Nghiên cứu phát hiện nhiễm virus gây u nhú ở người trong viêm và tân sản cổ tử cung qua xét nghiệm tế bào học, mô bệnh học, PCR

Ung thu cổ tử cung (UTCTC) là một trong những ung thu thuờng gặp ở phụ nữ, nó đứng vị trí hàng đầu ở những nuớc đang phát triển và ở vị trí thứ hai trên toàn cầu với khoảng 500.000 truờng hợp mới mắc và 250.000 ca tử vong mỗi nam (WHO 1989 dẫn theo NGUYỄN VUỢNG dịch 1990) 27.Tại Việt Nam, qua số liệu ghi nhận gần đây ở Hà Nội, UTCTC đứng hàng thứ ba ở phụ nữ sau ung thu vú và ung thu dạ dày, trong khi đó, tỷ lệ này đứng hàng đầu ở thành phố Hồ Chí Minh và ở các tỉnh phía Nam 1. Tuy nhiên, nhờ những nỗ lực gần đây của các nhà khoa học, phần lớn những nguy co gây UTCTC đã đuợc nhận diện, giúp cho việc phòng và phát hiện sớm UTCTC ngày một khả quan hon. Đặc biệt việc phát hiện ra virus sinh u nhú ở nguời (Human Papilloma Virus: HPV) là yếu tố nguy co cao nhất của UTCTC đã trở thành một vấn đề thời sự của y học hiện đại nói chung, u học nói riêng. Theo số liệu của co quan nghiên cứu ung thu quốc tế (IARC) 46, uớc tính tỷ lệ nhiễm HPV ở phụ nữ toàn cầu lên tới hàng tram triệu nguời, ít nhất khoảng 50% nam và nữ ở độ tuổi hoạt động tình dục đã từng bị nhiễm HPV. Tỷ lệ nhiễm cao nhất đuợc phát hiện là ở một số nuớc Châu Phi nhu Zimbabwe lên tới 41,6%. Ở một số nuớc Châu Á nhu Trung Quốc, Ấn Độ, Hàn Quốc, tỷ lệ nhiễm HPV tuong ứng là 18%, 16,9%, và 10,4%. Ở Việt Nam, chua có nghiên cứu, thống kê đầy đủ số nguời nhiễm HPV và những hậu quả về vật chất, tinh thần đối với nguời mắc bệnh do HPV gây ra. Vì vậy, chúng tôi chỉ đua ra những số liệu có tính thống kê hiện có tại một số thành phố nhu: Thành phố Hồ Chí Minh: tỷ lệ nhiễm HPV phát hiện đuợc là 9,9% đến 12%, ở Hà Nội là 1,86% 10 , 18, 19. Các bệnh do nhiễm HPV gây ra kể cả UTCTC, có thể chữa khỏi hẳn nếu đuợc phát hiện sớm. Điều quan trọng là làm sao phát hiện nhiễm HPV? và phải có một chuong trình sàng lọc đuợc áp dụng nhằm phát hiện sớm những truờng hợp nhiễm HPV, từ đó có biện pháp điều trị triệt để, ngan chặn nguy co tiến triển thành ung thu, nhất là ung thu xâm nhập 26 Trên thế giới, trong 2 nam 2005 2006 đã có hàng nghìn công trình nghiên cứu, tài liệu tham khảo về HPV đuợc đua lên mạng. Tại Việt Nam, từ nam 2002 đến nay, đã có một số công trình nghiên cứu nhằm phát hiện nhiễm HPV ở cổ tử cung qua phết TBH cổ tử cung, MBH (đã phổ biến) hoặc kỹ thuật PCR, lai tại chỗ (chua mở rộng) 4, 10, 18, 19, 23.Tuy nhiên, mỗi phuong pháp đều có những giá trị chẩn đoán khác nhau. Vì thế, chúng tôi tiến hành đề tài: “ Nghiên cứu phát hiện nhiễm virus gây u nhú ở nguời trong viêm và tân sản cổ tử cung qua xét nghiệm tế bào học, mô bệnh học, PCR” với mục tiêu: Buớc đầu xác định tỷ lệ nhiễm HPV trong viêm và tân sản CTC. Nghiên cứu giá trị của các phuong pháp phiến đồ AĐ – CTC, mô bệnh học và PCR trong việc phát hiện nhiễm HPV.

