Khóa luận tốt nghiệp Sư phạm sinh học: Khảo sát khả năng kháng độc tính Cadmium của dịch ép quả sơ ri lên một số chỉ số huyết học của chuột nhắt trắng (Mus musculus var. albino)

Tuy nhiên, hiện tại vẫn chưa có những đánh giá liên quan đến khả năng kháng độc tính cadmium của địch ép sơ ri lên một số chỉ số huyết học của chuột nhắt trăng nói riêng và các động vật

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRUONG ĐẠI HỌC SU PHAM TP HO CHÍ MINH

E9 LO Œ#

NGUYÊN KIM MI

KHAO SÁT KHẢ NANG

KHÁNG ĐỘC TÍNH CADMIUM CỦA

DICH ÉP QUA SƠ RI LÊN MỘT SO CHÍ SO

(Mus musculus var albino)

KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC

NGANH SƯ PHAM SINH HỌC

THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH - 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HÒ CHÍ MINH

go £9 œä

NGUYÊN KIM MI

KHẢO SÁT KHẢ NANG KHANG ĐỘC TÍNH CADMIUM CUA

DICH EP QUA SO RI LEN MOT SO CHI SO

HUYET HOC CUA CHUOT NHAT TRANG

(Mus musculus var albino)

KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC

NGANH SU PHAM SINH HOC

NGƯỜI HUONG DAN KHOA HỌC

PGS.TS Nguyén Thi Thuong Huyén

THÀNH PHO HO CHI MINH - 2024

LỜI CẢM ƠN

Khoá luận tốt nghiệp là kết qua của một quá trình dài trau đôi và nỗ lực khôngchí riêng bản thân em Em rất may mắn khi luôn nhận được sự giúp đỡ, hỗ trợ tận

tình từ Quý Thay Cô gia đình và bạn bè của minh.

Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Cô — PGS TS Nguyễn Thị

Thương Huyền, người đã hướng dẫn em trong suốt thời gian thực hiện khoá luận

Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến Thay — ThS Trương Văn Trí, Cô Trần Quốc

Thắng Hoa, Thay — ThS Võ Văn Thanh, Cô — TS Tran Thị Minh Định, Cô TrầnThị Hiểu đã tạo điều kiện và giúp đỡ em trong suốt thời gian em thực hiện đề tài

nghiên cứu tại Phòng thí nghiệm Giải phẫu — Sinh lí người và động vật.

Bên cạnh đó, em cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến chị Kiều Nhi, chị Thanh

Hang, chị Nguyệt, chị Dương, anh Quang, bạn Phước, bạn Hao, bạn Ngọc, bạn Hồng Trinh, bạn Cao Dương, em Huy Bửu em Khánh Phương, em Thành Đạt — những người luôn đông hành, luôn động viên, giúp đỡ và quan tâm tận tình dé em hoàn thành tốt nghiên cứu nảy.

Trân trọng gửi lời cảm ơn đến quý Thay, Cô giảng viên Khoa Sinh học,Trường Dại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh đã chia sẻ, giúp đỡ và truyền

dat cho chúng em những kiến thức và bai học quý báu.

Cuối cùng, con xin gửi lời cảm ơn đến ba mẹ và người thân trong gia đình,những người đã chia sẻ và động viên con Đặc biệt, con biết ơn ba mẹ vì đã luôn

yêu thương, đồng hành và tạo mọi điều kiện, là chỗ dựa tinh than vững chắc dé

con hoàn thành khoá luận tốt nghiệp này

TP Hỗ Chí Minh, ngày 16 tháng 0Š năm 2024

SINH VIÊN

Nguyễn Kim Mi

LỜI CAM ĐOANKhoá luận tốt nghiệp với tên dé tải “Khảo sát khả năng kháng độc tinhcadmium của dịch ép quả sơ ri lên một số chi số huyết học của chuột nhắt trắng

(Mus musculus var albino)” do tôi thực hiện đưới sự hướng dẫn của Cô — PGS.TS.

Nguyễn Thị Thương Huyền Nội dung khoá luận thuộc đề tài nghiên cứu

CS2023.19.46 do PGS.TS Nguyễn Thị Thương Huyền làm chủ nhiệm Các kết quả trong đẻ tài đã được nhóm nghiên cứu cho phép sử dụng.

Tôi xin cam đoan các kết quả trong khoá luận là trung thực và chưa từng được

ai công bố trong bat kì công trình nào khác

Học viên thực hiện

Nguyễn Kim Mi

MỤC LỤC

jes (leslie kt; ::2zz::t2:22121151625111111203111552535115388553155838557158881353568311E85885511593884g51548811552368571855885511558 ii MGINE:ciciceiiiiiiiiiiiiiiiitiiiiiiiiti11111144511411663131131335315883333133868333515883933833683355338335555354355 558 iv

Darn 80101/0000 00/50 1n 5 ,H a vii

U0u1ng 00 :‹+ä| ÔỎ Vill

Danh cee BÌHÊ(¡(ocscoioioiooiiioiiiistititiiii400010142140121311611ã651301358365838866384859835585388513808886355818 iX

I TINH CAP THIET CUA DE TÀI 2° s9 EE251921E152111 51 2121122122126 |

II MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 2 2S 29222152111 1177172111511 1x xe xe 2

II DOL TƯỢNG NGHIÊN CỨU 2-5 2S 15211 51 91211111211 211211012 12c 2

IV NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - 222 SSESS1E12251 1122121121121 2211.212 xe 3

V,PHẠM VI NGHIEN CUU 1 3

1.1 Tông quan về cadmium - 2< ezeCEzteCzeCEzzCzzzcrzzerrzrrzzcrczee 4

1.1.1 Đặc tính, ứng dụng và trạng thái tồn tại của cadmium 41.1.2 Các nguồn phát thải và các con đường phơi nhiễm cadmium 5

1.1.3 Tác động, cơ chế gây độc của cadmium với cơ thé con người và động vật 7

1.2, Tổng quan về chưột DAK AIG scnssscssscsssssssscssssssssssssssssssseseosssssosiscssssssossvees 101.2.1 Wilitrh pda Og: 2 ssc sacsssessscssesesscassavescasesaseccosasescosesasescascsesssussoveissssszssecaseies 101.2.2 Sơ lược về chuột nhắt trang ccccccceecsssessssvesssssessssseesssesssssesssverennvesenseenen 10

{.2.3.:Đặc điểm inh MOAN caeeesnnnnniiiiiidininiibnogiiieeHii4-01400 006008 i

1.3 TOmg quan u34 14

LSU Soha Ve 6a lá 66161113214159122100146321111010201311421011110330111162390015134001318124010 14

1.3.2 Thanh phan của dich ép quả SO ri ecccccscsscsssssesssseeessueeessscsssseesneeessneeen 15

1.3.3 So lược về vitamin C (ascorbic aid) oo.cccccccccsssecssssecssessesssvesessseesessvensvevece 171.4 Tông quan các công trình nghiên cứu trên thế giới và Việt Nam 18

1.4.1 Các Công trình nghiên cứu trên thé giới o.oo ccccssesesssesssssessssserssseesenseeeen 18

1.4.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam - Hee 20 2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu ¿- 522222 2222222 SE csrrrrrrcsrree 22

2.1.I, Thời Bian METIS CHW cesescccsssercescesensncesssronsesesesvecsensncensensnensesearenssneseaesaens 22

2.1.2 Địa điểm nghiên cứu .¿- ¿22222222 2222221122 11221112 211222211 c-cccee 22

2.2 Dụng cụ, thiết bị và hoá chất ¿2s 2112111121211 2111211120012 e6 22

2.2.1 Dụng cụ, thiết bị dùng chăm sóc chuột và thu mẫu máu chuột 22

2.2.2 Hoá chat và dung địch thí nghiệm 52-50 0 222122221 ee 24

22:41, WEEN :::szs¿:¿:;52222:55555235355555253535553535355555353558383355355238535553535385332353335585335ã35232555 25

2:8:1.ÌPHWW0nE pháo chăm: 866i6BHŨK:ossaoooeiooiooiionioaiiniiiitiiiioii0100061360006888086 26

2.3.2 Cơ sở chọn nồng độ chi, dịch ép quả Sơ ri va vitamin C thương mại 27

2.3.3 Bồ trí thí nghiệm -.2222-©222 222222221122 211172732222112 211127211222 ccee 27 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu - - << n1 HH2 01 1k 28

2.3.4.1 Phương pháp chuẩn bi dung dich Cd từ CdCl2.2.5 H20, dich ép quả

sở ri và:vitamiin.C tỉnh KhiẾt sssccsssssscsscsssessssosssasssosssasscsssasassnssssaiiee 28

2.3.4.2 Phương pháp cho chuột uỗng chi, vitamin C va dich ép qua sơ rỉ 29

2.3.4.3 Phương pháp khảo sát độ tăng trọng c eeieeee 30

2.3.4.4 Phương pháp thu nhận mẫu máu chuột - 2-5552 30

2.3.4.5 Phương pháp xác định số lượng hông cau, bạch cầu, tiều cầu và hàm

QTD nsiaiiiaiiiiaitiagitsitiisitai111511441132111611918116118551582318453143188588831853 31 2.3.4.6 Phương pháp xác định thời gian đông máu - 32

2.3.4.7 Phương pháp xác định HCT ¡cv seo 32

2.3.4.8 Phương pháp làm tiêu bản máu - s5 cSSsSeeeeeerrke 33

2.3.4.9 Phương pháp xác định kích thước hồng câu . 34

Chương 3 KẾT QUÁ VÀ BANILUAN ssssssessssssssscssisossosssooscasssiososssssssnssssonsvassonssvsasie 36

3.1 Tác dụng kháng độc tính cadmium của dịch ép quả sơ ri lên độ tăng trọng

Gớ thế GRƯẾInnninnsnninniinoiiiidiiiitiitt880601840003810081118100301803013383501831089103000880040 36 3.2 Tác dụng kháng độc tính cadmium của dich ép quả sơ ri lên các chỉ số huyết

