NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC TIÊM CÓ CHỨA AMPICILLIN VÀ COLISTIN

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC TIÊM CÓ CHỨA AMPICILLIN VÀ COLISTIN SV thực hiện: HUỲNH THỊ XUÂN PHƯỢNG Ngành: Dược Thú Y Niên khóa: 2004 – 2009 Tháng 09/2009 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC TIÊM CÓ CHỨA AMPICILLIN VÀ COLISTIN Tác giả HUỲNH THỊ XUÂN PHƯỢNG Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp kĩ sư ngành Bác sỹ thú y chuyên ngành Dược thú y Giáo viên hướng dẫn: TS VÕ THỊ TRÀ AN PGS – TS TRƯƠNG PHƯƠNG Tháng 09/2009 LỜI CẢM ƠN Đời đời nhớ ơn Cha mẹ, người sinh thành, nuôi dưỡng, dạy dỗ, thương yêu, quan tâm, lo lắng, động viên, dành điều tốt đẹp đến đời hy sinh để có ngày hơm Thương trao Gia đình, anh chị em - chỗ dựa tinh thần – chia sẻ, động viên, giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn sống Chân thành cám ơn Ban giám hiệu, tồn thể q thầy khoa Chăn Nuôi – Thú Y khoa Cơ Trường Đại học Nơng Lâm Tp HCM tận tình giảng dạy, truyền đạt kinh nghiệm, kiến thức quý giá cho q trình học tập Thành kính biết ơn TS Võ Thị Trà An, PGS – TS Trương Phương PGS – TS Lê Minh Trí tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Cảm ơn Cảm ơn giúp đỡ tận tình BSTY Đặng Thị Xuân Thiệp, BSTY Lê Hữu Ngọc, chị Ý, chị Bắc, em Kha bạn bè lớp động viên, chia sẻ buồn vui sống, giúp đỡ cho vật chất lẫn tinh thần suốt thời gian thực tập thực luận văn Huỳnh Thị Xuân Phượng Chân thành cám ơn Tháng 09/2009 TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu bào chế thuốc tiêm có chứa ampicillin colistin” tiến hành Bộ mơn Nội Dược Phòng Thực Hành Kiểm Nghiệm Thú Sản Môi Trường Sức Khỏe Vật Nuôi, khoa Chăn Nuôi – Thú Y, Trường Đại học Nông Lâm Tp HCM, thời gian từ tháng 4/2009 đến tháng 8/2009 Nghiên cứu tiến hành với mục tiêu tạo dạng thuốc tiêm có chứa hai loại kháng sinh ampicillin colistin dựa tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam 2006 cho dạng thuốc tiêm hỗn dịch dầu Các tiêu kiểm nghiệm bao gồm: độ trong, màu sắc, pH, độ vô khuẩn, chất gây sốt Kết thu sau xây dựng công thức chế phẩm thuốc tiêm chứa ampicillin colistin sau: Thành phần 1ml: Ampicillin trihydrate 100 mg Colistin sulfate 20 mg Span 60 10 mg Nipagin 0,1% 10 mg Dầu thực vật ml Sau kiểm nghiệm bán thành phẩm chế phẩm làm được, chế phẩm đáp ứng yêu cầu Dược điển Việt Nam, 2006: (1) Độ trong: phân tán sau lắc, thời gian lắng cặn phút 40 giây, (2) Màu sắc: màu trắng đục sữa, (3) pH : trung tính, (4) Độ vơ khuẩn: hồn tồn vô khuẩn sau ngày theo dõi, (5) Thử chất gây sốt: hồn tồn khơng có chất gây sốt Như vậy, với kết thu trên, bước đầu việc nghiên cứu đạt mục tiêu đề Tháng 09/2009 MỤC LỤC Trang Trang tựa i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình viii CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích - Yêu cầu CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Thuốc