Nghiên cứu thành phần hóa học và thử độc tính cấp của cây sâm cau (curculigo orchioides gaertn )

Đồng bào các dân tộc thường sử dụng thân rễ cây sâm cau thường gọi là tiên mao như một loại thuốc bổ - có thể dùng riêng hoặc kết hợp cùng với các vị thuốc khác - để điều trị các bệnh nh

NGUYỄN THỊ VÂN LY

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ THỬ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA CÂY SÂM CAU

(Curculigo orchioides Gaertn.)

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SỸ KHÓA 65

HÀ NỘI -2015

NGUYỄN THỊ VÂN LY

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ THỬ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA CÂY SÂM CAU

(Curculigo orchioides Gaertn.)

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SỸ

Người hướng dẫn:

PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển

DS Nguyễn Bích Ngọc Nơi thực hiện:

Bộ môn Dược học cổ truyền Viện Dược liệu

HÀ NỘI - 2015

đến thầy giáo, PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển, người thầy đã tận tình hướng dẫn em

trong suốt quá trình thực hiện khóa luận

Em cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến DS Nguyễn Bích Ngọc đã hướng

dẫn, đóng góp những kinh nghiệm quý báu và hỗ trợ tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp em hoàn thành khóa luận này

Em xin chân thành cảm ơn các thầy cô, anh chị Khoa Hóa phân tích – Tiêu chuẩn, Khoa Dược lý Sinh hóa -ViệnDược liệu đã giúp đỡ em trong suốt thời gian

Em xin chân thành cảm ơn!!!

Hà Nội, ngày 14 tháng 5 năm 2015

Sinh viên

Nguyễn Thị Vân Ly

1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, PHÂN BỐ CỦA CHI

CURCULIGO GAERTN 2

1.1.1 Vị trí phân loại của chi Curculigo Gaertn 2

1.1.2 Đặc điểm thực vật, phân bố chi Curculigo Gaertn 2

1.2 CÂY SÂM CAU CURCULIGO ORCHIOIDES GAERTN 4

1.2.1 Đặc điểm thực vật và phân bố cây sâm cau 4

1.2.2 Thành phần hóa học 5

1.3 ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CURCULIGO ORCHIODES GAERTN 10

1.3.1 Độc tính 10

1.3.2 Tác dụng sinh học 11

1.3.3 Công dụng của sâm cau theo y học cổ truyền 15

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18

2.1 NGUYÊN LIỆU 18

2.2 PHƯƠNG TIỆN 18

2.2.1 Thiết bị, dụng cụ 18

2.2.2 Dung môi, hóa chất thuốc thử 18

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19

2.3.1 Xác định mẫu nghiên cứu 19

2.3.2 Nghiên cứu định tính các nhóm chất trong dược liệu và trong các cắn n-hexan, ethyl acetat và n-butanol bằng phản ứng hóa học 19

2.3.3 Nghiên cứu định tính các nhóm chất trong dược liệu bằng phương pháp sắc kí lớp mỏng 19

2.3.4 Nghiên cứu chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc của các chất 19

2.3.5 Phương pháp thử độc tính cấp 20

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 22

3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC 22 3.1.1 Định tính các nhóm chất hữu cơ trong thân rễ sâm cau bằng phản ứng hóa học 22

phương pháp sắc kí lớp mỏng 29

3.2 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 34

3.2.1 Trong phân đoạn n-hexan 34

3.2.2 Trong phân đoạn ethyl acetat 36

3.3 THỬ ĐỘC TÍNH CẤP 40

3.3.1 Kết quả xác định hàm ẩm dược liệu và cao dược liệu 40

3.3.2 Kết quả thí nghiệm 41

BÀN LUẬN 43

 VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 43

 VỀ CHẤT PHÂN LẬP ĐƯỢC 43

 VỀ ĐỘC TÍNH CẤP 45

KẾT LUẬN 46

ĐỀ XUẤT 46

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

hóa học 26

Bảng 2: Kết quả định tính cắn các phân đoạn bằng phản ứng hóa học 28

Bảng 3: Bảng giá trị Rf của các vết ở phân đoạn n-hexan 30

Bảng 4: Bảng giá trị Rf của các vết ở phân đoạn ethyl acetat 31

Bảng 5: Bảng giá trị Rf của các vết ở phân đoạn n-butanol 32

Bảng 6: Số liệu phổ 1H (500 MHz) và 13C-NMR (125 MHz) của hợp chất SC2 39

Bảng 7: Kết quả xác định hàm ẩm thân rễ sâm cau 40

Bảng 8: Kết quả xác định hàm ẩm của cao thân rễ sâm cau 40

Bảng 9: Số liệu thử độc tính cấp của cao chiết sâm cau 42

Hình 2: Sơ đồ chiết xuất và phân đoạn các chất từ thân rễ sâm cau 27 Hình 3: Sắc kí đồ sắc kí lớp mỏng định tính cắn phân đoạn n-hexan với hệ III 29 Hình 4: Sắc kí đồ sắc kí lớp mỏng định tính cắn phân đoạn ethyl acetat với hệ II 31 Hình 5: Sắc kí đồ sắc kí lớp mỏng định tính cắn phân đoạn n-butanol với hệ III 32 Hình 6: Sắc kí đồ sắc kí lớp mỏng định tính sự có mặt của hợp chất phenolic trong 2 cắn n-hexan và ethyl acetat 33 Hình 7: Sắc kí đồ sắc kí lớp mỏng thể hiện sự có mặt của alcaloid trong thân rễ sâm cau 34 Hình 8: Quy trình phân lập hợp chất SC1 từ cắn n-hexan của thân rễ sâm cau 35 Hình 9: Sắc kí đồ định tính sự có mặt của SC1 phân lập đƣợc trong cắn phân đoạn n-hexan và hợp chất β - sitosterol chuẩn 35 Hình 10: Công thức cấu tạo hợp chất SC1 β-sitosterol 36 Hình 11: Quy trình phân lập hợp chất SC2 từ cắnethyl acetat của thân rễ sâm cau 37 Hình 12: Sắc kí đồ định tính sự có mặt của SC2 phân lập đƣợc trong cắn phân đoạn ethyl acetat 38 Hình 13: Công thức cấu tạo SC2 Orcinol-3-O-β-D-glucosid 40

