Nghiên cứu bào chế viên nang mềm cho hệ phân tán nano chứa coenzym q10 và epigallocatechin gallat

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - BỘ Y TẾ LA THỊ HỒNG LAN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NANG MỀM CHO HỆ PHÂN TÁN NANO CHỨA COENZYM Q10 VÀ EPIGALLOCATECHIN GALLAT LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2017 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH LA THỊ HỒNG LAN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NANG MỀM CHO HỆ PHÂN TÁN NANO CHỨA COENZYM Q10 VÀ EPIGALLOCATECHIN GALLAT Chuyên ngành: Công nghệ dược phẩm bào chế thuốc Mã số: 60.72.04.02 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Trương Công Trị Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2017 v LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác La Thị Hồng Lan vi NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NANG MỀM CHO HỆ PHÂN TÁN NANO CHỨA COENZYM Q10 VÀ EPIGALLOCATECHIN GALLAT La Thị Hồng Lan Giảng viên hướng dẫn: TS.Trương Cơng Trị TĨM TẮT Coenzym Q10 (CoQ10) epigallocatechin gallat (EGCG) – hoạt chất có tính chống oxy hóa mạnh CoQ10 ứng dụng điều trị bệnh rối loạn ty thể, bệnh tim mạn tính, thối hóa thần kinh EGCG có hoạt tính kháng ung thư chứng minh in vitro in vivo Tuy nhiên, CoQ10 tan nước, đồng thời hai hoạt chất bền đối ẩm ánh sáng Đề tài hướng tới nghiên cứu hệ vi tự nhũ chứa CoQ10 EGCG (SMEDDS-CoQ10-EGCG) với nhiều ưu điểm tăng độ tan CoQ10, bảo vệ hoạt chất, phân tán tốt sau uống, với kích thước pha phân tán nhỏ giúp cho tiểu phân hấp thu qua lớp biểu mơ vào tuần hồn máu nhờ trình vận chuyển xuyên bào nội bào Độ pha loãng, độ bền động nhiệt học, phân bố kích thước hạt tiêu để đánh giá hệ SMEDDS Đề tài thiết lập công thức quy trình điều chế hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG quy mơ phịng thí nghiệm hàm lượng viên dự kiến chứa 30 mg CoQ10, 100 mg bột trà xanh đạt tiêu đánh giá Xây dựng quy trình điều chế hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG quy mô 1000 viên/lô đạt tiêu đánh Cả lô SMEDDS-CoQ10-EGCG đánh giá tiêu có tính lặp lại Tiến hành đóng nang quy mơ 1000 viên/lơ (thực lơ) Phân tích chất hóa lý dự thảo tiêu chuẩn sở cho viên nang mềm chứa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG Theo dõi độ ổn định viên nang mềm chứa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG điều kiện dài hạn thời điểm 0, 3, tháng, tiêu đưa đạt Từ khóa: CoQ10, EGCG, chống oxy hóa, độ tan, SMEDDS, viên nang mềm vii INVESTIGATION OF FORULATION OF SOFT CAPSULE FOR NANO DISPERSION CONTAINING COENZYME Q10 AND EPIGALLOCATECHIN GALLATE La Thi Hong Lan Under the guidance of PhD Truong Cong Tri ABSTRACT Coenzyme Q10 (CoQ10) and epigallocatechin gallate (EGCG) are both powerful antioxidants CoQ10 is used in the treatment of various diseases such as mitochondrial disorders, cardiovascular disease, neurodegeneration Anticancer activity of EGCG has been proved not only in vitro but also in vitro studies However, CoQ10 is almost completely insoluble in water, besides that both substances have poor stability against humidity and light Our research will focus on Formulating of a Self- microemulsifying Drug Delivery System Containing CoQ10 and EGCG (SMEDDSCoQ10-EGCG) with many advantages like increasing solubility of CoQ10, protecting substances, disperse well after administration, with the size of the dispersed phase also allows subdivision to be absorbed through the epithelium into the blood circulation through transcellular and intracellular transport Dilution, thermodynamic strength, particle size distribution are the criteria for evaluating the SMEDDS system The subject has established the formula and process of modulating the SMEDDS-CoQ10-EGCG system in a laboratory scale where capsule is expected to contain 30 mg of CoQ10, 100 mg of green tea powder to achieve the evaluation criteria Construction of SMEDDS-CoQ10-EGCG modulation system at scale of 1000 tablets/lot met the targets All three plots of SMEDDS-CoQ10-EGCG are repeatable Conducting the capsule at scale of 1000 tablets/lot (make lots) Physical and chemical analyzes and draft standard criteria for soft capsules containing SMEDDS-CoQ10-EGCG The stability of soft capsules containing SMEDDS-CoQ10-EGCG in long-term conditions at 0, 3, months, the targets are reached Key words: CoQ10, EGCG, antioxidant, solubility, SMEDDS, soft capsules viii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .v MỤC LỤC viii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT xi DANH MỤC CÁC BẢNG xiii DANH MỤC HÌNH xv LỜI CẢM ƠN xvii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 TỔNG QUAN COENZYM Q10 VÀ EGCG 1.1.1 Coenzym Q10 1.1.2 Epigallocatechin gallat 1.1.3 Một số sản phẩm chứa CoQ10 EGCG thị trường 1.2 TỔNG QUAN VỀ HPT 10 1.2.1 Khái niệm HPT 10 1.2.2 Phương pháp đánh giá tính chất độ ổn định HPT 10 1.2.3 Ứng dụng HPT nano ngành dược 13 1.3 TỔNG QUAN VỀ HỆ TỰ NHŨ 15 1.3.1 Khái niệm 15 1.3.2 Phương pháp bào chế 16 1.3.3 Các bước khảo sát hệ SMEDDS 16 1.3.4 Các tiêu đánh giá hệ SMEDDS 18 ix 1.3.5 Một số biệt dược sử dụng hệ SMEDDS 20 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN VẬT LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ .21 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.1.2 Nguyên vật liệu 21 2.1.3 Hóa chất, dung mơi 21 2.1.4 Thiết bị 22 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.2.1 Khảo sát độ tan