NGHIÊN CỨU BAO c h ế t h u ố c t iê m đ ậ m đ ặ c c h ứ a SULFAMETHOXAZOL 20% VÀ TRIMETHOPRIM 4% Dương Thị Hổng Ánh, Nguyễn Thị Hải Yến, Nguyễn Văn Long Trường Đại học Dược Hà Nội SU M M ARY The com bination o f S u lfa m e th o x a z o l an d trim ethoprim is used to treat a w ide variety o f bacterial Infections However, the in solubility a n d insta bility in w ater o f these tw o active su bstan ces are m a jo r problem s o f parenteral preparation The aim o f this research w as to stu d y on preparin g 20% Sulfamethoxazol a n d 4% trim ethoprim concentrated injection B ased on the results o f this study, the form ulation o f 20% Sulfam ethoxazol a n d 4% trim ethoprim injection w as presented an d the sta bility o f this preparation w as Initially studied Từ k h ó a : Sulfamethoxazol, trim ethoprim , 2-pyrolldon, thu ốc tiêm, độ tan Đặt vấn đề Hiện nay, việc kết hợp hai dược chất Sulfa methoxazol trimethoprim dạng bào chế sử dụng phổ biến trường hợp nhiễm khuẩn Gram âm đường hô hấp, tiết niệu nhằm giảm tính kháng thuốc vi khuẩn nhạy cảm Tuy nhiên, hai dược chất tan nước ổn định việc bào chế dạng thuóc tiêm gặp nhiều khó khăn, thực đé tài nghiên cứu bào chế thuốc tiêm đậm đặc hai thành phần Sulfamethox azol trimethoprim để truyền tĩnh mạch với mục tiêu xây dựng công thức bào chế thuốc tiêm thành phẩn Sulfamethoxazol 20% trim ethoprim 4% bước đầu nghiên cứu độ ổn định Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu Nguyên liệu: Sulfamethoxazol (tiêu chuẩn BP) (SMZ), trim ethoprim (tiêu chuẩn Dược dụng) (TMP), propylenglycol (PG), 2-pyrolidon (2-Pyr), polyethylen glycol 400 (PEG 400), ethanol, dimethylsulfoxid, dimethylacetamid, monoethanolamin (MEA), diethanolamin (DEA), triethanolamin (TEA), nước cất pha tiêm (tiêu chuẩn DĐVN IV ) Phương pháp nghiên cứu ! Nghiến Cứu dược Thông tin thuõc I Số 2/2012 Khảo sát độ tan trimethoprlm số dung mồi: Hòa tan lượng dưtrimethoprim vào dung môi hỗn hợp dung môi, khuấy từ liên tục 12 nhiệt độ phòng (20-30°C) Lọc pha loãng (nếu cẩn) Xác định nóng độ dung dịch bâo hòa phương pháp đo quang bước sóng 271 nm Khảo sát ảnh hưởng tá dược kiểm đến độ tan Sulfam ethoxazol: Hòa tan lượng tá dược kiềm lOg Sulfamethoxazol vào 20ml nước cất Theo dõi ảnh hưởng tá dược kiềm khác đến độ trong, màu sắc thời gian kết tinh trở lại Sulfamethoxazol Các bước pha chế thuốc tiêm đậm đặc thành phân Sulfamethoxazol trimethoprim: Pha hỗn hợp dung môi, đun cách thủy 60-70°C, hoà tan trimethoprim, để nguội Đong lượng nước, hòa tan chất chống oxy hóa, tá dược kiểm, Sulfa methoxazol Rót từ từ dung dịch Sulfamethoxa zol vào dung dịch trimethoprim, khuấy đểu Điều chỉnh pH thích hợp Thêm nước vừa đủ thể tích, lọc qua màng lọc PTFE cellulose tái tổ hợp với kích thước lỗ lọc 0,45|am Soi kiểm tra độ Đóng ống tiêm ml, sục khí trình đóng ống tiệt khuẩn nhiệt ẩm 100°c 30 phút Soi loại bỏ ống hở, vẩn đục Dán nhân K Bước đâu theo dõi độ ổn định thuốc tiêm: pha chế thuốc tiêm theo công thức lựa chọn Theo dõi hình thức, pH, % hàm lượng dược chất lại điều kiện sau thời gian 30 ngày; + Điểu kiện phòng thí nghiệm: nhiệt độ 20 30°C(1) + Điểu kiện tủ vi khí hậu: nhiệt độ 40 ± 2‘c , tránh ánh sáng (2) + Điểu kiện khắc nghiệt: luộc sôi phơi ánh sáng (3) Phương pháp định lượng thời dược chất SMXvà TMP: Phương pháp HPLC với điểu kiện: Cột C18 (250x4.6mm, 5|im), bước sóng 245nm, pha động: hỗn