Khóa luận tốt nghiệp Sư phạm sinh học: Khảo sát ảnh hưởng độc tính của Cadmium lên chất lượng tinh trùng của chuột nhắt trắng (Mus musculus var. albino)

Võ Văn Thanh Cơ quan công tác: Khoa Sinh học, Trường Dai học Sư phạm Thành phô Hỗ Chí Minh Điện thoại: 0988447441 Email: thanhvv@hcmue.edu.vn Tôi đã bảo vệ khoá luận tốt nghiệp với dé tà

BO GIAO DUC VA ĐÀO TAO TRUONG DAI HQC SU PHAM TP HO CHI MINH

PHAM ANH HAO

KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC

NGANH SU PHAM SINH HOC

THÀNH PHO HO CHÍ MINH-2024

BỘ GIÁO ĐỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HÒ CHÍ MINH

PHAM ANH HAO

KHAO SAT ANH HUONG DOC TINH CUA CADMIUM LEN CHAT LƯỢNG TINH TRÙNG CUA

CHUOT NHAT TRANG (Mus musculus var albino)

KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC

NGANH SU PHAM SINH HOC

NGUOI HUONG DAN KHOA HOC

ThS Võ Văn Thanh

THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH-2024

CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM

Độc lập - Tự đo - Hạnh phúc

BẢN XÁC NHAN CHINH SỬA KHOA LUẬN TOT NGHIỆP

Họ và tên: PHAM ANH HAO

Sinh viên khoá: 46 (2020 - 2024) Mã sinh viên: 46.01.301.031 Ngày sinh: 12/06/2002 Nơi sinh: Lâm Đồng

Chương trình dao tạo: Ctr nhân Sư phạm Sinh học

Người hướng dẫn: ThS Võ Văn Thanh

Cơ quan công tác: Khoa Sinh học, Trường Dai học Sư phạm Thành phô Hỗ

Chí Minh

Điện thoại: 0988447441 Email: thanhvv(@hcmue.edu.vn

Tôi đã bảo vệ khoá luận tốt nghiệp với dé tài: Khảo sát anh hưởng độc tính

Cadmium lên chat lượng tinh trùng của chuột nhất trang (Mus musculus var albino)

tại Hội đồng cham khoá luận ngày 08 thang 05 năm 2024

Tôi đã sửa chữa và hoàn chỉnh khoá luận tốt nghiệp đúng với các góp ý yêu

cau của Hội đồng và uỷ viên nhận xét, gồm các ý chính như sau:

- Chỉnh sửa các lỗi chính tả, font chữ trong bài báo cáo.

- Sửa lại nhận định vé ảnh hưởng của độc tính Cadmium đổi với chi số

testosterone.

- Viết lại phần kết quả - ban luận theo góp ý của hội đồng (lồng ghép phan

bàn luận vào kết quả thay vì tách bàn luận thành mục riêng).

- Rút ngắn phụ lục phù hợp với nội dung bài bao cáo.

Nay tôi xin báo cáo đã hoàn thành sữa chữa khoá luận như trên và dé nghj

Hội đông châm khoá luận, người hướng dẫn khoa học xác nhận.

Thanh pho Hỗ Chi Minh, ngày 17 tháng 05

nam 2024

Sinh viên

B—

Pham Anh Hào

Xac nhan Xác nhận của Chủ tịch Hội đồng

của người hướng dẫn khoa học

a

ThS Võ Văn Thanh TS Phạm Cử Thiện

LOI CẢM ON

Trong suốt khoảng thời gian thực hiện vả hoản thanh dé tai khoá luận tốt nghiệp đại học, ngoài sự nỗ lực của bản thân trong suốt quãng thời qua, tôi luôn

nhận được sự giúp đỡ tận tinh của Quý Thay Cô, gia đình và bạn bè

Pau tiền, tôi xin bay tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thay-ThS Võ Van Thanh,

người luôn tận tâm hướng dẫn giúp tôi hoàn thành đề tài khoá luận tốt nghiệp.

Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý Thay Cô Khoa Sinh học Trường

Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh đã giảng dạy các kiến thức và giúp đỡ

tôi rất nhiều Tôi xin chân thành cảm ơn Thay - ThS Trương Văn Tri, Cô PGS

TS Nguyễn Thị Thương Huyền đã rất nhiệt tình chỉ dẫn, hỗ trợ kinh phí, giúp đỡtôi trong suốt quá trình thực hiện dé tải tại phòng thí nghiệm

Tôi xin cảm ơn tập thê bác sĩ Phòng giải phẫu bệnh-Tế bảo học-Phòng khám

Đa khoa Bệnh viện Hoà Hảo, Thành phố Hồ Chí Minh đã hỗ trợ nhuộm mẫu mô.

Cảm ơn Viện Pasteur Thanh phố H6 Chí Minh đã cung cấp nguồn chuột dé tôi

thực hiện và hoàn thành đẻ tài.

Tôi chân thành cảm ơn chị Nhi, chị Hằng, chị Dương, anh Quang, chị Nguyệt

đã giúp đỡ tôi nhiệt tình trong thời gian thực hiện dé tai.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn và cảm kích đối với gia đình, bạn bè đã ủng hộtôi trong suốt quãng thời gian học tap, nghiên cứu và hoàn thành dé tai Cam on

ban Bao Ngọc, bạn Kim Mi, bạn Văn Phước, bạn Khánh Phương và bạn Huy Bửu

đã động viên tôi rất nhiều trong suốt quá trình thực hiện.

Thành phố Hỗ Chí Minh, ngày 02 tháng 05 năm 2024

Sinh viên thực hiện dé tai

Phạm Anh Hào

MỤC LỤC

LÔNG MHÔN Geioisisiiieitastittgi1i11210434020335033618191033338313143513888183838315823362033288E i

MUI © Ụ-:-:-:::-:-::::::2:2:2:222:2127201121015111213151035191181816151849131335121393393E192951835 61535133383 ii

DANH MUO CHU VIET TAD sc sccesesscsseaccncncnssarasscscacssssssosnansssnssaessanssecssesssasnenes vi

DANHIMUC CAC HINA iccsissccssecsenencrnennmrnnncuannenunnnnenn viii

MO BDA sscsssssssssssascicecsccasssarnisasssasassscasiesasaonnstarssssensanssasasasararsisseasisssmcseiatans |

I Tính cấp thiết của đề tài St H2 S213 321515121212125 0502221717171 xe |

II Mục tiêu nghiên CỨU -:-::::::c:2:222(222:20<020212002121202140618122812121612184145454044e16 2

TH.PBam.vinghiêniGỮU::::::::-:::c:cicisiittiit2iitit2i21112121111113121392123312165518365556513138332 2

ð;10101y)59J8610).6)10)01 11100 Tớ 3

1.1 TONG QUAN VỀ CADMIUM 2 2S St S22 E*E*cErrErrrrersrxee 3

1.1.1.Tông quan về Cadmium ccccccceseseceesesseseesesscecesesecseereevesearsneeseees 3

1.1.2 Dạng tôn tại của Cadmium ngoải môi trường eee 3

1.1:3:Cadmium và độc tính của NG .cssssescssesescssssssscasssasasasasasasascsssssssssssasase 4

1.1.4.Cơ chế gây độc của Cadmium 2c 1 12212121111 12021221 xe 5

1.1.5 Anh hưởng của Cadmium lên hệ sinh duc đực -. - 6 1.1.6.Tình hình ô nhiễm Cadmium hiện nay - ào cv crererercrces §

1.2 Tổng quan về chuột nhất trắng (Mus musculus var albino) 9

PQ Viel PHAN ÍO8li‹:::si::siscsiciciiitisiscsiiiitnininiii2305161416140516181818186355580558558455 9

1.2.2 Giới thiệu chung về chuột nhất trăng "—— 101.2.3.Đặc điểm hệ sinh sản chuột nhắt trắng NMG 11

1.2.3.1.Tinh hoàn occ cccccccceeecoseeeeseseeecseueeeeeueeecusnaeevevsseeseueeeeenseeeenens 1]

1.2.3.2.Các hệ cơ quan khác của hệ sinh dục chuột đực 13

Í¿23:3:3:IMROIEfHLicczssissisisssisirsis555045615161616121015501135514561835551836161258384550356:18 13

Ï;5-3/4i01nEi(E n(NHD, ; ;52s::2:2:52552:2550202250358732358514383830212353232380E3E23234840202 l3

1.2.3.5.Cấu tạo tinh trùng chuột - -¿-sc cSS2 S2 S212121 11s sxcee 14

I.2.3:6: Hormone sinh: dỤC ỰC:::::iccccccscsieisieieietitisieceteteraratarassieszsssisssse 14

