Nghiên cứu bào chế cao đặc testin và ứng dụng vào bào chế viên nang cứng

Với mong muốn góp phần từng bước hiệnđại hóa dược học cổ truyền nói chung và bài thuốc Testin nói riêng, chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu điều chếcao đặc Testin vàứng dụng vào bà

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

1 Bộ môn Dược học cổ truyền

2 Bộ môn Công nghiệp Dược

HÀ NỘI – 2014

LỜI CẢM ƠN

Với lòng kính trọng và biếtơn sâu sắc, em xin chân thành cảmơn PGS.TS Vũ VănĐiền, người thầyđã trực tiếp tận tình hướng dẫnem trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành khóa luận này

Em xin bày tỏ lời cámơn chân thành tới TS Nguyễn Thị Thanh Duyên, côđã giúp đỡ vàđóng góp nhữngý kiến quý báu cho em trong phần bào chế viên nang cứng

Nhân dịp này em xin trân trọng gửi lời cảmơn tới:

Các thầy cô giáo, các chị kỹ thuật viên của bộ môn Dược cổ truyền và tổ Bào chế công nghiệp thuộc Bộ môn Công nghiệp Dượcđã tạođiều kiện giúp đỡ em trong suốt quá trình nghiên cứu và thực hiệnkhóaluận tốt nghiệp

Các thầy cô và bạn bè trong trườngĐại học Dược Hà Nội, đã trang bị cho em đầyđủ kiến thức và động viên giúp đỡ em trong suốt những năm học tập và nghiên cứu tại trường

Trong quá trình thực hiện khóaluận không thể tránh khỏi những thiếu sót, em rất mong có được sựcảm thông vàgópý quý báu của thầy cô và các bạn

Hà Nội, ngày 09 tháng 05 năm 2014

Đỗ Thùy Linh

MỤC LỤC

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 2

1 Bài thuốc Testin: 2

2 Tóm tắt đặc điểm các vị thuốc trong bài thuốc: 3

3 Vài nét về cao thuốc từ dược liệu: 10

4 Tóm tắt kỹ thuật bào chế viên nang cứng: 11

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15

1 Nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu: 16

2 Phương pháp nghiên cứu: 17

2.1 Bào chế cao đặc bài thuốc Testin: 17

2.1.1 Bào chế cao đặc: 17

2.1.2 Xử lý dịch chiết: 19

2.1.3 Tính hiệu suất bào chế: 19

2.1.4 Kiểm tra chất lượng cao đặc: 20

2.2 Bào chế viên nang cứng Testin: 22

2.2.1 Xây dựng công thức và phương pháp bào chế viên nang cứng Testin: 22

2.2.2 Đánh giá chất lượng của bán thành phẩm dạng hạt: 23

2.2.3 Đánh giá chất lượng của viên nang cứng Testin: 24

CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 26

1 Bào chế cao đặc Testin: 26

1.1 Xác định độ ẩm của dược liệu: 26

1.2 Bào chế cao đặc: 26

1.3 Kiểm tra chất lượng của cao đặc chiết theo phương pháp đun hồi lưu: 28

2 Bào chế viên nang cứng Testin: 29

2.1 Xây dựng công thức: 29

2.1.1 Khảo sát tạo hạt từ cao với từng tá dược độn đơn độc: 29

2.1.2 Khảo sát tạo hạt từ cao với hỗn hợp tá dược độn kết hợp: 33

2.2 Khảo sát phương pháp tạo hạt: 36

2.3 Đánh giá chất lượng của bán thành phẩm dạng hạt: 41

2.3.1 Khảo sát một số chỉ tiêu chất lượng hạt: 41

2.3.2 Đề xuất tiêu chuẩn chất lượng bán thành phẩm dạng hạt: 42

2.4 Đánh giá chất lượng của viên nang cứng Testin: 43

2.4.1 Khảo sát một số chỉ tiêu chất lượng của viên nang cứng Testin: 43

2.4.2 Đề xuất tiêu chuẩn chất lượng của viên nang cứng Testin: 46

3 Bàn luận: 46

4 Kết luận và đề xuất: 48

4.1 Kết luận: 48

4.2 Đề xuất: 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC 1: Ảnh các vị thuốc trong bài thuốc Testin

PHỤ LỤC 2: Thành phần và hướng dẫn sử dụng viên nang cứng Testin

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

DĐVN IV : Dược điển Việt Nam IV kl/tt : Khối lượng/thể tích TCCS : Tiêu chuẩn cơ sở

TCCL : Tiêu chuẩn chất lượng

PL : Phụ lục

SKLM : Sắc ký lớp mỏng

TB : Trung bình

DANH MỤC BẢNG

Bảng 10.Các thông số của hạt thu được khi phối hợp cao đặc với Avicel

PH 101

30

Bảng 11.Sự thay đổi độ ẩm theo thời gian sấy của hạtCT1, CT2 và CT3 30

Bảng 12 Các thông số của hạt thu được khi phối hợp cao đặc với tinh bột 31

Bảng 14 Các thông số của hạt thu được khi phối hợp cao đặc với hỗn hợp

tá dược A1

34

Bảng 16 Các thông số của hạt thu được khi phối hợp cao đặc với hỗn hợp

tá dược A2

35

Bảng 17 Sự thay đổi độ ẩm theo thời gian sấy của hạt CT10 và CT11 35

Bảng 18 Các thông số của hạt CT13, CT14 và CT15 theo phương pháp tạo

hạt 2

37

Bảng 19.Sự thay đổi độ ẩm theo thời gian sấy của hạt CT13, CT14 và CT15

theo phương pháp tạo hạt 2

CT18theo phương pháp tạo hạt 2.