HOG tt:iảit16504641114140311081116116351138115615863166338651851386338631846384331ã5358838831385388138ã1126148833883 39

3.2.1 Số lượng hỗng cầu trung bình 2 2©z£2EE++Z2E2xzerr2zzrrrrreerrx 39

3.2.3, Ham lượng hemoglobin trung bình cu esnrerrriee 43

32.4, Chỉ số bematocrititrung BÌnh ccec-s.n 22 202121 000024240006444008 453.2.5 Số lượng bạch cầu trung bình 2-222++z+222222tt222zzrrrrrzerrr 503:2:6.:Số lượng tiều cầu trung ĐÌN:ssonoaaananooanniniiiiinnininnaingisiginaasl 55

3.2.7 ThỜi gian đông mẤU:::‹:::-:::::sccccciiipitiitiinniipii0502221214611851123116518861165556ã18556 57

3.5 Tác dụng kháng độc tính cadmium lên một số chỉ số sinh hoá máu 60KET LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ, 22 22222222222 E22211112222111227221227212222211222 T2

P.0 8n Ả Ỗ 72

TÀI LIEU THAM KHAO s 2222222252202222111222731112027211110211111 1111 2c 73

EHIUHE - cốc c7 7 7c n6 ốc co l

Phụile 1 = Độ tang Tons ChƯỘI::::cococcocciooiooiiioooioioiiititiosii10001231318023315188.365 PLI

Phụ lục 2 - Chi số sinh lí máu ChUGt csssssseecssssssccsssssscsssssvsccsssssescssssssscesssssssessessseess PL4Phu lục 3 - Các chi số sinh hoá máu GBUẨÍ:cciiiicosiioioisatsiiiseata2120223315122221315156255518652 PL24

Phụ lục 4 - Kết quả phân tích hàm lượng vitamin C trong dịch ép thịt quả so ri PL32

Phụ lục 5 - Chấp thuận của hội đồng đạo đức trong nghiên cứu trên động vật PL33

DANH MỤC CHỮ VIẾT TÁT

Kí hiệu

ALT Alanine aminotransferase

AST | Aspartate aminotranferase

DANH MỤC BANG BIEU

Bảng 1.1 Tinh chat vật lí va hóa học của cadm1u1m - ác che 4Bảng 1.2 Một số chỉ số huyết học của chuột nhắt trắng 11Bang 1.3 Thanh phần hóa học của địch ép quả Sơ ri 266 c1 cuc co l6

Bang 2.1 Dụng cu, thiết bị chăm sóc chuột 2-2 21s 21211 2E E121 521121125 1x2 22 Bảng 2.2 Dụng cụ, thiết bị lay máu chuột vả quan sát tiêu bản - 23

Bảng 2.3 Hóa chất và dung dịch thí nghiệm -2 5-szcseccseecseec 24

Bang 3.1 Độ tăng trọng trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 2 tuần 37

Bang 3.2 Số lượng hông cầu trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 42Bang 3.3 Số lượng bạch cau trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 46Bang 3.4 Số lượng tiêu cầu trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 51Bang 3.5 Kích thước hồng cau trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 55Bang 3.6 Hàm lượng Hb trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 59Bang 3.7 Chỉ số hematocrit trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 63

Bang 3.8 Thời gian đông máu trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 67

Bang 3.9 Giá trị trung bình và độ lệch chuẩn của các tiêu chí khảo sát sinh hóa máu chuộtở:các nghiệm thức sau'6'tuÄ'RUÔI : :c‹:ccccccc c0 022S000220000221000221621221221240221242265680 59

DANH MỤC HÌNH

Hình 2.1 Sơ ri chua Brazil mua tại Gò Công, Tiền Giang 52-5555: 25Hình 2.2 Sơ đỏ bố trí thí nghiệm tổng thẻ 22222222 2222zeC2xEcEEEcrtrzrrrcrrree 26Hình 2.3 Bồ trí chuồng nuôi chuột thí nghiệm ở các nghiệm thức 28

Hình 2.4 Thao tác cho chuột uỗng 2- 22 22©t22EE22EE2 2 2£CSz2StcSztcStrszrred 29

Hình 2.5 Hình ảnh minh hoa cân khối lượng cơ thé ChUGLE cccccceecccscesssenseeseneeees 30Hình 2.6 Minh hoa thao tác lấy máu chuột - - + - 5 2c 21231 2s xe ccz 3I

Hình 2.7 Minh hoa thao tác xác định số lượng hông cầu và bạch cau 31 Hình 2.8 Minh hoạ thao tác xác định ham lượng Hb ccc ceeceseeeeeeeees 32 Hình 2.9 Minh hoa thao tác xác định tốc độ động MAW si csiccssssosssessscasseasecassacssescas Oe

Hình 2.10 Minh hoa thao tác xác định chỉ số hematocrit c.0.cccccseseesesseenseeseeseeens 33

Hình 2.11 Minh hoa thao tác làm tiêu ban máu chuột 555 5555 <s<<<ss<2 34

Hình 2.12 Minh hoạ thu máu tím chuột cà St xrgrrerrrree 35

Hình 3.1 Biéu đỗ thê hiện độ tăng trọng của chuột tại các nghiệm thức thử nghiệm qua TH) 1 4444 HĂHHH ) 36

Hình 3.2 Biéu đồ thê hiện số lượng hồng cầu của chuột tại các nghiệm thức thir

nghiệm qua các tuần nưôi -2¿©2s22t2SEEZSEEZ2EEEEEEEE2222222122112724172412222222 e- 39 Hình 3.3 Biêu 46 thé hiện số lượng bạch cầu của chuột tai các nghiệm thức thử

nghiệm qua các tuần nuôôi 2-2ceV+zCE+Z€EEzeCEzzcEzzcezz.creserzrsecrzecrzeecrsee 4I

Hình 3.4 Biểu đồ thé hiện số lượng tiểu cầu của chuột tại các nghiệm thức thử

Bgiiiôn: GiincS6tUẦN ARON ¡c0 2n 2á 2000022 00240000010186011804104881211024816483144003163400d4 43Hình 3.5 Biểu đỏ thé hiện kích thước hong cầu của chuột tại các nghiệm thức thử

nghiệm qua các tuân nuôi - 5: 5° 5 1221122111 2111 11 11111112111 2111211211210 1100121124 45

Hình 3.6 Biéu dé thé hiện ham lượng hemoglobin của chuột tại các nghiệm thức

thử nghiệm qua các tuần nuôi 22 212 1521122111211 117211211211 711171107110730 0e 49

Hình 3.7 Biểu dé thê hiện chỉ số hematocrit của chuột tại các nghiệm thức thử

Hình 3.8 Biểu đỗ thé hiện thời gian đông máu của chuột tại các nghiệm thức thir

nghiệm qua các tuần nuôi 2-2222 ©2ZS+E2SEE 2E 2Y32E3ZY12E127112731722272022ecred 56

Hình 3.9 Biểu đồ thé hiện giá trị bilirubin T của chuột tại các nghiệm thức khảo sát Sin) 0.1.0: 001 ớốớốớớố cố Ặ ah 59

Hình 3.10 Biéu dé thể hiện giá trị bilirubin D của chuột tại các nghiệm thức khảoGIG GN 6181101018011 6s c22xct2200220121101272122225112252000221102210021133010210132112319053235131023216223165Í 60

Hình 3.11 Biêu đô thẻ hiện giá trị bilirubin I của chuột tại các nghiệm thức khảo sát

SSAA MUS HÔI các can 11021002011065766122561110221612100021022112010022111371013125111220210216E118017extsinti 61Hình 3.12 Biểu đồ thé hiện giá trị AST của chuột tại các nghiệm thức khảo sắt sau

B tUAN 0 4445 62

Hình 3.13 Biéu đô thé hiện gia trị ALT của chuột tại các nghiệm thức khảo sát sau

làn 00 8 4+33:1+:2“:,HĂĂĂHHHH.ẢẢ 63 Hình 3.14 Biểu đô thẻ hiện giá trị urea của chuột tại các nghiệm thức khao sát sau 8

TT ớớớơớacAố an ni on TnG 66Hình 3.15 Biểu đỏ thẻ hiện giá trị creatinine của chuột tại các nghiệm thức khảo satsau 8 tuần nuôi 2 St 12 1521211111511 2122111111511 2111111102211 2101 21121211122 52 67

MỞ ĐÀU

I TINH CAP THIẾT CUA DE TÀI

O nhiễm môi trường do kim loại nặng ngày càng nghiêm trọng và trở thành mộtmối quan tâm lớn do những tác động xâu ma nó gây ra trên toàn thé giới Những kim

loại ô nhiễm này đang bị đào thai vào nước, đất và vào khí quyển do ngành công

nghiệp và kim loại nặng đang phát triển nhanh chóng, việc xử lí phân bón, chất thải

va thuốc trừ sâu không đúng cach [1] Kim loại nặng gây ra các tác hại cho con người

và động vật được quan tâm nhiều hiện nay phải kế đến cadmium (Cd) Các nguồn

tiếp xúc với cadmium bao gồm đồ chơi bằng nhựa, pin, son, gốm sứ nước bi ô nhiễm

không khí, đắt, thực phẩm, phân bón và khói thuốc lá [2].

Cadmium là một chat gây ô nhiễm môi trường từ các quá trình công nghiệp va

hoạt động nông nghiệp [3], |4] [Š] O những người không hút thuốc nói chung thì thực phẩm là nguồn phơi nhiễm Cd chính [6], [7] Sự hap thy Cd từ thức ăn ở người tương déi thấp nhưng nó được tái hap thu hiệu quả ở thận và có thời gian phân hủy sinh học tương đôi đài, ước tính từ 10 đến 30 năm [8], [9], [10] Theo tỏ chức Lương

thực và Nông nghiệp Liên Hợp Quốc (FAO) và tô chức Y tế thé giới (WHO), lượng

Cd có thé được đưa vào cơ thé ti đa 400 — 500 pg/tuan, tương đương 70 pe/ngay.

