nghiên cứu khả năng nhân giống vô tính cây chè đắng (ilex kaushue s,y hu) bằng phương pháp giâm cành

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN CẢNH CHÍNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG VÔ TÍNH CÂY CHÈ ðẮNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP GIÂM CÀNH LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : TRỒNG TRỌT Mã số : 61 62 01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS. HOÀNG MINH TẤN HÀ NỘI 2011 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan tính trung thực và nghiêm túc của luận văn này ñược thực hiện theo ñúng ñối tượng, nội dung, phương pháp và kết quả nghiên cứu. Các số liệu trong luận văn này chưa ñược công bố trên bất kỳ một tài liệu hoặc báo cáo khoa học nào. Các trích dẫn từ các nguồn tài liệu ñược thực hiện trung thực trong quá trình nghiên cứu. Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. ii LỜI CẢM ƠN Trước hết tôi xin trân trọng cảm ơn thầy giáo của tôi GS.TS Hoàng Minh Tấn, người ñã nhiệt tình và trách nhiệm hướng dẫn tôi trong suốt thời gian học tập và thực hiện ñề tài, sự tận tình và nghiêm khắc trong khoa học của thầy ñã cho tôi thêm ñộng lực và niềm say mê nghiên cứu ñể hoàn thành luận văn này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn ñến các thầy giáo, cô giáo trong tổ bộ môn Sinh lý thực vật, tổ bộ môn Cây công nghiệp Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã ñóng góp nhiều ý kiến, hướng dẫn tôi ñể luận văn hoàn thành ñúng yêu cầu và tiến ñộ. Tôi xin cảm ơn sự giúp ñỡ, chia sẻ ñầy thiện chí của bạn bè, ñồng nghiệp, ñặc biệt là sự ñộng viên, tạo mọi ñiều kiện của người thân của trong gia ñình tôi ñã ñồng hành, chia sẻ cùng với tôi trong suốt thời gian tôi thực hiện ñề tài này, kết quả của ñề tài ngoài ý nghĩa khoa học và thực tiễn nó còn là sự kết tinh tình cảm, tâm huyết và trách nhiệm của mọi người. Hy vọng tất cả tình cảm và hành ñộng sâu sắc trên sẽ tiếp thêm sức mạnh cho tôi tiếp tục ñi tiếp con ñường nghiên cứu khoa học, góp phần phục vụ hữu ích ñời sống xung quanh chúng ta. Xin trân trọng cảm ơn Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. iii MỤC LỤC Lời cam ñoan………………………………………………………………… i Lời cảm ơn……………………………………………………………………ii Mục lục………………………………………………………………………iii Danh mục bảng……………………………………………………………….v Danh mục hình…………………………………………………………… vi Danh mục viết tắt……………………………………………………………vii 1. MỞ ðẦU 1 1.1. Tính cấp thiết 1 1.2. Mục ñích và yêu cầu 2 1.2.1. Môc ñích 2 1.2.2. Yêu cầu 2 1.3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của nghiên cứu 3 1.3.1. Ý nghĩa khoa học 3 1.3.2. Ý nghĩa thực tiễn 3 1.4. Phạm vi nghiên cứu của ñề tài 3 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1. Nguồn gốc và phân bố của cây chè ñắng 4 2.2. Phân loại 5 2.3. Một số ñặc ñiểm của cây chè ñắng 6 2.4. Giá trị y dược của cây chè ñắng 8 2.5. Sự phát triển sản phẩm chè ñắng ở Việt Nam 11 2.6. Nhân giống vô tính bằng phương pháp giâm cành 12 2.6.1. Phương thức nhân giống 12 2.6.2. Sự ñiều chỉnh hormon quá trình tái sinh của cành giâm 15 3. ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 3.1 . ðối tượng 23 3.2. Nội dung nghiên cứu 23 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. iv 3.3. Phương pháp nghiên cứu 24 3.3.1. Bố trí thí nghiệm 24 3.3.2. Các chỉ tiêu theo dõi 30 3.3.3. Phương pháp lấy mẫu và xác ñịnh các chỉ tiêu 31 3.4. Phương pháp xử lý số liệu thí nghiệm 31 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 4.1. Ảnh hưởng của biện pháp khử trùng bằng thuốc diệt nấm bệnh ñến khả năng sống sót của cành giâm 32 4.2. Ảnh hưởng của việc xử lý chất kích thích ra rễ ñến khả năng tái sinh của cành giâm chè ñắng 35 4.3. Ảnh hưởng của tuổi cây mẹ ñến khả năng tái sinh của cành giâm 41 4.4. Ảnh hưởng của vị trí hom trên cành (mức ñộ hoá già của hom) ñến khả năng tái sinh rễ của cành giâm cây chè ñắng 44 4.5. Ảnh hưởng của lá ñể lại trên hom ñến khả năng tái sinh của cành giâm chè ñắng 47 4.6. Ảnh hưởng của giá thể ñến khả năng tái sinh của cành giâm chè ñắng 49 4. 7. Ảnh hưởng của thời vụ ñến khả năng tái sinh của cành giâm chè ñắng 51 4.8. Ảnh hưởng của mức ñộ che bóng ñến sinh trưởng của cây con chè ñắng trong vườn ươm 56 4.9. Ảnh hưởng của dinh dưỡng ñến sự sinh trưởng của cây giống chè ñắng trong vườn ươm 57 4.10. Ảnh hưởng của thời gian ñão bầu ñến khả năng lưu cây bầu giống chè ñắng trong vườn ươm. 60 3.11. Sơ bộ hạch toán khâu sản xuất cây giống chè ñắng bằng cành giâm60 5. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 61 5.1 KẾT KUẬN 62 5.2 ðỀ NGHỊ 63 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. v DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1. Ảnh hưởng của biện pháp khử trùng ñến tỷ lệ sống (%) của cành giâm chè ñắng (thí nghiệm ñược tiến hành vào tháng 8/2010) 32 Bảng 4.2. Ảnh hưởng của IBA và ABT1 ñến ñộng thái tỷ lệ ra rễ của cành giâm chè ñắng (%) 35 Bảng 4.3. Ảnh hưởng của IBA và ABT1 ñến số lượng rễ và chiều dài rễ (cm) của cành giâm chè ñắng 36 Bảng 4.4. Ảnh hưởng của IBA và ABT1 ñến tỷ lệ hình thành chồi (%) của cành giâm chè ñắng 39 Bảng 4.5. Ảnh hưởng của tuổi cây mẹ ñến tỷ lệ ra rễ (%) và tỷ lệ tạo chổi (%) của cành giâm chè ñắng 41 Bảng 4.6. Ảnh hưởng của tuổi cây mẹ (năm) ñến số lượng rễ và chiều dài của rễ dài nhất(cm) tái sinh của cành giâm 41 Bảng 4.7. Ảnh hưởng của vị trí hom giâm trên cành ñến tỷ lệ hình thành rễ và chồi của cành giâm (%) 45 Bảng 4.8. Ảnh hưởng của vị trí hom trên cành ñến số lượng rễ và chiều dài rễ (cm) của cành giâm chè ñắng 46 Bảng 4.9: Ảnh hưởng của lá ñể lại ñến tỷ lệ ra rễ của cành giâm (%) 48 Bảng 4.10. Ảnh hưởng của giá thể ñến tỷ lệ ra rễ và chồi (%) của cành giâm 50 Bảng 4.11: Ảnh hưởng của thời vụ ñến tỷ lệ sống (%) và tỷ lệ hình thành rễ (%) của cành giâm chè ñắng 52 Bảng 4.12. Ảnh hưởng của thời vụ ñến tỷ lệ hình thành chồi (%) của cành giâm cây chè ñắng 52 Bảng 4.13: Ảnh hưởng của che bóng ñến sinh trưởng của cây con chè ñắng trong giai ñoạn vườn ươm (sau 3 tháng thí nghiệm) 56 Bảng 4.14: Ảnh hưởng của phân bón ñến sinh trưởng của cây giống chè ñắng trong vườn ươm 58 Bảng 4.15. Ảnh hưởng của biện pháp ñảo bầu ñến khả năng lưu cây giống trong vườn ươm (Quan sát 7 ngày sau khi ñảo bầu) 60 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1. Cây chè ñắng ở Thạch An, Cao Bằng 6 Hình 2.2. Hình thái lá cây chè ñắng 7 Hình 2.3. Công thức hoá học của một số triterpen saponin trong chè ñắng 10 Hình 1-4: Công thức hóa học của một số auxin 16 Hình 4.1 Ảnh hưởng của khử trùng bằng thuốc trừ nấm ñến tỷ lệ sống của cành giâm chè ñắng 33 Hình 4.2: Ảnh hưởng của IBA ñến ñộng thái tỷ lệ ra rễ của cành giâm 36 Hình 4.3. Ảnh hưởng của IBA ñến số lượng rễ ở các thời ñiểm xác ñịnh 37 Hình 4.4 : Ảnh hưởng của IBA ñến ñộng thái tỷ lệ tạo chồi của cành giâm 40 Hình 4.5 : Ảnh hưởng của tuổi cây mẹ ñến số lượng rễ tái sinh của cành giâm 42 Hình 4.6 : Ảnh hưởng của vị trí hom trên cành ñến tỷ lệ ra rễ (%) 45 Hình 4.7: Ảnh hưởng của vị trí hom trên cành ñến chiều dài rễ (cm) tái sinh 46 Hình 4. 