Bảng 22.Sự thay đổi độ ẩm theo thời gian sấycủa bán thành phẩm dạng hạt 41

Bảng 23.Kết quả khảo sát các chỉ tiêu chất lượng của bán thành phẩm dạng

hạt

42

Bảng 26.Giá trị Rf của 3 vết tương đương trên sắc ký đồ của Ba kích (BK),

DANH MỤC HÌNH

Hình 2 Biểu đồ độ ẩmtheo thời gian sấy của hạt CT1, CT2 và CT3 (sấy

tĩnhở 60°C)

31

Hình 3.Biểu đồ độ ẩm theo thời gian sấy củahạt CT5 (sấy tĩnhở 60°C) 32

Hình 4.Biểu đồ độ ẩm theo thời gian sấy của hạt CT7 và CT8 (sấy tĩnhở

Hình 6.Biểu đồ độ ẩm theo thời gian sấy của hạt CT13, CT14 và CT15 theo

phương pháp tạo hạt 2 (sấy tĩnhở 60°C)

38

Hình 7.Biểu đồ độ ẩm theo thời gian sấy của hạt CT16, CT17 và CT18 theo

phương pháp tạo hạt 2 (sấy tĩnhở 60°C)

40

Hình 9 Biểu đồ độẩm theo thời gian sấy của 3 mẻ hạt (sấy tĩnhở 60°C) 42

ĐẶT VẤN ĐỀ

Suy giảm chức năng sinh dục nam mặc dù không ảnh hưởng đến tính mạng nhưng làm giảm chất lượng cuộc sống của người bệnh vàảnh hưởng tiêu cực đến sự phát triển xã hội Các rối loạn về sinh dục thường xuất hiện cùng với quá trình lão hóa, cũng như sử dụng thuốc trong các quá trình điều trị nội khoa khác (cao huyết

áp, loét dạ dày, tá tràng) Ngoài ra, tình trạngstress trong xã hội phát triển cũng góp phần làm gia tăng suy giảm chức năngsuy dục, sinh sản nam Hội chứng bệnh này trong Y học cổ truyền chủ yếu thuộc phạm vi chứng thận hư và cũngcó nhiều vị thuốc và bài thuốc đểđiều trị hội chứng bệnh này

Bài thuốc Testin là bài thuốc do PGS.TS Vũ Văn Điền xây dựng nên, với mục đích hỗ trợ điều trị suy giảm chức năng sinh dục nam Với mong muốn góp phần từng bước hiệnđại hóa dược học cổ truyền nói chung và bài thuốc Testin nói riêng,

chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu điều chếcao đặc Testin vàứng dụng vào

bào chế viên nang cứng”vớinhữngmục tiêu sau:

1 Xây dựng quy trình bào chế cao đặc từ bài thuốc Testin

2 Xây dựng quy trình bào chế viên nang cứng Testin trong quy mô phòng thí nghiệm

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

1 Bài thuốc Testin:

1.1 Công thức bài thuốc:

Bá bệnh 10g Bạch tật lê 12g

Xà sàng tử 12g Hoàng kỳ 14g Cốt khí củ 10g Câu kỉ tử 16g

(Hình ảnh của các vị trong bài thuốc Testin xem trong phần phụ lục)

1.2 Cơ sở thiết kế bài thuốc:

- Dựa vào lý luận Y học cổ truyền về các bệnh do thận hư gây ra, trong đó đi sâu vào các chứng liên quan đến suy giảm sinh sản, sinh dục nam

- Dựa vào tính năng của các vị thuốc để kê đơn cho phù hợp để điều trị bệnh suy giảm chức năng sinh sản nam

- Dựa vào tác dụng dược lý và thành phần hóa học của các vị thuốc đã được chứng minh có tác dụng điều trị suy giảm chức năng sinh dục, sinh sản

- Trong bài thuốc có 4 vị thuốc là Bá bệnh, Bạch tật lê, Xà sàng tử và Ba kích

đã chứng minh có tác dụng cải thiện sự suy giảm chức năng sinh sản, sinh dục nam, phối hợp thêm Hoàng kỳ, Đương quy và Câu kỉ tử để bổ khí huyết, bổ can thận, thêm Cốt khí củ làm tăng cường lưu thông máu và có tác dụng dược

lý hướng sinh dục Như vậy, khi kết hợpcácvị thuốc cải thiện chức năng sinh dục vớicácvị thuốc bồi bổ cơ thể và tăng cường lưu thông huyết thì tác dụng cải thiện suy giảm chức năng sinh sản, sinh dục hy vọngsẽ tốt hơn

Thận trọng với người tiêu chảy, không dùng cho phụ nữ và trẻ em dưới 16 tuổi[11]

2 Tóm tắt đặcđiểm các vị thuốc trong bài thuốc:

2.1 Ba kích:

Dược liệu là rễ của cây Ba kíchMorinda officinalis How., họ Cà phê

Rubiaceae

2.1.1 Tác dụng dược lý:

- Tác dụng liên quan đến suy giảm sinh dục nam:

 Thí nghiệm trên chuột cống trắng đực cho thấy ba kích không có tác dụng giống androgen, nhưng có khả năng tăng cường hiệu lực của androgen