AST : Aspartate aminotransferase

SKLM, TLC : Sắc ký lớp mỏng

VEGF : Yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu

δ : Độ dịch chuyển hóa học (đơn vị tính là ppm)

ĐẶT VẤN ĐỀ

Cây sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) thuộc họ Tỏi voi lùn

(Hypoxidaceae) Trong y học cổ truyền Trung Quốc, thân rễ sâm cau được tán thành bột hoặc, sắc nước làm thuốc bổ, trị suy nhược cơ thể, đau lưng, viêm khớp

và viêm thận mạn tính Ở Ấn Độ, Nepal và Philippin thân rễ sâm cau dùng làm thuốc lợi tiểu, tăng cường chức năng tình dục, chữa bệnh ngoài da, loét dạ dày tá tràng, trĩ, lậu…Sâm cau còn là thành phần chính trong bài thuốc cổ truyền điều trị sỏi tiết niệu của Ấn Độ [16], [56]

Theo Y học cổ truyền Việt Nam, sâm cau có vị cay, tính ấm, có tác dụng trợ dương, trừ hàn, cường dương, mạnh gân xương Đồng bào các dân tộc thường sử dụng thân rễ cây sâm cau (thường gọi là tiên mao) như một loại thuốc bổ - có thể dùng riêng hoặc kết hợp cùng với các vị thuốc khác - để điều trị các bệnh như: liệt dương, đau lưng, viêm khớp, viêm thận, vàng da, vô sinh [16].Mặc dù đã được sử dụng từ lâu trong y học cổ truyền, nhưng chưa có nhiều nghiên cứu về thành phần hóa học và tác dụng dược lý của cây sâm cau ở Việt Nam được công bố Căn cứ tài liệu tham khảo chúng tôi thu thập được, đến nay mới chỉ có công bố của Nguyễn Duy Thuần và cộng sự (2001), về một số kết quả nghiên cứuthành phần hóa học; tác dụng chống oxy hóa và tác dụng tăng lực của sâm cau thu hái tại Tuyên Quang [15]

Để có thêm cơ sở khoa học cho việc sử dụng sâm cau làm thuốc, đồng thời phát huy hơn nữa giá trị, vai trò của cây sâm cau trong y dược học, chúng tôi tiến

hành đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học và thử độc tính cấp của cây sâm

cau – Curculigo orchioides Gaertn., họ Hypoxidaceae” với các mục tiêu sau:

- Chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc 1-2 chất tinh khiết từ thân rễ sâm cau

- Đánh giá độc tính cấp của cao chiết cồn thân rễ sâm cau

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

CURCULIGO GAERTN

1.1.1 Vị trí phân loại của chiCurculigo Gaertn

Theo Phạm Hoàng Hộ và Đỗ Tất Lợi chiCurculigo Gaertn được xếp trong họ Amaryllidaceae [12], [10] Theo Vũ Văn Chuyên, chi Curculigo Gaertn trước đây

cũng được xếp vào họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) nhưng hiện giờ được tách ra thành họ Hypoxidaceae[7]

Theo phân loại chiCurculigoGaertn dựa trên hệ thống phân loại của A L

Takhtajan năm 1987 về nhóm thực vật có hoa và các nhóm thực vật bậc cao có mạch khác, chỉnh lý một phần theo hệ thống năm 1996 của A L Takhtajan [3], [6]

+ Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta)

+ Lớp Hành (Liliopsida)

+ Phân lớp Hành (Liliidae)

+ Bộ Haemodorales

+ Họ Tỏi voi lùn (Hypoxidaceae)

+ Chi Curculigo Gaertn

1.1.2 Đặc điểm thực vật, phân bố chi Curculigo Gaertn

Đặc điểm thực vật chi Curculigo G

Cây thảo, sống lâu năm thường có thân rễ củ Lá hình ngọn giáo hoặc hình dải, thường xếp nếp, thường mọc từ rễ Cụm hoa chùm, hình trứng hoặc hình đầu, ở ngọn một cán hoa mọc từ rễ, dài nhiều hay ít Hoa có cuống hoặc không, màu vàng, bao hoa đính trực tiếp trên bầu hoặc trên một mỏ dài nằm trên bầu Lá đài 3, tràng

3, rời, hầu như giống nhau về hình dạng và kích thước, trải ra thành hình sao Nhị 6 xếp hai dãy, không có chỉ nhị hoặc trên một chỉ nhị dài; bao phấn dài có 2 ô sát nhau, song song, hướng trong Bầu hạ, 3 ô có nhiều noãn Quả không mở, có vỏ quả mỏng có mỏ hoặc không [6]

Phân bố của chi Curculigo G

Trong chi Curculigo thì loài Curculigo orchioides Gaertn được phân bố rộng

rãi, nó được tìm thấy ở Ấn Độ, Trung Quốc, Nhật Bản, Thái Lan, Lào, Campuchia,

Malaixia, Philippin, Indonexia, Pakistan, Papua New Guinea…Trong “Những cây

thuốc và vị thuốc Việt Nam”, Đỗ Tất Lợi chỉ đề cập đến 1 loài là Curculigo orchioides Gaertn Ở nước ta, Curculigo orchioides Gaertn hay còn gọi là sâm cau

(ngải cau…) phân bố ở Sơn La, Cao Bằng, Lạng Sơn, Ba Vì, Hòa Bình, Ninh Bình,

Hà Nam, Đà Nẵng, Quảng Nam, Kon Tum, Lâm Đồng, Bà Rịa-Vũng Tàu [12], [17], [6]

Trong “Cây cỏ Việt Nam” theo Phạm Hoàng Hộ, chi CurculigoGaertn ở Việt Nam hiện có khoảng 7 loài [10] Theo Võ Văn Chi, chi Curculigo Gaertn ở Việt Nam có 7-8 loài, nhưng thường thấy 5 loài sau là: C capitulata (Lour.) Kuntze,

C.disticha Gagnep, C.latifolia Dryand, C gracilis (Kurz) Hook.f., C orchioides

Gaertn [5]

