1. Bào chế caođặc Testin:
2.3.2. xuất tiêu chuẩn chất lượng bán thành phẩmdạng hạt:
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 5 10 15 20 25 Lần 1 Lần 2 Lần 3 Độ ẩm của hạt (%)
Từ kết quả trên, chúng tôi đề xuất tiêu chuẩn cho bán thành phẩm dạng hạt như sau:
Hình thức: Hạt có màu nâu, mùi thơm dược liệu, vịđắng. Độẩm: Không quá 2% sau khi sấytĩnhở 60°C trong 6h. Tỷ lệ hạt có kích thước dưới 180μm: không quá37%. Tỷ trọng biểu kiến:không dưới0,63 g/ml.
Chỉ số nén: nằm trong khoảng 16 – 20, tức là độ trơn chảy khá tốt (xem bảng4 mục 2.2.2 chương 2 trang 24).
Tốc độ trơn chảy: không dưới 6 g/s.
2.4.Đánh giáchất lượng của viên nang cứng Testin:
2.4.1. Khảo sát một sốchỉ tiêu chất lượng của viên nang cứng Testin:
Hạt sau khi kiểm tra chất lượng đượcđóng vào vỏ nang cỡ số 0 bằng máyđóng nang thủ công (2000 viên). Tiến hành kiểm tra chất lượng viên nang theo phương phápở mục2.2.3 chương 2 (trang 24 – 25). Kết quảthu được như sau:
- Hình thức:Viên nang cứng trong chứa hạt màu nâu, có mùi thơm dược liệu, vị đắng. - Độẩm của hạt trong nang: Bảng 24. Độẩm của hạt trong nang Mẫu 1 2 3 TB Độẩm (%) 4,94 4,37 4,52 4,61 - Độđồng đều khối lượng:
Khối lượng trung bình của thuốc trong nang là 433,1 mg. Khối lượng thuốc trong nang nằm trong khoảng khối lượng trung bình ± 7,5%.
- Độ rã:
Bảng 25. Bảng theo dõi độ rã của viên nang thành phẩm.
Viên 1 2 3 4 5 6
Thời gian rã (phút) 18,35 19,47 20,04 20,11 19,52 18,74 Tất cảcác viên đều có thời gian rã dưới 30 phút, đạt tiêu chuẩn vềđộ rã của viên nang theo DĐVN IV.
- Định tính một số vị thuốc trong viên nang bằng SKLM:
Ba kích: Sắc ký đồ của cao đặc bán thành phẩm và viên nang cho 3 vết có Rf tương đương với sắc ký đồ của Ba kích.
Bảng 26. Giá trị Rf của 3 vết tương đương trên sắc ký đồ của Ba kích (BK), cao và chế phẩm (CP). Vết Rf BK Cao CP 1 0,34 X X X 2 0,54 X X X 3 0,68 X X X Hình 10. Sắc ký đồ của Ba kích (BK), cao đặc và chế phẩm (CP)
Bá bệnh:Sắc ký đồ của cao đặc bán thành phẩm và viên nang cho 4 vết có Rf tương đương với sắc ký đồ của Bá bệnh.
Bảng 27. Giá trị Rf của 4 vết tương đương trên sắc ký đồ của Bábệnh (BB), caođặc và chế phẩm (CP). Vết Rf BB Cao CP 1 0,13 X X X 2 0,54 X X X 3 0,68 X X X 4 0,76 X X X Hình 11.Sắc ký đồ của Bá bệnh (BB), cao đặc và chế phẩm (CP)
Bạch tật lê:Sắc ký đồ của cao đặc bán thành phẩm và viên nang cho 4 vết có Rf tương đương với sắc ký đồ của Bạch tật lê.
Bảng 28. Giá trị Rf của 4 vết tương đương trên sắc ký đồ của Bạch tật lê (BTL), cao đặcvà chế phẩm (CP). Vết Rf BTL Cao CP 1 0,16 X X X 2 0,37 X X X 3 0,44 X X X 4 0,74 X X X Hình 12. Sắc ký đồ của Bạch tật lê (BTL), cao đặc và chế phẩm (CP)
Xà sàng tử:Sắc ký đồ của cao đặc bán thành phẩm và viên nang có 4 vếtcó Rf- tương đương với sắc ký đồ của Xà sàng tử.
