Nghiên cứu bào chế gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3

ĐẶT VẤN ĐỀTheo quan điểm sinh dược học bào chế, độ hòa tan của dược chất có ảnh hưởng quyết định tới mức độ và tốc độ hấp thu của dược chất. Các dược chất tan kém thường có sinh khả dụng thấp do quá trình hấp thu của dược chất ở đường tiêu hóa bị giới hạn bởi độ hòa tan của chúng. Tăng độ hòa tan của dược chất là biện pháp hàng đầu để tăng sinh khả dụng của thuốc. Điều chế hệ phân tán rắn của dược chất với những chất mang phù hợp là một trong những phương pháp cải thiện đáng kể độhòa tan của dược chất ít tan.Curcumin là một polyphenol khối lượng phân tử thấp, được chiết xuất từ củnghệ vàng (Curcuma longa L.) 7. Hiện nay curcumin đang thu hút được sự quan tâm của ngành Y học trên toàn thế giới nhờ vào những tác dụng sinh học vượt trội mới được nghiên cứu và chứng minh của nó. Cho tới nay đã có trên 6000 nghiên cứu về tác dụng sinh học của curcumin được công bố trên các tạp chí uy tín. Curcumin có tác dụng ức chế sự phát triển của khối u, tăng khả năng miễn dịch, chất chống oxy hóa mạnh, chữa một số bệnh tiêu hóa, gan mật, kháng khuẩn, chống viêm…20. Hơn nữa, về mặt lâm sàng, curcumin được chứng minh là an toàn vớicơ thể.Tuy nhiên, curcumin rất kém tan trong nước (độ tan 0,001%), chuyển hóa nhiều qua gan, thời gian bán thải ngắn nên sinh khả dụng của curcumin rất thấp chỉ đạt 23%. Do đó để góp phần vào hướng nghiên cứu nâng cao sinh khả dụng của curcumin, chúng tôi thực hiện đề tài:”Nghiên cứu bào chế hệ phân tán rắn của curcumin” với mục tiêu: 1. Khảo sát ảnh hưởng của chất mang (PEG, PVP K30, PLX) tới độ hòa tan của curcumin trong hệ phân tán rắn bào chế theo phương pháp nóng chảy.2. Xây dựng được công thức bào chế HPTR của curcumin.

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI ============ ĐỖ THỊ NGỌC BÍCH NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ GEL TRA MẮT CHỨA PIROXICAM NANO 0,3% KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng dẫn: TS. Nguyễn Thị Mai Anh Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế HÀ NỘI - 2015 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: TS. Nguyễn Thị Mai Anh DS. Đào Minh Huy Là người đã tận tình hướng dẫn và giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện và hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Em cũng chân thành cảm ơn: Các thày cô trong Ban giám hiệu, phòng Đào tạo cùng toàn thể các thày cô các bộ môn và cán bộ các phòng ban trường Đại học Dược Hà Nội đã tận tình dạy dỗ em trong những năm tháng học tập tại trường. Các thày cô và kỹ thuật viên bộ môn Bào chế, bộ môn Công nghiệp Dược, bộ môn Vật lý – Hóa lý trường Đại học Dược Hà Nội đã tạo điều kiện giúp đỡ em trong quá trình thực hiện khóa luận này. Cuối cùng em xin chân thành cảm ơn gia đình và bạn bè đã động viên, tạo mọi điều kiện giúp đỡ em trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu khoa học. Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 10 tháng 05 năm 2015 Sinh viên Đỗ Thị Ngọc Bích. MỤC LỤC Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt. Danh mục các bảng và đồ thị. Đặt vấn đề 1 PHẦN 1: TỔNG QUAN. 2 1.1. Một số biện pháp làm tăng sinh khả dụng của thuốc tác dụng tại chỗ ở mắt. 2 1.1.1. Đặc điểm sinh lí của mắt ảnh hưởng đến sinh khả dụng của thuốc. 2 1.1.2. Các biện pháp tăng sinh khả dụng thuốc tác dụng tại chỗ ở mắt. 2 1.2. Piroxicam. 