 Điều trị thử nghiệm trên người cho thấy: đối với nam giới có hoạt động sinh dục yếu, ba kích có tác dụng làm tăng khả năng giao hợp, đặc biệt đối với các trường hợp khả năng giao hợp yếu và thưa Tuy không làm tăng đòi hỏi tình dục, nhưng ba kích có tác dụng tăng cường sức dẻo dai; không thấy có tác dụng giống androgen trên lâm sàng Ba kích không làm thay đổi tinh dịch đồ nhưng trên thực tế có tác dụng hỗ trợ và cải thiện hoạt động sinh dục cũng nhưđiều trị vô sinh cho những nam giới có trạng thái vô sinh tương đối nhẹ và suy nhược thể lực Còn các trường hợp tinh dịchít, tinh trùng chết nhiều, không có tinh trùng, không xuất tinh khi giao hợp, sử dụng ba kích chưa thấy kết quả

- Một số tác dụng khác:Tác dụng tăng lực, chống độc, chống viêm.Ngoài ra nước sắc ba kích còn có tác dụng hạ huyết áp, tăng sự co bóp của ruột[10], [14]

- Kiêng kỵ: ngườiâm hư hỏa vượng[2]

2.2 Bá bệnh:

Dược liệu là rễ, vỏ cây, gỗ thân của cây Bá bệnhEurycoma longifolia J., họ

Thanh thất Simaroubaceae Dược liệu này mới được sử dụng trong dân gian nên chưa có trong các tài liệu thuốc cổ truyền và dượcđiển

2.2.1 Tác dụng dược lý:

- Tác dụng liên quan đến suy giảm sinh dục nam: Bá bệnh có tác dụng tăng dục,

có mối tương quan giữa hoạt tính kích thích sinh dục nam và lượng nội tiết tố sinh dục nam trong huyết thanh Thân và rễ bá bệnh làm tăng lượng testosteron trong huyết thanh động vật, rễ làm tăng testosteron nhiều hơn thân

cây

- Một số tác dụng khác:

 Một chế phẩm thuốc gồm 3 dược liệu bá bệnh, trâm bầu và xấu hổ có tác dụng lợi mật rõ rệtmà không làm thay đổi thành phần của mật, chậm quá trình hư biến của gan do CCl4, tăng sự tái tạo của tế bào gan trong các thí nghiệm trên chuột

2.2.2 Công dụng:

- Vỏ dùng chữa các trường hợpăn uống không tiêu, nôn mửa đầy bụng tiêu chảy, còn dùng chữa sốt rét, giải độc do uống nhiều rượu vàđau mỏi lưng do thấp

- Quả dùng chữa lỵ, tại Campuchia người ta dùng rễ chữa ngộ độc và say rượu, trị giun

- Lá còn được dùng tắm ghẻ, lở ngứa[10], [14]

2.3 Bạch tật lê:

Dược liệu là quả chín phơi khô, sao, bỏ gai của cây Thích tật lêTribulus

terrestris L., họ Tật lê Zygophyllaceae

2.3.1 Tác dụng dược lý:

- Tác dụng liên quan đến suy giảm sinh dục nam:

 Thử nghiệm cho chuột nhắt trắng uống dịch chiết nước đông khô từ Bạch tật lê thấy có sựgia tăng các hành vi tình dục theo liều (50mg/kg và 100mg/kg), sử dụng trong thời gian dài làm tăng nồng độ testosteron trong huyết thanh song không có ảnh hưởng đến lượng tinh trùng[18]

 Thử nghiệm lâm sàng trên các bệnh nhân nam mắc chứng suy giảm số lượng tinh trùng, uống bột Bạch tật lêvới liều 6g/ngàytrong 60 ngày thấy cải thiệnđáng kể trong triệu chứng bệnh cũng như số lượng tinh trùng so với

giả dược[17]

- Một số tác dụng khác:

 Cao bạch tật lê còn biểu hiện tính giảmđau rõ rệt trong thử nghiệm với

phương pháp gây đau do nhiệt

 Có trong thành phần của chế phẩm Albana của Ấn Độ có tác dụng bảo vệ tim và hạ lipid máu, trong một số bài thuốc dân gian Ấn Độ điều trị sỏi

 Bổ thận: chữa thận dương hư, di tinh liệt dương, tinh tủy kém

 Sơ can giải uất: dùng trong các trường hợp can khí uất kết, dẫn đếnđau sườn

ngực, đau dây thần kinh liên sườn

 Bình can sáng mắt: dùng trong các trường hợp đau đầu, hoa mắt, chóng mặt

do can dương thượng cường[2]

 Thành phần polysaccharid trong câu kỷ tử có tác dụng bảo vệ chống lại tổn thương tinh hoàn gây ra bởi nhiệt, tổn thương ADN tế bào tinh hoàn gây ra bởi H2O2 trên chuột, cải thiện hành vi tình dục và chức năng sinh sảnở chuột bị cắt một bên tinh hoàn[15]

- Một số tác dụng khác:

 Tăng cường miễn dịch, hạ cholesterol huyết, bảo vệ gan, làm chậm sự lão suy

 Tác dụng đối với hệ thống máu: Người bình thường hay bệnh nhân ung thư

ăn quả khô câu kỷ tử 5g/ngày liên tục trong 10 ngày thì số lượng bạch cầu tăng lên rõ rệt[14]

 Bổ phếâm: dùng trị bệnh lao, bệnh ho khan

 Ích khí huyết: dùng cho người già khí hư, huyết kém, người âm hư, huyết

hư, háo khát, thiếu máu xanh xao

- Kiêng kỵ: người tỳ vị hư hàn, ỉa chảy không dùng[2]