1.3 Tình hình các công trình nghiên cứu trên thé giới và ở Việt Nam 15

1.3.1 Tình hình nghiên cứu trên the gi6i 0.0 ccc cecseececsesceceeeeeeeeeesesvees 1§ 1.3.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam - án HsHhhee 19 1.4 Nhận định chung về tình hình nghiên cứu 2 5557+cscscszsz s22 20 CHƯƠNG 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU cover 21 2.1 Thời gian và dia diém nghiên cứu : 22 2-5252 S2 222 zczzzszvzsrsesv sec 21 2.2 Vật liệu nghiên CU ccccecccesesecssrseeeeneeseeteueeeenseueceensesserueeeeenueeesueees 21 2.3 Dung cụ, thiết bị và hoá chất 22s cs+Se2xcreczersexecrersrxee 21 2:4 Phương pháp nghiên GỨN!::::::sc:ccccissisiiioioiibooiitii4141414141610161615458ã4)5:5 22 2.4.1 Phương pháp chăm sóc chuột ccs Sáo 23 2.4.2 Cơ sở chọn nông AG T110: 1 ố ẻốốỐốỐốỐốỐốỐốốỐốẻố 23 2.4.3 BG trí thí nghiệm ¿si 22 202121211 11112121101112121 11181222 24 2.4.4 Phương pháp chăm sóc chuột - cà Ăn SH ve 25 2.4.5 Phương pháp gây nhiễm Cd cho chuột St 222222222 25 2.4.6 Phương pháp khảo sát khối lượng cơ thê chuột 2- 26 2.4.7 Phương pháp thu mẫu tỉnh hoàn và tinh dịch :-: 27

2.4.8 Phương pháp xác định khối lượng và kích thước tinh hoàn 29

2.4.9 Phương pháp đánh giá mật độ tinh trùng chuột - 29

2.4.10 Phương pháp đánh giá chất lượng tinh trùng chuột 30

2.4.11 Phương pháp đánh gia chất lượng và quan sát vi thé của tinh hoàn 3 I 2.4.12 Phương pháp đánh giá chỉ số testosterone ¿c:ccccccccss52 32 2.4.13 Phương pháp xử lí số liệu - 2-2: 22222222 Z£222EE2Ezcxesxzrsec 32 CHƯƠNG5.KẾT QUÁ VÀ BANIWUAN sscisisessssscosssasssnasssssassiossseisseisssseasssass 33 3.1 Khảo sát ảnh hưởng độc tính Cadmium lên khối lượng của chuột 33

3.2 Khảo sát ảnh hưởng độc tính Cadmium lên khói lượng tỉnh hoàn chuột 36 3.3 Khảo sát ảnh hưởng độc tính cadmium lên kích thước tỉnh hoàn chuột 38

3.3.1 Chiều đài của tinh hoàn chuột qua các nghiệm thức 38

3.3.2 Chiều rộng của tinh hoàn chuột qua các nghiệm thức 39

3.4 Khao sát ảnh hưởng độc tinh Cadmium lên số lượng tinh trùng chuột 41

3.5 Khảo sát ảnh hưởng của độc tính Cadmium lên chất lượng của tinh trùng

GHU Ê::isisiziEtEtEt6G2G1140041614115355555989898383533150R5R3838383538586369455949598161818181919595545555 43

3.5.1 Khao sat ảnh hưởng độc tinh Cadmium lên tỉ lệ sông của tinh trùng

3.5.3.Khao sát ảnh hưởng của độc tính Cadmium lên tỉ lệ di động bình thường

CHD PON ` a4 PL36

Phu luc 4.5 Anh hưởng của độc tinh Cd lên chi số testosterone PL4I

Phụ lục 5 Chấp thuận của hội đồng y đức s2 222 2szszscscsrses PL47

W0 Tuần bắt đầu thực hiện đẻ tài

W4 Tuần thứ 4 từ khi bắt đầu

W§ Tuan thứ 8 kê khi bắt đầu

SD-Standart Độ lệch chuẩn

deviation

TB Trung binh

(NT1) Chuột cho udng nước máy khử clo bình thường

(NT2) Chuột được uống nước pha Cadmium (CdC]:.2,SHzO)

DANH MỤC CÁC BANG

Bang | Các dụng cụ và thiết bị hỗ trợ chăm sóc chuột - 21

Bang 2 Hoá chat sử dụng cho thí nghiệm 5-5-5222 srscse2 21

Bảng 3 Hoá chat sử dung cho thí nghi@m 0 c.c.ccccccscesseseeseeeesesseeeeees 23

DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 1.1 Cau tạo của hệ sinh dục chuột đực 2-22-.- li

Hình 1.2 Cấu tạo của mô tỉnh hoàn chuột 22 s2sscxcxcxccrsrxex 12 Hình 1.3 Cau tạo tinh trùng chuột nhắt trắng -.- 5:55:25 522 14

Hình 2.1 Bố trí các nghiệm thức chăm sóc chuột - ác cSc<ev+ 24 Hình 2.2 Sơ đồ bồ trí thí nghiệm tông thé của khoá luận - 25 Hình 2.3Tién hành cân khảo sát trọng lượng chuột trước khi đưa vào nghiệm thức

N 5111312920111 111221122041245121312131)111211120213440312121213111421312221312121313020311122021132303.5 27

Hình 2.4 Phương pháp thu mẫu tỉnh hoàn chuột -¿-2-sssc s2 sxszsx s52 28

Hinh 2.5.Thao tác thu nhận tinh địch chuột tr mao tính : cree 28

Hinh 2.6 Phân loại tinh hoàn của chuột theo NT o 2 occ cece cece cece cece eee eee 29

Hình 2.7 Mật độ tinh trùng trên buông đếm Neubauer (x40) - - 30

Hinh 2.8 Trạng thai của tinh trùng khi nhuộm kép sóc {<5 31

Hình 3.1 Biêu đồ thé hiện khối lượng trung bình của chuột giữa các nghiệm thức

Hình 3.2 Biểu đỏ thé hiện khối lượng trung bình của tỉnh hoàn chuột giữa các

Hình 3.5 Biểu đỏ thé hiện mật độ trung bình của tỉnh trùng chuột giữa các nghiệm

Hình 3.6 Biểu đồ thé hiện tỉ lệ sống trung bình của tinh trùng chuột giữa các

NSD MMW: ::¡cccisepcooipiicbiiitsiiisisiai412181111 13416546518130305388816105548 6855 44

Hình 3.7 Biéu đồ thê hiện ti lệ di dạng trung bình của tinh trùng chuột giữa các

nghiệm thỨC ‹::‹:::-:::::::::::::c::c:cc2:222221202220212022222322221212281216185212455385 65356 45

Hình 3.8 Biéu đô thẻ hiện ti lệ di động bình thường trung bình của tinh trùng

chuột.g1ữa cä6 nñghiệH -.-.-.c.-<cc<scecssenssetsseEsEaessseesssee 46

Hình 3.9 Các kiêu di dang của tinh trùng chuột được ghi nhận 47

Hình 3.10 Tinh trùng ở trạng thái bình thường không di dạng 47

Hình 3 11 Kết qua thé hiện chi số testosterone trung bình của tinh trùng chuột

giữa các nghiệm thức (theo kiểm định Turkey) 48 Hình 3.12 Cau trúc mô tinh hoàn chuột ở các nghiệm thức sau 8 tuần thí nghiệm

(SۊlE Bar LOO (Hi ):::isos:icicitici22i2022121212630101352502131518181636193538895838586 51

MO DAU

I Tính cấp thiết của đề tài

Ô nhiễm môi trường không chỉ là một van dé của một khu vực mà đã trở thành một thách thức toàn câu, đặc biệt là với ô nhiễm từ kim loại nặng Khả năng

tiếp xúc với những chất này không chỉ gây nguy hại cho sức khỏe của con người

mà còn tạo ra những tác động tiêu cực đến môi trường tự nhiên và sinh quyền

Trong số các kim loại nặng, Cadmium (Cd) nồi lên như một trong những nguyên

nhân gây ra nhiều lo ngại và bất an

Cadmium thường được sử dung trong nhiều ngành công nghiệp và san xuất,

từ việc sản xuất pin, màu sơn [1] đến việc khai thác và chế biến khoáng sản Nó cũng thường xuất hiện trong phân bón vả thuốc trừ sâu được sử dụng trong nông nghiệp gây ra sự tiếp xúc không mong muốn với con người thông qua thực pham

và nước uống Thậm chí, sự tiếp xúc với Cd có xảy ra qua không khí ngay trong

môi trường lao động [2] Tuy nhiên, điều đáng lo ngại là Cd có thé tiếp tục tôn tại

trong môi trường và tích tụ trong cơ thể con người một cách lâu đài [3], gây ra những vấn đề sức khỏe nghiêm trọng như suy giảm trí nhớ [4], giảm chức năng

gan, than [5], các van dé sinh san [6] va thậm chí là ung thu [7] Mac dù mức độnhiễm độc Cadmium cấp tính hiện nay không phố biến, nhưng tiếp xúc lâu dai vớiCadmium ở mức độ thấp vẫn có thé gây ra nhiều van đề sức khỏe

Trong số các cơ quan bị ảnh hưởng nặng né bởi Cd, tỉnh hoàn là một trong

những cơ quan quan trọng đáng chú ý Cơ quan nay không chi là nơi sản xuất tỉnh

trùng mà còn chịu trách nhiệm cho sự phát triển và chức năng của hệ thống sinh dục Cadmium có thẻ gây ra tốn thương trực tiếp đến tỉnh hoàn thông qua các cơ chế như stress oxy hoá, và cả sự biến đổi gene [5] Những ton thương này có thé dẫn đến giảm số lượng và chất lượng tỉnh trùng và thậm chí gây ra vô sinh ở nam giới.

