Khảo sát khả năng kháng Độc tính cadmium của dịch Ép quả sơ ri lên một số chỉ số huyết học của chuột nhắt trắng mus musculus var albino

Tác dụng kháng độc ính cậmium lên một số chỉ số sinh hố máu KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ Phụ lục 2 Chỉ sốcinh í máu chut Phụ lục 3 ~ Các chỉ số sinh hố máu chuột Phụ lục 4 - Kết quả phân tíc

(Mus musculus var albino)

KHOA LUAN TOT NGHIỆP ĐẠI HỌC

NGÀNH SƯ PHẠM SINH HỌC

THÀNH PHÓ HỖ CHÍ MINH - 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HÒ CHÍ MINH

He

NGUYÊN KIM MI

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG DOC TINH CADMIUM CUA DICH EP QUA SO RI LEN MOT SO CHi SO HUYET HQC CUA CHUOT NHAT TRANG

(Mus musculus var albino)

KHOA LUAN TÓT NGHIỆP ĐẠI HỌC

NGANH SƯ PHAM SINH HỌC

NGUOI HUONG DAN KHOA HOC

PGS.TS Nguyễn Thị Thương Huyền

THANH PHO HO CHÍ MINH - 2024

Khoá luận ốt nghiệp à kết quả của một quá trình dài tu dồi và nỗ lực không

chỉ riêng bản thân em Em rất may mắn khi luôn nhận được sự giúp đỡ, hỗ trợ tận

tình từ Quý Thầy Cô, gia dịnh và bạn bê của mình

‘au tiên, em xin bày tỏ lòng biết on sâu sắc đến Cô ~ PGS TS Nguyễn Thị

“Thương Huyền, người đã hướng dẫn em trong suốt thời gian thực hiện khoá luận

Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến Thầy ~ ThS Trương Văn Trí, Cô Trần Quốc

Thắng Hoa, Thấy ~ Thể Võ Văn Thanh, Cô ~ TS Trần Thị Minh Định, Cô Trần

“Thị Hiểu đã tạo điều kiện và giúp đỡ em trong suốt thời gian em thực hiện đề tải

nghiên cứu tại Phòng thí nghiệm Giải phẫu — Sinh lí người và động vật

Bên cạnh đỏ, em cũng xin gửi lời cảm em sâu sắc đến chị Kiều Nhỉ, chị Thanh Hằng, chị Nguyệt, chị Dương, anh Quang, bạn Phước, bạn Hào, bạn Ngọc, bạn những người luôn đồng hành, luôn động viên, giúp đỡ và quan tâm tận tỉnh để em hoàn hành tốt nghiên cứu này

Trân trong gửi lời cảm ơn đến quý Thầy, Cô giảng viên Khoa Sinh học,

Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh đã chia sẻ, giúp đỡ và truyền đạt cho chúng em những kiến thức và bài học quý báu

Cuối cùng, con xin gửi lời cảm ơn đến ba mẹ và người thân trong gia định, những người đã chỉa sẽ và động viên con Đặc biệt, con biết ơn ba mẹ vì đã luôn yêu thương, đồng hành và tạo mọi điều kiện, là chỗ dựa tỉnh thằn vững chắc để con hoàn thành khoá luận tốt nghiệp này

TP Hỗ Chỉ Minh, ngày 16 tháng 05 năm 2024

SINH VIÊN

Khoá luận tốt nghiệp với tên đề tải “Khảo sát khả năng kháng độc tính

eadmium của địch ép quả sơ ri lên một số chỉ số huyết học cũa chuột nhất trắng (Mus musculus var albino)” do tôi thực hiện đưới sự hướng dẫn của Cô ~ PGS.TS Nguyễn Thị Thương Huyền Nội dung khoí luận thuộc để tài nghỉ

'CS2023.19.46 do PGS.TS Nguyễn Thị Thương Huyền làm chủ nhiệm Các kết quả trong dé tai đã được nhóm nghiên cứu cho phép sử dụng

Lời cảm ơn ii Mực lục iv

Danh mục bảng biểu vill Danh mục hình ix

I, MYC TIRU NGHIEN CUU 2

IIL BOI TUONG NGHIEN CUU 2

1.1 Tổng quan về cadmium 4 1.11 Đặc tính, ứng dụng và trạng thi tồn tại của cadrnium, 4 1.1.2 Các nguồn phát thải và các con đường phi nhiễm cadmium 5 1.1.3, Tác động, cơ chế gây độc của cadmium với cơ thể con người và động vật 7 1.2 Tông quan về chuột nhất trắng 10 12.1 Vị tí phân loại 0

1.2.3 Đặc điểm sinh lí máu u 1.4 Tổng quan về sơ rỉ l4 13.1, Sơ lược về sơ ri 4 1.3.2 Thanh phin của dịch ép quả sơ rỉ l5 1.3.3 Sơ lược vé vitamin C (ascorbic acid) „ 1-4 Tổng quan các công trình nghiên cứu trên thể giới và Việt Nam Is

1.42 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam 20 2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 2 3.1.1 Thời gian nghiên cứu, 2

2.2 Dung ev, thiết bị và hoá chất 2 2.2.1 Dung cu thie bi ding cham sốc chuột và thú mẫu máu chuột 2

2.2.2, Hod chat và dung dich thí nghiệm 24

2.3.1 Phương pháp chăm sóc chuột 26

223.2 Cơ sở chọn nồng độ chỉ, dịch p quả Sơ rỉ và vitamin C thương mại 27

2.3.4.1 Phương pháp chuẩn bị dụng dịch Cả từ CdCI.2.5 H:O, địch ép quá

2.3.4.2 Phuong php cho chudt uéng chi, vitamin C vi dich ép quả sơ rỉ.29

2.3.4.3 Phương pháp khảo sát độ tăng trọng 30

2.3.4.4 Phương pháp thu nhận mẫu máu chuột 30

2.3.4.5 Phương pháp xác định số lượng hồng cằu, bạch cầu, tiểu cầu và hàm

2.3.4.6 Phuong php xée dinh thi gian đông máu 3

2.3.4.7 Phương pháp xác định HCT 32

2.3.4.9, Phuong phip xée định kích thước hồng cầu 3

3.1 Tác dụng kháng độc tính cadmium_của địch ép quả sơ rỉ lên độ tăng trọng

3.2 Tác dụng kháng độc tỉnh cadmium của dịch ép quả sơỉ én ác chỉ số huyết

3.2.3, Ham lượng hemoglobin trung bình 43

3123 Thời gian đơng máu

35 Tác dụng kháng độc ính cậmium lên một số chỉ số sinh hố máu KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ

Phụ lục 2 Chỉ sốcinh í máu chut

Phụ lục 3 ~ Các chỉ số sinh hố máu chuột

Phụ lục 4 - Kết quả phân tích hàm lượng vitamin C trong địch ép thịt quả sơ ri

Phụ lục 5 Chấp thuận của hội đồng đạo đức trong nghiên cứ trên động vật PL32 PL33

