ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, trên thế giới cũng như trên thị trường Việt Nam có rất nhiều loại vắc xin. Trước khi sử dụng trên người, các vắc xin phải được kiểm tra nghiêm ngặt trong phòng thí nghiệm về công hiệu, vô trùng và tính an toàn trên động vật thí nghiệm. Để kiểm tra tính vô trùng của vắc xin, người ta cho vắc xin vào các môi trường nuôi cấy phù hợp để xem có vi khuẩn hoặc nấm mọc hay không. Môi trường thường dùng là môi trường lỏng thioglycolat (Fluid thioglycollate medium: FTM) và canh thang TSB (Tryptic soy broth). Môi trường lỏng thioglycolat phát hiện vi khuẩn hiếu khí và vi khuẩn kỵ khí; canh thang TSB phát hiện vi khuẩn hiếu khí và nấm trong vắc xin [6], [43], [58]. Vấn đề đặt ra là trong vắc xin có thể chứa các chất ức chế sự phát triển của vi khuẩn và nấm (chất ức chế), ví dụ: thimerosal, 2 phenoxy ethanol, phenol,...Trong những trường hợp đó liệu vi khuẩn và nấm có mọc được trong môi trường kiểm tra tính vô trùng của vắc xin hay không? Để kiểm tra xem môi trường có đảm bảo cho vi khuẩn và nấm mọc được khi vắc xin chứa các chất ức chế hay không, phải thực hiện thử nghiệm kiểm tra khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn và nấm khi có mặt của vắc xin, gọi là thử nghiệm thẩm định hay thử nghiệm ức chế (validation test, bacteriostasis and fungistasis test) [66], [67], [69], [75]. Thử nghiệm này được thực hiện bằng cách cho chính vắc xin và chủng mẫu vào môi trường, sau đó theo dõi sự phát triển của chủng. Nếu chủng mẫu mọc trong tất cả các ống môi trường cấy vắc xin thì điều đó khẳng định rằng thử nghiệm vô trùng có khả năng phát hiện được các trường hợp vắc xin bị nhiễm trùng. Nếu chủng mẫu không mọc được trong các ống môi trường cấy vắc xin thì qui trình thực hiện thử nghiệm vô trùng cần phải thay đổi. Tổ chức Y tế thế giới khuyến cáo: khi kiểm tra vô trùng bằng phương pháp cấy trực tiếp, có thể loại bỏ ảnh hưởng của các chất ức chế bằng cách tăng thể tích môi trường [75]. Tuy nhiên việc này chưa được thực hiện tại Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế (KĐQG). Thử nghiệm thẩm định được yêu cầu thực hiện cho từng vắc xin [63]. Vì mỗi vắc xin có chứa các chất ức chế khác nhau với nồng độ khác nhau. Do đó, cần có một qui trình chung để xác định thể tích môi trường thích hợp cho tất cả các vắc xin. Xuất phát từ nhu cầu trên chúng tôi tiến hành đề tài "Nghiên cứu thể tích môi trường thích hợp để kiểm tra vô trùng một số vắc xin tại Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế" với mục tiêu: 1. Tìm thể tích môi trường thích hợp cho 4 vắc xin được lựa chọn nghiên cứu, cụ thể: - Vắc xin bại liệt uống (OPV) do Trung tâm nghiên cứu, sản xuất vắc xin và sinh phẩm Y tế (POLYVAC) sản xuất. - Vắc xin BCG (BCG) do Viện Vắc xin và Sinh phẩm Y tế (IVAC) sản xuất. - Vắc xin viêm gan B (VGB) do do Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 (VABIOTECH) sản xuất. - Vắc xin viêm não Nhật Bản (VNNB) do VABIOTECH sản xuất. 2. Đề xuất qui trình xác định thể tích môi trường thích hợp để kiểm tra vô trùng vắc xin.