Do đó, việc nghiên cứu về ảnh hưởng của Cd lên chất lượng tỉnh trùng không

chi là quan trọng ma còn cân thiệt dé hiệu rõ hơn về tac động của chat nay đôi với

sức khỏe sinh sản của con người và động vật Chính vì vậy, đẻ tài khoá luận “Khảo

sát ảnh hưởng độc tính của Cadmium lên chất lượng tỉnh trùng của chuột

nhắt trắng (Mus musculus var albino)” được thực hiện.

Il Mục tiêu nghiên cứu

Khảo sát ảnh hưởng độc tính của Cd lên chất lượng tỉnh trùng của chuột nhắt tring thông qua khối lượng cơ thé, số lượng va chất lượng tinh trùng, khối lượng

và cau trúc tinh hoàn, cấu trúc giải phẫu của tinh hoàn chuột.

IL Pham vi nghiên cứu

Khối lượng cơ thẻ tỉnh hoan và tinh trang chuột nhất trắng 6 tuần tuôi.

Khảo sát 3 nồng độ Cadmium: | mg/kg thé trọng, 3 mg/kg thé trọng va 6 mg/kg thê trọng.

Các thông số khảo sát: độ tăng trọng; số lượng và chất lượng tỉnh trùng: khối

lượng và kích thước tinh hoàn; cau trúc mô học của tỉnh hoàn

CHƯƠNG 1 TONG QUAN

1.1 TONG QUAN VE CADMIUM

1.1.1 Tong quan vé Cadmium

Cadmium là kim loại có kí hiệu là Cd, tương đối hiểm, mềm, mau trắng ánh

xanh và có độc tính, thường tôn tại trong các quặng kẽm va được sử dụng chú yếu trong các loại pin Cd va các dung dich, các hợp chất của nó là những chất cực độc, thậm chí chỉ với nông độ thấp, chúng sẽ tích lũy và gây hại cho cơ thé Khi đất trồng bị nhiễm Cd thì các loại cây trong cũng dé dang bị nhiễm lây và xâm

nhập vào cơ thể người qua ăn uống [3]

Tiếp xúc đài ngày trong môi trường có chứa Cd hoặc ăn loại thực phẩm có

chứa lượng Cd cao sẽ gây nhiễm độc mãn tính Nếu nhiễm Cd qua đường hô hap,

trong vòng 4-20 giờ sẽ cảm thấy dau thắt ngực, khó thở, tim tái, sốt cao, nhịp tim

chậm Ngoài ra, khi hít phải bụi có chứa Cd sẽ nhanh chóng dẫn đến các van dé

đối với hệ hô hap va thận, có thẻ dẫn đến tử vong (thông thường là do hỏng thận)

[8].

Nếu nhiễm Cd qua đường tiêu hoá sẽ gây buồn nôn, nôn, dau bụng, đi ngoài.

Tham chi, chỉ cần nuốt phải một lượng nhỏ Cd cũng có thê phát sinh ngộ độc tứcthì, đồng thời, còn gây tôn thương cho gan và thận Riêng nhiễm độc Cd mãn tính

có thể gây vàng men răng, tăng men gan, đau xương, xanh xao, thiểu máu, tăng huyết áp Đặc biệt, khi phụ nữ có thai bị nhiễm độc Cd sẽ làm tăng nguy cơ gây di dang cho thai nhỉ [9].

Các hợp chất chứa Cd thường cũng là các chất gây ung thư Ngoài tồn thương

thận, người bệnh còn chịu các chứng loãng xương và nhuyễn xương Hiện nay,

chưa có phương pháp giải độc Cd hữu hiệu [9].

1.1.2 Dang ton tại của Cadmium ngoài môi trường

Cadmium hay Cadimi (Cđ) là một kim loại nặng có trong đất, thường ít gặp

Cd ở dang tinh chất vi Cd thường phối hợp với những thành phần khác dé cho ranhiều dang khác nhau, chẳng hạn như: Cadmium Oxide, Cadmium Chloride,

Cadmium Sulfate, và Cadmium Sulfide [10].

Cadmium được phát hiện bởi một nha bác hoc Dức vào năm 1817, có số thứ

tự 48 trong bảng tuần hoàn các nguyên tố hoá học của nhà khoa học Trong ngành

được có sử dụng một hợp chất: Cadmium Sulfide với một số tên biệt được như:

Biocadmio, Buginol, Capsebon, Mirador, Cadmium được khai thác các mỏ

Copper, va Zinc Nhờ đặc tính ít bị ri sét nên Cadmium được sử dụng trong việc

sản xuất piles (trong điện cực của các loại piles nickel-Cadmium), batteries, ma kén, hợp kim alliage, que đũa han, trong sản xuất chat plastic polyvinyl Chloride

(PVC) Cadmium được sử dung.

Bởi lí do trên đô chơi trẻ em va vật dụng làm bằng chat déo PVC đều có chứa

Cadmium Cadmium cũng được dùng trong những loại nước sơn đặc biệt trong

sản xuất đồ sứ như chén, dĩa, [ I0]

1.1.3 Cadmium và độc tính của nó

Những ánh hướng nghiêm trọng của việc nhiễm Cadmium đã được phát hiện

những lần đầu tai Nhật Bản Năm 1946, một số cư dân ở Jintou (Nhật Bản) đã mắc

bệnh itai-itai, một căn bệnh có biểu hiện bán cấp nhiễm độc Cd [11], [9]

Tại Pháp vào tháng 9/1999, người dân sống tại quận 15 Thành phố Marseille

đã một phen lo sợ khi ăn rau qua tại địa phương trồng và thu hai có nhiễm

Cadmium do nhà máy TLM ở vùng đó chuyên sản xuất dây Copper và trong quy

trình có sử đụng Cadmium, từ đó Cadmium đi vào đất và ngắm vào thực vật, cây

trong[5]

Qua kiểm tra sức khoẻ một số người, các bác sĩ đã phát hiện Cadmium đã tích tụ trong cơ thể nhiều người, đặc biệt là ở thận, đó là cơ quan đầu tiên mà

Cadmium phá hủy Đã có khoảng 70 học sinh trong khu vực bị nhiễm độc

Cadmium với các triệu chứng: nôn mửa, tiêu chảy, trong đó có hai trưởng hợp

nguy hiểm Khi đi vào cơ thé, Cadmium có xu hướng cạnh tranh với các vi chất

có trong cơ thẻ [12].

Cadmium cạnh tranh với Calcium (Ca) trong calmodulin (chất có tác dụng

điều chỉnh các hoạt động trong tế bào) gây chứng loãng xương Những tôn thương

về xương làm cho người bị nhiễm độc Cadmium đau đớn ở vùng xương chậu và hai chan [13].

Cadmium cạnh tranh với vi khoáng Zine (Zn), Tin (Sn), Iron (Fe) Các

nguyên tố vi lượng nảy tham gia vào thành phan cấu tao của hang trăm loại men sinh hoá, tạo máu và nhiều chức năng trong hoạt động sống của con người Khi bị

Cadmium cạnh tranh sẽ đẫn đến sự đảo lộn của nhiều quá trình [14]

1.1.4 Cơ chế gây độc của Cadmium

Sử dụng thực phẩm chứa nhiều Cadmium sẽ gây ra tình trạng rối loạn tiêu

hoá (buồn nôn, nôn mứa hoặc nặng hơn là tiêu cháy) Do sự phan tan vào môi trường thông qua một số quy trình như khai thác, nung chảy chất màu, ôn định nhựa, giống như các loại kim loại khác, Cadmium tổn tại vô thời hạn trong môi

trường vì nó không bị phân hủy sinh học Do dé, đất bị 6 nhiễm và Cadmium sẽđược xâm nhập vào chuỗi thức ăn của con người, các động vật khác bằng cách tiêu

thụ thức ăn, nguồn nước bị ô nhiễm Ngoài ra, môi trường xung quanh nơi khai

thác cũng làm cho cho con người bị nhiễm Cadmium Các báo cáo đánh giá chế

độ ăn uống và các chương trình giám sát dan số cho thay rằng hau hết mọi người

không thê tránh khỏi việc tiếp xúc lâu dài với lượng Cd thấp, điều này gây ảnh

hưởng xấu đối với sức khỏe của trẻ em, người cao tuổi [15]

Sau khi hap thụ Cd, chất độc nay được giữ lại trong cơ thé và duy trì thời

gian sinh học trung bình trong khoảng 20-30 năm ở người Khoảng 1⁄3 chất độc

của cơ thê sẽ ảnh hưởng đến thận Sau khi tiếp xúc nhiều, Cd được tìm thấy nhiều

hơn ở gan, nơi thời gian bán huỷ sinh học ngắn hơn so với thận Tuy nhiên, chưa

có triệu chứng cụ thể nào được chỉ ra khi nhiễm độc Cadmium ở người Một sốphương pháp giám sát sinh học là dé tìm kiểm các dấu hiệu tác động sớm ở cơ

quan quan trọng [1Š], [16].