Curculigo capitulata (Lour) O Ktze

Tên Việt Nam: Sâm cau lá lớn, Cồ nốc lan

Phân bố: phân bố ở Lạng Sơn, Hà Nội, Hòa Bình đến Đồng Nai, cây thường mọc

dưới tán rừng xanh, ẩm, những nơi ẩm ướt, độ cao từ 300 – 2200m[1], [7]

Curculigo latifolia Dryand Ex Ait

Tên thường gọi: Cồ nốc lá rộng, Sâm cau lá rộng

Phân bố: Ở nước ta có gặp ở Kontum, Lâm Đồng, Ninh Thuận và Bình Dương [6]

Curculigo disticha Gagn

Tên Việt Nam: Cồ nốc song đính, cồ nốc hai hàng, rau báo rừng

Phân bố: Ở nước ta có gặp từQuảng Trị vào Gia Lai và Đồng Nai, có trồng ở thảo

cầm viên ở thành phố Hồ Chí Minh

Curculigo tokinensis Gagn

Tên Việt Nam: Cồ nốc Bắc Bộ

Phân bố: Đà Lạt

Curculigo gracilis (Kurz) Hook.f

Tên Việt Nam: Tam lăng, Cồ nốc mảnh, Lòng thuyền, tiên mao hoa thưa

Phân bố: Ở Việt Nam gặp ở Lào Cai, Hà Tây, Ninh Bình vào đến Quảng Trị cây

thường mọc ở nơi rừng rậm, ẩm ướt, độ cao 1000 m[6], [10]

1.2.1 Đặc điểm thực vật và phân bố cây sâm cau

Tên Việt Nam: sâm cau, ngải cau, cồ nốc lan [9], [6]

Cây thảo, lâu năm, cao khoảng 20 -40 cm Thân rễ mập, hình trụ dài, mọc thẳng, thót lại hai đầu, mang nhiều rễ phụ [18], [37] Lá 3-6 hình , mọc tụ họp thành túm, xếp nếp tựa như lá cau, dài 20 -30 cm, rộng 2,5 – 3 cm, gốc thuôn, đầu nhọn, hai mặt nhẵn gần như cùng màu, gân song song rất rõ, bẹ lá to và dài, cuống lá dài khoảng 6 -10 cm

Cụm hoa nằm trên một trục ngắn và mảnh giữa các bẹ lá, gồm 3– 5 hoa màu vàng Lá bắc hình trái xoan nhọn, lá đài 3 có lọng dài ở lưng; tràng 3 cánh nhẵn; nhị

6 xếp thành hai dãy, chỉ nhị ngắn; bầu hình thoi có lông rậm kéo dài thành mỏ; đầu nhụy hình trái xoan, chia 3 nhánh mập [2], [12], [16], [6] Quả nang, thuôn, dài 1,2 – 1,5 cm chứa 1 – 4 hạt cây sinh trưởng tốt trong mùa mưa ẩm, ra hoa quả hàng năm, mùa hoa là tháng 5 -7 [16]

Bộ phận dùng: thân rễ

Phân bố: ở nhữngvùng núi cao 1600m, phía Nam và Tây Nam Trung Quốc;

Campuchia, Ấn Độ, Indonesia, Nhật Bản, Lào, Myanmar, Pakistan, Papua New Guinea, Philippines, Thái Lan, Việt Nam Ở Việt Nam: cây mọc trên các đồi cỏ nơi

ẩm mát vùng núi như Lai Châu, Tuyên Quang, Cao Bằng [6]

Hình 1: Hình ảnh Curculigo orchioides Gaertn [PL1]

1.2.2 Thành phần hóa học

Hiện nay trên thế giới đã có nhiều nghiên cứu về thành phần hóa học của sâm cau, các hợp chất được công bố bao gồm: phenolic glycosid [75], [81], [83]; một hợp chất lignan [25]; các hợp chất aliphatic hydroxyl ketones [49], [50], [51], [53]; các saponin thuộc nhóm cycloartan và nhóm ursan [52], [62], [76], [77], [78], [79], [80], [84]; flavone [56]; alkaloid [55], [56], [62] Bên cạnh đó cây còn chứa các thành phần khác: steroids; đường tự do như glucose, manose, xylose; mucilage; hemicelluloses; polysaccharid và glucoronic acid [28], [56]

Nghiên cứu trong nước về thành phần hóa học của loài Curculigo orchioides

Gaertn là rất ít Cho đến nay chúng tôi mới chỉ thấy nghiên cứu của Nguyễn Duy Thuần và Nguyễn Thị Phương Lan (2001), đã nhận dạng được loài sâm cau mọc hoang ở Sơn Dương, Hà Giang, sơ bộ kết luận rễ sâm cau Việt Nam chứa phytosterol, đường khử, saponin, chất béo, carotene và phân lập được một hợp chất

tinh khiết từ dịch chiết aceton – nước là 4-hydroxy-3-methoxybenzoicacid [11]

Michinor Kubo (1983) cùng các cộng sự đã phân lập từ thân rễ sâm cau một

phenolic glucosid mới đặt tên là curculigoside A (1) [40] Fu Daxu và công sự (2004), thân rễ sâm cau có chứa curculigosid C (3), curculigoside A (1), curculigoside B (2) và 2, 6-dimethoxylbenzoic acid [33] Trong nghiên cứu của

Josep Vall và cộng sự (2006), đã phân lập từ cây sâm cau hai phenolic cũ là

curculigoside A (1),curculigoside B (2) và hai phenolic mới là curculigoside C (3)

Curculigoside D (4)(Orchioside A) H OH OCH3 [35], [68]

Dall’ Acqua và cộng sự cũng đã phân lập và xác định đƣợc cấu trúc của hai

phenolic glycosid trong thân rễ của loài C.orchioides thu tại tỉnh Nawalparasi

(Nepal), là curculigoside E (5)và orchioside D (6) [30]

Xu J.P và cộng sự đã xác định đƣợc cấu trúc của curculigine B: 2, 4 -

dichloro - 3 - methyl - 5 - methoxyphenol - O - β - D - apiofuranosyl (1 6) - β - D

- glucopyanoside (7);và curculigine C:2, 4, 6 -trichloro - 3 - methyl - 5 -

methoxyphenol - O - β - D - xylopyranosyl (1 6) - β - D -glucopyranoside (8)