Theo thong kê của Page, Bingham và Chang (1981), lượng Cd vào cơ thé trung bìnhtrên thé giới hiện nay khoảng từ 25 — 75 ug/ngày [11] Đây rõ rang là van dé nghiêm

trọng đáng được quan tâm vì lượng Cd xâm nhập vào cơ thé con người đang xap xi

ở ngưỡng trên của tiêu chuẩn cho phép Chính vì vậy, những người hút thuốc lá đã tự

mình thêm vào cơ thé một lượng cadmium du thừa từ 25 — 35 wg/ngày [12].

Cadmium là kim loại không có vai trò sinh học nào đỗi với cơ thẻ con người[13] và được WHO là một trong mười hoá chat gây ô nhiễm môi trường cũng nhưảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe [14] Người ta ước tính rằng, chế độ ăn cóchứa Cd, Pb, Asen vô cơ và methylmercury là nguyên nhân dẫn đến 56.000 ca tửvong vả hơn 9 triệu ca khuyết tật trên toàn thế giới [ I5] Nông độ cao nhất của Cd

được tìm thấy tương ứng trong thận và xương nhưng tác dụng độc hại của các kim

loại nảy không chỉ giới hạn trong các bệnh về thận vả xương [16], [17] Sau khi hap

thụ, Cd đi vào máu và liên kết với mang hồng cau, albumin máu và phân bố khắp cơ

thé Sau khi nhiễm độc Cd cấp tinh, Cd chủ yếu đi vào gan làm cho gan trở thành cơquan bị ảnh hưởng nghiêm trọng dù tiếp xúc trong thời gian ngắn [18] Liên quan đến

vô sinh nam giới, Cd được xếp vào loại nguyên tô có độc tinh cao [19], [20].

Một số nghiên cứu chỉ ra rằng, Cd gây stress oxy hoá thông qua sự suy giảm hệ

thống enzyme chống oxy hoá do thay đôi cơ chế biểu hiện gene [21] Gần đây, các chất chồng oxy hoá thảo được được quan tâm dang ké [22] Vitamin C thuộc loại vitamin tan trong nước, chống oxy hoá và có khả năng loại bỏ cả superoxide và

hydrogen peroxide [23] Vitamin € được biết đến với khả năng giúp tăng cường sức

khoẻ và các chức năng sinh học khác như chống oxy hoá, chong ung thư, hạ đường

huyết và bảo vệ đa, làm trắng đa Ngoài ra, vitamin C còn giúp tăng cường hap thu

sắt, có vai trò quan trọng cho quá trình tạo ra hemoglobin, hỗ trợ trong việc tạo tế bào

hông cầu và giúp thành mach máu ving chắc [24] Trong các nghiên cứu cho thay

trong quả sơ ri có hàm lượng vitamin C rất cao, giống sơ ri chua (Malpighia emarghinata DC.) với hàm lượng vitamin C lên đến 882,9 mg/100 g [25] Ở nước ta,

giống sơ ri chua giống Brazil được trồng nhiều ở Gò Công, Tiền Giang, cho trái quanh

năm Tuy nhiên, hiện tại vẫn chưa có những đánh giá liên quan đến khả năng kháng

độc tính cadmium của địch ép sơ ri lên một số chỉ số huyết học của chuột nhắt trăng

nói riêng và các động vật có vú khác nói chung.

Xuất phát từ những lí do trên, đề tài khoá luận “Khảo sát khả năng kháng độc

tính cadmium của dịch ép quả sơ ri lên một số chỉ số huyết học của chuột nhất

trắng (Mus musculus var albino)” được thực hiện

II MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU

Đánh giá được khả năng kháng độc tính cadmium của địch ép quả sơ ri lên một

số chỉ số huyết học (các chỉ số công thức máu và chỉ số sinh hoá) vả trọng lượng cơ

thé chuột Kết quả nghiên cứu cung cap thông tin về khả năng của dịch ép này trong việc giảm độc tính của kim loại nặng trong cơ thê động vật.

II DOI TƯỢNG NGHIÊN CUU

Chuột nhắt trắng đực 6 tuần tuổi (19 - 21 g)

IV NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

Khao sát tac dụng khang độc tinh cadmium của dịch ép quả sơ ri lên:

= Độ tăng trọng của chuột;

— Một số chi số huyết học của chuột (một số chỉ số công thức mau va một sốchỉ số sinh hoá): số lượng tế bao máu (hồng cau, bạch cau, tiêu cầu); kích thước hồngcau; ham lượng hemoglobin, chỉ số hematocrit; thời gian đông máu; một số chỉ sốsinh hoá (AST, ALT, bilirubin, urea, creatinine).

V PHAM VI NGHIÊN CUU

Dé tải được thực hiện trên chuột nhất trắng đực 6 tuần tudi

Thời gian bố trí thí nghiệm: § tuần/đợt thí nghiệm

Khao sát 1 nồng độ Cd?* từ cadmium chloride (CdCl:.2,5 HO) với liều lượng

I mg/kg thé trọng: 3 nông độ vitamin C từ dich ép quả sơ ri (10 mg/kg thé trọng, 20 mg/kg thé trọng, 30 mg/kg thé trong);

Các chi số huyết học: sé luong té bao mau (hong cau, bach cau, tiểu cau), ham

lượng hemoglobin, tốc độ đông máu, chỉ số hematocrit, kích thước hồng cầu và chi

so sinh hoá.

Chương 1 TONG QUAN

1.1 TONG QUAN VE CADMIUM

1.1.1 Đặc tính, ứng dung và trạng thái ton tại của cadmium

Cadmium (Cd) thuộc nhóm XII, chu ki 5, sé hiệu nguyên tử là 48 của bang hệ

thong tuần hoàn, có khối lượng nguyên tử trung bình bing 112,411 (đv€), là kim loại

mềm, màu trắng bạc, không tan trong nước [10] Cadmium cùng với asen, chi, thủy ngân và crom không có chức năng về sinh học thiết yếu nào nhưng lại có độc tính cao đối với thực vật và động vật [26], [27], [28] Tuy nhiên, dạng ton tại của Cd thường

bắt gặp trong môi trường không gây độc cấp tính Hàm lượng trung bình của Cd trong

lớp vỏ trái đất được Bowen (1979) và Heinrichs (1980) ước tính trong vùng nghiên

cứu 1a 0,1 mg/kg Cd gần tương quan với kẽm (Zn) về mặt địa hoá cả hai nguyên tô

này có cùng cầu trúc ion và điện tử (tính chất điện thé hoá ion) Quang cadmidi không

đổi dio nhưng Cd có thé tìm thay trong hau hết các quặng kẽm do nó có tính chat

thay thé đồng hình với kẽm [10] Một vài thông số về tinh chat vật li và hoá học của cadimi thé hiện ở Bảng 1.1 [10].

Bảng 1.1 Tính chất vật lí và hoá học của cadmium

Số nguyên tử 48Trọng lượng nguyên tử 112,41 (dvC) Bán kính nguyên tử 155 pm

Cau hình electron [Kr]4d!°5s?

Nhiệt độ nóng chảy 321,07°C

Nhiệt độ sôi 767,3°C

Thế khử Cd ?*+ 2e“ Cd(s) —0,40E°

Sức nóng của phan ứng tông hợp 6,21 kJ/mol

Nhiệt hoá hơi 99,6 kJ/mol

Độ âm điện (thang Pauling) 1,69Nang lượng ion hoá thứ nhất 867.8 kJ/molNăng lượng ion hoá thứ hai 1631.4 kJ/mol

Khác với các kim loại khác như Pb, Cu va Hg đã được con người sử dụng từ

nhiều thé ki qua, Cd được biết đến sau và chỉ được sử dụng rộng rãi ở thế ki XX

Theo Nriagu (1988), việc sản xuất Cd trên thé giới tăng từ 11000 tan trong năm 1960 lên đến 19000 tan vào nam 1985 Cadmium được sử dụng vào các việc như: làm lớp

xi mạ bảo vệ cho thép; trong những hợp kim khác nhau; trong chất màu (cho các chất

nhựa, lớp men va đồ gốm); tạo chất làm chắc cho chất déo PVC; trong pin khô

Ni-Cd; trong vũ khí quân dung; trong những hợp chất khác như: chat bán dẫn, bộ phận kiểm soát lò phản ứng hạt nhân [12], [29], [30].

Cadmium đã tiếp xúc với con người thông qua nhiều phương tiện khác nhau

trong suốt nhiều thập ky qua do có nhiều ứng dụng phd biến Sự hiện diện của

cadmium trong môi trường cũng phan lớn là kết quả của các hoạt động con người.[31].

Theo Aylett va Rose (1979), Cd tồn tại phd biến ở các khoáng chat như: ZnS, Sfalerit, wientzite và khoáng chất phụ như ZnCOs, chứa 0,2 — 0,4% Cd Đôi khi ham

lượng Cd tìm thấy lên đến 5% Da tram tích có hàm lượng Cd cao hơn các loại đákhác, cao nhất là phosphoride va đá phiến sét den vùng biển Ca hai loại đá được hình

thành từ những cặn lắng giàu hữu cơ trong điều kiện yếm khí, các kim loại nặng tích lũy như các sulfite và các hợp chất phức tạp [12] Ảnh hưởng gây độc của một kim loại được xác định rõ rệt hơn ở dang ion so với sự tôn tại dạng nguyên tố lon Cd2*

có khả năng bám hút trên bề mặt của keo dat hơn là các dang khác như dang trung

tính hay dang anion Sposito dự đoản các dạng tôn tại của Cd trong dung dich dat (theo thứ tự giảm dan): Cd (II); CdSOs (0); CdCl* trong dat phèn; Cd (II), CdCl*,

Cd§O¿ (0) và CđHCO:' trong những đất kiềm

1.1.2 Các nguồn phát thải 6 nhiễm cadmium và các con đường phơi nhiễm cadmium

Trước khi Cd được sử dụng vảo lĩnh vực thương mại, dấu hiệu của sự ô nhiễm

Cd đã được phát hiện rộng rãi trong các vật liệu và nó được coi như là một tạp chất.