ALT | Alanine aminotransferase

AST _| Aspartate aminotranferase

Củ | Cadmium

cast Uống cadmium với mm 1 mg/kg thể trọng + dịch ép quả sơ rỉ nồng độ

10 mg/kg thé trong

ng cadmium voi ndng d@ | me/ke thé trong + địch ép quả sơỉ nông độ

ng cadrminm với nồng độ Ì mạ/kg thể trọng + dịch ép quả sơ rỉ nồn

các | Uống cadmium với nồng độ 1 mg/kg thé trong + vitamin C thương mại nồng độ 30 mg/kg thể trọng

Bảng L Tính chất vật và hóa học cũa cadmium 4 Bảng L.2, Một số chỉ số huyết học của chuột nhất trắng " Bảng 1.3 Thinh phần hóa học của địch ép quả sơ rỉ l6

Bang 2.2 Dụng cụ, thiết bị lắy máu chuột va quan sắt tiêu bản 2

mm 24

Bảng 2.3 Héa chit va dung dich thi ngh

thức qua mỗi 2 tuần .37

Bảng 3.1 Độ tăng trọng trung bình của chuột tại các nghĩệ

Bảng 32 Số lượng hồng cầu rung bình của chuột ại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 42

Bang 3.4 Số lượng tiểu cầu trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 51

Bảng 35 Kích thước hồng cầu trung bình của chuột tại các nghiệm thúc qua mỗi 4 tin 55

'Bảng 3,6 Hâm lượng Hb trung bình của chuột tại các nghiệm thức qua mỗi 4 tuần 59

Bing 37 Chi

Bing 3.8, Thai gian đông máu trung bình của chuột tại các nghiệm tite qua mi 4 win 67 hematocrit trung bình của chuột ạicc nghiệm thức qua mỗi 4 tuẫn 63

Bảng 39 Giá trị trung bình và độ lệch chuẩn của các iêu chí khảo sát sinh hóa máu chuột

DANH MỤC HÌNH

Hình 2.1 Sơ rỉ chua Brazil mua tại Gò Công, Tiên Giang, 25 Hình 22 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng thể 26 Hình 2.3 Bồ trí chuồng nuôi chuột thí nghiệm ở các nghiệm thức 28 Hình 2.4 Thao tác cho chuột uỗng 29 THình 2.5 Hình ảnh rninh hoạ cân khối lượng cơ thể chuột 30 Hình 2.6, Minh hoạ thao tác lẫy mầu chuột 31 Hinh 2.7 Minh hoa thao tie xác định số lượng hỏng cầu và bạch cầu 31 Hình 2.8, Minh hoa thao tic xée dink him lugng Hb 32 Hình 29 Minh hoạ thao tác xác định tốc độ đông máu 32 Hình 2.10 Minh hoạ thao tắc xác định chỉ số hematocri 33 Hình 2.11 Minh hoạ thao tắc lâm tiêu bản mẫu chuột 34 Hiinh 2.12, Minh hog tha méu tim chuột 35

Hình 3.1 Biểu đồ th hiện độ tăng trong cia chu ại các nghiệm thức thử nghiệm,

Hình 3.2 Biểu dé số lượng hỗng cầu của chuột tại các nghiệm thúc thử

Hình 3.3 Biểu đồ thể hiện số lượng bạch cầu của chuột ti các nghiệm thức thir

Hình 3.4 Biểu đỏ thể hiện số lượng tiểu cầu của chuột tại các nghiệm thức thir

Hình 35 Biểu đồ thể hiện kích thước hồng cầu của chuột tại các nghiệm thức thử

nghiệm qua các tuần nuôi 45

Hình 36 Biểu đồ thể hiện hàm lượng hemoglobin của chuột tại các nghiệm thức

thử nghiệm qua các tuần nuôi 49

Hình 3⁄7 Biểu đồ thể hiện chỉ số hematocrit cia chudt ta ede nghigm tite thir

nghiệm qua các tuần nuôi s4

inh 38 Biểu đồ thể hiện thôi gian đông máu của chuột tại các nghiệm thúc thử

nghiệm qua các tuần nuôi 56

Hình 39 Biểu đồ thể hiện giá tị ilnbin T của chuột tại các nghiệm thức khảo sắt

Hình 3.10, Biểu đồ thé hign gi ịbiimbin D của chuột tại các nghiệm thức khảo

Hình 3.11 Biểu đồ thé hign git bilirubin {ci chudt tice nghigm thức khảo sắt

Hình 3.12 Biểu đồ thể hiện giá tị AST của chuột tại các nghiệm thức khảo sắt su

8 tuẫn nuôi 62 Hình 3.13, Biểu đồ thể hiện giá trị ALT của chuột tại các nghiệm thức khảo sắt sau

§ tuần nuôi 6 Hình 3.14, Biểu đồ thể hiện giá trị urea của chuột tại các nghiệm thức khảo sát sau 8

Hình 3.15, Biểu đồ thể hiện giá trị creatinine của chuột tại các nghiệm thức khảo sát

1.TÍNH CÁP THIẾT CỦA ĐÈ TÀI

'Ô nhiễm môi trường do kim loại nặng ngảy cảng nghiêm trọng và trở thành một

mỗi quan tâm lớn do những ác động xâu mà nó gây ra rên toàn thể giới Những kim

loại ô nhiễm này đang bị đào thải vào nước, đất và vào khí quyển do ngành công nghiệp vả kim loại nặng đang phát triển nhanh chóng, việc xử lí phân bón, chất thải

và thuốc trữ sâu không đúng cách [1- Kim loại nặng gây a các tắc hại cho cơn người

và động vật được quan tâm nhiều biện nay phải kể đến cadmium (Cú) Các nguồn

tiếp xúc với cadmium bao gồm đồ chơi bằng nhựa, pin, sơn gốm số, nước bịô nh

không khí, đất, thực phi yin bn vb ôi tuc 2

Cadmium la mat nhiễm môi trường từ các quá trình công nghiệp và hoại động nông nghiệp [AI |4, 5) Ở những người không hút thuốc nồi chung tỉ

thực phẩm là nguồn phơi nhiễm Cử chính [6], [7] Sự hắp thụ Cử tử thức ăn ở người

tương đối thấp nhưng nó được tái hắp thu hiệu quả ở thận và có thôi gian phân hủy

sinh học tương đối đài, ước tính từ 10 đến 30 năm [8] [9], [10] Theo tổ chức Lương

thực và Nông nghiệp Liên Hợp Quốc (FAO) và tổ chức Y tế thể giới (WHO), lượng

Cđ có thể được đưa vào cơ thể tối đa 400 — 500 ug/tuẫn, tương đương 70 pg/ngay Theo thống k của Page, Bingham và Cang (1981), lượng Cả vào cơ thể trung bình iới hiện nay khoảng từ 25 ~ 75 mg/ngày [L1] Đây rõ rằng là vẫn để nại trọng đáng được quan tâm vì lượng Củ xâm nhập vào cơ thể con người đang xắp xỉ