Bảng 29. Giá trị Rf của 4 vết tương đương trên sắc ký đồ của Xà sàng tử (XST), cao đặcvà chế phẩm (CP). Vết Rf XST Cao CP 1 0,29 X X X 2 0,58 X X X 3 0,74 X X X 4 0,81 X X X Hình 13. Sắc ký đồ của Xàsàng tử (XST), cao đặc và chế phẩm (CP)
- Định lượng cắn ethylacetat:
Bảng 30.Hàm lượngcắn ethylacetat trongviên nang
Mẫu 1 2 3 TB
Hàm lượngcắn ethylacetat 1,21% 1,16% 1,20% 1,19%
Nhận xét: Các thông số của viên nang thành phẩm kháổnđịnh, trên sắc ký cho các vết tương tự với cao đặc và một số vết tương đương với dược liệu cho thấy một số hoạt chất trong dược liệu được chuyển vào cao đặc, và thành phần cao đặc được chuyển tương đối nguyên vẹn vào viên nang.
2.4.2. Đề xuất tiêu chuẩn chất lượng của viên nang cứng Testin:
Từ kết quả khảo sát trên, chúng tôi đề xuất tiêu chuẩn chất lượng sơ bộ của viên nang cứng Testin như sau:
Hình thức: Viên nang cứng trong chứa hạt màu vàng, có mùi thơmdược liệu, vị đắng (thử theo cảm quan).
Độẩm: không quá 5% (thử theo PL 9.6, DĐVN IV).
Độ đồng đều khối lượng: khối lượng trung bình ± 7,5% (thử theo PL 11.3, DĐVN IV).
Độ rã: Không quá 30 phút (thử theo PL 11.6, DĐVN IV).
Định tính: Tiến hành SKLM, thành phẩm có các vết đặc trưng của các dược liệu Bá bệnh, Bạch tật lê, Ba kích, Xà sàng tử.
Định lượngcắn ethylacetat: không dưới 1,16%.
3. Bàn luận:
Về phương phápbào chếcao đặc Testin:
Phương pháp chiếtnóngcóưu điểm là tiến hành nhanh hơn phương phápngâm lạnh, do đótiết kiệm thời gian hơnphương phápngâm lạnh. Cao đặc thu được từ phương pháp chiết nóng thể hiện tác dụng tương đối tốt[12]. Tuy nhiên, chiết bằng phương pháp chiết nóng sẽ cho nhiều tạp chất hơn so vớiphương pháp ngâm lạnh, dụng cụđể chiết nóng với dung môi ethanol cũng thường phức tạp hơnphương pháp chiết lạnh.
Về bào chế viên nang cứng Testin:
Việc bào chế viên nang từcao đặc dược liệu có những khó khăn nhấtđịnh. Cao đặc dược liệu hútẩm mạnh, dẻo dính, khó phân tán đồng đều tá dược vào cao, mất nhiều thời gian để sấy khô và trong quá trình nghiền thì dễ hútẩm, dính bết vào dụng cụ. Do đó, để bào chế viên nangđạt tiêu chuẩn theo quy định phải phối hợp thêm tá dược hút, tạo hạttốt. Cần nghiên cứu phối hợp các tá dược với tỷ lệ thích hợp đểđảm bảo viên có thể chứa lượng cao lớn nhất mà vẫn đạt tiêu chuẩn và hiệu suất tạo hạt cao, không bị hao hụt nhiều trong quá trình bào chế.
Phương phápxát hạt ướt là phương pháp tạo hạt phù hợp để bào chế hạtđựng trong nang cứng từ cao dược liệu. Việc tạo hạt giúp cải thiện khả năng trơn chảy ,giảm hiện tượng hútẩm dính vào thiết bị khi đóng nang so với dạng bột cao. Về quy trình tạo hạt, phương pháp thông thường là nhàoẩm trực tiếp cao đặc với hỗn hợp tá dược sau đó xát hạt. Nhượcđiểm của phương pháp này là phối hợp được lượng cao ít hơn (tốiđa 50%), hạt tạo ra xốp nhẹ, có tỷ trọng biểu kiến thấp, do đó lượng hạt trong một nang cũng như hàm lượng cao trong viên nang thấp, dẫn đến liều lượng uống một ngày sẽ cao. Chúng tôi lựa chọn phương pháp chỉ trộn tá dược hút (MgCO3) với cao đặc trước rồi sấy khô, sau đó tán mịn tạo bột cao khô, rồi mới nhàoẩm bột cao với tá dược còn lại. Với quy trình tạo hạt này, chúng tôi có thể tạo hạt với hàm lượng cao đặc cao hơn (60%), hạt tạo ra có tỷ trọng biểu kiến cao, do đó giúp giảm liều lượnguống mỗi ngày.