tiêm 2.1.1 Định nghĩa 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Vị trí tiêm sinh khả dụng thuốc tiêm 2.1.4 Yêu cầu chất lượng 2.1.5 Thành phần thuốc tiêm 2.2 Hỗn dịch 2.2.1 Định nghĩa 2.2.2 Phân loại 2.2.3 Tính chất hỗn dịch 2.2.4 Thành phần hỗn dịch 2.3 Kháng sinh 2.3.1 Lịch sử phát minh 2.3.2 Định nghĩa 2.3.3 Phân loại Tháng 09/2009 2.3.4 Nguyên tắc sử dụng kháng sinh 2.3.5 Phối hợp kháng sinh 2.3.6 Ampicillin 2.3.7 Colistin 11 2.3.8 Ampicillin – colistin thuốc tiêm dạng hỗn dịch dầu .13 CHƯƠNG 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 14 3.1 Địa điểm thời gian 14 3.1.1 Địa điểm 14 3.1.2 Thời gian 14 3.1.3 Nguyên vật liệu 14 3.1.4 Môi trường - Dụng cụ - Thiết bị 14 3.2 Nội dung - Phương pháp 15 3.2.1 Xây dựng công thức hỗn dịch tiêm 15 3.2.2 Tiến hành pha chế 15 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 4.1 Xây dựng công thức hỗn dịch tiêm 21 4.2 Tiến hành pha chế 22 4.3 Kiểm nghiệm số tiêu thuốc tiêm 24 4.3.1 Độ 24 4.3.2 Màu sắc 25 4.3.3 pH 26 4.3.4 Độ vô khuẩn 27 4.3.5 Thử chất gây sốt 29 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 PHỤ LỤC 35 Tháng 09/2009 DANH S ÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ampi – colis: ampicillin – colistin Tp HCM: Thành Phố Hồ Chí Minh TT (A): Chế phẩm thị trường Tháng 09/2009 DANH SÁCH HÌNH ẢNH Trang Hình 3.1: Mơi trường thử vơ khuẩn 17 Hình 3.2: Thử nghiệm chất gây sốt thỏ 19 Hình 4.1: Chế phẩm thử nghiệm Ampicoli - D 24 Hình 4.2: Màu sắc chế phẩm thử nghiệm 25 Hình 4.3: Kết pH chế phẩm bào chế xác định giấy đo pH 26 Hình 4.4: Môi trường thử độ vô khuẩn thioglycolat soybean – casein chế phẩm thị trường ngày thứ 27 Hình 4.5: Mơi trường thử độ vô khuẩn thioglycolat soybean – casein chế phẩm thị trường sau ngày 28 Hình 4.6: Mơi trường thử độ vơ khuẩn thioglycolat soybean – casein chế phẩm bào chế sau ngày 28 Tháng 09/2009 DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 4.1: Kết thử độ vô khuẩn chế phẩm 27 Bảng 4.2: Kết thử chất gây sốt chế phẩm .30 Bảng phụ lục: Giá trị thân nhiệt thỏ trước sau thử nghiệm chất gây sốt thuốc tiêm 35 Tháng 09/2009 Chương MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Khi chăn nuôi gia súc gia cầm, vật nuôi mắc bệnh điều tránh khỏi Trong số nguyên nhân gây bệnh thường xuyên phải kể đến vi khuẩn Các vi khuẩn gây bệnh cho gia súc, gia cầm thường gặp Staphylococcus, Streptococcus, Clostridium, Escherichia, Salmonella… Khi vật nuôi mắc bệnh nhiễm khuẩn, kháng sinh nhắc đến phương pháp trị liệu hiệu quả, thường xuyên Để sử dụng kháng sinh có hiệu quả, việc chẩn đốn nguyên nhân gây bệnh khâu quan trọng nhóm vi khuẩn mẫn cảm số nhóm kháng sinh Trong đó, nhiều lồi vi khuẩn gây bệnh Ở Việt Nam, việc chẩn đốn xác nhiễm khuẩn cho vật nuôi lúc thực Phân lập vi khuẩn thường xuyên áp dụng cho trại chăn ni cơng nghiệp có qui mơ lớn Trong thực tế, việc