Nghiên cứu [L7] chỉ ra rằng Cadmium lây nhiễm chủ yếu qua không khí, chấtđộc này được tao ra trong quá trình tinh chế Zine bằng cách chưng cat và do tính

dé bay hơi cao nên nó lắng đọng ở tất cả các phân đoạn Hiện tai, ở Ba Lan, các

ngành công nghiệp nặng thực tế đang biến mat và do đó con đường lây nhiễm Cd

chính ở nước nay là hút thuốc lá va tiêu thụ thực phẩm bị ô nhiễm Các triệu chứng

đặc trưng của ngộ độc Cd khác nhau tùy thuộc vào thời gian phơi nhiễm, chế độ

ăn uống, độ tudi và tinh trạng sức khỏe của những người bị nhiễm Tác động của

Cd đối với cơ thé có thé được điều chỉnh bằng tương tác của nó với các kim loại

khác, chăng hạn như Zine, Selennium, Copper Khói thuốc lá tương tác rất nhanh với nguyên tố này tạo ra ảnh hưởng xấu với cơ thể con người.

Wilezek [17] cho rằng Cd được tích tụ nhiều nhất ở phôi, gan, thận, tuyến tuy, tinh hoàn, cơ, mô mỡ va da, ức chế hoạt động của các enzyme có chứa lưu

huỳnh Người ta ước tinh rằng khoảng 13-19% Cd được hap thụ vào phôi từ không

khí và khoảng 10-44% qua đường tiêu hoá, chủ yếu vào ruột non Cadmium liên

kết với các tế bào hông cau trong phức hợp với các protein phân tử lớn (albumin)

và tích tụ trong gan, trong khi khi tạo phức với các protein phân tử nhỏ (metallothionein-MT), nó được tái hap thu ở ống thận Lượng Cd tích lũy dao động trong khoảng từ 0,14 đến 3,2 ppm trong co, 1,8 ppm trong xương và 0.0052 ppm

trong máu Ngoài ra, Cd còn còn ảnh hưởng đến cơ quan sinh sản, theo nghiên cứunày, tốc độ vận chuyên chậm trong máu của Cd có thé đi đến nhau thai va hàng

rao bảo vệ thai nhỉ, gây quái thai Phan lớn nguyên tổ này được giữ lại trong mô

Tuy nhiên không có đủ dit liệu về vai tro của nó trong say thai sớm va tác động

trực tiếp của nó đến sự phát triển của thai nhỉ ở người Nghiên cứu của Omeljaniuk

và cs [9] xác nhận rang hàm lượng Cd và chi ở phụ nữ sấy thai tự nhiên cao hơn đáng kê: (2,730+2,07 ug/L) và cao hơn nhiều trong nhau thai (214,4+5 14 ng/g) so với nhóm đối chứng (0,166+2,523 wg/L và 127,4+85 ng/g, tương ứng) Điều đáng

chú ý là phụ nữ có nông độ Cd trong máu, nước tiêu và thận cao hơn nam giới

Điều này có thé là do nguồn cung cấp sắt của cơ thẻ bị cạn kiệt và tình trạng thiểu sắt rõ rệt, thường gặp ở phụ nữ trong độ tuôi sinh sản.

1.1.5 Anh hưởng của Cadmium lên hệ sinh duc đực

Nghiên cứu của Kasperezyk và cs tiết lộ rằng số lượng, hình dang tinh trùng bình thường giảm khi tăng nồng độ Cd trong máu [18] Tác dụng độc hại của Cd chủ yếu làm suy giảm chức năng tỉnh hoàn thông qua tôn thương nội mô mạch

máu, tế bao Leydig và Sertoli, các kết nỗi giữa các tế bào và hoại tử ng sinh tinh,

ức chế tông hợp testosterone và làm suy yếu quá trình sinh tinh Cadmium cũng

phá vỡ chức năng của tuyến tiền liệt, dan đến thay đối chức năng bài tiết và nội

tiết tố, làm suy giảm khả năng sinh sản của nam giới [18], Kumar và Sharmađã

đưa dit liệu gần đây được xuất bản từ năm 2000 trở đi vào đánh giá này [19] Kết

qua cho thấy việc nhiễm Cd ảnh hưởng đến các cơ quan sinh sản nam giới và làm

suy giảm kha nang sinh tinh, chất lượng tinh dịch, đặc biệt là khả nang vận động của tính trùng và sự tông hợp nội tiết tố Dựa trên các nghiên cứu thực nghiệm

trên động vật và trên người, Cd cũng làm suy yếu khả năng sinh sản của phụ nữ

và cân bằng nội tiết tô sinh san cũng như ảnh hưởng đến chu kì kinh nguyệt Kumar

và Sharma kết luận răng việc tiếp xúc với Cd ở liều thấp có tác dụng phụ đối với

khả năng sinh sản của cả nam và nữ và ảnh hưởng đến việc mang thai hoặc kết

quá của nó [19] Hơn nữa, việc tiếp xúc với Cd trước khi sinh của mẹ có thẻ có tácđộng khác biệt đôi với con đực va con cái, đặc biệt là ảnh hưởng đến nhiều con

cải hơn.

Theo Angelis [20] Cd là một chat gây 6 nhiễm môi trường được gọi là chấtgây rồi loạn nội tiết Tinh hoàn đặc biệt nhạy cảm với Cd và tồn thương tỉnh hoànxảy ra ở mức độ lây nhiễm cao, thậm chí ở mức độ thấp vẫn gây ra những tác động

đến chức năng của tỉnh hoàn Độc tính của Cadmium được điêu hoa bởi nhiều cơ

chế, bao gồm tôn thương cau trúc đối với mạch máu tinh hoàn và ống sinh tinh,

viêm, độc tế bào trên tế bào Sertoli và Leydig, stress oxy hoá chủ yếu bằng cách bắt chước và can thiệp vào các ion thiết yếu, apoptosis, can thiệp vào các con

đường truyền tin hiệu chọn lọc va sự điều hoà biéu sinh của các gen liên quan đến

việc điều hoà chức năng sinh sản và rối loạn trục vùng dưới déi-tuyén yên-tuyến

sinh dục Đánh giá của nhóm tác giả nay phác thảo những phát hiện quan sat dich

té học từ phơi nhiễm môi trường và nghệ nghiệp ở người, đồng thời báo cáo các nghiên cứu thực nghiệm ở người và động vật Nghiên cứu này tập trung vào việc làm sáng tỏ các cơ chế gây bệnh của độc tinh Cd; xax! định các yếu tô ảnh hưởng

đến độ nhạy cam và khả năng kháng Cadmium, đặc biệt là việc sử dụng mô hình

động vật dé đánh giá cơ chế này Mặc dù có những phát hiện thực nghiệm thuyết

phục ở động vật và bằng chứng hỗ trợ ở người xác định Cadmium là chất độc sinhsản, các kết quả quan sát vẫn còn gây tranh cãi, do sự không đồng nhất trong thiết

kế nghiên cứu và kiêu gây nhiễm, cũng như do nhiễm đồng thời với nhiều chất ô nhiễm.

Kết qua của nghiên cứu [21] đã tiết lộ những tác động nguy hiểm cia việc

tiếp xúc trực tiếp với Cd?* đối với chất lượng tinh trùng sự xâm nhập của tinh

trùng vào tế bào trứng và sự phát triển của phôi có nguồn gốc từ quá trình thụ tỉnh

tự nhiên Kết quả nghiên cứu của nhóm nay đã chi ra rằng việc tiếp xúc trực tiếp

với Cđ?* gây ra những ảnh hưởng có hại đến chức năng tỉnh trùng và sự phát triển của phôi Những dữ liệu đáng tin cậy này đã làm sáng tỏ độc tính của Cd đến chức năng sinh sản ở động vật có vú từ một góc nhìn mới, tức là tác động trực tiếp của

Cd lên giao tử, sự thụ tinh và sự phát triển của phôi Do đó, xem xét mức độ ô nhiễm Cadmium hiện nay ở một số khu vực và tỉ lệ vô sinh ngày càng tăng trong

xã hội Ở một mức độ nào đó đã mở rộng kiến thức về tác hại của kim loại nặng

và nhắn mạnh tầm quan trọng to lớn của việc ngăn ngừa 6 nhiễm Cadmium

1.1.5 Tình hình 6 nhiễm Cadmium hiện nay

Ô nhiễm Cadmium là một van đề môi trường công cộng đáng được quan tâm.Việc tiếp xúc lâu đài với Cd có thé gây ảnh hưởng xấu đến sức khoẻ con người

Nghiên cứu trước đây của Lun [22] cho thấy nông độ Cd (U-Cd) trong nước tiểu

của người dân giảm khi đất lúa bị 6 nhiễm Cd đã giảm thiêu Tuy nhiên, từ năm

2008 đến năm 2014, nồng độ U-Cd tăng lên Đông thời, nông độ j9 2-microglobulin(B 2-MG) trong nước tiêu được coi là đấu hiệu sớm cua roi loạn chức năng thận

do Cadmium gây ra tăng liên tục Với mục đích nay, 83 bài báo có liên quan (chu

yêu là các bài báo trên tạp chí quốc tế) đã được phân tích Người ta thay rằng việcđiều tra Cd trong môi trường du lịch dién ra ở tất cả các châu lục (trừ Nam Cực)

và tăng cường từ giữa những năm 2000; Các nhà nghiên cứu Trung Quốc là những người đóng góp tích cực nhất Sự xuất hiện của Cd trong không khí sinh vật sống tram tích, dat, chất lơ lửng, nước và môi trường con người đã được nghiên cứu.