Bộ giáo dục và đào tạo Bộ y tế Trờng đại học y hà Nội Hứa thị giang Nghiên cứu phát hiện nhiễm virus gây u nhú ở ngời trong viêm và tân sản cổ tử cung qua xét nghiệm tế bào học, mô bệnh học, pcr Chuyên ngành : giảI phẫu bệnh Mã số : 60.72.01 Luận văn thạc sỹ y học Ngời hớng dẫn khoa học: GS.TS. nguyễn vợng Hà Nội - 2008 LỜI CẢM ƠN Trong quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn này, ngoài sự nỗ lực của bản thân, tôi ñã nhận ñược rất nhiều sự giúp ñỡ tận tình của nhà trường, các bệnh viện, các thầy, các cô và các ñồng nghiệp. Tôi xin chân thành cảm ơn: - ðảng uỷ, Ban giám hiệu, Phòng ñào tạo sau ñại học, bộ môn Giải Phẫu Bệnh - Trường ðại học Y Hà Nội. - ðảng uỷ, Ban giám ñốc- Bệnh viện ña khoa TW - Thái Nguyên. - GS. TS Nguyễn Vượng - Người thầy ñã trực tiếp truyền thụ kiến thức, tận tâm dìu dắt tôi từng bước trong quá trình học tập và hoàn thành luận văn này. - PGS. TS Trần Văn Hợp - Người thầy ñã tận tâm dạy dỗ, tạo mọi ñiều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình học tập và nghiên cứu. - TS Nguyễn Thị Lan Anh khoa sinh học phân tử - miễn dịch, Viện Vệ sinh dịch tễ TW. BS CKII. ðặng Thị Phương Loan; Ths. Chu Hồng Hạnh phòng 3 khoa khám bệnh - Bệnh viện K Hà Nội. - Các thầy, các cô bộ môn Giải Phẫu Bệnh - Trường ðại học Y Hà Nội. Các BS, KTV khoa GPB - Bệnh viện Bạch Mai, khoa GPB Bệnh viện K, khoa GPB Bệnh viện Phụ sản TW, khoa GPB Bệnh viện ña khoa TW- Thái Nguyên ñã tạo ñiều kiện giúp ñỡ tôi trong quá trình học tập và nghiên cứu. Tôi xin chân thành cảm ơn những người thân yêu trong gia ñình ñã luôn ñộng viên, khích lệ và tạo ñiều kiện cho tôi trong học tập và nghiên cứu. Hà Nội, ngày 25 tháng 11 năm 2008. Hứa Thị Giang NHỮNG TỪ VIẾT TẮT 1 CTC Cổ tử cung 2 ÂD - CTC Âm ñạo – cổ tử cung 3 HPV Human papilloma virus 4 UTCTC Ung thư cổ tử cung 5 MBH Mô bệnh học 6 TBH Tế bào học 7 PCR Polymerase Chain Reaction 8 SIL Tổn thương nội biểu mô 9 HSIL Tổn thương nội biểu mô ñộ cao 10 LSIL Tổn thương nội biểu mô ñộ thấp 11 XN Xâm nhập 12 CIN1 Loạn sản nhẹ 13 CIN2 Loạn sản vừa 14 CIN3 Loạn sản nặng 1 ðẶT VẤN ðỀ Ung thư cổ tử cung (UTCTC) là một trong những ung thư thường gặp ở phụ nữ, nó ñứng vị trí hàng ñầu ở những nước ñang phát triển và ở vị trí thứ hai trên toàn cầu với khoảng 500.000 trường hợp mới mắc và 250.000 ca tử vong mỗi năm (WHO 1989 - dẫn theo NGUYỄN VƯỢNG dịch -1990) [27].Tại Việt Nam, qua số liệu ghi nhận gần ñây ở Hà Nội, UTCTC ñứng hàng thứ ba ở phụ nữ sau ung thư vú và ung thư dạ dày, trong khi ñó, tỷ lệ này ñứng hàng ñầu ở thành phố Hồ Chí Minh và ở các tỉnh phía Nam [1]. Tuy nhiên, nhờ những nỗ lực gần ñây của các nhà khoa học, phần lớn những nguy cơ gây UTCTC ñã ñược nhận diện, giúp cho việc phòng và phát hiện sớm UTCTC ngày một khả quan hơn. ðặc biệt việc phát hiện ra virus sinh u nhú ở người (Human Papilloma Virus: HPV) là yếu tố nguy cơ cao nhất của UTCTC ñã trở thành một vấn ñề thời sự của y học hiện ñại nói chung, u học nói riêng. Theo số liệu của cơ quan nghiên cứu ung thư quốc tế (IARC) [46], ước tính tỷ lệ nhiễm HPV ở phụ nữ toàn cầu lên tới hàng trăm triệu người, ít nhất khoảng 50% nam và nữ ở ñộ tuổi hoạt ñộng tình dục ñã từng bị nhiễm HPV. Tỷ lệ nhiễm cao nhất ñược phát hiện là ở một số nước Châu Phi như Zimbabwe lên tới 41,6%. Ở một số nước Châu Á như Trung Quốc, Ấn ðộ, Hàn Quốc, tỷ lệ nhiễm HPV tương ứng là 18%, 16,9%, và 10,4%. Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu, thống kê ñầy ñủ số người nhiễm HPV và những hậu quả về vật chất, tinh thần ñối với người mắc bệnh do HPV gây ra. Vì vậy, chúng tôi chỉ ñưa ra những số liệu có tính thống kê hiện có tại một số thành phố như: Thành phố Hồ Chí Minh: tỷ lệ nhiễm HPV phát hiện ñược là 9,9% ñến 12%, ở Hà Nội là 1,86% [10] , [18], [ 19]. 2 Các bệnh do nhiễm HPV gây ra kể cả UTCTC, có thể chữa khỏi hẳn nếu ñược phát hiện sớm. ðiều quan trọng là làm sao phát hiện nhiễm HPV? và phải có một chương trình sàng lọc ñược áp dụng nhằm phát hiện sớm những trường hợp nhiễm HPV, từ ñó có biện pháp ñiều trị triệt ñể, ngăn chặn nguy cơ tiến triển thành ung thư, nhất là ung thư xâm nhập [26] Trên thế giới, trong 2 năm 2005- 2006 ñã có hàng nghìn công trình nghiên cứu, tài liệu tham khảo về HPV ñược ñưa lên mạng. Tại Việt Nam, từ năm 2002 ñến nay, ñã có một số công trình nghiên cứu nhằm phát hiện nhiễm HPV ở cổ tử cung qua phết TBH cổ tử cung, MBH (ñã phổ biến) hoặc kỹ thuật PCR, lai tại chỗ (chưa mở rộng) [4], [10], [ 18], [19], [23].Tuy nhiên, mỗi phương pháp ñều có những giá trị chẩn ñoán khác nhau. Vì thế, chúng tôi tiến hành ñề tài: “ Nghiên cứu phát hiện nhiễm virus gây u nhú ở người trong viêm và tân sản cổ tử cung qua xét nghiệm tế bào học, mô bệnh học, PCR” với mục tiêu: - Bước ñầu xác ñịnh tỷ lệ nhiễm HPV trong viêm và tân sản CTC. - Nghiên cứu giá trị của các phương pháp phiến ñồ Að – CTC, mô bệnh học và PCR trong việc phát hiện nhiễm HPV. 3 Chương 1 TỔNG QUAN 1.1.Dịch tễ học ung thư cổ tử cung (UTCTC ) 1.1.1.Tình hình ung thư cổ tử cung trên thế giới Ung thư cổ tử cung là một loại ung thư phổ biến ở hầu hết các nước trên thế giới. Theo hiệp hội quốc tế chống ung thư (UICC), tỷ lệ ung thư cổ tử cung chiếm 12% trong các loại ung thư ở nữ giới. Ở Pháp, cứ 100.000 phụ nữ ở tuổi 45 thì có 13 trường hợp mắc ung thư và con số này ngày càng tăng cao theo ñộ tuổi. Tần suất mới mắc hàng năm từ 20 ñến 85 trường hợp trong tổng số 100.000 phụ nữ [46]. Tỷ lệ tử vong do ung thư cổ tử cung rất khác biệt ở những nước khác nhau, cao nhất là ở Mexico (15,9/100.000 người), thấp nhất là ở Hy lạp (1,3/100.000 người ) [65]. Theo các nghiên cứu ñiều tra gần ñây thì tỷ lệ tử vong do UTCTC ñang có xu hướng giảm dần. Ở Mỹ, tỷ lệ mới mắc UTCTC năm 1947 là 44/100.000 người, ñến năm 1996 ñã giảm tỷ lệ mới mắc xuống 7,5/100.000 người do áp dụng rộng rãi sàng lọc phát hiện sớm UTCTC bằng kỹ thuật phiến ñồ nhuộm Papanicolaou [72]. 