8 1.2.1. Công thức hóa học. 8 1.2.2. Tính chất. 8 1.2.3. Định tính. 9 1.2.4. Định lượng. 9 1.2.5. Tác dụng, chỉ định. 9 1.2.6. Các dạng bào chế có trên thị trường. 9 1.3. Một số nghiên cứu về Piroxicam nano. 10 PHẦN 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. 15 2.1. Nguyên liệu và thiết bị. 15 2.1.1. Nguyên liệu. 15 2.1.2. Thiết bị. 16 2.2. Nội dung nghiên cứu. 16 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu. 16 2.3.1. Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3%. 16 2.3.2. Đánh giá một số tính chất của gel piroxicam nano 0,3%. 22 PHẦN 3: KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM. 25 3.1. Bào chế gel piroxicam nano 0,3% 25 3.1.1. Bào chế hỗn dịch piroxicam nano. 25 3.1.2. Đánh giá hỗn dịch nano Px. 25 3.1.3. Nghiên cứu lựa chọn tá dược tạo gel. 28 3.1.4. Nghiên cứu lựa chọn chất ổn định và nồng độ sử dụng. 32 3.1.5. Nghiên cứu lựa chọn chất giữ ẩm. 35 3.1.6. Nghiên cứu lựa chọn chất bảo quản. 36 3.1.7. Nghiên cứu lựa chọn chất tăng thấm qua giác mạc. 37 3.2. Đánh giá một số tính chất của gel chứa piroxicam nano 0,3%. 38 3.2.1. pH gel. 39 3.2.2. Độ nhớt. 39 3.2.3. Hàm lượng dược chất. 39 3.2.4. Khả năng giải phóng dược chất qua giác mạc thỏ. 40 PHẦN 4. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 42 4.1. Kết luận. 42 4.2. Đề xuất. 42 Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt AUC : Diện tích dưới đường cong. CMC : Carboxymethyl cellulose. DĐVN IV : Dược điển Việt Nam IV. EDTA : Etylen diamin tetra acetic acid. HEC : Hydroethyl cellulose. HPLC : High performance liquid chromatography. (Sắc ký lỏng hiệu năng cao). HPMC : Hydropropyl methylcellulose. kl/kl : khối lượng/khối lượng. kl/tt : khối lượng/ thể tích. KTTP : Kích thước tiểu phân. NMNT : Nước mắt nhân tạo. NSAIDs : Thuốc chống viêm phi steroid. PdI : Phân bố kích thước tiểu phân. PEG : Polyethylen glycol. PG : Propylen glycol. PVA : Alcol polyvinic. Px : Piroxicam. SEM : Kính hiển vi điện tử quét. TEM : Kính hiển vi điện tử truyền qua Danh mục các bảng và hình vẽ. Bảng Tên Trang 2.1 Nguyên liệu sử dụng trong quá trình thực nghiệm. 15 3.1 Kích thước tiểu phân và phân bố kích thước piroxicam nano (n = 5). 25 3.2 Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn. 26 3.3 Hàm lượng dược chất trong 20 ml hỗn dịch nano piroxicam (n = 3). 27 3.4 Hiệu suất quá trình tạo hỗn dịch nano piroxicam (n = 3). 27 3.5 Độ nhớt của một số gel. 28 3.6 Kích thước và phân bố kích thước tiểu phân piroxicam trong các gel. 29 3.7 Lượng piroxicam thấm qua màng thẩm tích của các mẫu gel ngay sau khi bào chế (µg). 30 3.8 Lượng piroxicam thấm qua màng thẩm tích của các mẫu gel sau 45 ngày bào chế (µg). 32 3.9 KTTP piroxicam trong gel có chất ổn định với nồng độ 2%. 33 3.10 KTTP piroxicam trong gel có chất ổn định với nồng độ < 2%. 35 3.11 KTTP piroxicam trong gel có chất giữ ẩm. 36 3.12 KTTP piroxicam trong gel có bổ sung chất bảo quản. 37 3.13 KTTP piroxicam trong gel có thêm EDTA. 38 3.14 Công thức thành phần gel chứa piroxicam nano 0,3%. 38 3.15 Độ nhớt gel chứa piroxicam nano 0,3%. 39 3.16 Hàm lượng piroxicam trong gel (n = 3). 39 3.17 Lượng piroxicam (µg) thấm qua giác mạc thỏ. 40 Hình vẽ, sơ đồ Tên Trang 2.1 Quy trình bào chế gel chứa nano piroxicam 20 3.1 Đường chuẩn biểu thị mối tương quan giữa nồng độ piroxicam trong methanol và mật độ quang. 