2.5 Cốt khí củ:

Dược liệu là rễ của cây Cốt khí củPolygonum cuspidatum Sieb et Zucc., họ

Rau răm Polygonaceae

2.5.1 Tác dụng dược lý:

- Cốt khí củ có tác dụng hạ cholesterol, cầm máu, tác dụng chống viêm (đặc biệt viêm khớp), tác dụng làm giảm tính thấm thành mạch, tác dụng chốngoxy hóa,

chống lão hóa

- Tác dụng kháng khuẩn: ức chế trực khuẩn mủ xanh, trực khuẩn phó thương

 Có hoạt tính trên chức năng nội tiết sinh dục động vật cái, gây tác dụng kiểu

oestrogen và progesteron yếu

 Tác dụng chống viêm, chống thiếu máu, ức chế ngưng tập tiểu cầu, chống

 Hoạt tràng thông tiện dùng với chứnghuyết hư huyết táo gây táo bón

 Giải độc dùng trong các trường hợp mụn nhọt, đinh độc, vết loét lâu liền miệng

- Kiêng kỵ: người tỳ vị thấp nhiệt, đại tiện lỏng không nên dùng; để tránh hiện tượng gây hoạt tràng, đại tiện lỏng khi dùng cần qua sao chế để giảm tính nhuận hoạt của vị thuốc[2]

2.7 Hoàng kỳ:

Dược liệu là rễ phơi khô của cây Hoàng kỳAstragalus membranaceus

Fisch,họĐậu Fabaceae

2.7.1 Tác dụng dược lý:

- Tác dụng trên hệ sinh dục: Hoàng kỳ có tác dụngkéo dài kỳđộng tình của

chuột bạch, thông thường là 1 ngày kéo dài thành 10 ngày

- Một số tác dụng khác:

 Tác dụng kích thích phát triển cơ thể, chống viêm

 Tăng sự co bóp của tim, làm giãn mạch khiến máu tới ngoại vi nhiều hơn,

hạ huyết áp, mạch tim và mạch thận giãn nở nên cũng làm thông tiểu tiện

 Tác dụng bảo vệ gan, ngăn ngừa giảm hàm lượng glycogen gan và tăng hàm lượng protein, albumin toàn phần trong huyết thanh ở chuột nhắt gây tổn thương gan bằng CCl4[2], [10], [14]

2.7.2 Tác dụng Y học cổ truyền:

- Tính vị: vị ngọt, tínhấm

- Quy kinh: vào kinh phế, tỳ

- Công năng chủ trị:

 Bổ khí trung tiêu dùng đối với trạng thái cơ thể suy nhược, chân tay vô lực, chóng mặt, kémăn, các bệnh sa giáng tạng phủ, tử cung, lòi dom, lỵ tả lâu ngày, băng lậu của phụ nữ

 Ích huyết: dùng đối với bệnh huyết hư, thiếu máu, đặc biệt thiếu máu sau bệnh sốt rét; hoặc sau khi bị mất máu nhiều

 Cổ biểu, liễm hãn: dùng chữa các bệnh ra mồ hôi nhiều, mồ hôi trộm

 Lợi niệu tiêu phù thũng: dùng khi tỳ hư, vận hóa nước kém, tâm thận dương

hư, tay chân, mặt mắt phù thũng, đặc biệt phù bụng do báng bĩ

 Giải độc trừ mủ: dùng trong bệnh mụn nhọtở thời kỳ đầu, vết loét lâu liền miệng

 Trừ tiêu khát sinh tân: dùng trong bệnhđái tháo đường, người khô, háo khát

- Chúý: khi dùng với tính chất bổ, hoàng kỳ thường được trích với mật ong[2]

2.8 Xà sàng tử:

Dược liệu là quả phơi hay sấy khô của cây Xà sàngCnidium monnieri (L.)

Cuss., họ Hoa tán Apiaceae

2.8.1 Tác dụng dược lý:

- Tác dụng liên quan đến sinh dục nam: dịch chiết ethanol của xà sàng tử làm tăng trọng lượng tuyến tiền liệt, túi tinh và cơ nâng hậu môn ở chuột đực Dạng coumarin toàn phần có tác dụng đối kháng với biểu hiện của chứng

“dương hư” do hydrocortison acetat gây nên

- Một số tác dụng khác: tác dụng chống loạn nhịp, chống dị ứng, lợi đờm bình suyễn, kháng loãng xương[14]

 Sát khuẩn chỉ ngứa: ngứa ngoài da, ngứa do côn trùng (mạt, dĩn…) cắn hoặc phụ nữ ngứa do trùng roi âm đạo, hoặcâm nang rất ngứa[2]

3 Vài nét về cao thuốc từ dược liệu:

3.1 Định nghĩa:

Cao thuốc là chế phẩm được chế bằng cách cô hoặc sấy đến thể chất quy định các dịch chiết thu được từ dược liệu thực vật hay động vật với các dung môi thích hợp Các dược liệu trước khi chiết xuất được xử lý đạt tiêu chuẩn DĐVN IV và được phân chia đến kích thước thích hợp

Cao thuốc được chia làm 3 loại:

- Cao lỏng: Là chất lỏng hơi sánh, có mùi vị đặc trưng của dược liệu sử dụng Nếu

không có chỉ dẫn khác, thườngquy ước 1ml cao lỏng tương ứng với 1g dược liệu dùng để điều chế cao thuốc

- Cao đặc: Là khối đặc quánh Độẩm của cao không quá 20%

- Cao khô: Là khối hoặc bột khô, đồng nhất, rất dễ hút ẩm Cao khô có độ ẩm

không quá 5%[5], [8]

3.2 Phương pháp điều chế cao đặc:

Quá trình điều chế cao thuốc thường có 2 giai đoạn:

- Giai đoạn I: Chiết xuất

Chiết xuất dược liệu bằng các dung môi thích hợp Tùy theo bản chất của dược liệu, dung môi, tiêu chuẩn chất lượng của thành phẩm cũng như điều kiện, quy mô sản xuất và trang thiết bị, có thể sử dụng các phương pháp chiết xuất: Ngâm, hầm, hãm, sắc, ngâm nhỏ giọt, chiết xuất ngược dòng, chiết xuất bằng thiết bị siêu âm, chiết xuất bằng phương pháp sử dụng điện trường và các phương pháp khác

- Giai đoạn II: Cô cao

Cao đặc: Dịch chiết được cô đặc đến khi dung môi dùng để chiết xuất còn lại

không quá 20% được cao đặc Để đạt đến thể chất quy định, quá trình cô đặc và sấy khô dịch chiết thường được tiến hành trong các thiết bị cô dưới áp suất giảm ở nhiệt

độ không quá 60oC Nếu không có các thiết bị cô đặc và sấy dưới áp suất giảm thì

được phép cô cách thủy (không được cô trực tiếp trên lửa) và sấy ở nhiệt độ không quá 80oC

Trường hợp muốn thu được cao thuốc có tỷ lệ tạp chất thấp, phải tiến hành loại tạp chất bằng các phương pháp thích hợp tùy thuộc vào bản chất của dược liệu, dung môi và phương pháp chiết xuất.Có thể cho thêm chất bảo quản hoặc các chất

trơ để làm chất mang hay để cải thiện các tính chất vật lý[5], [8]

4 Tóm tắt kỹ thuật bào chế viên nang cứng:

4.1 Khái niệm:

Viên nang cứng là dạng thuốc phân liều gồm:

- Dược chất được bào chế ở dạng thích hợp

- Vỏ nang gồm hai nửa hình trụ lồng khít vào nhau (mỗi nửa có một đầu kín và một đầu hở)

4.2 Ưu nhược điểm của viên nang cứng:

- Hình thức, màu sắc của sản phẩm đẹp

- Che dấu được mùi vị của dược chất, dễ nuốt do có hình dạng thuôn, bề mặt trơn

- Dễ đóng gói, vận chuyển, bảo quản

- Có thể kiểm soát giải phóng dược chất theo mong muốn

4.2.2 Nhược điểm:

- Năng suất sản xuất thấp hơn so với viên nén

- Chi phí sản xuất thường cao hơn so với viên nén

- Không áp dụng được với các dược chất hút ẩm mạnh

- Khi uống, có thể kích ứng đường tiêu hóa, do tập trung nồng độ dược chất cao tại chỗ nhanh khi mở vỏ

So với viên nén, viên nang là dạng thuốc tương đối dễ nghiên cứu để xây dựng công thức Dễ triển khai sản xuất ở các quy mô khác nhau, có thể sử dụng các máy đóng nang thủ công trong quy mô nhỏ hoặc các máy đóng nang bán tự động và tự động trong quy mô sản xuất lớn Chính vì vậy trong đề tài này, chúng tôi lựa chọn dạng bào chế viên nang cứng cho cao đặc Testin

4.3 Thành phần viên nang:

4.3.1 Vỏ nang:

- Thành phần của vỏ nang: Thành phần chính của vỏ nang là gelatin (gelatin loại A hay loại B), ngoài ra còn có các thành phần khác như: Chất màu, cản quang, chất bảo quản … Các polyme khác cũng có thể được sử dụng để thay thế gelatin làm

vỏ nang, (ví dụ hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) gel hóa ở nhiệt độ cao)

- Hình dạng của vỏ nang: Vỏ nang cứng gồm hai nửa hình trụ lồng khít vào nhau (mỗi nửa có một đầu kín và một đầu hở) Thân và nắp nang có hai khớp khóa; khớp sơ bộ và khớp chính Vỏ nang có nhiều cỡ, thể tích khác nhau và được đánh

số tương ứng với thể tích

- Kích cỡ vỏ nang: Vỏ nang rỗng được sản xuất theo kích cỡ đường kính thống nhất, gồm các loại được đánh số từ 000 đến 5 Trên thực tế, sử dụng phổ biến ba loại vỏ nang là nang số 0; số 1 và số 2, thể tích của mỗi loại vỏ nang được trình bày trên bảng 1 dưới đây:

- Tá dược độn: Các loại tá dược độn dùng trong viên nén như tinh bột, lactose,

dicalciphosphat đều có thể dùng trong viên nang Calci carbonat và magnesi carbonat là những tá dược có khả năng hút, cho nên có thể dùng cho viên nén chứa cao mềm dược liệu

- Tá dược dính: Cao dược liệu có thể chất dẻo dính nên bản thân cao có thể đóng

vai trò tá dược dính trong công thức Ethanol cũng được dùng làm tá dược dính trong công thức chứa cao dược liệu, giúp cho việc phân tán cao và khối bột dễ dàng hơn, cho hạt dễ sấy khô Ngoài ra còn dùng hồ tinh bột, dịch thể gelatin, dịch gôm arabic, dung dịch PVP…

- Tá dược trơn: Tá dược trơn giúp hạt trơn chảy đều, đảm bảo hạt được phân bố

đồng đều vào nang Các tá dược trơn thường dùng là Magnesi stearat, Talc, Aerosil

- Tá dược rã: Trong trường hợp có xát hạt hay có nén ép (máy có đĩa phân liều

hoặc vít phân liều) thì nên có tá dược rã để giúp thuốc phóng thích nhanh Nên sử dụng các tá dược siêu rã (tinh bột biến tính, cellulose biến tính, crospovidon) để giảm khối lượng hạt đóng vào nang[1], [6], [13], [16]

