Nghiên cứu bào chế thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% và tobramycin 0,3%

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN THỊ XUÂN NHI NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC NHỎ MẮT CHỨA HỆ PHÂN TÁN NANO DEXAMETHASON 0,1% VÀ TOBRAMYCIN 0,3% LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Tp Hồ Chí Minh - 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN THỊ XUÂN NHI NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC NHỎ MẮT CHỨA HỆ PHÂN TÁN NANO DEXAMETHASON 0,1% VÀ TOBRAMYCIN 0,3% Chuyên ngành : Công nghệ Dược phẩm Bào chế thuốc Mã số : 60.72.04.02 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : TS TRƯƠNG CƠNG TRỊ Tp Hồ Chí Minh - 2017 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên trân trọng nhất, em xin chân thành cảm ơn Thầy TS Trương Công Trị, người thầy kiến thức tinh thần, người ln tận tình hướng dẫn chun mơn động viên em hồn thành tốt luận văn Em xin chân thành cảm ơn Thầy Cô Bộ Mơn Hóa lý Dược ln quan tâm bảo cho em suốt thời gian em thực luận văn Bộ môn Em xin chân thành cảm ơn Thầy Cô Hội đồng chấm luận văn thạc sĩ dành thời gian đánh giá, nhận xét cho em ý kiến quý báu để luận văn hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn đến Thầy Cô Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh đã tận tình truyền giảng kiến thức kinh nghiệm suốt thời gian học tập vừa qua Và đặc biệt, em xin trân trọng cảm ơn Công ty cổ phần Dược Danapha tạo điều kiện, hỗ trợ tốt để em hồn thành chương trình học Thạc sĩ Xin cảm ơn chân thành Quý đồng nghiệp Danapha, anh chị em Trung Tâm RD giúp đỡ ủng hộ tinh thần thời gian thực luận văn Cảm ơn anh Huỳnh Thanh Phong nhóm Kiểm nghiệm hỗ trợ để đề tài hồn thành Xin gửi lời cảm ơn đến anh chị bạn học tập nghiên cứu Bộ Mơn Hóa lý Dược quan tâm, động viên nhiệt tình giúp đỡ suốt thời gian làm luận văn Cuối cùng, xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến Ba Mẹ - người thương yêu nâng đỡ bước đường đời Cảm ơn Anh Chị đặc biệt cháu ln tạo khơng khí gia đình ấm áp, đầy thương yêu niềm vui TP Hồ Chí Minh, ngày 01 tháng 10 năm 2017 Nguyễn Thị Xuân Nhi LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Nguyễn Thị Xuân Nhi Luận văn thạc sĩ dược học – Khoá học 2015-2017 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC NHỎ MẮT CHỨA HỆ PHÂN TÁN NANO DEXAMETHASON 0,1% VÀ TOBRAMYCIN 0,3% Nguyễn Thị Xuân Nhi Người hướng dẫn: TS Trương Công Trị Mục tiêu Đề tài thực với mục tiêu nghiên cứu bào chế thuốc nhỏ mắt phối hợp hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% nhằm tạo sản phẩm ổn định chất lượng tăng hiệu tác dụng so với thuốc nhỏ mắt phối hợp hai hoạt chất bào chế dạng dung dịch truyền thống Phương pháp nghiên cứu Đề tài phát triển thuốc nhỏ mắt dạng hỗn dịch nano Pha phân tán tiểu phân dexamethasone có kích thước nano mơi trường phân tán thân nước hịa tan tobramycin Hỗn dịch nano điều chế kỹ thuật đồng hóa áp suất cao Sau thu hệ phân tán đạt độ ổn định yêu cầu, đề tài phát triển quy trình điều chế thuốc nhỏ mắt với quy mô 500 lọ/lô theo dõi độ ổn định thuốc nhỏ mắt hai điều kiện 30 ± oC, độ ẩm 75 ± 5% 40 ± oC, độ ẩm 75 ± 5% Kết Hỗn dịch nano thu với thông số khuấy Ultra-Turrax 15000 rpm 15 phút qua đồng hóa áp suất 800 bar qua 10 chu kỳ có kích thước tiểu phân trung bình khoảng 210 -240 nm, kiểu phân bố đỉnh Quy trình điều chế thuốc nhỏ mắt quy mơ 500 lọ/lơ có tính lặp lại dễ phát triển lên quy mơ công nghiệp Thuốc nhỏ mắt ổn định khoảng thời gian theo dõi tháng hai điều kiện theo dõi Kết luận Kết cho thấy thuốc nhỏ mắt phối hợp hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% điều chế phương pháp đồng hóa áp suất cao ổn định chất lượng quy trình điều chế THESIS ABTRACT Thesis for the Degree of Master Pharmaceutical Sciences FORMULATION AND PROCESS DEVELOPMENT OF OPHTHALMIC NANOSUSPENSION CONTAINS DEXAMETHASONE 0,1% AND TOBRAMYCIN 0,3% Nguyễn Thị Xuân Nhi Supervisors: Truong Cong Tri (PhD) Objective The objective of this study was to prepare a stable ophthalmic nanosuspension contains dexamethasone 0,1% and tobramycin 0,3% which has advantages over conventional ophthalmic solution Method High pressure homogenization was used to prepare the ophthalmic nanosuspension The stable nanosuspension was developed to a 500-unit eye drops preparation process and evaluated the stability of eye drops at two conditions of 30 ± oC, RH 75 ± 5% and 40 ± oC, RH 75 ± 5% Result The nanosuspension was agitated by Ultra-Turrax at 15000 rpm for 15 minutes and homogenized at 800 bar for 10 cycles Average particle size of nanosuspension was 210 to 240 nm with monodispersion The process of preparing eye drops on a 500-unit preparation process is repeatable and easy to develop on an industrial scale The product was stabilized over a 6-month follow-up period in both conditions Conclusion This study suggests that the ophthalmic nanosuspension contains dexamethasone 0,1% and tobramycin 0,3% obtained by high pressure homogenization was stabilized in quality and preparation process i MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT V DANH MỤC BẢNG VI DANH MỤC HÌNH VIII DANH MỤC SƠ ĐỒ IX DANH MỤC BIỂU ĐỒ IX MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 TOBRAMYCIN 1.1.1 Công thức cấu tạo 1.1.2 Tính chất lý hóa .3 1.1.3 Tính chất dược lý 1.1.3.1 Tác dụng dược lý 1.1.3.2 Tương tác thuốc .4 1.1.3.3 Độc tính - Tác dụng khơng mong muốn 1.2 DEXAMETHASON 1.2.1 Công thức cấu tạo 1.2.2 Tính chất lý hóa 1.2.3 Tính chất dược lý 1.2.3.1 Tác dụng dược lý 1.2.3.2 Tương tác thuốc .6 1.2.3.3 Độc tính - Tác dụng khơng mong muốn 1.3 THUỐC NHỎ MẮT PHỐI HỢP TOBRAMYCIN VÀ DEXAMETHASON 1.3.1 Thành phần hàm lượng 1.3.2 Chỉ định liều dùng 1.3.3 Tình hình nghiên cứu thuốc nhỏ mắt phối hợp tobramycin dexamethason ii 1.4 CÁC HỆ PHÂN TÁN ỨNG DỤNG TRONG PHÁT TRIỂN THUỐC NHỎ MẮT 1.4.1 Hỗn dịch micro .9 1.4.2 Hỗn dịch nano .9 1.4.3 Nhũ tương 10 1.4.4 Vi nhũ tương .10 1.4.5 Tiểu phân nano 11 1.4.6 Liposome 11 1.4.7 Niosome 12 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 13 2.1.1 Nguyên vật liệu 13 2.1.2 Thiết bị 14 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.2.1 Thiết lập cơng thức xây dựng quy trình bào chế hệ phân tán 15 2.2.1.1 Khảo sát tiền bào chế 15 2.2.1.2 Thiết lập cơng thức quy trình bào chế 17 2.2.1.3 Phân tích tính chất lý hóa hệ phân tán 19 2.2.1.4 Theo dõi độ ổn định hệ phân tán 24 2.2.2 Phát triển quy trình điều chế thuốc nhỏ mắt quy mô 500 lọ/lô .24 2.2.2.1 Khảo sát thơng số quy trình điều chế .26 2.2.2.2 Đánh giá tính chất hóa lý sản phẩm 27 2.2.4 Nghiên cứu độ ổn định sản phẩm thuốc nhỏ mắt 28 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 29 3.1 THIẾT LẬP CÔNG THỨC VÀ XÂY DỰNG QUY TRÌNH BÀO CHẾ HỆ PHÂN TÁN 29 3.1.1 Khảo sát tiền bào chế 29 3.1.1.