Theo Mikhailenko [23] trong số các kim loại nặng, Cadmium (48 Cd, thường

hiện diện ở trạng thai Cd (II)) được phân bố tương đối rộng rãi trong tự nhiên

(không khí, sinh vật sông, trầm tích, đất, nước) và trong phạm vi bị ảnh hưởng bởi con người (cây trồng nông nghiệp, thực phẩm, nước thải bùn) và no cũng được cây trong hap thụ Điều này là nguy cơ tiém an do độc tính cao của nó, ngay cả ở

lượng nhỏ cũng có thé gây hại cho sức khỏe con người Mặc di nông độ của kim

loại này trong môi trường ở mức thấp, nhưng nó lại có khả năng tích tụ dan dan

trong các sinh vật sông, bao gồm cả con người Cadmium có xu hướng phân tán

trong sinh quyền, nhưng các hoạt động của con người có thé làm gián đoạn quy trình tự nhiên này, dan đến sự tập trung Cadmium ở một số khu vực Con người

chủ yếu tiếp xúc với Cd thông qua chuỗi thức ăn, đặc biệt là khi tiêu thụ cây trồng

và các sản phẩm tự nhiên khác bị ô nhiễm Lượng Cadmium trong chế độ ăn uống ủnh hướng trực tiếp đến mức độ tiếp xúc của con người với kim loại này Nguồn

Cả có thé là tự nhiên (nồng độ Cd trong môi trường tự nhiên) và nhân tạo (được

đưa vào cảnh quan thông qua phân lân, được sản xuất bing cách khai thác mỏ vàthải ra qua nước thai đô thi); cơ chế hỗn hợp của ô nhiễm Cd là sự vận chuyên khí

thải Cd do con người gây ra va sự ngưng tụ sau đó.

Nghiên cứu [24] giải thích rằng sự phát triển công nghiệp nhanh chóng đã

dẫn đến tình trạng ô nhiễm Cadmium (Cđ) nghiêm trọng Cd là một kim loại nặng độc hại gây nguy hiểm nghiêm trọng cho sức khỏe con người Cd có thé xâm nhập vào cơ thê qua không khí, nước, đất và thức ăn và có thời gian bán hủy dai (10-

30 năm), nó tích tụ phần lớn ở thận, gan, xương vả các cơ quan khác va gây ra tôn thương không thé phục hồi cho các cơ quan đích O nhiễm Cd còn gây ra một số nguy cơ gây ung thư và không gây ung thư cho sức khỏe.

1.2 Tổng quan về chuột nhắt trắng (Mus musculus var albino)

Chi: Chuột-Mus Linnaeus, 1758

Loài: Chuột trang-Mus musculus Linnaeus, 1758

Noi: Chuột trang-Mus musculus var albino Linnaeus, 1758

Tên Việt Nam: chuột nhat trắng

1.2.2 Giới thiệu chung về chuột nhắt trắng

Chuột nhắt trắng là những con chuột nhỏ thuộc Bộ Gam nhắm, thường từ loài

chuột nhất Mus musculus Chuột được sử dụng phô biến trong các thí nghiệm khoa

học về các lĩnh vực y học, sinh học, tâm lí học hoặc các lĩnh vực khác Các nhà

nghiên cứu thường dùng chuột nhat trắng dé làm thí nghiệm vì chúng để nuôi, sinh

sản nhanh, vòng đời ngắn và đặc biệt có hệ gene gần giống con người Với đặc

trưng của chuột nhắt trắng là tính hiền, được nuôi và nhân đản một cách dé dang

và quan trọng hơn là do tính tương đồng cao trong bộ gene của chuột va bộ genecủa người nên hiện nay chúng được coi là đối tượng quan trọng cho các nghiên

cứu y sinh học Y sinh học cũng là lĩnh vực nghiên cứu sử dụng chuột nhất trắng

làm mẫu thí nghiệm nhiều nhất Các gene của chuột được giải mã dé làm giàu ngân

hàng gene nhưng với mục đích chính là phục vụ cho con người Chuột nhắt trắng còn được dùng đề thử tác dụng bảo hộ va tác dụng phụ của vaccine, thử tác dụng

chữa bệnh của thuốc, của các tia xạ, tác dụng va ảnh hưởng của một loại thức ăn

gian thích hợp, giúp các nhà nghiên cứu tìm hiểu cách thức gene người phản ứng

với những nhân tố môi trường tương tự Ngoài yếu tố đi truyền, hệ thống sinh học

trong cơ thế chuột, chăng hạn như các bộ phận cơ thẻ, cũng hoạt động rất giống

con người Một trong những lí do quan trọng nhất là chuột dé biến đổi gene [26]

1.2.3 Đặc điểm hệ sinh sản chuột nhắt trắng đực

Hệ sinh sản ở chuột nhắt trắng đực gom bộ phận chính: tinh hoàn, ống dẫn

tinh, túi tinh, mào tinh, và đương vật (Hình 1.1) Mỗi bộ phận có chức năng riêng.

1: tuyển bao quy đầu; 2: dương vật; 3: túi thừa niệu đạo: 4: tuyến hành

niệu đạo; 5; niệu đạo; 6: tuyển tiên liệt; 7: bang quang; 8: ong dan tỉnh; 9: túi;

10: túi tinh; II: tuyển đồng (trước tuyến tiên liệU; 12: thân mào tỉnh; 13: đầu

mào tinh; 14: đuôi mào tinh; 15: tinh hoàn; 16: dây chang

1,2.3.1.Tinh hoàn

Tinh hoàn gồm một cặp, nằm trong bìu, mỗi tinh hoàn nặng xấp xi 0,06 g va

có kích thước xap xỉ 0,66 em*0,39 cmx0,45 em Tinh hoàn của chuột nhắt tring

được bao phủ bởi lớp mang tạo thành hình viên nang thuốc Loài gặm nham đặc

biệt ở chỗ tinh hoàn tiếp nồi với khoang bụng thông qua ông bẹn-mở trong xuyên

suốt cuộc đời Ong ben được bao phủ bởi các mao tinh lẫn với thể mỡ khi tinh

hoản nằm trong bìu Mỗi tỉnh hoàn cũng được bao bởi mào tỉnh độn với thể mỡ

xung quanh Chức năng chính của tinh hoan là sản xuất tinh trùng va testosterone

[26].

Về cau trúc mô học, lớp tinh

mạc nối tiếp với các vách gian

thay, phân chia các phan của ống

sinh tinh thành các tiêu thay Các

ống sinh tính nỗi tiếp, theo thứ tự

nhất định, từ mạng tinh hoàn đến

tiêu quản, dẫn đến mào tỉnh hoàn

và ống dan tinh Trong phan lớp

lớn tinh hoàn là sự dày đặc của

các ống sinh sinh, chúng xoắn lại

và các khe; các tế bảo Sertoli,

Leydig (tế bào kẽ) và các tế bào

mam sinh đục (Hình 1.2.)

Thành ống sinh tỉnh baogồm các tế bảo Sertoli, tế bào

mam được sắp xếp bên trong biều

mô sinh tỉnh và được bao quanh

bởi lớp màng đáy: lớp mảng đáy

gồm một lớp biêu mô mỏng phủ

Hình 1.2 Cấu tạo của mô tinh hoàn chuộtS: ống sinh tinh; L: tế bao Leydig; mũi tênmỏng: tỉnh nguyên bào sơ cap; mũi tên day: tinh

trùng

trên các tế bào myoid, collagene và một lớp chất nén ngoại bảo bên trong Các tế

bào Leydig nằm cạnh các ống sinh tỉnh, dây thần kinh và các mạch máu Các tế

bào mam tạo ra giao tử đực Tế bao Sertoli nằm xen kẽ các tế bào mam đang phát

trién nhằm hỗ trợ và nuôi dưỡng sự phát triển của tinh trùng Các tinh tử được hình

thành gắn ở ngoài thành ống va đi vào phía lòng ống biệt hoá thành tinh trùng:

mỗi tế bao Sertoli có thé hỗ trợ cho 50 tế bào mam, đảm bảo quá trình sản sinh

tinh trùng hiệu quả [27].

1.2.3.2 Các hệ cơ quan khác của hệ sinh duc chuột đực

Ong dẫn tính nối với mào tinh, dan tinh dich chứa tinh trùng đến đương vật

dé phóng thích ra ngoài (xuất tinh khi giao phối với chuột cái) Túi tinh là nơi chứatỉnh trùng vả tiết địch trộn với tỉnh trùng tạo ra tỉnh địch Dương vật là nơi thựchiện giao phối, xuất tinh và bài tiết nước tiêu Ngoài ra còn có các sinh dục phụgồm tuyến tiền liệt và tuyến hành niệu đạo (tuyến Cowper) Các tuyến phụ có

nhiệm vụ sản xuất các emzyme và các chất dinh dưỡng cho tỉnh trùng nuôi dưỡng

và biệt hoá tinh trùng [26].