26 3.2 Lượng piroxicam thấm qua màng thẩm tích theo thời gian của các mẫu gel ngay sau khi bào chế. 31 3.3 Lượng piroxicam thấm qua màng thẩm tích theo thời gian của các mẫu gel sau 45 ngày bào chế. 32 3.4 Lượng piroxicam thấm qua giác mạc thỏ 41 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong bào chế thuốc nhãn khoa, các chế phẩm quy ước thường có sinh khả dụng thấp do ảnh hưởng của nhiều yếu tố như: khả năng thấm hạn chế của giác mạc, phản xạ chớp mắt, tăng tiết nước mắt làm rửa trôi và pha loãng thuốc. Từ giữa thế kỉ 20, công nghệ nano ra đời đã đánh dấu một bước ngoặt lớn trong trong nền công nghệ dược phẩm, tạo ra nhiều dạng thuốc mới với ưu điểm vượt trội. Đặc biệt đối với các thuốc tác dụng tại chỗ ở mắt, công nghệ nano được coi là giải pháp hiệu quả giúp cải thiện đáng kể sinh khả dụng của thuốc do nhiều đặc tính riêng của tiểu phân nano. Piroxicam là một dược chất thuộc nhóm NSAIDs, điều trị chống viêm rất tốt trên mắt nhưng do độ tan thấp và dễ bị rửa trôi ở mắt nên sinh khả dụng kém. Một số nghiên cứu trên thế giới và trong nước đã công bố rằng hệ tiểu phân nano tinh thể có nhiều ưu điểm về bào chế, khả năng hòa tan và tính thấm nhưng dễ bị rửa trôi hơn một số dạng tiểu phân khác như nano polyme, nano lipid rắn, nano liposome. Vì vậy với mong muốn làm tăng sinh khả dụng của piroxicam chúng tôi thực hiện đề tài “ Nghiên cứu bào chế gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3%” với các mục tiêu: 1. Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt chứa 0,3% piroxicam nano tinh thể. 2. Đánh giá một số tính chất của gel tra mắt chứa 0,3% piroxicam nano tinh thể. 2 PHẦN 1: TỔNG QUAN. 1.1. Một số biện pháp làm tăng sinh khả dụng của thuốc tác dụng tại chỗ ở mắt. 1.1.1. Đặc điểm sinh lí của mắt ảnh hưởng đến sinh khả dụng của thuốc. Sinh khả dụng của thuốc nhỏ mắt quy ước thường rất thấp, dưới 5% chủ yếu do các đặc điểm sinh lí sau của mắt  Cấu tạo của giác mạc: giác mạc cấu tạo gồm 3 lớp, trong đó lớp biểu mô bên ngoài có cấu trúc chặt chẽ, liên kết giữa các lớp tế bào bởi ion Ca 2+ và chỉ cho các dược chất thân lipid đi qua. Lớp đệm nằm giữa có hàm lượng nước cao chỉ cho các dược chất thân nước đi qua. Cấu tạo của giác mạc, đặc biệt là cấu tạo lớp biểu mô đã tạo thành một hàng rào sinh lí ngăn cản hấp thu dược chất qua giác mạc [6], [30].  Hoạt động sinh lí của mắt: quá trình tiết nước mắt làm giảm nồng độ thuốc trước giác mạc, cùng với việc chớp mắt sẽ đẩy thuốc tràn ra khỏi mắt làm mất một phần lớn dược chất, hoặc đẩy thuốc thoát qua ống mũi – lệ, xuống dạ dày. Ngoài ra còn do liên kết giữa thuốc với protein của nước mắt khiến thuốc không thấm qua được giác mạc và dễ dàng bị rửa trôi khi nước mắt được tiết ra liên tục, do các enzyme có trong màng nước mắt gây phân hủy dược chất [6], [30].  Hấp thu qua kết mạc vào vòng tuần hoàn chung: khác với giác mạc, kết mạc có cấu tạo mạch máu phong phú và có tính thấm cao với nhiều loại dược chất. Hấp thu qua kết mạc sẽ đưa thuốc vào vòng tuần hoàn chung, làm giảm nồng độ thuốc gây tác dụng tại chỗ [6], [30]. 