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định hoạt chất tobramycin 29 3.1.1.2 Độ tan dexamethason 33 iii 3.1.2 Thiết lập cơng thức quy trình bào chế 34 3.1.2.1 Hệ đệm, chất chống oxy hóa, chất diện hoạt chất tăng độ nhớt .34 3.1.2.2 Thơng số q trình điều chế máy khuấy tốc độ cao Ultra-Turrax máy đồng hóa áp suất cao (HPH) 36 3.1.2.3 Cơng thức quy trình điều chế hệ phân tán quy mô 1000 ml/lô 43 3.1.3 Phân tích tính chất hóa lý hệ phân tán 44 3.1.3.1 Tính chất cảm quan .44 3.1.3.2 pH độ nhớt 44 3.1.3.3 Kích thước tiểu phân 44 3.1.3.4 Thế zêta 45 3.1.3.5 Định tính 45 3.1.3.6 Định lượng 45 3.1.4 Độ ổn định hệ phân tán 47 3.2 PHÁT TRIỂN QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ THUỐC NHỎ MẮT CHỨA HỆ PHÂN TÁN NANO DEXAMETHASON 0,1% VÀ TOBRAMYCIN 0,3% VỚI QUY MÔ 500 LỌ/LÔ .49 3.2.1 Khảo sát thông số trình sản xuất .52 3.2.1.1 Thời gian khuấy hòa tan tobramycin tá dược thân nước 52 3.2.1.2 Hiệu trình lọc 52 3.2.1.3 Thời gian khuấy phân tán dexamethason 52 3.2.1.4 Thời gian khuấy thiết bị Ultra – Turrax 53 3.2.1.5 Số chu kỳ đồng hoá máy đồng hoá áp suất cao 53 3.2.1.6 Tốc độ phân liều máy đóng lọ nhỏ mắt tự động 55 3.2.1.7 Quy trình điều chế thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% quy mô 500 lọ/lô 55 3.2.2 Xác định tính chất lý hóa hệ phân tán điều chế quy mơ 500 lọ/lơ .57 3.2.2.1 Tính chất cảm quan .57 3.2.2.2 Kích thước tiểu phân 57 3.2.2.3 pH độ nhớt 58 iv 3.2.2.3 Thế zêta 58 3.2.2.4 Định tính 58 3.2.2.5 Định lượng 59 3.3 DỰ THẢO TIÊU CHUẨN SƠ SỞ CỦA THUỐC NHỎ MẮT 60 3.4 THEO DÕI ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA THUỐC NHỎ MẮT 60 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 65 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 54 a) b) c) Hình 3.8 Dải phân bố kích thước hạt sau qua 5, 10, 15 chu kỳ đồng hóa áp suất cao (a) chu kỳ; (b) 10 chu kỳ; (c) 15 chu kỳ Nhận xét: Mẫu hỗn dịch đồng hóa qua máy HPH chu kỳ có kích thước hạt trung bình cịn lớn Trong đó, mẫu đồng hóa qua 10 13 chu kỳ cho dải phân bố kích thước tiểu phân tương đồng Tuy nhiên, tăng số chu kỳ từ 10 chu kỳ lên 13 chu kỳ, kích thước trung bình tiểu phân khơng thay đổi đáng kể Do đó, hỗn dịch nhỏ mắt chọn đồng hóa qua 10 chu kỳ áp suất 800 bar Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 55 3.2.1.6 Tốc độ phân liều máy đóng lọ nhỏ mắt tự động Bảng 3.29 Tốc độ phân liều máy đóng lọ nhở mắt tự động PL- 010317 PL- 020317 PL- 0310317 Thể tích 60 lọ/ 70 lọ/ 80 lọ/ 60 lọ/ 70 lọ/ 80 lọ/ 60 lọ/ 70 lọ/ 80 lọ/ (ml) phút phút phút phút phút phút phút phút phút Lọ 10,20 10,10 10,20 10,10 10,10 10,10 10,20 10,10 10,20 Lọ 10,10 10,10 10,20 10,10 10,10 10,10 10,20 10,10 10,20 Lọ 10,20 10,10 10,20 10,10 10,20 10,20 10,20 10,20 10,20 Lọ 10,20 10,10 10,20 10,20 10,20 10,20 10,20 10,20 10,20 Lọ 10,10 10,20 10,10 10,10 10,20 10,20 10,20 10,20 10,20 Lọ 10,20 10,10 10,10 10,10 10,20 10,10 10,20 10,10 10,20 Lọ 10,20 10,10 10,10 10,20 10,20 10,10 10,20 10,20 10,20 Lọ 10,10 10,20 10,10 10,20 10,20 10,10 10,10 10,10 10,10 Lọ 10,20 10,10 10,10 10,10 10,20 10,20 10,20 10,10 10,10 Lọ 10 10,20 10,20 10,10 10,20 10,20 10,20 10,20 10,20 10,10 Nhận xét: đóng lọ tốc độ đóng 60 lọ/phút, 70 lọ/phút, 80 lọ/phút đảm bảo đồng thể tích lọ Đề tài chọn tốc độ 70 lọ/phút để tiến hành đóng lọ thuốc nhỏ mắt 3.2.1.7 Quy trình điều chế thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% quy