c có nồng độ thấp (0,15 mg/lOml) 22 Bảng 3: Công thức thành phần mẫu viên thực nghiệm 23 Bảng 4; Lượng vitamin c hịa tan theo thời gian từ cơng thức 13, 1, 14.24 Bảng 5: Lượng vitamin c hòa tan theo thời gian từ công thức 15, 7, 16.26 Bảng 6: Lượng vitamin c hòa tan theo thời gian từ công tiiức 2; 3; 4; 5; 28 Bảng 7: Lượng vitamin c hòa tan theo thòi gian tìr cơng thức 8; 9; 4; ] 0; 11; 12 30 Bảng 8: Lượng vitamin c hòa tan từ công thức A; B; c D 32 Bảng 9: Lực gây vỡ viên mẫu 12 33 Bảng 10: Khối lượng 10 viên 34 Bảng 11: Lượng vitamin c hòa tan theo thời gian từ viên mẫu lựa chọn .35 HÌNH VẼ Hình 1: Sơ đồ bào chế viên nén vitamin c tác dụng kéo dài 18 Hình 2: Dược chất giải phóng theo thời gian từ công thức 13; l v l 25 Hình 3: Dược chất giải phóng theo ửiời gian tìr cơng thức 15; 16 26 Hình 4: Dược chất giải phóng theo thời gian từ công thức 2; 3; 4; 5; 28 Hình 5: Dược chất giải phóng ứieo thịi gian từ công thức 8; 9; 4; 10; 11; 12 .30 Hình 6: Dược chất giải phóng theo thời gian từ công thức A; B; c D .32 Hình 7: Dược chất giải phóng từ cơng thức viên lựa chọn 36 ĐẶT VẤN ĐÈ Acid ascorbic (vitamin C) chất có nhiều trái chất cần thiết cho sống sinh vật lĩnh VỊĨC hóa sinh, chất chống oxy hóa, tliain gia vào trìnli tổng hợp enzym, tăng sức đề kliáng, phục hồi sức kliỏe, đặc biệt ngăn ngìra bệnli scorbut Iigirời Acid ascorbic dùng làm chất bảo quản tlụrc phẩm làm hương vị cho số loại nước uống Với nliiềii vai trò quan trọng với có mặt vitamin c từ trái nước uống, từ viên thuốc kẹo ngậm, nói vitamin c thuốc sử dimg phổ biến thực tế Cimg cấp đặn vitamin c cho thể có ý nghĩa lớn để góp phần trì nâng cao sức Idiỏe cho ngirời Là vitamin dễ tan nước, có thời gian bán thải nhanh, sử dimg vitamin c điều trị, người bệnh phải dùng thuốc nhiều lần ngày, gây khó khăn việc sử dụng thuốc, giảm hiệu điều trị Vì việc nghiên cứu phát triển dạng thuốc viên tác dụng kéo dài vitamin c có ý nghĩa lớn thực tế Từ thực tế chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài; ‘‘Nghiên cứu bào chế viên nén vitamin c tác dụng kéo dài phương pháp dập thẳng vói tá dược HPM C” với mục tiêu sau: ỉ Nghiên cứu bào chế viên vitamin c tác dụng kéo dài với tá dược HPMC 4K HPMC lOOK Khảo sát yểu tổ thành phần công thức bào chế ảnh hưởng đến giải phóng dược chất viên vitamin c từ viên Khảo sát yếu tổ kĩ thuật bào chế ảnh hưởng đến khả giải phóng dược chất PH ẦN I: TỎ N G QUAN I Thuốc tác dụng kéo dài dùng qua đường tiêu hóa 1.1 Khái niệm ưu nhược điểm thuốc tác dụng kéo dài [2] Khái niệm thuốc tác dụng kéo dài (TDKD) Thuốc TDKD chế phẩm có khả kéo dài q trình giải phóng hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm trì nồng độ dược chất máu vùng điều trị