Có rat nhiều nguồn phát thai Cd gây ô nhiễm từ các nguồn khác nhau

Cadmium vào môi trường đất từ đá mẹ

Dat hình thành từ các đá có nguồn gốc núi lửa chứa lượng Cd từ 0,1 — 0,3 mg/kg,

chúng hình thành trên đá biến chất có ham lượng Cd từ 0,1 — 1.0 mg/kg Dat hình

thành trên đá trầm tích chứa 0,3 — 1,1 mg/kg Cd Nói chung hau hết các đất đều có ham lượng Cd dưới 1,0 mg/kg, ngoại trừ những nơi bị ô nhiễm từ những nguồn riêng

biệt hoặc phát triển trên những đá có lượng Cd cao tới mức bat thường như các phiến

đá đen [12].

Ở những vùng đất lẫn bùn công, rãnh, kim loại tìm thấy chủ yếu là Cd và các kim loại nặng khác ở tang mặt 15 cm, tuy nhiên Cd có xu hướng đi chuyển theo độ

nghiêng nhanh hơn một trong hai nguyên tố Pb hoặc Cu Nhiều người cho rang, Cd

ít de doa đến chất lượng của nước trong đất (nước thé nhưỡng — soil solution) mànguy cơ de dọa chất lượng nước ngầm nhiều hơn [12]

Cadmium từ phân bón: Phân lân chứa lượng Cd cao trong hau hết phosphoride

ding dé sản xuất phân bón Phan phosphate đang trở thành nguồn tạo ra Cd và có mặt

hầu như khắp nơi, gây ô nhiễm cho đất nông nghiệp [12].

Cadmium lắng ty từ bụi khí quyén: Bennett (1981) cho rằng, bình thường nòng

độ Cd trong không khí dao động trong phạm vi từ | — 50 mg/mỶ, phụ thuộc vào

khoảng cách các nguồn phát ra Cadmium gây ô nhiễm được đưa vào môi trường là

kết qua của sự phát trién nhanh chóng các ngành công nghiệp va công nghệ hiện đại

(32] Nguồn phát phải Cd chủ yếu ra không khí là: sự sản xuất kim loại không sắt,

quá trình đốt cháy than đá, quá trình đốt cháy đầu, quá trình thiêu hủy chất thải, sự

chế tao sắt — thép, ứng dung kim loại trong công nghiệp.

Cadmium từ bùn thải, bàn cong rãnhNước bùn cống thải chứa Cd từ chất thải sinh hoạt của con người và các sản

phẩm sinh hoạt sông của gia đình Sự tích lũy Cd trong nước cống, rãnh thường được

tạo ra trong quá trình xử lí bùn công Mức độ tập trung của kim loại trong bùn công

có thẻ biến động rất lớn do sự thay đôi liên tục của hợp chất và thê tích nước thải

Công nghiệp được xả vào công Mặc dù dang chat thai bùn cống là một dạng giàu

dinh dưỡng như nitrogen và phosphorus, nhưng khi sử dụng làm phân bón nó có thé

làm tăng hàm lượng Cd và các kim loại không cần thiết khác trong đất, làm tăng khả

năng hấp thụ chúng boi cây trồng [12]

Ngoài ra, Cd cũng có thé gây 6 nhiễm đất từ các nguồn khác như khai thác mỏ, quá trình làm giàu quặng mỏ quá trình luyện quặng fulfide có chứa Cd (có thé chứa

đến 5% Cd) [33] Trong môi trường đô thi, khói thuốc lá cũng là một trong những

nguôn quan trọng góp phan lam cho con người tiếp xúc với Cd [34] Một điều thuốc

lá trung bình có thé chứa từ 1 đến 2 pg Cd và khoảng 30 — 50% lượng này có thé

được hap thụ vào phôi [35] Đối với những người không hút thuốc thì chế độ ăn uéng

là nguén tiếp xúc Cd quan trọng nhất, Nong độ Cd cao nhất thông thường được timthay trong than, gan, loài giáp xác, những loại hạt giống, đặc biệt là trong nam va cácsản pham ngũ cóc Những loại thức ăn cơ bản như: bột ngũ cốc, rau củ quả và đặcbiệt là da số các thức ăn biên góp nhiều vào sự tiếp xúc Cd hang ngay [36]

Sự hấp thụ Cd diễn ra chủ yếu qua đường hô hap (10 - 50%) và ở mức độ nhỏhon chủ yếu qua đường tiêu hoá (3 — 5%) [37], trong khi sự hap thy qua đa là tươngđối hiếm Khi Cd đi vao cơ thé, nó được vận chuyên vào máu qua hồng cầu và

albumin, sau đó tích tụ ở thận [36], gan và ruột [38] Ở người, phơi nhiễm Cd có thé

dẫn đến nhiều tác dụng phụ, chăng hạn như rồi loạn chức năng than và gan, phù phôi.tôn thương tỉnh hoàn, nhuyễn xương, ton thương tuyến thượng thận và đặc biệt là hệ

thống tạo máu, [39].

1.1.3 Tác động, cơ chế gây độc của cadmium doi với cơ thể con người và động vật

Cadmium khi hap thụ vào cơ thẻ sẽ kết hợp với albumin trong máu va đi chuyên

đến gan Ở trong gan, cadmium sẽ tạo thành một phức chất với metallothionein (MT)

một loại protein giàu lưu huỳnh có khối lượng phân tử thấp [10] MT tách cadmium

ra khỏi tế bảo gan vả hoạt động như một tác nhân giải độc Từ gan có sự phóng thích

chậm cadmium - MT đến máu Không giống như cadmium - albumin, hợp chấtcadmium — MT được thấp qua tiểu cầu vả tiếp tục được hấp thụ trở lại bởi các tế bào

có hình ống Với néng độ tiếp xúc Cd thấp bằng con đường ăn uống, Cd dường như

đi chuyên đến MT trong màng nhay ruột non, nơi ma nó có thẻ bị tách ra trong nhiềungày Sau khi được đưa vào mau, hợp chat Cd — MT di chuyên trực tiếp đến thận Khi

vào trong cơ thể, cadmium chủ yêu được đảo thai ra ngoải qua nước tiểu nhưng rat chậm,

sự bài tiết thấp này tương ứng với thời gian bán hủy sinh học hơn 25 — 30 năm [40] [41]

Sự tiếp xúc lâu đài với Cd dù ở liều thấp cũng cho thấy tác dụng phụ đến khảnăng sinh sản của ca nam va nữ, thậm chí là việc mang thai [42] Điều nảy là do sự

thay đôi biểu hiện của nhiều gene trong phôi, dẫn đến sự methyl hoá bat thường của

chúng trong nhau thai và phôi Các kiểu biến đôi biểu sinh do Cd gây ra có liên quan đến khả năng dé dàng liên kết với thiol khi làm cạn kiệt chat cho methyl S-adenosyl methionine, dẫn đến thay đổi methylome và sau đó là thay đổi hoạt động

methyltransferase DNA Diéu nảy có thé gây ra rối loạn phát triển nhau thai và thai

nhì Cadmium gây ra sự thay đôi quá trình hình thành steroid, rối loan chu kỳ kinh

nguyệt và hormone sinh sản, chậm dậy thì và có kinh, sảy thai, sinh non và giảm cân

khi sinh [33] Cadmium cũng có liên quan tiêu cực đến mật độ khoáng xương ở phụ

nữ sau mãn kinh Phụ nữ có lượng cadmium trong cơ thê cao hơn nam giới, phản ánh nông độ cadmium trong mau, nước tiêu và thận cao hơn Sự hấp thu cadmium ở ruột

tăng lên khi lượng sắt dự trừ trong cơ thể cạn kiệt và tình trạng thiểu sắt rõ ràng,những tình trạng phô biến ở phụ nữ trong độ tuôi sinh sản [43]

Thận không phải là cơ quan bị ảnh hưởng nghiêm trọng với sự tiếp xúc Cd vô

cơ ở liều lượng cấp tinh (ví dụ CdC]:) nhưng nó rất nhạy cảm với sự tiếp xúc Cd với

liều lượng mãn tính Sự phá hủy thận được phản ứng với glucose niệu, hiện tượng

nước tiểu có protein va sự phá hủy tiến triển chậm cho đến khi làm suy yếu thận mãntính Tình trạng rồi loạn chức năng thận được biểu hiện như sự gia tăng tong số proteinniệu hay gia tăng sự bai tiết của 8a — microglobulin hay protein kết hợp retinol, dan

đến tình trạng rỗi loạn chức năng thận và cầu thận Tác dụng độc hại đối với thận còn

thé hiện qua sự tôn thương cau trúc thận và thay đôi chức năng bài tiết [12]

Cadmium được đi chuyển đến gan, tại đó chúng có thê gây tổn thương và rồi

loạn một số chức năng Khi hap thụ Cd với liều lượng cao, gan tích lũy khoảng 60%

Cd và là mục tiêu chính dé chất độc Cd cấp tính xâm nhập vào, gây ra tinh trạng

nhiễm độc gan Việc nhiễm độc Cd mãn tính đã dẫn đến những bệnh lí nghiêm trọng

như viêm gan mãn tinh, xuất hiện những tế bảo nhiều nhân không 16 [12] Tôn thương

gan còn được chứng minh băng các mô bệnh học và thường đi kèm với tăng nông độ

enzyme trong mau, giảm tông hợp protein.