chẩn đốn ngun nhân gây bệnh thường dựa vào triệu chứng lâm sàng Chính thế, nhiều loại biệt dược thú y bào chế với phối hợp vài kháng sinh nhằm đạt phổ kháng khuẩn rộng cải thiện dược động học sản phẩm Ngoài ra, phối hợp kháng sinh giúp hạn chế đề kháng vi khuẩn giảm bớt độc tính cho vật nuôi so với việc sử dụng kháng sinh đơn lẻ Một phối hợp có tính kinh điển kết hợp hai nhóm kháng sinh sát khuẩn β-lactam polypeptide Trong đó, phối hợp kháng sinh colistin (nhóm polypeptide) ampicillin (nhóm β-lactam) phổ biến Kết hợp giúp tiêu diệt hầu hết loại vi khuẩn thường gây bệnh cho gia súc, gia cầm Với mục đích tìm hiểu q trình bào chế thuốc tiêm có chứa hai loại kháng sinh phần thực tế chuyên ngành Dược Thú Y, chấp thuận Bộ môn Nội - Dược, khoa Chăn nuôi – Thú y, Trường Đại Học Nông Lâm Tp HCM giúp đỡ trường Đại học Y Dược Tp HCM, với hướng dẫn tận tình TS Võ Thị Trà An, PGS - TS Trương Phương, thực đề tài: “NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC TIÊM CÓ CHỨA AMPICILLIN VÀ COLISTIN” Tháng 09/2009 Span loại tá dược gọi chất gây phân tán chất ổn định có vai trò giúp cho hỗn dịch hình thành nhanh chóng ổn định Span chất diện hoạt với phân tử gồm hai phần phân cực thân nước phần không phân cực thân dầu định hướng bề mặt tiếp xúc rắn lỏng (phần phân cực quay phía chất rắn phân cực, phần khơng phân cực quay chất khơng phân cực phân cực) tạo màng đơn phân tử bao bọc xung quanh tiểu phân dược chất rắn làm cho dược chất rắn dễ dàng thấm chất dẫn (Bộ môn Bào chế trường Đại học Dược Hà Nội, 1997) Hiểu cách đơn giản, chất gây phân tán chất trung gian, có tác dụng liên kết lại chất liên kết (phân cực không phân cực) Chúng thử nghiệm việc sử dụng span 60 để xem xét khả gây thấm span 60, xem xét vai trò tá dược bào chế chế phẩm dạng hỗn dịch Khi tiến hành thử nghiệm bào chế chế phẩm khơng chứa tá dược mà có hoạt chất thơi kết hỗn dịch bền, chúng tơi tiến hành bào chế chế phẩm có thêm tá dược span Sau tham khảo số công thức bào chế dạng hỗn dịch dầu điều kiện trình làm đề tài, chọn span 60 Sau cho thêm span 60 kết thu hỗn dịch bền vững, ổn định Chúng thử tiến hành chọn tá dược tween 80 span 60 kết hỗn dịch bền Điều cho thấy vai trò span quan trọng, có nghĩa tá dược thành phần quan trọng chế phẩm, tá dược khơng có tác dụng dược lý (ở tác dụng kháng khuẩn) khơng có tá dược chế phẩm khơng thể phát huy hết hoạt lực hoạt chất, đơi bị tác dụng Chính vậy, tá dược cần phải lựa chọn đúng, tá dược dành cho pha dầu dùng cho dung mơi dầu (span 60), tá dược dành cho pha nước chọn dung nước (tween 80) Mặc dù lý thuyết, tween 80 loại tá dược dùng cho dung môi dầu dung môi nước nhưng thực tế tween 80 sử dụng tốt cho dung môi dầu Tháng 09/2009  Tiến hành pha chế chế phẩm chứa span 60 Cân hóa chất theo số lượng sau Ampicillin trihydrate: 10 g Colistin sulfate: 2g Span 60 0,1 g Nipagin 0,1% 0,1 g Dầu thực vật vừa đủ 100 