ở ngưỡng trên của tiêu chuẩn cho phép Chín vì vậy, những người hút thuốc Lí đã tự

mình thêm vào cơ thể một lượng cadmium dư thừa từ 25 ~ 35 ugíngày [I2] Cadmium là kim loại không có vai trồ inh học nào đối với cơ thé con người (I3] và được WHO là một trong mười hoá chất gây ô nhiễm môi trường cũng như

chứa Cú, Pb, Asen vô cơ và methylmercury là nguyên nhân dẫn đến 56.000 ca từ

vong và hơn 9 triệu ca khuyết tật trên toàn thể giới [15] Nông độ cao nhất của Cử

được tìm thấy tương ứng trong thận và xương nhưng tác dụng độc hại của các kim

loại này không chỉ giới hạn rong các bệnh về thận và xương [16] [17] Sau khi hắp

thể, Sau khi nhiễm độc Cả cắp tính, Củ chủ yếu đi vào gan làm cho gan trổ thành cơ

vô sinh nam giới, Cd được xếp vào loại nguyên tổ có độc tỉnh cao [19], [20] Một số nghiên cứu chỉ ra rằng, Có gây stress oxy hoá thông qua sự suy giảm hệ thống enzyme chống oxy hoá do thay đổi cơ chế biểu hiện gene [21] Gần đây, các vitamin tan trong nước, chống oxy hoá và có khả năng loại bỏ cả superoxide và

hydrogen peroxide [23] Vitamin C duge biết đến với khả năng giúp tăng cường sức huyết và bảo vệ da, làm trắng da Ngoài ra, vitamin C côn giúp tăng cường hấp thu sit, có vai to quan trong cho qué tinh io ra hemoglobin, hd trợ trong việc tạo t bào hồng cầu và giúp thành mạch máu vững chắc [24] Trong các nghiên cứu cho thấy trong quả sơ rỉ có him lượng viamin C rất cao, giống sơ rỉ chua (Malpighia

emarghinata DC.) v6i hàm lượng vitamin C lên đến 882,9 mg/100 g [25] O nude ta,

ự sơ rỉ chua giống Brơil được trồng nhiều ở Gò Công, Tiền Giang, cho tấi quanh năm Tuy nhiên, biện tại vẫn chưa có những đánh giá liền quan đến khả năng kháng

độc tính cadmium của địch p sơ i chỉ số huyết học của chuột nhất trắng

nồi riêng và các động vật có vú khác nói chung,

khoá luận “Khảo sát khả năng kháng độc

tinh cadmium của dịch ép quả sơ rỉ lên một số chỉ số huyết học của chuột nhất “Xuất phát từ những lí do trên, đề

tring (Mus musculus var albino)” duge thực hiện

1 Myc TIEU NGHTEN COU

Đánh giá được khả năng kháng độc tính cadrmium của dịch ép quả sơ ỉ ên một

số chỉ số huyết học (các chỉ số công thức mắu và chỉ số sinh hoá) và trọng lượng cơ

thể chuột Kết quả nghiên cứu cung cắp thông tin về khả năng của dịch ép này trong việc giảm độc tính của kim loại nặng trong cơ thể động vật

THỊ ĐÔI TƯỢNG NGHIÊN CÚU

Chuột nhất trắng đực 6 tuần tuổi (19 - 21 g)

Khio sát tác dụng kháng độc tính cadmium của địch ép quả sơ rỉ lên

Độ tăng trọng của chuộc;

—Một số chỉ số huyết học của chuột (một số chỉ số công thức máu và một số

chi sé sinh hod): s lượng tế ảo máu (hồng cầu, bạch cầu, iều cầu); kích thước hồng

cầu; bảm lượng hemoglobin, chi sé hematoeri: thời gian đông máu; một số chỉ sinh hod (AST, ALT, bilirubin, urea, creatinine)

V PHAM VINGHIEN CUU

"Để tải được thực hiện trén chuột nhất trắng đực 6 trẫn tui Thai gi n bd tri thí nghiệm: 8 tuằn đợt thí nghiệm

Khao sat 1 néng d6 Cd?* tir cadmium chloride (CdCI2.2,5 H20) voi liều lượng

1 mgikg thể trọng: 3 nồng độ vitamin Ctr địch ép quả sơ rỉ (10 mẹ Xự thể trọng, 20

1.1 TONG QUAN Vi CADMIUM

1.1.1 Đặc tính, ứng dụng và trạng thái tồn tai cia cadmium

‘Cadmium (Cd) thuộc nhóm XII, chu kì 5, số hiệu nguyên tử là 48 của bảng hệ

thống tuần hoàn, có khối lượng nguyên từ trung bình bằng 112,411 (đv€), là kim loại mềm, màu trắng bạc, không tan trong nước [10] Cadmium cùng với asen, chỉ, thủy ngân và crom không có chức năng về sinh học thiết yêu nào nhưng lại có độc tính cao gặp trong môi trường không gây độc cấp tỉnh Hàm lượng trung bình của Cử trong

lớp vỏ tri đắt được Bowen (1979) vi Heinrichs (1980) use tinh trong vũng nghiên cứu là 0,1 mg/kg Cd gin twong quan véi kim (Zn) vỀ mặt địa hoá, cả hai nguyên tổ dỗi đào nhưng Cú có thể tìm thấy trong hầu hết các quặng kẽm do nó có tính chất thay thể đồng hình với kẽm [10| Một vải thông số vềtnh chất vật lỉ và hoá học của

cadimi thé hign & Bang 1.1 [10]

Bing 1.1 Tinh chit vit vi hod hge ea cadmium SỐ nguyên từ 48

“Trọng lượng nguyên tử 112,41 (ave) Bán kinh nguyên tử 155 pm

“Cấu hình electron [KrJ4d953Ẻ Nhiệt độ nóng chây 321,07°C Nhiệt độ sôi 761ã°C

Thể khử Cả*+ 2e ~ — Cả) — =040E° Sức nóng của phân ứng tổng hợp 621 kỪmol

Nhiệt hoá hơi 99,6 kJ/imoll

"Độ âm điện thang Paulng) —— Lớ9

Năng lượng ion hoá thứ nhất — 8618IJ/mol

"Năng lượng ion hoá thứ hai 1631.4 ki/mol

hiền thể kỉ qua, Cả được biết đến xau và chỉ được sử dụng rộng rãi ở thể Ki XX Theo Neiagu (1988), việc sân xuất C trên thể giới tăng từ 11000 tn trong năm 1960 lên đến 19000 tấn vào năm 1985, Cadmium được sử đụng vào ác việc như: làm lớp

làm chắc cho chất đèo PVC; rong pin khô Ni-

z rong những hợp chất khác như: chất bán dẫn, bộ phận

nhựa, lớp men và đỗ gốm); tạo c

'Cd; trong vũ khí quân dụng

kiểm soát lỏ phản ứng hạt nhân [12], [29] [30]