1.1.2. Tình hình UTCTC ở Việt Nam Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu thống kê về số lượng ung thư trên phạm vi cả nước và cũng không có thống kê cụ thể hàng năm về tỷ lệ mới mắc và tỷ lệ tử vong do ung thư. Theo kết quả ghi nhận ung thư gần ñây nhất, trong 4 năm, giai ñoạn từ 1/1/2001 ñến 31/12/2004 có 32.944 ca ung thư mới mắc ñã ñược ghi nhận tại 5 tỉnh thành. Tại Cần thơ, UTCTC ñứng hàng ñầu trong các loại ung thư ở nữ giới, tại Thừa Thiên Huế UTCTC ñứng hàng thứ ba, tại Hà Nội, Thái Nguyên, Hải Phòng, ñứng thứ tư [7]. 4 1.1.3. Những nguyên nhân gây UTCTC Rất nhiều nghiên cứu trước ñây ñã xác ñịnh có những mối liên quan rõ rệt với UTCTC như: Những phụ nữ có hoạt ñộng tình dục sớm (dưới 15 tuổi), có nhiều bạn tình, những người có con sớm, ñẻ nhiều, ñẻ dầy, dùng thuốc tránh thai, mắc bệnh lây truyền theo ñường tình dục, hút thuốc lá, dinh dưỡng kém, tiền sử có tổn thương viêm nhiễm cổ tử cung, nhất là loạn sản cổ tử cung không ñược ñiều trị triệt ñể [16], [26]. Ngày nay, nhờ những tiến bộ vượt bậc của y học hiện ñại, những nguyên nhân trên tuy vẫn ñược xác ñịnh nhưng chỉ có ý nghĩa phối hợp, hỗ trợ và thúc ñẩy sự phát triển u song nguyên nhân chính gây UTCTC ñã ñược khẳng ñịnh: ñó là virus gây u nhú ở người .Vì AND của virus HPV ñã ñược tìm thấy trong những trường hợp UTCTC với tỷ lệ khá cao, thường từ trên 70% ñến trên 90%, ñặc biệt các typ 16 và 18 [48], [ 59], [75]. ðồng thời, cũng ñã xác ñịnh ñược bước ñầu cơ chế gây ung thư của các týp virus ñó cũng như phòng ngừa tác hại của chúng bằng tiêm vacxin chống HPV. 1.2. HPV và nhiễm HPV cổ tử cung 1.2.1 Một số ñặc ñiểm cơ bản của HPV HPV (Human Papillomma Virus) thuộc họ Papovavirusdae, họ này bao gồm hai tộc là Papillomavirus và polyomavirus. Papillomavirus là những virus hiện nay rất ñược quan tâm vì nó ñóng vai trò quan trọng trong K.CTC. Polyomavirus thường gây nhiễm trùng không triệu chứng và kết hợp với một số bệnh thận. HPV có trên 100 typ, trong ñó có khoảng 20 - 30% số typ chưa giải mã ñược toàn bộ bộ gen, có 40 typ có thể gây bệnh ở cơ quan sinh dục nam, nữ. Về mối liên quan với ung thư, những tài liệu cập nhật của WHO (2006), CDC (2006) [54] cũng như của Geisinger và cs (2004) [56], DeMay (2005) [66] và nhiều tác giả khác ñều chia khái quát HPV thành hai nhóm chính: 5 + Các typ HPV có nguy cơ cao, sinh ung thư là: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58…trong ñó loại nguy hiểm nhất là các typ 16 và 18, có thể là thủ phạm của 70% UTCTC, 40% các ung thư dương vật, âm hộ, âm ñạo, 10% các ung thư vùng ñầu mặt cổ [45]. + Loại nguy cơ thấp, ít có khả năng sinh ung thư: Các typ 6, 11, 42, 43, 44…; Các typ 6, 11 tuy ít gây ung thư nhưng có thể gây 10% các tân sản nội biểu mô ñộ thấp cổ tử cung, khoảng 90% các mụn cóc, mào gà, sùi sinh dục cũng như bệnh u nhú tái phát ñường hô hấp. Brien PM và cs [52] còn nêu các typ 16, 18 có thể gây > 95% các ung thư cổ tử cung và typ 6, 11 có thể gây xung quanh 20% ung thư ñầu mặt cổ. Theo Bar (2001), HPV ñược tìm thấy trong 68,3% các trường hợp ñược nghiên cứu, trong ñó tỷ lệ HPV 16 dương tính là 54%, HPV 18 là 39%, cả hai loại gặp trong 25% số bệnh nhân ung thư. [48]. Geisinger K.M, Kurman RJ và cs qua y văn còn dẫn thêm một nhóm nguy cơ trung gian là các typ 31, 33, 35, 51, 52, thường kết hợp với những tân sản nội biểu mô ñộ thấp hoặc ñộ cao nhưng hiếm thấy trong ung thư biểu mô xâm nhập [56], [60] Hình 1: Hình ảnh virus HPV dưới kính hiển vi ñiện tử và mô hình xây dựng cấu trúc riêng của một virus HPV 6 1.2.2.Cơ chế sinh bệnh của HPV nói chung 1.2.2.1. ðường lây truyền Trong nhiều thập niên, y học ñã mô tả rõ những tổn thương mụn cơm, mụn cóc ñặc biệt các sùi mào gà ở da, thường gặp và biểu hiện rõ, ñiển hình ở dương vật, âm hộ, hậu môn và vì thế, từ lâu, người ta ñã hiểu HPV ñược lây truyền qua da và phổ biến nhất, qua ñường tình dục [47], [56], [61], [67], [73] và ñương nhiên không chỉ ở cơ quan sinh dục ngoài mà tất cả những nơi có liên quan trực tiếp hoặc gián tiếp (âm ñạo, CTC, hậu môn, ñường niệu, bàng quang). Việc sờ mó, hôn, ñồng tính luyến ái…có thể gây lây nhiễm qua niêm mạc miệng và từ ñó, có thể lan tới vùng mũi, họng, hạ hầu thanh quản và ñường hô hấp trên, thực quản. Như vậy, ñường lây truyền chủ yếu của HPV là qua da và niêm mạc. 1.2.2.2.Bệnh sinh do HPV nói chung Là vấn ñề phức tạp, chúng tôi chỉ nêu rất vắn tắt một số kết quả ñã ñược chứng minh. HPV gây nhiễm tế bào da (khi có sước, loét), niêm mạc (loại phủ biểu mô vảy) và nhân lên gây tổn thương (viêm, sước, loét, mụn cóc hay mụn cơm) sau thời kỳ nung bệnh khoảng từ một ñến hai tháng. Các tiến triển của tổn thương qua nhiều tháng (3 – 4 tháng) và không lây nhiễm vào tế bào lớp sâu hơn. DNA của virus có thể tồn tại bên trong tế bào niêm mạc và tái hoạt ñộng. Trong những u lành và ác tính của ñường sinh dục, genom của HPV vẫn tồn tại bên trong tế bào và liên quan ñến các yếu tố tương tác. HPV typ 16 và 18 gây u nhú (Papilloma) cổ tử cung, loạn sản và UTCTC, ít nhất có 85% DNA của HPV tích hợp vào gen tế bào. Ngoài dạng tích hợp, DNA của HPV còn tồn tại dạng plasmid, nhưng dạng tích hợp nhiều hơn dạng plasmid. Sự tích hợp này gây ra bất hoạt của các gen E1 và E2 và do vậy, sự sao mã là giới hạn trong các gen E6 và E7. E6 và E7 là các gen gây ung thư (oncogen) chúng tạo nên các protein gắn và bất hoạt protein p53 7 (E6) và p105 Rb (E7). Nếu liên kết này không bị phá vỡ, nhiễm sắc thể dễ dàng ñột nhập và dưới sự tác ñộng của một số yếu tố khác, tế bào sẽ dễ dàng chuyển thành ác tính. 1.2.3. Nhiễm HPV và bệnh UTCTC Mối liên quan giữa nhiễm HPV và UTCTC ñã ñược xác ñịnh từ những năm 70 của thế kỷ 20, theo ñó, HPV gây ra rối loạn sinh sản của tế bào biểu mô CTC. Tần xuất lưu hành HPV là rất cao ở nhóm tuổi ñã có sinh hoạt tình dục, kể cả nam và nữ. Nhóm tuổi 20 – 29 bị nhiễm HPV cao nhất. Một nghiên cứu theo dõi bằng phiến ñồ nhuộm Papanicolaou ở phụ nữ trẻ tuổi trong hai năm