ml Ampicillin trihydrate, colistin sulfate, span 60, nipagin 0,1% nghiền mịn trước cối chày Cho ampicillin trihydrate colistin sulfate vào cối, dùng chày nghiền mịn trộn Sau đó, thêm 10 ml dầu thực vật vào, đánh theo chiều tạo thành khối bột nhão, cho thêm span 60 vào, đánh đều, cho thêm nipagin 0,1% vào, đánh đều, cuối cho từ từ dầu thực vật vào đến thể tích qui định 100 ml Cho hỗn hợp vào cốc mỏ quạ 250 ml, dùng ống tiêm tiệt trùng lấy 10 ml hỗn hợp cho vào lọ 15 ml, làm 10 lọ thuốc tiêm, lọ chứa 10 ml, đóng nút, ghi nhãn Để có cách bào chế này, chúng tơi tiến hành làm nhiều lần Lúc đầu, không nghiền mịn chất riêng mà trộn chung vào cối nghiền, kết kích thước chất to, sau hoàn tất chế phẩm lắng nhanh Cho nên, tiến hành nghiền chất trước trộn lại nghiền lại lần thấy mịn Số lượng 10 ml dầu cho vào đủ để tạo thành khối bột nhão đặc (tức vừa đủ để làm mềm làm nở dược chất rắn) tiến hành thử nhiều lần, cho nhiều dầu hỗn hợp lỏng, khó nghiền, khơng đạt độ mịn cao Còn cho q dầu khối bột q khơ, chưa đủ để thấm hết hoạt chất  Tiến hành pha chế chế phẩm không chứa span: 10 ml Cân hóa chất Ampicillin trihydrate 1g Colistin sulfate 0,2 g Nipagin 0,1% 0,01 g Dầu thực vật vừa đủ 10 ml Tháng 09/2009 Thao tác tiến hành làm tương tự pha chế chế phẩm có span 60 không cho thêm span 60 4.3 Kiểm nghiệm số tiêu thuốc tiêm 4.3.1 Độ Sau theo dõi thời gian lắng 10 mẫu thử, nhận thấy chế phẩm thử nghiệm có chứa span 60 có thời gian lắng cặn trung bình trung bình phút 40 giây Thuốc phân tán chất dẫn sau lắc, ổn định Chế phẩm khơng chứa span 60 có thời gian lắng cặn trung bình phút 20 giây Sản phẩm Amcicoli - D có thời gian lắng cặn phút 40 giây Hình 4.1: Chế phẩm thử nghiệm chế phẩm Ampicoli - D Như vậy, bào chế khơng cho thêm span 60 hỗn dịch lắng nhanh, chứng tỏ hỗn dịch bền, không ổn định Ngược lại, bào chế có thêm chất phụ span 60 thời gian lắng cặn lâu hơn, chứng tỏ hỗn dịch bền, ổn định Với thời gian lắng cặn phút 40 giây, chế phẩm làm đáp ứng yêu cầu tính bền vững chế phẩm, bảo đảm yêu cầu phân tán đồng hoạt chất suốt thời gian rút liều thuốc từ chế phẩm vào bơm tiêm đến tiêm cho vật Chất lượng lý tưởng hỗn dịch thuốc phải trạng thái ổn định, nói cách khác tiểu phân dược chất rắn khơng hòa tan phải ln trạng thái phân tán chất dẫn Nhưng Tháng 09/2009 thực tế khó thực điều này, cho nên, yêu cầu thời gian lắng thuốc tiêm tối thiểu nhằm đảm bảo sử dụng dược chất rắn khơng hòa tan phân phối liều dùng Một vài phút khoảng thời gian đủ để phân liều thuốc Do đó, trước sử dụng ta lắc nhẹ chai thuốc mà tiểu phân dược chất rắn nhanh chóng dễ dàng trở lại trạng thái phân tán chất dẫn giữ nguyên trạng thái khoảng thời gian vài phút đảm bảo việc phân chia liều lượng tương đối xác Khi so sánh thời gian lắng sản phẩm Ampicoli - D (đang lưu hành thị trường) chế phẩm thử nghiệm có chứa span thời gian lắng sản phẩm Ampicoli D dài