Cadmium đã xúc với con người thông qua nhiều phương tiện khác nhau

trong suốt nhiều thập kỹ qua do có nhiều ứng dụng phổ biển Sự hiện diện của cadimlam rong môi trường cũng phần lớn là kết quả của

ID

ác hoạt động con người

Theo Aylet và Rose (1979), Cả ổn ti phổ biển ở các Khoáng chất như: ZnS, Sori, wientzite va khodng chit phu như ZnCOs, chứa 0.2 ~ 0,44 Có Đôi khi hảm

lượng Cd tìm thấy lên đến 5% Đá tram tích có hảm lượng Cd cao hơn các loại đá

khác, cao nhất à phoaphoride và đã phién sét đen vũng biển Cả bai loại đá được hình thành từ những cặn lắng giàu hữu cơ trong điều kiện yêm khí, các kim loại nặng tí£h loại được xác định rõ rột hơn ở dạng ion so với sự ổn tại dạng nguyên ổ, lon Ca?

có khả năng bám hút trên bề mặt của keo đất hơn là các dạng khác như dạng trung

tinh hay dạng anion Sposito dự đoàn các dạng tồn ti của Cổ trong dung dich dit

(theo thứ tự giảm dẫn): Cd (II); CdSO (0); CdCI* trong dat phén; Cd (11), CdCl",

CdS, (0) vat CAHCOs* trong những đất kiểm,

1.1.2 Các nguần phat that 6 nhién cadmium vi cic com đường phơi nhiễm cadmium

"rước khi Cú được sử dụng vào lĩnh vục thương mại, đẫu hiệu của sựô nhiễm

Cả đã được phát hiện ông rãi tong các vật iệu và nó được coi như là một tạp chất

Có rất nhiều nguồn phát thải Cả gây ô nhiễm từ các nguồn khác nhau

Cadmium vào môi trường đắt từ dé me

chúng hình thành tên dã biển chất có hàm lượng Củ từ 0,1 ~ I0 mgikz Dắt hình

thành trên đá trầm tích chứa 0,3 ~ 1,1 mg/kg Cd Nói chúng hẳu hết các đất đều có

biệt hoặc phát triển trên những đá có lượng Cd cao tới mức bắt thường như các phiến

đá đen [12]

t những vùng đắt lẫn bùn cổng, rãnh, kim loại tim thấy chủ yếu là Có và các

kim loại nặng khác ở tẳng mặt 15 em, tuy nhiên Cd có xu hướng di chuyển theo độ

Cadmium ting tu tie byi khi quyén: Bennett (1981) cho rằng, bình thường nồng

độ Cả trong không khi dao động trong phạm vỉ từ 1 - 50 mgim`, phụ thuộc vào khoảng cách các nguồn phát ra Cadmium gây ô nhiễm được đưa vào môi trường là kết quả của sự phát triển nhanh chóng các ngành công nghiệp và công nghệ hiện đại 32] Nguồn phát phải Cả chủ yêu ra không khí là: sự sản xuất kim loại không sắt, quá trình đốt cháy than đá, quá trình đốt cháy dầu, quá trình thiêu hủy chất thải, sự chế ạo sắt thép, img dụng kim loại trong công nghiệp

Cadmium tie bitn thải, bùn cống rãnh

Nước bùn cổng thải chữa Cả từ chất thải sinh hoạt của cơn người và các sản

phẩm sinh hoạt sống của gia đình Sự tích lũy Cd trong nước cổng, rảnh thường được

tạo ra trong quổ tình xử í bản cổng Mức độ tập trung của ảm loại ong bản cổng

có thể È ến động rất lớn do sự thay đổi liên tục của hợp chất và thể tích nước thải

Công nghiệp được xả vào cổng Mặc dù dạng chất thải bùn cống là một dạng giàu

dịnh dưỡng nhu nitrogen va phosphorus, nhưng khi sử dụng làm phân bón, nó có thé

năng hấp thụ chúng bởi cây trồng [12]

Ngoài ra, Cd cũng có thể gây ö nhiễm đất từ các nguồn khác như khai thác mỏ,

quả trình lâm giảu quặng mỏ, quá trình luyện quặng Rlfide có chứa Cả (có thể chứa

nguồn quan trọng góp phẩn lảm cho con người tiếp xúc với Ca [34] Một điều thuốc

lá trung bình có thể chứa từ 1 đến 2 pg Cd và khoảng 30 ~ $0% lượng này có thể

„ng độ Cả cao nhất thông thường được tỉm thấy trong thận, gan, loi giáp xác, những loại ạt giồn

là nguồn tiếp xúc Cd quan trọng nhất,

biệ là rong nắm và các sản phẩm ngũ cốc Những loại thức ăn cơ bản như: bột ngũ cốc, rau cũ quả và đặc biệlà đa số cắc thức ăn biển góp nhiễu vào sự iếp xúc Cử bằng ngủy [36]

Sự hắp thụ Cả điễn ra chủ yếu qua đường hô hắp (10 ~ 50%) và ở mức độ nhỏ

hơn chủ yếu qua đường tiêu hoá (3 — 5%) [37], trong khi sự hắp thụ qua đa là tương

đổi hiểm, Khi Cả di vào cơ thể, nó được vận chuyển vào mu qua hồng cầu và ding nhiều tác dụng phụ, chẳng hạn như rố loạn chức năng thận và gan, phủ phổi, tôn thương tỉnh hoàn, nhuyễn xương, tôn thương tuyển thượng thận và đặc bit là bệ

tạo máu, [39]

1.1.3 Tác động, cơ chế gậy độc của cadinium đất với cơ thể con người và động vật

‘Cadmium khi hap thụ vào cơ thể sẽ kết hợp với albumin trong máu và di chuyển

cđến gan Ở trong gan, cadmium sẽ tạo thành một phức chất với metallothionein (MT)

một loại protein giàu lưu huỳnh có khối lượng phân tử thấp [10], MT tách cadmium

a

ra khỏi bảo gan và hoi động như một tác nhân gỉ Từ gan có sự phống thích châm caẻmiam - MT đến máu Không giống như cadmium ~ albumin, hop chất

có hình ống Với nồng độ tiếp xúc Cá thấp bằng con đường ăn uống, Cả đường như

di chuyển đến MT trong màng nhây ruột non, nơi mà nó có thé bj tách ra trong nhiều

ngày Sau khi được đưa vào máu, hợp chất Cú ~ MT đi chuyển trực tiếp đến thận Khi

bài iế thắp này trong ứng với thi gian bán hủy sinh học hơn 25 ~ 30 năm [40} [41]