[75]

Curculigine C Curculigine B

Từ thân rễ Curculigo orchioides Gaertn, Garg cùng cộng sự (1989) đã tìm ra

một phenolglycoside mới đặt tên là corchioside A (9) [34]

Zhen-Hui Wang và các nhà nghiên cứu Trung Quốc (2013) từ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat, đã phân lập đƣợc 5 dẫn chất chlorophenolic glucosides là curculigine E, F, G, I, H và một phenolic glycoside mới là orcinoside H [81]

4-1.2.2.3 Hợp chất saponin triterpennoid

Các triterpens tìm thấy trong thân rễ sâm cau đa số là thuộc nhóm cycloartene, có duy nhất một triterpen thuộc nhóm ursan có tên là: 31-methyl-3-

oxo-20-ursen-28-oic acid (24) [16], [55].Misra Triguna N., (1990) đã phân lập

đƣợc curculigol từ thân rễ C.orchioides Gaertn và xác định cấu trúc của hợp chất

này là:(24-methylcycloart-7-en-3 β, 20-diol) (25) [16], [52]

Xu Junping và Xu Rensheng (1992) đã xác định đƣợc cấu trúc của aglycon mới là curculigenin A, B, C [78] Sau đó 13 curculigosaponin đƣợc tìm ra và đƣợc

ký hiệu từ A đến M, trong đó curculigosaponin A J đều mang khung chung của curculigenin A; curculigosaponin K M có phần genin là curculigenin B [76], [78]

Ngoài những hợp chất kể trên, một lƣợng lớn các acid béo đƣợc phân lập từ

dịch chiết dầu của rễ loài C.orchioidesgồm: palmitic (42), oleic (43), linoleic (44),

arachidic (45) và behenic acid (46) [48] Có 3 hợp chất steroids tìm đƣợc từ thân rễ

C.orchioides là: sitosterol (47), stigmasterol (48), yuccagenin (49) [34], [55], và

một hợp chất lignan [25]

Tiwari và Misra (1976) tìm thấy trong thân rễ loài C.orchioides hai hợp chất

flavonoid, chúng đều thuộc nhóm flavon[55], [56]

(4 1)-β-D-glucopyranoside (50)

Có 1 alcaloid duy nhất được Rao và cộng sự (1978) phân lập được từ thân rễ sâm

cau là lycorine Tuy nhiên, hàm lượng alcaloid này ở chi Curculigo vẫn chưa được

nghiên cứu kỹ Ngoài ra còn có các hợp chất chứa nitơ khác cũng đã được tìm thấy

Theo Dược điển Trung Quốc (2010), Curculigo orchioides có độc tính và liều

lâm sàng khuyến cáo cho người trưởng thành là 3g-9g/ngày Liều LD50 của cao chiết ethanol là 215,9 g/kg, gấp 1439 lần liều khuyến cáo lâm sàng Trong thử nghiệm độc tính trường diễn của mẫu, sử dụng mức liều 120 g/kg trong 6 tháng trên chuột cống thấy xuất hiện những tổn thương trên gan, thận và cơ quan sinh sản của chuột; dùng kéo dài ở mức liều 30 g/kg hay 60 g/kg không thấy bất kỳ độc tính nào xuất hiện [21], [56]

Thông thường khi uống sâm cau ở liều khuyến cáo không gây ra bất kỳ tác dụng phụ hay độc tính nào Tuy nhiên nếu uống nhiều trong khoảng thời gian dài có thể xuất hiện một số tác dụng như ra mồ hôi lạnh, tê cóng chân tay Vì vậy, chỉ sử dụng ở mức liều mà đã chắc chắn tính an toàn của chế phẩm Chống chỉ định với những người thiếu âm, nội nhiệt, những người bị nhiễm lạnh do các tác nhân ngoại cảnh [56]

Jiao và cộng sự cho rằng tác dụng gây độc cho gan có thể do thành phần triterpenoid ketone có trong dịch chiết ethanol [39]

Nghiên cứu về độc tính của C.orchioides tại Việt Nam còn chưa nhiều và đa số

các nghiên cứu đều thực hiện với dạng trà tan Tiên mao 3 g/gói, do khoa Dược bệnh viện YHCT Trung ương sản xuất Đề tài do Dương Minh Sơn và cộng sự thực hiện (2007) cho kết quả nghiên cứu độc tính cấp trên 5 nhóm chuột trong 7 ngày với mức liều tăng dần từ 10 g/kg tới 30 g/kg là đa số các chuột chỉ giảm hoạt động, nằm

và ngủ trong 2-3 giờ, sau đó tất cả đều hoạt động và ăn uống bình thường, không có chuột nào chết Do đó nghiên cứu vẫn chưa xác định được liều LD50 bằng đường uống Kết quả thử độc tính bán trường diễn trên thỏ với mức liều uống 9 g/3 lần/ngày, theo dõi trong 6 tuần, chưa thấy có các dấu hiệu thay đổi về các thành

phần máu và chức năng gan, thận có ý nghĩa thống kê so với trước điều trị [14]

Kết quả “Khảo sát tính an toàn của trà Tiên mao trên bệnh nhân bị rối loạn cương dương.” của Trần Quốc Bình và Dương Minh Sơn thực hiện (2011) trên 31 bệnh nhân bị mắc bệnh rối loạn cương dương tại khoa ngoại bệnh viện Y học cổ truyền Trung ương trong 3 tháng cho thấy uống trà tiên mao với liều 9 g chia 3 lần/ngày không gây ra tác dụng không mong muốn, không làm thay đổi các chỉ số cận lâm sàng, huyết học, sinh hóa [4]

1.3.2 Tác dụng sinh học

Tác dụng chống oxy hóa

Trong nghiên cứu in vitro của Bafna và Mishra (2005) đã thấy dịch chiết

methanol của thân rễ C orchioides có hiệu quả rất tốt trong việc dọn sạch các gốc

tự do nhóm superoxide, có tác dụng trung bình đối với các gốc tự do DPPH, nitric

oxide và ức chế quá trình peroxide lipid [19] Theo Wu và cộng sự, các hợp chất

phenolic là yếu tố chính tạo nên tác dụng chống oxi hóa của C.orchioides [74]