chế phẩm làm (bền phút) Kết sản phẩm Ampicoli - D có loại tá dược khác, giúp cho chế phẩm bền Hơn nữa, sản phẩm Ampicoli - D sử dụng máy móc để nghiền mịn hoạt chất, chế phẩm làm thủ công, nghiền cối chày nên mịn chế phẩm thị trường Tuy vậy, chế phẩm thử nghiệm có thời gian lắng phút 40 giây chấp nhận đáp ứng yêu cầu tính ổn định (Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa, 2007) Do chế phẩm làm thuộc dạng bào chế hỗn dịch dầu nên tiêm chế phẩm theo đường tĩnh mạch mà tiêm bắp, kích thước chế phẩm làm dù chưa mịn chấp nhận 4.3.2 Màu sắc Hình 4.2: Màu sắc chế phẩm thử nghiệm Tháng 09/2009 Chế phẩm làm có màu trắng đục sữa, màu sắc chế phẩm thử nghiệm đáp ứng yêu cầu màu sắc hỗn dịch thuốc tiêm 4.3.3 pH Hình 4.3: Kết pH chế phẩm thử nghiệm xác định giấy đo pH Chúng tơi sử dụng giấy q để thử pH chế phẩm làm được, phương pháp khơng hồn tồn phản ánh xác pH chế phẩm mà mức tương đối Tuy nhiên, theo Dược điển Việt Nam (2006) tiêu pH tiêu khuyến cáo, tiêu bắt buộc phải tuân thủ nên kết tương đối chấp nhận Với kết trung bình 10 mẫu pH = (gần trung tính), chế phẩm thử nghiệm đáp ứng yêu cầu pH thuốc tiêm pH thuốc tiêm phải đáp ứng yêu cầu: (1) Phù hợp sinh lý thể, (2) Giúp hoạt chất ổn định định dung mơi, giữ hoạt tính dạng thuốc bào chế Như biết, pH thuốc tiêm phù hợp với pH sinh lý từ giúp tránh kích ứng tế bào, nhức buốt nơi tiếp xúc Trong giới hạn pH cho phép thuốc tiêm pH trung tính gần trung tính tốt Mặc dù thể có khả dung nạp thuốc có pH 2,5 – 10 Khi pH vượt giới hạn gây hoại tử khó dung nạp thuốc (Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa, 2007) Tháng 09/2009 Hoạt chất chế phẩm thử nghiệm ampicillin trihydrate thuộc nhóm kháng sinh penicillin, bền loại kháng sinh, pH tối ưu penicillin – 6,5 Môi trường acid đường tiêu hóa thủy giải chuỗi amid mở vòng lactam làm hoạt tính kháng khuẩn thuốc Môi trường kiềm phá hủy penicillin (Võ Thị Trà An, 2007) Như vậy, với pH trung tính chế phẩm hoạt chất ampicillin trihydrate giữ hoạt tính kháng khuẩn 4.3.4 Độ vơ khuẩn Bảng 4.1: Kết thử độ vô khuẩn chế phẩm Mẫu Môi trường thioglycolat Môi trường Soybean casein n = 10 Khơng có vi khuẩn mọc Khơng có nấm mọc Ampicoli - D Khơng có vi khuẩn mọc Khơng có nấm mọc Hình 4.4: Mơi trường thử độ vơ khuẩn thioglycolat soybean – casein Ampicoli - D ngày thứ Tháng 09/2009 Hình 4.5: Mơi trường thử độ vơ khuẩn thioglycolat soybean – casein Ampicoli - D sau ngày Hình 4.6: Mơi trường thử độ vơ khuẩn thioglycolat soybean – casein chế phẩm thử nghiệm sau ngày Ở thí nghiệm này, chúng tơi tiến hành thử độ vô khuẩn khu vực bào chế cách đặt đĩa môi trường thioglycolat đĩa môi trường soybean – casein vào phòng vơ khuẩn, mở nắp đĩa petri hồn tất việc bào chế, sau Tháng 09/2009 đem ủ môi trường thioglycolat 370C 24 ủ môi trường soybean – casein 250C ngày Kết cho thấy khu vực pha chế vơ khuẩn khơng phát vi khuẩn, nấm