hợp dung dịch đệm phosphat pH 5,5 acetonitril (tỉ lệ 80:20), tốc độ dòng 1,2ml/ phút, thể tích tiêm 20|jl Mẫu chuẩn mẫu thử pha pha động với nóng độ trime thoprim 80|jg/ml, Sulfamethoxazol 200|jg/ml [1] tá dược kiểm cho lần khảo sát Bỏng Kết quânghiên cứuànlì hưởngcùatá dượckiémđễnktìànânghòa tơnSMĨ Độtrong Natrihyđrc»ộ/d (g) Kết khảo sát ảnh hường tá dược kiềm đến khả nàng hòa tan Sulfamethoxazol Sử dụng riêng biệt kết hợp số tá dược kiềm natri hydroxyd, TEA, DEA, MEA để hòa tan 10 g SMZ 20 ml nước.Theo dõi hình thức pH dung dịch ngày Kết bảng cho thấy kết hợp natri hỵdroxyd với DEA MEA, dung dịch thu có pH thấp màu vàng nhạt so với dung dịch lại Vì chọn cách kết hợp MEA 0) DEA TEA (3) Ö) pH Màu sác Điái lóỀn Điều kiện phòng thí nohiêni » 3P7 9,72 4,93 9^ 0,91 1,42 - 9(6 * - 9/B *** + + 1(VI5 « - - - - 9»^ * 0,91 Ỉ63 1Q09 * - ^ 3fl5 972 « - - - - - 0/ỀO Kết nghiên cứu Kết khảo sát độ tan trimethoprim số dung môi: Tiên hành khảo sát độ tan trimethoprim theo phương pháp đâ mô tả Kết khảo sát cho thấy độ tan trimethoprim dung môi 2-pyr cao {14,98 g/IOOml), đến độ tan trimethoprim PEG 400 (5,45 g/100ml) PG (2,65 g/IOOml) Tiếp tục khảo sát độ tan trimethoprim hỗn hợp dung môi 2-pyr PG 2-pyr PEG, kết cho thấy hàm lượng 2-pyr tăng, độ tan trimethoprim tăng Mặt khác, nhận thấy mầu sử dụng hỗn hợp dung mòi để hòa tan thời gian kết tinh lại lâu so với mẫu sử dụng 2-pyr để hòa tan TMP Do PEG thường không thích hợp cho thuốc tiêm tiệt khuẩn phương pháp nhiệt ẩm, lựa chọn hỗn hợp dung môi 2-pyr PG (40:20) để thực nghiên cứu Hinhlhút TDkiểm ,1 0,91 4,91 9,77 *# Q60 659 9,45 «* Chúth(ch: >> quá/ớn+ kẽt tủa - khôngkết tủa * màu/ỉỡl' vàng, màuvàng tănglên từ* ->**-> ***->**** Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất chống oxy hóa đến độ ổn định thuốc tiêm Tiến hành pha chế dung dịch thuốc tiêm theo công thức sau: Băng2 ĩhàahptiân màu thuíc tiêmsửdụngcác chát chõngoxyMa khácnhau Thành phán CT2 m 03 CT4 05 4Q0g 400g 4Q0g SMZ 4Q0g 4QDg TMP 8Pg m aog íiOg -pyr 80ml aoml aoml 80ml PG 40ml 40ml 40ml 40ml 40ml Alcolbenzylic 4ml 4ml 4ml 4ml 4ml Naừi hydroxyd ĩAg 2Ag MEA 8flg m NatrimeâbisuVit Q2 g Q2 g - - - CỊ2 g Q2 g Qig - Qlg - pHlQO pHIQO pHlQO pHlQO Rongalit - Natriedetat Ddnatritylroíyd Maddtvdtodanc2 MvđđiầJ diHipH Nướtcấtpha tìẻm vừa đù SỐ / 2 ! pHlQO 200 ml Ũ ml 2 ŨOml aog ũml 8,4q 200 ml 200 ml Nghiên cứu dược Thòng tln thuõc Ị 43 Bâng Kẽt quà theo dõi ảnh hưởng chât chống oxy hóa đến độ ổn n h dung dịch thuổc tiêm CT % hàm lư ợ n g d ợ c c h ấ t cò n lạ i Đ k k h ắ c n g h iệ t M àu sắ c Đ k t ủ vi k h í hậu Đ k khắc Đ k tù v i k h í hậu n g h iệ t SMZ TMP SM Z ,1 ,3 ,3 ,4 *** ** ,2 ,8 ,1 ,7 ** * ,8 95,71 ,8 ,3 ** * ,5 ,3 ,2 ,2 ** ,5 ,1 ,8 ,0 *# TMP Theo dõi màu sắc, hàm lượng dược chất lại dung dịch thuốc tiêm điều kiện khác nghiệt (luộc sôi giờ) tủ vi khí hậu sau 30 ngày Kết bảng cho thấy chất chống oxy hóa làm tăng độ ổn định dung dịch thuốc tiêm Kết nghiên cứu ảnh hường điều kiện tiệt khuẩn sục khí đến độ ổn định dung dịch thuốc tiêm Tiến hành pha chế dung dịch thuốc tiêm theo công thức 2, có không sục khí trình đóng ống tiêm, có không tiệt khuẩn phương pháp nhiệt ẩm (100°c, 30 phút), theo dõi màu sắc dung dịch phẩn trăm hàm lượng dược chất lại sau 30 ngày Kết bảng cho thấy việc sục làm tăng độ ổn định dung dịch thuốc tiêm, đóng thời việc sử dụng phương pháp tiệt khuẩn nhiệt