Wang cũng đã chỉ ra các curculigoside cản trở tác dụng phá hủy tế bào nội mô tĩnh mạch rốn người, đồng thời làm giảm quá trình apoptosis tế bào Apoptosis là một quá trình hoạt động của sự lão hóa và chết tế bào, sự tích lũy H2O2 trong tế bào

chính là tác nhân châm ngòi cho quá trình apoptosis [73]

Các curculigoside còn tác động lên protein ở tế bào da người: làm tăng biểu hiện của protein procollagen type I và làm giảm biểu hiện của protein MMP-1 dẫn đến

có tác dụng tốt trong điều trị sự lão hóa da người [43]

Tại Việt Nam, nghiên cứu của Nguyễn Duy Thuần và Nguyễn Thị Phương Lan

(2001) cũng đã chỉ rõ tác dụng chống oxi hóa in vitro của polyphenol chiết từ thân

rễ sâm cau là tương đối cao [15]

Tác dụng bảo vệ, chống độc cho gan

Qua các nghiên cứu của Rao và cộng sự đã cho thấy tác dụng chống nhiễm trùng

và bảo vệ gan của C.orchioides do chúng có tác dụng đối kháng với một số chất có

khả năng gây độc cho gan như rifampicin [63], [64] Các curculigenin A và

curculigol cũng đã được nghiên cứu và sàng lọc thấy có tác dụng chống độc cho gan

[66], [69]

Rajesh và cộng sự (2000) cũng nghiên cứu về Kamilari có chứa thành phần là

C.orchioides, có hiệu quả tốt trong hỗ trợ điều trị xơ gan do rượu [61]

Tác dụng điều hòa miễn dịch

Nghiên cứu của Bafna và cộng sự chỉ ra rằng dịch chiết methanol của thân rễ

C.orchioides có tác dụng làm tăng số lượng bạch cầu, tăng lượng kháng thể dịch thể

ở những chuột được điều trị ức chế miễn dịch bằng cyclophosphamide [20]

Cácglucosid phenolic từ sâm cau đóng vai trò khá quan trọng trong việc điều hòa miễn dịch cơ thể do chúng có tác dụng làm tăng hàm lượng kháng thể dịch thể [42] Lacaille-Dubois và Wagner cũng nghiên cứu tác dụng sinh học của các curculigosaponin – cycloartane từ thân rễ sâm cau, kết quả cho thấy các curculigosaponin kích thích sự tăng sinh tế bào lympho ở lách chuột nhắt trắng, tác dụng của curculigosaponin trên kháng thể vẫn chưa rõ rệt [41], [56] Các curculigosaponin C và F thúc đẩy sự tăng sinh tế bào lympho ở lách chuột nhắt trắng, còn curculigosaponin G làm tăng trọng lượng tuyến ức in vivo ở chuột nhắt trắng [16], [66], [77]

Hoạt tính tăng cường chức năng sinh lý

Dịch chiết ethanol của thân rễ Curculigo orchioides có tác dụng kích thích sinh

dục đáng kể thỏ đực, làm tăng lượng glycogen, tăng độ ẩm ở tử cung của chuột cái trưởng thành [72];tác dụng làm tăng số lần, tăng tần xuất giao phối trên động vật Điều này đã gợi ý cho các nhà nghiên cứu có thể dùng thân rễ sâm cau như một vị thuốc để điều trị chứng rối loạn cương dương [27], [56]

Bài thuốc gồm sâm cau và hai vị dược liệu khác uống với sữa và đường trong 3 tháng, đã được thử nghiệm trên những cặp vợ chồng vô sinh, người nam giới có các chứng giảm tinh trùng, tinh trùng chết, tinh trùng kém chuyển động và tinh trùng yếu Kết quả có sự thay đổi đáng kể về khả năng sống của tinh trùng sau một tháng điều trị Ở tháng thứ hai có sự tăng về số lượng và khả năng chuyển động của tinh trùng, đồng thời số lượng tinh trùng non giảm Sau 3 tháng điều trị, tinh trùng bình thường phát triển ở 80% bệnh nhân nam giới [16]

Một số các nghiên cứu khác cho thấy dịch chiết ethanol từ thân rễ C.orchioides

có tác dụng làm tăng nồng độ hormone FSH, LH và hormone testosterone trên chuột cống Kết quả này càng làm rõ hơn cơ chế tác dụng điều khiển hành vi tình

dục trên chuột cống là thông qua điều chỉnh hợp lý hệ thống thần kinh – nội tiết

[28]

Tác dụng chống loãng xương

Theo Cao DP và cộng sự Curculigosides trong dịch chiết ethanol có tác dụng kích thích, thúc đẩy hoạt động của các phosphatase kiềm và làm tăng canxi lắng đọng trong xương; làm giảm nồng độ của các ROS và lipid peroxid; thúc đẩy hoạt động của các enzym chống oxy hóa trong tế bào tạo xương Ngoài ra, các phenolic glycosides này còn kích thích sự phát triển và làm tăng biểu hiện của các yếu tố như: VEGF, tyrosine kinase-1 và một số các đích sinh học khác trong điều trị các bệnh xương chuyển hóa thường gặp như tế bào MC3T3-E1 [24]

Dịch chiết ethanol của thân rễ sâm cau có tác dụng chống co thắt hồi tràng cô lập

ở chuột lang gây bởi histamine Một số nghiên cứu khác chỉ ra rằng dịch chiết có tác dụng bảo vệ chống lại cơn co thắt khí quản trên chuột lang Các tiêu chí này phần nào cho thấy hiệu quả trong việc điều trị hen [16], [58]

Tác dụng hạ đường huyết

Dịch chiết nước và dịch chiết ethanol sâm cau đều có tác dụng chống tăng đường huyết trong điều kiện bình thường và trong điều kiện tăng đường huyết do alloxan trên chuột cống Tác dụng hạ đường huyết phụ thuộc liều của dịch chiết đã được so

sánh với glimepiride - thuốc điều trị tiểu đường đường uống, liều 500 µg/kg [26],

Hoạt tính chống ung thư:

Dịch chiết sâm cau đã được Gupta (2005) phát hiện có tác dụng ức chế tế bào ung thư phổi dòng tế bào MCF-7 [35]