1.2.3.3 Mao tinh

Mao tỉnh hoàn gồm một cặp, hình dau hỏi, được hình thành do các ống tinh

từ mạng tỉnh uốn khúc chạy lên và đỗ chung vào một ống chung, thường có 3-5ống dẫn và các ống này được bao bọc trong một lớp đệm mỡ Ống tỉnh của mào

tinh được cấu tạo bởi một lớp biểu mô trụ giả tầng có lông chuyền và các tế bào

ngắn không liên kết Lông mao trong ống dẫn day tinh trùng đến mao tinh hoan,

các tế bào không liên kết được cho là hap thụ một phan dich trong mào tính Mỗi

ống dẫn được bao phủ bởi một lớp cơ trơn có vai trò hỗ trợ trong việc đây tỉnh

trùng đến mảo tỉnh Phần đầu mào tỉnh được kết nỗi với tiêu quản từ mạng tỉnh, phan đuôi là nơi lưu giữ tinh trùng trưởng thành được kết nối với ống dan tinh

[26].

1.2.3.4 Ong dan tinh

Ong dan tinh nỗi liền với mao tinh va dẫn tinh trùng từ đuôi của mao tinh

đến niệu dao Nó là một phan của thừng tinh, bao gồm các mach máu và day than kinh tương ứng Ở chuột, ông dẫn tinh đi từ đuôi của mào tinh qua ống dẫn tinh

và kết thúc mở vào niệu đạo Về mặt mô học, ông dan tinh được bao phủ bởi biêu

mô hình trụ có lông mao, được bao bọc bởi một lớp cơ trơn day Cau trúc này bao

gồm các lớp cơ trơn bên trong, một lớp tron day nằm ở giữa và bên ngoài cũng 1a

các lớp cơ trơn Các lớp cơ trơn dày này đóng vai trò trong việc dẫn và đây tỉnh

trùng ra ngoài trong quá trình xuất tinh Ở những chuột gia, một số tế bào có nhân

đa bội lớn có thé xuất hiện trong biểu mô của ống dẫn tinh, làm cho mào tinh trở

nên lớn hơn và đôi khi có thể bị xoắn hoặc uốn cong với sự ánh hướng của lưu

lượng máu từ mạch tĩnh hoặc động mạch [26].

1.2.3.5 Cấu tạo tinh trùng chuột

Tinh trùng chuột có 3 phần chính: dau, cô (phần giữa) đuôi (Hình 1.3.) Phầnđầu tinh trùng chuột có hình lưỡi móc rất đặc trưng; có hai phan chính là nhân vàthé đỉnh Nhân chứa nhiễm sắc thê ở dạng kết đặc cao, không có RNA, chiếm 65%

thé tích phần đầu Phần trước của nhân được bọc bằng thể đỉnh tạo đạng túi, trong túi này chứa các enzyme thủy phân liên quan đến quá trình xâm nhập cúa tỉnh trùng qua mảng trong suốt (zona pellucida) Phan cô rất ngắn, chứa nhiều ti thê, tập trung thành từng vòng quanh trục, đây là nơi sản sinh ra năng lượng cho hoạt

đông của tinh trùng Duôi giúp tinh trùng đi động [26].

\

Bull tình trong taco

chữa đài (yen)

⁄

Doge g 0a tí tà trông

thee chide đài (per)

{He tính tring theo chiều đài (um)

Os tr trừng

theo chiều rụng

(um)

Hình 1.3 Cấu tạo tinh trùng chuột nhat trắng

1.2.3.6 Hormone sinh duc đực

O chuột nhất trang nói riêng và động vật có vú nói chung, hormone đóng vai

trỏ quan trọng trong qua trình sinh sản của con đực Một trong những hormone

quan trọng là hormone phóng thích kích dục tố (GnRH-Gonadotropm Releasing

Hormone), được sản xuất bởi các tế bào thần kinh nội tiết ở vùng đưới đồi GnRH

được giải phóng vào hệ thông mach máu va đi đến tuyến yên kích thích thuỳ trước

tuyến yên tiết ra hai hormone FSH (Follide Stimulating Hormone-hormone kích thích nang noan) và LH (Luteinizing Hormone-hormone hoảng thé hoá) Cả hai hormone này đều tham gia vào quá trình sản sinh tỉnh trùng.

Hormone LH kích thích tế bảo Leydig ở khoang kẽ tiết ra testosterone, đóng

vai tro quan trọng trong quá trình nội tiết va sinh sản Trong khi đó, hormone FSH

kích thích sự phát triển của ống sinh tỉnh và tế bào Sertoli, giúp tiết ra địch chứa nhiều chất dinh dưỡng hỗ trợ cho sự phát triển và trưởng thành của tinh trùng.

Ngoài ra, các yêu tổ khác như nhiệt độ, tia phóng xạ, bệnh lý, chất kích thích,

stress, cũng có thé ảnh hưởng đến sự sinh san của tinh trùng [28]

1.3 Tình hình các công trình nghiên cứu trên thế giới và ở Việt Nam

1.3.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới

Năm 2006, Wang và các cộng sự của mình đã nghiên cứu tác dụng của việc

bô sung ascorbic acid va thiamine ở các nông độ khác nhau đôi với độc tinh của

chì gây ra ở tỉnh hoàn chuột [29] Nghiên cứu được tiễn hành với 75 con chuột

được chia ngẫu nhiên thành 5 nhóm (15 con/nhém): đối chứng: nhóm được xứ lí

bằng chi kết hợp vitamin C (liều thấp, trung bình và cao) và các nhóm cho uốngvitamin C (nông độ 140, 420, 1260 mg/kg) kết hợp với thiamine (10, 30, 90mg/kg):Các nhóm được cho uéng bằng đường miệng hằng ngày Nhóm được xử lí với chi

với nông độ 0,2% chi acetate pha trong nước uống Kết qua cho thay, so với nhóm đối chứng, các biêu hiện TGFfI và caspase-3, chỉ số apoptotic (AI) và tôn thương

DNA đều tăng đáng kế ở nhóm tiếp xúc với chì (P<0,05) Sau khi can thiệp vitamin

C liều thấp và liều trung bình, ti lệ tôn thương DNA va số lượng tế bào apoptotic

ở chuột viêm tỉnh hoàn biểu hiện thấp hon so với nhóm tiếp xúc với chi (P<0,05)

và các mô bị tôn thương có sự cải thiện Tuy nhiên, việc bồ sung đông thời acid

ascorbic va thiamine ở liễu cao nhất đã thúc day quá trình apoptosis tế bào tinh

hoản thông qua việc tăng biểu hiện TGFƒI và caspase-3 Như vậy, khi điều trị kết

hợp với thiamine và acid ascorbic ở liều thấp hơn đã ức chế hiệu quả các tế bào

tỉnh hoàn khỏi quá trình apoptosis bởi chi acetate, nhưng liều cao hơn có thé làm tôn thương tinh hoan trầm trọng hơn.

Năm 2022, Martinez đã nghiên cứu bước đầu các thông số tỉnh trùng ở chuột,

nghiên cứu được tiến hành nhằm mô tả tuần tự từng bước phẫu thuật dé phục hồi

tinh trùng [13] Hai bước đầu tiên của quy trình nay (thu hỗi tinh trùng va phân

tích khả năng đi chuyên của tinh trùng) được thực hiện trong điều kiện hạn chế vềthời gian và nhiệt độ Kha năng di chuyển cua tinh trùng là hiện tượng sinh lí tiễn

hoá theo thời gian và chịu tác động của nhiệt độ môi trường Đề có được dữ liệu

về khả năng đi chuyên có thê lặp lai, thời gian giữa quá trình lay tinh trùng và đo

khả năng đi chuyên của tinh trùng phải giống nhau đối với tất cả các cá nhân trong

nghiên cứu (thời gian tôi ưu sẽ là từ 15 đến 20 phúU và phải duy trì nhiệt độ 37°C

trong suốt quá trình nghiên cứu Vì các phép đo nông độ và hình thái không bị ảnh

hưởng bởi các yếu tố này nên chúng có thẻ được thực hiện một cách thoải mái sau

đó mà không bị hạn chế Martinez và các cộng sự đã quan sát được các hình tháiđiện hình, bat thường ở dau, bat thường ở roi, bat thường ở cả đầu và roi qua kínhhiền vi ánh sáng của tinh trùng nhuộm Harris-Schorr

Năm 2020, Abdollahi và c.s.đã nghiên cứu so sánh các thông số tinh trùng

của chuột tiếp xúc với một số chất độc hại tác nhân vật lí [30] Nghiên cứu này

nhằm mục đích so sánh ảnh hưởng của việc tiếp xúc với tiếng ôn, độ rung, ánh sáng và tia hong ngoại đối với nam giới Những con chuột được phân ngẫu nhiên

vào năm nhóm tám con, bao gồm những con chuột chưa được lây nhiễm Nhóm

và nhóm tiếp xúc bao gồm ánh sáng (1000 lux), tiếng ồn (100 dB (A)), độ rung

(gia tốc 1,2m/s*) Và tia hồng ngoại (mật độ công suất 5 watt) Các nhóm tiếp xúc

phải chịu bốn tác nhân nay trong 8 giờ một ngày, 5 ngày một tuần trong thời gian

2 tuần Phân tích tỉnh dịch được thực hiện theo hướng dẫn của Tổ chức Y tế Thế

giới Các sự khác biệt trung bình có ý nghĩa cao nhất về số lượng tỉnh trùng

(-1,35*10°%mL) đã được quan sát giữa nhóm sử dụng vi sóng và đối chứng

(P=0,001) Sự khác biệt cao nhất về tỷ lệ bat động (25,88%) được quan sát thay

giữa nhóm nhiều và nhóm kiêm soát (P=0,001) Sự khác biệt cao nhất về hình thái

bình thường (-27,06 %) quan sát được giữa nhóm tiếp xúc với ánh sáng và nhóm

kiểm soát (P=0,001) Bon tác nhân có thé gây ra những thay đổi ở các tinh trùng khác nhau tuy nhiên, các tham số để có kết luận chắc chắn; cần nhiều nghiên cứu

trong phòng thí nghiệm và thực địa hơn Tổng cộng, phơi nhiễm với tia hồng ngoại

có ảnh hưởng lớn nhất đến số lượng tỉnh trùng và việc tiếp xúc với ánh sáng có

ảnh hưởng lớn nhất đến bình thường hình thái và khả năng vận động không tiễntriển Hơn nữa, việc tiếp xúc với tiếng ồn có ảnh hưởng lớn nhất đến sự tiến bộ

tương ứng là phan trăm chuyên động và phan trăm bat động.

