Xây dựng tiêu chuẩn nguyên liệu ngấy hương tại tỉnh hà tĩnh

ĐẶT VẤN ĐỀBên cạnh nền y học hiện đại, nền y học cổ truyền có đóng góp vô cùng to lớn trong việc chăm sóc sức khỏe cho người dân, cho cộng đồng. Việt Nam là một trong những nước có nền y học cổ truyền lâu đời với những bài thuốc hay và những cây thuốc quý. Đã có rất nhiều dược liệu được nghiên cứu và đưa vào sử dụng. Tuy nhiên cũng còn nhiều cây thuốc chưa được nghiên cứu cụ thể mà Ngấy hương là một trong số đó.Ngấy hương là cây bụi thân leo, thường mọc hoang ở ven rừng hoặc nơi đã phát quang bụi rậm hoặc đồi cây bụi. Ngấy hương có tác dụng kích thích tiêu hóa,bổ ngũ tạng, tăng cường sức khỏe, giải độc tiêu phù. Nhằm khai thác nguồn nguyên liệu này tại địa phương, công ty Cổ phần Dược Hà Tĩnh đã và đang tiến hành nghiên cứu để đưa vào sử dụng.Dược điển Việt Nam IV chưa có chuyên luận riêng về dược liệu Ngấy hương. Nhằm mục đích đưa dược liệu Ngấy hương vào sản xuất, năm 2012 công ty Cổphần Dược Hà Tĩnh đã kết hợp với bộ môn Dược Liệu – Trường Đại Học Dược Hà Nội triển khai dự án nghiên cứu về tiêu chuẩn của nguyên liệu Ngấy Hương.Đề tài “XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN NGUYÊN LIỆU NGẤY HƯƠNG TẠI TỈNH HÀ TĨNH” là một phần trong dự án nghiên cứu về nguyên liệu Ngấy hương mục tiêu:Xây dựng cơ sở dữ liệu để thành lập tiêu chuẩn kiểm nghiệm nguyên liệu Ngấy hương.Để thực hiện được mục tiêu trên đề tài được tiến hành với những nội dung sau: Nghiên cứu đặc điểm vi học, hóa học của dược liệu mang tên Ngấy hương và xây dựng tiêu chuẩn định tính, định lượng nhóm chất chính có trong dược liệu Ngấy hương. Nghiên cứu một số chỉ tiêu kiểm nghiệm khác nhằm góp phần xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cho nguyên liệu Ngấy hương.

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

HÀ NỘI - 2013

PGS TS Nguy ễn Viết Thân

B ộ môn Dược liệu

HÀ N ỘI - 2013

Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS TS Nguyễn Viết Thân, giảng viên bộ môn Dược liệu trường Đại học Dược

Hà Nội, người thầy tận tình hướng dẫn, chỉ bảo em trong quá trình thực hiện khóa

luận

Em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Quốc Huy và các thầy cô giáo, các anh chị kỹ thuật viên tại bộ môn Dược liệu đã giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho

em hoàn thành khóa luận

Em xin trân trọng cảm ơn ban Giám hiệu, phòng Đào tạo, các thầy cô giáo

giảng viên trường Đại học Dược Hà Nội đã truyền cho em kiến thức cùng nhiệt huyết của thầy cô trong suốt những năm học tập tại trường

Em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè, người thân đã ở bên động viên, giúp đỡ em thực hiện khóa luận

Hà Nội, tháng 05 năm 2013

Phạm Trung Kiên

Trang

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 2

1.1 T ỔNG QUAN VỀ HỌ HOA HỒNG (ROSACEAE) 2

1.1.1 Vị trí phân loại họ Hoa hồng (Rosaceae) 2

1.1.2 Đặc điểm thực vật họ Hoa hồng (Rosaceae) 2

1.1.3 Phân loại thực vật họ Hoa hồng 2

1.2 TỔNG QUAN VỀ CHI RUBUS 3

1.2.1 Đặc điểm thực vật và phân bố chi Rubus 3

1.2.1.1 Đặc điểm thực vật chi Rubus: 3

1.2.1.2 Phân loại thực vật chi Rubus: 4

1.2.2 Đặc điểm một số loài thuộc chi Rubus 5

1.2.2.1 Rubus alceaefolius Poir Syn R.moluccanus Hook.f – Mâm xôi 5

1.2.2.2 Rubus parvifolius L Syn R.triphyllus Thunb – Ngấy tía, Ngấy lá nhỏ 6

1.2.2.3 Rubus rosaefolius Sm – Ngấy lá hồng 6

1.2.2.4 Rubus cochinchinensis Tratt – Ngấy hương 7

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C ỨU 11

2.1 NGUYÊN LI ỆU, PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 11

2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 11

2.1.2 Phương tiện nghiên cứu 11

2.1.2.1 Hóa chất và dụng cụ 11

2.1.2.2 Thiết bị dùng trong nghiên cứu 11

2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12

2.2.1 Kiểm nghiệm bằng phương pháp nghiên cứu hiển vi 12

2.2.2 Kiểm nghiệm bằng phương pháp hóa học 12

2.2.3 Kiểm nghiệm các chỉ tiêu vật lý, hóa lý 12

3.1.1 Mô tả về cây Ngấy hương 13

3.1.2 Nghiên cứu vi học vi phẫu dược liệu 14

3.1.3 Nghiên cứu vi học bột dược liệu 17

3.2 SƠ BỘ ĐỊNH TÍNH CÁC NHÓM CHẤT TRONG DƯỢC LIỆU NGẤY HƯƠNG BẰNG CÁC PHẢN ỨNG HÓA HỌC 19

3.2.1 Phản ứng định tính Glycosid tim 19

3.2.2 Định tính Saponin trong dược liệu 20

3.2.3 Định tính hợp chất anthranoid trong dược liệu 21

3.2.4 Định tính flavonoid 22

3.2.5 Định tính coumarin 23

3.2.6 Định tính tanin 24

3.2.7 Định tính alcaloid 25

3.2.8 Định tính acid hữu cơ 25

3.2.9 Định tính đường khử 26

3.2.10 Định tính acid amin 26

3.2.11 Định tính polysaccharid 26

3.2.12 Định tính chất béo 27

3.2.13 Định tính caroten 27

3.2.14 Định tính sterol 27

3.2.15 Định tính iridoid 27

3.3 S ẮC KÝ LỚP MỎNG, XÂY DỰNG CHỈ TIÊU NHẬN BIẾT VÀ KIỂM NGHI ỆM NGẤY HƯƠNG 29

3.3.1 Xác định chỉ số tạo bọt 33

3.3.2 Xác định chỉ số phá huyết 34

3.3.3 Định lượng saponin toàn phần có trong dược liệu Ngấy hương bằng phương pháp cân 36

3.4.2 Độ ẩm 37

3.4.3 Tro toàn phần 38

3.4.4 Xác định lượng chất chiết được trong dược liệu bằng ethanol theo phương pháp chiết nóng 39

3.4.5: Xác định tỷ lệ phần trăm tạp chất trong dược liệu 40

3.5 BÀN LU ẬN 39

CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 43

4.1 K ẾT LUẬN 43

4.2 ĐỀ XUẤT 44

TÀI LI ỆU THAM KHẢO

Rf Hệ số lưu

Bảng 1 Triterpenes có trong cây Ngấy hương 8

Bảng 2 Kết quả định tính sơ bộ các chất trong dược liệu 28

Bảng 3 Tiến hành xác định chỉ số phá huyết 35

Bảng 4 Kết quả định lượng saponin toàn phần trong dược liệu 37

Bảng 5 Kết quả xác định tro toàn phần trong dược liệu 38

Bảng 6 Kết quả xác định lượng chất chiết được trong dược liệu 39

Bảng 7 Kết quả xác định tạp chất trong dược liệu 40

Hình 1 Công thức tổng quát của Triterpens trong Ngấy hương 8 Hình 2 Ngấy hương trong tự nhiên 13 Hình 3 Hình ảnh dược liệu khi đã sấy khô 14 Hình 4 Đặc điểm vi phẫu lá Ngấy hương 15 Hình 5 Đặc điểm vi phẫu thân Ngấy hương 16 Hình 6 Một số đặc điểm bột dược liệu Ngấy hương 18 Hình 7 Sắc ký đồ dịch chiết dược liệu sau khi khai triển hệ 1 30 Hình 8 Sắc ký đồ dưới đèn 254nm khi khai triển hệ 1 31 Hình 9 Sắc ký đồ dưới đèn 366 nm khi khai triển hệ 1 32 Hình 10 Sắc ký đồ sau khi phun thuốc thử hiện màu khi khai triển hệ 1 33

một trong số đó

Ngấy hương là cây bụi thân leo, thường mọc hoang ở ven rừng hoặc nơi đã phát quang bụi rậm hoặc đồi cây bụi Ngấy hương có tác dụng kích thích tiêu hóa,

bổ ngũ tạng, tăng cường sức khỏe, giải độc tiêu phù Nhằm khai thác nguồn nguyên

liệu này tại địa phương, công ty Cổ phần Dược Hà Tĩnh đã và đang tiến hành nghiên cứu để đưa vào sử dụng

Dược điển Việt Nam IV chưa có chuyên luận riêng về dược liệu Ngấy hương

Nhằm mục đích đưa dược liệu Ngấy hương vào sản xuất, năm 2012 công ty Cổ

phần Dược Hà Tĩnh đã kết hợp với bộ môn Dược Liệu – Trường Đại Học Dược Hà

Nội triển khai dự án nghiên cứu về tiêu chuẩn của nguyên liệu Ngấy Hương

Đề tài “XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN NGUYÊN LIỆU NGẤY HƯƠNG TẠI

TỈNH HÀ TĨNH” là một phần trong dự án nghiên cứu về nguyên liệu Ngấy hương

mục tiêu:

Xây dựng cơ sở dữ liệu để thành lập tiêu chuẩn kiểm nghiệm nguyên liệu

Ngấy hương

Để thực hiện được mục tiêu trên đề tài được tiến hành với những nội dung sau:

- Nghiên cứu đặc điểm vi học, hóa học của dược liệu mang tên Ngấy hương và xây dựng tiêu chuẩn định tính, định lượng nhóm chất chính có trong dược liệu Ngấy hương

- Nghiên cứu một số chỉ tiêu kiểm nghiệm khác nhằm góp phần xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cho nguyên liệu Ngấy hương

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

1.1 TỔNG QUAN VỀ HỌ HOA HỒNG (ROSACEAE)

1.1.1 Vị trí phân loại họ Hoa hồng (Rosaceae)

Theo hệ thống phân loại của Takhtajan 2009 họ Hoa hồng (Rosaceaae) thuộc bộ

Hoa hồng (Rosales), phân lớp Hoa hồng (Rosoideae), lớp Ngọc lan (Magnoliopsida), nghành Ng ọc lan (Magnoliopsida), giới thực vật (Plante)

1.1.2 Đặc điểm thực vật họ Hoa hồng (Rosaceae)

Theo sách Thực vật học, họ Hoa hồng có các đặc điểm sau:

Cây gỗ, bụi hay cây cỏ Lá đơn hoặc kép, mọc so le Có 2 lá kèm, đôi khi đính

với gốc cuống lá Hoa đơn độc hay tụ họp thành cụm hoa chùm hoặc xim Hoa lưỡng tính, đều, mẫu 5 Đế hoa phẳng, lồi hoặc lõm hình chén, miệng chén dính với

gốc lá đài và cánh hoa Đài 5, dính nhau ở gốc Tràng 5, có khi không cánh Bộ nhị thường nhiều nhị, có khi chỉ có 5 hoặc 10 nhị Bộ nhụy có nhiều lá noãn rời hoặc 1-2-5 lá noãn dính liền, mỗi lá noãn thường có 2 hoặc nhiều noãn Bầu trên hoặc dưới

Quả đóng, quả đại, quả mọng kiểu táo hay quả hạch Hạt thường không có nội nhũ [5]

1.1.3 Phân loại thực vật họ Hoa hồng

Theo sách Thực vật học, họ Hoa hồng gồm 4 phân họ:

Phân họ Thủy bìa (Spiraecoidence): Cây bụi, lá đơn mọc so le, bộ nhụy gồm 5

lá noãn rời, quả gồm các đại hoặc quả nang

Phân họ hoa hồng (Rosoideae): Lá kép 3-5 lá chét, bộ nhị thường 10 đến nhiều

nhị rời Quả tụ

Phân họ Táo tây (Maloideae): Lá đơn, nguyên, 2-5 lá noãn trong đế hoa lõm,

bầu dưới Quả mọng kiểu táo

Phân họ Mận (Prunoideae): Lá đơn, bộ nhụy có 1 lá noãn, rất ít khi 2-5, bầu trên Quả hạch

Ở Việt Nam có 20 chi, khoảng 130 loài, chủ yếu mọc hoang, một số loài được trồng làm cảnh (Hoa hồng, Đào), ăn quả (Táo, Lê, Mơ, Mận, Đào) [5]

Theo Phạm Hoàng Hộ ở Việt Nam gồm có các chi:

Chi Neillin Chi Rubus

Chi Pyracantha Chi Fragaria

Chi Sorbus Chi Duchesnea

Chi Photonia Chi Potentilla

Chi Eriobotrya Chi Geum

Chi Stranvaesia Chi Agrimonia

Chi Rhaphiolepis Chi Rosa

Chi Pyrus Chi Prunus

Chi Malus Chi Chrysobalanus

Chi Docynia Chi Parinari [9]

1.2 TỔNG QUAN VỀ CHI RUBUS

1.2.1 Đặc điểm thực vật và phân bố chi Rubus

1.2.1.1 Đặc điểm thực vật chi Rubus: Cây bụi hoặc cây bụi thấp, lá rụng sớm, đôi

khi là những cây cỏ, cây gỗ lâu năm Thân cây thẳng đứng, leo, uốn cong, hoặc phủ

phục, nhẵn hoặc có lông, thường là có gai hoặc lông, đôi khi có lông tiết, hiếm khi không có gai Lá mọc so le, có cuống lá, lá đơn, kép hình chân vịt hoặc lông chim, chia hoặc không phân chia, có răng cưa, nhẵn hoặc có lông, đôi khi có lông tiết, lá kèm dính liền với cuống lá, không chia hoặc đôi khi xẻ thùy, lâu dài hoặc rụng sớm,

gần chân của cuống lá hoặc tại đường giao nhau của thân và cuống lá Hoa lưỡng tính, hiếm khi đơn tính và cây đơn tính khác gốc, cụm hoa xim, cành hoa, hoặc ngù,

hoặc một số trong các cụm, hoặc đơn độc Đài hoa được mở rộng, đôi khi với một ống ngắn rộng, đài hoa kéo dài, thẳng đứng hay ngược lại, (4 hoặc 5-8) Cánh hoa

thường 5, hiếm khi nhiều hơn, đôi khi không đủ, trắng, hồng, đỏ, nhẵn hoặc có lông, toàn bộ mép lá, hiếm khi có đầu cụt Nhị hoa rất nhiều, đôi khi có ít, đính trên họng tràng, sợi mảnh, bao phấn đính gốc Lá noãn nhiều, hiếm khi ít, gắn trên mặt lồi của

đế hoa, mỗi lá noãn trở thành một quả hạch con hoặc quả tụ gồm nhiều quả hạch,

chỉ nhị phát triển, rủ xuống, dạng sợi mảnh, tận cùng, nhẵn hoặc có lông, núm nhụy đơn giản, có bông dính chùm Quả hạch hoặc quả bế thuộc quả hạch được tập hợp

lại trên đế hoa hình bán cầu, hình nón, hình trụ tạo thành một quả tụ, phân tách từ

đế hoa, hoặc hợp sinh với đế hoa và rơi xuống với đế hoa gắn với sự trưởng thành

và tổng hợp rắn, hạt rủ xuống, có màng vỏ ngoài của hạt, lá mầm phẳng - lồi Lá kép 5 lá chét Hoa mọc thành chùm ở nách lá, màu trắng Quả tụ gồm nhiều quả

hạch khi chín có màu đỏ ăn được [5], [19]

1.2.1.2 Phân lo ại thực vật chi Rubus: Chi Rubus là một chi lớn thuộc họ hoa hồng

gồm khoảng 700 loài phân bố nhiều nơi trên thế giới đặc biệt phong phú ở khu vực

Bắc bán cầu, một số loài ở Nam bán cầu [5], [19]

Một số loài thuộc chi Rubus điển hình [20]:

Rubus canadensis var invisus L.H Bailey – Mâm xôi Canada

Rubus coreanus Miq – Mâm xôi Triều Tiên

Rubus cuneifolius Pursh – Mâm xôi cát

Rubus fruticosus Lour – Mâm xôi đen

Rubus idaeus var sterilis Kóhler – Mâm xôi đỏ châu Âu, Phúc bồn tử

Rubus leucodermis Douglas ex Torr & A Gray – Mâm xôi vỏ trắng

Rubus occidentalis var grandiflorus Focke – Mâm xôi đen

Rubus odoratus var columbianus Millsp.– Mâm xôi hoa

Rubus allegheniensis Porter ex L.H.Bailey – Mâm xôi Allegheny

Rubus arcticus var stellatus (Sm.) B Boivin – Mâm xôi Bắc cực

Rubus spectabilis Push – Mâm xôi hồi

Rubus strigosus Michx – Mâm xôi đỏ Mỹ

Rubus saxatilis var americanus Pers – Mâm xôi đá

Ở Việt Nam giáo sư Phạm Hoàng Hộ đã xác định được 54 loài thuộc chi Rubus [9]

1.2.2 Đặc điểm một số loài thuộc chi Rubus

1.2.2.1 Rubus alceaefolius Poir Syn R.moluccanus Hook.f – Mâm xôi

Theo cây thuốc và vị thuốc Việt Nam và cây thuốc và những bài thuốc thường dùng [10], [11]:

Mô t ả: Cây nhỡ mọc trườn, thân, cành, cuống lá, cuống hoa đều có gai nhỏ Lá

đơn có cuống dài, mọc so le, phiến lá chia 5 thùy không đều, gân chân vịt, mép có răng cưa không đều nhau, mặt trên phủ nhiều lông lởm chởm, mặt dưới có lông

mềm màu xám Cụm hoa thành đầu hay chùm ở nách lá, màu hồng Quả hình cầu,

gồm nhiều quả hạch tụ họp lại như dáng mâm xôi, khi chín màu đỏ tươi

B ộ phận dùng: Quả, cành, lá (Fructus, Ramulus Rubi Alceaefolii) Quả hái lúc

chín, cành lá thu quanh năm, thái ngắn, phơi khô

Thành ph ần hóa học chính: Quả chứa các acid hữu cơ, chủ yếu là acid citric,

malic, salycilic Lá chứa tanin

Công d ụng: Quả có vị ngọt có tác dụng bổ can thận, giữ tinh khí, làm cường

dương mạnh sức Quả thường được dùng ăn chữa đau thận hư, tinh ứ, liệt dương, đái sòn, hoạt tinh, di tinh Lá có tác dụng hoạt huyết, thanh nhiệt, tán ứ, tiêu viêm Cành lá già phơi khô, nấu nước uống thay chè làm dễ tiêu hóa

Cách dùng, li ều lượng: Ngày 20-40g cành lá, 30-50g quả, dạng thuốc sắc, dùng

riêng hay phối hợp với các vị thuốc khác

1.2.2.2 Rubus parvifolius L Syn R.triphyllus Thunb – Ngấy tía, Ngấy lá nhỏ

Theo cây thuốc và những bài thuốc thường dùng và cây thuốc và động vật làm thuốc [1], [11]:

Mô tả: Cây bụi trườn, phân nhánh nhiều, nhánh mảnh, có lông và gai cong Lá mọc

so le, thường gồm 3 lá chét, lá chét tương đối nhỏ, mặt trên không lông hay phủ lông thưa, mặt dưới đầy lông nhạt hoặc xám nhạt Lá chét cuối có thùy, lá kèm hẹp, cao 3-5 mm Ngù hoa ở ngọn, cao 4-5cm, hoa hồng, rộng cỡ 1cm, đài đầy lông, có gai nhỏ, cánh hoa cao 5mm, nhị nhiều, lá noãn cỡ 30 Quả hình bán cầu, màu đỏ, vị chua ngọt, ăn ngon

Bộ phận dùng: Toàn cây (Herba Rubi Parvifolli), thu hái vào mùa hè, rễ thu hoạch

vào mùa đông, dùng tươi hoặc phơi khô dùng dần

Thành phần hóa học chính: Carbohydrat, flavonoid, saponin, acid hữu cơ, tanin Công dụng: Quả ăn được, cây dùng trị thổ huyết, đòn ngã, dao chém bị thương, phụ

nữ có mang đau bụng, lỵ, trĩ, mụn ghẻ Cành lá sắc nước rửa viêm da, giã nát đắp mụn nhọt độc Rễ dùng chữa cảm mạo, sốt cao, sưng hầu họng, chữa viêm gan truyền nhiễm, gan lách sưng to, chữa ho ra máu, viêm thận, thủy thũng, viêm nhiễm đường tiết niệu Chữa đòn ngã ứ đau, phong thấp đau xương Hoa vắt lấy nước, bôi mặt trị tàn nhang

Cách dùng, liều lượng: Ngày dùng 15-30g rễ khô, dạng thuốc sắc, dùng riêng hay

phối hợp với các vị thuốc khác

Bài thuốc:

1 Chữa viêm đường tiết niệu: Ngấy tía, rau Má lông, Kim tiền thảo, mỗi vị 30g, sắc uống

2 Chữa thấp khớp: Ngấy tía 30g, Cúc chỉ thiên 15g, Hy thiêm 10g, sắc nước uống

3 Chữa ho ra máu thổ huyết: Ngấy tía, Thiên thảo, cây Cứt lợn, Mạch môn, Thanh thiên, mỗi vị 20g, sắc nước uống

4 Chữa gan lách to: Rễ Ngấy tía 30g, Thóc lép 30g, sắc nước uống

1.2.2.3 Rubus rosaefolius Sm – Ngấy lá hồng

Theo từ điển cây thuốc Việt Nam và Cây cỏ Việt Nam [7], [9]:

Mô tả: Cây bụi sống nhiều năm có thể cao đến 2-3m với thân có lông mịn, có gai

nhỏ, cong hay thẳng Lá mọc so le, kép, có cuống, với 5-7 lá chét mọc đối, xoan thon, dài 2-4 (3-7) cm, rộng 1-2 (1-3) cm, có lông, gân phụ 8-10 cặp, mép có răng kép, lá kèm hẹp, nhọn Hoa 1-3 ở ngọn nhánh, thơm, có tuyến, có cuống, cuống hoa 2-3cm, lá dài thon nhọn, dài ra, có lông gập xuống cánh hoa tròn, trắng, nhị nhiều,

lá noãn nhiều Quả thành đầu tròn, to 2cm, màu đỏ

Bộ phận dùng: Rễ, lá (Radix et Folium Rubi Rosaefolii)

Phân bố: Nam Phi, Ấn độ, Nam Trung quốc, Nam Nhật bản, Úc, Indonesia, Việt

Nam Ở nước ta thường gặp ở rừng thưa, vùng núi trên 1000m ở Lào Cai, Lạng Sơn, Cao Bằng Cũng thường gặp trên các đồi, rừng, quanh các làng, bụi rậm Thu hái vào mùa hè và mùa thu, rửa sạch, dùng tươi hoặc phơi khô dùng dần

Tính vị, tác dụng: Vị hơi đắng, ngọt và chát, tính mát có tác dụng thanh nhiệt, thu

liễm, trừ ho, cảm mạn

Công dụng: Quả ăn được, hoa thơm Rễ khô dùng sắc uống chữa đau bụng (Lào

Cai) Ở Trung quốc được dùng để điều trị ho do viêm phổi, ho gà, khái huyết, đau răng, mồ hôi trộm, đau cơ và xương Liều dùng 15-30g dạng thuốc sắc Nghiền hạt hay lá và hòa với dầu vừng để bôi vào chỗ bỏng lửa hoặc bỏng nước Có nơi người

ta dùng nước nấu lá uống để điều trị chứng tim đập nhanh

Bài thuốc:

1 Ra mồ hôi trộm: Rễ Ngấy lá hồng 15g, nấu canh với thịt lợn, ăn

2 Đau cơ xương đòn ngã: Rễ Ngấy hồng, ngâm rượu uống Bên ngoài giã chồi non đắp vào vết thương

1.2.2.4 Rubus cochinchinensis Tratt – Ngấy hương

Mô t ả: Cây bụi, mọc dựa vào thân cây khác, phân cành nhiều, cành vươn dài, có gai

nhỏ cong về phía gốc Lá kép có 5 lá chét, lá chét giữa lớn hơn cả, những lá ở trên

có 3 lá chét hình mũi mác, mặt trên lá màu xanh, mặt dưới có lông màu trắng ngà

hoặc vàng sẫm, mép lá khía răng cưa, cuống chung dài, có gai Hoa trắng mọc thành chùm ở nách lá gần ngọn Quả hình cầu gồm nhiều quả hạch con, màu đỏ [11]

