Luận văn Nghiên cứu trích ly polyphenol từ lá sakê và ứng dụng tạo sản phẩm đồ uống giàu polyphenoll

Chương 1. MỞ ĐẦU 1.1. Xuất xứ của đề tài Từ lâu nay, vấn đề dinh dưỡng và sức khoẻ luôn là môi quan tâm của con người. Theo xu hướng của cuộc sông ngày nay, người ta có ít thời gian để chăm sóc cho sức khoẻ, đồng thời các căn bệnh thời đại cũng có chiều hướng gia tăng... Do đó việc bổ sung thêm các thành phần dinh dưỡng, dược liệu cần thiết vào thực phẩm là cần thiết nhằm bổ sung và hỗ trợ cơ thể. Sản phẩm đồ uống không còn đơn thuần là giải khát mà còn phải tốt cho sức khoẻ. Vì thế việc nghiên cứu sản xuất các chiết xuất từ thiên nhiên để bổ sung vào đồ uống luôn được quan tâm, và những chất được trích ly đó chính là các hợp chất polyphenol. Hợp chất này thường được trích ly từ các loại hoa lá, củ quả... của nhiều loại thảo dược và thường thấy nhất là trong trà. Thành phần này được sử dụng trong thực phẩm như một loại thực phẩm chức năng nhằm mục đích phòng ngừa bệnh do có tính chất kháng oxy hoá mạnh. Hợp chất polyphenol được sử dụng với rất nhiều mục đích trong các ngành công nghiệp như thực phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm... Việc sử dụng hợp chất polyphenol bổ sung vào thực phẩm mang lại nhiều giá trị cho cả người sản xuất cũng như người tiêu dùng: + Nhà sản xuất: đa dạng hoá sản phẩm, có cơ hội thị trường... + Người tiêu dùng: sản phẩm có lợi cho sức khoẻ... Chính vì vậy, việc sản xuất các sản phẩm đồ uống có chứa polyphenol trích ly mang lại hiệu quả và lợi nhuận cao hơn so với các sản phẩm đồ uống truyền thông, và điều này đang là hướng ưu tiên để phát triển cho ngành chế biến đồ uống trên thế giới và ở Việt Nam.

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP http://www.ebook.edu.vn Trang 1

SVTH: NGUYỄN XUÂN TRÌNHNGUYỄN XUÂN PHƯỚCGVHD: TS HOÀNG KIM ANH

Chương 1 MỞ ĐẦU

1.1 Xuất xứ của đề tài

Từ lâu nay, vấn đề dinh dưỡng và sức khoẻ luôn là môi quan tâm của conngười Theo xu hướng của cuộc sông ngày nay, người ta có ít thời gian để chăm sóccho sức khoẻ, đồng thời các căn bệnh thời đại cũng có chiều hướng gia tăng Do đóviệc bổ sung thêm các thành phần dinh dưỡng, dược liệu cần thiết vào thực phẩm làcần thiết nhằm bổ sung và hỗ trợ cơ thể

Sản phẩm đồ uống không còn đơn thuần là giải khát mà còn phải tốt cho sứckhoẻ Vì thế việc nghiên cứu sản xuất các chiết xuất từ thiên nhiên để bổ sung vào đồuống luôn được quan tâm, và những chất được trích ly đó chính là các hợp chấtpolyphenol

Hợp chất này thường được trích ly từ các loại hoa lá, củ quả của nhiều loạithảo dược và thường thấy nhất là trong trà Thành phần này được sử dụng trong thựcphẩm như một loại thực phẩm chức năng nhằm mục đích phòng ngừa bệnh do có tínhchất kháng oxy hoá mạnh Hợp chất polyphenol được sử dụng với rất nhiều mục đíchtrong các ngành công nghiệp như thực phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm

Việc sử dụng hợp chất polyphenol bổ sung vào thực phẩm mang lại nhiều giátrị cho cả người sản xuất cũng như người tiêu dùng:

+ Nhà sản xuất: đa dạng hoá sản phẩm, có cơ hội thị trường

+ Người tiêu dùng: sản phẩm có lợi cho sức khoẻ

Chính vì vậy, việc sản xuất các sản phẩm đồ uống có chứa polyphenol trích lymang lại hiệu quả và lợi nhuận cao hơn so với các sản phẩm đồ uống truyền thông, vàđiều này đang là hướng ưu tiên để phát triển cho ngành chế biến đồ uống trên thế giới

và ở Việt Nam

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Trang 2

SVTH: NGUYỄN XUÂN TRÌNHNGUYỄN XUÂN PHƯỚCGVHD: TS HOÀNG KIM ANH

1.2 Mục tiêu nghiên cứu

Sakê là một loại thảo mộc được dân gian sử dụng rất nhiều nhưng lại ít có côngtrình nghiên cứu

Hiện nay chỉ có một sô" ít các công trình nghiên cứu về tinh bột sakê Bên cạnh

đó dân gian sử dụng lá sakê để nấu làm nước uống thay trà rất phổ biến, một sô" tàiliệu cũng đề cập tới polyphenol trong lá sakê Do vậy, đề tài “Nghiên cứu trích lypolyphenol từ lá sakê và ứng dụng tạo sản phẩm đồ uống giàu polyphenol” là rất thực

tế và khả năng mang lại nhiều giá trị

Những vấn đề được nghiên cứu trong đề tài:

1) Tìm hiểu đặc tính và thành phần của lá sakê

2) Khảo sát quá trình trích ly và thu nhận polyphenol

3) Thử nghiệm tạo sản phẩm trà sakê đóng chai và trà túi lọc giàu polyphenol

Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Giới thiệu về cây sakê

2.1.1 Đặc điểm sinh thái

a) Nguồn gốc và phân loại

❖ Nguồn gốc

Sakê được cho là có nguồn gốc từ vùng tân Guinea Phân bô" rộng rãi ở khuvực Thái Bình Dương: Indonesia, Malaysia đến Hawaii Cây thích hợp với khí hậunhiệt đới gió mùa nóng ẩm, mưa nhiều

Sakê là một trong những loài cây lương thực có sản lượng cao, với một cây cóthể ra tới trên 200 quả mỗi mùa Tại miền nam Thái Bình Dương, cây

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP http://www.ebook.edu.vn Trang 3