Vềđánh giá chất lượng sơ bộ của cao đặc, bán thành phẩmdạng hạt và viên nang cứng Testin:
Để thành phẩm sản xuất ra đạt tiêu chuẩn, các sản phẩm trung gian cần thiết phải được tiêu chuẩn hóa. Vì vậy bên cạnh việc kiểm tra chất lượng của cao đặc, chúng tôi còn xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm bán thành phẩm dạng hạt nhằmđảm bảo hạt có độ trơn chảy tốt giúp cao được phân phối đều vào nang và độẩm thấp tránh tình trạng nấm mốc trong quá trình bảo quản.
Trong một bài thuốc có nhiều vị thuốc, việc xác định sự có mặt của các vị thuốcbằng SKLM trong thành phẩm được bào chếtừ bài thuốc đó là cần thiết. Song
do thời gian, kinh phí hạn chế, chúng tôi mới chỉ định tính được 4 vị Bá bệnh, Ba kích, Bạch tật lê và Xà sàng tử là những vị thuốc chính ảnh hưởng nhiều đến tác dụng của bài thuốc, để làm dấu vân tay bước đầu cho việc kiểm nghiệm bài thuốc.
Định lượng thành phần trong sản phẩm: Tác dụng của cao thuốc do rất nhiều yếu tố, chưa thểxác định chính xác thành phần nào quyết định tác dụng. Định lượng một thành phần nào đó cũng chỉ để xác định dấu vân tay. Ở đây chúng tôi chọn nhóm flavonoid là nhóm khá phổ biến trong dược liệu, dễ chiết xuất để định lượng. Nếu có một chất chuẩn nào đểđịnh lượng bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao thì kết quả sẽ thuyết phục hơn nhiều, song chúng tôi chưa có chất chuẩn và thời gian để thực hiện.
4. Kết luận và đề xuất: 4.1.Kết luận: 4.1.Kết luận:
Qua quá trình thực nghiệm, đề tài của chúng tôi đã thu được một số kết quảsau đây: - Đã xây dựng được quy trình bào chế cao đặc bằng ethanol 40% theo phương
pháp chiết hồi lưu.
- Đã sơ bộ xây dựng được tiêu chuẩn của cao đặc bào chế theo phương pháp chiết hồi lưu với ethanol 40% làm nguyên liệu đầu vào cho bào chế viên nang cứng Testin.
- Đã xây dựng công thức và bào chếđược viên nang cứng Testin (2000 viên). - Sơ bộ xây dựng được các tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng của bán thành phẩm
dạng hạt.
- Bước đầu xây dựngđược tiêu chuẩnkiểm nghiệm cho viên nang cứng Testin.
4.2.Đề xuất:
Từ kết quả nghiên cứu, chúng tôiđưa ra một số đề xuất sau:
- Xây dựng phương pháp định lượng với một chất chuẩn bằng HPLC. - Theo dõi độổnđịnh để xácđịnh tuổi thọ của viên nang cứng Testin.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT
1. Bộ môn Bào chế, trường Đại học Dược Hà Nội (2008), Kỹ thuật bào chế và sinh dược học các dạng thuốc,tậpII, NXB Y học, Hà Nội, trg 165, 213 – 214. 2. Bộ môn Dược học cổ truyền - Trường Đại học Dược Hà Nội (2006), Dược học
cổ truyền, NXB Y học, Hà Nội, tr 204 – 205, 227 – 228, 236 – 237, 249 – 250, 277, 280, 313 – 314.
3. Bộmôn Dược liệu - Trường Đại học Dược Hà Nội (2009), Bài giảng Dược liệu tập I, trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội.
4. Bộ môn Dược liệu - Trường Đại học Dược Hà Nội (2010), Thực tậpdược liệu (kiểm nghiệm dược liệu bằng phương pháp hóa học), trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội.
5. Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học, Hà Nội.
6. Lê Thị Thu Hằng (2008), Nghiên cứu thành phần hóa học và dạng bào chế bài thuốcĐương quy bổ huyết thang gia giảm, khóa luận tốt nghiệp dược sĩ khóa 2003 – 2008, trườngĐại học Dược Hà Nội.