Tác dụng chống viêm:

Dode và cộng sự đã chỉ ra tác dụng chống viêm của thành phần gel trong thân rễ sâm cau bằng mô hình nghiên cứu chống viêm thực nghiệm là mô hình gây phù bàn chân chuột bằng carragenin [32] Rễ sâm cau thử nghiệm trên chuột nhắt dưới dạng cao cồn thấy có hoạt tính làm tăng khả năng thích nghi, chống viêm, chống co giật,

an thần, có hoạt tính hormone sinh dục nam và kích thích miễn dịch [16], [40], [56] Một số nghiên cứu khác cho thấy, sâm cau có tác dụng làm giảm ngưỡng nghe, cải thiện chức năng trung tâm thính giác, tổ chức ốc tai của chuột, vì vậy mà sâm cau có thể được sử dụng như một sản phẩm tự nhiên điều trị chứng mất thính lực do tiếng ồn ở chuột [36]

1.3.3 Công dụng của sâm cau theo y học cổ truyền

Tính vị, công năng: sâm cau vị cay tính ấm, độc vào hai kinh tỳ và thận, có tác

dụng thêm sức nóng làm tan lạnh, cường dương, mạnh gân xương [2], [9], [6]

Công dụng:

Sâm cau đã được sử dụng trong Y học cổ truyền Trung Quốc để điều trị liệt dương, tê nhức chân tay, viêm khớp thắt lưng và đầu gối, trị tiêu chảy [6], [56] Thân rễ có thể nấu với thịt trị chứng bất lực và ù tai; có thể ngâm trong rượu vang trị đái dầm, hoặc nghiền thành bột mịn dùng với rượu vang trị chảy máu tử cung

[34] Y học dân gian Trung Quốc còn sử dụng sâm cau để điều trị áp xe nhọt, đau

do chấn thương và nhiễm trùng [23]

Trong Y học cổ truyền Ấn Độ, sâm cau là một vị thuốc khá quan trọng, nó có mặt trong đa số các công thức Ayurvedic, nó được biết là một vị thuốc bổ, có tác dụng giảm đau, lợi tiểu và tác dụng cường dương [18], [29] Sâm cau kết hợp với các loại thảo mộc khác để điều trị ho mạn tính, viêm phế quản, hen suyễn và viêm gan Sâm cau còn có tác dụng kích thích tiêu hóa, kích thích sự thèm ăn; các chế phẩm của thảo dược này rất hữu ích trong việc điều trị trĩ và hội chứng ruột kích thích Thân rễ sâm cau ép lấy nước có tác dụng chống nhiễm trùng, làm lành vết thương, hoặc có thể trộn lẫn với nước ép tỏi dùng nhỏ mắt để trị mù lòa [28], [56]

Lá của sâm cau được biết là có đặc tính chống ung thư [28], [56] Các thầy lang Ấn

Độ đã sử dụng sâm cau để điều trị rối loạn niệu như tiểu khó, tiểu ra máu, lậu và giang mai Lấy thân rễ sâm cau đập nát cùng với quả ajwain (một loại quả của loài

Trachyspermum ammi, Fam Umbelliferae) nghiền, đem sắc, có tác dụng chống bất

tỉnh ở trẻ em Tại Mariana, sâm cau được sử dụng như một loại thực phẩm Tại Philippin, thân rễ sâm cau được sử dụng đơn độc hoặc phối hợp với các loại thuốc khác và được dùng như một loại thuốc bổ, lợi tiểu và kích thích tình dục; thân rễ giã nát đắp trên da để trị ngứa [56]

Tại Việt Nam, cây sâm cau được trồng làm cảnh, thân rễ được dùng làm thuốc [6].Thường dùng chữa nam giới tinh lạnh, liệt dương, phụ nữ đái đục, bạch đới; người già đái són, lạnh dạ, kém ăn; thần kinh suy nhược; phong thấp, lưng gối lạnh đau, vận động khó khăn [2], [9], [16], [6] Ngày dùng 6 -12 g phối hợp với các vị khác dạng thuốc sắc hay ngâm rượu

Phụ chú: Tiên mao dùng nhiều gây cường dương, làm tinh hao kiệt sức, người hư

yếu cấm dùng Uống tiên mao thì kiêng ăn thịt trâu bò [9], [6]

Bài thuốc có sâm cau:

BT1: Chữa liệt dương do rối loạn thần kinh chức năng [16]

Sâm cau 8g, sâm bố chính, hoài sơn, trâu cổ, kỷ tử, ngưu tất, tục đoạn, thạch hộc mỗi vị 12 g, cam thảo nam, cáp giới, ngũ gia bì mỗi vị 8 g Sắc uống ngày một thang

BT2: Chữa phong thấp, lưng lạnh đau, thần kinh suy nhược, liệt dương [12], [16]

Sâm cau 50g thái nhỏ sao vàng, rượu trắng 650 ml, ngâm trong 7 ngày hơn Mỗi ngày uống 2 lần vào trước bữa ăn chính mỗi lần 25-30 ml

BT3: Chữa nam giới liệt dương, phụ nữ tử cung lạnh khó thụ thai [16]

Sâm cau 20g, thục địa, ba kích, phá cố chỉ, hồ đào nhục mỗi vị 16g, hồi hương 4g Sắc uống mỗi ngày 1 thang

BT4: Chữa tê thấp đau mình mẩy [16]

Sâm cau, hy thiêm, hà thủ ô mỗi vị 50 g, rượu trắng 650 ml, ngâm trong 7 ngày hơn Ngày uống 50 ml chia 2 lần

BT5: Chữa sốt xuất huyết [16]

Sâm cau 20 g sao đen, cỏ nhọ nồi 12 g, trắc bách diệp 10 g sao đen, quả dành dành

8 g sao đen Sắc uống mỗi ngày 1 thang

BT6: Chữa huyết áp cao nhất là phụ nữ ở thời kì mãn kinh [16]

Sâm cau, ba kích, dâm dương hoắc, tri mẫu, hoàng bá, đương quy mỗi vị 12g Sắc uống ngày 1 thang

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU

Nguyên liệu dùng trong nghiên cứu là thân rễ của cây sâm cau được thu hái tại Cao Bằng và Đắc Lắc từ tháng 5 đến tháng 8 năm 2014 Dược liệu được sấy khô ở

55oC – 60oC, bảo quản trong túi nilon buộc kín, để nơi khô ráo Mẫu dược liệu được cung cấp từ đề tài cấp Bộ Y tế: “Nghiên cứu thành phần hoá học, tác dụng sinh học

và nhân giống loài sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn).”