SVTH: NGUYỄN XUÂN TRÌNHNGUYỄN XUÂN PHƯỚCGVHD: TS HOÀNG KIM ANH

sinh ra 50 150 quả môi năm Tại miễn nam An Độ, sản lượng thông thường là 150

-200 quả mỗi năm Quả sakê có chứa thành phần tinh bột, khoáng chất, các acid aminthiết yếu

Sakê đã có thời gian được coi là cây lương thực quý, được các nhà thám hiểm

và thương buôn người Tây Ban Nha, Anh, Pháp coi trọng, vận chuyển và buôn bánđến các vùng thuộc địa của họ Chủ yếu thường từ Philipines chuyển đến Mêxico vàTrung Mỹ, Jamaica Hiện nay sakê vẫn cập cảng Hoa kỳ, Canada và Châu Âu từ

Caribean để cung cấp cho nhu cầu thực phẩm của các sắc tộc thiểu số và làm nguyên

liệu cho một sô" ngành chủ yếu là ngành công nghệ thực phẩm

Sakê đã được người Pháp đưa vào Việt Nam từ Indonesia và được trồng tạimiền nam Việt Nam Cây không sông được trong vùng khí hậu miền bắc Việt Nam

Hình 2.1: Đặc điểm cây sakê

♦♦♦ Phân loại khoa học:

xám đen, bên trong chưa

nhiều nhựa mủ Cây phân

s A altilis

Vỏ và cành non cómàu xanh, lớn lên có màuxanh thẫm rồi chuyển sangmàu xanh nhạt, càng lớncàng chuyển sang màu nâuxám.

❖ Chồi và láChồi mọc tận trêncùng của cành lá sakê,chúng sinh trưởng rấtmạnh Chồi có màu xanhtươi khi mới nhô lên ởtrạng thái xoắn Chồi cónhiều nhựa, lớn nhanhvươn lên cao, bung xoắntạo thành lá

Lá sakê to và dày

có chiều dài từ 25 - 35cm,bản xẻ thùy thường chia từ

3 đến 9 thùy sâu hình lôngchim Lá có hình thuôn dàicuông lớn mập, khi rụngthì để thành sẹo trên cành

Lá cây có chứanhựa mủ, một loại nhựacây có màu trắng sữa, lá có

hệ thông gân lớn hìnhxương cá và hệ thông gânnhỏ đan xen lẫn nhau Lácây màu xanh thẫm, khigià chuyển thành màuvàng nâu khô rụng xuống

Hoa mọc thành cụm hoa dạng đầu, chỉ có khả năng được thụ phấn sau đó 3 ngày.

Động vật thụ phấn cho nó là côn trùng và một số loại động vật như chim, dơi

Quả: Quả giả, phức hợp phát triển lên từ bao hoa phình ra và bắt nguồn từ 1.500 2.000 hoa Chúng được nhìn thấy trên lớp vỏ quả như là các đĩa giông hình lục giác.Quả hình trứng, kích cỡ to bằng quả bưởi chùm có bề mặt thô ráp giông quả mít

-và mỗi quả trên thực chất là tổ hợp của nhiều quả bé, mỗi quả bé được bao quanh bằngbao hoa dày cùi thịt và phát triển trên đế hoa dày cùi thịt Một vài giông cây trồng đã quachọn lọc có quả không hạt

tính như: geranyl dihydrochalcone, geranyl flavonoids, geranyl- tetrahydrochalcone,papayotin và artocarpine

Thành phần Khôi lượng chât khô trong 100g

♦♦♦ Bảng 2.3: Thành phần hoá học của quả:

Thành phần Khối lượng chất khô trong 100g

♦♦♦ Bảng 2.1: Thành phần hoá học của lá sakê:

Thành phần Khối lưựng chất khô trong 100g

♦♦♦ Thành phần hóa học của hoa:

Hoa sakê có chứa một sô" hoạt chất loại chalcones có khả năng chông bướu ungthư, ức chế được tế bào ung thư loại sarcoma, hợp chất loại geranyl- tetrahydrochalcone(chông được dị ứng)

❖ Thành phần hoá học của vỏ thân:

Vỏ thân: có các hợp chất loại phenolic: Artenolol A, B, c, D và E; cácprenylflavon: Artonin E và F; Cycloartobiloxanthones

Đọt non: có các flavonoids, các hợp chất dihydrochalcone, cycloaltilisin 6 và 7(các hợp chất này có hoạt tính ức chế men Cathepsin K )

2.1.3 Một sô" ứng dụng của lá sakê hiện nay.

Bộ phận có thể dùng trong y học gồm, rễ, lá, vỏ và nhựa cây Theo Đông y, rễsakê có tính làm dịu, trị ho; vỏ có tác dụng sát trùng; lá có công dụng tiêu viêm, tiêu độc,lợi tiểu

Ở một sô" nước, rễ sakê dùng trị bệnh hen và các chứng rối loạn dạ dày, đau răng,bệnh về da; vỏ cây sakê dùng trị ghẻ; nhựa cây được dùng pha loãng trị tiêu chảy và lỵ;còn lá sakê tươi thì được dùng với lá đu đủ tươi, giã với vôi để đắp trị nhọt Trong nước,dân gian dùng lá sakê chữa phù thủng, viêm gan vàng da bằng cách nấu lá tươi để uống.Ngoài ra, theo lương y Nguyễn Công Đức (giảng viên khoa Y học cổ truyền, ĐH Y

Dược, Tp.HCM) lá sakê phôi hợp với một sô" vị thuốc khác sẽ trị được một số bệnh sau:

1 Trị bệnh gút (thông phong) và sỏi thận :

Dùng lá sakê tươi (2 lá - độ 100 gr), 100 gr dưa leo và 50 gr cỏ xước khô, để nấu nước uống trong ngày

2 Trị tiểu đường týp 2 :

Lấy 2 lá sakê tươi (100 gr), 100 gr trái đậu bắp tươi và 50 gr lá ổi non Tất cả

để chung nấu nước để uống trong ngày

3 Chữa viêm gan vàng da :

Dùng 100 gr lá sakê tươi, 50 gr diệp hạ châu (chó đẻ) tươi, 50 gr củ móp gai tươi và 20 - 50 gr cỏ mực khô Tất cả để chung, nấu nước để uống trong ngày

4 Trị chứng huyết áp cao dao động :

Dùng 2 lá sakê vàng vừa mới rụng, 50 gr rau ngót tươi và 20 gr láchèxanh tươi Để chung nâu nước uống trong ngày