mọc môi trường thử độ vô khuẩn (môi trường bình thường) u cầu vơ khuẩn thuốc tiêm yêu cầu đặc trưng Da niêm mạc hàng rào bảo vệ chống lại xâm nhập vi trùng tác nhân có hại khác bị vơ hiệu hóa nơi tiêm Do thuốc tiêm phải tuyệt đối vơ khuẩn Chỉ có chế phẩm hồn tồn vơ khuẩn tuyệt đối vơ khuẩn khơng thể có chế phẩm gần vơ khuẩn Mục đích vơ khuẩn thuốc tiêm: (1) Làm cho chế phẩm không độc: thuốc mang vi trùng, nấm gây bệnh sử dụng bị nhiễm bệnh dùng thuốc, vi sinh vật không gây bệnh, độc tố vi khuẩn tiết ra, hay chất phân hủy từ tế bào chúng kháng ngun gây viêm, gây sốt chí nhiệt tố… (2) Giữ cho chế phẩm ổn định: vi khuẩn, nấm mốc nhiễm vào thuốc làm đục, tủa thuốc Để hỗ trợ cho yêu cầu vô khuẩn, số chất sát khuẩn, kháng nấm đưa vào cơng thức với mục đích bảo quản (Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa, 2007) Ở đây, chúng tơi sử dụng chất bảo quản nipagin 0,1% với mục đích kháng nấm, dầu thực vật dễ bị nhiễm nấm Với hoạt chất kháng sinh kết hợp hiệp lực nên tiêu diệt hầu hết vi khuẩn Gram + Gram - Chính khả nhiễm khuẩn vào môi trường thử độ vô khuẩn hạn chế nhiều Đồng thời, việc bào chế tiến hành phòng vơ khuẩn xơng formol chiếu tia cực tím giúp hạn chế việc vấy nhiễm vi khuẩn, nấm vào chế phẩm bào chế Nếu tiêm thuốc không vô khuẩn vào thể thú đồng nghĩa với viêc đưa mầm bệnh, chất độc, chất có hại vào thể thú, dễ dàng dẫn đến hậu nghiêm trọng (như gây viêm, gây shock…) Chính vậy, u cầu độ vơ khuẩn thuốc tiêm cần phải đáp ứng 4.3.5 Thử chất gây sốt Phương pháp thử nghiệm thử chất gây sốt thỏ cơng nhận thức tất Dược điển Tuy nhiên, phương pháp có nhiều nhược điểm thực Việc nuôi chọn thỏ chuẩn có nhiều phiền phức; tiến hành thử phụ thuộc nhiều yếu tố: ngoại cảnh, hành vi thỏ, độ xác dụng cụ đo nhiệt Tuy phương pháp thử thỏ không dễ dàng thực thỏ lựa chọn Tháng 09/2009 thử nghiệm u cầu tuyệt đối khơng có chất gây sốt thuốc tiêm Thỏ loài động vật nhạy cảm, với thay đổi bất thường hay ngồi thể chúng dễ dàng nhận biết, thể rõ ràng, biểu rõ thỏ thay đổi thân nhiệt Khi sử dụng thỏ vào mục đích thử nghiệm chất gây sốt lựa chọn thỏ kỹ, chọn thỏ đạt yêu cầu thể trạng sức khỏe, việc nuôi thỏ, chăm sóc thỏ quan tâm Trước bắt đầu thử nghiệm kiểm tra lại kỷ lưỡng để đảm bảo yếu tố bên (nhiệt độ mơi trường) ổn định, hồn tồn khơng ảnh hưởng đến thỏ Như thế, việc tăng giảm nhiệt độ thỏ bị ảnh hưởng chế phẩm đem thử Không thế, sau tiêm chế phẩm vào thỏ theo dõi thân nhiệt thỏ thời gian Chính điều đảm bảo cho chế phẩm kiểm tra cách có chất lượng Bởi vì, chế phẩm thử nghiệm thỏ - động vật nhạy cảm – cho kết khơng chứa chí nhiệt tố tiêm thú khác - nhạy cảm - bảo đảm chắn không gây nên tượng sốt mà nguyên nhân chí nhiệt tố Bảng 4.2: Kết thử chất gây sốt chế phẩm Mẫu Đáp ứng thỏ (Số thỏ=3con/mẫu) Tổng số đáp ứng thỏ Đánh giá 0,2 0,2 0,25 0,65 ĐẠT 0,1 0,1 0,05 0,25 ĐẠT 0,25 0,35 0,3 0,90 ĐẠT 0,15 0,05 0,40 0,60 ĐẠT 0,25 0,15 0,20 0,60 ĐẠT 0,25 0,30 0,35 0,90 ĐẠT 0,15 0,30 0,15 0,60 ĐẠT 0,05 0,20 0,35 0,60 ĐẠT 0,15 0,25 0,05 0,45 ĐẠT 10 0,20 0,25 0,15 0,60 ĐẠT A 0,25 0,25 0,30 0,80 ĐẠT Tháng 09/2009 Với kết bảng 4.2, chúng tơi thấy chế phẩm làm hồn tồn khơng có chất gây sốt, đáp ứng thỏ sau chích khơng vượt q 0,60C tổng số đáp ứng khơng q 1,40C Nhìn vào kết bảng 4.2, thấy tổng đáp ứng thỏ 0,80 tổng đáp ứng thỏ chế phẩm làm từ 0,25 đến 0,90 Dù có chênh lệch giá trị đáp ứng thỏ theo Dược điển Việt Nam (2006) kết chấp nhận tổng đáp ứng thỏ khơng vượt q 1,40C Chất gây sốt hay chí nhiệt tố chất nhiễm vào thuốc, sau tiêm gây phản ứng tăng thân nhiệt Hậu việc tăng thân nhiệt tùy thuộc nhiều yếu tố chăm sóc, xử lí kịp thời, trạng thái sức khỏe thú… Nói chung sức khỏe thú tốt, xử lí kịp thời sốt chí nhiệt tố khơng gây hậu nghiêm trọng, thú trạng thái suy yếu thú già, bệnh trầm trọng, hậu phẫu… sốt chí nhiệt tố đe dọa tính mạng Cơ chế gây sốt chí nhiệt tố giải thích sau: độc tố xâm nhập vào thể sau tiêm gọi ngoại độc tố (chí nhiệt tố ngoại) bị bạch cầu đa nhân máu tiêu diệt theo chế thực bào Đồng thời, với tượng thực bào, lượng lớn chí nhiệt tố nội sinh (chí nhiệt tố nội) thể tạo kích thích trung tâm điều hòa thân nhiệt vùng đồi não, điều chỉnh thân nhiệt theo hướng tăng cao, gây sốt (Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa, 2007) Như vậy, thuốc tiêm phải hồn tồn khơng phép có chí nhiệt tố xuất chí nhiệt tố làm cho bệnh thú trở nên trầm trọng hơn, dẫn đến hậu nghiêm trọng Tiêm thuốc khơng đạt u cầu có chứa chí nhiệt tố chẳng khác đưa chất lạ, chất có hại vào thể thú  Do hạn hẹp kinh phí thời gian nên chúng tơi khơng có điều kiện để gửi mẫu chế phẩm đến trung tâm phân tích để định tính - định lượng Tháng 09/2009 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Dựa số tiêu kiểm nghiệm thuốc tiêm (dạng bán thành phẩm) thực điều kiện đề tài, chế phẩm thử nghiệm có chứa ampicillin colistin đạt yêu cầu: độ trong, màu sắc, pH, độ vô khuẩn, chất gây sốt Như vậy, bước đầu nghiên cứu bào chế hỗn dịch dầu ampicillin – colistin đạt kết Tuy nhiên, đề tài nhiều thiếu sót nhiều hạn chế thiết bị, hóa chất, hạn hẹp kinh phí thời gian nên số tiêu chưa làm (định tính, định lượng) Đề nghị sử dụng công thức bào chế đề tài chế phẩm bào chế cho nghiên cứu Cần có thêm trang thiết bị để tiến hành việc nghiên cứu đến giai đoạn kiểm nghiệm thành phẩm có kinh phí để gửi mẫu kiểm nghiệm Ngoài ra, cần tiếp tục nghiên cứu để chế phẩm thử nghiệm sử dụng điều trị bệnh lâm sàng Tháng 09/2009 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Võ Thị Trà An, 2007 Kháng sinh cho vật nuôi Nhà xuất Đà Nẵng 184 trang Bộ môn Bào chế trường Đại học Dược Hà Nội, 1997 Kỹ thuật bào chế sinh dược học dạng thuốc, tập 219 trang Nguyễn Duy Cương Nguyễn Hữu Quỳnh, 1999 Từ Điển Bách Khoa Dược Học Nhà xuất từ điển Bách khoa Dược điển Việt