B ộ phận dùng: Thân, lá, quả (Caulis, Folium et Fructus Rubi Cochinchinensis)

Thu hái thân, lá quanh năm phơi khô dùng dần [1], [11], [13]

Hình 1: Công thức tổng quát của Triterpens trong Ngấy hương

B ảng 1: Triterpenes có trong cây Ngấy hương

STT X R1 R2 Tên hợp chất

1 O H CH3 2-Oxo-Pomolic acid

2 α-OH9H H CH3 Tormentic acid

3 α-OH9H Glc COOH Suavissimoside F1

4 α-OAc9H Glc COOH O-Acetylsuavissimoside F1

Phân b ố:

Theo tài liệu Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam:

Phân bố chủ yếu ở Việt Nam rải rác ở Lào, Campuchia, phía Nam Trung Quốc, biên giới Việt Trung Hầu hết có mặt ở các tỉnh vùng núi phía thấp (dưới 1000m) trung du, đôi khi có ở đồng bằng Ở Việt Nam cây mọc hoang ở khắp các rừng núi nước ta thường mọc ở ven rừng hoặc nơi đã phát quang bụi rậm, đồi cây bụi, rừng

thứ sinh đã qua nhiều lần khai thác liên tục [10]

Tác d ụng dược lý

- Trên protein huyết: Dùng cao nước quả Ngấy hương cho chuột nhắt trắng

uống trong nhiều ngày kết hợp với chế độ ăn thiếu protein thấy hàm lượng protein toàn phần và albumin tăng so với lô đối chứng không dùng thuốc Kết quả trên do

Ngấy hương làm giảm quá trình dị hóa hoặc làm tăng quá trình đồng hóa protein [1], [13]

Công d ụng

- Ngấy hương có vị chua, hơi ngọt, tính bình, mùi thơm nhẹ, vào kinh tỳ thận,

có tác dụng giúp tiêu hóa, bổ ngũ tạng, ích tinh khí, giải độc tiêu phù [1], [7]

- Quả Ngấy hương ăn ngon và bổ dưỡng Thân lá phơi khô thái nhỏ, sao thơm,

sắc uống thay chè, dùng cho phụ nữ mới đẻ, chóng lại sức, ăn được và cho người tiêu hóa kém, ăn không tiêu, đầy bụng, phù thũng, viêm gan, vàng da Uống lâu thì

trừ được hàn thấp, đẹp da, đen tóc, nhẹ mình, sống lâu Thân lá không sao, sắc uống

giải nhiệt và phối hợp với các vị thuốc khác để điều trị đái vàng, đái buốt Liều dùng hàng ngày 6-12 g quả hoặc 15-30g thân lá, ngày uống từ 2-3 lần trước bữa ăn chính [1], [13]

Bài thu ốc có Ngấy hương

- Chữa phù thũng: Ngấy hương 20g, Rễ cỏ tranh 10g, Cỏ mần trầu 10g Tất cả thái nhỏ, sao vàng sắc với 400ml nước, còn 100ml chia 2 lần uống trong ngày Nếu

đi tiểu ra máu thêm 10g cây Dừa cạn

- Chữa cảm thấp, nôn mửa, gai lạnh, ăn không tiêu: Lá Ngấy hương 40-50g phơi khô, sắc uống Có thể phối hợp với Gừng sống 3g, Lá sả 20g

- Chữa vàng da: Ngấy hương 20g, Lá vằng 20g Hai thứ phơi khô, tán nhỏ, sắc

- Giảm kích thước khối u, giảm rối loạn tiểu tiện:Ngày uống 2 lần, mỗi lần một gói Hoàn Xích Hương (Xích đồng nam, Ngấy hương, Thục địa, Hoài sơn, Đơn bì,

Bạch linh, Trạch tả, Mật ong, tá dược vừa đủ 12.5g), uống với nước chín, đợt điều trị từ 3-4 tuần [Thử nghiệm thực tế tại bệnh viện Y học cổ truyền Hà Tĩnh]

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP

2.1 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU

2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu

Nguyên liệu nghiên cứu là mẫu dược liệu được lấy tại tỉnh Hà Tĩnh, đơn vị lấy

mẫu là công ty Cổ phần Dược Hà Tĩnh:

- Mẫu dược liệu Ngấy hương 1 (T1) lấy vào tháng 12/2012

- Mẫu dược liệu Ngấy hương 2 (T2) lấy vào tháng 3/2013

2.1.2 Phương tiện nghiên cứu

- Thuốc thử: các thuốc thử dùng trong phản ứng định tính và sắc ký

- Bản mỏng tráng sẵn silicagel GF254 của Merck

- Dụng cụ: dụng cụ thủy tinh và các dụng cụ khác dùng trong phòng thí nghiệm (cốc có mỏ, bát sứ, chày, cối, thuyền tán, đũa thủy tinh, lam kính, bình nón…)