2.2 Giới thiệu về polyphenol và một sô" polyphenol trong lá sakê

2.2.1 Polyphenol

Polyphenol là các hợp chất mà phân tử của chúng chưa nhiều vòng Benzen, trong

đó có một, hai hoặc nhiều hơn hai nhóm Hydroxyl Dựa vào đặc trứng của cấu tạo hóahọc người ta chia các hợp chất polyphenol thành ba nhóm chính:

♦♦♦ Nhóm hợp chất phenol Cö- Cl: Acid Galic

❖ Nhóm hợp chất phenol Có - C3: Acid Cafeic

❖ Nhóm hợp chất phenol Có - C3- Cö: Catechin, Flavonoid

O M

“yvS -¿t«

CuHình 2.4: Hợp chất polyphenolTính chất: Các polyphenol có chứa gốc Pyrocatechic hoặc Pyrogalic nên chúng

có thể tham gia phản ứng oxy hóa - khử, phản ứng cộng và ngưng tụ

♦♦♦ Phản ứng oxy hóa - khử: Dưới tác dụng của enzyme polyphenol oxydase, cácpolyphenol bị oxy hóa tạo thành các Quinon

♦♦♦ Phản ứng cộng: Khi có mặt các acid amin thì các Quinon này sẽ tiến hànhphản ứng cộng với acid amin để tạo thành các octoquinon tương ứng

❖ Phản ứng ngưng tụ: Các octoquinon này dễ dàng ngưng tụ với nhau để tạothành các sản phẩm có màu gọi chung là Flobafen

2.2.2 Chức năng của các polyphenol

Polyphenol được chú ý đến bởi khả năng chông oxy hóa của chúng Chúng cókhả năng chuyển electron trong chuỗi hô hấp bình thường định cư trong ti thể Chúng cóđược khả năng đó là do chúng có khả năng tạo phức bền với các kim loại nặng, do đólàm mất hoạt tính xúc tác của chúng, đồng thời chúng có khả năng nhận các gốc tự dotức là có khả năng dập tắt các quá trình tạo ra các gốc tự do

Ngoài ra polyphenol còn có khả năng ức chế sự phát triển của vi nấm

Nhiều polyphenol có hoạt tính vitamin p, nghĩa là có khả năng làm tăng độ đànhồi và chuẩn hóa tính thẩm thấu của vi ti huyết quản

Hiện nay nhiều tài liệu nghiên cứu polyphenol có khả năng chông và ức chế các

tế bào ung thư và sự hấp thụ các tia uv

Hình 2.6: Các hợp chất geranyl flavonoids

2.2.3 Polyphenol trong lá sakê:

a) Tác dụng dược lý của lá sakê:

Theo các công trình nghiên cứu trên thế giới người ta phát hiện ra rằng ngoàicác thành phần khoáng chất, vitamin và một sô" chất vi lượng chúng có hàm lượngcao các hợp chất polyphenol

Trong lá sakê có chứa:

♦♦♦ 5 hợp chất loại geranyl dihydrochalcone (2, 4, 5, 8, 9)

Hình 2.5: Các hợp chất geranyl dihydrochalcone ♦♦♦ 4 loại geranyl flavonoids (1, 3, 6,

7)

Lá sakê từ lâu đã được những cư dân vùng tân Guinea và một sô" quốc gia như

Ai Cập, Malaysia, Indonesia sử dụng như là một loại thảo dược dùng để trị bệnh hoặcphôi hợp với các loại thuốc khác để chữa các bệnh về ngoài da, tiêu chảy, bệnh gút, viêm

da, ho, viêm gan, giải độc gan

Tuy nhiên những nghiên cứu mới đây chỉ ra rằng các hoạt chất polyphenol trong

lá sakê có tác dụng trị được nhiều loại bệnh khác nhau như bệnh về đường tim mạch, đáitháo đường, bệnh parkison, bệnh béo phì, bệnh sỏi thận và đặc biệt theo các tài liệu mớiđây chỉ ra rằng các hoạt chất polyphenol trong lá sakê có tác dụng ức chế và ngăn ngừa

các tế bào ung thư ở người loại SPC-A-1, sw 480,SMMC-7721 (Phytochemistry Sô"

68-2007); Quercetin, Campherol)

Tác dụng ngăn chặn và chữa bệnh ung thư của polyphenol được nghiên cứu rấtmạnh mẽ trong những năm gần đây Nhiều công trình nghiên cứu đã cho thấypolyphenol có khả năng tương tác ngăn chặn và hạn chế các quá trình khơi mào, hìnhthành và phát triển các tế bào ung thư Trong giai đoạn khơi mào các polyphenol trunghòa các tác nhân kích hoạt bởi cytorchom P450 enzyme, các tác nhân này có khả năngtương tác làm thay đổi cấu trúc của AND, ngăn chặn sự tạo thành Nitrosamine là mộtnhóm các hợp chất phát sinh từ khói thuốc lá, các amin dị vòng trong thịt, cá nấu chín -các tác nhân được cho là gây ung thư

Trong giai đoạn bắt đầu của tế bào ung thư, các polyphenol có khả năng ức chếAP-1 một dẫn xuất truyền khơi mào cho sự phát triển của tế bào ung thư da, thể hiện khảnăng ngăn chặn protein kinase, enzyme kích hoạt tế bào trong giai đoạn phát triển của tếbào ung thư, ức chế hoạt động của Telomerase, làm giảm thời gian sông của tế bào ungthư