Nam, 2006, lần xuất thứ ba Nhà xuất Y học Hà Nội Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa, 2007 Bào chế sinh dược học Tập Nhà xuất Y học 291 trang Lê Quan Nghiệm Huỳnh Văn Hóa, 2007 Bào chế sinh dược học Tập Nhà xuất Y học 386 trang Nguyễn Như Pho, 1999 Giáo trình Dược lý thú y Trường Đại học Nông Lâm Tp HCM Huỳnh Thị Ngọc Phương, 2008 Giáo trình Hóa Dược Trường Đại học Y dược Tp HCM Virbac, 2007 Danh mục thuốc thú y - thủy sản Virbac Tháng 09/2009 Tài liệu tiếng Anh 10 Asrian J.Bayley, 2001 CVP (Compendium of veterinary products), 6th North American Compendium, Inc 11 IVS (Index veterinary specialies) annual, 1993 Autralia Tháng 09/2009 PHỤ LỤC Bảng Giá trị thân nhiệt thỏ trước sau thử nghiệm chất gây sốt thuốc tiêm Mẫu Thỏ Nhiệt độ trước tiêm (0 C) Nhiệt độ sau tiêm (0 C) T0 đầu T0 sau T0 tbình Lần Lần Lần T0 cao 38,50 38,70 38,60 38,70 38,80 38,80 38,80 38,40 38,20 38,30 38,50 38,50 38,40 38,50 38,50 38,60 38,55 38,70 38,70 38,80 38,80 38,80 39,00 38,90 39,00 38,90 38,90 39,00 38,50 38,30 38,40 38,40 38,50 38,50 38,50 38,70 38,80 38,75 38,80 38,80 38,80 38,80 38,00 38,30 38,15 38,20 38,30 38,40 38,40 38,30 38,40 38,35 38,70 38,70 38,60 38,70 38,50 38,70 38,60 38,80 38,80 38,90 38,90 38,70 38,80 38,75 38,80 38,90 38,90 38,90 38,60 38,70 38,65 38,70 38,60 38,70 38,70 38,40 38,60 38,50 38,80 38,90 38,80 38,90 38,40 38,30 38,35 38,50 38,60 38,60 38,60 38,80 38,90 38,85 38,90 39,00 39,00 39,00 38,50 38,50 38,50 38,70 38,70 38,70 38,70 38,20 38,30 38,25 38,40 38,50 38,50 38,50 38,00 38,00 38,00 38,30 38,30 38,20 38,30 38,40 38,50 38,45 38,60 38,70 38,80 38,80 38,40 38,70 38,55 38,60 38,70 38,70 38,70 38,60 38,80 38,70 38,90 38,90 39,00 39,00 38,80 38,90 38,85 39,00 39,00 38,90 39,00 38,90 39,00 38,95 38,90 39,00 39,00 39,00 38,60 38,60 38,60 38,70 38,80 38,70 38,80 38,50 38,40 38,45 38,70 38,80 38,80 38,80 Tháng 09/2009 10 Thị trường 38,60 38,70 38,65 38,70 38,80 38,80 38,80 38,40 38,50 38,45 38,60 38,70 38,60 38,70 38,30 38,40 38,35 38,30 38,40 38,30 38,40 38,20 38,20 38,20 38,30 38,40 38,40 38,40 38,50 38,60 38,55 38,60 38,80 38,80 38,80 38,70 38,80 38,75 38,90 38,90 38,80 38,90 38,50 38,60 38,55 38,80 38,70 38,70 38,80 38,30 38,40 38,35 38,40 38,60 38,60 38,60 38,20 38,40 38,30 38,50 38,50 38,60 38,60 Tháng 09/2009 ... 26 Hình 4.4: Môi trường thử độ vô khuẩn thioglycolat soybean – casein chế phẩm thị trường ngày thứ 27 Hình 4.5: Mơi trường thử độ vô khuẩn thioglycolat soybean – casein chế phẩm... đầu tụ huyết trùng, thương hàn) - Thỏ: từ 1,5 kg trở lên 3.1.4 Môi trường - Dụng cụ - Thi t bị - Môi trường thioglycolat (Trường Đại học Y dược, Tp HCM), soybean - casein - Đèn cực tím, cối chày... pha chế đặt đĩa thạch môi trường thioglycolat đĩa thạch soybean – casein (mở nắp đĩa petri) buồng vô khuẩn, gần khu vực pha chế đến pha chế xong đem ủ đĩa thạch thioglycolat 370C, đĩa soybean –