L LL Lời ii i c c c cảm mm m ơn nn n • Để hoàn thành luận văn này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñối với PGS.TS Lê Văn Phủng, thầy hướng dẫn trực tiếp tôi từ những ngày ñầu của chuyên ngành vi sinh, người có ảnh hưởng lớn nhất ñối với tôi về sự cẩn thận, ý thức trách nhiệm trong công việc. • Tôi xin chân thành cảm ơn : - Ban Giám hiệu, phòng Đào tạo Sau ñại học trường Đại học Y Hà Nội, - Các thầy cô, cán bộ công nhân viên Bộ môn Vi sinh ñã truyền ñạt kiến thức và tạo ñiều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình học tập. • Tôi xin gửi lòng biết ơn chân thành tới: - PGS.TS Nguyễn Thị Hồng Linh, phó Viện trưởng Viện Kiểm ñịnh Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế; - Ban Lãnh ñạo, Phòng Kiểm ñịnh chất lượng Công ty Vắc xin và Sinh Phẩm số 1; - Ban Lãnh ñạo Trung tâm Nghiên cứu, Sản xuất Vắc xin và Sinh phẩm Y tế; - Khoa Quản lý chất lượng Viện Kiểm Định Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế; - Th.S Nguyễn Thị Vân Anh, KTV Lê Thị Kim Thuỷ, KTV Phạm Thị Thu Phương, chị Nguyễn Thị Ký, anh Đỗ Văn Minh cùng các ñồng nghiệp khác ñã giúp tôi thực hiện thành công luận văn này. • Cuối cùng, tôi bày tỏ tình cảm thân thương và lòng biết ơn ñặc biệt ñối với gia ñình và người thân ñã luôn luôn ở bên cạnh tôi, giúp ñỡ, tạo ñiều kiện cho tôi học tập, nghiên cứu. Hà Nội, ngày 15 tháng 11 năm 2010 Nguyễn Thị Kiều CÁC CHỮ VIẾT TẮT ATCC: American type culture collection (Bộ sưu tập chủng mẫu của Mỹ) BHB Brain heart broth (Môi trường canh thang não tim) CFU: Colony forming unit (Đơn vị hình thành khuẩn lạc) FTM : Fluid thioglycollate medium (Môi trường lỏng thioglycolat) GSK Glaxo Smith Kline (Công ty Glaxo Smith Kline) HEPA High Efficiency Particulate Arresting (Hệ thống lọc hiệu năng cao) ICH International conference on Hamonisation (Hội nghị hoà hợp quốc tế) IVAC: Viện Vắc xin và Sinh phẩm Y tế KĐQG: Viện Kiểm ñịnh Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế MT: Môi trường LAL Limulus Amebocytes Lysate (Phản ứng xác ñịnh nội ñộc tố) NMSL: Nước muối sinh lý OPV: Vắc xin bại liệt uống POLYVAC: Trung tâm nghiên cứu, sản xuất vắc xin và sinh phẩm Y tế SOP Standard Operating procedure (Qui trình chuẩn) TRS: Technical report series (Các hướng dẫn kỹ thuật của Tổ chức Y tế Thế giới) TSA: Tryptic soy agar (Thạch TSA) TSB: Tryptic soy broth (Canh thang TSB) VABIOTECH: Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 VGB Vắc xin viêm gan B VK: Vi khuẩn VNNB: Vắc xin viêm não Nhật Bản VR: Vi rút VX: Vắc xin WHO: World health organization (Tổ chức Y tế Thế giới) MỤC LỤC Trang Đặt vấn ñề 1 Chương 1. Tổng quan tài liệu 1.1. Vắc xin 1.1.1. Các thành phần trong vắc xin 1.1.2. Các chất ức chế trong vắc xin 1.1.3. Các vắc xin sử dụng trong nghiên cứu 1.1.3.1. BCG 1.1.3.2. OPV 1.1.3.3. Vắc xin viêm gan B 1.1.3.4. Vắc xin viêm não Nhật Bản 1.2. Kiểm ñịnh vắc xin 1.2.1. Kiểm tra vô trùng 1.2.2. Nhận dạng 1.2.3. Xác ñịnh công hiệu 1.2.4. Kiểm tra an toàn chung 1.2.5. Kiểm tra an toàn ñặc hiệu… 1.2.6. Kiểm tra chất gây sốt 1.2.7. Kiểm tra các chỉ tiêu hoá lý 1.3. Thử nghiệm vô trùng 1.3.1. Các phương pháp kiểm tra vô trùng 1.3.2. Điều kiện thực hiện thử nghiệm vô trùng 