7. Nguyễn Thị Hằng (2013), Kiểm tra chất lượng các vị thuốc trong bài thuốc Testin, khóa luận tốt nghiệp dược sĩ khóa 2008 – 2013, trườngĐại học Dược Hà Nội.
8. Từ Minh Koóng (2009), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm, tập I, NXB Y học, Hà Nội.
9. Từ Minh Koóng (2009), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm, tập III, NXB Y học, Hà Nội, trg 46 – 47, 168 – 170.
10. Đỗ Tất Lợi (2004), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội, trg 55 – 59, 82, 303 – 304, 412 – 413, 506 – 507, 573 – 574, 850 – 851, 887 – 889.
11. Doãn Thị Phượng (2013), Nghiên cứuđiều chế và chuẩn hóa cao đặc bài thuốc Testin, khóa luận tốt nghiệp dược sĩ khóa 2008 – 2013, trườngĐại học Dược Hà Nội.
12. Nguyễn Thị Thanh (2013), Thăm dò hoạt tính androgen của cao thuốc Testin trên chuột đực thí nghiệm, khóa luậntốt nghiệp dược sĩ khóa 2008 – 2013, trường Đại học Dược Hà Nội.
13. Nguyễn Thu Trang (2010), Bướcđầu nghiên cứu bào chế viên nang cứng Bổ trung ích khí, khóa luận tốt nghiệp dược sĩ khóa 2005 – 2010, trườngĐại học Dược Hà Nội.
14. Viện dược liệu (2004), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, NXB Khoa học và kỹ thuật, tập 1, trg 101 – 106, 116 – 118, 362 – 365, 530 – 531,834 – 837, 842 – 844, 946 – 949, 1092 - 1095.
TÀI LIỆU TIẾNG ANH
15. Quiong Luo et al (2006), “Lycium barbarum polysaccharides: Protective effects against heat-induced damage of rat testes and H2O2-induced DNA damage in mouse testicular cells and beneficial effect on sexual behavior and reproductive function of hemicastrated rats”, Life Sciences, 79(7), 613 – 621.
16. Raymond C. Rowe, Paul J. Sheskey and Marian E. Quinn (2009), “Handbook of Pharmaceutical Excipients, Sixth Edition”, the Pharmaceutical Press and the American Pharmacists Association, the United States of America.
17. Thirunavukkarasu M. Sellandi, Anup B. Thakar, and Madhav Singh Baghel (2012), “Clinical study of Tribulus terrestris Linn. in Oligozoospermia: A double blind study”, AyurvedaJournal of Research, 33(3), 356 – 364.
18. Surender Singh, Vinod Nair, and Yogendra K. Gupta (2012), “Evaluation of the aphrodisiac activity of Tribulus terrestris Linn. in sexually sluggish male albino rats”, Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics, 3(1), 43 – 47. 19. The State Food and Drug Administration of P. R. China (2010),
Pharmacopoeia of the People’s Republic of China Volume I, People’s Medical Publishing House, China.
20. TheUnited States Pharmacopoeia 32 (2009), General Chapters <1174> Powder Flow.
21. World Health Organization (1998), Quality control method for medicinal plant materials, World Health Organization, Geneva, 33 – 35.
PHỤ LỤC 1: Ảnh các vị thuốc trong bài thuốc Testin
Ba kích Bá bệnh
Bạch tật lê Câu kỷ tử
Cốt khí củ Đương quy
PHỤ LỤC2: Thành phần và hướng dẫn sử dụng viên nang cứng Testin
Công thức bào chế cho 1 viên nang khoảng 450 mg:
Ba kích 87,24 mg Tương đương với 270 mg cao đặc dược liệu Bá bệnh 87,24 mg Bạch tật lê 104,68 mg Câu kỷ tử 139,58 mg Cốt khí củ 87,24 mg Đương quy 122,13 mg Hoàng kỳ 122,13 mg Xà sàng tử 104,68 mg Avicel PH 101 90,0 mg Magnesi carbonat 90,0 mg Talc 9,0 mg Magnesi stearat 4,5 mg
Chỉđịnh: Hỗ trợ điều trị suy giảm chức năng sinh dục nam.
Chống chỉ định: Thận trọng với người tiêu chảy, không dùng cho phụ nữ và trẻ em dưới 16 tuổi.
Cách dùng: Ngày uống 3 lần, mỗi lần 3 viên.