Sau khi hap thụ, Cd được đưa vào cơ thé thông qua tế bào hồng cầu hoặc protein[44] Một lượng lớn Cd trong hồng cầu liên kết với các protein có trọng lượng phân

tử cao, trong khi một lượng nhỏ liên kết với huyết sắc tô Hệ thong tạo mau là một

trong những hệ thong nhạy cảm nhất và nó là mục tiêu gây độc quan trọng của Cd Đặc biệt, sự hap thu cadmium gay ra bénh thiéu mau héng cau trong mau (giam số lượng tế bao hỏng cau trong máu và nông độ Hb) vả gia tăng số lượng tế bao bạch cau (chủ yếu là bạch cầu trung tính) [12] Cadmium gây thiếu máu đo tan máu, thiếu

sắt và sản xuất không đủ erythropoietin (thiếu máu thận) cùng với những thay đôitrong chuyên hoá sắt [45] Các nghiên cứu cho thay, phơi nhiễm Cd có liên quan đến

roi loạn mạch máu Các nhóm malondialdehyd va protein carbonyl huyết tương tăng

lên trong khi glutathione hồng cầu giảm ở những đối tượng tiếp xúc với Cd [46] Phơi

nhiễm cadmium gây tăng huyết áp và tôn thương mạch máu thông qua kích hoạt

NADPH oxidase, hệ thống renin-angiotensin và con đường cyclooxygenase 2 trongđộng mạch [47].

Sự nhiễm độc xương do tiếp xúc với Cd trong thời gian dài đã được chứng minhthành công ở người Vào năm 1950, cư dan ở quận Toyama — Nhat đã bị một tai nan

khủng khiếp do tiếp xúc với Cd cao ở mỏ quặng kẽm Cadmium gay 6 nhiễm đất va

nước uống Phụ nữ, trẻ em bị đau đớn bởi hàng loạt các triệu chứng và đấu hiệu được

biết đến với căn bệnh Itai — Itai (xảy ra ở Nomiyama năm 1986) Đặc điểm của bệnh

này là xương bị đau nhức dữ đội, làm biến đạng xương và gãy xương, kèm theo lànhững dấu hiệu của bệnh suy yếu thận mãn tính

Ngoài độc tính được quan sát thấy trong hệ thống tạo máu, gan và thận,

cadmium đã được chứng minh 1a gây độc tính ở tuyến tụy, nội tiết, tim mạch hệ

thong miễn dich và sinh san [48].

1.2 TONG QUAN VE CHUỘT NHẬT TRANG

1.2.1 Vi tri phân loại

Theo Tran Hồng Việt [49], chuột nhắt trắng được phân loại như sau:

Giới: Động vật Animalia

Ngành: Có đây sống Chordata

Phân ngành: Có xương sống Vertebrata hay có hộp sọ Craniota

Lớp: Thú, hữu nhũ Mammalia

Phân lớp: Thú nhau Placentalia

Tong bộ: Gam nham Glires

Bộ: Gaim nham Rodentia

Phan bộ: Rang đơn hang Simplicidentata Họ: Chuột Muridea

Giống: Chuột Mus Linnaeus, 1785

Loài: Chuột nhất Mus musculus Linnaeus, 1785 Noi: Chuột nhat tring Mus musculus var albino, 1785

1.2.2 Sơ lược về chuột nhắt trắng

Mus musculus var albino là nòi chuột nhất trắng có hình dang và kích thước

tương tự với chuột nhắt nha Chúng có bộ lông màu trắng mắt đỏ vả tai to vénh,

mỗi bàn chân có 5 ngón và đuôi có ít lông, chiều đài đuôi tương đương với chiều dài

cơ thẻ Kích thước của chúng nhỏ từ 12 đến 15 cm tính từ mũi tới đuôi khi trưởng thành, với khôi lượng cơ thé từ 18 — 40 gram (từ 8 đến 12 tuần tuổi) Chuột nhất trắng động đục sớm, từ khoảng 5 — 7 tuần ở chuột đực và từ 4 — 7 tuân ở chuột cái Độ tudi

thành thục giới tính từ 4 - 6 tuần tuổi chu kì động dục là 4 - 5 ngày (tự phát) thời gian

mang thai của chuột khá ngắn (khoáng 19 đến 21 ngày), với số lượng con sinh ra mỗi lứa từ 4 — 10 con Chúng có tinh khí kha điềm đạm thích leo tréo, dao hang, cũng như

có các hành vi xã hội như tụ tập với nhau, đi vệ sinh chung một chỗ trong chuông,

đánh dấu lãnh thé, gây han, hành vi tinh đục và các tương tác xã hội, Chuột nhắt

trắng thường hoạt động mạnh vào ban đêm và rất nhạy cảm với sy chuyển động va

thay đôi cường độ ánh sang [50], [Š1] [53].

1.2.3 Đặc điểm sinh lí máu

Máu ngoại vi bao gồm huyết tương, hồng cầu bạch cầu vả tiêu cầu Tương tự

ở người, máu chuột cũng có các chức năng như cung cấp oxygen, chất dinh dưỡng và

loại bỏ các chất thải trong quá trình chuyên hoá cúa cơ thé Ca ba loại tế bảo máu(hồng cau, bạch cau, tiêu cau) déu bat nguồn từ tủy xương và đi chuyên đến máungoại vi khi trưởng thành Ngoài ra, máu mang bạch cau, tiêu cầu và các yếu tô đôngmáu đến các vị trí cần thiết Một số chỉ số huyết học của chuột được mô tả ở Bảng 1.2 [51]

Bảng 1.2 Một số chỉ số huyết học của chuột nhắt trắng

STT Chỉ số huyết học

I Tổng lượng máu trung bình (mL) 1,25 = 1,75

2 phuoÐ = HỘT (ti lệ phần tram thé tích hong 39 — 49

cau trên tông so mau)

3 |Số lượng hong cau (triệu/qtL) 7-13

4 Hemoglobin (g/dL)

5 Số lượng bạch cầu (trên mỗi pL)

6 | Số lượng tiêu cầu (trên mỗi pL) 300000 - 1000000

Tương tự ở người, hông cầu chuột là các tế bào máu đỏ, có dạng hình đĩa lõmhai mặt, chứa huyết sắc t6 hemoglobin, có đường kính 4 - 7 pm Ở chuột con (dưới

4 tuần tudi), hồng cầu lưới có thẻ chiếm 10% tông số hồng cầu So với các loài động

vật có vú khác, hồng cầu chuột có tudi thọ khá ngắn, trung bình khoảng 30 - 52 ngày

(ở chó là 110 ngày và 120 ở người) Sự tăng hay giảm số lượng hông cầu đều cho

thay sự bat thường của co thẻ Sự tăng số lượng hồng cau có thé liên quan đến chứng

đa hong cau, ngược lại, số lượng hồng cầu giảm có thé là thiếu máu đo xuất huyết,tăng tan mau và giảm sản xuât te bao mau [50].

Bạch cau là các tế bao máu trắng có nhân, không chứa hemoglobin Ở chuột, số

lượng bạch cầu trung bình 5 000 — 12 000 tế bào/ pL, trong đó: bạch cầu lympho

(chiếm 70 — 75%), bạch cầu trung tính (chiêm 20 — 25%), bach cầu đơn nhân (chiếm

2 ~ 6%), bạch cầu ua acid (chiếm 0 - 3%) và bạch cầu ưa base (chiếm 0 — 0.1%).Chức năng chính của bạch cau là bảo vệ cơ thé bằng thực bào và miễn dịch Số lượngbạch cau trong máu có thé biên động lớn do bach cầu có khả năng di chuyên từ máuđến các mô và ngược lại Chuột thường tăng số lượng tế bào bạch cau dé chống lạicác phản ứng viêm [51].

Tiểu cầu sinh ra từ tế bào nguồn dòng tủy — tiêu cầu Ở chuột, tiêu cầu thườngtập hợp lại với nhau nhưng cũng có thé xuất hiện dưới dạng từng tiêu cầu riêng lẻ

Đường kính tiêu cầu chuột dao động từ 1 — 4 ym, các cạnh của tiêu cầu không đều,

có các sợi nhọn và các phan nhô ra giống như những xúc tu Chuột có số lượng tiêu cau cao, trung bình dao động từ 300 000 — 1 000 000 tế bảo, tuôi thọ trung bình ngắn (khoảng 4 — 5 ngày) Tế bào sau khi nhuộm có màu xanh nhạt với hạt nhỏ Tiểu cầu rat quan trọng đôi với sự hình thành cục máu đông và cam máu, chúng phản ứng với

tồn thương tế bảo nội mô bằng cách kích hoạt, kết tụ va cung cấp bề mặt xúc tác chocác yếu tô đông máu [51]

Hemoglobin (Hb) là thành phan cau tạo chú yếu của hồng cầu Nhờ Hb mà hong

cầu có thê thực hiện chức nang vận chuyên khí O2 và CO của minh Hb gồm hai thành phan là hem và globin Ở chuột, nồng độ Hb đao động khoảng 12,2 — 16,2 g/dL (hoặc 2%).

1.2.4 Đặc điểm một số chỉ số sinh hoá

Các xét nghiệm sinh hoá huyết thanh rất quan trọng cho các mục đích đánh giá

sức khoẻ và chân đoán các bệnh khác nhau Một số chỉ số xét nghiệm sinh hoá máu

cơ bản như các chỉ số men gan (ALT - Alanine aminotransferase và AST - Aspartate

aminotranferase, bilirubin và các thông số khác chỉ điểm cho tôn thương và chức

năng than (urea máu, creatinine) [Š4].

AST (tên gọi khác là SGOT) là một loại enzyme được san xuất ra tại gan, Nếugan bị tôn thương hoặc bị hoại tử ở một vi trí nào đó, AST sẽ được giải phóng 6 at

vào máu Bình thường, chỉ số AST thường dưới 35 U/L Ngoài gan, AST còn xuất

hiện ở các cơ quan khác như tim, than, cơ và não Tương tự như cơ chế giải phóng ở

gan, khi những cơ quan nay gặp tôn thương thi AST sẽ rò ri vào máu Vì vậy AST

không phải là tiêu chí đánh giá đại diện cho tình trạng tôn thương gan [54].

Chỉ số ALT là chỉ số đặc hiệu phản ánh rõ ràng hơn về các van dé tại gan vì

ALT chỉ được sản xuất tại gan, có một số lượng rất ít trong cơ vân và cơ tim Do đó

có thê nói rằng gan là cơ quan tập trung ALT nhiều nhất và cũng sẽ được phóng thích vào máu néu gan xảy ra tôn thương Giới hạn bình thường của ALT là từ 3 — 30 U/L.