Mẫu cây được giám định tên khoa học là: Curculigo orchioides Gaernt., họ Tỏi

Các loại cột sắc kí: sắc ký cột Silica gel F254 cỡ hạt 60-200 µm (Merck), Sephadex LH-20, sắc ký cột pha đảo (RP-18), máy cất thu hồi dung môi Buchi, tủ sấy Memmert…

Máy đo phổ hồng ngoại (IR) FT-IR Spectrophotometer 1650-Perkin Elmer (Viện Hóa học, VAST)

Máy đo phổ khối lượng LC/MS/MS – Water – API – ISI (Viện Hóa học, VAST)

Máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H- và 13C-NMR) của hãng Bruker (500MHz), Viện Hóa học, VAST

2.2.2 Dung môi, hóa chất thuốc thử

- Dichloromethan (DCM), ethyl acetat (EtOAc), chloroform (CHCl3 ),

methanol ( MeOH), aceton, n-butanol… đạt tiêu chuẩn công nghiệp

- Bản mỏng Silica gel 60F254, chất nhồi cột là Silica gel F254, cỡ hạt 63-200 µm (Merck)

- Cồn thực phẩm 96% Việt Nam, nước cất

- Các hóa chất dùng định tính sơ bộ thành phần hóa học được pha theo chuyên luận thuốc thử trong Dược điển Việt Nam IV

- Cao chiết ethanol của sâm cau

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1 Xác định mẫu nghiên cứu

Giám định tên khoa học của cây trên cơ sở phân tích các đặc điểm hình thái thực vật, so sánh với các khóa phân loại thực vật

2.3.2 Nghiên cứu định tính các nhóm chất trong dược liệu và trong các cắn hexan, ethyl acetat và n-butanol bằng phản ứng hóa học

n-Định tính các nhóm chấtbằng ống nghiệm theo tài liệu Thực tập Dược liệu phần hóa học [1]

2.3.3 Nghiên cứu định tính các nhóm chất trong dược liệu bằng phương pháp sắc kí lớp mỏng

Định tính các cắn phân đoạn theo tài liệu Thực tập Dược liệu phần hóa học [1]

2.3.4 Nghiên cứu chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc của các chất

Chiết hoạt chất từ dược liệu bằng ethanol 96% theo phương pháp chiết nóng Cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm Phân đoạn dịch chiết bằng dung môi công

nghiệp có độ phân cực tăng dần n-hexan, ethyl acetat và n-butanol

Sử dụng sắc ký cột với các chất hấp phụ silica gel pha thường, pha đảo, Sephadex để phân lập các chất Khảo sát nhiều hệ dung môi pha động khác nhau để lựa chọn điều kiện tối ưu Sắc ký lớp mỏng dùng để theo dõi vết các chất từ các phân đoạn

Kiểm tra độ tinh khiết bằng sắc ký lớp mỏng (soi dưới đèn tử ngoại ở bước sóng 254 nm, 365 nm)phun thuốc thử H2SO4 10% /ethanol và hơ nóng ở 110oC

2.3.5 Phương pháp thử độc tính cấp

2.3.5.1 Xác định hàm ẩm của dược liệu và cao sâm cau

Cân chính xác khoảng 2 g bột thân rễ sâm cau vào cốc (cốc đã xác định khối lượng), sấy ở 105oC áp suất thường trong 3 giờ Sau đó lấy cốc ra, làm nguội tới

nhiệt độ phòng bằng cách cho vào bình hút ẩm 15 phút, rồi cân ngay

Làm lại nhiều lần đến khối lượng không đổi [2]

Độ ẩm dược liệu tính theo công thức:

Trong đó:

X: hàm ẩm dược liệu tính ra phần trăm

a: khối lượng dược liệu khi chưa sấy

b: khối lượng dược liệu sau sấy đến khối lượng không đổi

Làm tương tự đối với cao dược liệu

2.3.5.2.Động vật làm thí nghiệm

- Chuột nhắt trắng Swiss albino cả 2 giống, có trọng lượng 18-22 g, đạt tiêu

chuẩn thí nghiệm do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp

2.3.5.3 Phương pháp nghiên cứu [8], [13]

- Chuột mua về được nuôi 5 ngày trước khi thí nghiệm để chuột thích nghi điều kiện thí nghiệm Cho chuột nhịn đói 16 giờ và uống nước tự do theo nhu cầu Chiachuột thành các lô thí nghiệm, mỗi lô 10 chuột

- Đường dùng thuốc: đường uống, cho chuột uống bằng cách dùng bơm tiêm

có kim đầu tù để đưa mẫu thử vào dạ dày chuột một cách nhẹ nhàng

- Chuẩn bị mẫu thử: Cao chiết được thêm nước cất, nghiền đều tạo dung dịch

có nhiều nồng độ khác nhau có thể cho chuột uống được

- Tìm liều tối đa mà không có chuột nào của lô thí nghiệm chết (LD0) và liều tối thiểu để 100% chuột của lô thí nghiệm chết (LD100) Nếu có chuột chết thì thử thêm

3 liều trung gian giữa 2 liều nói trên để xác định LD50

- Thời gian theo dõi: Chuột đƣợc theo dõi và quan sát các biểu hiện về hành vi, hoạt động, ăn uống, bài tiết, đếm số chuột sống chết trong vòng 72 giờ (nếu có)

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

3.1.1 Định tính các nhóm chất hữu cơ trong thân rễ sâm cau bằng phản ứng

hóa học

 Chuẩn bị dịch chiết nước: Cho 2 g bột dược liệu vào bình nón dung tích 50 ml,

thêm 15 ml nước cất, đun sôi trực tiếp trên bếp điện 5 phút, lọc qua giấy lọc gấp nếp làm các phản ứng