ñã nhận thấy tỷ lệ nhiễm HPV trong năm ñầu là 3%, trong năm sau là 7%[12]. Tỷ lệ mới mắc HPV hàng năm là 7%. Qua những số liệu thu ñược khi nghiên cứu HPV sử dụng PCR, Vandormin và cộng sự (1992) [trích dẫn từ 13] ñã nhận thấy trong nhóm những người có nguy cơ cao bị bệnh lây truyền qua ñường tình dục và có nhiều bạn tình thì tỷ lệ mới mắc HPV ở phụ nữ là 47,1/ 100 người / năm, ở nam giới là 50,5 /100 người / năm. 1.2.3.1.Lịch sử tiến triển tự nhiên của ung thư cổ tử cung Sau khi HPV tấn công vào lớp tế bào ñáy của biểu mô cổ tử cung, HPV hầu như chỉ hiện diện tại chỗ và không ñi vào mạch máu, do ñó không gây ra tình trạng viêm, không hoạt hoá hệ miễn dịch, và hầu như không gây miễn nhiễm sau khi ñã nhiễm tự nhiên HPV. Tuy nhiên không phải tất cả các trường hợp nhiễm HPV nào cũng ñều tiến triển thành UTCTC. Nhiễm HPV dù bất kỳ nhóm nào ñều có khả năng tự lui bệnh và không ñể lại di chứng cho người bị nhiễm. Một số trường hợp nhiễm kéo dài, ñặc biệt do nhiễm nhóm nguy cơ cao sẽ gây các tổn thương về mô học của cổ tử cung theo diễn tiến từ quá sản tế bào dự trữ, dị sản vảy, ASCUS, AGUS, loạn sản nhẹ , loạn sản vừa, loạn sản nặng, ung thư tại chỗ, ung thư vi xâm nhập, ung thư xâm nhập. [...]... dò không lai và quan sát k t qu trên các máy ñ c huỳnh quang Máy ñ c huỳnh quang có u ñi m là có nhi u m u nên m i m u s ng v i m t lo i ñ u dò căn c vào m u c a tín hi u có th xác ñ nh ñư c typ HPV và căn c vào cư ng ñ m u có th xác ñ nh ñư c s lư ng b n sao chép h gen trong t bào Căn c vào hình d ng d i m u th ng hay ch m tròn có th xác ñ nh ñư c h gen c a virus có l ng vào h gen c a t bào ch hay... m PCR 2.2 ð a ñi m và th i gian nghiên c u : 2.2.1 ð a ñi m : Nghiên c u ñư c th c hi n t i B nh vi n K và qu n Hoàng Mai - Hà N i 2.2.2.Th i gian nghiên c u : T tháng 01/2007 ñ n tháng 07/2008 28 2.3 Phương pháp nghiên c u : 2.3.1 Chi n lư c thi t k nghiên c u : Chúng tôi ti n hành nghiên c u theo phương pháp nghiên c u ti n c u và mô t c t ngang 2.3.2 C m u và ch n m u : C m u: D a vào k t qu nghiên. .. nh rõ khác ñư c ho c ñ nh rõ trong d n gi i) + T bào tuy n (NOS: không ñ nh rõ khác ñư c ho c ñ nh rõ trong d n gi i) - Không ñi n hình: + Các t bào c trong t cung, thiên v (trông gi ng) tân s n + Các t bào tuy n, thiên v (trông gi ng) tân s n - Ung thư bi u mô tuy n t i ch (in situ) - Ung thư bi u mô tuy n + C trong t cung + N i m c t cung + Ngoài t cung + Không ñ nh rõ khác ñư c (NOS: not otherwise... 2 ASC-US có 1 L.SIL; 3,3 L.SIL có 1H.SIL và 20 H.SIL có 1 ung thư AGUS cũng hi m th y tương t như ung thư bi u mô tuy n song còn r t ít ñư c quan tâm Vi t Nam T l ung thư bi u mô tuy n có tăng trong nh ng năm g n ñây và ít nhi u có liên quan ñ n n i ti t sinh d c n song nguyên nhân cơ b n v n là do HPV Nghiên c u c a Iwasawa và cs (1996) [59] trên 352 b nh nhân UTCTC tìm th y 92% ung thư bi u mô v y... d ng: PCR chung cho m i typ HPV và PCR riêng cho t ng typ HPV - PCR chung cho phát hi n m i typ HPV còn ñư c g i là PCR ñ c hi u theo nhóm, phát hi n virus thu c cùng m t nhóm M c ñích c a phương pháp này là ch c n m t ph n ng PCR mà phát hi n ñư c nhi u typ HPV và phân bi t HPV v i các lo i virus gây ung thư khác Do v y, PCR trong trư ng h p này ph i s d ng các c p m i (Primer) chung cho nhi u typ... ñ u dò ñư c ñánh d u phóng x ho c v i các tín hi u ph n ng hoá h c Sau ñó, phát hi n tín hi u lai nh các máy t ch p ghi nh phóng x huỳnh quang ho c nh m t máy dò tìm phát hi n và ghi l i m u c a các ph n ng hoá h c Lai t i ch có th ñ nh v các trình t axit nucleic c a HPV bên trong m i t bào, trong các m u t bào và các m u mô ñã ñư c b o qu n Cho phép ñánh giá ñ ng th i các thay ñ i v t bào h c và mô. .. 1.2.3.2 Cơ ch gây ung thư c a HPV trong UTCTC: Là v n ñ khá ph c t p và ph i ñi s u m i lý gi i ñư c tương ñ i tho ñáng Như y văn ñã n u có hai lo i có nguy cơ cao nh t là các týp HPV 16 và 18 Các typ 6 và 11 gây ung thư âm v t, âm h nhi u hơn là c t cung M t ñi m r t quan tr ng là HPV ñ t nh p các t bào ñáy (l p t bào sinh s n) c a c t cung, vì sau ñó các t bào này m i phát tri n thành các t bào v y ñã... v y có ch a DNA c a HPV và 75% ung thư bi u mô tuy n có ch a DNA c a HPV Nh ng ti u chu n ch n ñoán ASCUS, AGUS Vi t Nam ñã ñư c Nguy n Vư ng và cs gi i thi u trong m t s tài li u ñã xu t b n [41], [42], [43] ðó là: +ASCUS: T bào và nhân to nh không ñ u nhau, bào tương ưa bazơ, nhân to g p 2- 3 l n nhân t bào trung gian bình thư ng, nghĩa là to hơn nhân t bào d s n T l nhân/ bào tương tăng nh ñ n v... ng (ho c t bào bóng): có ngu n g c t t bào v y thành th c (thư ng là lo i t bào ngo i vi ho c trung gian) ho c t bào v y d s n c a vùng chuy n ti p T bào thư ng to hơn t bào d s n v y, gi m ho c m t tính ña di n làm cho t bào có xu hư ng tròn hơn (nguyên nhân vi c ñ t tên t bào bóng) và 16 ñ c trưng b ng các qu ng sáng quanh nhân h u như không bao gi thi u v i m c ñ không ñ u nhau quây quanh các nhân... nhà nghiên c u ph i nh n di n chính xác th t b sung c a các trình t axit nucleic trong ñ u dò v i trình t DNA c a HPV 2 ðánh d u ñ u dò: các m u dò sau khi ñã ñư c nh n d ng c n ñánh d u v i huỳnh quang 3 Bi n tính nhi m s c th và ñ u dò: bi n tính b ng ki m ñ u dò s ñi vào trong t bào gi ng như cơ ch bi n n p 4 Lai x y ra các nhi t ñ lai thích h p ñ quá trình lai gi a ñ u dò và ñích 26 5 R a các ñ u . phát hiện nhiễm virus gây u nhú ở người trong viêm và tân sản cổ tử cung qua xét nghiệm tế bào học, mô bệnh học, PCR với mục ti u: - Bước ñ u xác ñịnh tỷ lệ nhiễm HPV trong viêm và tân sản. dục và đào tạo Bộ y tế Trờng đại học y hà Nội Hứa thị giang Nghiên c u phát hiện nhiễm virus gây u nhú ở ngời trong viêm và tân sản cổ tử cung qua. typ 6 và 11 gây ung thư ở âm vật, âm hộ nhi u hơn là ở cổ tử cung. Một ñiểm rất quan trọng là HPV ñột nhập các tế bào ñáy (lớp tế bào sinh sản) của cổ tử cung, vì sau ñó các tế bào này mới phát