Nhìn chung thì khi xét nghiệm chỉ số AST và ALT ở mức bình thường sẽ gần tương

đương nhau [54].

Bilirubin là một sắc t6 có màu vàng cam được hình thành trong quá trình phá

vỡ hong cau bình thường trong mau Bilirubin đi qua gan và được bài tiết ra khỏi cơ thé thông qua phân và một lượng nhỏ nước tiêu Quá trình tổng hợp và chuyên hoá

bilirubin có quan hệ mật thiết với gan nên lượng bilirubin cao thường là do các bệnh

gan gây ra Có 3 trị số bilirubin gồm: Bilirubin toàn phan (T) bình thường khoảng 0,1

— 1,1 mg/dL; Bilirubin trực tiếp (D) bình thường khoảng 0,1 — 0.4 mg/dL và Bilirubin gián tiếp (1) khoảng 0,1 — 0,7 mg/dL Nhìn chung, lượng bilirubin tăng cao sẽ báo hiệu các nguy cơ bệnh lí liên quan đến chức năng máu, chức nang gan [54].

Chỉ số BUN (Blood Urea Nitrogen) là xét nghiệm dùng dé xác định các hàm lượng nitrogen có trong urea (bình thường 7 — 19 mg/dL) Thông thường, khi gan hoặc thận bị tôn thương thì chỉ số BUN sẽ có xu hướng tăng.

Creatinine huyết thanh là sản phẩm đào thải của quá trình thoái hoá creatinin

phosphat ở cơ và được lọc hoàn toàn qua các cầu thận, không được các ống thận tái hap thu Do đó giá trị của creatinine chủ yếu phản ánh chức năng thận và chi số

creatinine huyết thanh được sử dụng dé đánh giá chức năng thận Bình thường,

creatinine huyết thanh có M: 0,6 - 1,3; E: 0,5 - 1,1 mg/dL [54].

1.3 TONG QUAN VE SƠ RI

1.3.1 Sơ lược VỀ sơ rỉ

Cây sơ ri hay cây Kim Dong Nam, tên khoa học là Malpighia emarghinata DC

Là cây hai lá mam, thuộc bộ Sơ ri (Malpighiales), họ Sơ ri (Malpighiaceae), chi Cum

ria (Malpighia) [55] Là loại cây gỗ nhỏ, cao từ 2,5 đến 3,0 mét, có nguồn gốc từ khu vực Tây Án, miền Bắc Nam Mỹ và đã được trồng ở các nước nhiệt đới Một số đồn điền lớn của khu vực phía Bắc của Brazil được xem là một trong những nơi trồng Sơ

ri lớn nhất thé giới [56].

Tại Việt Nam, cây sơ ri được trồng pho biến ở khu vực Nam Bộ đặc biệt là ở

Tiên Giang do có các đặc tính thích nghỉ phù hợp với điều kiện môi trường tại nơi

này Thân cây được hình thành từ nhiều cảnh phân nhánh, đường kính từ 2 đến 4 mét;

vỏ cây xù xì có mau nâu xám Lá cây có hình bau dục hoặc hình elip, chiều dài từ 2,5

đến 9,8 cm và chiều rộng từ 1,2 đến 6,8 cm, có màu xanh đậm, mọc đối, cuống la

ngắn, có lông ở gân lá và mặt dưới của lá Hoa lưỡng tinh, mọc thành chim ở đầu cành, có mau trắng hoặc tím nhạt và có hương thơm nhẹ [55], [56].

Cây sơ ri cho quả trong năm đầu tiên phát triển và có thé thu hoạch tử 4 — 7 lần

mỗi năm, tùy thuộc vào điều kiện khí hậu, thổ nhưỡng và kĩ thuật chăm sóc Sản lượng tủng bình dao động từ 2 kg/cây trong năm đầu tiên và 47 kg/cây ở khoảng năm thứ 6 với điêu kiện tưới tiêu, chăm sóc hợp lí Quả sơ rí có hình cầu hoặc bầu dục với

đường kính từ 1 — 2,5 cm va nặng từ 2 — 10 g Quả vỏ 3 thùy, có ba lớp gồm lớp mang

mong bên ngoài, phan trung bì mong nước ở giữa và phan bên trong bao gồm ba hạt.

Bè mặt quả có thé nhẫn hoặc có các rãnh Màu vỏ của quả non thường có màu xanh

lục, nhưng cũng có thê có mau trắng hoặc xanh tia Ở quả chin, màu sắc của vỏ có thé thay đôi từ đó vàng, đỏ cam đến đỏ tươi [55].

Quả chín hoản toàn có hàm lượng vitamin C được xem là cao nhất trong tất cả

các loại trái cây [55] Quả sơ ri chin thì mềm, dé hỏng với thời gian bảo quản từ 2

-4 ngày ở nhiệt độ hơn 20°C, do đó thu hoạch quả sơ ri từ khi vừa chuyển sang hong

không nên dé chín hoàn toàn trên cây Quả sơ ri được dùng như một loại trái cây trang

miệng hoặc kết hợp với các loại trái cây tươi khác như một món salad trái cây, nó

cũng được ché biến thanh nhiều loại sản phẩm khác như: nước ép, siro, thành phan

của sữa chua, thạch kem, mỹ phẩm va các thực pham chức nang, trong đó, nước

ép Sơ ri được sử dụng phô biến nhất Do có nhiều mục đích sử dụng dan đến sự giatăng nhu cầu về sản phẩm trên thị trường trong và ngoài nước đã kích thích việc trồng

trọt nhằm xuất khâu ra các thị trường thương mại [56] [57].

Nhiều nghiên cứu cho thay sơ ri có nhiều tác dung trong đời sông nhờ khả năng

cung cấp nhiều vitamin va khoáng chat, đặc biệt là vitamin C, kalium và chất xơ Sơ

rỉ có tác dụng tăng cường hệ miễn dịch, tăng cường sản xuất collagen làm đa săn

chắc, giúp cơ thé chéng lai một số loại vi khuẩn và virus, cải thiện hệ tiêu hoá Nhiều

nghiên cứu chi ra rằng, các hợp chất sinh học tồn tại trong nước ép Sơ ri có liên quan

đến khả năng trao đôi chất, các chứng viêm và giúp hạn chế các bệnh liên quan đến

béo phì, chống tăng đường huyết, ngăn ngừa bệnh đái tháo đường, tăng huyết áp,

loãng xương [58], [56], [59] Lá sơ ri được sử dụng dé pha tra và làm siro giúp điều

trị các triệu cảm cúm, hạn chế tăng cholesterol và tăng huyết áp Nước ép quả sơ ri

cung cấp một nguôn vitamin C (acid ascorbic) đồi dio va nhiều chất giúp chống oxihoá mạnh mẽ khác góp phần ngăn ngừa các bệnh liên quan vẻ tim mạch, huyết áp

làm giảm mức độ stress oxi hoá, ngăn ngừa ton thương hệ than kinh, bảo vệ DNA, ngăn ngừa ung thư và những bệnh thoái hoa khác [56] [60], [61].

1.3.2 Thành phan của dich ép quả sơ ri

Dịch ép của qua sơ ri gồm nhiều thành phần khác nhau như nước, đường, một

số acid hữu cơ như acid citric và acid malic, vitamin và khoáng chất Thành phần hoá

học của dịch ép qua sơ ri được mô tả ở Bang 1.3 [55].

Về thành phần lipid, có một số acid béo bao gồm: oleic (31.9%) linoleic(29,2%), palmitic (21,8%), stearic (13,9%) và linolenic (1,33⁄) Các loại đường chính

là fructose vả glucose, thap nhat la sucrose.

Dịch ép của quả sơ ri là một hỗn hợp phức tạp có chứa ham lượng cao vitamin

C, carotenoid và polyphenol (bao gồm quercetin vả rutin) Các thành phần này có

hoạt tính sinh học cao này có thé chong oxy hoá và các tôn thương từ quá trình stress

oxy hoá [56] Như đã mô ta ở Bang 1.4, địch ép sơ ri còn có các vitamin như thiamine

(BI), riboflavin (B2), niacin (B3) va provitamin A và các khoáng chat như calcium,sắt, kalium, magnesium va phosphorus Ngoài ra quả so ri còn chứa các loại chất khác

như: phenol, carotenoid, anthocyanin, phytochemical, acid mallic, acid citric và acid

tartaric, dẫn xuất của acid benzoic, flavonoid và nhiều loại amino acid, [56]

Bảng 1.3 Thanh phan hoá học của dich ép quả So ri

_ Chấdinhdường |i

Vitamin B2 0.006

0,31

Khoáng chat (mg/100 g)

1.3.3 Sơ lược về vitamin C (aseorbie acid)

Vitamin C (L-ascorbate) hay acid ascobic (AA) là một loại vitamin tan trong

nước, được tìm thay trong nhiều loại thực phẩm như trái cây và rau, là một chat chong

oxy hoá quan trọng và can thiết cho sức khoẻ con người Vitamin C gồm sáu carbon

lactone được tông hợp từ glucose trong gan hoặc thận của nhiêu loài động vật có vú,

trừ con người, động vật linh trưởng, chuột va chim Những loài nảy không có enzyme

gulonolactone oxidase, một chất cần thiết dé tong hợp acid ascorbic tiền chat tức thời 2-keto-I-gulonolactone Do không thé tự tông hợp vitamin C, con người buộc phải bd sung nó vào cơ thé thông qua chế độ ãn uống Một số loại trái cây và rau quả giàu

vitamin C như sơ ri, kiwi, dâu tây, đào, cà chua, táo, anh dao, cam, đứa, ôi, xoài,

chanh leo, bông cải xanh [62] Được phân lập vào năm 1928, vitamin C rất cần

thiết cho sự phát triển và duy trì các mô liên kết Nó đóng một vai trò quan trọng

trong việc hình thành xương, chữa lảnh vết thương và duy trì nướu khỏe

mạnh Vitamin € đóng vai trò quan trọng trong một số chức năng trao đôi chất bao

gồm kích hoạt vitamin B, acid folic, chuyên đối cholesterol thành acid mật và chuyểnđôi acid amin, tryptophan, thành chat dẫn truyền thần kinh, serotonin Nó là một chấtchóng oxy hoá giúp bảo vệ cơ thé khỏi tác hại của các góc tự do Vitamin C được sửdụng như một tác nhân trị liệu trong nhiều bệnh và rối loạn, bảo vệ hệ thông miễn

dich, giảm mức độ nghiêm trọng của phản ứng di ứng và giúp chống lại nhiễm trùng [63].