Sự tiếp xúc lầu đài với Cd dù ở liều thấp cũng cho thấy tác dụng phụ đến khả năng inh sàn của cả nam và nữ thậm chí là việc mang thai [42] Điều này là do sự chúng trong nhau thai và phôi Các kiểu biến đổi biểu sinh do Cử gây ra có liên quan

methionine, dẫn đến thay đổi methylome và sau đó là thay đổi hoạt động

th hình thành steroid, rồi loạn chủ kỳ kinh

nguyệt vi hormone sinh si châm day thi va 66 kinh, say tha sinh non và giảm cân

ki sinh (3) Cadmium cling o6 liên quan iêu cực đến mật độ khoáng xương ở phụ

nữ sau mãn kinh Phụ nữ có lượng cadmium trong cơ thể cao hơn nam giới, phản ảnh

nằng độ cadmium trong máu, nước tiêu và thận cao hơn, Sự hắp thu caömium ở một

tăng lên khi lượng sắt dự trữ trong cơ thể cạn kiệt và tinh trạng thiểu sắt rõ rằng,

những tình trạng phổ biến ở phụ nữ trong độ tuổi sinh sả [43]

Thận không phải là cơ quan bị ảnh hưởng nghiêm trọng với sự tiếp xúc Củ võ

cơ ở liều lượng cắp tỉnh (vi đụ CáC|:) nhưng nó rắt nhạy cảm với sự tiếp xác Cd với

liều lượng mãn tính Sự ph hủy thận được phản ứng với glucose niệu, hiện tượng

nước tiểu có protein và sự phá hủy tiến triển chậm cho đến khi làm suy yếu thận mãn

tính Tình trạng rối loạn chức năng thận được biểu hiện như sự gi tăng tổng số protein

‘én tinh trang ri loan chúc năng thận và cầu thận Tác dụng độc hại đối với thận còn thể hiện qua sự tổn thương cầu trú thận và thay đổi chức năng bài tết [12] Cadmium duge di chuyển đến gan, tại đó chúng có thể gây tổn thương và rồi

loạn một số chức năng, Khi hắp thụ Cả với liều lượng cao, gan tích lũy khoảng 60%

Cả và là mục tiêu chính để chất độc Cả cắp tính xâm nhập vào, gây ra tỉnh trạng

nhiễm độc gan Việc nhiễm độc Cd mãn tính đã dẫn đến những bệnh lí nghiêm trọng

như viêm gan mãn tinh, xuất hiện những tế bào nhiều nhân không lồ [2] Tên thương

enzyme trong méu, giảm tổng hợp profcin

Sau khi hấp thụ, Có được đưa vào cơ thể thông qua tế bảo hồng cầu hoặc protein 44] Một lượng lớn Củ trong hỗng cầu liên kết với các protein có trọng lượng phân

trong những hệ thông nhạy cảm nhất và nó là mục tiêu gây độc quan trọng của Cd

Dic big, ship thy cadmium gây ra bệnh thiệu mầu hồng cầu trong mâu (giảm số

lượng tế bảo hing cầu trong máu và nông độ Hb) và gia tăng số lượng tế bảo bạch sắt và sản xuất không đủ erythropoietin (thiểu máu thận) cùng với những thay đổi trong chuyển hoá sắt [45] Các nghiên cứu cho thấy, phơi nhiễm Cử có liên quan đến lên trong khi glutathione hồng cầu giảm ở những đối tượng tiếp xúc với Ca [46] Phot NADPH oxidase, hé thing renin-angiotensin va con đường eyclooxygenase 2 tronyr động mạch [47]

Sự nhiễm độc xương do tiếp xúc với Cd trong thời gian dài đã được chứng minh

thành công ở người Vào năm 1950, cư dan ở quận Toyama ~ Nhật đã bị một tai nạn

khủng khiếp do tiếp xúc với Có cao ở mô quặng kẽm Cadrmium gây ð nhiễm đất và

nước ung Phụ nữ, trẻ em bị đau đớn bởi hàng loạt các tr chứng và đầu hiệu được

biết đến với căn bệnh lai ~ lai (xây ra ở Nomiyama năm 1986) Đặc điểm của bệnh

này là xương bị đau nhức dữ dội, làm biến dạng xương và gãy xương, kèm theo là

những dẫu hiệu của bệnh suy yẾn thận mãn tính

Ngoài độc tính được quan sát thấy trong hệ thống tạo máu, gan và thận,

cadmium đã được chứng mình là gây độc nh ở tuyển huy, nội tiết, tìm mạch hệ thống miễn dịch và sinh sản [48]

1.2, TONG QUAN VE CHUQT NHAT TRANG

12.1 Vịtrí phân loại

Theo Trần Hồng Việt [49], chuột nhất trắng được phân loại như sau:

Giới: Động vật Animaia

Ngành: Có đây sông Chordita

'Phân ngành: Có xương sống Vertebrata hay có hộp sọ Craniota

Sng: Chudt Mus Linnaeus, 1785

Lodi: Chugt nhit Mus musculus Linnaeus, 1785 Nồi: Chuột nhat tring Mus musculus var, albino, 1785 1.3.2 Sơ lược về chuột nhất trắng

.Mus mascalus vác albino là nồi chuột nhất trắng có hình dạng và kích thước

tương tự với chuột nhất nhà Chúng có bộ lông màu trắng, mắt đỏ và tai to vễnh

mỗi bàn chân có 5 ngôn và đuôi có ít lông, chiều dài đuôi tương đương với chiều dài

cơ thể Kích thước của chúng nhỏ từ 12 đến 15 em tính từ mũi tới đuôi khi trưởng

thành, với khỗi lượng cơ thể từ 18 ~ 40 gram (ử š đến 12 tuẫn tuổi), Chuột nhất rắng

động dục sớm, từ khoảng 5 — 7 tuần ở chuột đực và từ 4 — 7 tuần ở chuột cải Độ tuổi

thành thục giới nh từ 4 6 tuẫn tuổi, chủ kã động dục là 4= 5 ngày (ự phá, hôi gian lứa r4 — 10 con Chúng có tỉnh khí khả điểm đạm, thích lo trêo, đảo han, cũng nhự

đánh dầu lãnh thổ, gây hẳn, hành vỉ tỉnh dục và các tương tác xã hội Chuột nhất

thay đội cường độ ánh sáng [50], [51] [53]

