Báo cáo tốt nghiệp xác định hàm lượng vitamin c trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu quả cao

Báo cáo tốt nghiệp xác định hàm lượng vitamin c trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu quả cao

BÁO CÁO ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VITAMIN C TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO GVHD: LÊ THỊ MỸ CHÂU SVTH: NGUYỄN THỊ BẢY MSSV: 0852040449 LỜI CẢM ƠN  Trong quá trình làm khóa luận em xin chân thành cảm ơn tới Ths: Lê Thị Mỹ Châu- khoa Hóa, Đại Học Vinh, đã giao đề tài và tận tình hướng dẫn, tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp đỡ em trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành khóa luận.  Bên cạnh đó em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ths: Chu Thị Thanh Lâm –Khoa Hóa, Đại Học Vinh đã tạo điều kiện thuận lợi và giúp đỡ em trong suốt quá trình làm thí nghiệm.  Cuối cùng em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đã giúp đỡ em hoàn thành khóa luận này. NỘI DUNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4 KẾT LUẬN 5 MỞ ĐẦU 1 TỔNG QUAN VỀ VITAMIN C VÀ NGUYÊN LIỆU 2 MỞ ĐẦU 1 Lý do chọn đề tài - Vitamin là một nhóm chất hữu cơ có phân tử tương đối nhỏ và có bản chất lý hóa rất khác nhau, vitamin đảm nhận vai trò như những chất xúc tác. - Vitamin C có nhiều trong thực phẩm tự nhiên và các loại thực phẩm đã qua chế biến. Trong thực phẩm thì vitamin C có nhiều trong các loại rau quả tươi như: Nước cam, chanh, quýt, và có hàm lượng cao trong rau xanh đặc biệt là bông cải xanh, cải brussel, rau cải, cà chua, đu đủ. - Trong đó em đã chọn Đu đủ, thanh long, táo tàu, khoai lang tím, cà rốt làm đối tượng nghiên cứu và sử dụng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao để phân tích và xác định. 2 Nhiệm vụ nghiên cứu - Nghiên cứu tính chất vật lý, hóa học và phương pháp xác định hàm lượng vitamin C trong các loại củ, quả. - Tách vitamin C có trong các mẫu như: Đu đủ, thanh long, táo tàu, khoai lang tím, cà rốt. - Định lượng vitamin C bằng phương pháp HPLC - Đánh giá kết quả thực hiện 3 Đối tượng nghiên cứu - Nghiên cứu trong các mẫu : Đu đủ, thanh long, táo tàu, khoai lang tím, cà rốt. - Các mẫu trên được lấy tại các cửa hàng trong khu vực Thành phố Vinh. Mỗi mẫu được gói vào túi nilông sạch, bảo quản nơi khô ráo, thoáng mát tránh tiếp xúc với ánh sáng và nhiệt độ cao. TỔNG QUAN I. TỔNG QUAN VỀ VITAMIN C 1.1 Lược sử nghiên cứu và phát triển của vitamin C  Vào thế kỷ XVI-XVIII người ta thấy rằng các thủy thủ đi tàu lâu ngày do ăn lương khô và khẩu phần ăn quá đơn điệu thiếu hoa quả và rau tươi đã dẫn đến mắc bệnh beri- beri. Biểu hiện là viêm thần kinh, sưng phù, xuất huyết chân răng, mờ mắt…  Năm 1912 nhà bác học Ba Lan Funk đã phân lập từ cám một chất có tác dụng chữa bệnh beri-beri và đặt tên là vitamin. Sau Funk, danh từ vitamin trở nên phổ biến rộng rãi.  Do tầm quan trọng của vitamin đối với sự sống nên nhiều nhà bác học đi sâu nghiên cứu về mặt hóa học, sinh học, dược lý học, các biểu hiện lâm sàng và cách phòng chữa bệnh thiếu vitamin. 