ĐỀ CƯƠNG MÔN NẤM VÀ BỆNH DO NẤM GÂY RA

Sinh sản bằng cách hỡnh thành bào tử vô tính: - Khi môi tr-ờng nghèo dinh d- ng, nấm men chuyển sang hỡnh thức sinh sản hỡnh thành bào tử: + Khi đó nhân của tế bào mẹ phân chia 2 - 3 l

ĐỀ CƯƠNG MÔN NẤM VÀ BỆNH DO NẤM GÂY RA

- Nấm học thú y: Là môn khoa học nghiên cứu về nấm và những loài nấm phổ biến gây bệnh cho động vật nuôi, các phương pháp chẩn đoán, phòng và trị bệnh

- Nấm học (Mycology) được khai sinh bởi nhà thực vật học người Ý tên là Pier Antonio Micheli (1729) qua tài liệu công bố về “giống cây lạ” (Nova Plantarum Genera)

- Theo Giáo sư Ekriksson Gunnan (1978) thì người có công nghiên cứu sâu về nấm mốc lại là Elias Fries (1794 - 1874)

CHƯƠNG I: ĐẠI CƯƠNG VỀ NẤM

I ĐẶC ĐIỂM CHUNG VỀ CẤU TẠO CỦA GIỚI NẤM

- Giới nấm (Fungi) là nhóm sinh vật đơn ngành thuộc dạng tế bào nhân thực Cơ thể là đơn bào hoặc đa bào dạng sợi, có thành kitin (trừ một số ít có thành xenlulôzơ), không có lục lạp Sống dị dưỡng hoại sinh, kí sinh và cộng sinh (địa y) Sinh sản chủ yếu bằng bào tử, bào tử thường không

có lông và có thể có roi

- Nấm phát triển trong điều kiện có sẵn chất hữu cơ và ở nhiệt độ từ 25oC đến 30oC Ở 0o

C thì nấm không phát triển, 100oC giết chết nhiều loại nấm

- Vị trí phân loại trong tự nhiên: (Theo hệ thống phân loại 5 giới của RH Whittaker the five

kingdom system): Animals: Giới động vật; Plants: Giới thực vật; Fungi: Giới nấm; Protista: Giới nguyên sinh; Procaryota: Giới khởi sinh

- Theo Elizabeth Tootyll (1984) nấm mốc có khoảng 5.100 giống(chi) và 50.000 loài được mô tả, tuy nhiên, ước tính có trên 100.000 đến 250.000 loài nấm hiện diện trên trái đất

- Liên quan đến bệnh tật, nấm có 4 phương thức gây bệnh:

+ Ký sinh

+ Gây bệnh với các hiện tượng dị ứng

+ Gây bệnh do ăn phải thức ăn nhiễm nấm và độc tố của chúng

+ Gây bệnh do ăn phải nấm độc

+ TÊt c¶ c¸c loµi nÊm men vµ c¸c nÊm sîi kh«ng sinh qu¶ thể lín (mò nÊm)

+ C¸c nÊm sinh qu¶ thể d¹ng lín th-êng ®-îc gäi lµ nÊm lín (mushroom)

- Tuy nhiên giai đoạn sợi nấm của các nấm lớn cũng vẫn là đối t-ợng nghiên cứu của vi sinh vật học

3 Đặc điểm chung của nấm

a Cơ thể nấm có bộ máy dinh d ỡng ch-a phân hoá thành các cơ quan riêng biệt: Hypha

- Nấm thường tồn tại ở dạng đơn bào hoặc đa bào, đa số có dạng sợi là sợi nấm hay khuẩn

ty(hypha)

+ Sợi nấm có thể có hoặc không có vách ngăn

+ Sợi nấm có đ-ờng kính trung bi nh là 5 - 10μm, đôi khi rất lớn (tới 25μm) nh-ng có khi rất nhỏ (1

- 2μm)

+ Có sợi nấm trong suốt, không màu, có sợi có màu Một số sợi nấm tiết sắc tố vào môi tr-ờng nuôi cấy Một số sợi nấm khác có thể tiết ra các chất hữu cơ, kết tinh trên bề mặt sợi nấm

+ Đa số sợi nấm phân nhánh nhiều lần nh-ng cũng có loại sợi nấm không phân nhánh

+ Từ một bào tử hay một đoạn sợi nấm gặp điều kiện thuận lợi, sợi nấm sẽ phát triển ra theo cả ba chiều tạo thành một hệ sợi nấm hay khuẩn ti thể

b Các vách ngăn ở sợi nấm đều có lỗ thông:

- Tuỳ loại nấm mà vách ngăn có thể:

+ Có một lỗ thông khá lớn ở chính giữa Ví dụ: nấm túi, nấm bất toàn

+ Có thể có nhiều lỗ thông t-ơng đối nhỏ Ví dụ: Geotrichum candidum và nhiều loài Fusarium

- Nhân tế bào cũng có thể thót nhỏ lại để chui qua lỗ thụng cựng chất nguyờn sinh

+ Nhân tế bào trong sợi nấm th-ờng di chuyển tới những phần sợi nấm đang có hoạt động sinh lý mạnh mẽ

+ Cả sợi nấm không ngăn vách và có ngăn vách chỉ là những ống dài chứa chất nguyên sinh và nhiều nhân tế bào

+ Sợi nấm ch-a có cấu tạo tế bào điển hỡnh nh- ở các sinh vật nhân thật khác (trừ nấm men đơn bào)

+ Mỗi tế bào trong một sợi nấm ch-a có hoạt động trao đổi chất độc lập vỡ ch-a có giới hạn rõ rệt

c Nấm cũng có rất nhiều đặc điểm chung với các sinh vật có nhân thật, nhất là về cấu tạo của nhân

- Nấm khác hẳn về nhiều mặt với các vi sinh vật thuộc nhóm nhân nguyên thuỷ nh- vi khuẩn, vi khuẩn lam

d Nấm có những đặc điểm riêng biệt về mặt hoá học tế bào:

- Nấm không có cấu trúc thống nhất giữa các nhóm về thành phần của thành tế bào

- Chỉ có một số ít có chứa xenlulozơ trong thành tế bào

- Chất dự trữ của nấm không phải là tinh bột nh- ở thực vật mà là glicogen nh- ở động vật

e Nấm khụng chứa trong tế b o sắc tố quang hợp:

Khỏc với thực vật và cỏc vi khuẩn quang hợp, nấm khụng chứa trong tế bào sắc tố quang hợp, vỡ vậy nấm khụng cú khả năng quang hợp, khụng cú khả năng sống tự dưỡng, nấm chỉ cú đời sống hoại sinh (trờn chất hữu cơ chết), kớ sinh (trờn cơ thể sống) và cộng sinh (với tảo và VK lam hoặc với rễ cõy)

g Nấm sinh sản bằng bào tử vô tính và bào tử hữu tính:

- Các bào tử vô tính: khác nhau ở hỡnh thái và ở nguồn gốc phát sinh Ngoài ra cũn cú: bào tử đốt, bào tử phấn, bào tử chồi

+ Căn cứ vào đặc điểm phát sinh ng-ời ta phân ra: bào tử kín và bào tử trần

+ Một dạng bào tử vô tính không phải là dạng sinh sản đ-ợc là bào tử màng dày(bào tử áo) Chúng

do một đoạn sợi nấm tích luỹ nhiều chất dinh dưỡngvà có thành tế bào dày lên mà tạo thành nhằm mục đích thích ứng với các điều kiện bất lợi của môi tr-ờng

+ Một kiểu bào tử vô tính khác đó là các bào tử có roi có khả năng bơi lội trong n-ớc là các bào tử

động

- Các bào tử hữu tính ở nấm rất đa dạng: bào tử noãn, bào tử tiếp hợp, bào tử túi, bào tử đảm

h Nấm không có một chu trỡnh phát triển chung:

- Có 5 kiểu chu trỡnh phát triển của nấm:

+ Chu trỡnh l ỡng bội: Giai đoạn đơn bội t-ơng ứng với thể giao tử là các giao tử hoặc các nang

giao tử Thể bào tử lưỡngbội chiến -u thế so với thể giao tử Vớ dụ: lớp Chytridiomycotes và lớp

Oomyceter

+ Chu trỡnh hai thế hệ: Thể giao tử đơn bội xen kẽ với thể bào tử lưỡng bội và về nguyên tắc

t-ơng đ-ơng nhau Vớ dụ: Một số loài nấm thuộc lớp Oomycetes

+ Chu trỡnh đơn bội: Sự giảm phân nối tiếp ngay với quá trỡnh phối nhân để tạo thành thể giao tử

đơn bội Thể giao tử đơn bội phát triển bằng các bào tử vô tớnh đơn bội và sinh ra một thế hệ giao

tử đơn bội thứ hai Thế hệ này tiếp tục phát triển bằng các bào tử vô tính đơn bội hoặc tạo thành các giao tử rất ít phân hoá về hỡnh thái Giai đoạn lưỡng bội t-ơng ứng với thể bào tử chỉ tồn tại trong một thời gian rất ngắn VD: Nhiều loài nấm lớp Zygomycetes

+ Chu trỡnh đ n bội - song nhân: Một biến dạng của chu trỡnh đơn bội Vớ dụ: ở nấm túi giai

đoạn đơn bội chiến -u thế với giai đoạn song nhân Các sợi nấm đơn bội sau một thời gian phát triển sẽ tạo ra các giao tử rất ớt phân hoá về hỡnh thái Sau khi phối trộn nguyờn sinh chất, nhân tế bào vẫn tồn tại riêng rẽ thành từng đôi Giai đoạn này ngắn hơn giai đoạn đơn bội

+ Chu trỡnh vô tính: Đặc tr-ng cho nấm bất toàn, hoàn toàn không có giai đoạn hữu tính Cho đến

nay ng-ời ta ch-a tỡm thấy giai đoạn hữu tính của các nấm này

III Nấm men

1 Đặc điểm chung:

- Nấm men (Yeast) là tên gọi thông th-ờng của một nhóm nấm có vị trí phân loại không thống nhất nh-ng có chung các đặc điểm sau đây:

+ Thường tồn tại ở trạng thái đơn bào

+ Đa số sinh sản theo lối nảy chồi, cũng có khi trực phõn

+ Nhiều loại có khả năng lên men đ-ờng

+ Thành tế bào có chứa Mannan (D- mannoza)

+ Thích nghi với môi tr-ờng chứa đ-ờng cao, có tính axit cao

+ Nấm men phân bố rất rộng rãi trong tự nhiên, nhất là trong các môi tr-ờng có chứa đ-ờng, có pH thấp nh- trong hoa quả, rau d-a, mật mía, rỉ đ-ờng, mật ong, trong đất ruộng mía, đất v-ờn cây ăn quả, trong các đất có nhiễm dầu mỏ

2 Hỡnh thái và cấu trúc của tế bào nấm men

- Nấm men là vi sinh vật điển hỡnh cho nhóm nhân thật

- Tế bào nấm men th-ờng lớn gấp 10 lần so với vi khuẩn

- Loại nấm men nhà máy r-ợu, nhà máy bia th-ờng sử dụng là Saccharomyces cerevisiae, có kích

th-ớc thay đổi trong khoảng 2,5-10μm x 4,5-21μm do đó có thể thấy rõ đ-ợc d-ới kính hiển vi quang học

a Về hỡnh th i: Tuỳ loài nấm men mà tế bào có hỡnh thỏi đa dạng: hỡnh cầu, hỡnh trứng, hỡnh

ôvan, hỡnh chanh,

- Có loài nấm men có khuẩn ti hoặc khuẩn ti giả Khuẩn ti giả ch-a thành sợi rõ rệt mà chỉ là nhiều

tế bào nối với nhau thành chuỗi dài Có loài có thể tạo thành váng khi nuôi cấy trên môi tr-ờng dịch thể

b Cấu tạo tế b o:

- Thành tế bào nấm men:

+ Dày khoảng 25m (25% khối l-ợng khô của tế bào)

+ Đa số nấm men có thành tế bào cấu tạo bởi Glucan và mannan

+ Một số nấm men có thành tế bào chứa kitin và mannan

+ Trong thành tế bào nấm men có chứa khoảng 10% protein (khối l-ợng), trong số protein này có một phần là các enzim Trên thành tế bào còn thấy có cả một l-ợng nhỏ lipit

- D-ới lớp thành tế bào là lớp màng tế bào chất (NSC):

+) Sử dụng dịch tiêu hoá của ốc sên Helix pmotia có thể làm phá vỡ thành tế bào của nấm men tạo

ra tế bào trần Lấy tế bào trần đ-a vào trong một dung dịch có áp suất thẩm thấu, ly tâm để lấy ra màng tế bào chất, rửa và li tâm lại để thuần khiết màng, quan sát d-ới kính hiển vi điện tử thấy nó gồm 3 lớp Cấu tạo chủ yếu là protein (50% khối l-ợng khô), phần còn lại là lipit (40%) và một ít polisaccarit

+) Thành phần của màng tế bào chất nấm men:

- Nguyờn sinh chất: ngoài những thành phần cơ bản, NSC tế bào nấm men cũng chứa :

+ Ti thể của nấm men cũng giống với nấm sợi, tế bào sinh vật có nhân khác ADN của ti thể nấm men là một phân tử dạng vòng có khối l-ợng phân tử là 50 x 106 Da (gấp 5 lần so với ADN ti thể ĐVBC) ADN của ti thể nấm men chiếm 15-23% tổng l-ợng ADN toàn tb nấm men

+ Chức năng của ty thể: là một trạm năng l-ợng của nấm men, năng l-ợng đ-ợc tích luỹ d-ới dạng ATP Thực hiện tổng hợp protein và photpholipit do ty thể có chứa ADN và riboxom( protein có trọng l-ợng thấp)

+ Năm 1967 một loại plasmit phát hiện ở tế bào nấm men Saccharomyces cerevisiae đ-ợc gọi là

“2m plasmit” có vai trò quan trọng trong thao tác chuyển gen của kĩ thuật di truyền Loại plasmit này là một ADN vòng chứa 6300 cặp bazơ

+ Các tế bào nấm men khi già sẽ xuất hiện không bào Trong không bào có chứa các ezim thuỷ phân, poliphophat, lipoit, ion kim loại, các sản phẩm trao đổi chất trung gian Ngoài tác dụng một kho dự trữ, không bào còn có chức năng điều hoà áp suất thẩm thấu của tế bào

+ Trong một tế bào nấm men (loài Candida albicans) còn thấy các vi thể Đó là các thể hỡnh

cầu(hỡnh trứng), đ-ờng kính 3m, chỉ phủ một lớp màng dày khoảng 7nm Vi thể có vai trò nhất

định trong quá trỡnh oxi hoá metanol

- Nhân:

+ Nhân của tế bào nấm men là nhân thật, có kết cấu hoàn chỉnh có màng nhân, dịch nhân, các nhiễm sắc thể Nhân th-ờng hỡnh tròn, đ-ờng kính 2 - 3 μm Chính vỡ vậy sự sinh sản của nấm men

co n đ-ợc tiến hành theo ph-ơng thức gián phân

+ Nhân của tế bào nấm men đ-ợc bao bọc bởi một màng nhân nh- ở các sinh vật có nhân thật khác Màng nhân của nấm men có cấu trúc 2 lớp và có rất nhiều lỗ thủng

+ Nhân của tế bào men r-ợu Saccharomyces cerevisiae có chứa 17 đôi nhiễm sắc thể

+ ADN trong tế bào nấm men đơn bội có khối l-ợng phân tử là: 1 x 1010 Da (Dalton, 1 Da = 1,67 x

10-24g),

So với khối l-ợng phân tử ADN cu a TB Nõ m men với ADN cu a vi khuẩn Escherichia coli thỡlớn hơn 10 lần nh-ng so với ADN của ng-ời thỡlại nhỏ hơn 100 lần

3 Sinh sản và các chu kỳ sống của nấm men

3.1 Sinh sản vô tính:- Phân cắt: ở chi Schizosaccharomyces

- Nảy chồi: ở tất cả các chi nấm men

- Bằng bào tử : + Bào tử đốt: ở chi Geotrichum + Bào tử bắn: ở chi Sporobolomyces

+ Bào tử áo: ở nấm Candida albicans

a Sinh sản bằng ph-ơng thức phân cắt

- Phân cắt là hỡnh thức sinh sản thấy ở chi nấm men Schizosaccharomyces

- Lối phân cắt này t-ơng tự nh- ở vi khuẩn Tế bào dài ra, ở giữa mọc ra vách ngăn chia tế bào ra thành 2 phõ n t-ơng đ-ơng nhau, mỗi tế bào con sẽ có một nhân

b.Sinh sản bằng phơng thức nẩy chồi: Đây là hi nh thức sinh sản chủ yếu của nấm men, được tiến

hành như sau:

- Khi tế bào nấm men trởng thành sẽ nẩy ra một chồi nhỏ

- Chồi lớn dần lên, nguyên sinh chất và một phần nhân của tế bào mẹ đợc chuyển sang chồi

- Vách ngăn đợc hỡnh thành, ngăn cách với tế bào mẹ, tạo nên tế bào mới

- Tế bào con tạo thành có thể tách khỏi tế bào mẹ, hoặc vẫn dính với tế bào mẹ và tiếp tục nảy sinh

tế bào mới

c Sinh sản bằng cách hỡnh thành bào tử vô tính:

- Khi môi tr-ờng nghèo dinh d- ng, nấm men chuyển sang hỡnh thức sinh sản hỡnh thành bào tử:

+ Khi đó nhân của tế bào mẹ phân chia 2 - 3 lần liên tiếp tạo ra 4 - 8 nhân con

+ Mỗi nhân con đ-ợc NSC bao bọc và có màng bọc để tạo thành bào tử

+ Tế bào men mẹ trở thành tu i bào tử

+ Bào tử bắn th-ờng gặp ở chi nấm men Sporobolomyces, Sporidiobolus, Bullera và Aessosporon

- Loại bào tử này có hỡnh thỏi sinh ra trên một cuống nhỏ mọc ở các tế bào dinh dưỡng hỡnh trứng + Sau khi bào tử chín, nhờ một cơ chế đặc biệt bào tử sẽ đ-ợc bắn ra phía đối diện

+ Khi cấy các nấm men này trên thạch nghiêng theo một đ-ờng zich zắc, ít hôm sẽ thấy trên thành ống nghiệm phía đối diện với bề mặt thạch sẽ có một đ-ờng zich zắc kha c do các bào tử bắn tạo thành

+ Bào tử màng dày hay bào tử áo th-ờng mọc ở đỉnh của các khuẩn ti giả (pseudomycelium) một

số men (nh- Candida albicans)

3.2 Sinh sản hữu tính:

- Ở một số loại nấm men bào tử còn đ-ợc hỡnh thành do sự tiếp hợp giữa hai tế bào:

+ Khi 2 tế bào đứng gần nhau

+ Mỗi đầu của 2 tế bào mọc ra mấu lồi h-ớng vào nhau

+ Tại chỗ tiếp xúc màng tế bào bị thuỷ phân, 2 tế bào thông với nhau

+ 2 tế bào tiếp hợp với nhau và hỡnh thành hợp tử

+ Nhân của hợp tử phân chia 2 - 3 lần tạo thành 4 - 8 nhân con mới

+ Mỗi nhân con đ-ợc NSC và màng bao bọc tạo thành bào tử

+ Mỗi túi bào tử có 4 - 8 bào tử

- Ở điều kiện thuận lợi, màng túi bào tử bị phá vỡ, các bào tử đ-ợc giải phóng, phát triển thành tế bào nấm men mới

4 Chu kỳ sống của nấm men có thể phân ra thành 3 loại hỡnh:

a Các tế bào dinh dưỡng đơn bội (n) có thể tiếp hợp với nhau để tạo ra tế bào dinh dưỡnglưỡng bội (2n) Sau quá trỡnh giảm phân sẽ sinh ra các bào tử túi (th-ờng là 4 bào tử túi)

b Bỡnh th-ờng khi không có sinh sản hữu tính chúng vẫn liên tục nảy chồi đẻ sinh sôi nảy nở Nấm men r-ợu Saccharomyces cerevisiae

c Các tế bào dinh dưỡngđơn bội (n) sinh sản theo lối phân cắt sau quá trỡnh phân cắt 3 lần, lần

đầu giảm nhiễm sẽ tạo ra 8 bào tử túi Tế bào mang 8 bào tử này trở thành túi

- Khi túi vỡ các bào tử túi sẽ thoát ra ngoài và khi gặp điều kiện thuận lợi phát triển trở lại thành các

tế bào dinh d- ng Chu kỳ sống này thấy ở Schizosaccharmyces octospora

- Thể dinh dưỡng chỉ có thể tồn tại d-ới dạng lưỡngbội (2n), sinh sản theo lụ i nảy chồi khá lâu.Bào

tử túi đơn bội tiếp hợp từng đôi với nhau ngay cả từ khi còn nằm trong túi

- Giai đoạn đơn bội tồn tại d-ới dạng bào tử túi nằm trong túi và không thể sống một cách độc lập

Có thể thấy rõ chu kỳ sống này ở Saccharomy- codess ludwigii

5 Phân loại nấm men

- J.Lodder (1970) đã xác định có 349 loài nấm men, thuộc 39 chi khác nhau

- J.A Barnett, R.W Payne và D.Yarrow (1983) xác định có 483 loài nấm men thuộc 66 chi khác nhau

- Đặc điểm sinh học của từng loài và khoá phân loại đến chi, đến loài có thể tham khảo cuốn “Phân loại Nấm men” do Bảo tàng giống chuẩn vi sinh vật (Đại học quốc gia Hà Nội) xuất bản năm 1995

6.Vai trò của nấm men:

- Nấm men phân bố rộng trong tự nhiên, có vai trò quan trọng về nhiều mặt:

+ Tham gia khép kín vòng tuần hoàn vật chất trong tự nhiên

+ Do trao đổi chất của hầu hết nấm men không sinh chất độc hại cho ng-ời, động vật nên đ-ợc ứng dụng rộng trong:

- Chế tạo chất hữu cơ quan trọng: cồn, axeton, glyxerin…

- Chế biến thực phẩm: R-ợu, bia, làm nở bột mỳ, n-ớc chấm

- Sản xuất protein đơn bào

- Dùng nấm men lên men trực tiếp thức ăn cho gia súc

- Tuy nhiên bên cạnh các nấm men có ích cũng có không ít các nấm men có hại, chúng gây ra hiện t-ợng làm h- hỏng thực phẩm t-ơi sống hoặc các thực phẩm chế biến

- Có khoảng 13 - 15 loài nấm men có khả năng gây bệnh cho ng-ời và cho động vật chăn nuôi Đáng chú ý nhất là các loài:

- Candida albicans,

- Crytococcus neoformans,

- Trichosron cutaneum,

- T capitatum…

IV Nấm sợi

- Nấm sợi là tất cả các nấm không phải nấm men và cung co thờ sinh mũ nấm (thể quả có kích th-ớc lớn) nh- ở các nấm lớn

- Tuy nhiên ở tất cả các giai đoạn ch-a sinh mũ nấm thi khuẩn ti thể (hệ sợi nấm) của nấm lớn vẫn

đ-ợc coi là nấm sợi và đ-ợc nghiên cứu về các mặt sinh lí, sinh hoá, di truyền…nh- các nấm sợi khác

- Nấm sợi còn đ-ợc gọi là nấm mốc (Monds), tức là chỉ tất cả các mốc mọc trên thực phẩm, trên chiếu, trên quần áo, trên giầy dép, trên sách vở… Chúng phát triển rất nhanh trên nhiều nguồn cơ chất hữu cơ khi gặp khí hậu nóng ẩm

- Trên nhiều vật liệu vô cơ do dính bụi bậm (nh- các thấu kính ở ống nhòm, máy ảnh, kính hiển vi…) nấm mốc vẫn có thể phát triển, sinh axit và làm mờ các vật liệu này

- Nấm mốc đa số cú hỡnh sợi (filamentous fungi = nấm sợi), sợi cú ngăn vỏch (đa bào đơn nhõn) hay khụng cú ngăn vỏch (đơn bào đa nhõn)

- Sợi nấm thường là một ống hỡnh trụ dài cú kớch thước lớn nhỏ khỏc nhau tựy loài

- Đường kớnh của sợi nấm thường từ 3-5àm, cú khi đến 10àm, thậm chớ đến 1mm

- Chiều dài của sợi nấm cú thể tới vài chục cm

- Cỏc sợi nấm phỏt triển chiều dài theo kiểu tăng trưởng ở ngọn Cú thể phõn nhỏnh và cỏc nhỏnh

cú thể lại phõn nhỏnh liờn tiếp tạo thành hệ sợi nấm khớ sinh xự x như bụng

- Trờn mụi trường đặc và trờn một số cơ chất trong tự nhiờn, bào tử nấm, tế bào nấm hoặc một đoạn sợi nấm cú thể phỏt triển thành một hệ sợi nấm cú hỡnh dạng nhất định gọi là khuẩn lạc nấm

1-Dinh d ỡng v tăng tr ởng của nấm mốc

- Hầu hết cỏc loài nấm mốc khụng cần ỏnh sỏng trong quỏ trỡnh sinh trưởng Tuy nhiờn, cú một số loài lại cần ỏnh sỏng trong quỏ trỡnh tạo bào tử (Buller, 1950)

- Nhiệt độ:

+ Tối thiểu cần cho sự phỏt triển là từ 2oC đến 5o

C, + Tối thớch hợp từ 22oC đến 27o

C + Tối đa mà chỳng cú thể chịu đựng được là 35oC đến 40o

C + Cỏ biệt cú một số ớt loài cú thể sống sút ở 0oC và ở 60o

C

- pH:

+ Núi chung, nấm mốc cú thể phỏt triển tốt ở mụi trường acid (pH=6)

+ pH tối thớch là 5 - 6,5

+ Một số loài phỏt triển tốt ở pH < 3 và một số ớt phỏt triển ở pH > 9 (Ingold, 1967)

- Oxi cũng cần cho sự phỏt triển của nấm mốc vỡ chỳng là nhúm hiếu khớ bắt buộc và sự phỏt triển

sẽ ngưng khi khụng cú oxi

- Nước cũng là yếu tố cần thiết cho sự phỏt triển

- Nấm mốc khụng cú diệp lục tố nờn chỳng cần được cung cấp dinh dưỡng từ bờn ngoài (nhúm dị dưỡng)

- Một số sống sút và phỏt triển nhờ khả năng ký sinh (sống ký sinh trong cơ thể động vật hay thực vật) hay hoại sinh (saprophytes) trờn xỏc bó hữu cơ

- Nhúm nấm rễ hay địa y sống cộng sinh với nhúm thực vật nhất định

- Nguồn dưỡng chất cần thiết cho nấm được xếp theo thứ tự sau: C, O, H, N P, K, Mg, S, B, Mn,

Cu, Zn, Fe, Mo và Ca

+ Cỏc nguyờn tố này hiện diện trong cỏc nguồn thức ăn vụ cơ đơn giản như glucoz, muối

ammonium sẽ được nấm hấp thu dễ dàng

+ Nếu từ nguồn thức ăn hữu cơ phức tạp nấm sẽ sản sinh và tiết ra bờn ngoài cỏc loại enzim thớch hợp để cắt cỏc đại phõn tử này thành những phõn tử nhỏ để dễ hấp thu vào trong tế bào

2 Hỡnh thái và cấu trúc của nấm sợi

a Cấu trỳc:

- Cấu trúc của sợi nấm cũng t-ơng tự nh- cấu trúc của tế bào nấm men

+ Bên ngoài có thành tế bào, rồi đến màng tế bào chất, bên trong là tế bào chất với nhân phân hoá + Màng nhân có cấu tạo 2 lớp và trên màng có nhiều lỗ nhỏ

+ Trong nhân có hạch nhân

+ Bên trong tế bào nấm còn có thể màng biên

+Thể màng biên là một kết cấu màng đặc biệt, nằm ở giữa thành tế bào và màng tế bào chất, bao bọc bởi một lớp màng đơn và có hỡnh dạng biến hoá rất nhiều (hỡnh ống, hỡnh túi, hỡnh trứng hoặc hỡnh nhiều lớp)

+ Công dụng của thể màng biên còn ch-a đ-ợc làm sáng tỏ, có thể là có liên quan đến sự hỡnh thành thành tế bào

b Hỡnh thái :

*) Nấm mốc gồm có 2 bộ phận: khuẩn ty và bào tử

b.1 Khuẩn ty (Hypha) hay sợi nấm:

+ Cấu tạo dạng sợi phân nhánh, những sợi này sinh tr-ởng ở đỉnh

+ Cả đám sợi gọi là khuẩn ty thể hay hệ sợi nấm

+ Khuẩn ty đ-ợc sinh ra từ bào tử, tuỳ từng loại, khuẩn ty có thể có hỡnh lò xo, xoắn ốc, cái vợt, sừng h-ơu, cái l-ợc, lá dừa

- Sợi nấm có 2 loại:

+ Sợi nấm có vách ngăn: Loại này có ở phần lớn các loại nấm mốc Sợi nấm do những chuỗi tế bào tạo nên

Sợi nấm lớn lên do tế bào không ngừng phân cắt, nên cơ thể chúng có cấu tạo đa bào đơn nhân Ví dụ: Aspergillus; Penicillinum

+ Sợi nấm không có vách ngăn:Loại này có ở một số nấm mốc bậc thấp Toàn bộ hệ sợi nấm

đ-ợc coi nh- một tế bào phân nhánh đ-ợc gọi là cơ thể đa nhân Trong quá trỡnh phát triển của sợi

nấm,chỉ có nhân phân chia, NSC tăng lên nh-ng không có màng ngăn, nên cơ thể chúng đ-ợc gọi

là cơ thể đơn bào đa nhân Ví dụ: Mốc Murco; Rhizupus,

- Khi nuôi cấy trong môi tr-ờng đặc, căn cứ vào vị trí chức năng của khuẩn ty có thể phân ra làm 3 loại khuẩn ty:

+Khuẩn ty cơ chất: Khuẩn ty phát triển sâu vào môi tr-ờng lấy thức ăn

+Khuẩn ty khí sinh: Khuẩn ty phát triển trên bề mặt môi tr-ờng

+Khuẩn ty sinh sản: Khuẩn ty sinh sản phát triển từ một khuẩn ty khí sinh, đầu của khuẩn ty phát

triển đặc biệt trong chứa bào tử

b.2 Bào tử:

- Bào tử là cơ quan sinh sản chủ yếu của nấm mốc

- Khi nấm mốc tr-ởng thành, các khuẩn ty sinh sản sẽ sinh ra các bào tử

- Bào tử đ-ợc hỡnh thành bằng hỡnh thức sinh sản vô tính hay hữu tính

3 Sinh sản của nấm mốc: Khi nấm mốc tr-ởng thành sẽ tiến hành sinh sản Có 2 hỡnh thức sinh sản chính:

- Sinh sản vô tính: Sinh sản vô tính của nấm mốc có nhiều hỡnh thức:

+ Trực phân: giống vi khuẩn

+ Nẩy chồi : giống nấm men

+ Khúc khuẩn ty: trên cơ thể nấm mốc, khuẩn ty đứt ra từng đoạn, mỗi đoạn phát triển thành cơ thể nấm mới

- Hỡnh thành các bào tử vô tính, gồm:

+) Bào tử noãn:

+ Đầu các khuẩn ty sinh sản có sự ngắt đốt

+ Mỗi đốt đ-ợc coi nh- một bào tử, khi rơi vào môi tr-ờng sẽ phát triển thành một khuẩn ty mới +) Bào tử màng dày (hậu bào tử):

+ Ở nấm mốc đa bào

+ Đến thời kỳ sinh sản, một số tế bào ở cơ thể nấm tích luỹ chất dinh dưỡng màng dày lên hỡnh thành bào tử

+ Bào tử tách rời khỏi cơ thể, gặp điều kiện thuận lợi nảy mầm cho cơ thể mới

+) Bào tử nang: (bào tử nội sinh)

+ Đây là hỡnh thức sinh sản chủ yếu của đa số nấm mốc bậc thấp

+ Ở đầu khuẩn ty sinh sản phỡnh to ra hỡnh thành nang bào tử (hỡnh tròn, hỡnh chai, phân

nhánh)

+ Trong đó nhân phân chia nhiều lần liên tiếp tạo một loạt nhân con

+ Nhân con đ-ợc NSC và màng bao bọc hỡnh thành bào tử nang

+ Nang bào tử chứa các bào tử

+ Khi nang vỡ, bào tử đ-ợc giải phóng, gặp điều kiên thuận lợi hỡnh thành cơ thể nấm mới

+) Bào tử đính(bào tử trần): (Bào tử ngoại sinh)

+ Đây là hỡnh thức sinh sản của nấm mốc bậc cao và một số nấm bậc thấp

+ Từ cơ chất mọc lên những khuẩn ty đặc biệt gọi là cuống sinh bào tử

+ Đầu cuống sinh bào tử phỡnh to hoặc phân nhánh tạo ra chồi ngắn nh- hỡnh cái chai

+ Từ các chồi này các bào tử đ-ợc sinh ra tuần tự liên tiếp, các bào tử đính mới sinh ra sẽ đẩy dần các bào tử cũ ra ngoài

+ Bào tử đính của từng loại nấm mốc có hỡnh dạng, màu sắc khác nhau: Ví dụ: Penicillinum bào tử

đính có màu xanh, hỡnh cầu

- Sinh sản hữu tính: Nấm mốc sinh sản hữu tính hỡnh thành các loại bào tử sau:

+) Bào tử noãn:

+ ở đỉnh các sợi nấm sinh sản sinh ra các noãn khí (cơ quan giao tử cái) trong đó chứa nhiều noãn cầu

+ Hùng khí (cơ quan giao tử đực) ở gần noãn khí

+ Noãn khí và hùng khí tiếp xúc, hùng khí sẽ thụ tinh cho các noãn cầu bằng nhân và một phần NSC của mi nh để tạo thành một bào tử noãn

+ Bào tử noãn đ-ợc bao bọc bởi một màng dày, sau một thời gian phân chia giảm nhiễm sẽ tạo ra

ba o tử đơn bụ i va pha t triờ n tha nh một khuẩn ty mới

+) Bào tử tiếp hợp:(zygospore)

+ Khi 2 khuẩn ty sinh sản khác giới tiếp giáp nhau, sẽ mọc ra 2 mấu lồi gọi là nguyên phối nang + Các mấu lồi tiến dần lại gặp nhau

+ Mỗi mấu lồi sẽ xuất hiện một vách ngăn tạo ra một tế bào đa nhân

+ 2 tế bào của 2 mẫu lồi sẽ tiếp hợp với nhau tạo thành một hợp tử đa nhân có màng dày bao bọc gọi là bào tử tiếp hợp

+ Sau một thời gian sống tiềm tàng, bào tử tiếp hợp sẽ pha t triờ n thành một nang trong chứa nhiều bào tử

+) Bào tử túi: (Ascospore)

+ Trên một khuẩn ty sinh ra 2 cơ quan sinh sản: Túi giao tử đực - hùng khí; Túi giao tử cái - thể sinh túi

Hùng khí và túi giao tử cái tiếp hợp hỡnh thành túi trong chứa bào tử

+ Ngoài ra còn có bào tử đảm hay gọi là bào tử ngoại sinh.Bào tử đảm sinh ra trên nh-ng cơ quan

đặc biệt gọi là quả đảm

4 Các dạng biến hoá của hệ sợi nấm

- Lúc bào tử nấm rơi vào một điều kiện môi tr-ờng thích hợp nó sẽ nảy mầm mọc ra theo cả ba chiều thành một hệ sợi nấm hay gọi là khuẩn ti thể

Hệ sợi nấm có thể biến hoá để thích nghi với các điều kiện sống khác nhau thành các dạng đặc biệt sau đây:

+) Rễ giả (rhizoid): Trụng gần giống nh- một chùm rễ phân nhánh, có tác dụng giúp nấm bám

chặt vào cơ chất và hấp thụ dinh dưỡngtừ cơ chất Có thể thấy rõ rễ giả khi quan sát nấm

Rhizopus

+) Sợi hút (haustoria): Gặp ở các nấm kí sinh bắt buộc Chúng đ-ợc mọc ra từ khuẩn ti và phân

nhánh rồi đâm sâu vào tế bào vật chủ, ở đó chúng có thể biến thành hỡnh cầu, hi nh ngón tay hay hỡnh sợi Chúng sử dụng các sợi hút này để hút chất dinh dưỡngtừ cơ thể của vật chủ

+) Sợi áp (appressoria): Gặp ở các nấm kí sinh ở thực vật Phần sợi nấm tiếp xúc với vật chủ sẽ

phồng to ra, tăng diện tiếp xúc với vật chủ Phần này th-ờng có hỡnh đĩa, có nhiều tế bào, áp chặt vào vật chủ Các mô của vật chủ d-ới tác dụng của enzim do nấm sinh ra sẽ bị phá huỷ từng phần hay hoàn toàn Qua mô bị phá huỷ này các sợi nấm sẽ lấn sâu vào bên trong vật chủ và tiếp tục sinh enzim để tiêu hoá cơ thể vật chủ Khác với sợi hút, sợi áp không phát triển thành các nhánh

đâm sâu vào tế bào còn sống của vật chủ

+) Sợi bò hay thân bò (stolon): Đó là đoạn sợi nấm khí sinh không phân nhánh, phát sinh từ các

sợi nám cơ chất, có hỡnh thẳng hoặc hỡnh cong Đầu mút của các sợi bò chạm vào cơ chất phát triển thành các rễ giả để bán chắc vào cơ chất.Sợi bò cứ lan dần ra mọi phía để cả trên thành thuỷ sinh của ống nghiệm, của nắp hộp Petri… Sợi bò và rễ giả th-ờng gặp ở bộ Mucorales

Sợi bũ (stolon)

+) Vòng nấm hay mạng nấm:

+ Đó là những biến đổi ở các loài nấm có khả năng bẫy các động vật nhỏ trong đất (nh- amíp, tuyến trùng)

+ Vòng nấm có thể có dạng bọng dính mọc ra từ những cuống ngắn xếp thẳng góc với sợi nấm chính

+ Đỉnh của các cuống này phỡnh to ra thành bọng hỡnh cầu

+ Bọng này tiết ra một chất dính trên khắp bề mặt Khi một con mồi chạm vào chất dính này sẽ bị

giữ chặt lại và mọc ra một nhánh đâm sâu xuyên qua vỏ ngoài của con vật

+ Các nhánh này lại phồng lên thành một bọng nhỏ bên trong cơ thể con vật và tiếp tục phân nhánh thành các sợi hút

+ Mạng nấm hay còn gọi là l-ới dính là một mạng sợi dính với nhau nh- tấm l-ới nhỏ Các côn trùng chạm vào sẽ bị giữ chặt lấy Sau đó một tế bào của mạng nấm sẽ phát triển thành một bọng nhỏ và các sợi hút để tiêu hoá dần cả cơ thể con mồi

- Từ khuẩn ti khí sinh có thể mọc ra những sợi sinh sản vô tính hoặc hữu tính sau đây:

+) Đầu bào tử trần (conidial head):

+ Các cơ quan sinh sản vô tính có thể có cấu tạo chứa các bào tử vô tính

+ ở nấm thuộc các chi Penicillium và Aspergillus có các đầu bào tử trần với nhiều sợi nấm phân hoá khác nhau Chẳng hạn ở chi Penicillium bắt đầu từ đoạn sợi ch-a phân nhánh gọi là cuống nấm rồi đến các sợi phân nhánh bậc hai gọi là cành nhánh

+ Phần sinh ra các bào tử trần gọi là thể Bỡnh Thể Bỡnh có thể có một lớp hoặc hai lớp

+ ở Aspergillus th-ờng chỉ có các cành nhánh mọc ra từ một bọng còn gọi là bào nang Các bào tử trần ở Aspergillus có thể toả tròn ra thành hỡnh phóng xạ, cũng có thể h-ớng cả về một phía tạo hỡnh trụ

+) Nang bào tử kín (sporangia):

+ Là dạng biến đổi ở bộ Mucorales, mọc ra từ cuống nang

+ Mỗi nang bào tử kín có một nang trụ nối tiếp với cuống nang và nằm bên trong của nang bào tử kín

+ Các bào tử kín đ-ợc sinh ra bên trong các nang này

+) Đảm (basidia):

+ Là cơ quan sinh sản hữu tính do tế bào song nhân ở đỉnh sợi phỡnh to ra mà tạo thành

+ Trong đảm hai nhân sẽ phối hợp với nhau để hỡnh thành một nhân lưỡngbội

+ Sau đó do phân cắt giảm nhiễm mà sinh ra 4 nhân đơn bội Khi đó trên đảm sẽ mọc ra 4 cuống nhỏ đầu phỡnh to ra

+ Các nhân đơn bội sẽ đi vào 4 cuống nhỏ này và về sau phát triển thành 4 bào tử

+) Túi giá (picmidium):

+ Là dạng hỡnh thái: Hỡnh cầu, Hỡnh chai

+ Vỏ cấu tạo bởi các lớp sợi nấm quấn chặt lại với nhau

+ Thành trong của vỏ mang các cuống bào tử trần

+ Các bào tử trần sinh ra từ đỉnh các cuống này

+) Cụm giá (sporodochium):

+ Cấu tạo bởi các cuống bào tử trần ngắn xếp liền với nhau tạo thành một khối khá dầy

+ Bào tử trần sinh ra trên đỉnh cuống, tạo thành một cái đệm gồm nhiều cuống dính với nhau một phần hoặc tất cả

+) Đỉa giá (acervulus):

+ Gặp ở các nấm kí sinh trên thực vật, nằm bên d-ới biểu bỡ hoặc tầng cutin

+ Đỉa giá gồm một đỉa phẳng cấu tạo bởi các sợi nấm quấn chặt lấy nhau trên đó có các cuồng bào

tử trần mọc thẳng đứng

+ Khi biểu bỡ của cây chủ vỡ ra, đĩa giá sẽ lộ ra bên ngoài

+ Bên cạnh các cuống bào tử trần còn thấy có các lông cứng

+) Bó giá (coremium; synnema):

+ Là nhiều cuống bào tử trần dài

+ Xếp song song với nhau ở phần gốc hoặc suốt dọc cuống

+ Mang các bào tử trần ở phần ngọn hoặc suốt dọc thân

+) Hạch nấm (slepotium):

+ Là một khối sợi nấm rắn chắc th-ờng có tiết diện tròn, không mang các cơ quan sinh sản

+ Chỉ có ở các nấm có sợi nấm ngăn vách Đó là một dạng sống nghỉ của nấm để bảo vệ nấm trải qua đ-ợc các điều kiện bất lợi của môi tr-ờng sống

+ Th-ờng có kích th-ớc từ 100m - 1mm

+ Th-ờng có cấu tạo 2 lớp:

Bên ngoài: là lớp vỏ rắn cấu tạo bởi nhu mô giả có thành dầy, phủ cutin và có sắc tố hạch nấm có màu vàng, nâu, tím đen…

Lớp trong: th-ờng mềm hơn, cấu tạo bởi mô các tế bào hỡnh thoi, gồm các sợi nấm Bỡnh th-ờng hoặc gelatin hoá, vô màu, chứa nhiều chất dự trữ thuộc loại hidrat cacbon và lipit

+) Thể đệm (stroma):

+ Còn gọi là đệm nấm, là một khối sợi nấm có thành tế bào dính liền nhau theo nhiều h-ớng Trên hoặc trong thể đệm có mang các cơ quan sinh sản

+ Thể đệm chỉ gặp ở: Nấm túi (Ascomycotina), Nấm đảm (Basidiomycotina)

+ Các tế bào trong đệm nấm ch-a tạo thành mô thật nh- ở động vật, thực vật mà chỉ là các mô giả

Có hai loại mô giả: Mô tế bào hỡnh thoi: có cấu tạo xốp, các sợi xốp song song với nhau và vẫn có thể phân biệt đ-ợc từng sợi riêng biệt Nhu mô giả: có các tế bào hỡnh đa giác hay hỡnh tròn dính chặt với nhau, không tách rời đ-ợc thành từng sợi

+) Quả túi (fruit bodes):

+ Là loại thể đệm gặp ở Nấm túi

+ Có các dạng quả túi: Hỡnh cầu (cleistothecium), Hỡnh chai (perithecium), Hỡnh đỉa (apothecium), Hỡnh cầu gặp ở lớp Plectomycetes, Hỡnh chai gặp ở lớp Pyrenomycetes, Hỡnh đĩa gặp ở lớp

Discomycetes

5 Hệ thống phân loại nấm

- Cho đến nay ch-a có hệ thống phân loại nấm nào đ-ợc tất cả các nhà nấm học thống nhất công nhận

- Tuy nhiên, hệ thống phân loại của G.C Ainsworth (1973) là đ-ợc sử dụng rộng rãi hơn cả

- Nấm phõn bố trờn toàn thế giới và phỏt triển ở nhiều dạng mụi trường sống khỏc nhau, kể cả ở sa mạc

- Đa phần nấm sống ở trờn cạn, nhưng một số loài lại chỉ tỡm thấy ở mụi trường nước

- Nấm và vi khuẩn là những sinh vật phõn huỷ chớnh cú vai trũ quan trọng đối với cỏc hệ sinh thỏi trờn cạn trờn toàn thế giới

- Da al (1975) liệt kờ 7 đặc tớnh để phõn loại nấm mốc nh sau:

+ Đặc điểm hỡnh thỏi

+ Ký chủ đặc thù

+ Đặc điểm sinh lý

+ Đặc điểm tế bào học và di truyền học

+ Đặc điểm kháng huyết thanh

+ Đặc tính sinh hóa chung

+ Ascomycetes ;+ Basidiomycetes;+ Deuteromycetes

- Gần đây, Kurashi (1985) nhấn mạnh đến tầm quan trọng của hệ thống ubiquinon trong phân loại nấm mốc cũng như ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử để khảo sát đa dạng di truyền và qua mối liên hệ di truyền phân loại lại cho chính xác hơn

6 Sinh th i : Dựa theo sự theo tỉ lệ giữa số loài nấm với số loài thực vật ở trong cùng một môi

trường, người ta ước tính giới Nấm có khoảng 1,5 triệu loài Khoảng 50.000 loài nấm đã được các nhà phân loại học phát hiện và miêu tả, tuy nhiên kích cỡ thực sự của tính đa dạng của giới Nấm vẫn còn là điều bí ẩn

- Đa phần nấm phát triển dưới dạng các sợi đa bào gọi là sợi nấm, cấu tạo nên thể sợi (hay khuẩn ty), trong khi những loài khác thìlại phát triển dưới dạng đơn bào

- Dù không dễ thấy, nhưng nấm lại có mặt ở tất cả các môi trường trên Trái Đất và đóng một vai trò rất quan trọng trong hệ sinh thái

- Cùng với vi khuẩn, nấm là sinh vật phân hủy chính ở hầu hết các hệ sinh thái trên cạn (và có thể dưới nước), bởi vậy nên chúng cũng có vai trò quan trọng các chu trình sinh địa hóa và ở nhiều lưới thức ăn

- Khi sống hoại sinh hay cộng sinh, chúng phân hủy những vật chất hữu cơ thành những phân tử

vô cơ, rồi sau đó những chất này sẽ được đồng hóa ở thực vật hay những sinh vật khác

a.Cộng sinh:

- NÊm có mối quan hệ cộng sinh với hầu hết tất cả các giới Quan hệ của chúng có thể hỗ trợ hoặc đối nghịch nhau, hay với những nấm hội sinh thìkhông đem lại bất cứ lợi ích hay tác hại rõ ràng nào đối với vật chủ

b Săn mồi:

- Một số loài nấm là những kẻ săn giun tròn Chúng có thể biến đổi sợi nấm để tạo thành những cấu trúc đặc biệt có chức năng bẫy giun tròn, nên được gọi với tên chung là nấm bẫy mồi Những bẫy thường thấy: mạng dính (lưới dính), bọng dính, vòng không thắt, cột dính, vòng thắt và bào tử dính

- Các loài nấm bắt mồi theo kiểu này thường thuộc các chi Arthrobotrys, Dactylaria, Dactylella và Trichothecium Có vài loài như Zoopage phanera thìlại tiết chất dính ra toàn bộ mặt ngoài sợi nấm

và cũng có khả năng bẫy mồi tương tự

7 Vai trò của nấm sợi

-Nấm đã được con người sử dụng để chế biến và bảo quản thức ăn một cách rộng rãi và lâu dài: + Sử dụng cho quá trình lên men để tạo ra rượu, bia và bánh m

+ Một số loài nấm khỏc được sử dụng để sản xuất x dầu , tương, nước chấm

- Nhiều loại nấm được sử dụng để sản xuất chất khỏng sinh, gồm cỏc khỏng sinh β-lactam như penicillin và cephalosporin

- Nấm rất tớch cực trong cạnh tranh về dinh dưỡng và khụng gian với những sinh vật khỏc

- Vớ dụ: nấm cú thể ngăn chặn sự tăng trưởng hay loại trừ kẻ thự nguy hiểm của thực vật và con người, như kiến đục gỗ, mối, chõu chấu, muỗi, ve bột, cỏ dại, giun trũn hay nấm khỏc mà cú thể gõy hại cho mựa màng và nhà cửa

- Khả năng điều khiển sinh học cỏc loài gõy hại cho nụng nghiệp của nấm đó được quan tõm và ứng dụng thực tế:

+ Loài nấm kớ sinh cụn trựng đó được sử dụng làm thuốc trừ sõu sinh học vỡ khả năng kớ sinh và tiờu diệt cụn trựng của chỳng

+ Cú ớt nhất 14 loại nấm cú khả năng chống rệp

+ Loài nấm thuộc chi Trichoderma cũng cú khả năng ngăn chặn những loài nấm gõy bệnh cho cõy + Cỏc nấm hiển vi trong đất cũn cú thể phõn giải cỏc chất hữu cơ thành chất vụ cơ

8 T c hại của nấm sợi

- Mặc dự cú rất nhiều lợi ớch, nhưng nấm cũng cú khụng ớt tỏc hại Ngoài mầm bệnh và chất độc, nấm cũn cú thể là những kẻ phỏ hoại ghờ gớm

- Dưới điều kiện độ ẩm thớch hợp, nấm mốc sẽ phỏt triển và sinh sụi trong cỏc căn nhà Chỳng tiết

ra cỏc enzym và acid để phõn huỷ cỏc chất hữu cơ, do đú nờn chỳng cú thể phỏ hoại ỏo quần,

- Cú ba dạng nấm làm mục gỗ chớnh: dựa theo đặc điểm của gỗ bị mục

+ Mục khụ (dry rot),

+ Nấm mốc làm hỏng chố, cao su, bụng…

+ Nấm kớ sinh gõy bệnh hắc lào, lang ben

+ Nấm độc gõy ngộ độc, rối loạn tiờu húa

+ Mốc che phủ và thối rữa quả đào sau 6 ngày

+ Nhiều nấm sợi ký sinh trên ng-ời, trên động vật, thực vật và gây ra các bệnh nấm khá nguy hiểm Nhiều nấm sợi sinh ra các độc tố nấm có thể gây ra bệnh ung th- và nhiều bệnh khác

V Nuôi cấy nấm

- Nuôi cấy nấm là một khâu hết sức cần thiết nh-ng tiến hành phức tạp

- Để nuôi cấy nấm kết quả, cần chuẩn bị môi tr-ờng, làm tốt thủ thuật nuôi cấy

- Riêng đối với một số giống nấm y học và thú y học, có khi cần những kỹ thuật riêng biệt

1 Môi tr-ờng nuôi cấy nấm

Cỏc loại mụi trường: Cú thể phõn loa i MT nuụi cấy nấm dựa trờn cơ sở sau;

- Dựa vào mục đích, có môi tr-ờng phân lập và môi tr-ờng định loại nấm

- Dựa vào cơ chất , có môi tr-ờng tự nhiên và môi tr-ờng nhân tạo

+ Môi tr-ờng tự nhiên là MT chứa cơ chõ t nguyên thể nh- khoai tây, cà rốt

+ Môi tr-ờng nhân tạo do con người phối chế nhiều thành phần hoá chất khác nhau

- Dựa vào thành phần dinh dưỡng có môi tr-ờng giàu và môi tr-ờng nghèo

- Để bảo quản nấm cần phải sử dụng môi tr-ờng bảo quản

a Môi tr-ờng phân lập nấm

- Từ những bệnh phẩm tr-ớc tiên phải phân lập đ-ợc nấm

- Th-ờng môi tr-ờng Sabouraud có glucoza, Sabouraud có maltoza

- Khi cần bảo quản, dùng môi tr-ờng Sabouraud bảo quản

* Môi tr-ờng Sabouraud có glucoza: Thành phần:

* Môi tr-ờng Sabouraud để bảo quản

Muốn bảo quản đ-ợc các khuẩn lạc nấm trong một thời gian t-ơng đối dài, cần chuẩn bị môi

tr-ờng bảo quản không có đ-ờng

- N-ớc cất 1000ml

- Thạch sợi 20g

b Môi tr-ờng để định loại nấm

- Những môi tr-ờng để phân lập nấm đôi khi cũng đủ để tiến hành định loại nấm Nh-ng có nhiều tr-ờng hợp, trong môi tr-ờng phân lập nấm ch-a phát triển tối đa về hỡnh thể, vỡ vậy cần tới những môi tr-ờng định loại

- Trong môi tr-ờng định loại thích hợp, khuẩn lạc nấm phát triển đầy đủ, bộc lộ những đặc tính giúp cho việc định loại đ-ợc dễ dàng

- Có những lúc môi tr-ờng tự nhiên và môi tr-ờng nhân tạo được dùng để định loại

- Môi tr-ờng tự nhiên dùng trong định loại: Các môi tr-ờng tự nhiên dùng trong định loại có 8 loại:

b.1 Môi tr-ờng n-ớc carôt và khoai tây

b.2 Mụi tr ờng bột ngũ cốc

b.3 Môi tr-ờng nuôi chiết nấm

- Dùng cuống nấm rơm, rạ rửa sạch để ráo rồi nghiền, thêm n-ớc sinh lý 0,9% L-ợng n-ớc sinh lý phải gấp đôi trọng l-ợng của nấm Lọc qua vải hoặc qua giấy lọc Hấp tyndall( hõ p 1000c/h) Tr-ớc

khi hấp thêm thạch 2%

b.4 Môi tr-ờng n-ớc chiết malt

- Ngâm tiểu mạch cho mọc mầm, sau đó để khô ở tủ ấm 300C rồi nghiền ở 3 cối Cứ 200g tiểu mạch thêm 1 lít nuớc và đun nóng dần lên 600C Khi nhiệt độ đã đạt 600C tiếp tục đun giữ vững nhiệt độ 600C, rồi vừa đun vừa khuấy Sau đó thêm 3g Houblon, đun sôi 1 giờ rồi lọc Nên định l-ợng maltoza bằng r-ợu Fehling và sau đó thêm n-ớc để có tỷ lệ maltoza là 3% Cuối cùng hấp tiệt trùng 1200C

- Môi tr-ờng n-ớc chiết malt có thể dùng d-ới dạng lỏng hoặc d-ới dạng đặc (thêm thạch hoặc gelatin)

2 Thủ thuật nuôi cấy nấm: tiến hành theo 3 b-ớc: - Định h-ớng nuôi cấy nấm

- Nuôi cấy nấm

- Thuần khiết khuẩn lạc nấm

a Định h-ớng nuôi cấy nấm

+ Trong y học, thu y ho c khác với điều tra nấm ở ngoài thiên nhiên, cần phải có định h-ớng nuôi cấy Diễn biến lâm sàng, bệnh phẩm lấy đ-ợc là những điều kiện giúp cho định h-ớng nuôi cấy Đồng thời sau những kết quả phân lập đầu tiên, hỡnh dạng nấm cũng là những gợi ý cho định h-ớng nuôi cấy nấm tiếp tục

+ Việc định h-ớng nuôi cấy nấm rất quan trọng vỡ sẽ quyết định thủ thuật nuôi cấy, xác định loại môi tr-ờng cần thiết ấn định quy tắc theo dõi

b Nuôi cấy nấm

+) Có nhiều thủ thuật nuôi cấy khác nhau:

+ Nuôi cấy nấm trên thạch nghiêng

++ Hầu nh- mọi loại nấm đều cần nuôi cấy trên thạch nghiêng để phân lập, định loại, giữ giống ++ Th-ờng dùng 2 loại ống nghiệm 18 x 180mm và 30 x 180mm

+ Nuôi cấy nấm ở môi tr-ờng lỏng

Thủ thuật nuôi cấy nấm ở môi tr-ờng lỏng cũng giống khi cấy nấm trên thạch nghiêng Cần chú ý khi hơ nóng không làm nóng môi tr-ờng

+ Nuôi cấy nấm trên đĩa thạch

++ Trong ống nghiệm nuôi cấy khó thấy đ-ợc chi tiết hỡnh thỏi của khuẩn lạc Để có những khuẩn lạc lớn thỡcần nuôi cấy nấm trên đĩa thạch

++ Một ph-ơng thức khác cũng đem lại kết quả t-ơng tự là nuôi cấy trong chai bẹp Roux

++ Nuôi cấy nấm trên đĩa thạch còn có -u điểm là tạo điều kiện để dễ quan sát ở phần rỡa cũng nh- phần đáy của khuẩn lạc

+ Nuôi cấy nấm trên phiến kính

++ Nuôi cấy nấm trên phiến kính chỉ cần một số rất ít môi tr-ờng

++ Ph-ơng pháp nuôi cấy nầy cũng nh- các ph-ơng pháp nuôi cấy trên diện tích nhỏ giúp cho dễ theo dõi hỡnh thái của nấm nhất là đối với những nấm mỏng manh, dễ gẫy

c Thuần khiết khuẩn lạc nấm

+) Thông th-ờng khi khuẩn lạc đã mọc có những nấm tạp nhiễm, vi khuẩn cũng mọc ở môi tr-ờng

vỡ vậy phải thuần khiết khuẩn lạc nấm mới tiên hành định loại hoặc nghiên cứu đ-ợc

+) Muốn thuần khiết khuẩn lạc nấm, phải tiến hành 6 biện pháp:

+ Ngăn cản sự phát triển của vi khuẩn

+ Tách rời khuẩn lạc nấm với những khuẩn lạc tạp nhiễm

+ Pha loãng các khuẩn lạc công sinh để có thể có khuẩn lạc nấm mọc riêng rẽ

+ Dùng yếu tố nhiệt độ thích hợp để tách khuẩn lạc

+ Cấy truyền

+ Ngăn cản sự phát triển của nấm và vi khuẩn tạp nhiễm khi lấy bệnh phẩm và khi nuôi cấy

*) Những bệnh phẩm nấm th-ờng rất dễ tạp nhiễm do ở những th-ơng tổn nấm có những hiện

t-ợng cụ ng sinh với những vi sinh vật khác; hơn nữa phòng thí nghiệm nấm, tủ cấy nấm, sau một quá trỡnh sử dụng rất dễ tạp nhiễm Vỡ vậy hầu nh- bất kỳ tr-ờng hợp nuôi cấy nấm nào cũng cần

đ-ợc thuần thiết

- Ngăn cản sự phát triển của vi khuẩn trong môi tr-ờng cấy nấm: Những kháng sinh thông

dụng hiện nay nh- Penixilin, Tetraxyclin…có tác dụng ngăn cản sự phát triển của nhiều loại vi

khuẩn nh-ng không có tác dụng ngăn cản sự phát triển của nấm

- Tách riêng rẽ những khuẩn lạc khi cấy

+ Kết quả định loại, nghiên cứu th-ờng gặp khó khăn do môi tr-ờng nuôi cấy có nhiều khuẩn lạc vi sinh vật cùng mọc gần nhau, không nhận định đ-ợc từng khuẩn lạc riêng rẽ Có khi từ một bệnh phẩm có cả những giống và loại nấm khác nhau cùng mọc gần nhau

+ Những khuẩn lạc mọc gần nhau có thể ức chế nhau và nhất là có những khuẩn lạc -u thế có thể làm tàn lụi một khuẩn lạc khác Do đặc điểm này, khi cấy nấm phải tiến hành cấy rời rạc nhau, xa nhau Cũng không nên cấy một l-ợng nhiều bệnh phẩm mà chỉ nên cấy 1 l-ợng bệnh phẩm rất nhỏ + Từ thủ thuật tiến hành nh- vậy sẽ có những khuẩn lạc t-ơng đối thuần khiết ngay từ lần cấy đầu tiên

- Pha loãng nấm

+ Cách thức pha loãng nấm được tiến hành theo những cách thức cổ điển dựng để pha loãng vi khuẩn

+ Cách pha loãng thông dụng là đổ môi tr-ờng có khuẩn lạc đã mọc vào môi tr-ờng thạch đun lỏng

có nhiệt độ khoảng 40oC, sau đó đổ thạch vào những hộp lồng petri Khi lấy khuẩn lạc, dùng dao

mổ hoặc ngòi bút chủng đậu khoét riêng rẽ từng khoảng thạch có khuẩn lạc mọc để cấy truyền theo dõi

- Dùng yếu tố nhiệt độ để thuõ n khiết nấm

+) Do đặc điểm sinh thái, giống và loại nấm có những yêu cầu nhiệt độ khác nhau

+ Nếu có điều kiện dựng thờm tủ ấm > 37oC

Tiến hành nh- vậy từ một lần cấy thuần nhất có thể có những khuẩn lạc khác nhau, phát triển khác nhau

- Cấy truyền nấm để thuần khiết

+ Từ một bệnh phẩm qua lần đầu nuôi cấy rất dễ có nhiều loại khuẩn lạc Ph-ơng pháp cấy truyền rất cần thiết để dần dần có khuẩn lạc nấm cần thiết

+ Khi cấy truyền phải chú ý cấy truyền đúng thời gian không để nấm đã có những biến dị và biến dạng

+ Số lần phải truyền thay đổi tuỳ theo từng tr-ờng hợp

+ Nói chung phải cấy truyền cho tới lúc có những khuẩn lạc thuần khiết

- Chống tạp nhiễm từ khâu lấy bệnh phẩm và khi nuôi cấy trong phòng thí nghiệm

+ Khi lấy bệnh phẩm, phải chú ý tuân thủ những nguyên tắc tiệt khuẩn đ-ợc chỉ dẫn Làm nh- vậy

sẽ giảm đ-ợc nhiều khuẩn lạc cộng sinh của vi khuẩn

+ Phòng thí nghiệm nuôi cấy nấm là nơi tiếp thu rất nhiều nấm bệnh khác nhau, th-ờng có rất nhiều những bào tử nấm Vỡ vậy phải tiệt trựng phòng th-ờng kỳ bằng tia cực tím Các phiến kính ống nghiệm, que cấy sau khi sử dụng cần tiệt trựng triệt để Đối với ng-ời tiến hành nuôi cấy, quần

áo mặc chú ý thực hiện vô trựng đến mức cao nhất có thể đ-ợc

3 Quan sát đại thể những khuẩn lạc nấm

- Trong quá trỡnh nuôi cấy, khuẩn lạc nấm đ-ợc theo dõi hàng ngày nhằm quan sát sự phát triển về

đại thể, việc quan sát có nhiều khâu:

+ Tốc độ phát triển của khuẩn lạc

+ Hỡnh dạng của khuẩn lạc

+ Cấu tạo của mặt khuẩn lạc

+ Tâm của khuẩn lạc

+ Rỡa của khuẩn lạc

+ Cấu tạo của mặt khuẩn lạc

- Tốc độ phát triển của khuẩn lạc

+ Tốc độ phát triển của khuẩn lạc có liên quan đế việc định loại nấm Có những loại khuẩn lạc mọc sớm, cú loại mọc muộn

+ Sau khi đã mọc, tốt độ phát triển tiếp tục nhanh hay chậm cũng thay đổi tuỳ theo sinh thái từng loại nấm

+ Vỡ vậy quan sát đại thể phải chú ý cả 2 mặt:

Thời gian xuất hiện khuẩn lạc

Tốc độ phát triển tiếp tục

đặn, có những khuẩn lạc mọc phẳng và có thể có những khuẩn lạc có sùi

- Cấu tạo bề mặt của khuẩn lạc

+ Tuỳ theo từng loại nấm, mặt khuẩn lạc có thể có những vết nhăn hỡnh cuộn xoắn, có thể có những đ-ờng tia có thể xếp theo dạng tia Cũng có những loại nấm bề mặt có rãnh

+Tuỳ theo giai đoạn phát triển, khuẩn lạc có thể tạo thành những quầng

- Rỡa của khuẩn lạc

+Hỡnh thái rỡa của khuẩn lạc khác nhau tuỳ loại:

++ Có những khuẩn lạc có rỡa nham nhở không đều đặn;

++ Có những khuẩn lạc có rỡa dài, có loại có rỡa mỏng

- Màu sắc của khuẩn lạc

- Màu sắc của khuẩn lạc có thể thay đổi tuỳ theo giai đoạn phát triển: lúc đầu co khoảng trắng khoảng nâu xen kẽ , có thể vu ng giữa màu trắng, vùng rỡa màu xám…Có thể lúc đầu khuẩn lạc có màu trắng, sau chuyển sang màu nâu, cuối cùng chuyển sang màu đen

- Đáy của khuẩn lạc cũng có thể có những màu khác nhau Khi quan sát khuẩn lạc đại thể, cần chú

ý đặt sắp ống nghiệm hoặc hộp lồng nuôi cấy để quan sát màu sắc của đáy khuẩn lạc

- việc quan sát đại thể khuẩn lạc là một khâu hết sức quan trọng của định loại và nghiên cứu về nấm

Quá trỡnh quan sát phải tiến hành th-ờng xuyên, có ghi chép, có đối chiếu với những đặc điểm

định dạng của nấm

4 Gây nhiễm thực nghiệm nấm trên súc vật

- Nhằm mục đích nghiên cứu hoặc chẩn đoán, nhiều khi cần phải gây nhiễm nấm trên súc vật

- Muốn gây nhiễm thực nghiệm nấm đ-ợc tốt phải chọn lọc súc vật nhiễm, chọn lọc đ-ờng gây nhiễm, phải có mầm bệnh nấm gây nhiễm thích hợp và cuối cùng phải đọc kết quả chính xác

a Súc vật gây nhiễm

- Những súc vật gây nhiễm th-ờng dùng là chuột lang, chuột nhắt trắng, chuột cống trắng, thỏ

- Những súc vật gây nhiễm phải không có bệnh, đ-ợc nuôi dưỡngtốt để khỏi gây nhầm lẫn kết quả

và sống đ-ợc dài ngày đáp ứng cho yêu cầu thực nghiệm

b Đ-ờng gây nhiễm

- Có nhiều đ-ờng có thể gây nhiễm:

- Thông th-ờng dùng đ-ờng tiêm d-ới da và đ-ờng tiêm vào phúc mạc

- Đ-ờng tiêm tĩnh mạch th-ờng ít dùng vỡ dễ gây những phản ứng sai lệch

- Đ-ờng gây nhiễm nên t-ơng tự nh- thực tế lâm sàng

Vớ dụ:

+ Gây th-ơng tích, sây xát tr-ớc khi gây nhiễm Nếu là gây nhiễm bằng hít bụi nấm hoặc đ-ờng phế quản

+ Đối với nấm gây bệnh ở da, ph-ơng pháp nhiễm tốt nhất là cho da tiếp xúc trực tiếp với nấm

- Tuỳ theo ph-ơng pháp cụ thể, tiến hành tiêm truyền và gây nhiễm sẽ khác nhau

b.1 Tiêm nội bỡ (trong da)

- Th-ờng dùng để thử các phản ứng kháng nguyên của nấm

- Khi tiêm nội bỡ, nên chọn con vật lụng trắng nếu không thỡphải bôi thuốc rụng lông tr-ớc một hôm để có thể quan sát rõ nốt mần kháng nguyên

- Tiêm trong da với súc vật khó hơn đối với ng-ời vỡ da súc vật rất mỏng Khi tiêm phải tạo thành nốt phồng nếu không là đã tiêm vào d-ới da

- Khi rút kim ra thỡphải lấy bông có thấm r-ợu 900 để ngay lên nốt tiêm cho hỗn dịch tiờm khỏi chảy ra theo

pháp, nếu không thấy lồi tức là đã tiêm vào ổ bụng, cần phải rút kim ra tiêm lại Sau khi tiêm cũng lấy bông tẩm r-ợu để vào nốt tiêm cho chất nấm khỏi chảy ra

b.3 Tiêm bắp thịt

Th-ờng tiêm vào bắp thịt đùi chân sau, bắp thịt ở thành bụng hoặc phía bên thành vùng x-ơng ức

b.4 Tiêm tĩnh mạch

Tuỳ theo loại sinh vật thí nghiệm mà chọn vị trí tĩnh mạch tốt nhất

b.5 Gây nhiễm thực nghiệm với nấm da

- Tr-ớc hết phải nhổ hết lông hoặc dùng thuốc bôi rụng lông để bộc lộ vùng da cần gây nhiễm

- Sau đó dùng kim chủng đậu hoặc đinh ghim rạch lên da nhiều vết nh-ng không đ-ợc làm chảy máu

- Lấy bào tử nấm trộn lẫn với mật ong rồi bôi lên vùng da gây nhiễm của con vật

- Khi đã xuất hiện tổn th-ơng thỡhàng ngày cạo lấy vẩy xét nghiệm tỡm nấm hoặc tiến hành nuôi cấy

b.6 Gây nhiễm nấm ở niêm mạc

- Th-ờng tiến hành với nấm Candida albicans

- Lấy nấm men hoà vào trong n-ớc muối sinh lý vô trùng rồi bơm vào mồm con vật hoặc dùng xông nhỏ cho vào dạ dày rồi bơm bệnh phẩm vào

c Bệnh phẩm gây nhiễm

- Bệnh phẩm gây nhiễm nếu có thể đ-ợc nên dùng bệnh phẩm lấy trực tiếp từ th-ơng tổn nấm

- Nếu là mủ, có thể dùng 0,1-0,5ml để gây nhiễm

- Nếu là miếng sinh thiết, nên dùng những miếng mỏng d-ới 1mm và gây nhiễm bằng kim thông Trocart

- Tuy nhiên cũng có lúc phải gây nhiễm bằng nấm có ở môi tr-ờng nuôi cấy; trong những tr-ờng hợp này cần lấy nấm ở những khuẩn lạc đã phát triển đầy đủ với mọi hỡnh thể có đ-ợc

d Nhận định kết quả gây nhiễm

- Thông th-ờng những kết quả gây nhiễm có thể nhận định khoảng 15 - 30 ngày sau gây nhiễm Tuy nhiên, có tr-ờng hợp bệnh phát muộn, vỡ vậy không nên sớm vứt bỏ những súc vật gây nhiễm ch-a thấy phát bệnh sau 30 ngày

- Kết quả về nấm da gây bệnh th-ờng dễ nhận định căn cứ vào những th-ơng tổn ở da Nh-ng đối với những nấm gây bệnh nội tạng việc nhận định kết quả nhiều khi rất khó khăn

- Kết quả gõy nhiễm thực nghiệm cần đ-ợc khẳng định thêm bằng cách nuôi cấy phục hồi nấm, xét nghiệm cơ thể bệnh học, làm các phản ứng miễn dịch

CHƯƠNG II: PHếNG VÀ CHỮA CÁC BỆNH DO NẤM

- Nấm cú 4 ph ng thức gõ bệnh:

- Ký sinh gõy bệnh

- Gõy bệnh với cỏc hiện tượng dị ứng

- Gõy bệnh do ăn phải thức ăn nhiễm nấm

- Gõy bệnh do ăn phải nấm độc

- Với phạm vi y học và thỳ y học, chỉ đề cập tới việc phũng và chữa cỏc bệnh do nấm ký sinh

A PHếNG CÁC BỆNH DO NẤM

- Việc phũng c c bệnh do nấm bao gồm 3 nhúm biện ph p:

- Thực hiện vệ sinh đề phũng nấm xõm nhập cơ thể;

- Ngăn ngừa nhiễm nấm do lõy lan;

- Chủ động phòng bệnh bằng cách điều trị những cơ thể đã mắc bệnh nấm

I Thực hiện vệ sinh đề phòng nấm âm nhập c thể

- Theo đặc điểmsinh học, nấm không cần ánh sáng vì thế, nấm có thể mọc bất kỳ nơi nào

- Tuy nhiên, để phát triển, nấm ký sinh vẫn cần một số điều kiện như nhiệt độ, độ ẩm, thức ăn

- Thực hiện tốt nhưng điều kiện vệ sinh như giữ vệ sinh da, vệ sinh ăn uống là thực tế ngăn ngừa

sự xâm nhập và phát triển của nấm trên cơ thể

- Thực hiện vệ sinh còn nhằm tăng cường sức đề kháng và ngăn ngừa hiện tượng nấm chuyển từ trạng thái không gây bệnh sang trạng thái gây bệnh

- Một số nấm men như Candida albicans có thể sống cộng sinh ở đường tiêu hoá của người, súc vật mà không gây bệnh nhưng nếu ruột bị viêm nhiễm hoặc có một sự đảo lộn của khuẩn hệ ở ruột hoặc cơ thể suy giảm sức đề kháng, Candida albicans sẽ chuyển sang trạng thái gây bệnh

- Một điều kiện khác khi nấm có mật độ cao ở môi trường sống chúng sẽ dễ xâm nhập.Vì thế, nếu nhà ở,chuồng trại vật dụng sạch sẽ thìmật độ nấm ở môi trường sống sẽ giảm đi và sự xâm nhập vào cơ thể sẽ giảm Do đó ngoài việc ăn sạch, uống sạch, việc ở sạch cũng là một yêu cầu của phòng bệnh nấm

- Rất nhiều loại nấm được dự trữ trên súc vật do đó cũng có thể coi bệnh nấm là một bệnh có nguồn dịch tự nhiên (Chmel) Tránh sự tiếp xúc mất vệ sinh giữa người và súc vật

II Ngăn ngừa nhiễm nấm do gâ lan

- Bất kỳ loài nấm gây bệnh nào cũng lây lan với phương thưc thích hợp Vì vậy cần khống chế bằng cách không để nấm lây lan từ cơ thể mắc bệnh sang cơ thể chưa mắc bệnh

- Việc cách ly những cơ thể mắc bệnh nấm, việc tiệt khuẩn ở những vật dụng chăn nuôi cần được tiến hành theo những quy định chung của bệnh truyền nhiễm

- Cần chú ý phát hiện những súc vật mang trùng , xử lý triệt để các chất thải của cơ thể bệnh

III Chủ động phòng bệnh b ng c ch điều tr những động vật mắc nấm

Những động vật mắc nấm là vật chủ dự trữ mầm bệnh Phát hiện động vật mắc bệnh nấm, điều trị kịp thời và triệt để bệnh là một biện pháp chủ động ngăn ngừa sự phát triển của bệnh nấm

B ĐIỀU TRỊ BỆNH DO NẤM

I NGUYÊN TẮC ĐIỀU TRỊ BỆNH NẤM

Nguyên tắc điều trị bệnh nấm cần dựa trên các đặc điểm sinh học của nấm để khống chế nấm phát triển, cần kết hợp việc chữa với việc phòng bệnh, cần sử dụng tốt các thuốc và hoá chất chống nấm

1 Ngăn ngừa sự ph t triển của nấm

- Nấm muốn phát triển tại nơi ký sinh cần một số điều kiện sống thích hợp:

+ Điều kiện môi trường

+ Điều kiện trụ bám

+ Điều kiện sinh sản

- Để chữa bệnh nấm cần phá được các điều kiện sống trên

1.1 Tha đổi điều kiện của môi tr ờng n i nấm ký sinh

- Một số nấm muốn phát triển, cần một số điều kiện hằng định của môi trường

- Nấm gây bệnh ở miệng và họng cần môi trường toan và nhiều đường dễ gặp ở những động vật đang trong lứa tuổi bú sữa Gây điều kiện kiềm hoá môi trường miệng bằng các loại kiềm nhẹ như nước vôi loãng, natribicacbonat,… sẽ chữa được bệnh

- Làm rụng bằng tia X

- Làm rụng bằng thalium axetat

1.3 Ngăn ngừa t i sinh sản của nấm

- Bào tử nấm là thành phần sinh sản của nấm Nấm có thể tồn tại kéo dài dưới dạng bào tử và khi

đó có thể gây bệnh với mức độ không đáng kể

- Chữa nấm thật triệt để, diệt các bào tử là biện pháp khống chế tái sinh sản của nấm và ngăn ngừa bệnh nấm phát triển trở lại khi có điều kiện thích hợp

2 Kết hợp chữa bệnh với phòng bệnh

Kết hợp phòng và chữa bệnh là một nguyên tắc chung của ngành y tế và cũng cần ứng dụng trong việc chữa bệnh nấm, phòng các bệnh viêm nhiễm kết hợp là một nguyên tắc cần thiết trong chữa nấm

3 Sử dụng c c thuốc v ho chất chống nấm

- Các hoá chất chống nấm gồm rất nhiều loại Đa số các hoá chất chống nấm đều có thể gây hại đối với da nếu sử dụng với nồng độ cao thí dụ iốt, kali-iodua, axit phenic nên cần chú ý sử dụng theo đúng liều lượng quy định

- Hiện nay có nhiều các loại thuốc chống nấm nhưng cần sử dụng theo đúng liều lượng và phác đồ quy định để bảo đảm điều trị kết quả

- Nếu thấy nấm có hiện tượng kháng, không nhạy cảm với thuốc điều trị, phải kịp thời thay đổi thuốc

- Một số thuốc chống nấm có thể có phản ứng phụ, phải đ nh chỉ thuốc hoặc xử trí những phản ứng phụ tuỳ theo trường hợp

- Một số thuốc chống nấm ( kháng sinh ) có hoạt phổ rộng, nhưng nhiều loại có tính đặc hiệu cao, vì vậy việc chẩn đoán đúng bệnh, xác định loại nấm ký sinh gây bệnh để lựa chọn thuốc điều trị phù hợp là cần thiết

II - ĐIỀU TRỊ BỆNH II.A - ĐIỀU TRỊ BỆNH NẤM DA

- Bệnh nấm da có thể gây ra bởi rất nhiều những giống nấm khác nhau Thường là những giống Achorion, Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton

- Để điều trị hiệu quả, cần chú ý một số nguyên tắc riêng của điều trị nấm da và sử dụng tốt những loại thuốc chữa

1 Ngu ên tắc riêng của điều tr nấm da

- Những nguyên tắc riêng của điều trị nấm da xuất phát từ những đặc điểm ký sinh của nấm gây bệnh ở da

- Nấm gâ bệnh ở da có 4 đặc điểm:

a) Da là một bề mặt liên tục, nấm ký sinh ở da có những điều kiện khuếch tán và lan toả dễ dàng

Một số bệnh nấm da thường gây ngứa, tạo vẩy bong nên thương tổn dễ lan rộng do gãi,tiếp xúc

với vùng da khác, hoặc vẩy nấm được gieo rắc Do đặc điểm này, điều trị nấm da phải điều trị sớm

ngay sau khi phát hiện được bệnh Trong quá trình chữa bệnh phải hết sức chú ý vệ sinh, hạn chế

gãi ngứa, nếu cần phải băng kín vùng bị nấm lại

b) Đa số nấm da thường ký sinh ở ngoại bì nhưng cũng có một số nấm da có khả năng ăn sâu

xuống dưới da

Hơn nữa dù nấm da ký sinh ở ngoại bì, nấm cũng thường ở dưới lớp vẩy

Vì vậy những thuốc điều trị cần có tính ngấm tới lớp có nấm

c) Đa số nấm da ký sinh ở ngoại bì và ở lớp tế bào sừng, sử dụng thuốc có thể gây tổn thương lớp

tế bàonày Vì vậy cần hạn chế thương tổn bằng cách chữa sớm, không dùng thuốc làm cháy hoặc

phá huỷ lớp tế bào sừng Mà phải dùng những loại thuốc giúp cho da khôi phục được những

thương tổn đã có Một số nấm da có đặc tính phân giải được tế bào sừng nên lại càng cần phải chú

ý

d) Bệnh nấm da thường khó chữa, tiến triển dai d ng, vì vậy chữa bệnh phải kiên trì dù quá trình

điều trị kéo dài

- Hiện nay, có nhiều loại thuốc kháng sinh kháng nấm có khả năng điều trị bệnh nấm da Nhưng

nếu không thật cần thiết thìcần hạn chế sử dụng u tiên sử dụng những dung dịch và hoá chất

dùng ngoài da dù đạt kết quả chậm hơn so với phương pháp dùng kháng sinh Sở d như vậy vì

những kháng sinh kháng nấm thường có độc tính nhất định với cơ thể, kháng sinh kháng nấm dùng

kéo dài dễ tạo điều kiện kháng thuốc

2 C c thuốc v biện ph p chữa bệnh nấm da

- Có rất nhiều loại thuốc điều trị nấm da Có loại dùng dạng bôi tại chỗ, đắp gạc hoặc có băng giữ

Gần đây có một số thuốc dùng uống nhưng phải rất thận trọng, nếu không cần thiết không nên

dùng

- Các loại thuốc bôi ở thương tổn thường có 3 cơ chế tác dụng sau:

+ Làm mát da, ngăn cản hiện tượng viêm da

+ Thay đổi vi tuần hoàn ở da làm co hoặc giãn mạch tạo điều kiện cho thuốc ngấm được sâu,

ngấm được dễ và nhanh

+ Diệt nấm do tiếp xúc trực tiếp với những bộ phận dinh dưỡng và sinh sản của nấm

- Đối với những loại thuốc uống, do thuốc ngấm vào máu, khuếch tán đến lớp thượng bì bị

nhiễm nấm và có tác dụng đến nấm gây bệnh

- Thuốc bôi chữa nấm da có nhiều nhưng dưới đây là một số thuốc thông dụng

2-cloro-4-nitrophenolum (Biệt dược của Tiệp Khắp là Nitrofungin)

2-cloro-4-nitrophenolum, được pha chế thành thuốc bôi theo công thức sau: + 2 cloro – 4

nitrophenolum 1g

+ Triaxetylen glucolum 10g + Spiritis 50% 100ml

- Tổn thương của nấm có nhiều vị trí nhưng chủ yếu là ở những nơi da mỏng như bụng bẹn và ở

bộ phận sinh dục nấm gây bệnh chủ yếu là Trichophytonvà Apidermophyton

- Về cách chữa: cho đắp hoặc ngâm vùng da có nấm trong dung dịch nước muối sinh lý 30 phút

Sau đó bôi Nitrofunginvào vùng thương tổn, ngày 2 lần

a) Axit boric

- Thường dùng Axit boric 4% để chữa các bệnh nấm da vì dung dịch này có tác dụng làm bong vẩy mạnh, tiệt khuẩn ở nơi thương tổn, làm ráo nước ở nơi bị nấm ký sinh Khi bôi thường nên xát mạnh, bôi liên tục cho đến khi thấy trên da có xuất hiện những tinh thể axit Bôi hàng ngày 2 -3 lần và bôi liên tục trong 7 -10 ngày

- Axit boric có tác dụng tốt trong điều trị một số nấm da thể nhẹ

b) Sunfua canxi

- Sunfua canxi có thể điều chế đơn giản theo công thức sau: + Vôi tôi 14g

+ Lưu huỳnh 35g + Nước vôi 150g

- Tôi vôi vào nước rồi thêm lưu huỳnh để sôi hoặc đun sôi

- Sunfua canxi có tác dụng tốt đối với một số nấm gây bệnh dai d ng nhưng khi dùng phải chú ý

e) Axit benzoic

- Cũng như axit salixylic, axit benzoic cũng dùng để chữa nấm và thường được dùng hỗn hợp với một số thuốc chữa nấm khác theo công thức sau: + Axit benzoic 10g