- Bộ dụng cụ: Shohxlet

2.1.2.2 Thiết bị dùng trong nghiên cứu

- Kính hiển vi Labomed

- Cân kĩ thuật Sartorius

- Cân phân tích Precisa

- Máy cất thu hồi dung môi Buchi

- Tủ sấy

- Máy đo độ ẩm Sartorious

- Lò nung Nabertherm

- Máy chấm sắc ký CAMAG LINOMAT 5

- Máy chụp ảnh sắc ký CAMAG REPROSTAR 3

- Máy vi tính với phần mềm winCATS và VideoScan

- Máy ảnh canon, samsung 12.1

2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Phương pháp xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm và kiểm định phương pháp theo Dược Điển Việt Nam IV [6]

2.2.1 Kiểm nghiệm bằng phương pháp nghiên cứu hiển vi

- Đặc điểm vi phẫu: Mẫu dược liệu (thân, lá) được cắt vi phẫu bằng máy cắt

bằng tay, tẩy và nhuộm theo phương pháp nhuộm kép, quan sát dưới kính hiển vi xác định đặc điểm vi phẫu và chụp ảnh các đặc điểm vi phẫu dưới kính hiển vi

nhằm góp phần xây dựng tiêu chuẩn nguyên liệu [12], [3]

- Soi bột: lá, thân dược liệu được nghiền nhỏ thành bột bằng thuyền tán và cối

sứ, rây lấy bột mịn, lên tiêu bản và quan sát, chụp ảnh dưới kính hiển vi để xác định các đặc điểm bột theo tài liệu [12], [3]

2.2.2 Kiểm nghiệm bằng phương pháp hóa học

- Định tính các nhóm chất có trong mẫu dược liệu bằng phản ứng hóa học [8]

- S ắc ký lớp mỏng

+ Sử dụng bản mỏng Silicagel tráng sẵn của Merck Chấm sắc ký bằng máy

chấm sắc ký CAMAG LINOMAT 5, hiện vết bằng đèn ở các bước sóng 254nm và 366nm, phun thuốc thử hiện màu Vanilin / Ethanol / H2SO4 Chụp ảnh sắc ký

2.2.3 Kiểm nghiệm các chỉ tiêu vật lý, hóa lý

- Cảm quan: Quan sát, mô tả đặc điểm

- Độ ẩm dược liệu: Tiến hành theo Dược điển Việt Nam IV phụ lục 12.11

- Tro toàn phần: Tiến hành theo Dược điển Việt Nam IV phụ lục 9.8

- Xác định lượng chất chiết được bằng phương pháp chiết nóng: Tiến hành theo Dược điển Việt Nam IV phụ lục 12.10

2.3 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU:

Sử dụng MS Excel để xử lý các bảng số liệu

CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

3.1 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM VI HỌC DƯỢC LIỆU NGẤY HƯƠNG

3.1.1 Mô tả về cây Ngấy hương

Ngấy hương là cây bụi, thân leo, lá rụng sớm Trên thân có gai nhỏ mọc cong

về phía gốc Lá mọc so le, có cuống lá, lá kép hình chân vịt gồm 5 lá chét đôi khi có

3 lá chét, mép có răng cưa nhọn không đều Lá chét ở giữa lớn hơn lá chét ở bên Lá hình bầu dục, đáy hình nêm, đỉnh nhọn, mặt trên nhẵn, mặt dưới có lông mịn

Hình 2: Ngấy hương trong tự nhiên

- Dược liệu dùng để làm thuốc là phần trên của cây chủ yếu bao gồm cành, lá được sấy khô

Hình 3: Hình ảnh dược liệu khi đã sấy khô

3.1.2 Nghiên cứu vi học vi phẫu dược liệu

Mẫu dược liệu bao gồm cả thân và lá → tiến hành làm riêng vi phẫu lá và

vi phẫu thân của dược liệu để quá trình xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm được rõ ràng

* Ti ến hành:

- Làm mềm (lá, thân) bằng phương pháp làm mềm nóng [3], cắt bằng máy cắt vi phẫu cầm tay, chọn các lát cắt mỏng

- Tấy lát cắt dược liệu bằng Cloramin B đã pha bão hòa tới khi lát cắt

trắng hoàn toàn để tẩy sạch các chất trong tế bào, chỉ giữ lại màng tế bào và tinh thể nhằm quan sát tiêu bản dễ hơn

- Rửa sạch bằng nước cất nhiều lần

- Ngâm Cloralhydrat trong 10 phút để tẩy tinh bột khoai còn dính trên lát

cắt và cũng làm tiêu bản sáng hơn

- Rửa lại nhiều lần bằng nước

- Ngâm trong dung dịch acid acetic 5% để tấy Clorid của Cloramin B và Cloralhydrat còn sót lại

- Nhuộm Xanh methylen (đã pha loãng theo tỷ lệ 1:4) trong vòng 1 phút

- Rửa sạch nhiều lần bằng nước cất

- Nhuộm đỏ son phèn trong 1 giờ

- Rửa sạch nhiều lần bằng nước cất

- Đặt vi phẫu vào một giọt nước cất trên phiến kính, đậy lamen, soi trên kính hiển vi