1.2 Cấu tạo của vitamin C  Công thức phân tử: C 6 H 8 O 6  Khối lượng phân tử: 176.13 g/mol. Axit L- ascorbic 1.3 Nguồn gốc + Nguồn gốc thực vật  Trái cây và rau quả là nguồn chứa nhiều vitamin C nhất.VD: cam, bưởi, chanh, đu đủ, cà chua…  Các nguồn thực phẩm khác bao gồm ớt đỏ, ớt xanh, quả kiwi, bông cải xanh, dâu tây, bắp cải, và dưa đỏ cung cấp một lượng đáng kể vitamin C. + Nguồn gốc từ động vật  Đa số các loài động vật (trừ khỉ, chuột bạch và người) có khả năng tự tổng hợp được vitamin C cho cơ thể. Vitamin C có nhiều nhất trong gan và ít nhất ở cơ. Vitamin C có mặt trong sữa mẹ và hàm lượng ít hơn trong sữa bò tươi, với sữa tiệt trùng chỉ chứa một lượng rất ít vitamin C. Tấ cả vitamin thừa sẽ được bài tiết qua nước tiểu. 1.4 Tính chất 1.4.1 Lý tính  Axit ascorbic là tinh thể bột trắng hoặc hơi ngả vàng, không mùi, vị chua, không tan trong cloroform, ether, benzen, dầu, chất béo.  Nhiệt độ nóng chảy: 190 0 C (phân hủy)  Khả năng hòa tan trong nước: cao 1.4.2 Hóa tính Tính axit: Do hiệu ứng liên hợp của nhóm cacboxyl, nên nguyên tử hydro của nhóm hydroxyl ở vị trí số 3 trở nên rất linh động, làm cho vitamin C có tính axit mạnh. Tính khử: Việc oxy hóa axit ascorbic xảy ra ở hai mức độ khác nhau. Sự oxy hoá khử thuận nghịch axit ascorbic thành axit dehydroascorbic Sự oxy hoá bất thuận nghịch axit ascorbic. [...]... đồ S c đồ chuẩn vitamin C ở nồng độ 10 ppm S c đồ chuẩn vitamin C nồng độ 50 ppm S c đồ chuẩn vitamin C nồng độ 100 ppm S c đồ c c mẫu vitamin C S c đồ mẫu c rốt S c đồ mẫu khoai lang tím S c đồ mẫu táo tàu S c đồ mẫu thanh long S c đồ mẫu thanh long thêm chuẩn KẾT LUẬN Kết luận Trong quá trình th c hiện đề tài em đã x c định đư c một số kết quả sau: - Kết quả th c nghiệm thu đư c sau khi phân tích:... năng cao (HPLC)  PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U Sơ đồ xử lý mẫu và chất chuẩn Vitamin C, axit ascorbic 98,7% ho c mẫu c , quả 10mg axit ascorbic + MeOH và địnhm c Nghiền nhuyễn C n chính x c 10 mg Định m c bằng pha động Mẫu bơm vào máy HPLC Màng l c Siêu âm Dung dịch Ly tâm L c qua giấy l c Tiến hành đo trên máy HPLC Điều kiện s c ký:  C t s c ký: C t s c ký pha đảo RP-18e (150×4.6mm, 5 µm)  T c độ dòng 0,7... x c định đư c giới hạn x c định c a phương pháp là LOQ = 0.047 ppm - Kết quả phân tích cho thấy hàm lượng vitamin C có trong c c loại c , quả đang c n tươi là rất cao Kiến nghị  Vitamin C có vai trò quan trọng đối với s c khỏe con người Tuy nhiên vi c sử dụng vitamin C không đúng c ch c ng sẽ ảnh hưởng nhiều tới s c khỏe Do vậy để c một s c khỏe tốt thì chúng ta nên sử dụng vitamin C đư c tổng hợp... + Hàm lượng vitamn C có trong mẫu Đu đủ là: 22.157 (mg/100g) + Hàm lượng vitamin C có trong mẫu Thanh long là: 6.89 (mg/100g) + Hàm lượng vitamin C có trong mẫu Táo tàu là: 4.703 (mg/100g) + Hàm lượng vitamin C có trong Khoai lang tím là: 8.503 (mg/100g) + Hàm lượng vitamin C có trong mẫu C rốt là: 6.274 (mg/100g) - Đã x c định đư c giới hạn phát hiện c a phương pháp là: LOD = 0.14 ppm - Đã x c định. .. dưỡng trong 100 g khoai lang tím Hàm lượng Năng lượng 119 Kcal Protein 0,8 g Lipid 0,2 g Glucid 28,5 g Xơ 1,3 g Canxi 34 mg Phospho 49 mg Sắt 1,0 mg Caroten 150 mcg Vitamin B1 0,05 mg Vitamin B2 0,05 mg Vitamin PP 0,6 mg Vitamin C 23 mg III C c phương pháp x c định vitamin C  Phương pháp chuẩn độ iốt Phương pháp chuẩn độ bằng 2,6 Diclorophenolindophenol (DPIP)  Phương pháp s c kí lỏng hiệu năng cao. .. 