CoQ10 EGCG 23 2.2.2 Nghiên cứu xây dựng quy trình điều chế hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG quy mơ phịng thí nghiệm (100 g/mẫu) 23 2.2.3 Thẩm định quy trình định lượng CoQ10 ECCG phương pháp HPLC 24 2.2.4 Phân tích tiêu lý hóa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG 29 2.2.5 Đánh giá độ ổn định hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG 30 2.2.6 Nâng cỡ lô cho hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG tương ứng 1000 viên/lô 31 2.2.7 Phát triển sản phẩm viên nang mềm chứa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG 31 2.2.8 Phân tích tính chất hóa lý dự thảo tiêu chuẩn sở cho viên nang mềm chứa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG 31 2.2.9 Theo dõi độ ổn định viên nang mềm 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 33 3.1 THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG COQ10 33 3.1.1 Tính tương thích hệ thống CoQ10 33 3.1.2 Tính đặc hiệu/chọn lọc 34 3.1.3 Tính tuyến tính 35 x 3.1.4 Độ lặp lại 37 3.1.5 Độ xác trung gian 38 3.1.6 Độ 39 3.2 THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG EGCG 42 3.2.1 Tính tương thích hệ thống 42 3.2.2 Tính đặc hiệu/chọn lọc 43 3.2.3 Tính tuyến tính 44 3.2.4 Độ lặp lại 46 3.2.5 Độ xác trung gian 47 3.2.6 Độ 48 3.3 KHẢO SÁT HỆ SMEDDS CHỨA COQ10-EGCG 50 3.3.1 Khảo sát tính chất lý hóa CoQ10 50 3.3.2 Khảo sát đánh giá hệ SMEDDS chứa CoQ10-EGCG (SMEDDS-CoQ10EGCG) 53 3.3.3 Điều chế SMEDDS-CoQ10-EGCG cỡ mẫu 113 g 59 3.3.4 Nâng cỡ lô hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG lên quy mô 1130 g/lô 60 3.3.5 Bào chế viên nang mềm chứa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG 62 3.3.6 Phân tích tính chất hóa lý dự thảo tiêu chuẩn sở cho viên nang mềm chứa hệ SMEDDS-CoQ10-EGCG 67 3.3.7 Theo dõi độ ổn định sơ viên nang mềm 70 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 71 KẾT LUẬN .71 KIẾN NGHỊ 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 xi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ nguyên Nghĩa từ AUC Area under the curve Diện tích đường cong CDH Chất diện hoạt CĐDH Chất đồng diện hoạt CoQ10 Coenzyme Q10 CT DE Công thức Dry Emulsion Nhũ tương khô Dầu/Nước D/N EGCG Coenzym Q10 Epigallocatechin gallate HĐBM Epigallocatechin gallate Hoạt động bề mặt HLB Hydrophilic – Lipophilic Balance Cân thân dầu – thân nước HPLC High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatography HPT Hệ phân tán KHVQH Kính hiển vi quang học N/D Nước/Dầu NE Nanoemulsions Nano nhũ tương NLC Nanostructured Lipid Carriers Giá mang cấu trúc nano PD PEG PN Pha Dầu Polyethylenglycol Polyethylenglycol Pha nước xii PDI Polydispersity Index Chỉ số đa phân tán IUPAC International Union of Pure and Danh pháp hóa học quốc tế Applied Chemistry Rpm Revolutions per minute Vòng phút RSD Relatively Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn SEM Scanning Electron Microscopy Kính hiển vi điện tử quét SEDDS Self emulsifying drug delivery Hệ tự nhũ tạo nhũ tương system SMEDDS Self microemulsifying drug Hệ vi tự nhũ delivery system SNEDDS Self nanoemulsifying drug Hệ siêu vi tự nhũ delivery system SLN Solid Lipid Nanoparticles TB Tiểu phân nanolipid rắn Trung bình TEM Transmission Electron Microscopy Kính hiển vi điện tử truyền qua UV Ultraviolet Tử ngoại XRD X-ray diffraction Nhiễu xạ tia X Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 97 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 98 PL16 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu chuẩn) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 99 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 100 PL17 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu placebo) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 101 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 102 PL18 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu thử 1) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 103 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 104 PL19 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu thử 2) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 105 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 106 PL20 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu placebo thêm chuẩn 80) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 107 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 108 PL21 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu placebo thêm chuẩn 100) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 109 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 110 PL22 Kết thẩm định quy trình định lượng EGCG (mẫu placebo thêm chuẩn 120) Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.HCM 111 Tuân thủ Luật Sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn trích dẫn ... tài: ? ?Nghiên cứu bào chế viên nang mềm cho hệ phân tán nano chứa Coenzym Q10 Epigallocatechin gallat? ?? tiến hành Mục tiêu tổng quát Thiết lập công thức xây dựng quy trình bào chế viên nang mềm cho. .. HỒ CHÍ MINH LA THỊ HỒNG LAN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NANG MỀM CHO HỆ PHÂN TÁN NANO CHỨA COENZYM Q10 VÀ EPIGALLOCATECHIN GALLAT Chuyên ngành: Công nghệ dược phẩm bào chế thuốc Mã số: 60.72.04.02... cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác La Thị Hồng Lan vi NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NANG MỀM CHO HỆ PHÂN TÁN NANO CHỨA COENZYM Q10 VÀ EPIGALLOCATECHIN