1.3.3. Vai trò của con người trong thử nghiệm vô trùng 1.3.4. Môi trường dùng trong kiểm tra vô trùng 1.3.5. Các chứng âm, chứng dương của thử nghiệm vô trùng 1.3.6. Việc loại bỏ ảnh hưởng của các chất ức chế 3 3 3 4 5 5 5 6 6 7 8 9 9 10 10 11 12 13 13 15 18 18 21 23 1.3.7. Các thể tích môi trường thử nghiệm 1.3.8. Chủng mẫu 1.4. Quá trình hoàn thiện kỹ thuật kiểm tra vô trùng vắc xin tại Viện Kiểm ñịnh Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế 1.4.1. Trước năm 2002 1.4.2. Năm 2002-2003 1.4.3. Năm 2004-2005 1.4.4. Từ 2006 ñến nay 1.4.5. Các tồn tại trong thử nghiệm vô trùng tại Viện Kiểm ñịnh Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế 25 25 28 28 28 29 29 31 Chương 2: Đối tượng, vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.1. Đối tượng nghiên cứu 2.2. Vật liệu 2.2.1. Môi trường, hoá chất 2.2.2. Vắc xin 2.2.3. Chủng mẫu 2.2.4. Trang thiết bị dụng cụ 2.3. Phương pháp nghiên cứu………………………………………………. 2.3.1. Thiết kế nghiên cứu 2.3.2. Nội dung nghiên cứu 2.3.3. Xác ñịnh thể tích môi trường 2.3.4. Xác ñịnh hàm lượng thimerosal của các loạt vắc xin viêm gan B, viêm não Nhật Bản 2.3.5. Xác ñịnh hàm lượng formaldehyd của các loạt vắc xin viêm gan B, viêm não Nhật Bản 32 32 33 33 33 35 35 36 36 37 37 41 42 Chương 3: Kết quả nghiên cứu 3.1. Kết quả xác ñịnh thể tích môi trường 44 45 3.1.1. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng BCG 3.1.2. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng OPV 3.1.3. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng vắc xin viêm gan B 3.1.4. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng vắc xin viêm não Nhật Bản 3.1.5. So sánh tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong FTM và TSB 3.2. Kết quả xác ñịnh hàm lượng thimerosal và formaldehyd 3.2.1. Hàm lượng thimerosal và formaldehyd của vắc xin viêm gan B 3.2.2. Hàm lượng thimerosal và formaldehyd của vắc xin viêm não Nhật Bản 3.3. Qui trình xác ñịnh thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng vắc xin 45 47 50 56 60 63 63 65 66 Chương 4: Bàn luận 1. Về thể tích môi trường 2. Nồng ñộ các chất ức chế trong vắc xin viêm gan B, vắc xin viêm não Nhật Bản 3. Qui trình xác ñịnh thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng vắc xin 4. Hạn chế của ñề tài 68 68 75 77 79 Kết luận 80 Kiến nghị Tài liệu tham khảo Phụ lục 82 DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1: Số lượng vắc xin cần lấy ñể kiểm tra vô trùng Bảng 1.2: Thể tích VX cần lấy từ mỗi lọ ñể cấy vào mỗi loại MT và thể tích VX cấy vào mỗi ống MT Bảng 1.3: Giới hạn nhiễm VK và nấm của các cấp ñộ sạch Bảng 1.4: Giới hạn hạt bụi của các cấp ñộ sạch (hạt/m 3 không khí) Bảng 1.5: Các chủng mẫu do Dược ñiển Mỹ qui ñịnh Bảng 1.6: Các chủng mẫu do Dược ñiển châu Âu qui ñịnh Bảng 1.7: Các chủng mẫu sử dụng trong nghiên cứu Bảng 2.1: Số lượng ống MT cần cho mỗi loạt của từng VX Bảng 2.2: Số lượng VX sử dụng cho xác ñịnh thể tích MT Bảng 2.3: Số lượng ống MT của từng chủng mẫu ở mỗi thể tích MT Bảng 3.1: Kết quả kiểm tra vô trùng các loạt MT Bảng 3.2: Kết quả kiểm tra dinh dưỡng các loạt FTM Bảng 3.3: Kết quả kiểm tra dinh