8.503 5 C rốt 12.54995 10 160.33063 6.274 3.4 Hiệu suất thu hồi Hiệu suất thu hồi c a quy trình đư c tính theo c ng th c sau  C m − C blank H=   C spike    ×m ×100%   Trong đó: Cm: Hàm lượng vitamin C có trong mẫu c thêm chuẩn,tính theo ppm Cblank: Hàm lượng vitamin C có trong mẫu không thêm chuẩn, tính theo ppm Cspike: Hàm lượng chuẩn vitamin C thêm vào mẫu, tính theo ppm m: Lượng c n c a mẫu... diện tích Pic c dạng y = ax +b trong đó: x là nồng độ y là diện tích pic a = 19.57309, b = 10.97903 Hệ số hồi quy tuyến tính là:R2 = 0,99968 Đường chuẩn biểu thị mỗi quan hệ giữa diện tích Pic thu đư c và nồng độ c c chuẩn vitamin C 3.2 Khảo sát hàm lượng vitamin C có trong c c mẫu c , quả Hàm lượng Vitamin C (mg/100g) c trong mẫu tính theo c ng th c sau V 100 C = C0 × × ( mg / 100 g ) m 1000 Trong. .. hoa quả tươi mỗi ngày  Để bảo toàn đư c lượng vitamin C nhiều nhất trong th c phẩm thì: - Chọn mua loại hoa quả và rau tươi - Chọn quả chín tự nhiên trên c y sẽ c hàm lượng vitamin C nhiều hơn là quả c n xanh đem ủ chín - Bảo quản rau, quả nơi không c ánh sáng và nhiệt độ thấp (tủ lạnh) để tránh hao hụt hàm lượng vitamin C - Không nên chế biến kỹ hoa quả và rau c , vì như vậy sẽ làm mất hết lượng vitamin. .. sau V 100 C = C0 × × ( mg / 100 g ) m 1000 Trong đó: V: Thể tích bình định m c (ml) C: Hàm lượng axit ascorbic trong mẫu thử (mg/100g, mg/100ml) C0 : Nồng độ vitamin C trong dung dịch mẫu bơm máy (µg/ml) m: Khối lượng c a mẫu phân tích (g) Kết quả phân tích hàm lượng vitamin C trong c c mẫu Mẫu C c mẫu C0 (ppm) Khối lượng mẫu (g) Diện tích pic C (mg/100g) 1 Đu đủ 44.31417 10 573.38916 22.157 2 Thanh long... trò c a vitamin C đối với c thể        Kích thích sự bảo vệ c c mô Kích thích nhanh sự liền sẹo Ngăn ngừa ung thư Tăng c ờng khả năng chống nhiễm khuẩn Dọn sạch c thể Chống lại chứng thiếu máu Ch c năng miễn dịch 1.6 Vitamin C với t c dụng chữa bệnh     Bệnh tim Cao huyết áp C m lạnh Ung thư 1.7 Nhu c u về vitamin C  Nhu c u về (sinh tố C) trung bình cho người không phải làm vi c nặng . BÁO C O ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI X C ĐỊNH HÀM LƯỢNG VITAMIN C TRONG TH C PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP S C KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO GVHD: LÊ THỊ MỸ CHÂU SVTH: NGUYỄN THỊ BẢY . như những chất x c t c. - Vitamin C có nhiều trong thư c phẩm tự nhiên và ca c loại thư c phẩm đã qua chế biến. Trong thư c phẩm thì vitamin C có nhiều trong ca c loại rau quả. và phương pháp xa c định hàm lượng vitamin C trong c c loại c , quả. - Tách vitamin C có trong ca c mẫu như: Đu đủ, thanh long, táo tàu, khoai lang tím, c rốt. - Định lượng vitamin C