4.4 Quy trình bào chế viên nang cứng:

4.4.1 Quy trình tạo hạt:

Cao dược liệu có thể chất dẻo dính, hàm lượng nước cao, do đó chúng tôi lựa chọn phương pháp xát hạt ướt để tạo hạt Đây cũng là phương pháp tạo hạt thông dụng nhất hiện nay do có nhiều ưu điểm như dễ phân phối dược chất đồng đều hơn, quy trình và thiết bị đơn giản, dễ thực hiện

Các bước của quá trình tạo hạt ướt bao gồm:

- Nghiền và trộn hỗn hợp bột khô: Các thành phần ban đầu cần phải được trộn kỹ

để đảm bảo sự phân bố đồng đều của hoạt chất trong hạt Đây là quá trình trộn rắn - rắn, thường được tiến hành qua bước nghiền mịn trước để đảm bảo đồng nhất hỗn hợp

- Tạo khối ẩm của hỗn hợp bột: Thêm tá dược dính lỏng vào khối bột, trộn cho

đến lúc tá dược thấm đều vào khối bột, tạo ra sự liên kết các tiểu phân bột vừa đủ

để tạo hạt Để tá dược dễ thấm vào khối bột, nên dùng tá dược nóng, nhất là với những tá dược có độ nhớt cao như dịch thể gelatin, hồ tinh bột Lượng tá dược và thời gian trộn quyết định đến khả năng liên kết của hạt Thường phải qua thực nghiệm để xác định các thông số cụ thể cho từng công thức

- Xát hạt: Khối ẩm sau khi trộn đều, để ổn định trong một khoảng thời gian nhất

định rồi xát qua cỡ rây quy định Kiểu rây xát hạt và cách xát ảnh hưởng đến hình dạng và mức độ liên kết của hạt Nếu khối ẩm quá ẩm mà lực xát lại lớn thì

dễ tạo thành các sợi dài Để thu được hạt có hình dạng gần với hình cầu, tốt nhất

là xát hạt qua rây đục lỗ với lực xát hạt vừa phải Với dược chất khó tạo hạt hoặc hạt có màu, có thể xát hạt hai lần để thu được hạt đạt yêu cầu và có màu sắc đồng nhất

- Sấy hạt: Hạt sau khi xát, tải thành lớp mỏng và sấy ở nhiệt độ quy định Trước

khi sấy, có thể để thoáng gió cho hạt se mặt, sau đó đưa vào buồng sấy và nâng nhiệt độ từ từ cho hạt dễ khô đều Trong quá trình sấy, thỉnh thoảng đảo hạt, tách các cục vón và kiểm tra nhiệt độ sấy Hạt thường được sấy cho đến độ ẩm từ 1 – 7% tùy từng loại dược chất

- Sửa hạt: Hạt sau khi sấy, phải xát hạt lại nhẹ nhàng qua cỡ rây quy định để phá

vỡ các cục vón, tạo ra được khối hạt có kích thước đồng nhất hơn[1], [9]

4.4.2 Quy trình đóng hạt vào nang:

Quy trình đóng hạt vào nang gồm 3 giai đoạn:

- Mở vỏ nang: Việc mở vỏ nang có thể thực hiện bằng tay ở các thiết bị thủ công

hoặc mở bằng chân không đối với các thiết bị tự động hoặc bán tự động Do hai nửa vỏ nang được lắp với nhau bằng khớp sơ bộ nên dùng chân không có thể mở

ra được Sau khi mở, hai phần nắp và thân được phân riêng Phần thân nang nằm trên bàn đóng nang hay mâm quay của thiết bị để đóng thuốc vào Nếu đóng thủ công thì bột thuốc được đổ lên bàn đóng nang, dùng dụng cụ gạt đầy vào thân nang

- Đóng thuốc vào nang: Trong công nghiệp có nhiều phương pháp đóng thuốc vào nang phụ thuộc vào thiết bị đóng nang Có thể chia thành hai phương pháp chính:

 Phương pháp đong theo thể tích: Thể tích biểu kiến của một đơn vị phân liều ở

dạng hạt bằng thể tích của nang Lựa chọn cỡ nang dựa theo công thức:

V =

với V là thể tích nang

M là khối lượng chất đóng nang

dbk là tỷ trọng biểu kiến của chất đóng nang, được xác định bằng cách cân một lượng bột nhất định (m), chuyển vào ống đong, gõ nhẹ nhàng cho đến khi thể tích không thay đổi (Vbk), tỷ trọng biểu kiến bằng m/Vbk

 Phương pháp đóng bằng piston: Khối bột trước khi đóng vào nang được nén lại bằng piston, tạo thành “thỏi” trước khi đóng vào nang Lượng bột đóng vào nang được tính dựa trên áp lực nén của piston, thể tích buồng piston, khả năng

chịu nén của khối bột

- Đóng nắp nang: Sau khi đóng thuốc vào nang, nắp nang được lắp vào thân nang

bằng khớp chính Nang sau đó được làm sạch bột, đánh bóng và đóng gói[1], [9]