mơ 500 lọ/lơ Quy trình sản xuất thuốc nhỏ mắt chứa hỗn dịch nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% xây dựng với kết thực nghiệm sau: ✓ Thời gian khuấy hịa tan hồn tồn tobramycin tá dược thân nước phút ✓ Lọc qua màng lọc cellulose actetat 0,22 µm khí N2 đạt hiệu yêu cầu ✓ Thời gian phân tán dexamethason vào pha nước chứa tobramycin: 30 phút ✓ Thông số khuấy Ultra-Turrax 15000 rpm, thời gian 20 phút ✓ Hệ phân tán đồng hóa máy HPH APV-2000 800 bar 10 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 56 chu kỳ ✓ Tốc độ phân liều máy đóng lọ nhỏ mắt tự động phù hợp 70 phút/lọ Mơ tả quy trình bào chế - Cân thành phần nguyên liệu theo cơng thức - Đun nóng lít nước cất pha tiêm đến nhiệt độ khoảng 90 oC Thêm từ từ HPMC vào, khuấy liên tục với tốc độ 1000 rpm Khi thêm hết lượng HPMC, tiếp tục khuấy thêm 30 phút HPMC phân tán hoàn toàn Sau đó, thêm vào dịch HPMC lít nước cất pha tiêm Khuấy Để nguội đến nhiệt độ phòng - Hòa tan benzalkonium clorid, dinatri EDTA, natri clorid lít nước cất pha tiêm với tốc độ khuấy 1000 rpm 10 phút Sau thêm từ từ poloxamer vào, khuấy với tốc độ 1000 rpm 20 phút để hịa tan hồn tồn Tiếp tục cho tobramycin vào Khuấy phút để nguyên liệu tan hết hoàn toàn Thêm PEG 400 vào dung dịch, khuấy đồng phút - Phối hợp dung dịch HPMC thu vào dung dịch vừa pha chế Khuấy phút Thêm dung dịch H2SO4 0,1 N Khuấy phút Sau bổ sung nước cất pha tiêm đến đủ lít - Tiến hành lọc dung dịch thuốc qua màng lọc 0,22 µm bằng khí N2 - Thêm dexamethason vào dịch thuốc Khuấy máy khuấy từ với tốc độ 1000 rpm 30 phút - Chuyển dịch thuốc qua máy khuấy tốc độ cao Ultra-Turrax Khuấy với tốc độ 15000 rpm 20 phút - Cho dịch thuốc chạy qua máy đồng hóa áp suất 800 bar qua 10 chu kỳ - Đóng thuốc vào lọ PEHD 10 ml vơ trùng máy đóng lọ nhỏ mắt tự động với tốc độ phân liều 70 lọ/phút - Đóng gói, dán nhãn, bảo quản mẫu nhiệt độ 30 ± oC, RH 75 ± 5% nhiệt độ 40 ± oC, RH 75 ± 5% Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 57 3.2.2 Xác định tính chất lý hóa hệ phân tán điều chế quy mô 500 lọ/lơ 3.2.2.1 Tính chất cảm quan Hỗn dịch đục mờ, không màu, không quan sát thấy tiểu phân mắt thường 3.2.2.2 Kích thước tiểu phân Kết đánh giá kích thước hỗn dịch nano dexamethason 0,1% phối hợp tobramycin 0,3% quy mô 500 lọ/lô cho thấy ba mẻ cho hỗn dịch kiểu phân bố kích cỡ đỉnh với kích thước trung bình khoảng 210 - 240 nm Bảng 3.30 Kích thước tiểu phân trung bình hệ phân tán PL- 010317 PL- 020317 PL- 030317 Kích thước TB (nm) 211,5 ± 15,7 240,0 ± 19,5 232,8 ± 17,4 Kiểu phân bố (đỉnh) 1 PL-010317 PL-020317 PL-030317 Hình 3.9 Dải phân bố kích thước hạt mẫu điều chế (a) PL-010317; (b) PL-020317; (c) PL-030317 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 58 3.2.2.3 pH độ nhớt Kết đo pH trung bình mẫu hỗn dịch nhỏ mắt sau điều chế khoảng 5,5 pH nằm khoảng pH xây dựng cho thuốc nhỏ mắt Bảng 3.31 Kết pH mẫu hỗn dịch nhỏ mắt Chỉ tiêu PL-010317 PL-020317 PL-030317 pH 5,56 ± 0,01 5,58 ±0,03 5,52 ±0,03 Độ nhớt (cP) 11,74 ± 0,75 12,32 ± 0,56 12,81 ± 0,66 3.2.2.3 Thế zêta Kết zêta mẫu hệ phân tán thể Bảng 3.32 Hình 3.10 Bảng 3.32 Kết đo zêta công thức Công thức Thế zêta (mV) PL - 010317 -3,25 ± 0,35 PL - 020317 -4,37 ± 0,41 PL - 030317 -3,43 ± 0,32 Hình 3.10 Biểu đồ thể giá trị zêta mẫu hệ phân tán 3.2.2.4 Định tính Định tính tobramycin: Sản phẩm lơ nhỏ mắt có thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch dẫn xuất thử tương ứng với thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch dẫn xuất chuẩn Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 59 Định tính dexamethason: Sản phẩm lơ nhỏ mắt có thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch thử tương ứng với thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch chuẩn 3.2.2.5 Định lượng Bảng 3.33 Hàm lượng hoạt chất mẫu nhỏ mắt Hàm lượng PL-010317 PL-020317 PL-030317 Tobramycin (%) 99,37 ± 0,34 98,23 ± 0,28 99,52 ± 0,22 Dexamethason (%) 99,52 ± 0,41 100,59 ± 0,37 100,01 ± 0,25 Hình 3.11 Sắc ký đồ tobramycin lơ PL-010317 Hình 3.12 Sắc ký đồ dexamethsone lơ PL-010317 Tn thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 60 3.3 DỰ THẢO TIÊU CHUẨN SƠ SỞ CỦA THUỐC NHỎ MẮT Trên sở tính chất, đường dùng dạng bào chế dựa Dược điển Mỹ USP 38, đề tài dự thảo tiêu chuẩn thuốc nhỏ mắt trình bày Bảng 3.34 Bảng 3.34 Tiêu chuẩn sở dự thảo cho thuốc nhỏ mắt phối hợp tobramycin dexamethason Chỉ tiêu yêu cầu Mức chất lượng Phương pháp thử Tính chất Hỗn dịch đục mờ, không Cảm quan màu, không quan sát thấy tiểu phân mắt thường Định tính Phải có tín hiệu dương tính đặc Thời gian lưu sắc trưng tobramycin ký đồ mẫu thử so dexamethason với mẫu chuẩn Thể tích 10 ml + 10,0% Đo thể tích pH 5,0 - 6,0 pH kế Kích thước tiểu phân < 1000 nm Máy đo kích thước tiểu phân Định lượng 90,0 – 120,0% tobramycin HPLC 90,0 – 110,0% dexamethason Độ vô khuẩn Phải vô khuẩn Tiến hành theo DĐVN IV 3.4 THEO DÕI ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA THUỐC NHỎ MẮT Thuốc nhỏ mắt theo dõi độ ổn định điều kiện: - Nhiệt độ 30 ± oC, RH 75 ± 5% : 0, 1, 3, tháng - Nhiệt độ 40 ± oC, RH 75 ± 5% : 0, 1, 3, tháng Các tiêu chất lượng theo dõi bao gồm: Tính chất cảm quan, pH, kích thước tiểu phân, định lượng độ vô khuẩn Kết theo dõi độ ổn định trình bày Bảng 3.35 Bảng 3.36 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 61 Bảng 3.35 Kết theo dõi hỗn dịch điều kiện 30 ± oC, RH 75 ± 5% Hàm lượng tobramycin (%) Hàm lượng dexamethason (%) Độ vô khuẩn Tên mẫu Chỉ tiêu Cảm quan pH KTTPTB (nm) PL-010317 Ban đầu Đạt 5,56 ± 0,02 211,5 ± 15,7 99,37 ± 0,34 99,52 ± 0,41 Đạt tháng Đạt 5,51± 0,03 236,5 ± 17,4 99,46 ± 0,46 100,51 ± 0,35 Đạt tháng Đạt 5,45 ± 0,02 242,3 ± 14,4 97,92 ± 0,37 97,29 ± 0,31 Đạt tháng Đạt 5,50 ± 0,01 257,9 ± 20,1 96,27 ± 0,49 97,67 ± 0,44 Đạt Ban đầu Đạt 5,58 ± 0,03 240,0 ± 19,5 98,23 ± 0,28 100,59 ± 0,37 Đạt tháng Đạt 5,54 ± 0,02 225,4 ± 23,5 97,36 ± 0,35 100,51 ± 0,54 Đạt tháng Đạt 5,59 ± 0,03 261,0 ± 16,9 96,12± 0,40 99,29 ± 0,36 Đạt tháng Đạt 5,51 ± 0,02 258,2 ± 19,7 96,84 ± 0,37 98,15 ± 0,42 Đạt Ban đầu Đạt 5,52 ± 0,03 232,8 ± 17,4 99,52± 0,22 100,01 ± 0,25 Đạt tháng Đạt 5,57 ± 0,01 241,4 ± 22,6 99,46 ± 0,51 99,23 ± 0,49 Đạt tháng Đạt 5,48 ± 0,04 239,7 ± 26,3 98,73 ± 0,43 99,29 ± 0,32 Đạt tháng Đạt 5,5 ± 0,02 250,8 ± 16,9 97,26 ± 0,32 98,06± 0,34 Đạt PL-020317 PL-030317 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 62 Bảng 3.36 Kết theo dõi hỗn dịch điều kiện lưu mẫu 40 ± oC, RH 75 ± 5% Tên mẫu Chỉ tiêu Cảm quan pH KTTPTB (nm) Hàm lượng tobramycin (%) Hàm lượng dexamethason (%) Độ vô khuẩn PL-010317 Ban đầu Đạt 5,56 ± 0,02 211,5 ± 15,7 99,37 ± 0,29 99,52 ± 0,21 Đạt tháng Đạt 5,44 ± 0,03 257,4 ± 19,0 98,12 ± 0,35 99,26 ± 0,33 Đạt tháng Đạt 5,61 ± 0,03 243,6 ± 22,1 97,01 ± 0,30 98,35 ± 0,29 Đạt tháng Đạt 5,37 ± 0,02 226,6 ± 23,2 95,34 ± 0,27 96,07 ± 0,34 Đạt Ban đầu Đạt 5,58 ± 0,03 240,0 ± 19,5 98,23 ± 0,17 100,59 ± 0,37 Đạt tháng Đạt 5,40 ± 0,02 245,3 ± 24,4 97,93 ± 0,22 100,44 ± 0,26 Đạt tháng Đạt 5,55 ± 0,02 237,8 ± 26,5 97,07 ± 0,26 99,83 ± 0,23 Đạt tháng Đạt 5,49 ± 0,02 240,9 ± 18,4 96,19 ± 0,38 97,64 ± 0,32 Đạt Ban đầu Đạt 5,52 ± 0,03 232,8 ± 17,4 99,52 ± 0,40 100,01 ± 0,37 Đạt tháng Đạt 5,59 ± 0,01 252,5 ± 14,6 98,25 ± 0,38 99,43 ± 0,41 Đạt tháng Đạt 5,61 ± 0,03 257,8 ± 19,2 97,16 ± 0,25 99,06 ± 0,26 Đạt tháng Đạt 5,48 ± 0,02 249,3 ± 20,7 95,32 ± 0,35 97,34 ± 0,18 Đạt PL-020317 PL-030317 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 63 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Sau thời gian thực với mục tiêu đề ra, đề tài đạt kết sau: ❖ Đề tài xây dựng công thức bào chế cho hỗn dịch nano dexamethason 0,1% phối hợp tobramycin 0,3% với công thức sau: Thành phần Hàm lượng (g) Tobramycin 0,03 Dexamethason 0,01 Poloxamer 0,10 HPMC 0,10 PEG 400 0,50 Dinatri EDTA 0,001 Dung dịch H2SO4 0,1 N (ml) 0,29 Natri clorid 0,74 Benzalkonium clorid Nước cất pha tiêm 0,001 vđ 10ml ❖ Công thức quy trình điều chế hệ thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% khảo sát quy mô 500 lọ/lô Thuốc nhỏ mắt bào chế phương pháp đồng hóa áp suất cao Giai đoạn giảm kích thước tiểu phân tiến hành cách sử dụng thiết bị phân tán tốc độ cao Ultra - Turrax với tốc độ 15000 rpm 20 phút Sau đó, hệ phân tán đồng hoá 10 chu kỳ áp suất 800 bar Hệ phân tán thu có kích thước tiểu phân trung bình nằm khoảng 210-240 nm Đây kết khả quan so sánh với mẫu thuốc nhỏ mắt hỗn dịch đối chiếu thị trường có kích thước trung bình từ 3-5 µm Quy trình bào chế đơn giản, có tính lặp lại, dễ dàng nâng quy mô pilot hướng đến quy mô sản xuất ❖ Đề tài dự thảo tiêu chuẩn cho thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% theo USP 38 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 64 ❖ Thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% sau tháng bảo quản điều kiện thường lão hóa cấp tốc đạt tiêu chất lượng đặt KIẾN NGHỊ Để hoàn thiện sản phẩm, đề tài cần tiếp tục thực số nội dung sau: - Thẩm định tiêu chuẩn dự thảo thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% - Tiếp tục theo dõi đánh giá độ ổn định dài hạn thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% - Đánh giá hiệu dược lý thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1% tobramycin 0,3% so với thuốc đối chiếu Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam, lần xuất thứ 4, Hà Nội, tr 208-209 Bộ Y Tế (2012), Dược Thư quốc gia Việt Nam, NXB Y Học, Hà Nội, tr.1109 Phạm Ngọc Bùng, Hoàng Đức Chước, Nguyễn Đăng Hòa, Võ Xuân Minh (2006), Kỹ thuật bào chế sinh dược học dạng thuốc, tập 1, Nhà xuất Y học, Hà Nội 2006, tr 183-2012 Nguyễn Minh Đức, Trương Công Trị (2010), Tiểu phân nano - Kỹ thuật bào chế, phân tích tính chất ứng dụng ngành Dược, Nhà xuất Y học, TP HCM, tr 59 – 73, 147 – 175 Trần Thị Minh Thu (2004), Nghiên cứu xây dựng công thức thuốc nhỏ mắt Tobramycin 0,3%, Luận Văn Thạc Sỹ Dược Học, Đại học Dược Hà Nội TIẾNG ANH Amrite A.C., Kompella U.B (2005), “Size-dependent disposition of nanoparticles and microparticles following subconjunctival administration”, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 57(12), pp.1555-1563 Bergamini M.V.W., Lopez C.A., Vallet M.J.A., Oros