1.1.2. Các biện pháp tăng sinh khả dụng thuốc tác dụng tại chỗ ở mắt. 1.1.2.1. Tăng thấm thuốc qua giác mạc. Các biện pháp có thể áp dụng để tăng thấm thuốc qua giác mạc bao gồm: - Sử dụng các nhóm tá dược có khả năng tăng thấm như: các chất tạo phức chelat với ion Ca 2+ , chất diện hoạt, acid béo, dẫn chất của acid béo. - Điều chỉnh tỉ lệ ion hóa. 3 - Tạo tiền thuốc, tạo phức. - Áp dụng liệu pháp ion. - Bào chế dược chất có cấu trúc siêu vi tiểu phân với những đặc tính bề mặt giúp dược chất thấm sâu. Trong các biện pháp nêu trên, hiện nay, hướng nghiên cứu các hệ tiểu phân nano đang là xu hướng có nhiều triển vọng ứng dụng cho các thuốc có tác dụng tại chỗ ở mắt. Hệ tiểu phân nano gồm: nano tinh thể, nano polymer, nano lipid, liposome, dendrimer, nano nhũ tương. Các hệ này hoặc duy trì được nồng độ bão hòa xung quanh các tiểu phân, duy trì chênh lệch gradient nồng độ nên tăng khuếch tán dược chất qua màng hoặc có cấu trúc tương tự như màng sinh học, vừa thân nước vừa thân dầu nên có khả năng thấm sâu qua giác mạc.  Rajesh Katara và cộng sự nghiên cứu bào chế hỗn dịch nano aceclofenac bằng phương pháp kết tinh sử dụng Eudragit RL 100. Các tác giả tiến hành đánh giá khả năng thấm qua giác mạc mắt dê đã bóc tách của dược chất với thiết bị là bình khuếch tán Franz. Kết quả cho thấy lượng dược chất thấm qua giác mạc từ hỗn dịch nano cao gấp hai lần so với dung dịch aceclofenac cùng nồng độ [26].  Chetoni và cộng sự nghiên cứu bào chế liposome cation chứa acyclovir điều trị tại chỗ ở mắt. Kết quả thu được liposome có KTTP khoảng 370 nm, 23% dược chất được đưa vào trong liposome. Đánh giá sinh khả dụng của hệ liposome in vivo trên thỏ thông qua định lượng dược chất trong thủy dịch, so sánh với thuốc mỡ tra mắt trên thị trường có hàm lượng dược chất lớn hơn gấp 8 lần. Kết quả cho thấy sau 90 phút, nồng độ dược chất trong thủy dịch của mẫu liposome lớn hơn gấp nhiều lần so với thuốc mỡ tra mắt [21].  Li Gan và cộng sự nghiên cứu bào chế thuốc nhỏ mắt chứa tinh thể lỏng nano dexamethason (DEX cubosom). Kết quả thu được tinh thể lỏng nano có KTTP 214 ± 41,1 nm. So sánh DEX cubosom với dung dịch dexamethason – natri phosphat (DEX – NaP) cùng nồng độ về sinh khả dụng in vivo và in vitro. Thí nghiệm được tiến hành với giác mạc thỏ bóc tách trên bình khuếch tán Franz và [...]... giác mạc thỏ bóc tách 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3% 2.3.1.1 Bào chế hỗn dịch piroxicam nano a Bào chế hỗn dịch piroxicam nano Piroxicam nano được bào chế bằng phương pháp kết tinh [8], [10] Quá trình bào chế theo 3 bước: 17 Bước 1: Tạo các dung dịch gồm các thành phần sau - Dung dịch A: + Piroxicam: 0,15 g + Natri deoxycholat: 0,075...  Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt 0,3% piroxicam nano Xây dựng công thức gel với các thành phần: Tá dược tạo gel, tá dược ổn định, tá dược giữ ẩm, tá dược bảo quản, tá dược tăng thấm, piroxicam nano  Đánh giá sơ bộ gel tra mắt 0,3% piroxicam nano Sơ bộ đánh giá gel ở một số tiêu chí: pH, độ nhớt, hàm lượng dược chất, khả năng thấm của dược chất qua giác mạc thỏ bóc tách 2.3 Phƣơng pháp nghiên. .. trình tạo Px nano (%) L: Hàm lượng Px nano sau khi ly tâm (%) M: khối lượng nước cất để phân tán Px nano tạo hỗn dịch (g) m: khối lượng Px thô sử dụng để chế tạo hệ Px nano (g) 2.3.1.2 Nghiên cứu xây dựng công thức gel Px nano 0,3% 19 a Lựa chọn tá dược trong công thức tạo gel PX nano 0,3% Bào chế gel chứa Px nano 0,3% với các nhóm tá dược bao gồm: - Tá dược tạo gel: HPMC, HEC, CMC - Tá dược ổn định:... ~ 65 % nên có thể áp dụng để bào chế gel piroxicam nano 28 Kết quả ở mục 3.1.2 cho thấy, hỗn dịch nano Px bào chế theo phương pháp