ẩm không ảnh hưởng đến độ ổn định chế phẩm Đ iéu kiên Báng Két theo dõi ánh hường tiệt khuẩn sục khí Màu sắc % hàm lượng dược ch ất lại Đ iểu kiện tủ vi k hí hậú sau tháng Luộc sôi 8h Luôc sôi 8h Đ iếu kiện tủ vi k hí hậu sau tháng TMP SMZ TMP SMZ 97,27 96,85 98,12 96,76 ** * 97,45 97,06 98,24 97,05 ** * 96,34 96,13 97,16 96,54 ** * 96,54 96,47 96,14 96,35 ** * Bước đấu theo dõi độ ổn định dung dịch thuốc tiêm: Tiến hành pha chế dung dịch thuốc tiêm theo công thức 2, trình đóng ống tiêm có sục khí Nj, tiệt khuẩn phương pháp nhiệt ẩm, sau thời gian 30 ngày, theo dôi kết điều kiện khác Kết bảng cho thấy thời gian 30 ngày, dung dịch thuốc tiêm giữ độ ổn định điểu kiện phòng thí nghiệm Ánh sáng 44 Nghiên Cứu duợc Thôngtlnthuõc * Số2/20 12 Chúlhlứ: m k h u ầ , CÓSỤCN2 m tkh u ổ n , m n g s ụ c H 2 Không tiệ t khuẩn, CÓSỤCN2 Không tiệ t khuổn, không sục N2 nhiệt độ làm giảm hàm lượng dược chất dung dịch Bàn luận Trimethoprim dược chất tan nước, để bào chế thuốc tiêm dung dịch cẩn sử dụng thêm dung môi tan nước để bào chế thuốc tiêm, theo số tài liệu tham khảo sử dụng số dung môi đồng tan nước PEG, 2-pyr, PG, dimethylsulfoxid, dimethylacetamid để hòa tan dược chất khó tan 2-pyr làm tăng độ tan dược chất tan tốt [2] Sulfamethoxazol dươc chất có tính acid Bảng5 Kẽt quảtheo dõi độổn địnhcủadungdịch thuỗctiêm ĩrongthời gian 30ngày Đ iều kiện Hình thức TM P SMZ Trong, m àu vàng 10,05 100 100 Đ kl Trong, m àu vàng 10,10 99,26 99,35 Đk2 Trong, m àu vàng 10,21 98,27 98,55 Đk3 Trong, m àu vàn g đậm 10,33 95,35 96,02 Ban đắu Sau % Hàm lượng dược ch ất lại pH 30 ngày tan nước, để làm tăng độ tan dược chất này, sử dụng tá dược kiểm natri hydroxyd, MEA, DEA, TEA để tạo muói với Sulfamethoxazol Két sử dụng kết hợp MEA DEA với natri hydroxyd có tác dụng làm tăng độ tan SMZ, dung dịch thuốc tiêm ổn định so với tá dược kiềm khác Kết phù hợp với nghiên cứu Ki HM cộng [3], Các khảo sát đâ cho thấy thời gian 30 ngày dung dịch thuốc tiêm ổn định điều kiện phòng thí nghiệm, nhiên cán theo dôi độ ổn định dự đoán tuổi thọ thuốc cán tiến hành thử nghiệm dài hạn Kết luận Đã xây dựng công thức bào chế thuốc tiêm dung dịch đậm đặc thành phán Sulfamethoxazol 20% trimethoprim 4% đảm bảo tiêu chất lượng vòng 30 ngày điéu kiện phòng thí nghiệm Tài liệu tham khảo Trần Thị Lẽ Lý (2005), Nghiên cứu bào ché thuốc tiêm chứa sulfam ethoxazol trimethoprim, Khóa luận dược s ĩ đại học, Trướng đại học dược Hà Nội Jain p et al (2007), “Solubilization of poorly soluble compounds using 2-pyrrolidon”, Int J P h a r, 342, 1-2, pp.1-5 Ki HM et al (2007), T h e effect of meloxicam/ethanolamine salt formation on percutaneous absorption of meloxicam”, /\rch.Pharm R e s,, 30, 2, p.215 So 2/20 12 Nghiên cứu dược Thông tin thuõc 45 ... dịch đậm đặc thành phán Sulfamethoxazol 20% trimethoprim 4% đảm bảo tiêu chất lượng vòng 30 ngày điéu kiện phòng thí nghiệm Tài liệu tham khảo Trần Thị Lẽ Lý (2005), Nghiên cứu bào ché thuốc tiêm. .. hàm lượng dược chất dung dịch Bàn luận Trimethoprim dược chất tan nước, để bào chế thuốc tiêm dung dịch cẩn sử dụng thêm dung môi tan nước để bào chế thuốc tiêm, theo số tài liệu tham khảo sử dụng... khôngkết tủa * màu/ỉỡl' vàng, màuvàng tănglên từ* ->**-> ***->**** Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất chống oxy hóa đến độ ổn định thuốc tiêm Tiến hành pha chế dung dịch thuốc tiêm theo công thức sau: