Xác định tỷ lệ nhiễm salmonella SPP trên thịt lợn bán tại các chợ ở hà nội và nghiên cứu khả năng kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn phân lập được

B GIÁO D C VÀ ðÀO T O TRƯ NG ð I H C NÔNG NGHI P HÀ N I - - TR N TH THU H NG XÁC ð NH T L NHI M SALMONELLA SPP TRÊN TH T L N BÁN T I CÁC CH HÀ N I VÀ NGHIÊN C U KH NĂNG KHÁNG KHÁNG SINH C A CÁC CH NG VI KHU N PHÂN L P ðƯ C LU N VĂN TH C SĨ NÔNG NGHI P Chuyên ngành : Thú y Mã s : 60 64 0101 Ngư i hư ng d n khoa h c: PGS.TS PH M NG C TH CH Hà N i - 2012 L I CAM ðOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên c u tơi tr c ti p th c hi n v i s giúp ñ c a t p th cán b B môn N i ch n – Dư c – ð c ch t khoa Thú y trư ng ñ i h c Nông nghi p Hà N i, b môn Vi trùng – Vi n Thú y qu c gia dư i s hư ng d n khoa h c c a PGS TS Ph m Ng c Th ch Các s li u, k t qu trình bày lu n văn trung th c chưa t ng đư c cơng b cơng trình nghiên c u khác Các tài li u trích d n ñ u ñư c ch rõ ngu n g c xu t x , tên tác gi Hà n i, ngày tháng năm 2012 Tác gi lu n văn Tr n Th Thu H ng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… i L I C M ƠN L i đ u tiên, tơi xin nói l i c m ơn chân thành nh t t i PGS.TS Ph m Ng c Th ch – ngư i Th y ñã t n tình hư ng d n, giúp ñ tơi su t q trình th c t p hoàn thành lu n văn t t nghi p ð ng th i, xin chân thành c m ơn t p th cán b B môn N i ch n – Dư c – ð c ch t th y, cô khoa Thú y ñã t o m i ñi u ki n giúp tơi hồn thành đ tài nghiên c u Tơi xin ñư c bày t l i c m ơn chân thành t i Ban qu n lý ñào t o - Trư ng đ i h c Nơng nghi p Hà N i ñã t o ñi u ki n thu n l i cho su t hai năm h c v a qua Cu i xin g i l i c m ơn chân thành t i t p th b môn Vi trùng – vi n Thú y qu c gia, gia đình, b n bè ñ ng nghi p ñã ñ ng viên giúp đ tơi su t th i gian h c t p t i trư ng Hà n i, ngày tháng năm 2012 Tác gi lu n văn Tr n Th Thu H ng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… ii M CL C Trang L I CAM ðOAN i L I C M ƠN ii M C L C iii DANH M C CÁC T VI T T T vi DANH M C CÁC B NG vii DANH M C HÌNH, SƠ ð .viii DANH M C NH ix PH N I M ð U 1.1 ð t v n ñ 1.2 M c tiêu nghiên c u PH N II T NG QUAN TÀI LI U 2.1 Tình hình nhi m Salmonella th c ph m có ngu n g c ñ ng v t 2.2 M t s hi u bi t v vi khu n Salmonella 2.2.1 ð c tính hình thái, ni c y tính ch t sinh hóa c a vi khu n Salmonella 2.2.2 C u trúc kháng nguyên c a vi khu n Salmonella 11 2.2.3 Các y u t ñ c l c c a vi khu n Salmonella 13 2.2.4 Kh gây b nh c a vi khu n Salmonella 19 2.5.5 Các y u t nh hư ng ñ n s phát tri n t n t i c a Salmonella th c ph m 20 2.3 M t s nghiên c u v ô nhi m Salmonella th c ph m t i Vi t Nam 21 2.4 Hi n tư ng kháng kháng sinh c a vi khu n 25 2.5 M t s nghiên c u v tính kháng thu c c a vi khu n Salmonella 27 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… iii PH N III ð I TƯ NG, N I DUNG, NGUYÊN LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 31 3.1 ð i tư ng, ñ a ñi m th i gian nghiên c u 31 3.1.1 ð i tư ng nghiên c u 31 3.1.2 ð a ñi m nghiên c u 31 3.1.3 Th i gian nghiên c u 31 3.2 N i dung nghiên c u 31 3.3 Nguyên li u dùng nghiên c u 31 3.4 Phương pháp nghiên c u 33 3.4.1 Phương pháp l y m u 33 3.4.2 Phương pháp nuôi c y, phân l p vi khu n Salmonella 33 3.4.3 Phương pháp giám ñ nh vi khu n Salmonella phân l p ñư c 33 3.4.4 Phương pháp xác ñ nh serotyp c a vi khu n Salmonella phân l p ñư c 34 3.4.5 Phương pháp xác ñ nh kh m n c m v i kháng sinh 37 3.4.6 Phương pháp xác ñ nh m t s gen mã hóa tính kháng kháng sinh c a vi khu n Salmonella b ng ph n ng PCR 38 3.4.7 Phương pháp x lý s li u 40 PH N IV K T QU VÀ TH O LU N 41 4.1 K t qu phân l p xác ñ nh t l nhi m vi khu n Salmonella spp 41 4.1.1 K t qu xác ñ nh t l nhi m vi khu n Salmonella spp t m u th t l n m u lau d ng c bán th t l n 41 4.1.2 K t qu xác ñ nh t l nhi m vi khu n Salmonella spp theo ñ a bàn nghiên c u 44 4.1.3 T n su t ch có m u dương tính v i vi khu n Salmonella spp 46 4.2 K t qu giám ñ nh m t s đ c tính ni c y đ c tính sinh hóa c a ch ng Salmonella spp phân l p ñư c 48 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… iv 4.3 K t qu xác ñ nh serotyp c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c 54 4.4 K t qu ki m tra kh kháng kháng sinh c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c 58 4.5 K t qu xác ñ nh m t s gen mã hóa tính kháng kháng sinh c a vi khu n Salmonella phân l p ñư c 64 PH N V K T LU N VÀ ð NGH 68 5.1 K t lu n 68 5.2 ð ngh 68 TÀI LI U THAM KH O 69 PH L C 77 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… v DANH M C CÁC T VI T T T BGA Briliant green agar BHI Brain heart infusion BPW Buffered peptone water CHO Chinese Hamster Ovary DLH Deoxycholate Hydrogen sulfide Lactose agar DPF Delayed Permeability Factor EMB Eosin Methylene Blue ETEC Enterotoxigenic E.coli GTP Guanosine triphosphate GDP Guanosine diphosphate LT Heat Labile Toxin LIM Lysine Indole Motility MR Methyl red LPS Lipopolysaccharide LIM Lysine Indole Motility PCR Polymerase Chain Reaction PFGE Pulsed-Field Gel Electrophoresis R Rough RPE Rated Perceived Exertion RPF Rapid Permeability Factor RV Rappaports Vassiliadis SS Salmonella shigella S Smooth ST Heat – stabile toxin TSI Triple sugar iron XLD Xylose lysine deoxycholate Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… vi DANH M C CÁC B NG Trang B ng 3.1 B ng ñánh giá m c ñ m n c m c a vi khu n v i m t s lo i kháng sinh 38 B ng 3.2 Trình t c p m i kích thư c s n ph m PCR tương ng 39 B ng 4.1 K t qu xác ñ nh t l nhi m vi khu n Salmonella spp t m u th t l n m u lau d ng c bán th t l n 41 B ng 4.2 K t qu xác ñ nh t l nhi m vi khu n Salmonella spp theo ñ a bàn nghiên c u 44 B ng 4.3 T n su t ch có mÉu dương tính v i Salmonella spp 46 B ng 4.4 K t qu ki m tra m t s ñ c tính ni c y c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c 49 B ng 4.5 K t qu giám ñ nh m t s đ c tính sinh hố c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c 52 B ng 4.6 K t qu xác ñ nh serotyp c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c 55 B ng 4.7 T n su t xu t hi n c a serovar Salmonella t i ñ a bàn nghiên c u 58 B ng 4.8 K t qu ki m tra kh kháng kháng sinh c a ch ng Salmonella phân l p ñư c 60 B ng 4.9 T ng h p kh kháng kháng sinh c a ch ng Salmonella phân l p ñư c 62 B ng 4.10 K t qu xác ñ nh m t s gen mã hóa tính kháng kháng sinh c a vi khu n Salmonella phân l p ñư c 64 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… vii DANH M C HÌNH, SƠ ð Trang Hình 4.1 Bi u ñ so sánh t l nhi m Salmonella spp gi a m u th t l n m u lau d ng c bán th t l n 42 Hình 4.2 T l nhi m vi khu n Salmonella spp theo ñ a bàn nghiên c u 45 Hình 4.3 T l ch có m u dương tính v i Salmonella spp 46 Hình 4.4 T l serotyp c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c ñ i v i m u th t 55 Hình 4.5 T l serotyp c a ch ng vi khu n Salmonella spp phân l p ñư c ñ i v i m u lau 56 Hình 4.6 T l kháng kháng sinh c a ch ng Salmonella phân l p ñư c 63 Hình 4.7 T l gen kháng kháng sinh tetA, blaTEM c a vi khu n Salmonella 65 Sơ ñ 3.1 Quy trình phân l p giám ñ nh vi khu n Salmonella t m u th t l n m u lau d ng c bán th t l n 34 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… viii DANH M C NH Trang nh 4.1 Hình thái vi khu n Salmonella dư i kính hi n vi (x1000 l n) 50 nh 4.2 Vi khu n Salmonella môi trư ng Malonate 50 nh 4.3 Khu n l c Salmonella môi trư ng CHROM 53 nh 4.4 Khu n l c Salmonella môi trư ng DHL 53 nh 4.5 Vi khu n Salmonella môi trư ng TSI 54 nh 4.6 Gen kháng kháng sinh v i Ampicillin (blaTEM ) c a vi khu n Salmonella 66 nh 4.7 Gen kháng kháng sinh v i Tetracycline (tet A(A) c a vi khu n Salmonella 66 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… ix T l (%) 80 70 60 50 40 30 20 10 Ofloxacin Ceftiofur Cephalothin Amikacin Norfloxacin Enrofloxacin Ciprofloxacin Gentamycin Tetracycline Sulfisoxazole Streptomycin Kanamycin Chloramphenicol Ampicillin Lo i kháng sinh Hình 4.6 T l kháng kháng sinh c a ch ng Salmonella phân l p ñư c T k t qu ki m tra kh kháng kháng sinh b ng 4.9 hình 4.6 cho th y: ch ng Salmonella phân l p đư c có kh kháng ñ ng th i v i nhi u lo i kháng sinh khác nhau, ñ c bi t ch ng S typhimurium S derby v i kh kháng l n lư t 11/14 10/14 lo i kháng sinh ki m tra v i t l kháng r t cao ði u h t s c nguy hi m, v y c n có nh ng nghiên c u sâu xác ñ nh ki u gen kháng thu c c a vi khu n đ có th đánh giá đ y ñ v kh kháng thu c c a vi khu n, t đưa bi n pháp đ i phó phù h p đ phịng ch ng ki m soát s lây lan c a m m b nh Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 63 4.5 K t qu xác ñ nh m t s gen mã hóa tính kháng kháng sinh c a vi khu n Salmonella phân l p ñư c Trong nghiên c u này, s d ng ph n ng PCR ñ xác ñ nh gen mã hóa tính kháng kháng sinh c a m t s ch ng vi khu n Salmonella qua ki m tra có kh kháng kháng sinh Chúng tơi ti n hành ki m tra lo i gen kháng kháng sinh là: i) gen blaTEM kháng ampicillin đ i v i 25 ch ng Salmonella qua ki m tra kháng sinh đ có kh kháng v i ampicillin g m 12 ch ng S typhimurium, ch ng S derby, ch ng S rissen, ch ng S anatum ch ng S sandow; ii) gen tetA (A) ñ i v i 29 ch ng Salmonella qua ki m tra kháng sinh đ có kh kháng v i tetracycline g m 13 ch ng S typhimurium, 10 ch ng S derby, ch ng S rissen, ch ng S anatum ch ng S sandow K t qu thu ñư c trình bày b ng 4.10 B ng 4.10 K t qu xác đ nh m t s gen mã hóa tính kháng kháng sinh c a vi khu n Salmonella phân l p ñư c Gen kháng kháng sinh Ch ng Salmonella blaTEM tetA (A) S ch ng dương tính/s ch ng ki m tra T l T l (%) S ch ng dương tính/s ch ng ki m tra S typhimurium 9/12 75,0 12/13 92,3 S derby 7/9 77,7 7/10 70,0 S rissen 0/1 0,0 ½ 50,0 S anatum 0/1 0,0 0/2 0,0 S sandow 1/2 50,0 0/2 0,0 17/25 68,0 20/29 68,97 T ng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… (%) 64 T l (%) 100.00 92.30 90.00 80.00 75.00 77.70 70.00 70.00 60.00 50.00 50.00 blaTEM 50.00 tetA (A) 40.00 30.00 20.00 10.00 0.00 S typhimurium S derby S rissen S anatum S sandow Ch ng Salmonella Hình 4.7 T l gen kháng kháng sinh tetA, blaTEM c a vi khu n Salmonella K t qu b ng 4.10 hình 4.7 cho th y: - ð i v i gen blaTEM: Có 17 s 25 ch ng Salmonella ki m tra g m: 9/12 ch ng S typhimurium (t l 75,0%), 7/9 ch ng S derby (t l 77,7 %) ½ ch ng S sandow (t l 50,0%) có ch a gen blaTEM, v i s n ph m PCR 310 bp Các ch ng cịn l i khơng có gen - ð i v i gen tetA (A): Có 20 t ng s 29 ch ng Salmonella bao g m: 12/13 ch ng S typhimurium (t l 92,3%), 7/10 ch ng S derby (70,0%) ½ ch ng S rissen (t l 50,0%) ki m tra đ u có ch a gen tetA (A) v i s n ph m PCR 210 bp, ch ng l i ki m tra đ u khơng có ch a gen Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 65 10 11 M nh 4.6 Gen kháng kháng sinh v i Ampicillin (blaTEM ) c a vi khu n Salmonella - Gi ng 1: ñ i ch ng dương blaTEM - Gi ng 4: ñ i ch ng âm blaTEM - Gi ng 2,3,5,6,8,9,10,11 blaTEM dương tính (s n ph m 310 bp) - Gi ng 7: blaTEM âm tính - Gi ng M: Thang chu n 100 bp M nh 4.7 Gen kháng kháng sinh v i Tetracycline (tet A(A) c a vi khu n Salmonella - Gi ng 1: ñ i ch ng dương tet A(A) - Gi ng 2: ñ i ch ng âm tet A(A) - Gi ng 4, 6, 7, 9: tet A(A) dương tính - Gi ng 3,5,8: tet A(A) âm tính Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 66 - Gi ng M: thang chu n 100 bp T ng h p k t qu cho th y có 68% ch ng Salmonella kháng kháng sinh ampicillin đem ki m tra có ch a gen blaTEM, 68,97% ch ng kháng tetracycline có ch a gen tetA (A) K t qu c a có s khác bi t nh v i k t qu nghiên c u c a Hoàng Hoài Phương (2008) v i 90,9% ch ng Salmonella spp phân l p t th c ph m kháng đa kháng sinh có ch a gen blaTEM 63,6% ch ng có ch a gen tetA (A) Qua k t qu cho th y, ph n l n ch ng S typhimurium S derby có kh kháng kháng sinh qua ki m tra đ u có ch a gen kháng kháng sinh blaTEM tetA (A) tương ng Trong đó, có ch ng S typhimurium ch ng S derby ki m tra ch a ñ ng th i c lo i gen ðây m t k t qu r t ñáng báo ñ ng, nh t ñ i v i ch ng vi khu n S typhimurium ch ng vi khu n gây b nh thư ng g p l n ngư i, kh kháng kháng sinh cao c a chúng s gây r t nhi u khó khăn vi c u tr b nh ki m soát s lây lan c a chúng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 67 PH N V K T LU N VÀ ð NGH 5.1 K t lu n Từ kết nghiên cứu đ thu đợc, rút sè kÕt luËn sau: 5.1.1.T l nhi m vi khu n Salmonella spp m u nghiên c u trung bình 28,4%, t l phân l p ñư c vi khu n bày bán th t l n 33,8% m u lau d ng c m u th t l n 23,1% 5.1.2 Các ch ng Salmonella phân l p ñư c thu c v serovar g m: 15 ch ng S typhimurium (chi m t l 40,54%), 12 ch ng S derby (chi m t l 32,43%), ch ng S rissen (chi m 8,11%), ch ng S anatum (chi m 5,41%) ch ng thu c S sandow (chi m t l 13,51%) 5.1.3 S typhimurium S derby serovar có nhi u ch ng kháng v i nhi u lo i kháng sinh nh t v i kh kháng l n lư t v i 11/14 10/14 lo i kháng sinh ki m tra, serovar l i S rissen, S anatum S sandow kháng l i 4-5 lo i kháng sinh Tuy nhiên t t c ch ng ñ u m n c m v i ofloxacin ceftiofur 5.1.4 Có 68,0% ch ng Salmonella ki m tra có ch a gen blaTEM kháng ampicillin 68,97% ch ng ki m tra có ch a gen tetA (A) kháng tetracycline 5.2 ð ngh Ti p t c nghiên c u xác ñ nh t h p gen kháng kháng sinh khác c a ch ng Salmonella spp phân l p ñư c y u t ñ c l c c a chúng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 68 TÀI LI U THAM KH O Tài li u ti ng Vi t Nguy n H u Bình (1991), B nh thương hàn Bách khoa b nh h c t p I Trung tâm qu c gia biên so n T ñi n Bách khoa Vi t nam, 1991 Tr 80 - 84 Phùng Qu c Chư ng (1995), Tình hình nhi m Salmonella l n t i vùng Tây Nguyên kh phòng tr Lu n án PTS khoa h c nông nghi p, Trư ng ð i h c Nông nghi p I Hà N i Phùng Qu c Chư ng (2005), K t qu ki m tra tính m n c m c a m t s thu c kháng sinh c a vi khu n Salmonella phân l p t v t ni t i ðăkLăk T p chí Khoa h c k thu t thú y, s 1, tr 53 ð Trung C (2004), Phân l p xác ñ nh y u t gây b nh c a Salmonella l n t i m t s t nh mi n núi phía B c bi n pháp phòng tr Lu n án Ti n s nông nghi p, Vi n Thú y Qu c gia ð Trung C , Tr n Th H nh, Nguy n Quang Tuyên (2001), K t qu phân l p xác ñ nh m t s y u t gây b nh c a vi khu n Salmonella spp gây b nh Phó thương hàn l n m t s t nh mi n núi phía B c T p chí Khoa h c k thu t thú y, s 3, tr 10-17 ð Trung C , Tr n Th H nh, Nguy n Quang Tuyên, ð Th Lan Phương (2003), Xác ñ nh m t s y u t gây b nh c a Salmonella Typhimurium phân l p t l n b tiêu ch y m t s t nh mi n núi phía B c T p chí Khoa h c k thu t thú y, s 4, tr 33-37 Tr n Quang Diên (2002), Nghiên c u tình hình nhi m, ñ c tính gây b nh c a Salmonella gallinarum pullorum gà công nghi p ch kháng nguyên ch n đốn Lu n án Ti n s nơng nghi p, Trư ng ð i h c Nông nghi p I, Hà N i Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 69 Tr n Th H nh c ng s (1999), Tình hình nhi m Salmonella mơi trư ng chăn nuôi gà công nghi p s n ph m chăn ni T p chí KHKT Thú Y, T p VI, s 1/1999, tr 6-12 Tr n Th H nh, Nguy n Ti n Thành, Ngô Văn B c, Trương Th Hương Giang, Trương Th Quý Dương (2009), T l nhi m Salmonella spp t i s gi t m l n công nghi p th cơng T p chí Khoa h c K thu t Thú y, T p XVI, s 2, tr 51-56 10 Tr n Xuân H nh (1995), Phân l p giám ñ nh vi khu n Salmonella l n tu i gi t th t T p chí KHKT Thú Y, T p III, s 3/1995, tr 89 11 Tr n T nh Hi n S d ng kháng sinh th tình tr ng kháng kháng sinh c a vi khu n? www.ykhoanet.com/tapchiyhoc/9908/B1HienKS-3tr182-184.htm 12 Ph m Th Thanh Huy n (2010) Phân l p xác ñ nh m t s ñ c tính sinh v t h c c a vi khu n Salmonella spp t th t tươi t i m t s ch siêu th ñ a bàn Hà N i Lu n văn Th c s nông nghi p, trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i 13 Nguy n Lương (1998) Salmonella ng ñ c th c ăn ngư i ñ ng v t có kh gây n ð , Canada, Rumani, Tây Ban Nha Thông tin thú y, s 6/1998, tr 14 14 Nguy n Th Hoa Lý (1998) M t s lo i vi khu n gây b nh ch y u s a tươi T p chí KHKT Thú Y, T p V, s 1/1998.Tr8 15 Tr n Th Nhài (2005) Nghiên c u hi n tr ng ô nhi m vi khu n th t tươi s ng th trư ng Hà N i ð xu t m t s gi i pháp k thu t Lu n văn Th c sĩ nông nghi p, Vi n Khoa h c Nông nghi p Vi t Nam, Hà N i 16 Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên, Vũ Bình Minh, ð Ng c Thuý (2000) Phân l p vi khu n E.coli Salmonella l n m c b nh tiêu ch y, xác ñ nh m t s ñ c tính sinh v t hố h c c a ch ng vi khu n Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 70 phân l p ñư c bi n pháp phòng tr K t qu nghiên c u Khoa h c k thu t thú y (1996-2000), NXB Nông nghi p, Hà N i, tr 171-176 17 Nguy n Vĩnh Phư c (1970) Vi sinh v t h c thú y NXB ð i h c trung h c chuyên nghi p Hà N i 18 Hoàng Hoài Phương, Nguy n Th Kê , Ph m Hùng Vân, Nguy n ð Phúc, Nguy n Th Anh ðào, Tr n Th Ng c Phương (2008) Kh o sát gen kháng kháng sinh c a m t s vi khu n gây b nh phân l p t th c ph m T p chí Y h c thành ph H Chí Minh, t p 12, b sung s năm 2008, tr 283-290 19 Lê Minh Sơn (2003) Nghiên c u m t s vi khu n gây ô nhi m th t l n vùng h u ng n Sông H ng Lu n án ti n sĩ nông nghi p, Vi n Khoa h c k thu t Nông nghi p Vi t Nam, Hà N i 20 Lê Văn T o (1993) Phân l p, ñ nh danh vi khu n Salmonella gây b nh cho l n Báo cáo khoa h c mã s KN 02 – 15, NXB Nông nghi p, Hà N i 21 Nguy n Như Thanh, Nguy n Bá Hiên, Tr n Th Lan Hương (1997) Vi sinh v t Thú y NXB Nông nghi p, Hà N i 22 Ph m T t Th ng, Lã Văn Kính, ð H u Phương Th c tr ng nh n thu c c a vi khu n gây b nh tiêu ch y h i ch ng hô h p l n th t khu v c mi n ðông Nam B Vi n Khoa h c Nơng nghi p Mi n Nam T p chí Chăn ni s 21 23 Tơ liên Thu (2005) Tình tr ng kháng kháng sinh c a vi khu n Salmonella E.coli phân l p ñư c t th t l n th t gà t i vùng ñ ng b ng B c b T p chí Khoa h c k thu t thú y, s 4, tr 29 – 35 24 Bùi Như Thu n, Nguy n Phùng Ti n, Bùi Minh ð c (1991) Ng ñ c th c ăn Ki m nghi m ch t lư ng tra v sinh an toàn th c ph m, T p I Nhà xu t b n y h c, 1991 Tr 153 - 164 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 71 25 ð Ng c Thúy, Cù H u Phú, Văn Th Hư ng, ðào Th H o, Nguy n Xuân Huyên, Nguy n B ch Hu (2006) ðánh giá tình hình nhi m m t s lo i vi khu n gây b nh th t tươi ñ a bàn Hà N i T p chí Khoa h c K thu t Thú y T p XIII, s Trang 48-54 26 Ph m Văn Tu t (1999) Ng ñ c Salmonella T p chí Thu c s c kh e, s 148 (15/9/1999), tr 10 27 Tiêu chu n Vi t Nam(1990) th t s n ph m c a th t – phương pháp phát hi n Salmonella, TCVN – 5153 28 Tiêu chu n Vi t Nam (2002) th t tươi – quy ñ nh k thu t, TCVN 7046 – 2002 Tài li u ti ng nư c 29 Asai, T., H Esaki, A Kojima, K Ishihara, Y Tamura, and T Takahashi., 2006 Antimicrobial resistance in Salmonella isolates from apparently healthy food-producing animal from 2000 to 2003: the first stage of Japanese veterinary antimicrobial resistance monitoring (JVARM) J Vet Med Sci 68:881-4 30 Baggesen, D L., D Sandvang, and F M Aarestrup., 2000 Characterization of Salmonella enterica serovar typhimurium DT104 isolated from Denmark and comparison with isolates from Europe and the United States J Clin Microbiol 38:1581-6 31 Benjamin, W.H.; Turnbough, C.N.; Posey, B.S and Briles, D.E (1985) The ability of Salmonella typhimurium to produce siderophore enterobactin, avirulence factors Infect Immun,50, p 392-397 32 Berends, B R., Van knapen, F., Mossel, D A., Burt, S A Snijders, J M.A., 1998 Impact on human health of Salmonella spp on pork in the Nertherlands and the anticipated effects of some currently psoposed control stratergies Int J Food Microbiol; 44: 219-229 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 72 33 CDC (2006) Surveillance for foodborne disease outbreaks-United States, 2006 http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5822a1.htm 34 CIRAD, 2006 Training Course “Salmonella”, 23–37 October 2006 35 Clarke, G.J.; Wallis, T.S.; Starkey, W.J; Collins, J.; Spencer, A.J.; Daddon, G.J.; Osborne, M.P.; Candy, D.C and Stephen, I., 1988 Expression of an antigen in strains of Salmonella typhimurium with antibodies tocholeratoxin Med Microbiol, 25, p 139-146 36 Edward Aliam J (1990) Foodborne and Waterborne bacterial disease of Humans, 1990 p 360 37 Ewing; Edward (1970) Indentification of Enterobacteriaceae Edicion Revolucionnalria, Instituto Cubano Del libro 19 No 1002, Vedado Habana 37 FAO (1992) Manual of food quality control Rew.1.1 Microbiologial analysis Published by Food an Agriculture organization of United Nations Rome 1992 Editor Dr.Andrews 38 Farmer, J.J (1995) Enterobacteriaceae: Introduction and identification p 438-449 In Murray, P.R., Baron, E.J and Pfaller, M.A (ed.) Manual of Clinical Microbiology, 6th Edition, American Society for Microbiology, Washington, D C 39 Finlay, B.B and Falkow (1988) Virulence factors associated with Salmonella species Microbiological Sciences Vol 5, No.11 40 Frost, A.J.; Bland, A.P.; Wallis, T.S (1970) The early dynamic respose of the calf ileal ephithelium to Salmonella typhimurium Vet – Pathol, 34, p 369-386 41 Henrry F.J (1999) Combatting childhood diarrhoea thoungh international collaborative reseach, Journal of Diarhoea Diseases Reseach, 9.1999.p 165-167 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 73 42 Jones, J.W.; Richardson, A L (1981) The attachment to invasion of helacells by Salmonella typhimurium the contribution of manose sensitive and manose – sensitive haemaglutinate activities J Gen Microbiol, V127, p 361-370 43 Kishima M, Uchida I, Namimatsu T, Osumi T, Takahashi S, Tanaka K, Aoki H, Matsuura K and Yamamoto K., 2008 “Nationwide Surveillance of Salmonella in the Faeces of Pigs in Japan” 44 Krause, M.; Fang, F.C.; Gedaily, A.E.; Libby, S and Guiney, D.G (1995) Mutational Ananysis of SpvR Binding to DNA in the Regulation of the Salmonella Plasmid Virulence Operon Academic Press Inc Plasmid, 34, p 37-47 45 Leah J Martin, J Flint, A Ravel (2006) Antimicrobial resistance among Salmonella and Shigella isolates in five Canadian provinces (19972000) Can J Infect Dis Med Microbiol, 17(4):243-250 46 Lee Learn-Han, Cheah Yoke-Kquen, Noorzaleha Awang Salleh, Sabrina Sukardi, Sim Jiun-Horng, Khoo Chai-Hoon, Son Radu Analysis of Salmonella agona and Salmonella weltevreden in Malaysia by PCR fingerprinting and antibiotic resistance profiling Antonie van Leeuwenhoek DOI 10.1007/s10482-008-9254-y 47 Lowry and Bates (1989) Identification of Salmonella in the meat industry biochemical and sorological procedures Meat Ind Res Inst N02, bubl N0860 48 Mead, P S., Slusker, L., Dietz, V., McCaig, L F., Bresee, J S., Shapiro, C., Griffin, P M., Tauxe, R V., 1999 Food-related illness and death in the United States Emerg