dưỡng các loạt TSB Bảng 3.4: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy BCG, thể tích 20 mL/ống, loạt VX số 1 Bảng 3.5: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy BCG; thể tích 20 mL/ống; loạt VX số 2, số 3 Bảng 3.6: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy OPV, thể tích 20 mL/ống Bảng 3.7: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy OPV, thể tích 30 mL/ống, loạt VX số 1 Bảng 3.8: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy OPV; thể tích 30 mL/ống; loạt số 2, số 3 Bảng 3.9: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VGB, thể tích 20 mL/ống… 15 15 17 17 26 27 27 32 34 39 44 44 44 45 46 47 48 49 50 Bảng 3.10: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VGB, thể tích 30 mL/ống Bảng 3.11: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VGB, thể tích 40 mL/ống Bảng 3.12: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong FTM cấy VGB; thể tích 40 mL/ống; loạt VX số 2, số 3 Bảng 3.13: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong TSB cấy VGB Bảng 3.14: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong TSB cấy VGB, thể tích 80 mL Bảng 3.15: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VNNB, thể tích 20 mL/ống Bảng 3.16: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VNNB, thể tích 30 mL/ống Bảng 3.17: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VNNB, thể tích 40 mL/ống Bảng 3.18: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VNNB, thể tích 50 mL/ống Bảng 3.19: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong MT cấy VNNB, thể tích 60 mL/ống Bảng 3.20: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong FTM cấy VNNB; thể tích 60 mL/ống; loạt VX số 2, số 3 Bảng 3.21: Tỷ lệ mọc của chủng mẫu trong TSB cấy VNNB, thể tích 60 mL… Bảng 3.22: Tỷ lệ mọc của B. subtilis trong thử nghiệm ức chế VGB Bảng 3.23: Tỷ lệ mọc của B. subtilis trong thử nghiệm ức chế VNNB Bảng 3.24: Tỷ lệ mọc của C. albicans trong thử nghiệm ức chế VGB Bảng 3.25: Tỷ lệ mọc của C. albicans trong thử nghiệm ức chế VNNB Bảng 3.26: Tỷ lệ mọc của K. rhizophila trong thử nghiệm ức chế VGB…… Bảng 3.27: Tỷ lệ mọc của K. rhizophila trong thử nghiệm ức chế VNNB……. Bảng 3.28: Hàm lượng thimerosal và formaldehyd của VGB Bảng 3.29: Hàm lượng thimerosal và formaldehyd của VNNB…… 50 52 53 54 55 56 57 57 58 58 59 60 60 61 61 62 62 63 63 65 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1: Kiểm tra găng của kỹ thuật viên Hình 1.2: Môi trường FTM Hình 1.3: Môi trường TSB Hình 1.4: Bảng hiện thị máy ñếm hạt bụi Hình 1.5: Đầu thu mẫu máy ñếm vi khuẩn và nấm Hình 1.6: Khuẩn lạc C. albicans (môi trường TSA) Hình 1.7: Khuẩn lạc K. rhizophila (môi trường TSA) Hình 1.8: B. subtilis mọc làm mất chỉ thị màu FTM………… Hình 1.9: C. albicans mọc trong TSB Hình 1.10: C. albicans mọc trong FTM Trang 17 19 19 31 31 45 45 47 51 51 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, trên thế giới cũng như trên thị trường Việt Nam có rất nhiều loại vắc xin. Trước khi sử dụng trên người, các vắc xin phải ñược kiểm tra nghiêm ngặt trong phòng thí nghiệm về công hiệu, vô trùng và tính an toàn