kết tinh tương đối đồng đều giữa các mẫu về KTTP, phân bố kích thước, hiệu suất nên có thể sử dụng để bào chế gel trong các thí nghiệm tiếp theo 3.1.3 Nghiên cứu lựa chọn tá dược tạo gel 3.1.3.1 Khảo sát độ nhớt của một số tá dược tạo gel Để chế phẩm có độ nhớt và thể chất... gel: + Thể chất và độ nhớt của gel + Kích thước và phân bố kích thước của tiểu phân Px + Khả năng giải phóng dược chất qua màng thẩm tích - Với các nhóm tá dược còn lại: kích thước và phân bố kích thước của tiểu phân Px b Quy trình bào chế gel piroxicam nano Bào chế hỗn dịch nano piroxicam như phần a mục 2.3.1.1 Theo hiệu suất quá trình, tính lượng Px phối hợp đảm bảo hàm lượng 0,3% trong gel Bào chế. .. kích ứng mắt Giảm kích ứng mắt sẽ giảm hoạt động tăng tiết nước mắt, chớp mắt do phản xạ nên có thể tăng thời gian lưu tại mắt của dược chất Các biện pháp: điều chỉnh pH, áp suất thẩm thấu, giảm nồng độ hay không dùng các hóa chất có khả năng gây kích ứng mắt [6] b Chuyển sang các dạng bào chế khác  Bào chế dưới dạng nhũ tương hay hỗn dịch  Bào chế dưới dạng hệ điều trị đặt tại mắt  Bào chế dược... 1.2.6 Các dạng bào chế có trên thị trƣờng Một số chế phẩm chứa piroxicam: - Thuốc tiêm 20 mg/ml (chế phẩm Felden IM, Pirox IM, Kecam…) 10 - Viên nang, viên nén 10 mg, 20 mg (chế phẩm Felden, Ciprox DT, Pirox 10, Pirox 20,…) - Thuốc đạn 20 mg (chế phẩm Felden, Oximezin, Zitumex,…) - Bôi ngoài da: gel 0,5% (chế phẩm Felden, Zerospam, Flodenu,…) [7], [10] 1.3 Một số nghiên cứu về Piroxicam nano  Francesco... nồng độ [19] 7  Bào chế dưới dạng bán rắn mỡ, kem, gel có cấu trúc dung dịch, hỗn dịch hay nhũ tương đảm bảo vừa giải phóng tốt dược chất vừa duy trì tác dụng kéo dài Dạng bán rắn như gel và thuốc mỡ tra mắt có độ nhớt rất cao, lưu giữ thuốc tại mắt trong thời gian dài Gel tra mắt ít gây cảm giác khó chịu, nhờn và mờ mắt như thuốc mỡ Ngoài ra dạng gel hóa tại chỗ đang được nghiên cứu và sử dụng nhiều... trong gel Bào chế gel piroxicam với các nhóm tá dược nếu có được thực hiện theo sơ đồ 2.1 20 Hòa tan Nước cất EDTA Ngâm trương nở Poloxaner 407 hoặc poloxamer 188 Ngâm trương nở Tá dược tạo gel Gel Trộn đồng nhất Tween 40/ Tween 80 hoặc cremophor Nipagin và nipasol Trộn đồng nhất Hỗn dịch Px nano Hòa tan PG Trộn đồng nhất Gel piroxicam nano Sơ đồ 2.1 Quy trình bào chế gel piroxicam nano c Đánh giá khả... Dhawan và cộng sự nghiên cứu bào chế emugel nano bằng phương pháp nhũ hóa Pha dầu, chất nhũ hóa, pha nước lần lượt là acid oleic, tween 80 và nước cất Nhũ tương nano thu được có cấu trúc D/N, hình cầu với kích thước các tiểu phân < 200 nm, PdI 0,164, thế Zeta -55,8 mV Sau khi bào chế, nhũ tương được phối hợp với gel carbopol 934 (0,5 % kl/kl), khuấy trộn để tạo emugel nano đồng nhất Gel có độ nhớt, pH, . dung nghiên cứu. 16 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu. 16 2.3.1. Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3% . 16 2.3.2. Đánh giá một số tính chất của gel piroxicam nano. 0,3% ” với các mục tiêu: 1. Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt chứa 0,3% piroxicam nano tinh thể. 2. Đánh giá một số tính chất của gel tra mắt chứa 0,3% piroxicam nano tinh thể. 2. như nano polyme, nano lipid rắn, nano liposome. Vì vậy với mong muốn làm tăng sinh khả dụng của piroxicam chúng tôi thực hiện đề tài “ Nghiên cứu bào chế gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3% ”