1.2.3 Đặc điễn sinh lí máu

"Máu ngoại vi bao gdm huyết tương, hồng cầu, bạch cầu vàtiễu cầu Tương tự

ở người, máu chuột cũng có các chức năng như cung cắp oxysen, cất đỉnh dưỡng và (hằng cầu, bạch cầu, tiểu cầu) đều bắt nguồn từ tùy xương và dĩ chuyển đến máu

ngoại vi khi trưởng thành Ngoải ra, máu mang bạch cầu, tiểu cầu và các yêu tổ đông

mắn đến các vỉ í cần thiết Một số chỉ số huyết họ của chuột được mô tà ở Bảng L.2 51]

Bảng I.2 Mật số chỉ số huyết học của chuột nhất trắng STT Chi s6 huyết học Chuột

1 | Téng lượng máu trung binh (mL) 1,25 ~ 1,75 Hematocrit ~ HCT (ti 1g phin tram thé tich hồng 49-49

2 cầu trên tổng số máu)

4 | Hemoglobin (g/dL) 122-162

6ˆ | Số lượng iễu cầu trên mỗi uL) 300000 - 1000000

“Tương tự ở người, hồng cầu chuột là các tế bào máu đó, có dạng hình đĩa löm bai mặt, chứa huyết sắc tổ hemoglobin, có đường kính 4 ~ 7 pm Ở chuột con (dưới

10% tổng số hồng cầu So với các loài động -4tuẫn tuổi, hồng cầu lưới cổ th

vật có vũ khác, hồng cầu chuột có tuổi th khá ngn, trung bình khoảng 30 ~ 52 ngày thấy sự bắt thường của cơ th Sự tăng s lượng hồng cầu có th liên quan đến chứng tăng tan máu vàgiảm sản xuất tế bảo máu [50]

lượng bạch cầu trung binh 5 000 12.000 té baoy wL, trong d6: bach clu lympho

(chiếm 70 ~ 75%), bach cầu trung tính (chiếm 20 ~ 254), bạch cầu đơn nhân (chiếm

2 - 6%), bạch cầu ưa acid (chiếm 0 - 3%) và bạch cầu ưa base (chiếm 0 - 0,1%) Chức năng chính của bạch cẳu là bảo vệ cơ thể bằng thực bào và miễn dịch Số lượng

bạch cầu trong máu có thể biến động lớn do bạch cầu có khả năng dĩ chuyển từ máu

dén các mô và ngược lại Chuột thường tăng số lượng tế bào bạch cầu để chống lại

tổn thương tế bào nội mồ bằng cách kíth hoại, kết tạ vã cung í

các yếu tổ đông máu [S1]

‘Hemoglobin (Hb) là thành phần cấu tạo chủ yêu của hỏng cầu Nhờ Hb mà hồng

cầu có thể thục hiện chức năng vận chuyên khí O; và CO; của mình Hồ gồm ha thành

phần là hem va globin Ở chuột, nồng độ Hb dao động khoảng 12,2 — 16,2 g/dL (hoặc g4)

j chi sé sinh hoá

1.24, Bie diém

(Cae xét nghigm sinh hos huyétthanh rét quan trọng cho các mục đích đánh giá

sức khoẻ và chin đoán các bệnh khác nhau Một số chỉ số xét nghiệm sinh hoá máu

cơ bản như các chỉ số men gan (ALT ~ Alanine amingtransferise và AST — Asparile aminotranferse, bilirubin vee thông số khác chỉ điểm cho tốn thương và chức nang than (urea miu, creatinine) [54]

AST (tén gọi khác là SGOT) là một loại cnzyme được sản xuất ra tại gan Nếu gan bị tổn thương hoặc bị hoại tử ở một vị trí nào đó, AST sẽ được giải phóng ở ạt

hiện ở các cơ quan khác như tim, thận, cơ và não, Tương tự như cơ chế giải phống ở san, khi những cơ quan này gặp tổn thương thì AST sẽ rò rỉ vào máu Vì vậy AST không phải là tiêu chí đánh giá đại điện cho tỉnh trạng tốn thương gan [54] Chỉ số ALT là chỉ số đặc hiệu phản ảnh rõ rằng hơn về các vẫn đề ti gan vì

ALT chi được sản xuất tại gan, có một số lượng rắt ít trong cơ vân và cơ tim Do đó

có thể nói rằng gan là cơ quan tập trung ALLT nhiễu nhất và cũng sẽ được phóng thích

vào máu nếu gan xảy ra tốn thương Giới hạn bình thường của ALT lả từ 3 - 30 U/L

Nhân chung thì khi xét nghiệm chỉ số AST và ALT ở mức bình thường sẽ gần tương

đương nhau [34]

Bilirubin 1a mot si tổ có mẫu vâng cam được hình thành trong quả trình phá

vỡ hồng cầu bình thường trong mau Bilirubin di qua gan và được bài tiết ra khỏi cơ thê thông qua phân và một lượng nhỏ nước tiểu Quả trình tổng hợp và chuyển hoá

bilinbin có quan hệ mật thiết với gan nên lượng biliubin cao thường là do các bệnh

gan gây ra Có 3 trị số bilirubin gồm: Bilirubin toàn phần (T) bình thường khoảng 0,1

— li m1; Bilnbintrực ấp (D) bình thường khoảng 0,1 0.4 mg/l va Bilirubin

gián tiếp (1) khoảng 0,1 — 0,7 mg/dL Nhìn chung, lượng bilirubin ting cao sẽ bio

hiệu các nguy cơ bệnh í quan đến chức năng mẫu, chúc năng gan 54] Chỉ số BUN (Blood Urea Nitrogen) là xét nghiệm dùng để xác định các hàm

lượng nitrogen có trong urea (bình thường 7 — 19 mg/đL) Thông thường, khi gan

hoặc thận bị tổn thương thì chỉ số BUN sẽ có xu hướng tăng,

Creatinine huyết thanh là sản phẩm đảo thải của quá trình thoái hoá creatinin

phosphat ở cơ và được lạc hoàn toàn qua các cầu thận, không được các ng thận tái hip thu, Do đó giá tị của ereatinine chủ yêu phản ánh chức năng thận và chỉ số

creatinine huyét thanh có M: 0,6 ~ 1,3; F:0,5 ~ 1,1 mg/dL [54],

1-11, Sơ lược về sơ rÌ

Chy sơ í hay cấy Kim Bing Nam, ten khoa hge la Malpighiaemarghinata DC

Là cây hai lá mầm, thuộc bộ Sơri (Malpigbile), họ Sơri (Malpighiaceae), chỉ Cầm

rìa (Malpighia) [55] Là loại cây gỗ nhỏ, cao từ 2,5 đến 3,0 mét, có nguồn gốc từ khu

vực Tây Án, miền Bắc Nam Mỹ và đã được trồng ở các nước nhiệt đới Một số đồn

điền lớn của khu vực phía Bắc của Brazil được xem là một trong những nơi trồng Sơ

rỉ lớn nhất thể giới [56]