trên ñộng vật thí nghiệm. Để kiểm tra tính vô trùng của vắc xin, người ta cho vắc xin vào các môi trường nuôi cấy phù hợp ñể xem có vi khuẩn hoặc nấm mọc hay không. Môi trường thường dùng là môi trường lỏng thioglycolat (Fluid thioglycollate medium: FTM) và canh thang TSB (Tryptic soy broth). Môi trường lỏng thioglycolat phát hiện vi khuẩn hiếu khí và vi khuẩn kỵ khí; canh thang TSB phát hiện vi khuẩn hiếu khí và nấm trong vắc xin [6], [43], [58]. Vấn ñề ñặt ra là trong vắc xin có thể chứa các chất ức chế sự phát triển của vi khuẩn và nấm (chất ức chế), ví dụ: thimerosal, 2 phenoxy ethanol, phenol, Trong những trường hợp ñó liệu vi khuẩn và nấm có mọc ñược trong môi trường kiểm tra tính vô trùng của vắc xin hay không? Để kiểm tra xem môi trường có ñảm bảo cho vi khuẩn và nấm mọc ñược khi vắc xin chứa các chất ức chế hay không, phải thực hiện thử nghiệm kiểm tra khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn và nấm khi có mặt của vắc xin, gọi là thử nghiệm thẩm ñịnh hay thử nghiệm ức chế (validation test, bacteriostasis and fungistasis test) [66], [67], [69], [75]. Thử nghiệm này ñược thực hiện bằng cách cho chính vắc xin và chủng mẫu vào môi trường, sau ñó theo dõi sự phát triển của chủng. Nếu chủng mẫu mọc trong tất cả các ống môi trường cấy vắc xin thì ñiều ñó khẳng ñịnh rằng thử nghiệm vô trùng có khả năng phát hiện ñược các trường hợp vắc xin bị nhiễm trùng. Nếu chủng mẫu không mọc ñược trong các ống môi trường cấy vắc xin thì qui trình thực hiện thử nghiệm vô trùng cần phải thay ñổi. Tổ chức Y tế thế giới khuyến [...]... tích môi trư ng thích h p cho t t c các v c xin Xu t phát t nhu c u trên chúng tôi ti n hành ñ tài "Nghiên c u th tích môi trư ng thích h p ñ ki m tra vô trùng m t s v c xin t i Vi n Ki m ñ nh Qu c gia V c xin và Sinh ph m Y t " v i m c tiêu: 1 Tìm th tích môi trư ng thích h p cho 4 v c xin ñư c l a ch n nghiên c u, c th : - V c xin b i li t u ng (OPV) do Trung tâm nghiên c u, s n xu t v c xin và sinh. .. ph m Y t (POLYVAC) s n xu t - V c xin BCG (BCG) do Vi n V c xin và Sinh ph m Y t (IVAC) s n xu t - V c xin viêm gan B (VGB) do do Công ty V c xin và Sinh ph m s 1 (VABIOTECH) s n xu t - V c xin viêm não Nh t B n (VNNB) do VABIOTECH s n xu t 2 Đ xu t qui trình xác ñ nh th tích môi trư ng thích h p ñ ki m tra vô trùng v c xin 3 Chương 1 T NG QUAN TÀI LI U 1.1 V c xin V c xin (VX) là nh ng ch ph m sinh. .. pháp c y tr c ti p, lư ng VX c n l y t m i l ñ c y vào m i lo i MT (FTM, TSB) và lư ng VX c y vào m i ng MT cũng ñư c qui ñ nh t i tài li u WHO TRS 530 annex 4 [75], c th như sau: B ng 1.2: Th tích VX c n l y t m i l ñ c y vào m i lo i MT và th tích VX c y vào m i ng MT Th tích có trong m i l VX < 1 mL 1 mL - 20 mL Lư ng VX t i thi u dùng cho m i lo i MT Toàn b VX có trong m il 1 mL Lư ng VX c y vào m... l c Phương pháp hi n nay ñang ñư c s d ng t i KĐQG là phương pháp c y tr c ti p [28] 1.3.1.2 S lư ng v c xin c n cho ki m tra vô trùng c a m i lo t s n xu t Sau khi s n xu t, m i lo t VX c n l y m t s l nh t ñ nh ñ ki m tra vô trùng S lư ng VX c n cho ki m tra vô trùng c a m t lo t s n xu t ph 14 thu c vào s lư