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

1 Nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu:

1.1 Nguyên liệu:

Bảng 2 Các nguyên liệusử dụng trong đề tài

9 Avicel PH 101 TCCS Đài Loan

10 Calci carbonat DĐVN IV Trung Quốc

11 Magnesi carbanat DĐVN IV Trung Quốc

12 Tinh bột DĐVN IV Việt Nam

Hóa chất

13 Acid formic DĐVN IV Trung Quốc

14 Cloroform DĐVN IV Trung Quốc

15 Ethanol 96% DĐVN IV Việt Nam

16 Ether dầu hỏa DĐVN IV Trung Quốc

17 Ethyl acetat DĐVN IV Trung Quốc

18 Methanol DĐVN IV Trung Quốc

19 Toluen DĐVN IV Trung Quốc

1.2 Phương tiện nghiên cứu:

Bảng 3 Thiết bị được sử dụng trong đề tài

1 Bếpđun cách thủy Baths HH-S4 Trung Quốc

2 Bếp hồng ngoại Sanaky AT-2521HGN Trung Quốc

3 Tủ sấy Memmerk, Shellab Đức

4 Cân phân tích Sartorius Đức

5 Cân kỹ thuật Precisa Thụy Sĩ

6 Máy ly tâm Universal PLC-012E Đức

7 Máyđo độẩm Precisa XM-60 Thụy Sĩ

8 Máyđo tỷ trọng biểu kiến Erweka Đức Các dụng cụ thí nghiệm khác thuộc bộ môn Dược học cổ truyền và tổ Bào chế công nghiệp, bộ môn Công nghiệp Dược trường Đại học Dược Hà Nội

2 Phương pháp nghiên cứu:

Nghiên cứu xây dựng quy trình bào chế viên nang cứng Testin qua các giai đoạn sau:

- Bào chế cao đặc bán thành phẩm

- Xây dựng công thức và bào chế viên nang cứng Testin

2.1 Bào chế cao đặc bài thuốc Testin:

2.1.1 Bào chế cao đặc:

Dược liệu được kiểm tra chất lượngđạt tiêu chuẩn DĐVN IV[7], được bào chế thànhdạng thuốc phiến, chiết xuất với dung môi ethanol 40% bằng cácphương

phápkhác nhau Tính hiệu suấtbào chế trung bình của từng phương pháp để so sánh và lựa chọn phương pháp chiết xuất phù hợp

2.1.1.1 Chiết hồi lưu:

- Chiết bằng bộ dụng cụ đun hồi lưu, dung môi ethanol 40%

- Lần 1: Cân lượng dược liệu tương ứng5 thang thuốc: xà sàng tử, bạch tật lê, câu kỉ tử được cho vào túi nhỏ, thắt chặt miệng lại Tất cả các dược liệu được đưa vào giỏ sắc thuốc Thêm dung môi ethanol 40% (3 lít) vào đến ngập dược liệu Đun sôi trong 1 giờ rồi rút lấy dịch chiết

- Lần 2: Thêm tiếp dung môi ethanol 40% đến ngập dược liệu, đun sôi trong 1h, rút lấy dịch chiết

- Lần 3: Tiến hành tương tự lần 2

- Gộp dịch chiết 3 lần lại, để lắng, gạn lấy phần dịch trong Phần còn lại lọc qua bông

2.1.1.2 Chiết ngâm lạnh 2 ngày:

- Chiết bằng bộ dụng cụ ngâm lạnh, dung môi ethanol 40%

- Lần 1: Cân lượng dược liệu tương ứng5 thang thuốc: xà sàng tử, bạch tật lê, câu kỉ tử được cho vào túi nhỏ, thắt chặt miệng lại Tất cả các dược liệu được đưa vào bình ngâm lạnh Thêm dung môi ethanol 40% (2 lít) đến ngập dược liệu Ngâm lạnh trong 2 ngày rồi gạn lấy dịch chiết

- Lần 2: Thêm tiếp dung môi ethanol 40% đến ngập dược liệu Ngâm lạnh trong

2 ngày rồi gạn lấy dịch chiết

- Lần 3: Tiến hành tương tự lần 2

- Gộp dịch chiết 3 lần lại, để lắng, gạn lấy phần dịch trong Phần còn lại lọc qua bông

2.1.1.3 Chiết ngâm lạnh 3 ngày:

- Chiết bằng bộ dụng cụ ngâm lạnh, dung môi ethanol 40%

- Lần 1: Cân lượng dược liệu tương ứng5 thang thuốc theo công thức 1: xà sàng

tử, bạch tật lê, câu kỉ tử được cho vào túi nhỏ thắt chặt miệng lại Tất cả các

dược liệu được đưa vào bình ngâm lạnh Thêm dung môi ethanol 40% (2 lít) đến ngập dược liệu Ngâm lạnh trong 3 ngày rồi gạn lấy dịch chiết

- Lần 2: Thêm tiếp dung môi ethanol 40% đến ngập dược liệu Ngâm lạnh trong

3 ngày rồi gạn lấy dịch chiết

- Lần 3: tiến hành tương tự lần 2

- Gộp dịch chiết 3 lần lại, để lắng, gạn lấy phần dịch trong Phần còn lại lọc qua bông

2.1.2 Xử lý dịch chiết:

- Cất thu hồi dung môi, thu được cao lỏng với thể tích bằng 1/3 thể tích ban đầu

- Dịch chiết sau khi thu hồi dung môi được ly tâm 5000 vòng/phút trong 30 phút

- Dịch ly tâm được lọc qua bông, sau đó cô cách thủy thành cao đặc

2.1.3 Tính hiệu suất bào chế:

Mỗi phương pháp làm 3 mẫu, tính hiệu suất bào chế trung bình theo phần trăm cao khô tuyệt đối trên dược liệu khô tuyệt đối (kí hiệu H) theo công thức sau:

H = ×( ) (1)

Trong đó m1: Khối lượng dược liệu khô tuyệt đối (g)

m2: Khối lượng cao đặc (g)