“Tại Việt Nam, cây sơ rỉ được trồng phổ biển ở khu vực Nam Bộ, đặc biệt là ở Tiền Giang do có các đặc tính thích nghỉ phủ hợp với điều kiện môi trường tại nơi

này Thân cấy được ình hành từ nhiề cảnh phân nhánh, đường kính từ 2 đến 4 met

đến 9,8 em và chiều rộng từ 1,2 dén 6,8 em, cỏ màu xanh đậm, mọc đối, ¡ng lá

ngắn, có lông ở gân lá và mặt dưới của lá Hoa lưỡng tính, mọc thành châm ở đầu

cảnh, có màu trắng hoặc tim nhạt và có hương thơm nhẹ [55], [56]

Cây sơ rỉ cho quả trong năm đầu tiên phát tiễn và có thể thụ hoạch từ 4 — lẫn

mỗi năm, tùy thuộc vào điều kiện khí hậu, thổ nhường và kĩ thuật chăm sóc Sản

lượng tông bình dao động từ 2 kg/cây trong năm đầu tiên và 47 kẹ cây ở khoảng năm,

thứ 6v lều kiện tưới ti chăm sóc hợp lí, Quả sơ rí có hình cầu hoặc bầu dục với

lớp mang,

mông bên ngoài, phần trung bì mọng nước ở giữa và phẫn bên trong bao gồm ba hạt đường kính từ Ì 2,5 em và nặng từ 2— 10 g Quả võ 3 thủy, cổ ba lớp

Bé mat quả có thể nhẫn hoặc có các rãnh Màu vỏ của quả non thường có màu xanh

Ie, nhưng cũng cổ thể có mẫu trắng hoặc xanh tí Ở quả chín, mẫu sắc cũa vỏ có

thể thay đổi từ đô vàng, đỏ cam đến đỏ tươi [55]

CQuả chín hoàn toàn có hàm lượng vĩamin C được xem là cao nhất rong tt cả

các loại trái cây [55] Qua sơ rỉ chín thì mềm, dễ hỏng với thời gian bảo quản từ 2

4 ngày ở nhiệt độ hơn 2(

không nén dé ct hoàn toàn trên cây Quả sơ rỉ được dùng như một loại trái cây trắng do đó thu hoạch quả sơ rỉ từ khi vừa chuyển sang hong miệng hoặc kết hợp với các loại trái cây tươi khác như một món salad trái cây, nó

của sữa chua, thạch, kem, mỹ phẩm và các thực phẩm chức năng trong đĩ, nước

tăng nhủ cầu về sản phẩm trên thị trường trong và ngồi nước đ kích thích việc trồng

trọt nhằm xuất khẩu ra các thị trường thương mại [56], [57]

tác dụng trong đời sống nhờ khả năng

"Nhiều nghiên cứu cho thấy sơ rỉ cĩ nhiễ

L đặc biệt là vitamin C, kalium và chất xơ Sơ

cung cấp nhiều vitamin và khống chỉ

rỉ cĩ tác dung tăng cường hệ miễn dịch, tăng cường sản xuất collagen làm da săn loại vi khuẩn và virus, cải thiện hệ tiêu hố Nhiễu chắc, giúp cơ thể chống lại một

nghiên cứu chỉ ra rằng, các hợp chất sinh học tồn tại trong nước ép Sơ rỉ cĩ liền quan

«én khả năng trao đổi chất, các chứng viêm và giúp hạn chế các bệnh liên quan đến

lọng xương [58], [56], [59] Lá sơ rỉ được sử dụng đẻ pha trà và làm siro giúp điều:

trì các triệu cảm cúm, hạn chế tăng cholesterol và tăng huyết áp Nước ép quả sơ rỉ

cung cấp một nguồn vitamin C (acid ascorbic) déi dảo và nhiều chất giúp chồng oxi

hố mạnh mẽ khác, gĩp phần ngĩn ngừa các bệnh liên quan về tim mạch, huyết ấp, ngăn ngùa ung thư và những bệnh thoi hố khác [56] [60], 61]

13.2 Thành phân của dịch ép quả sơ rỉ

Địch ép của quá sơ ri gồm nhiều thành phần khác nhau như nước, đường, một

số acid hữu cơnhư scid ciuie và ad male, viaamin và khống chất Thành phẳn hố

học của dịch ép quả sơ rỉ được mơ tả ở Bảng 1.3 [53)

VỀ thành phần lpid, cĩ một số acid béo bao gồm: olsie (314

), palmitic (21,8%), stearie (13,9%) và linolenie (1,3%) Các loại đường chính

029,

1a fructose vi glucose, thi nhất là suerose,

Dịch ép của quả sơ rỉ là một hỗn hợp phức tạp cĩ chứa hảm lượng cao vitamin

CC, arotenoid và polyphenol (bao gồm quercein và run) Các thành phần này cĩ

oxy hố [S6] Như đã mơ tả ở Bảng 1.4, địch ép sơ rỉ cịn cĩ các vitamin như thiamine

sit kau, magnesium va phosphorus, Ngo ra qui sc còn chứa cc loại cất khác nha: phenol, carotenoid, anthocyanin, phytochemical, acid mallic, eid cite và acid tartaric, dẫn xuất của acid benzoic, flavonoid va nhiều loại amino acid [56]

Bảng 1-3 Thành phần hoá học của dịch ép quả Sơ ri

Nước () 92,60 - 95,00 Protein (%) 0.21- 1,20 Lipid (%) 023 - 080 Carbohydrates (%) 03

“Tỉnh bột (%) 005-023 Đường () 275 - 603

Vitamin (mg/100 g)

Vitamin C 862,86 - 1465.22 Vitamin B6 0,009 Vitamin B2 0.006 Vitamin B3 0.40 Vitamin BS 031

Khoáng chất (mg/100 g)

Phosphorus 10 Calelum 120

Kalium 1460 Magnesium 180 Sodium 70 Tro (%) 491-523 Chất xơ (%) 0.16 - 1,63 Pectin (mg/100 g) 94,03 - 246,71 Lipid peroxidation (n mol MDA/g) 59,75 - 119.97

Vitamin C (L-aseotbste) hay acid ascobie (AA) là một loại vitamin tan trong

nước, được tìm thấy trong nhiều loại thực phẩm như trái cây và rau, là một chất chống,

oxy hoa quan trọng và cằn thiết cho sức khoẻ con người Vitamin C gồm sẵu carbon lactone duge ting hop tr glucose trong gan hod thận của nhiễu loài động vật có vú,

trừ con người, động vật linh trưởng, chuột va chim, Những loài nảy không có enzyme

gulonolactone oxidase, mot chit cin thiét 4 ting hop acid ascorbic itn chất ức thời