Amara va c.s [31] nghiên cứu vai trò chong oxy hoá của Zinc (Zn) trong tinhhoàn tiếp xúc với Cd của chuột Wistar Tuy nhiên các tác gia đã chi ra rằng tiếpxúc cận mãn tính với Cd (CdCh, 40 mg/l, mỗi lần) trong 30 ngày dẫn đến giảmđáng kê tốc độ tăng trưởng (-11%) và trọng lượng tương đối của tinh hoàn (-36%)

và túi tỉnh (-80%) Chuột được điều trị cho thấy mức testosterone trong tỉnh hoàn

và huyết tương giảm tương ứng (-70%, P<0,05; -48%, P<0.05) số lượng tinh trùng

mao tinh hoàn (-22%, P<0,05) va kha năng vận động của tinh trùng (-35) 1%,

P<0.05) Ngược lai, Cd lam tăng nòng độ malondialdehyde (+46%,

P<0,05),metallicothionein (+200%, P<0,05) và nông độ §-oxodGuo (+71%, P<0,05) trong tinh hoan Ở tuyến sinh dục, Cd làm giảm GPx (-30%, P<0,05), CAT (-32%, P<0,05), Mn-SOD ty thé (-34%, P<0,05) va CuZn-SOD trong té bao (-hoạt động 32%, P<0,05) Việc bé sung Zine (ZnCl2, 40 mg/l, mỗi os) ở chuột

tiếp xúc với Cd đã phục héi hoạt động cua GPx, CuZn-SOD và Mn-SOD trong

tinh hoàn ở mức độ của nhóm đối chứng.Cho thay rằng tac động của Cd anh hưởng

rat lớn đến tốc độ tăng trưởng, trọng lượng và túi tinh của tinh hoan

Mudathir [32] chi ra rằng Cadmium (Cd) được biết là có tác dụng gây độc tuyến sinh dục và gây độc cho tỉnh trùng Nghiên cứu được thực hiện để đánh giá vai trò bảo vệ có thê có của chiết xuất hành tay (Allium cepa Linn) và tỏi (Allium

sativum Linn) đối với ton thương tinh hoàn do Cd gây ra và nhiễm độc tinh trùng

Nhóm đối chứng nhận được nước cat hai lần; nhóm Cd nhận Cd (1,5 mg/100g thé

trọng/ngày) qua đường uống: các nhóm được điều trị bằng chiết xuất được xử lítrước bằng các liều lượng khác nhau của chiết xuất hành tây và/hoặc tỏi (0,5mL

và 1.0 mL/100g thé trong/ngay) trong một tuần và sau đó đồng thời tiếp thêm chất

độc với Cd (1,5 mg/100 g thé trọng/ngày) trong thêm ba tuần nữa Tình trạng oxy hoá/chống oxy hoá của mô tinh hoàn và đặc điểm tinh trùng đã được xác định Cd gây ra sự gia tăng rõ rệt (p<0,001) nồng độ peroxid hoa lipid tinh hoàn (LPO) và glutathione S-transferase (GST) trong khi nồng độ glutathione (GSH), superoxide

effutase (SOD), catalase (CAT) va base phosphatase (ALP) lai cao hon giam di.

Nhiễm độc Cd làm giảm đáng kể (p<0,001) nông độ tinh trùng mào tinh hoàn va

kha năng di chuyền của tinh tring, tăng phan trăm tong số tinh trùng bất thường

và số lượng tỉnh trùng sông/chết Cả hai chiết xuất đều làm giảm thành công những

tác đụng phụ này của Cd Nghiên cứu này đã chứng minh rằng chiết xuất nước củahành và tỏi có thé mang lại biện pháp bảo vệ chống lại tôn thương oxy hoá tinhhoàn do Cd gây ra và nhiễm độc tinh trùng bằng cách có thé làm giảm quá trìnhperocid hoá lipid và tăng cơ chế bảo vệ chống oxy hoá ở chuột [33]

Nghiên cứu đã chứng minh rằng Allium cepa cải thiện sự thay đối do CdSO4

gây ra vẻ trọng lượng tỉnh hoàn, số lượng tỉnh trùng, khả năng vận động của tỉnh

trùng và hình thái tỉnh trùng Nó cũng cho thay Allium cepa làm giảm sự biến đôi

của quá trình peroxid hoá lipid trong các mô tinh hoàn do tiếp xúc với CdSO¿

Những phát hiện trong nghiên cứu cho thấy rằng việc xử lí trước mô hình chuột bằng chiết xuất Allium cepa đã ngăn ngừa độc tính sinh sản do CđSO+ gây ra bằng

cách cải thiện chat lượng tinh trùng va tăng cường tinh trạng peroxid hoá lipid tinh

hoản.

Theo [34] giá trị trung bình của đường kính ống sinh tinh, số lượng tế bào

sinh tinh, tế bào Sertoli, Leydig và độ day của lớp mam trong tỉnh hoàn đều tăng

đáng kể (P<0,05) ở tat cả các nhóm so với nhóm CdCl; (P<0,05) Khả năng di

chuyên của tỉnh trùng, số lượng tỉnh trùng và testosterone giảm đáng kê ở nhóm

CdCl: so với tat cả các nhóm điều trị (p<0,05) Giá trị MDA trung bình tăng lên

dang kế ở nhóm CdCl: so với các nhóm khác (p<0.05).

1.3.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam

Năm 2021, Võ Văn Thiệp, Trần Thể Hùng và Nguyễn Thị Hương Bình đã cóbài nghiên cứu về ham lượng Cadimi trong cá Dia tro (siganus fuscescens) va bướcđầu đánh giá nguy cơ rủi ro sức khỏe người tiêu dùng tại vùng ven biển Quảng

Bình Hàm lượng Cd được phân tích bằng phương pháp quang phố hap thụ nguyên

tử ngọn lửa (F-A AS) Ước tính lượng tiêu thụ hang ngày (EDI) và thương số nguy

hại (THQ) đã được sử dung dé đánh giá nguy cơ rủi ro của Cd đối với sức khỏe của người tiêu thụ Kết quả cho thay ham lượng Cd có xu hướng tích lũy cao hơn trong gan so với trong mang và cơ Mặc dù phan lớn hàm lượng Cd trong gan (Quảng Phúc-Ba Đồn và Nhật Lệ-Đồng Hới) va trong mang (Nhật Lệ) đều vượt quá ngưỡng giới hạn của Bộ Y tế nhưng giá trị EDI trong cơ cá dia tro thấp hơn lượng ăn vào hàng ngày có thé chấp nhận được tạm thời (PTDI) do Bộ Y tế quy

định, đồng thời giá trị THQ cũng không vượt quá 1 Do đó tại thời điểm nghiêncứu không có những rủi ro tiềm an của Cd đến sức khỏe người tiêu thụ loài cá này

tại vùng ven biên Quang Bình [35].

Năm 2012, Nguyễn Thị Thương Huyền và tgk [36] đã nghiên cứu về tác động

của Cd lên quả trình phát triển của phôi cả ngựa vin-Danio Rerio (Hamilton, 1822)thông qua tỉ lệ song chết của phôi ở 4 giai đoạn: phôi nang, phôi vi, phân đốt va

hình thành hau, họng Đồng thời ảnh hưởng của Cadmium qua nhịp tim và nhịp quay minh của phôi ở các nồng độ Cadmium 0,1; 1; 5; 10; 20: 50 và 100ug/1 được

đánh giá Các kết quả thu được chi ra rằng phôi cá Ngựa van khi bị lây nhiễm môitrường có chứa Cadmium vẫn cho ti lệ sông cao (thấp nhất là 67+23,6% ở giaiđoạn phân đốt cao nhất là 99,17+2,04%) nhịp tim trung bình của phôi thay đôi

và biến thiên theo sự tăng dan của nồng độCd Phôi được gây nhiễm ở nông độ

Cadmium 100ug/1 có nhịp tim tăng mạnh so với lô đối chứng ở cả hai giai đoạn

khảo sát (182,54 va 158,73 nhip/phut; 215,66 va 185,57 nhịp/phúU Dưới ảnh hưởng của Cadmium, sô lan quay minh của phôi giảm xuông.