+ Axit salixylic 10g + Resorcin 10g

+ Mỡ cừu 35g + Vaselin 35g

- Axit benzoic thường dùng với các loại nấm kẽ ở bàn chân

+ Glyxerin 100g

- u điểm của dung dịch ATS là có tác dụng diệt nấm nhưng không làm hại da

h) Iốt v kali iodua

- Iốt và kali iodua là những thuốc chữa nấm đã dùng từ rất lâu và có tác dụng đối với nhiều loại nấm nhất là những loại nấm gây hắc lào

- Iốt và kali iodua có thể dùng riêng hoặc có thể dùng phối hợp với một số hoá chất khác để tăng cường tác dụng chữa nấm như một số công thức sau: + Iốt tinh thể 2g

+ Axit salixylic 2g + Rượu 80

0

100ml Hoặc:

+ Thường sử dụng dưới dạng các dạng rượu trầu không, mỡ trầu không và cao trầu không

+ Rượu trầu không được pha chế bằng cách lấy lá trầu không phơi khô, tán nhỏ thành bột rồi ngâm vào rượu

+ Mỡ trầu không được pha chế bằng cách cất rượu cho bốc hơi giữ lại tinh chất bột trầu không rồi trộn với vaselin

+ Nếu lấy lá trầu thái nhỏ, đun sôi lấy nước rồi cô đặc lại thìsẽ được dạng cao trầu không

II.B Điều tr nấm móng Những nấm gâ bệnh ở móng th ờng gâ bệnh k o d i v có những đặc điểm nh sau:

- Bệnh nấm móng thường kết hợp với bệnh nấm da

- Bệnh nấm móng do rất nhiều loại nấm có thể gây ra, nhưng chủ yếu là do các nấm thuộc giống: + Trichophyton

+ Epidermophyton

- Nấm trichophyton thường gây bệnh nấm móng là: + T rubum

+ T mentagrophytes + T sulphureum + T violaceum

- Nấm Epidermophyton gây bệnh thường là E floccosum

- Bệnh nấm móng thường dai d ng khó chữa nhiều khi phải dùng đến kháng sinh kháng nấm

- Do tác nhân gây bệnh phức tạp, bệnh nấm móng có nhiều biểu hiện bệnh khác nhau nhưng thông thường là sùi móng, nứt móng, rụng móng Những thương tổn do nấm ở móng có thể dễ dàng lan toả đến toàn bộ vùng móng và dễ lây sang móng khác

- Chữa nấm móng, dùng các loại thuốc đã được chỉ dẫn trong chữa các bệnh nấm da Tuy nhiên những loại thuốc đó thường rất ít có tác dụng nên đến nay loại thuốc chữa nấm móng đem lại kết quả chủ yếu là Griseofulvin

II.C - ĐIỀU TRỊ BỆNH NẤM MEN

- Nấm men có nhiều loại gây bệnh nhưng chủ yếu là những nấm men thuộc giống Candida và dễ gặp là loại Candida albicans

- Những nấm men gây bệnh thường có một số đặc điểm chung: + Đa số thích hợp với môi trường toan

+ Có thể chuyển từ tạp sinh sang tính trạng ký sinh gây bệnh hoặc do sức đề kháng của cơ thể giảm sút hoặc do có một sự rối loạn về khuẩn hệ nơi nấm men sống tạp sinh

- Nếu nấm men ký sinh gây bệnh ở những hốc tự nhiên (miệng, hầu họng…) Nên thay đổi pH của nơi nấm ký sinh sang tính trạng kiềm tính

- Tăng cường sức đề kháng và khôi phục lại khuẩn hệ Bình thường ở nơi nấm ký sinh bằng cách: + Khi bệnh súc đang sử dụng kháng sinh và kháng sinh đã diệt khuẩn không hợp lý, phải đ nh chỉ việc sử dụng kháng sinh nhằm làm cho khuẩn hệ tự khôi phục trở lại

+ Khi khuẩn hệ phát triển đột xuất về một chủng nào đó nhất là những chủng loại tạo nên tính trạng toan tính của khu vực có nấm ký sinh thìlại phải dùng thuốc kháng sinh diệt loại vi khuẩn đó nhằm đẩy lùi sự phát triển của nấm men

- Các loại nấm men có thể gây bệnh ở nhiều nơi: Miệng, thực quản, ruột, quanh hậu môn, âm đạo,

da, móng,… Nội tâm mạc, ở phổi, đường tiết niệu Có thể gây bệnh nhiễm nấm men toàn thân

- Đối với những nấm men gây bệnh ở phủ tạng, tiến hành điều trị theo như những bệnh nấm nội tạng

- Đối với những loại nấm men gây bệnh ở da có thể điều trị gần như các bệnh nấm da

- Riêng đối với những nấm men ở các hốc tự nhiên thì dùng một số phương pháp điều trị đặc hiệu

- Thông thường dễ gặp và cần thiết phải điều trị đặc hiệu là nấm men ở miệng

1 Điều tr nấm men ở miệng

- Nấm men ở miệng dễ gặp ở động vật sơ sinh đang ở thời kỳ bú sữa gây bệnh tưa rõ nhất là ở lưỡi

+ Bệnh có thể gây tác hại không đáng kể nhưng có khi gây tổn thương nặng niêm mạc vùng miệng làm ảnh hưởng đến sức khỏe của động vật non

- Có nhiều biện pháp để chữa nấm men ở miệng: Nystatin

- Nystatin rất đặc hiệu để chữa nấm men Candida Trong những trường hợp tưa nặng có thể bôi dung dịch Nystatin hoặc bôi sáp Nystatin điều chế theo công thức sau:

II.D - ĐIỀU TRỊ CÁC BỆNH NẤM NỘI TẠNG

- Những bệnh nấm ở nội tạng tuy không phổ biến nhưng nói chung gây tác hại nghiêm trọng có thể ảnh hưởng đến tính mạng của bệnh súc

- Nấm nội tạng có thể gây ra do nhiều giống và loại nấm như Xạ khuẩn Actinomyces, các giống nấm Sporotrichum, Cryptococcus, Coccidioides, Blastomyces, Histoplasma, Aspergillus,…

- Vị trí bị bệnh cũng rất phức tạp: bất kỳ cơ quan phủ tạng nào cũng có thể bị

- Đối với các bệnh nấm nội tạng, nhằm điều trị được tốt cần chú ý:

+ Phải chẩn đoán chính xác vì hình thái bệnh rất phong phú, cần chẩn đoán phân biệt với những bệnh khác

+ Trong chẩn đoán, khó dùng những phương pháp phân lập và định loại nấm nên cần kết hợp các phương pháp chẩn đoán miễn dịch với chẩn đoán lâm sàng

+ Khi đã chẩn đoán được bệnh, việc điều trị cần được tiến hành khẩn trương vì bệnh nấm nội tạng

có diễn biến cấp tính nguy hiểm

- Để chữa các bệnh nấm nội tạng,ở người, trước kia thường có những biện pháp điều trị cổ điển như dùng iôt, kali iodua hoặc quang tuyến X nhưng nói chung không đem lại kết quả chắc chắn và nhiều khi thất bại hoàn toàn

- Kháng sinh chống nấm:

+ Từ năm 1949, sau những phát minh về kháng sinh kháng nấm, việc điều trị nấm nội tạng đã có những tiến bộ đặc biệt

+ Kháng sinh kháng nấm tạo ra những khả năng điều trị rất tốt với nấm nội tạng

+ Đến nay những kháng sinh kháng nấm thường dùng để điều trị nấm nội tạng đã thay thế hoàn toàn những phương pháp cổ điển

- Những kháng sinh kháng nấm thường được dùng là: + Nystatin

+ Amphotericin B + Griseofuvin + Mycostatin

+ Pimaricim + Candicidin

- Kháng sinh chống nấm được phân loại theo cơ chế tác động như sau:

- Thuốc gây trở ngại sự tổng hợp vách tế bào: thường cản trở sự tổng hợp chitin của vách tế bào

như nhóm polyoxin A là các thuốc cạnh tranh acetyl glucosamin trở ngại tổng hợp chitin, do đó có

tác dụng đối với các nấm gây bệnh thực vật mà không có tác dụng với các nấm gây bệnh động vật

Haloprogin có tác dụng chống các nấm da và Candida Aculeacin A và echinocandin B gây trở

ngại phản ứng enzym tổng hợp -glucan của các nấm men

- Thuốc gây tổn hại màng tế bào chất: là các thuốc kết hợp trực tiếp với sterol, phosphlipid, protein màng gây tổn hại cơ năng của màng

+ Amphotericin B có tác động chống Histoplasma, Cryptococcus, Candida, Sporothrix,… nhưng

cũng gây hại thận, gây sốt,…

+ Cyclopiroxolamin không gây hại đối với cấu trúc của màng nhưng có tác dụng chống nấm do

tác dụng trực tiếp đến protein ATPaza của nấm

- Thuốc gây trở ngại sự tổng hợp sterol gồm các hợp chất hệ acetyl amin, hệ thiocarbamin và hệ azol, bao gồm tất cả các imidazol, thông qua con đường acetyl CoA tác động đến chu trình tổng hợp sterol

- Các thuốc hệ aryl amin, (naftifin, terbinafin) và hệ thiocarbamin (tolnaflat, tolciclat) gây trở ngại

một cách đặc hiệu đối với phản ứng squalen epoxidaza của các nấm da và Candida

- Các thuốc hệ azol (imidazol, fluconazol, itraconazol) trở ngại tổng hợp ergosterol và phản ứng loại methyl C – 14 của - methyl sterol mà có tác dụng chống nấm và có thể sử dụng bên trong cơ thể

- Thuốc gây trở ngại bộ máy truyền điện tử: Mặc dù tính độc chọn lọc yếu vì hệ truyền điện tử phosphoryl hoá nhờ oxy hoá của tế bào nấm và tế bào động vật giống nhau

+ Siccanin gây trở ngại một cách đặc hiệu sự truyền điện tử từ enzym dehydrogenza của axit

succinic đến hệ ubiquinon Siccanin có tác dụng chống nấm da,

+ Pyrrolnitrin có tác dụng đối với các nấm da, Aspergillus, Candida

- Các chất kháng sinh hệ quinon (nanaomycin) gây trở ngại hệ hô hấp của vi khuẩn và nấm, gây trở ngại sự tổng hợp AND, ARN và protein nên cũng hữu hiệu đối với bệnh nấm da ở động vật

- Thuốc gây trở ngại tổng hợp protein: Điểm tác dụng chủ yếu của actidione là ribosom 80S nên gây trở ngại việc di chuyển amin từ phức hợp aminoacyl –tRNA đến chuỗi peptid Do phản ứng không đặc hiệu nên không thể dùng điều trị bệnh nhưng có thể thêm vào môi trường nuôi cấy (0,5 mg/l) để ức chế các nấm men, Aspergillus, các nấm họ Mucoraceae,… để phân lập nấm da

- Thuốc gây trở ngại sự tổng hợp AND: Variotin gây trở ngại phản ứng của enzym DNA –

polymeraza , biểu hiện hoạt tính chống các nấm da

- Flucytosin (5 – fluorocytosin) là chất cản trở sự chuyển hoá các pyrimidin, sản phẩm 5- fluoro –

2' – deoxyuridilat kết hợp với enzym tổng hợp thymidin gây trở ngại hoạt tính enzym nên có tác dụng mạnh chống các nấm như Candida, Cryptococcus, các nấm đen và có thể dùng qua đường miệng

- Thuốc trở ngại cơ năng mạng lưới nội chất

- Gryseofulvin là thuốc gây trở ngại cơ năng mạng lưới nội chất, gây dị thường trong phân chia

tế bào và hình thái tế bào, được gọi là yếu tố cứu (curing factor), là thuốc kháng nấm sợi da có thể