 Chuẩn bị dịch chiết ethanol: Cho 9 g bột dược liệu vào bình nón dung tích 100

ml, thêm 80 ml EtOH 90o , đun cách thủy 10 phút, lọc nóng qua giấy lọc gấp nếp, làm các phản ứng

 Chuẩn bị dịch chiết Ether dầu hỏa: cho 5g dược liệu vào bình nón dung tích 50

ml, đổ ngập ether dầu hỏa, ngâm qua đêm Dịch lọc làm các phản ứng

Tiến hành làm 3 mỗi thí nghiệm 3 lần

3.1.1.1 Định tính alcaloid

Lấy 5g dược liệu vào bình nón dung tích 100 ml, thêm 50 ml dung dịch H2SO4 1N,

để ở nhiệt độ phòng 30 phút rồi đun sôi cách thủy 30 phút Dịch chiết lọc qua giấy lọc vào bình gạn Kiềm hóa dịch lọc bằng dung dịch ammoniac đặc Chiết alcaloid bằng chloroform 3 lần, mỗi lần 5 ml Dịch chiết chloroform gộp lại và acid hóa bằng H2SO4 1N Gạn lấy lớp nước cho vào 3 ống nghiệm, mỗi ống khoảng 1 ml rồi thêm vào:

Ống 1: 2-3 giọt TT Mayer, thấy xuất hiện ít tủa bông trắng

Ống 2: 2-3 giọt TT Dragendorff, thấy xuất hiện ít tủa da cam

Kết luận: Dược liệu có chứa alcaloid

Phản ứng Liberman-Bouchardat: Cô cạn cách thủy, hòa tan cắn trong 1 ml anhydrit acetic Đặt nghiêng ống nghiệm thêm từ từ H2SO4 đặc theo thành ống nghiệm, không thấy xuất hiện màu nâu giữa 2 mặt phân cách

Phản ứng Baljet: thêm 0,5 ml TT Baljet (1 phần acid picric 1% trong cồn và 9 phần NaOH 10%) không thấy xuất hiện đỏ cam

Phản ứng Legal: thêm 5 giọt Natri nitroprussiat và thêm từ từ vài giọt NaOH 10% (đảm bảo kiềm dư) không thấy xuất hiện màu đỏ

Kết luận: dược liệu không có glycosid tim

3.1.1.3 Định tính phytosterol

Cho vào ống nghiệm to 0,5g bột dược liệu, thêm 10 ml chloroform, ngâm ở nhiệt độ phòng 60 phút Lọc dịch chiết, bay hơi dung môi Hòa tan cắn bằng 0,5ml anhydrit acetic, lắc đều Đặt nghiêng ống nghiệm 45o, cho thêm từ từ H2SO4 đặc theo thành ống nghiệm

Mặt phân cách giữa 2 lớp chất lỏng có màu đỏ

Kết luận: Dược liệu có phytosterol

3.1.1.4 Định tính tanin

Lấy dịch chiết nước chia vào mỗi ống nghiệm 1 ml

Phản ứng với TT FeCl3 5%: thêm vào ống nghiệm vài giọt TT FeCl3 5% thấy xuất hiện màu xanh rêu

Phản ứng với Gelatin 1%: thêm vào ống nghiệm vài giọt Gelatin 1%: không thấy xuất hiện tủa bông trắng

Kết luận: Dược liệu không có tanin

3.1.1.5 Định tính acid hữu cơ

Thêm vào dịch chiết nước ít bột Natri carbonat không thấy xuất hiện bọt khí

Kết luận: Dược liệu không có acid hữu cơ

3.1.1.6 Định tính đường khử tự do

Thêm vào dịch chiết nước 2 giọt TT Fehling A và 2 giọt TT Fehling B, đun cách thủy xuất hiện tủa đỏ gạch

Kết luận: Dược liệu có đường khử tự do

3.1.1.7 Định tính saponin

Quan sát hiện tượng tạo bọt:

Lấy 1 ml dịch chiết nước, thêm 5ml nước lắc mạnh theo chiều dọc ống nghiệm, để yên quan sát Thấy có bọt và bền trong 15 phút

Cho vào 2 ống nghiệm, mỗi ống 1 ml dịch chiết ethanol

Ống 1 thêm 0,5 ml dung dịch NaOH 10%

Ống 2 để nguyên

Đun cách thủy cả 2 ống nghiệm đến sôi thấy:

Ống 1: xuất hiện màu vàng hơn

Cho 1 ml dịch chiết ethanol vào ống nghiệm, thêm vài giọt NaOH 10% vào, sau

đó thêm vài giọt TT Diazo, không thấy xuất hiện màu đỏ sẫm

Kết luận: Dược liệu không có coumarin

3.1.1.10 Định tính flavonoid

Chia dịch chiết ethanol vào mỗi ống nghiệm 1 ml làm phản ứng

Phản ứng với kiềm: Thêm vài giọt NaOH 10% vào thấy xuất hiện tủa vàng Phản ứng với FeCl3 : Thêm vài giọt FeCl3 vào thấy xuất hiện tủa đen

Phản ứng Cyanidin: Thêm ít bột Mg kim loại và vài giọt dung dịch HCl đặc vào, đun cách thủy, không thấy dung dịch chuyển sang màu đỏ

Kết luận: Dược liệu không có flavonoid nhưng có hợp chất phenolic

Nhỏ 2-3 giọt dịch chiết ether lên giấy lọc, hơ khô, thấy để lại vết mờ

Kết luận: Dược liệu chứa chất béo

Nhận xét:Qua các phản ứng hóa học trên, chúng tôi đưa ra kết luận sơ bộ

trong dược liệu thân rễ sâm cau có chứa: saponin, alcaloid, phytosterol, đường khử

tự do, chất béo, carotene và hợp chất phenolic

Kết quả nghiên cứu trên trùng khớp với đề tàicủa Nguyễn Duy Thuần và Nguyễn Thị Phương Lan (2001)[11] Ngoài ra, thân rễ của cây sâm cau được thu

hái tại Cao Bằng và Đắc Lắc có chứa thành phần alkaloid, tuy nhiên hàm lượng còn

ít

Kết quả được tóm tắt qua bảng 1

Bảng 1: Kết quả định tính các nhóm chất có trong thân rễ sâm cau bằng phản