1.4 Nhận định chung về tình hình nghiên cứu

Các nghiên cứu trên chuột nhắt trắng đã cho thay rang Cd có thé ảnh hướng

tiêu cực đến sức khỏe sinh sản của động vật Tuy nhiên, dé hiểu rõ hơn về cơ chế

và hậu quả của ảnh hưởng nảy, cần thực hiện thêm nghiên cứu về các tác động cụ

thé của Cd lên chức năng tỉnh hoàn và tinh trùng Việc này là cần thiết để định rõ

mức độ tôn thương ma Cd gây ra đổi với hệ sinh sản chuột đực Đồng thời, thôngqua việc nghiên cứu sâu hơn về cơ chế hoạt động của Cd, chúng ta có thể dé xuấtcác biện pháp phòng tránh và điều trị hiệu quả hơn đẻ bảo vệ sức khỏe sinh sảncủa động vật và có thé mở rộng ứng dụng cho con người Tinh đến hiện tai, các

nghiên cứu trên chuột nhất trắng đã làm sáng tỏ một phần nhỏ của bức tranh tong

thé về ảnh hưởng của Cd lên sinh san, tuy nhiên, cần có nhiều nghiên cứu hơn dé

đi sâu vào cơ chế và hậu quả của tác động này, từ đó cung cấp cơ sở khoa học cho

các biện pháp ứng phó và quản lí hiệu quả hơn về van dé này

CHUONG 2 PHUONG PHAP NGHIEN CUU

2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

Dé tài được tiền hành vào tháng 9/2023-3/2024

Thí nghiệm được thực hiện tại phòng thí nghiệm Giải phẫu-Sinh lí Người vàĐộng vat-Khoa Sinh học-Trường Dai học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh

2.2 Vật liệu nghiên cứu

Chuột nhất trắng 4 đến 5 tuần tuổi, Chuột được nuôi ôn định trong 2 tuần vàđược gây nhiễm Cadium liên tục trong 8 tuần

2.3 Dụng cu, thiết bị và hoa chat

Bảng 1 Các dụng cụ và thiết bị hỗ trợ chăm sóc chuột

STT | Tên dụng cụ và thiết bị Nước sản xuất

1 Phòng nuôi mau vật thí nghiệm (chuột nhắt trăng)

2 Chuông nuôi

3 Trâu lót chuông

4 Máy lạnh

5 May do nhiét ké Bite

6 Binh uông nước

Chuông nuôi chuột được lót một lớp trâu sau đó mới chuột vào nuôi.

Chuông được trang bị bình nước day đủ

Các dụng cụ trước khi sử dụng đã được rửa sạch và khử trùng.

Bảng 2 Hoá chất sử dụng cho thí nghiệm

STT Tên dụng cu và thiết bị | Hãng san xuât Nước sản

ir Cân phan tích Shimadzu Nhật Bản

[2 Kính hiện vi quang học | Olympus Nhật Bản

My tim wei [ie

Lame Greetmed Trung

Quéc

Taneta nea [ ie Fpemon Pa TSoAp TT |e

Raven Smt [|

a J lưaNg,

- Steriplan Dia petri ® 35

im

Bảng 3 Hoá chất sử dụng cho thí nghiệm

STT | Tên hoá chất Hãng sản xuất

1 Cadmium Sigma Die

2 Glyxerin Xilong Scientific

3 Methanol Xilong Scientific

4 Formaldehyde Xilong Scientific

5 Kali dihydrogen phosphate Merck Bite

6 di-Natri hydrogen phosphate — Merck Đức |

7 Natri citrat 5% mua

Dung dịch formaldechyde co định mau: formaldchyde 10%+KH2POs (4

g/1000 mL)+Na2HPOz (6,5 g/1000 mL).

Dung dich Giemsa: 7,6 g Giemsa+750 mL methanol+250 mL lycerin.

Dung dịch chống đông: 5 g Natri citrat+100 mL nước cất.

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp chăm sóc chuột

Thí nghiệm được thông qua Hội đồng đạo đức động vat, mã số

1211/KHTN-ACUCUS ngày 11/12/2023.

2.4.2 Cơ sở chọn nông độ Cadmium

Theo nghiên cứu của Acharya và cs (2008), liều 1,0 mg CdCl:/kg/ngảy trong

khoảng 5-8 tuần thí nghiệm đã ảnh hưởng đến chức năng sinh sản của chuột đực

[33].

Theo nghiên cứu của Vijaya va cs (2020) cho thấy với nông Cadmium độ 6

mg/kg để làm mô hình đánh giá sự ảnh hưởng của độc tính Cadmium lên chấtlượng tỉnh trùng của chuột nhất trắng [37]

Theo đó, đẻ tài khoá luận chọn 3 nồng độ Cd từ CdC1;.2,SH2O đề khảo sát là 1,3 và ómg/kg thé trọng.

2.4.3 Bồ trí thí nghiệm

Chuột đạt tiêu chuẩn làm thí nghiệm được phân chia vào các nghiệm thức vàđánh dau theo thứ tự cố định ở đuôi cho từng con ở từng nghiệm thức Thí nghiệmgồm 36 chuột, chia làm 4 nghiệm thức (9 chuộtnghiệm thức) (Hình 2.2.), baogồm:

Nghiệm thức 1-Đối chứng-(ĐC): chuột cho uống nước máy khử clo bình

Thí nghiệm được bồ trí theo Hình 2.1 và Hình 2.2

Hình 2.1 Bồ trí các nghiệm thức chăm sóc chuột

= An: 7h00 và 17h00 |

- Cd* (pha trong nước|

cắt) được bơm xuống

: thực quản j

Hình 2.2 Sơ đô bố trí thí nghiệm tổng thể của khoá luận

2.4.4 Phương pháp chăm sóc chuột

Chuột nhất trắng đực- Mus musculus var albino (4 tuần tuổi), được mua từ

Viện Pasteur Thành phó Hỗ Chí Minh Chuột được nuôi ồn định ở điều kiện phòng

thí nghiệm tại phòng thí nghiệm Giải phẫu-Sinh lí người và động vật trường Đại

học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh trong 2 tuần dé chuột đạt trong lượng 18

g-22 g (6 tuần tudi)-dé đáp điều kiện tiến hành thí nghiệm

Chuột được nuôi trong lồng kính có nắp đậy bằng lưới inox đưới nên chuồng

lót trau (trau được thay định kỳ 2 ngày/lần), 1 nghiệm thức nuôi 9 con chuột;

Chuột được cho uống nước va ăn bằng thức ăn tông hợp Nước uống và thức

ăn cho chuột được bô sung định kì vào lúc 7 giờ và 17 giờ mỗi ngày Chu kì chiều sáng là 10 giờ sáng và 14 giờ tối Nhiệt độ phòng (25-27°C) được ghi nhận bởi

máy đo nhiệt kế điện tử dat trong phòng

2.4.5 Phương pháp gây nhiễm Cả cho chuột

Pha dung địch muối CdCl2.2,5H20 với nước cat đạt nồng độ 60 mg/kg thétrọng Dùng sctock nay dé pha ra các nông độ khảo sát tương ứng lần lượt là 1, 3

và 6 mg/kg thé trọng.

Chuột được cho uống độc bang ống xilanh có dung tích | mL, gắn với đầu

kim chuyên dụng đầu tròn và bơm trực tiếp theo đường thực quản của chuột, Chuột

làm thí nghiệm được cho uống Cd vào lúc 6-7 giờ sáng hàng ngày, và cho uống

trước ăn 30 phút Sau khi cho uống dung dich Cd, theo đối lần lượt từng cá thể

chuột về biêu hiện trong 48 tiếng sau uống

2.4.6 Phương pháp khảo sát khối lượng cơ thể chuột

Sau khi nhận chuột từ viện nghiên cứu, tiền hành cân trọng lượng từng cá thểchuột (Hình 2.3.) vào budi sáng trước khi ăn vả ghi nhận số liệu sau đó nuôi ôn

định thê trọng của chuột nhất trắng trong 2 tuần, cân và ghi nhận số liệu định kì 4

tuan/lan và tính mức độ tăng khối lượng cơ thé của từng cá thé chuột Khối lượng

cơ thé của chuột được ghi nhận tại thời điểm tuần 0, tuần 4 và tuần 8 của thí

nghiệm.

Hình 2.3 Tiến hành cân khảo sát trọng lượng chuột trước khi đưa vào

nghiệm thức

2.4.7 Phương pháp thu mẫu tỉnh hoàn và tỉnh dịch

Thu nhận ở một đợt, sau 8 tuần thí nghiệm; sé thu nhận tinh hoàn vả tinh dịch

toàn số chuột ở mỗi nghiệm thức Tại thời gian thu mẫu, chuột thí nghiệm được

gây mê bằng cách tiêm thuốc mé (ketamine va xylazine) liều 0,01 mL/10 g vào cơđùi sau của chuột, chờ chuột đi vào trạng thái mê sẽ thực hiện mồ 6 bụng chuột;

kéo tinh hoàn; mao tinh hoàn ra khỏi xoang bụng; dùng kéo nhỏ mũi nhọn tách

phan mỡ và thu 2 mao tinh kèm một đoạn ống dẫn tinh chuyên vào eppendorf chứa

1 mL môi trường CBZ; thu nhận 02 tỉnh hoàn (được tách mỡ) đê xác định khối lượng và kích thước (Hình 2.4.).

Chuyển eppendorf chứa 02 mào tỉnh vào dia petri thủy tinh ®35 chứa | mL