Các chức năng sinh hoá của vitamin C bao gồm: chống oxy hoá, sinh tong hợp

collagen, hình thành nitrosamine va hydroxyl hoá proline, kích hoạt nội tiết tố, bài

tiết histamine, kích thích một số enzyme, chức năng thực bào của bạch cầu, sản xuấtchất dẫn truyền thần kinh, chuyên hoá một số acid amin Đối với sức khỏe con người,

vitamin C có liên quan đến việc giảm tỉ lệ mắc bệnh ung thư, tái tạo mô, huyết áp,

khả năng miễn dịch, chuyển hoá thuốc vả bải tiết hydroxyproline trong nước tiêu, [64]

Do tính chất tan trong nước nên vitamin € có thê hoạt động cả bên trong và bên

ngoài tế bào dé chống lại tôn thương các gốc tự do và có một số ứng dụng trong điều

trị bệnh ung thư trị liệu {62] La một chất chong oxy hoa nôi tiếng, vitamin C có vai

trò trong việc bao vệ tế bào khỏi stress oxy hoá bởi kha năng cho điện tử, nó cho 2

carbon từ liên kết đôi giữa carbon thứ hai va carbon thứ ba của phân tử 6-carbon Một

số báo cáo cho rằng, vitamin C còn có thé bảo vệ tế bao khỏi H2O> và bức xạ [65].(66] Trong nhiều bệnh ung thư, sự gia tăng mãn tính của stress oxy hoá, liên quan

đến nông độ hydrogen pyroxide tăng cao — góp phan làm tăng tốc độ tăng sinh, tăng khả năng tạo mạch và di căn [67] Do đó nhiều chat chong oxy hoá như vitamin C có đặc tính chống ung thư.

Vitamin C còn đặc biệt quan trọng đỗi với sức khỏe tim mạch Nhiều nghiên cứu chỉ ra rằng, sự thiêu hụt vitamin C có liên quan đến bệnh tim mạch và chế độ ăn

uống khoảng 100 mg/ngay là thực sự cần thiết dé tránh các bệnh tim mạch ở nam giới

và phụ nữ không hút thuốc [68]

1.4 TONG QUAN CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU TREN THE GIỚI VÀ

VIỆT NAM

1.4.1 Các Công trình nghiên cứu trên thế giới

Năm 2008, Acharya và cộng sự thực hiện nghiên cứu nhằm đánh giá tác dụng

của vitamin C và E với hệ sinh sản đực ở chuột tiếp xúc cadmium Chuột được tiêmCdCl qua màng bụng (1 mg/kg b.w) đã cho thay các stress oxy hoá trong tuần thứ 5đến thứ § Kết quả nghiên cứu cho thấy, chuột được tiếp xúc với Cd gia tăng đáng kế

tị lệ bat thường (di dạng) cua tinh trùng, làm giảm SỐ lượng tinh trùng Nhóm chuột tiếp xúc với Cd nhưng được bo sung vitamin C (10 mg/kg b.w) và vitamin E (100 mg/kg b.w) góp phan cái thiện số lượng va chất lượng tinh trùng do cadmium gây ra [69].

Sharaf và cộng sự (2017) đã thực hiện nghiên cứu nhằm khảo sát khả năng

chống oxi hoá bảo vệ vai trò của vitamin C (30 mg vitamin C/kg b.w) đối với độc

tính huyết học của chi acetate (20 mg vitamin C/kg the trong) va cadimi clorua (3,0

mg/kg b.w) ở chuột đực Sau 30 ngày cho thay: chi acetate và cadimi clorua làm tăng

đáng kê số lượng bạch cau va số lượng tiểu cầu, làm giảm số lượng tế bào hồng cau

và nông độ hemoglobin Vitamin C đã cải thiện tác dụng có hại của chi acetate và

cadmium clorua đối với các thông số huyết học [70]

Năm 2019, Milena và cộng sự đã nghiên cứu nhằm đánh giá tác dung độc hại

của Cd cấp tính và phơi nhiễm chì trong mau, gan va thận của chuột Chuột Wistarđược gây nhiễm Cd cap tính ở nồng độ (15 và 30 mg/kg b.w), chi acetate nồng độ

150 mg/kg thê trọng và một nhóm được xử lí kết hợp giữ cadmium và chì (15 mg

Cd/kg b.w va 150 mg chi/kg b.w) Kết quả cho thấy sự gia tăng nhẹ nồng độcreatinine, sự giảm nồng độ urea, giảm tông số protein và nồng độ albumin, đồng thời

bilirubin trực tiếp tăng cao so với nhóm đối chứng Ngoài ra, Cd liều cao làm giảm

đáng kế số lượng bạch cầu (trong đó bạch cau trung tính lại cao hơn đáng kẻ) Trongtat cả các nhóm thir nghiệm đều nhận thay xu hướng giảm số lượng hông cau, Hb và HCT

so với đối chứng Số lượng tiểu cầu tăng đáng kế ở nhóm Cd (15 mg/kg b.w) nhưng lạigiảm ở nông độ (30 mg/kg b.w), trái ngược với nhóm đối chứng [21]

Năm 2021, Hounkpatin và cộng sự đã nghiên cứu nhằm khảo sát tác dụng bao

vệ của vitamin C đối với các thông số huyết học ở chuột Wistar bị nhiễm độc Cd từCdCh, thủy ngân và Cd kết hợp và thủy ngân Sau thời gian nuôi ôn định, một sốnhóm tiếp xúc với Cd ở nồng độ thấp và cao Cd (0,25 mg/kg b.w và 2,5 mg/kg b.w,tương ứng) một số khác tiếp xúc với thủy ngân, và nhóm cuỗi củng tiếp xúc với cả

hai kim loại Một nhóm được bé sung vitamin C cùng với các kim loại tương ứng,

trong khi nhóm đối chứng chỉ uống nước cất Kết quả cho thay, Cd lam giảm số lượng

hông cầu kẻ cả ở liễu cao hay liều thấp; giảm số lượng bạch cầu khi được xử lí ở liễu

cao; nồng độ hemoglobin và hematocrit giảm khi được xử lí ở liều thấp Ở nghiệmthức được xử lí bởi Cd kết hợp vitamin C cho thay tiềm nang bảo vệ của vitamin C

khỏi kim loại độc hại này [71].

Nam 2022, Shi-Han Yang và cộng sự đã thực hiện nghiên cứu nhằm đánh giáảnh hưởng của việc tiếp xúc Cd lên tế bào leydig và mạch máu ở tỉnh hoàn chuột.Chuột đực tiếp xúc với Cd bằng cách tiêm mang bụng với nồng độ lần lượt là 0.5, 1.5

và 2,5 mg/kg b.w/ngay trong vòng 10 ngày Kết quả ghi nhận được cho thay số lượng

các tế bảo nội mô tăng lên đáng kẻ và các protein liên quan đến mạch máu cũng tănglên khi tiếp xúc Cd, đặc biệt là ở nòng độ 2,5 mg/kg/ngày Nhóm này cho rằng có thê

sự tiếp xúc Cd đã kích thích sự tăng sinh của các tế bào thành và tế bảo nội mô của

mạch máu, dẫn đến tỉnh trùng hoạt động bất thường Ngoài ra, trọng lượng tỉnh hoàn

và hoạt động của tế bao leydig cũng giảm đáng ké khi gây nhiễm Cd [72]

Năm 2022, Poli và cộng sự đã nghiên cứu nhằm đánh giá kha năng cải thiện tôn

thương oxy hoá do Cd gây ra ở chuột Wistar bằng vitamin C, kèm và

N-Acetyleysteine Kết quả cho thay, ở nghiệm thức được cho uéng CdCl: hoà tan trong

nước uống với nồng độ 10 mg/L trong 45 ngày đã gây ra các ảnh hưởng so với nhóm

chuột đối chứng, bao gồm: giảm trọng lượng cơ thé, giảm khối lượng gan, các chỉ số sinh hoá của huyết thanh như albumin, urea, creatinine, AST và ALT tăng đáng kẻ

so với lô chuột đối chứng lộ) nghiệm thức được xử lí đồng thời CdCd2 (10 mg/L) và

vitamin C (100 mg/kg thẻ trọng) cho thay sự cải thiện khả năng cải thiện tôn thương

đo độc tính cadimi gây ra [73].

1.4.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam

Nguyễn Thị Thương Huyền (2019) đã tiền hành nghiên cứu nhằm đánh giá tác

dụng kháng độc tính asen (450 ug/L) của tỏi và sơ ri (250 mg/kg thé trọng) lên một

số chỉ tiêu sinh lí của chuột nhắt trắng đực Sau 30 ngày cho thấy: dịch ép tỏi Lý Sơn

và dịch ép Sơ ri có tiềm năng trong việc giữ ôn định tế bào máu trong quá trình phơi

nhiễm asen Phân tích mô học cho thay dịch ép tỏi Lý Sơn và dịch ép sơ ri có tiềm

năng trong việc bảo vệ gan, thận và lách khi bị phơi nhiễm As Cả hai dịch ép này

cũng giúp gan vả than dao thải lượng As tích tụ tai đây [74].