* K ết quả:

- Đặc điểm vi phẫu của lá Ngấy hương:

Hình 4: Đặc điểm vi phẫu lá Ngấy hương

1 Lông che chở 2 Biểu bì gân 3 Mô dày 4 Gỗ 5 Libe

6 Mô cứng 7 Mô mềm 8 Biểu bì phiến 9 Mô giậu 10 Mô xốp

Mô tả:

- Phần gân lá: Cả gân trên và gân dưới đều lồi, gân trên lồi nhiều hơn Biểu bì trên và dưới cấu tạo bởi một hàng tế bào hình trứng xếp liên tục, đều đặn, thành hóa cutin Phần biểu bì trên mang lông che chở Mô dày trên và dưới cấu tạo từ 2-4 lớp

tế bào hình tròn, thành dày, xếp sát dưới lớp biểu bì Mô mềm là những tế bào hình

đa giác hay tròn, thành mỏng, có kích thước không đều nhau Ở giữa gân là bó

libe-gỗ, libe tạo thành vòng bao quanh bó gỗ, bó gỗ xếp hình cung Vòng tế bào mô

cứng nằm sát ngay lớp libe

- Phần phiến lá: Biểu bì trên và dưới cấu tạo bởi một hàng tế bào hình chữ nhật,

xếp gần nhau đều đặn, thành tế bào hóa cutin Bên dưới hàng tế bào biểu bì trên là hàng tế bào mô giậu gồm những tế bào xếp thẳng, hẹp, vách mỏng Ở giữa phiến lá

là các mô xốp vách mỏng có hình tròn hay hình bầu dục xếp liền nhau

- Đặc điểm vi phẫu của thân Ngấy hương:

Hình 5 : Đặc điểm vi phẫu thân Ngấy hương

1 Biểu bì 2 Mô dày 3 Mô mềm ruột 4 Libe

5 Lông che chở 6 Mô cứng 7 Gỗ

Mô tả:

- Từ ngoài vào trong gồm có: Biểu bì gồm các tế bào hình chữ nhật xếp đều đặn thành vòng đồng tâm và dãy xuyên tâm Trên lớp biểu bì có mang lông che chở

Mô dày gồm nhiều hàng tế bào dẹt nằm ngang, thành mỏng Libe xếp thành từng

bó, phía ngoài mỗi bó là các tế bào mô cứng ôm sát bó libe Vòng gỗ khá dày gồm các mạch gỗ lớn riêng lẻ hay xếp thành từng đám trong mô mềm gỗ Mô mềm ruột

gồm những tế bào hình tròn hoặc đa giác thành mỏng

3.1.3 Nghiên cứu vi học bột dược liệu

* Ti ến hành

Sấy khô dược liệu (lá, thân) trong tủ sấy ở nhiệt độ 600

C sau đó dùng thuyền tán và chày cối sứ nghiền nhỏ Rây lấy bột mịn, dùng kim mũi mác lấy

bột dược liệu cho lên phiến kính đã nhỏ sẵn một giọt nước cất, đặt lamen lên và quan sát dưới kính hiển vi Xác định những đặc điểm vi học của bột Ngấy

hương và chụp lại ảnh bằng máy ảnh

* K ết quả:

- Đặc điểm vi học bột dược liệu Ngấy hương: Tiến hành trên mẫu dược

liệu thu hái tháng 3/2013

+ Đặc điểm bột: bột màu vàng, mùi thơm, không vị

+ Soi trên kính hiển vi thấy các đặc điểm:

Mảnh bần (1) cấu tạo từ những tế bào hình đa giác Bó sợi (2) gồm nhiều các sợi mỏng tập hợp lại Lông che chở đơn bào (5), đôi khi đứng tập trung thành đám Thường bắt gặp các mảnh mô mềm mang tinh bột (4), đôi khi mang lỗ khí (3) Mảnh mạch điểm (8), mạch xoắn (9) Thể cứng (10) Tinh bột (11) thường hình tròn có đường kính khoảng 0.005 mm - 0.02 mm Rải rác đôi khi bắt gặp các tinh thể calci oxalat hình khối (6) kích thước khoảng 0.02 mm - 0.035 mm

Hình 6: Một số đặc điểm bột dược liệu Ngấy hương

1 Bần 2 Bó sợi 3 Biểu bì chứa lỗ khí 4 Mô mềm mang tinh bột

5 Lông che chở 6 Tinh thể calcioxalat 7 Tế bào chứa chất nhựa

8 Mảnh mạch điểm 9 Mạch xoắn 10 Mô cứng 11 Tinh bột

* Nh ận xét: Kiểm nghiệm dược liệu bằng phương pháp hiển vi giúp ta nhận

biết, phân biệt được dược liệu Ngấy hương qua hình ảnh vi phẫu và một số đặc điểm tiêu biểu ở bột như: Lông che chở, mô mềm mang tinh bột, mô cứng… Đây là phương pháp đơn giản nhưng hiệu quả và có tính chính xác cao