8 : Ảnh hưởng của lá ñể lại trên cành giâm ñến tỷ lệ ra rễ của cành giâm (%) 48 Hình 4.9: Ảnh hưởng của giá thể giâm cành ñến tỷ lệ ra rễ của cành giâm .50 Hình 4. 10 : Ảnh hưởng của thời vụ ñến tỷ lệ hình thành rễ (%) 53 Hình 4.11 : Ảnh hưởng của thời vụ ñến tỷ lệ hình thành chồi (%) 53 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. vii Chữ viết tắt Chữ viết tắt Nội dung V B IBA NAA IAA ABT1 ð/C CT ppm Viben C Benlate Indol butyric acid Naphtyl acetic acid Acid β indol acetic Chế phẩm kích thích ra rễ ðối chứng Công thức Nồng ñộ phần triệu Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. 1 . MỞ ðẦU 1.1. Tính cấp thiết Cây chè ñắng (Ilex kaushue S.Y. Hu) là cây thân gỗ lâu năm ñược sử dụng như là một dược thảo rất có ý nghĩa ñể chữa nhiều loại bệnh quan trọng về tiêu hoá, an thần, cảm sốt, giải ñộc …ñặc biệt là các bệnh liên quan ñến tim mạch như ñiều chỉnh huyết áp, giảm cholesteron trong máu, chống lão hoá, chống phóng xạ, vì chứa các chất chống oxy hoá trong chúng…Chính vì vậy mà từ lâu người ta ñã dùng lá chè ñắng làm trà uống ñể trị nhiều bệnh. Ngày nay, sản phẩm chè ñắng ñược dùng như một thực phẩm chức năng cho mục ñích chữa bệnh, không những phổ biến ở Trung Quốc mà ở rất nhiều nước khác trên thế giới trong ñó có Việt Nam. Tuy nhiên, có thể nói rằng cho ñến nay việc nghiên cứu về cây chè ñắng ở Việt Nam còn rất hạn chế. Có rất ít các nghiên cứu về cây chè ñắng ñược công bố trên các tạp chí khoa học chuyên ngành mà chỉ có một số thông tin về công dụng và giới thiệu sản phẩm chè ñắng ñược ñăng tải trên internet. Mặt khác, cây chè ñắng ñược phát triển ở một số tỉnh miền núi Phía Bắc với số lượng cây và diện tích trồng rất hạn chế, trong khi nhu cầu sử dụng sản phẩm chè ñắng không ngừng tăng lên. Một trong những khó khăn cho việc phát triển cây chè ñắng là việc cung cấp cây giống có chất lượng và số lượng ñáp ứng nhu cầu trồng cây chè ñắng hiện nay. Cây chè ñắng có thể nhân giống hữu tính bằng gieo hạt. Tuy nhiên, số lượng hạt thu ñược là rất hạn chế chưa kể ñến khả năng phân ly khi gieo bằng hạt. Việc chọn cây mẹ có chất lượng cao rồi tiến hành nhân giống bằng phương pháp vô tính sẽ tạo ra các cây giống chè ñắng sinh trưởng ñồng ñều có phẩm chất tương tự cây mẹ. Trong các phương pháp nhân giống vô tính Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………………………. 2 (giâm cành, chiết cành và nuôi cáy mô) thì phương pháp nhân giống bằng giâm cành có nhiều lợi thế hơn cả. Nhân giống bằng giâm cành sẽ cho hệ số nhân giống cao, cây ñồng ñều về mặt di truyến, dễ thao tác và triển khai trong sản xuất và có khả năng mở rộng quy mô khi có nhu cầu trồng với diện tích lớn. Ngoài ra việc ñầu tư cơ sở vật chất không tốn kém nhiều nên giá thành cây giống sẽ không cao. Vì vậy trong giai ñoạn hiện nay, việc nhân giống bằng giâm cành ñối với cây chè ñắng là một lựa chọn hợp lý và tối ưu cho việc phát triển cây chè ñắng ở Việt Nam. ðể có thể có ñủ cơ sở khoa học cho việc xây dựng một quy trình hoàn chỉnh cho việc nhân giống cây chè ñằng bằng giâm cành, chúng tôi tiến hành ñề tài: “Nghiên cứu khả năng nhân giống vô tính cây chè ñắng (Ilex kaushue S,Y Hu) bằng phương pháp giâm cành”. 