thời gian dài với mục đích kéo dài thời gian điều trị, giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh, giảm tác dụng không mong muốn, nâng cao hiệu điều trị thuốc Theo dược điển Mỹ, thuốc TDKD phải giảm nửa số lần dùng thuốc cho người bệnh ưu nhược điểm thuốc TDKD: Mục đích thuốc TDKD cải thiện nâng cao hiệu điều trị thuốc So với dạng thuốc quy ước, thuốc TDKD có số ưu nhược điểm sau; - Duy trì nồng độ dược chất máu vìmg điều trị, giảm dao động nồng độ thuốc máu (tránh tượng đỉnh - đáy), giảm tác dụng không mong muốn thuốc - Giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh, giảm phiền phức, tránh quên thuốc, bỏ thuốc, thức dậy đêm để uống thuốc Từ đảm bảo tuân thủ người bệnh theo chế độ liều định, góp phần nâng cao hiệu điều trị thuốc Đặc biệt người bệnh mạn tính, kinh niên phải điều trị dài ngày (Cao huyết áp, đái tháo đường ) - Nâng cao sinh khả dụng thuốc thuốc hấp thụ đặn, triệt để hơn.Trong nhiều tmờng hợp tập trung thuốc cao nơi cần điều trị, phát huy tối đa tác dụng thuốc - Giảm lượng thuốc dùng cho đợt điều trị, giá thành liều thuốc thường cao dạng quy ước giá thành hiệu trình lại giảm Hạn chế thuốc TDKD là: - Nếu có trượng ngộ độc, tác dụng kliơng mong muốn hay khơng chịu thuốc khơng thải trừ thuốc kliỏi thể - Thuốc TDKD dạng bào chế đòi hỏi kĩ thuật cao Khi uống q trình giải phóng dược chất đường tiêu hóa lại phụ thuộc vào nhiều yếu tố Do có sai sót ký thuật bào chế hay thay đổi sinh học cá thể người bệnh dẫn đến đáp ứng lâm sàng so với ý đồ thiết kế ban đầu - Chỉ có sổ dược chất chế dạng TDKD 1.2 • Co’ chế giải phóng dược chất từ thuốc tác dụng kéo dài Hệ tác dụng kéo dài giải phóng dược chất theo chế khuyếch tán + Hệ màng bao khuếch táu + Hệ cốt trơ khuếch tán • Hệ tác dụng kéo dài giải phóng theo chế hịa tan + Hệ màng bao hòa tan + Cốt thân nước cốt sơ nước ăn mịn • Hệ tác dụng kéo dài giải phóng dươc chất theo chế trao đổi ion • Hệ giải phóng dược chất theo chế áp suất thẩm thấu 1.3 Cốt thân nước Có nhiều phương pháp để kiểm sốt giải phóng dược chất từ dạng thuốc kéo dài hệ màng bao, hệ cốt trơ, hệ hỗn hợp Trong phạm vi đề tài, chúng tơi đề cập đến hệ cốt (matrix) hịa tan ăn mòn ■ Nguyên tắc cấu tạo Dược chất phân tán cốt Chất tạo cốt polyme hòa tan hay bị ăn mòn dung dịch tiêu hóa theo mơ hình sau ■ Cơ chế giải phóng dược chất - Dược chất giải phóng khỏi cốt nhờ trình diễn sau: + Cốt thấm nước hòa tan lớp dược chất bề mặt cốt + Polyme truơng nở tạo thành hàng rào gel kiểm sốt q trình giải phóng dược chất + Mơi trường hịa tan khuếch tán qua lớp gel thấm vào cốt hòa tan dược chất cốt + Quá trình khuếch tán dược chất từ dung dịch bão hịa bên cốt ngồi mơi trường hịa tan - Cơ chế giải phóng; Q trình giải phóng dược chất hệ khơng phụ thuộc vào hòa tan cốt mà phụ thuộc nhiều vào khuếch tán dược chất từ lớp gel.Sir khuếch tán dược chất biểu thị theo phương trình Noyes-Whitney: dC _ D dt h •A.(Cs- C) Trong đó: D; hệ số khuếch tán dược chất H: bề dầy khuếch tán A: tổng diện tích bề mặt tiếp xúc dược chất với môi trường hòa tan Csi nồng độ bão hòa dược chất C; nồng độ dược chất môi trường hòa tan 28 giữ nguyên với tỷ lệ 1:2 Kết thử độ hòa tan năm loại viên trình bày bảng hình Bảng 6: Lượng vitamin c hịa tan theo thời gian từ công thức 2; 3; 4; 5; Lượng vỉtamiii c giải phóng theo thời gian (%) Thời gian (giờ) CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 0 0 0 14,56 12,43 12,4 11,33 10,21 30,21 25,43 23,86 20,33 18,45 36,54 33,26 30,55 27,43 24,87 43,21 37,89 36,11 34,21 30,22 48,13 42,69 40,22 38,22 35,19 52,22 47,77 45,43 41,36 39,22 55,76 53,21 50,32 48,32 45,32 59,43 56,32 52,13 50,22 48,33 70 60 tư) c Õ 50 JC Q 40 *Ỉ5 30 u a tư) 20 c o 10 10 Thoi gian (glo) Hình 4: Đồ thị dược chất giải phóng theo thời gian từ công thức 2; 3; 4; 5; 29 Nhân xét: - Từ kết nghiên cứu trên, nhận thấy kết hợp HPMC lOOK HPMC 4K cốt có khả kiểm sốt tốt lượng dược chất giải phóng từ viên Sau thử nghiệm, lượng dược chất giải phóng từ cơng thức thử nghiệm cao khoảng 59,43 %, điều cho thấy cơng thức có khả kiểiĩi sốt giải phóng dược chất kéo dài - Khi tỷ lệ Vitamin c ; cốt HPMC giữ nguyên mức 1:2, sử dụng cốt có tỷ lệ polyme HPMC 4K: HPMC lOOK khác khả kiểm sốt giải phóng dược chất khác nhau, nhiên sụ khác công thức không nhiều Khi tỷ lệ HPMC 4K; HPMC lOOK cốt thay đổi theo thứ ụr 5:1; 2:1; 1:1; 1:2: 1:5 lượng vitamin c giải phóng sau giảm theo thứ tự 59,43%; 56,32%; 52,13%; 50,22%; 48,33% tương ứng 3.3.1.4 Hàm lượng vitamin c viên khả kiểm sốt giải phóng HPMC: Để đánh giá ảnh hưởng hàm lượng vitamin c công thức khả kiểm sốt giải phóng dược chất cốt HPMC, chọn công thức sử dimg tỷ lệ HPMC lOOK: HPMC 4K 1:1 để tiến hành nghiên cứu Tiến hành thử độ liịa tan cơng thức 8; 9; 4; 10; 11; 12 Đây công thức sử dimg cốt HPMC lOOKiHPMC 4K tỷ lệ 1:1, hàm lượng vitamin c viên khác nhau, lượng vitamin c viên 50; 100; 150; 200; 250; 300 mg Kết thử độ hòa tan sáu loại viên nảy đượe trình bày bảng hình 30 Bảng 7: LưọiigvitaminChịatanứieoứiờigiantừcáccơngthức8;9;4; 10; 11; 12 Lượng vitamin c giải phóng theo thời gian (%) Thời gian CT8 0 11,23 12,4 14,33 19,33 23,54 18,98 23,86 26,37 30,43 39,65 25,78 30,55 32,17 38,65 54,89 30,23 36,11 38,92 45,99 62,44 34,76 40,22 43,42 55,43 68,33 37,68 45,43 49,32 62,39 73,57 40,39 50,32 55,87 67,34 76,34 26,54 24,11 20,21 18,33 CT12 17,87 C T ll 15,65 CT 10 12,43 CT4 10,77 CT9 (giờ) 44,22 52,13 60,21 75,35 80,32 90 80 ‘CT8