Cho đến hiện nay, ở Việt Nam vẫn chưa có nhiều Công trình khoa học nghiên

cứu vé kha nang kháng độc tinh Cd của vitamin C (ascorbic acid) cũng như dich ép

quả sơ ri lên các chi số huyết học chuột nhắt trắng trong thời gian dai (trên 30 ngày)

Vi vậy, việc thực hiện đề tài này góp phan cung cap dẫn liệu khoa học có thé lam co

sở cho các bước nghiên cứu tiếp theo

1.4.3 Nhận định tình hình nghiên cứu

Các nghiên cứu đã thé hiện rằng vitamin C có thé đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ cơ thé khỏi độc hai Cd thông qua các thông số huyết học ở chuột thí nghiệm Theo đó, cần có thêm các nghiên cứu về vai trò của vitamin C nói chung va vitamin C từ các nguồn cây trái tự nhiên trong việc bảo vệ cơ thé khỏi độc hại của

Cd Vi vậy, đề tài khoá luận này sẽ tiếp tục mở rộng phạm vi nghiên cứu băng việc

thăm do khả nang kháng độc tính của dịch ép qua sơ ri, một nguồn vitamin € tự nhiên,

đối với các chỉ số huyết học của chuột nhắt trắng Điều này sẽ cung cấp thông tin quantrong và đáng giá vẻ tiềm năng của dich ép sơ ri làm một phương tiện bảo vệ hiệu qua khỏi

tác động độc hại của Cd, mở ra cơ hội cho các phát hiện mới trong lĩnh vực nghiên cứu này.

Chương 2 VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 THỜI GIAN VA DIA DIEM NGHIÊN CỨU

2.1.1 Thời gian nghiên cứu

Khoá luận được tiền hành từ tháng 10/2023 đến tháng 04/2024,

2.1.2 Địa diém nghiên cứu

Khoá luận được thực hiện tại Phòng thí nghiệm Giải phẫu — Sinh lí Người &

Dộng vật (M103), Trường Dai học Sư phạm Thành phố Hỗ Chí Minh

Xét nghiệm sinh hoá được thực hiện tại ở Trung tâm Y khoa Medic Hoà Hao,

Quận 10, Thành phố Hồ Chí Minh

2.2 DỤNG CỤ, THIẾT BỊ VÀ HOÁ CHÁT

2.2.1 Dụng cụ, thiết bị dùng chăm sóc chuột và thu mẫu máu chuột

+ ` -Â + ° v > ˆ ` x + ˆ

Các dụng cụ và thiệt bị chính sử dụng chăm sóc chuột và thu mau mau chuột

trong khoá luận được thé hiện ở Bảng 2.1 và Bảng 2.2.

Bảng 2.1 Dụng cụ, thiết bị chăm sóc chuột

Tên dụng cụ, thiết bị Xuất xứ

STT

Lranrswewange |

6 | Nhiệt kế điện tir do nhiệt độ và độ âm

Bảng 2.2 Dụng cụ, thiết bị lay máu chuột và quan sát tiêu bản

Buông đêm hông câu, bạch câu | Heinz Herenz Hamburg

Ông trộn hỏng cau, bạch cau Heinz Herenz Hamburg

Ong mao quản Hirschmann

Labogrerate

Bộ dung cụ Huyết sắc kế Sahli Marienfald Đức

May lì tâm HETTICH Dức

Lamella Heinz Herenz Hamburg

Vinahancook Việt Nam Pipetman ISOLAB

Fancol 50

Dia petri Dan Mach

Đồng hồ đếm giờ Việt Nam

Ông nghiệm tách huyết thanh USM Việt Nam

máu URI

2.2.2 Hoá chất và dung dịch thí nghiệm

Các hoá chất và dung dịch thí nghiệm chính sử dụng cho đề tài thê hiện ở Bảng 2.3

Bảng 2.3 Hoá chất và dung dịch thí nghiệmSTT Tên hoá chat Hãng sản xuất

1 | Cadmium (Cd) chloride Sigma

2 | Natri sulfate Scharlab S.L Tay Ban Nha

3 | Natri clorua Scharlab S.L Tay Ban Nha

4 | Acid acetic Scharlab S.L Tay Ban Nha

5 | Acid hydrochloric

Scharlab S.L.

6 | Magnesium sulfate Tay Ban Nha

7 | Kali dihydrogen phosphate

a

8 | di-Natri hydrogen phosphate Merck Đức

9 | Methanol Xilong Scientific Trung Quốc

10 | Glycerin Xilong Scientific Trung Quốc

ll An D6

12 | Formandehyde Xilong Scientific Trung Quốc

13 | L-Ascorbic acid (bột Scharlab S.L Tây Ban Nha

Các dung dịch thí nghiệm được pha theo hướng dẫn của Giáo trình thực hành

Sinh lí học người và động vật [75], bao gồm:

- Dung địch Hayem (Na;SO:: 5,0 g; NaCl: 1,0 g; nước cất vừa đủ 100 mL);

- Dung dịch bạch cầu Lazarus (acid acetic nguyên chất: 5 mL; xanh methylen1%: 20 giọt: nước cất vừa đủ 100 mL);

- Dung dịch tiêu cầu Magie sulfate 14% (MegSO:: 14 g; nước cất vừa đủ 100 mL);

- Dung dich Giemsa (Giemsa: 7,6 g; methanol: 750 mL; glycerin: 250 mL);

- Vitamin C tinh khiết (30 mg/kg thê trong): 30 mg L-Ascorbic acid (dang bột

+ nước cat vừa đú 5 mL.

2.2.3 Vật liệu

~ Sơ ri chua giỗng Brazil mua tại Gò Công, Tiền Giang (Hình 2.1) ding đẻ thu

ép thịt quả Dùng dịch ép nay dé cho chuột trồng

Hình 2.1 Sơ ri chua giống Brazil mua tại Gò Công, Tiền Giang

2.3 Phương pháp nghiên cứu

Toàn bộ thí nghiệm của khoá luận được bố trí theo sơ dé Hình 2.2

I Chỉ: 6h00 — 7h00; J Ổn định chuột trong phòng thí nghiệm (2 tuần)

! y An: 6h30—sova H

' _ ———— = 5

1 pee ates i Cân khối lượng, phan bố vào các nghiệm thức

Cas (pha trong, 7

|*T-= -—=-l nước _ cat), Vitc | Sau 8 tuần | | Cán |*T-= -—=-lấy máu

¡thương mại và dichy i (tsi

lép sơ ri được bom!

† xuống thực quản : Xác EP Di các chỉ Số lượng tế bào máu

——======= số huyết học Đường kính hồng cầu

Moi nghiệm thức bổ trí 9 chuột.

ĐC: Đối chứng, NT: Nghiệm thức.

2.3.1 Phương pháp chăm sóc chuột

Chuột nhất trắng đực (Mus musculus var albino) 4 tuần tuôi, mua từ Viện Paster

Thành pho Hỗ Chi Minh Chuột được nuôi ôn định ở điều kiện phòng thí nghiệm

trong 2 tuần để đạt trọng lượng 19 — 21 g (6 tuần tuôi) trước khi tiễn hành thí nghiệm

Điều kiện nuôi chuột như sau: chuột được nuôi trong lông kính có kích thước

30x19x19 cm, với đáy được lót trấu và nắp được đậy bằng lưới inox (4-5con/chuéng) Chu kì sáng tối được điều chỉnh là 10 giờ sáng và 14 giờ trong tối, ởnhiệt độ phòng (27 - 28°C), với độ ầm từ 76 - 80%, được đo bằng máy đo nhiệt kế

điện tử đặt trong phòng Thức ăn của chuột là viên thức ăn tông hợp chuyên dành cho

loài này, được đặt mua từ Viện Sinh học Nhiệt đới Nước uống cho chuột là gồm

nước máy của phòng thí nghiệm đã được khử clorine Chuột được cung cắp thức ăn

và nước uống vào lúc 7 giờ sáng và 17 giờ mỗi ngày Chuông nuôi được thay mới trau sau mỗi 2 - 3 ngày.

2.3.2 Cơ sở chọn nâng độ chì, dịch ép quả So rỉ và vitamin C thương mại

Cơ sở chọn nông độ cadmium:

Căn cứ vào Công bố của Wang va cộng sự (2020), cho thấy tiếp xúc cadmium

clorua ở nồng độ | mg/kg và 2 mg/kg thê trọng trong 35 ngày liên tiếp đã gây ra ảnh hưởng đáng kẻ đến trọng lượng cơ thể chuột va một số anh hưởng khác [76];

Hounkpatin va cộng sự [71] đã nghiên cứu nhằm khảo sát tác dụng bảo vệ của vitamin

C đối với các thông số huyết học ở chuột Wistar bị nhiễm cadimi clorua (0,25 mg/kgthé trọng và 2.5 mg/kg thê trọng, kết quả cho thấy, Cd làm giảm số lượng hồng cau

kể cả ở liều cao hay liều thấp; giảm số lượng bạch cầu khi được xử lí ở liều cao; nồng

độ Hb và HCT giảm khi được xử lí ở liều thấp Ở nghiệm thức được xử lí bởi Cd kết

hợp vitamin C cho thấy tiềm năng bảo vệ của vitamin C khỏi kim loại độc hại này Với nghiên cứu thực hiện kéo dai (60 ngày), nòng độ cadmium chloride 1 mg/kg thé

trọng được chọn dé sử dụng cho nghiên cứu này.

Cở sở chọn nông độ dịch ép thịt quả sơ ri:

Sharaf và cộng sự (2017) cho thấy với nông độ 30 mg vitamin C/kg trong thời

gian 30 ngày có thé cải thiện tác dụng có hại của cadmium đối với các thông số huyết

học [70] Do đó, đề tải cũng lựa chọn nòng độ 30 mg/kg thẻ trọng lảm đối chứng

dương cho thí nghiệm Dựa vào nghiên cứu của Van và cộng sự (2023), việc sử dụng

dung dịch ép chanh dây cho thấy có tiềm năng trong việc giảm/hạn chế độc tính của

kẽm (90 mg/kg thê trọng) gây ra cho chuột, trong đó nồng độ dịch ép chanh dây 30 mg/kg thé trọng cho hiệu quả hơn ở nòng độ 20 mg/kg the trọng [77], do đó chọn 3 nông độ dịch ép sori la 10, 20 va 30 mg/kg thê trong dé thực hiện khảo sát trong đề tải này.