1.2. Mục ñích và yêu cầu 1.2.1. Môc ñích Trên cơ sở nghiên cứu ảnh hưởng của các nhân tố nội tại và ngoại cảnh ñến khả năng tái sinh, sinh trưởng của cành giâm cây chè ñắng ñể góp phần hoàn thiện quy trình nhân giống cây chè ñắng bằng giâm cành. 1.2.2. Yêu cầu - Nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố nội tại như tuổi cây mẹ, kích thước hom , số diện tích lá ñể lại, tuổi cành giâm…ñến khả năng tái sinh rễ của cành giâm - Nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố ngoại cảnh như giá thể, ñộ ẩm, mức ñộ che giâm, chất ñiều hoà sinh trưởng, thuốc chống nấm…ñến khả năng tái sinh của cành giâm - Nghiên cứu ảnh hưởng của dinh dưởng và chế ñộ ñảo bầu ñến sinh trưởng và hiệu quả sản xuất giống của cây giống trong vườn ươm - Xây dựng quy trình nhân giống vô tính bằng cành giâm cho cây chè ñắng. [...]... ủó kh ng ủ nh chố ủ ng, chố Khụm, Kh inh Tr Vi t Nam mang tờn khoa h c l Ilex kaushue S.Y.HU Trung Qu c , I kudingcha ủ ng ngha v i I latifolia v Trung qu c cú c hai loi I kaushue S.Y.HU v I latifolia Thumb ex Merr, cũn Vi t Nam ch cú loi Ilex kaushue S.Y.HU Túm l i, cõy chố ủng Vi t Nam cú tờn khoa h c chu n xỏc l: Ilex kaushue S.Y.HU G n ủõy, m t s ủ a phng nh p cõy gi ng chố ủ ng t Trung Qu c ủ... Lu n vn th c s khoa h c nụng nghi p 22 3 I T NG, N I DUNG V PHNG PHP NGHIấN C U 3.1 i t ng - Gi ng chố ủ ng: Gi ng chố ủ ng s d ng ủ cung c p cnh giõm cú ngu n g c t cõy chố ủ ng Cao B ng (Ilex kaushue S Y HU) ủ c tr ng t i v n th c nghi m v v n m cỏc h gia ủỡnh cỏn b giỏo viờn c a tr ng Cao ủ ng ngh cụng ngh v Nụng lõm ụng B c t i H u Lng, L ng Sn cú ủ tu i 5 ủ n trờn 10 tu i Cõy chố ủ ng t i H... Qu c cú tờn khoa h c l Ilex kudingcha C J Tseng Trong cu n Th c v t chớ Võn Nam, Trung Qu c 1996 [15], Li Y.R ủó ủ nh lo i loi ny thnh 4 loi: I pentagona, I kaushue, I latifolia v I dunniana trong ủú cú 2 loi cú quan h ủ n chố ủ ng Vi t Nam: - I kaushue: cnh v cu ng hoa cú lụng t tha, phi n lỏ di 13-16 cm, gõn bờn rừ c hai m t, c m hoa m c t m v d ng chựm gi di 1cm, đi hoa ủ c hỡnh ủa, nh ng n hn cỏnh... hi u qu r t cao n ng ủ 100ppm, th i gian x lý 1-5 gi ch sau 7 - 10 ngy hom b t ủ u xu t hi n r v i t l ra r x p x 100%, 12 - 13 ngy r phỏt tri n m nh v sau 20 ngy cú th ủem tr ng th i gian trỏi v (hố, thu), hi u qu c a IAA kộm hn v ng i ta cú th thay b ng -NAA n ng ủ 6000 ppm v i th i gian x lý nhanh thỡ sau Tr ng i h c Nụng Nghi p H N i Lu n vn th c s khoa h c nụng nghi p 19 20 ngy cõy cú th ủ tiờu . chỉnh cho việc nhân giống cây chè ñằng bằng giâm cành, chúng tôi tiến hành ñề tài: Nghiên cứu khả năng nhân giống vô tính cây chè ñắng (Ilex kaushue S,Y Hu) bằng phương pháp giâm cành . 1.2 từng cây trồng mà ta chọn phương pháp nhân giống phù hợp. Với cây chè ñắng, chúng tôi chọn phương pháp nhân giống vô tính bằng cành giâm ñể nghiên cứu. ðể nhân giống thành công thì cành giâm. tính bằng phương pháp giâm cành 2.6.1. Phương thức nhân giống Có hai phương thức nhân giống ñối với thực vật là nhân giống hữu tính và nhân giống vô tính. Nhân giống hữu tính là sự tái tạo