Infect Dis 5, 607-625 49 NCCLS, 2000 Performance standards for antimicrobial disk susceptibility tests Approved standard, seventh edition edn Pennsylvania, USA: The National Committe for Clinical Laboratory Standards, p 5-10 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 74 50 Ogasawara N, Tran TP, Ly TL, Nguyen TT, Iwata T, Okatani AT, Watanabe M, Taniguchi T, Hirota Y, Hayashidani H., 2008 Antimicrobial Susceptibilities of Salmonella from Domestic Animals, Food and Human in the Mekong Delta, Vietnam J Vet Med Sci 51 Pang, T., Z A Bhutta, B B Finlay, and M Altwegg (1995) Typhoid fever and other salmonellosis: a continuing challenge Trends Microbiol 3: 253-255 52 Popoff M.Y (2001), Antigenic formulas of the Salmonella serovas , 8th edition WHO Collaborating Centre for reference and Research on Salmonella Institus Pasteur, Paris, France, p 156 53 Quinn P.J, Carter M.E, Makey B, Carter G.R (2002), Clinical veterinary microbiology Wolfe Pulishing, London WC1 H9LB, England, p 209-236 54 Shahada F, Chuma T, Tobata T, Okamoto K, Sueyoshi M, Takase K., 2006 Molecular epidemiology of antimicrobial resistance among Salmonella enterica serovar infantis from poultry in Kagoshima, Japan Int J Antimicrob Agents, 28(4):302-307 55 Snoeyenbos G.H (1992) Pullorum diseases.Diseases of poultry, eight, Edition p 65- 79 56 Stephen G.H (1991) Pullorum diseases Diseases of poultry, eight, Edition p.65-79 57 Su, L H., C H Chiu, C Chu, and J T Ou., 2004 Antimicrobial resistance in nontyphoid Salmonella serotypes: a global challenge Clin Infect Dis 39:546-551 58 Takeshi, K., Itoh, S., Hosono, H., Kono, H., Tin V T., Vinh, N Q., Thuy, N T B, Kawamoto, K., Makino, S (2009) Detection of Salmonella spp isolates from specimens due to pork production chains in Hue city, Vietnam J Vet Med Sci 71(4), 485-487 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 75 59 Nguyen Thi Bich Thuy, 2009 Characterization of Salmonella isolated from healthy pigs in Hokkaido, Japan and horizontal transfer of antimicrobial resistance genes and virulence genes Enterobacteriaceae Doctoral thesis, Obihiro among University of Agriculture and Veterinary Medicine, Japan 60 Van, T T H., Moutafis, G., Istivan T., Tran, L T., Coloe, P J (2007) Detection of Salmonella spp in retail raw food samples from Vietnam and characterization of their antibiotic resistance Applied and Environmental Microbiology 73(21), 6885-6890 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 76 PH L C M TS HÌNH NH Trư ng ð i h c Nơng nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 77 ... a ch ng Salmonella spp phân l p t th c ph m cao v i 77,5% Salmonella spp kháng v i nh t kháng sinh T l kháng ña kháng sinh (t kháng sinh tr lên) c a Salmonella spp 60% Salmonella spp kháng cao... tợng kháng kháng sinh xảy thể lo i vi khuẩn định sống v sinh sản môi trờng có nồng độ kháng sinh cao nồng độ ức chế sinh sản phần lớn cá thể khác canh khuẩn nòi khác lo i Hiện tợng kháng kháng sinh. .. Chlotetracycline M t s nghiên c u v kh kháng kháng sinh c a Salmonella Vi t Nam đư c cơng b Các nhà nghiên c u Vi t – Nh t ñã ti n hành nghiên c u 230 m u Salmonella phân l p ñư c t ñ ng v t,