Khi quá trình ung thư diễn ra, polyphenol có thể can thiệp, ức chế hoạt động củaurokinase, enzyme đóng vai trò quan trọng trong quá trình phát triển và biến đổi của tếbào ung thư, phá hủy các dạng biến đổi đặc thù của tế bào gây ra do sdevirus, hay ngănchặn quá trình tổng hợp AND trong tế bào ung thư hepatoma, leukemia, ung thư phổi.Ngoài ra còn có một sô" công bô" chưa chính thức cho rằng polyphenol có khả năngngăn chặn một sô" loại ung thư như: ung thư vú, ung thư vòm họng, ung thư đường tiêuhóa, giảm khôi u

b) Tác dụng chông oxy hóa của polyphenol trong lá sakê

♦♦♦ Quá trình oxy hóa và nguyên nhân gây bệnh do mất cân bằng oxy hóa.Theo các tài liệu nghiên cứu đã công bô", các bệnh như: ung thư, tim mạch, lãohóa có liên quan rất gần với các quy luật về quá trình oxy hóa trong các tế bào sông.Các quá trình oxy hóa diễn ra dưới tác dụng của các gốc tự do trong tế bào là cần thiết để

tạo ra năng lượng hoặc trong các quá trình sinh tổng hợp của cơ thể Gốc tự do là nhữnghợp chất hoạt động mạnh, được tạo ra trong cơ thể trong quá trình trao đổi chất hay đượcđưa vào từ bên ngoài do virút, vi khuẩn Các gốc tự do được tạo thành gồm các gốc cóhoạt tính cao như Hydroxyl (OH), lon sắt( Fe2+0) Cu(0H)2 những gốc tự do có hoạt tínhtrung bình và yếu như Peroxyl (ROO), Hydrogen Peroxde H202, Singlet Oxy (0^, Nitricoxide (NO), Ankoxyl ( RO)

Gốc tự do là các nguyên tử không trọn vẹn, sô" điện tử vòng ngoài của nó là sô"

lẻ nến không bền vững, nó phải kết hợp với một nguyên tử khác để có sô" điện tử chẩn

để bền vững Sự bền vững này chỉ trong chốc lát, chính nó lại tạo ra một nguyên tửkhông trọn vẹn khác và tiếp tục kết hợp với một nguyên tử khác rồi trở thành nguyên tửkhông trọn vẹn và tiếp tục chu kỳ bất tận như thế Phản ứng hóa học của nó rất mãnh liệt

và nó sẽ kéo theo một điện tử của phân tử khác về nó, cho ra những phân tử khác bị hưhại hay bị oxy hóa Một khi phân tử bị oxy hóa rồi thì phân tử đó sẽ tự mất đi tất cả cácchức năng vốn có của nó, tiếp đó chính nó lại là tác nhân oxi hóa các phân tử chungquanh nó, làm hư hại các tế bào của các phân tử xung quanh Và quá trình này cứ tiếptục như thế sẽ tạo thành các tế bào không bình thường dẫn tới các loại bệnh như: xơ vữađộng mạch, ung thư

Thông thường các gốc tự do trong tế bào sinh ra trong quá trình sinh dưỡng đượckiểm soát chặt chẽ thông qua quá trình kháng oxy hóa nội tại bằng các hợp chất nhưglutathione, vitamin E, vitamin c và enzym Superoxide dismutase Ngoài ra cơ thể còn

có các tế bào như neutrophil, monocyte, B-celL có khả năng chông lại các yếu tô" oxyhóa ngoại lai xâm nhập

Tuy nhiên, trong các tế bào có thể xuất hiện hiện tượng các gốc tự do được tạo raquá nhiều do mất cân bằng trong hoạt động hoặc do các yếu tô" bên ngoài như các chấtđộc, do nhiễm vi sinh vật, do ozone, bức xạ, tia ƯV, nhiễm phóng xạ, do thuốc lá, môitrường ô nhiễm Các gốc tự do dư thừa trong khi cơ thể thiếu các yếu tô" bảo vệ đểngăn chặn, có khả năng tương tác, phá hủy màng lipid không bão hòa của tế bào, làmgiảm khả năng bảo vệ các tế bào dẫn đến sự xâm nhập các tác nhân gây bệnh từ bênngoài oxy hoá các nucleotid căn bản làm thay đổi cấu trúc AND, dẫn đến các quá trìnhđột biến, phát sinh các khôi u, ung thư, làm hỏng cấu trúc protein hoặc hoạt hóa enzymtrong các quá trình trao đổi chất gây bệnh

♦♦♦ Tính kháng oxy hóa của nhóm hợp chất polyphenol trong lá sakê

Trong cơ thể con người có sấn một vài enzyme dùng để bảo vệ và ngăn ngừanhiều loại gốc tự do làm nguy hại tế bào như: Superoxide dismutase phân hóa nhiều trongcác tế bào hồng cầu và gan Tuy nhiên với sô" lượng gốc tự do quá nhiều nên cơ thể phảinhờ đến các chất chông oxy hóa từ bên ngoài như vitamin E, vitamin c Tuy nhiênngười ta đặc biệt chú tâm tới khả năng chông oxy hóa của các hợp chất polyphenol cótrong các loại thực phẩm như: lá dâu tằm, trà xanh, lá sakê

Công thức hóa học của các geranyl dihydrochalcone (2, 4, 5, 8, 9), geranylflavonoids (1, 3, 6, 7) có mặt các hydrogen phenolic thể hiện khả năng kháng oxy hóamạnh Quá trình kháng oxy hóa của chúng được thể hiện bằng cách tác động trực tiếp lêncác gốc tự do được sinh ra trong cơ thể, chúng sẽ tương tác với các gốc tự do đưa chúng

về trạng thái các chất bền qua đó làm cho quá trình oxy hóa bị loại bỏ thông qua cácdạng phản ứng sau:

2.2.4 ứng dụng khả năng kháng oxy hóa của các thành phần polyphenol

ứng dụng được quan tâm mạnh mẽ nhất hiện nay của nhóm các hợp chấtpolyphenol là về khả năng dược lý Nhưng ngoài khả năng ngăn chặn có hiệu quả cácquá trình oxy hóa đặc biệt là các quá trình oxy hóa lipid, nhóm chất này còn được quantâm sử dụng trong các sản phẩm thuộc các lĩnh vực khác như mỹ phẩm và thực phẩm.Trong các lĩnh vực này do đặc điểm xuất phát từ thiên nhiên, an toàn nên polyphenolđược sử dụng như là chất chông oxy hóa để thay thế cho các chất chông oxy hóa thườngdùng như BHT, BHA

Trong mỹ phẩm polyphenol được bổ sung vào các sản phẩm như: kem đánhrăng, kem dưỡng da, sữa tắm

Trong thực phẩm với khả năng kháng oxy hóa chúng được cho vào kẹo, bánh,nước giải khát, chế biến thực phẩm chức năng

2.2.5 Tình hình nghiên cứu, sản xuất chế phẩm polyphenol

a) Tình hình nghiên cứu và sản xuất chế phẩm polyphenol ở ngoài nước

Polyphenol được chiết xuất thành các dạng khác nhau như: cao chiết, dung dịch,dạng paste được sử dụng rộng rãi trong các loại sản phẩm đồ uống, làm chế phẩm bổsung vào các loại thực phẩm chức năng và làm thuốc

Ở Nhật Bản, hầu hết các loại thức ăn nhanh đều được bổ sung polyphenol bởitheo các kết quả nghiên cứu cho thấy các hợp chat polyphenol có nhiều tác dụng trong

phòng ngừa các bệnh liên quan đến cuộc sông hiện đại như: ung thư, xơ vữa động mạch,lão hóa, các bệnh về tim mạch

Polyphenol được sản xuất nhiều ở các nước Mỹ, Nhật và đặc biệt là ở TrungQuốc với quy cách và các chỉ tiêu khác nhau tùy thuộc vào nhà sản xuất hoặc theo sự đặthàng của khách hàng Phương pháp sản xuất cơ bản dựa trên kỹ thuật trích ly bằng dungdịch ethanol sau đó làm tinh khiết bằng ethyl acetate để thu được chế phẩm có độ tinhkhiết theo yêu cầu

Trên thị trường thế giới có nhiều loại chế phẩm polyphenol chiết xuất từ trà xanh

và một sô" loại nguyên liệu khác với độ tinh khiết 60 - 98% tùy thuộc trình độ công nghệ

và thiết bị áp dụng Các hãng sản xuất của Trung Quốc đã cho ra đời nhiều loại sảnphẩm polyphenol từ các loại trà khác nhau của Trung Quốc Giá của sản phẩm phụ thuộcrất nhiều vào công nghệ và kỹ thuật tinh chế cũng như kiểu thiết bị ứng dụng và cuốicùng là nguồn nguyên liệu ban đầu

Thị trường tiêu thụ chế phẩm polyphenol nhiều nhất là Mỹ và Nhật Bản Ớ Mỹ,các loại sản phẩm polyphenol phổ biến ở dạng con nhộng Loại sản phẩm này yêu cầuhàm lượng polyphenol cao, độ tinh khiết cao hơn 95% và các chỉ tiêu về cafein và kimloại nặng cũng rất nghiêm ngặt bởi chúng được coi như là thuốc Tại thị trường NhậtBản chế phẩm polyphenol được sử dụng đa dạng hơn với loại bột chứa trong các hộp 50

- lOOgr dùng làm nguyên liệu bổ sung vào đồ uống và thức ăn nhanh, bánh kẹo Hàmlượng polyphenol và các chỉ tiêu khác cũng tương đôi rộng rãi bởi mục đích sử dụng làchế biến thực phẩm

Bảng 2.4: Các chỉ tiêu chủ yếu của chế phẩm polyphenol trên thị trường thế

giới như sau:

Đặc tính cảm quan Màu vàng kem, màu vàng nhạt đến màu

nâu sáng, cấu trúc xốp, ánh kim Mùi vịđặc trưng

Hàm lượng polyphenol tổng 50 - 98%

Tổng vi sinh vật hiếu khí < 1000 cfu/g

Nước ta đã có một sô" công trình nghiên cứu cơ bản về các loại hợp chấtpolyphenol đặc biệt trong trà xanh, lá dâu tằm trong các truờng đại học, viện nghiêncứu hay các công ty chế biến thực phẩm.

Viện hóa học thuộc Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam cũng đã có các côngtrình nghiên cứu chiết xuất polyphenol sử dụng cho mục đích hóa dầu

Năm 2005, phân viện Công nghệ thực phẩm tại Tp HCM đã thực hiện đề tài cấpbộ: “Nghiên cứu công nghệ sản xuất polyphenol từ trà xanh Việt Nam” Đề tài đã đượcnghiệm thu và đạt kết quả xuất sắc, mặc dù hàm lượng polyphenol trong chế phẩm chỉđạt 50 - 70% Năm 2008 Viện cũng thực hiện đề tài : “Nghiên cứu cải tiến công nghệ vàthiết bị để nâng cao chất lượng catechin sản xuất từ trà xanh phục vụ cho nhu cầu xuấtkhẩu và tiêu thụ trong nước” Nội dung nghiên cứu cải tiến quy trình công nghệ và thiết

bị sản xuất catechin từ trà xanh có độ tinh khiết > 80% và ứng dụng quy trình công nghệmới vào sản xuất thực nghiệm

Nhóm nghiên cứu thuộc trường Đại học Lạc Hồng đã thực hiện đề tài : “Nghiêncứu chiết xuất và xác định tác dụng kháng oxy hóa của polyphenol từ trà xanh ViệtNam” Kết quả chiết xuất caíein và polyphenol từ lá trà xanh Việt Nam có thể thu đượccafein khoảng 2 - 2,1% và polyphenol khoảng 7 - 8% so với mẫu lá khô

Chế phẩm polyphenol được chiết xuất từ lá trà xanh được sử dụng trong sản xuất dược phẩm và bổ sung vào một sô" loại thực phẩm:

+ Sản phẩm Dogarlic trà xanh của công ty dược Domesco trong thành phần

có chứa cao trà xanh, có tác dụng hạ cholesterol, điều hòa triglycerid, phòng bệnhthấp khớp

+ Sản phẩm Teamex của công ty dược Imexpharm chứa 25 mgepigalocatechingalat có tác dụng chông oxy hóa, các gốc tự do trong cơ thể giúpngăn ngừa các bênh mãn tính và ung thư

+ Bánh sandwich, bánh pudding chức năng và sữa chua bước đầu thử nghiệm

bổ sung polyphenol là sản phẩm từ kết quả nghiên cứu của đề tài cấp bộ năm2005: “Nghiên cứu công nghệ sản xuất polyphenol từ trà xanh Việt Nam”.Bảng 2.5: Hàm lượng polyphenol được bổ sung vào một sô" sản phẩm

sung

3 Sữa chua chức năng 0.50%

2.2.6 Các sản phẩm có chứa polyphenol

a) Sản phẩm trong nước

♦♦♦ Sản phẩm DOGARLIC - TRÀ XANH của công ty dược Domesco Sản phẩm dược liệu Dạng bào chế: viên bao phim

Thành phần: Cao trà xanh 3/1 ( Folium Camellia exteact) : 0,25g

Cao tỏi 5/1 ( Allium sativum extract) : 0,3 gCao nghệ 4/1 ( curcumo longga extract) : 0,25g Tá dượcvừa đủ 1 viên bao phim Quy cách đóng gói: Hộp 10 vỉ X 10 viên, chai 50 hoặc 100 viên