L.C (1994), Pharmaceutical formulation containing clobetasone and Tobramycin and applications thereof, European Patent 0661055 A1 Bergamini M.V.W., Mas J.A.V., Cabello J.T., Cabrera A.L., Weniger (1997), Diclofenac and Tobramycin formulations for ophthalmic and otic topical use, US patent 005597560A Budai et al (2007), “Gels and Liposome in optimized ocular drug delivery: studies on ciprofloxacin formulations”, International Journal of Pharmaceutics, 343(1), pp 34–40 10 Brandl M., Gu L (1992), ”Degradation of Tobramycin in aqueous solution”, Drug Development and Industrial Pharmacy, 18(13), pp.1423-1436 11 Brittain H.G (1996), Analytical profiles of Drug substances and Excipients, Vol 24, Academic Press, Chicago, pp 580-608 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 12 Cagle G.D., McDonald T.O., Rosenthal A.L (1992), Combination of tobramycin and dexamethason for topical ophthalmic use, US patent 5,149,694 13 Conrow R.E et al (2002), “Corticosteroid Decomposition via a Mixed Anhydride”, Journal of Organic Chememistry, 67 (19), pp 6835–6836 14 Edmonds J.S., Morita M., Turner P., Skelton B.W., White A.H (2006), “Aerial oxidation of the glucocorticoid side-chain under pH control”, Steroids, 71, pp 34-41 15 Fialho S.L (2004), “New vehicle based on a microemulsion for topical ocular administration of Dexamethason”, Clinical Express Ophthalmology, 32(6), pp 626–632 16 Florey K (1973), Analytical Profiles of Drug Substances, Vol 2, Academic Press, London, pp 163-192 17 Gaudana R., Jwala J., Boddu S.H.S., Mitra A.K (2009), “Recent perspectives in ocular drug delivery, Pharmaceutical Research, 26(5), pp 1197–1216 18 Jitendra, Sharma P.K., Banik A., Dixit S (2011),” A new trend: Ocular Drug Delivery System”, Pharma Science Monitor-An International Journal Of Pharmaceutical Sciences, 2(3) 19 Kabra B.P (2013), Topical ophthalmic compositions containing tobramycin and dexamethason, US patent 8,450,287 B2 20 Kassem M.A., Rahman A.A., Ghorab M.M., Ahmed M.B., Khalil R.M (2007), “Nanosuspension as an ophthalmic delivery system for certain glucocorticoid drugs”, International Journal of Pharmaceutics, 340, pp 126–133 21 Kaur I.P., Garg A., Singla A.K., Aggarwal D (2004), “Vesicular systems in ocular drug delivery: an overview”, International Journal of Pharmaceutics, 269(1), pp 1–14 22 Kayser O (2005), “The impact of nanobiotechnology on the development of new drug delivery systems”, Current Pharmceutical Biotechnology, 6(1), pp 35 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 23 Kurade D.S., Joshi D.G., Bandgar A.A (2015), “A review on ocular drug delivery with new trends”, International Journal of Advanced Research, 3(11), pp 629 – 642 24 Li J et al (2015), “Positively charged micelles based on a triblock copolymer demonstrate enhanced corneal penetration”, International Journal of Nanomedicine, 10(1), pp 6027- 6037 25 Malmsten M (2002), Surfactants and Polymers in Drug Delivery, Chapter 2, Marcel Dekker Inc., New York 26 Malvolti C., Gazia R (2012), Optimised formulation of Tobramycin for aerosolization, US Patent 8,168,598 B2 27 Martindale- The Complete Drug References, 35th edition, The Pharmaceutical press, London, p 271 28 Mitra A.K (2003), Ophthalmic Drug Delivery System, 2nd edition, Marcel Dekker Inc., New York, pp 437-443 29 Mudgil M., Gupta N., Nagpal M., Pawar P (2012), “Nanotechnology: a new approach for ocular drug delivery system”, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 4(2), pp 105-112 30 Nisha S., Deepak K (2012), “An insight to ophthalmic drug delivery system,” International Journal of Pharmaceutical Studies Research, 3(2), pp 9-13 31 Patel A., Cholkar K., Agrahari V., Mitra A.K (2013), “Ocular drug delivery systems: An overview”, World Journal of Pharmacology, 2(2), pp 47–64 32 Perdiguer N.C., Mas J.A.V., Cabello G.T (2002), Pharmaceutical compositions containing Tobramycin and xanthan gum, US patent 6,352,978 B1 33 Rajasekaran A., Kumaran K.S.G.A., Preetha J.P., Karthika K (2010), “A comparative review on conventional and advanced ocular drug delivery formulations,” International Journal of Pharm Tech Research, 2(1), pp 668-74 34 Reddy I.K (1996), Ocular therapeutics and drug delivery, Technomic Publishing Company Inc., USA, chapter 13 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 35 Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2005), 21st edition, The University of the Sciences in Philadelphia 36 Rosasco M.A., Segall A.I (2015), “Determination of the Chemical Stability of Various Formulations of Tobramycin Eye-Drops by HPLC Method and Data Analysis by R-GUI Stability Software”, Journal of Applied Pharmaceutical Science, (12), pp 008-013 37 Min L (2012), Organic Chemistry of Drug Degradation, RSC Drug Discovery Series No 29 38 Sahoo S.K., Dilnawaz F., Krishnakumar S (2008), “Nanotechnology in ocular drug delivery”, Drug Discovery Today, 13(3), pp 144–151 39 Shivhare R et al (2012), “An update review on novel advanced ocular drug delivery system”, World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 1(2), pp 545–568 40 Smith G.B., Weinstock L.M et al (1972), “Kinetics of equilibration of bisulfite and dexamethason-21-phosphat in aqueous solution”, Journal of Pharmaceutical Sciences, 61(5), pp.708–716 41 Suresh P.K et al (2011), “Ophthalmic Delivery System for Dexamethason: An overview”, International Journal of Innovative Pharmaceutical Research, 2(4), pp.161-165 42 Tangri P., Khurana S (2011), “Basics of ocular drug delivery systems,” International Journal of Research in Pharmaceuticaland Biomedical Sciences, 2(4), pp 1541–1552 43 Vandamne T.F (2002), “Microemulsions as ocular drug delivery systems: recent developments and future challenges”, Progess in Retinal and Eye Research, 2, pp.15–34 44 http://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2009/050818lbl.pdf, accessed 01 June 2016 45.http://www.usp.org/sites/default/files/usp_pdf/EN/meetings/workshops/ophthalmic preparations.pdf, accessed 01 June 2016 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn ... trình bào chế hệ phân tán nano dexamethason 0,1 % tobramycin 0,3 %, phân tích tính chất hóa lý hệ phân tán Phát triển quy trình điều chế thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1 % tobramycin. .. thành góp phần vào việc nghiên cứu phát triển dạng bào chế dùng cho mắt Việt Nam MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Mục tiêu tổng quát Bào chế thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1 % tobramycin 0,3... thảo tiêu chuẩn sở cho thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1 % tobramycin 0,3 % Theo dõi độ ổn định thuốc nhỏ mắt chứa hệ phân tán nano dexamethason 0,1 % tobramycin 0,3 % sau 06