X: Độ ẩm của cao đặc (%)

Để tính được khối lượng dược liệu khô tuyệt đối cần xácđịnh độẩm của từng dược liệu Phương pháp xácđịnh độẩm của dược liệu như sau:

Sử dụng phương pháp mất khối lượng do làm khô (DĐVN IV PL 9.6) để đo

độ ẩm của 6 dược liệu không chứa thành phần dễ bay hơi: Hoàng kỳ, Cốt khí củ,

Ba kích, Câu kỉ tử, Bá bệnh, Bạch tật lê

Sử dụng phương pháp cất với dung môi toluen (DĐVN IV PL 12.13) để đo độ

ẩm của 2 dược liệu chứa thành phần dễ bay hơi là Đương quy và Xà sàng tử [5], [19], [21]

Khối lượng dược liệu khô được tính theo công thức:

m1 = n ∑ .( )(2) với m1 là khối lượng dược liệu khô (g)

mi là khối lượng mỗi dược liệu (g)

Xi là độ ẩm của mỗi dược liệu tương ứng (%)

n là số thang thuốc chiết trong một lần

2.1.4 Kiểm tra chất lượng cao đặc:

Cao đặc chiết xuất theo phương pháp nào được lựa chọn để tiến hành bào chế viên nang cứng cần được kiểm tra chất lượng để đảm bảo tính ổnđịnh của nguyên liệu đầu vào Cao đặc được kiểm tra theo các chỉ tiêu và phương pháp tiến hànhnhư sau:

2.1.4.3 Xác định pH:

- Pha dung dịch cao đặc 1% (kl/tt): Cân chính xác khoảng 1 g cao đặc cho vào cốc có mỏ, hòa tan, chuyển dần cao ở trong cốc bằng nước cất vào bình định mức 100 ml, thêm nước cất đến vạch

- Hiệu chuẩn máy đo pH lần lượt bằng các dung dịch đệm chuẩn có pH = 7, pH

- Chuẩn bị dịch chấm sắc ký:

 Dịch chiết cao đặc: Lấy 1g cao đặc, ngâm trong 30ml ethanol 96% trong 3 giờ, lọc, dịch lọc đem bốc hơi dung môi còn khoảng 1ml được dịch chấm sắc ký của cao đặc

 Dịch chiết dược liệu: Cân số gam dược liệu tương ứng có trong 1 g cao đặc tán nhỏ thành bột Cho riêng mỗi vị thuốc vào bình nón, ngâm trong ethanol 96%,

3 lần, mỗi lần 10ml trong 1h, gạn lấy dịch, lọc, bốc hơi dung môi còn 1ml để chấm sắc ký

- Hoạt hóa bản mỏng Silicagel GF 254 ở 105°C trong 1h

- Hệ dung môi khai triển: [7], [11]

Bá bệnh : Cloroform:ethyl acetat (7:3)

Xà sàng tử : Cloroform:ethyl acetat (9:1)

Bạch tật lê : Cloroform:methanol (19:1)

Ba kích : Toluen:ethyl acetat:acid formic (8:2:0,1)

- Phát hiện vết bằng cách soi dưới đèn UV với λ = 366 nm

2.1.4.5 Định lượng cắn ethylacetat:

Lấy chính xác 5,00 g cao đặc, hòa tan trong 25 ml nước, cho vào bình gạn, lắc loại tạp với ether dầu hỏa 3 lần, mỗi lần 15 ml, lấy lớp nước Đun nóng nhẹ lớp nước để đuổi hết ether dầu hỏa dư, chiết với ethyl acetat nhiều lần cho đến khi kiểm tra dịch chiết không còn flavonoid (kiểm tra bằng thuốc thử Cyanidin) Gộp

các dịch chiết ethyl acetat lại, cô trên bếp cách thủy đến cắn, đem sấy khô ở 80°C tới khối lượng không đổi Làm 3 lần lấy kết quả trung bình [3], [4], [11]

Công thức tính hàm lượng cắn ethylacetat trong cao đặc:

2.2 Bào chế viên nang cứng Testin:

2.2.1 Xây dựng công thức và phương pháp bào chế viên nang cứng Testin:

Dựa trên các thông số về khả năng bào chế, biểu đồ độ ẩm theo thời gian sấy (đánh giá khả năng sấy khô của hạt), hiệu suất tạo hạt, tỷ lệ hạt có kích thước dưới 180μm, tỷ trọng biểu kiến, chỉ số nén, tiến hành khảo sát công thức và phương pháp bào chế viên nang cứng Testin như sau:

- Cốđịnh phương pháp tạo hạt, thay đổi loại và tỷ lệtá dượcđể lựa chọn công thức bào chế viên nang cứng Testin thích hợp Phương pháp tạo hạt sử dụng trong quá trình khảo sát công thức bào chế là phương pháp tạo hạt 1

 Phương pháp tạo hạt1:

 Trộn đều tá dược độn theo phương pháp đồng lượng

 Trải đều cao đặc lên hỗn hợp tá dược và trộn đến khi cao thấm đều vào khối bột

 Xát hạt qua rây cỡ 1mm

 Sấy hạt: Rải hạt thành lớp mỏng và sấy tĩnhở 60°C

 Sửa hạt qua rây cỡ 1mm[9], [11]

- Sau khi lựa chọn được loại tá dược tốt nhất, sử dụng phương pháp tạo hạt 2 thay thế và so sánh với phương pháp tạo hạt 1 để lựa chọn phương pháp thích hợpbào chế viên nang cứng Testin