Chỉ định: Hạ cholesterol, điều hòa triglycerid, phòng bệnh thấp khớp

Tương tác thuốc: Không nên uống với sữa

Cách dùng và liều dùng: Dùng uống, 2 -4 viên/ ngày, chia 2 lần trước bữa ăn theohướng dẫn của thầy thuốc

Hình 2.7: sản phẩm Dogarlic - Trà xanh

♦♦♦ Sản phẩm TEAMEX của công ty dược Imexpharm Thành

phần EGCG : 25g

Tính chất: EGCG là hoạt chất chính có trong trà xanh, có tác dụng chông các gốc tự

do giúp ngăn ngừa bệnh mãn tính

Chỉ định: Teamex chứa EGCG được dùng để bổ sung nhu cầu EGCG hằng ngày của

cơ thể

Liều dùng: 2-3 viên/ ngày

Ngày nay có một sô" sản phẩm nước giải khát trên thị trường có bổ sung polyphenolvào trong sản phẩm như trà xanh không độ, C2 không độ có bổ sung EGCG

b) Sản phẩm nước ngoài

Có rất nhiều sản phẩm trên thị trường có bổ sung polyphenol, không chỉ riêngnhững sản phẩm thực phẩm nhưng còn cả những sản phẩm dược phẩm, mỹ phẩm.Phần lớn polyphenol được sử dụng bổ sung là polyphenol được chiết xuất từ cácloại trà xanh

Hình 2.9: Một sô" sản phẩm thực phẩm ở nước ngoài như bánh, rượu, nước giải

Trong thực tế, trích ly là sự hoà tan giữa các chất trong vật liệu vào trong dungmôi, quá trình hoà tan đó xảy ra cho đến khi đạt đến sự cân bằng nồng độ chất trích ly

ở các lớp bên trong và lớp mặt ngoài của nguyên liệu, đó là quá trình chuyển khối: sựchuyển vật chất nhờ sự khuếch tán phân tử (chuyển dần từ trong nội tâm nguyên liệuvào dung môi) và sự khuếch tán đôi lưu (chuyển dần từ bề mặt vật liệu vào trong dungmôi) Rõ ràng các cấu tử ở lớp bề mặt hoà tan nhanh hơn cấu tử ở lớp trong các khevách của tế bào, điều đó cho thấy rõ tác dụng của việc chuẩn bị nguyên liệu trước khiđưa vào quá trình

♦♦♦ Biến đổi của vật liệu

Thay đổi nồng độ và thành phần cấu tử trong hệ thông trích ly Trong thiết bịtrích ly vật liệu bị biến đổi chủ yếu về hoá lý và hoá học Sự cân bằng phân bô" cácchất giữa hỗn hợp cần tách với dung môi hoặc giữa hai pha không trộn lẫn vào nhautheo định luật phân bô":

Yp = K2X XTrong đó : x_ nồng độ các chất hoà tan trong hỗn hợp đem trích ly (kg/kg)

Yp_ nồng độ cân bằng của các chất hoà tan trong dung môi (kg/kg)

K2_ hệ sô" phân bô" phụ thuộc vào nồng độ chất hoà tan, nhiệt độ và thành phần pha

Ngoài sự thay đổi thành phần các cấu tử trong hệ thông trích ly còn có thay đổicấu trúc của vật liệu, chủ yếu là cấu trúc bên ngoài

Có thể có sự trích ly các cấu tử khác ngoài cấu tử chính Có một số biến đổi

sinh hoá và sinh học làm thay đổi tính chất vật liệu sau trích ly như tạo mùi vị, hươngthơm

Sản phẩm sau trích ly là hỗn hợp gồm các cấu tử đã tách rời cộng với dungmôi Thường tách dung môi bằng phương pháp chưng cất hoặc bằng các phương phápkhác

♦♦♦ Các yếu tô" ảnh hưởng của quá trình

Sự chênh lệch nồng độ giữa 2 pha: khi chênh lệch nồng độ lđn, lượng chất trích

ly tăng Thời gian trích ly giảm khi tăng tỷ lệ dung môi so với nguyên liệu và tăng vậntốc chuyển động của dung môi trong lớp nguyên liệu

Diện tích tiếp xúc giữa nguyên liệu và dung môi: cần tăng diện tích này để làmtăng hiệu quả quá trình Đôi với nguyên liệu rắn để làm tăng diện tích này thì có thểnghiền hoặc băm nhỏ nguyên liệu Mặt khác, nghiền hoặc băm có tác dụng làm vỡ tếbào làm thúc đẩy quá trình tiếp xúc triệt để giữa nguyên liệu và dung môi Tuy nhiên,kích thước và hình dạng của nguyên liệu làm nhỏ cũng có giới hạn Vì nếu chúng quámịn sẽ bị lắng đọng lên lớp nguyên liệu, tắc các ông mao dẫn hoặc bị dòng dung môicuốn vào chất cần trích ly sẽ làm cho dung dịch có nhiều cặn và làm phức tạp cho quátrình xử lý tiếp theo

Độ ẩm của nguyên liệu: độ ẩm của nguyên liệu giảm thì tốc độ trích ly tăng, vì

độ ẩm tác dụng với protein và các chất háo nước khác, ngăn cản sự dịch chuyển củadung môi thấm sâu vào trong nguyên liệu sẽ làm chậm quá trình khuếch tán

Nhiệt độ trích ly: tăng nhiệt độ có tác dụng tăng tốc độ khuếch tán và giảm độnhớt, phân tử chất hoà tan chuyển động dễ dàng khi khuếch tán giữa các phân tử dungmôi Tuy nhiên nhiệt độ là một yếu tô" có giới hạn vì khi nhiệt độ quá cao có thể xảy

ra các phản ứng khác không cần thiết, gây khó khăn cho quá trình công nghệ

Thời gian trích ly: khi thời gian tăng lượng chất khuếch tán tăng, nhưng thờigian phải có giới hạn vì khi đã đạt mức độ trích ly cao nhất nếu kéo dài thời gian sẽkhông mang lại hiệu quả kinh tế

♦♦♦ Phương pháp thực hiện

Quá trình trích ly được thực hiện bằng cách ngâm hoặc tưới dung môi lên vậtliệu

Các công đoạn chủ yếu của quá trình trích ly:

+ Cho hỗn hợp cần trích ly tiếp xúc với dung môi

Hình 2.11: Sơ đồ quy trình trích ly

+ Tách các pha

+ Tách và thu hồi dung môi

Có thể thực hiện quá trình trích ly bằng gián đoạn hoặc liên tục, trích ly mộthoặc nhiều bậc Dung môi có thể chuyển động cùng chiều hoặc ngược chiều

b) Phương pháp tổng quát để trích ly polyphenol

Do tính chất cũng như tầm quan trọng của polyphenol nên ta tiến hành xác địnhcác nguyên liệu có hàm lượng polyphenol cao để tiến hành trích ly, thu nhận chúng.Hiện nay trong công nghiệp vẫn sử dụng phương pháp trích ly bằng dung môi thôngdụng để thu sản phẩm thô ban đầu

♦♦♦ Sơ đồ của quá trình được mô tả như sau:

♦♦♦ Giải thích

+ Lựa chọn và chuẩn bị nguyên liệu

Nguyên liệu để trích ly polyphenol có thể dùng ở dạng tươi, hoặc đã được xử lýsấy khô nhưng thông thường là đã qua xử lý sấy khô, như vậy sẽ giảm bớt được hàmlượng nước có trong nguyên liệu thuận lợi cho việc trích ly sau này, đồng thời quátrình sấy khô sẽ ức chế được hệ enzyme oxy hóa, tránh thất thoát lượng polyphenoltrong nguyên liệu

Việc lựa chọn nguyên liệu ảnh hưởng rất lớn đến kết quả trích ly polyphenol do

sự phân bô" hàm lượng của polyphenol không đồng đều phụ thuộc nhiều vào các yếutô" giông, thổ nhưỡng, cách thu hái, bảo quản,

Theo như nghiên cứu thì hàm lượng polyphenol trong lá đã vàng có hàm lượngcao nhất, đồng thời hàm ẩm thấp nhất nên đây là nguyên liệu được sử dụng để trích lypolyphenol sau này

Trong lá có hệ enzyme polyphenol oxidase, khi có tác dụng cơ học như vò,nghiền, xay làm vỡ cấu trúc tế bào và giải phóng hệ enzyme này, enzyme sẽ tiếp xúcvới cơ chât là các polyphenol và nhanh chóng xảy ra quá trình oxy hóa làm thất thoátlượng polyphenol Do đó trước khi thực hiện quá trình trích ly ta phải có công đoạnlàm mất hoạt tính enzyme polyphenol oxidase Hiện nay có hai phương pháp thườngđược sử dụng để làm mất hoạt tính enzyme polyphenol oxidase là sử dụng hấp bằnghơi nước và sấy thùng quay hoặc sao rang

Trong phương pháp hấp bằng hơi nước nguyên liệu sau khi hái sẽ được đưavào một thiết bị dạng thùng quay, hơi nước khoảng 100°c được sục vào và đảo liêntục, quá trình diệt men hoàn toàn sau 2-3 phút Trong phương pháp này, nguyên liệuthường hấp thu một lượng nước khá lớn nên hàm ẩm cao nên trong quá trình chế biếnthường cần quá trình sấy kéo dài sau đó

Trong phương pháp diệt men bằng nhiệt, nguyên liệu được cho vào thùng sấynóng hoặc chảo sao, nhiệt độ bề mặt truyền nhiệt khoảng 120°c - 140°c Nguyên liệuđược đảo đều, quá trình diệt men được kết thúc sau 4-6 phút, quá trình diệt men bằngnhiệt thường được kết hợp với quá trình sấy sơ bộ bằng cách kéo dài thời gian sấy.Phương pháp này có nhược điểm là nhiệt độ bề mặt quá cao gây biến tính các thànhphần ở vị trí tiếp xúc, nhiệt độ khôi vật liệu không đều và chất lượng sản phẩm thấp.Phương pháp này cũng khó chuyển đổi để hoạt động liên tục nên chỉ được áp dụngtrong các cơ sở sản xuất nhỏ

Hiện nay đã có nghiên cứu sử dụng năng lượng vi sóng để thực hiện quá trình

ức chế enzyme và đã có những kết quả rất khả quan trong quy mô phòng thí nghiệm

và đang được thử nghiệm ứng dụng trong quy mô công nghiệp

Sau khi diệt men, nguyên liệu sẽ được xay nhỏ để tăng diện tích tiếp xúc vàđem trích ly Quá trình xay cắt có thể được thực hiện bằng các máy cắt nguyên liệuthông thường.

+ Các yếu tô" ảnh hưởng đến quá trình trích ly

Quá trình trích ly polyphenol hiện nay được thực hiện bằng các loại dung môi.Nguyên tắc của trích ly bằng dung môi dựa trên sự thẩm thấu dung môi vào tế bào,chất cần trích ly hòa tan vào dung môi và khuyếch tán ra ngoài tế bào Quá trình trích

ly bằng dung môi có ưu điểm là thiết bị đơn giản, có thể xử lý một lượng lớn nguyênliệu và có thể sử dụng ở quy trình liên tục Các yếu tô" ảnh hưởng đến quá trình trích

ly bằng dung môi:

• Lựa chọn dung môi trích ly: Dung môi trích ly là dung môi hòa tanđược hợp chất cần trích ly Các polyphenol là các hợp chất phân cực nên chủyếu sử dụng các dung môi phân cực như: nước, ethanol, acetone, ethylacetate Chủ yếu người ta dùng ethanol

• Nhiệt độ: Nhiệt độ càng cao làm tăng vận tốc và hiệu quả của quá trình,tuy nhiên cần lưu ý để lựa chọn nhiệt độ phù hợp tránh làm oxy hóapolyphenol cần trích ly Trong toàn bộ quá trình nhiệt độ không nên vượt quá80°c

• Tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi: Tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi càng nhỏ thìhiệu suất trích ly của quá trình càng cao Tuy nhiên sử dụng nhiều dung môi sẽgây khó khăn cho các giai đoạn tiếp theo

• Khuấy trộn: Khuấy trộn giúp tăng cường hiệu quả trích ly, do tăngcường quá trình truyền khôi

• pH: Polyphenol rất bền ở pH acid và kém bền ở pH base Khi thực hiệntrích ly ở pH thấp sẽ tránh được hiện tượng oxy hóa polyphenol và tăng hiệuquả quá trình trích ly Tuy nhiên, cũng có nghiên cứu cho rằng ảnh hưởng của

pH không làm ảnh hưởng nhiều đến hiệu quả trích ly, chỉ cần đảm bảo pHtrung tính hoặc thấp hơn