ng s n xu t c a lo t ñó và th tích VX có trong m i l S lư ng n y ñư c WHO qui ñ nh [75]:... thi u các chuy n ñ ng và nói chuy n [41] Ngoài ra, ngư i th c hi n th nghi m không ñư c m c các b nh truy n nhi m c p tính ho c m n tính [72] 1.3.4 Môi trư ng dùng trong ki m tra vô trùng 1.3.4.1 Các lo i MT dùng trong ki m tra vô trùng: TSB và các lo i canh thang thioglycolat H u h t các phòng thí nghi m l n trên th gi i cũng như KĐQG ñ u dùng FTM và TSB làm MT nuôi c y trong th nghi m vô trùng Thành... m t năm mi n là chúng ñư c ki m tra dinh dư ng và ch th màu ñ t y u c u FTM ñư c khuyên là không nên dùng n u quá m t ph n ba trên c a ng MT ñ i thành màu h ng [54], [69] Trong th nghi m ki m tra vô trùng, n u các VX g y ñ c MT thì sau 7 ng y nuôi c y ph i ti n hành c y chuy n sang m t ng MT khác Vi n Qu c gia v S c kh e và Môi trư ng Hà Lan khuyên trong hai l n ki m tra ñó nên s d ng cùng m t lo t...2 cáo: khi ki m tra vô trùng b ng phương pháp c y tr c ti p, có th lo i b nh hư ng c a các ch t c ch b ng cách tăng th tích môi trư ng [75] Tuy nhiên vi c n y chưa ñư c th c hi n t i Vi n Ki m ñ nh Qu c gia V c xin và Sinh ph m Y t (KĐQG) Th nghi m th m ñ nh ñư c y u c u th c hi n cho t ng v c xin [63] Vì m i v c xin có ch a các ch t c ch khác nhau v i n ng ñ khác... fluid thioglycolat medium G (FTMG), lo i n y có thành ph n gi ng h t FTM ngo i tr thành ph n th ch là th ch t ng h p FTMG trong hơn FTM, vì v y nó ñ c bi t thích h p cho vi c ki m tra vô trùng các VX có th tích l l n và nuôi c y dài ng y M t lo i canh thang thioglycolat n a ñư c s d ng trong th nghi m vô trùng, ñó là MT thioglycolat thay th (Alternative fluid thioglycollate 20 medium: AFTM), thành ph n... n ng c a ion Cl- v i b c nitrat 0,1 N, ch th màu kalicromat 10% [11] Th c hi n nh ng th nghi m nào trong s các th nghi m nói trên là ph thu c vào b n ch t c a t ng VX 1.3 Th nghi m vô trùng 1.3.1 Các phương pháp ki m tra vô trùng 1.3.1.1 Hai phương pháp ki m tra vô trùng Hi n nay, trên th gi i có hai phương pháp ki m tra vô trùng VX: Phương pháp màng l c và phương pháp c y tr c ti p [58], [75], [80]... u n y x y ra do b nhi m VK và n m t bên ngoài trong quá trình th c hi n th nghi m Giám sát môi trư ng làm vi c (ñ m s lư ng VK và n m trong không khí; ñ m s lư ng VK và n m trên b m t t c y vô trùng, găng c a cán b th c hi n th nghi m; ñ m s lư ng h t b i trong không khí) nh m ñánh giá xem có nguy cơ nhi m vi khu n và n m t bên ngoài vào các l MT c y VX trong quá trình ki m tra vô trùng hay không Ch . 3.1.1. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng BCG 3.1.2. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng OPV 3.1.3. Thể tích môi trường thích hợp ñể kiểm tra vô trùng vắc xin viêm. kiểm tra vô trùng một số vắc xin tại Viện Kiểm ñịnh Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế& quot; với mục tiêu: 1. Tìm thể tích môi trường thích hợp cho 4 vắc xin ñược lựa chọn nghiên cứu, cụ thể: . Vắc xin và Sinh Phẩm số 1; - Ban Lãnh ñạo Trung tâm Nghiên cứu, Sản xuất Vắc xin và Sinh phẩm Y tế; - Khoa Quản lý chất lượng Viện Kiểm Định Quốc gia Vắc xin và Sinh phẩm Y tế; - Th.S Nguyễn