• Sử dụng chất kháng oxy hóa hỗ trỢ: Việc sử dụng các chất kháng oxyhóa bổ sung như acid ascorbic, acid citric được xác nhận làm tăng hiệu quảtrích ly cũng như làm giảm sự oxy hóa polyphenol

• Thời gian: Quá trình trích ly polyphenol thường được thực hiện trongthời gian khác nhau Một sô" quy trình chỉ thực hiện trích ly dưới 30 phút, 30 -

60 phút hoặc kéo dài hơn Mặc dù hiệu quả trích ly thường tăng theo thời giannhưng việc kéo dài thời gian trích ly lại tăng chi phí dẫn đến giá thành sảnphẩm tăng cao không có tính kinh tế

Nhìn chung các quá trình trích ly dung môi thông thường có hiệu quả trích lykhông cao, thời gian dài, tiêu tốn nhiều dung môi Việc thay đổi các yếu tô" liên quanchưa thực sự cải thiện hiệu quả quá trình.

+ Các phương pháp trích ly polyphenol

Trích ly là một quá trình tách chiết hoàn toàn các chất có trong hỗn hợp cácchất này có độ hòa tan khác nhau trong một dung môi hoặc trong những hệ dung môikhác nhau Quá trình chiết xuất là một quá trình phức tạp, có thể xảy ra được là nhờhiện tượng khuyếch tán, hòa tan, thẩm thấu, thẩm tích của chất tan vào dung môi

• Phương pháp ngâm: Nguyên liệu được ngâm với dung môi trong bồnchiết ở nhiệt độ phòng, thỉnh thoảng đảo trộn Thời gian ngâm tùy thuộc vàoloại nguyên liệu

• Phương pháp đun hồi lưu: Nguyên liệu và dung môi chiết được chứa

trong một bồn có gắn hệ thông ngưng tụ, sau đó đun hồi lưu ở nhiệt độ thích

hợp Sau một thời gian chiết, rút dịch chiết ra cho dung môi mới vào để tiếp tụcchiết

• Phương pháp ngấm kiệt và phương pháp ngược dòng: Được thực hiệntrong bồn chiết có van điều chỉnh để dịch chiết chảy xuống theo mong muônsau khi ngâm nguyên liệu với dung môi một thời gian nhất định Dịch rút ra từbồn thứ nhất dùng để ngâm nguyên liệu ở bồn thứ hai, tiếp tục thực hiện chođến bồn chiết sau cùng Phương pháp này được sử dụng rộng rãi trong sảnxuất

+ Tinh chế polyphenol

Tùy vào thành phần hóa học của hợp chất cần chiết xuất, trước khi được tinhchế có thể thủy phân hoặc không thủy phân để cắt đứt một sô" liên kết hóa học tronghợp chất, loại bỏ các thành phần không mong muôn nhằm thu hồi các chế phẩm cầnchiết xuất

Có thể thủy phân bằng dung dịch acid hoặc enzyme Tùy vào nguyên liệu cóthể chọn điều kiện tôi ưu cho phản ứng thủy phân như chọn acid, nồng độ acid, chọnloại enzyme, thời gian phản ứng

• Tinh chế bằng dung môi: Dùng dung môi có độ phân cực khác nhau đểtách ra từng phân đoạn, tùy thuộc vào độ phân cực của từng hợp chất chúng sẽđược hòa tan trong các loại dung môi khác nhau Một sô" dung môi thườngdùng là: benzen, chloroform, ether, ethyl acetate, methanol, ethanol

• Tinh chế bằng than hoạt tính (theo Mabry): Cho than hoạt tính vào dịchchiết để hấp phụ, sau đó cho dung môi có độ phân cực từ yếu đến mạnh để đẩycác hợp chất ra khỏi than hoạt tính theo các phân đoạn khác nhau.

• Tủa với acetate chì: Hòa tan cặn chứa hỗn hợp vào cồn loãng sau đó choacetate chì vào để tủa Lọc lấy tủa, hòa tan tủa vào cồn loãng, loại chì thừabằng dung dịch natri nitrat hoặc natri phosphate

• Tách bằng phương pháp tủa với ether: Cặn chứa hỗn hợp được hòa tantrong methanol, sau đó tủa ethylic và lọc Một sô" tủa với ether, một sô" kháckhông tủa nằm lại trong dịch lọc Phần tủa và dịch lọc được tinh chế bằng cácphương pháp khác nhau

• Tách bằng phương pháp sắc ký: Tách bằng phương pháp sắt ký cột, sắc

ký lỏng Các phương pháp này có độ tinh khiết cao nhưng đòi hỏi thiết bịcũng như trình độ kỹ thuật cũng như chi phí cao

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP http://www.ebook.edu.vn Trang 29

CHƯƠNG 3: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

+ Lá chè tươi và trà khô thành phẩm: mua ở chợ

+ Lá sakê non, lá sakê xanh, lá sakê vàng

Tất cả các loại nguyên liệu đều được thu mua tại chợ Phạm Văn Hai - phường

3 - quận Tân Bình

Nguyên liệu sử dụng để nghiên cứu phải tươi tốt, không được dập nát, hư thối.,

để tránh thất thoát hàm lượng polyphenol do bị oxy hoá

3.1.2 Hóa chất.

+ Ethanol 98°, nước cất + Ethyl acetat đạt độ tinh khiết > 99,5%

+ Sodium tungstate ( NaW04.H20)

+ Thiết bị ổn nhiệt + Bình chiết + Máy đo pH

+ Máy đo OD và một sô" thiết bị hỗ trợ khác

NGUYỄN XUÂN PHƯỚC

3.2 Phương pháp nghiên cứu

3.2.1 Sơ đồ tiến hành nghiên cứu

GVHD: TS HOÀNG KIM ANH SVTH: NGUYỄN XUÂN TRÌNH

NGUYỄN XUÂN PHƯỚC

Pha nước

3.2.2 Quy trình trích ly và thu nhận polyphenol

a) Sơ đồ quy trình

NGUYỄN XUÂN PHƯỚC

Cao Polyphenol Hình 2.15: Sơ đồ quy trình trích ly và thu nhận cao polyphenol

*^Thu hồi ethỵl acetaT)