2-keto-l-gulonolactone Do không thể tự tổng hợp vitamin C, con người buộc phải bổ

sung nỗ vào cơ thể thông qua chỉ độ ăn uống Một số loại ri cây và rau quả giàu

vitamin € như sơ ri, kiwi, đâu tây, đào, cà chua, táo, anh đảo, cam, đứa, ôi, xoài,

chanh leo, bông cải xanh 62] Được phần lập vào năm 1928, vitamin C rất cần

thiết cho sự phát triển và duy trì các mô lí kết Nó đồng một vai trò quan trọng

trong việc hình thành xương, chữa lành vết thương và duy trì nướu khỏe

mạnh Vitamin C đồng vai trồ quan trọng trong một số chức năng trao đổi chất bao

gồm kích hoạt vitamin B, acid folie, chuyển đối cholesterol thành acid mật và chuyển

đổi acid amin,tryptopban, thành chất dẫn truyỄn thần kinh, serotonin, NO li mot chit

chống oxy hoá giúp bảo vệ cơ thể khỏi tác hại của các gốc tự do Vitamin C được sử

dụng như một tác nhân trị liệu trong nhiều bệnh và rồi loạn, bảo vệ hệ thống miễn

dịch, giảm mức độ nghiêm trong của phản ứng dị ứng và giúp chồng lại nhiễm trùng 63]

“Các chức năng sinh hoá của vitamin C bạo gồm: chồng oxy hoá, sinh tổng hợp,

eoliagen, hình thành niosamine và hydroxyl hoá proline, kích hoạt nội tết tổ, bái

tiết histamine, kích thích một số enzyme, chức năng thực bào của bạch cầu, sản xuất

chất dẫn truyền thần kinh, chuyển hoá một số acid amin Đi với súc khỏe con người,

vitamin C có liên quan đến việc giảm tỉ lệ mắc bệnh ung thư, ái tạo mô, huyết á

khả năng miễn dịch, chuyển hoá thuốc và bãi tiết hydroxyproline trong nti iu [64]

Do tính chất tan rong nước nên vitamin C có thể hoạt động cả bên trong và bên ngoài tế bào đễ chống lạ tổn thương các gốc tự do và có một số ứng dụng trong điều

trỏ trong việc bảo vệ tế bảo khỏi stress oxy hoá bởi khả năng cho điện tử, nó cho 2

số báo cáo cho rằng, vitamin C còn có thể bảo vệ tế bảo khỏi H:O› và bức xạ [65] (66] Trong nhiều bệnh ung thư, sự gia tăng mãn tính của stress oxy hoá, liền quan

«én nông độ hydrogen pyroxide tăng cao ~ góp phn kim ting tbe độ tăng inh, tăng

khả năng tạo mạch và di căn (67] Do đó nhiều chất chống oxy hoá như vitamin C đặc chống ung thư

'Viaamin C côn đặc biệt quan trọng đối với sức khỏe tìm mạch Nhiều nghiên

cửu chỉ ra rằng, sự thiểu hụt vitamin C có liên quan đến bệnh tim mạch và chế độ ăn

ống khoảng 100 mgingày là thực sự cần tiấết để tránh các bệnh m mạch ở nam giới

và phụ nữ không hút thuc [68]

14, TONG QUAN CAC CONG TRINH NGHIEN COU TREN THE GIOT VÀ VIET NAM

1.4.1 Các Công trình nghiên cứu trên th giới

Nam 2008, Acharya và cộng sự thục hiện nghiên cứu nhằm đánh giá tác dụng của vitamin C và E với hệ sinh sản đực ở chuột tiếp xúc cadmium Chuột được tiêm

“CÁCH: qua màng bụng ( mg Sự baw) đã cho thấy các stress oxy hod trong tain thir 5

tị lệ bất thưởng (dị dạng) của tỉnh trồng, làm giảm số lượng tỉnh trồng Nhỏm chuột

tiếp xúc với C

mg/kg ba) góp phần cái thiện số lượng vả chất lượng tính trùng do cadmium gay ra [69] nhưng được bổ sung vitamin C (10 mg/kg b.w) và vitamin E (100)

Sharaf vi công sự (2017) đã thực hiện nghiên cứu nhằm khảo sit khả năng

chống oxi hoá bảo vệ vai trò của vitamin C (30 mẹ vitamin C/kg b.w) đối với độc

tính huyết học cia chi acetate (20 mg vitamin Cig thé trọng) và cadimi clorua (3/0

êu cu, kim giảm số lượng tế bảo hồng cầu đăng kể số lượng bạch cầu và số lượng

và nỗng độ hemoglobin, Vitamin € đã cải thiện tác dụng có hại của chỉ eetate và

‘cadmium clorua đổi với các thông số huyết học [70]

Nim 2019, Milena và cộng sự đã nghiên cứu nhắm đánh giá tác dụng độc hại của Cả cấp tính và phơi nhiễm chỉ trong máu, gan và thận của chuột Chuột Wisar được gây nhiễm Cú cấp tính ở ndng d (15 vi 30 mg/kg bow), chi acetate nồng độ

150 mg/kg thể trọng và một nhóm được xử lí kết hợp giữ cadmium và chỉ (15 mẹ Cake bow và 150 mg chứkg b.w) Kết quả cho thấy sự gia tăng nhẹ nồng độ creatinine, sự giảm nỗng độ urea, giảm tổng số protein vi ndng d9 albumin, ding thoi Bilinubin trực tiếp tăng eao so với nhóm đối chúng Ngoài ra, Cả liều cao làm giảm tắt cả các nhóm thử nghiệm đều nhận thấy xu hướng giảm số lượng hồng cằu, Hb và HCT giãm ở nông độ (30 mg kg ba), tri ngược với nhóm đối chứng [21] Năm 2031, Hounkpatin và cộng sự đã nghiên cứu nhằm khảo sắt ác dụng bảo

vệ của vitamin đối với các thông số huyết học ở chuột Wistar bị nhiễm độc Cả từ nhóm tiếp xúc với Cd ở nồng độ thấp và cao Cd (0,25 mg/kg b.w và

tương ông), một số khác tiếp xúc với thùy ngân, và nhôm cuỗi cũng

hai kim loại Một nhóm được bổ sung vitamin C cùng với các kim loại tương ứng,

tong khi nhóm đổi chứng chỉ uống nước cắt Kết quả cho thấy, Cả làm giảm số lượng

cao; nồng độ hemoglobin và hematoerit giảm khi được xử lí ở liều thấp Ở nghiệm

thức được xử lí bởi Có kết hợp vitamin C cho thấy ềm năng bảo vệ của vitamin C

khỏi kim loại độc hại nảy [71]

Xăm 2022, Shi-Han Yang và công sự đã thực hiện nghiên cứu nhằm đảnh giá ảnh hưởng của việc tiếp xúc Cử lên tế bảo leydig và mạch máu ở tỉnh hoàn chuột

“Chuột đực tiếp xúc với Cd bằng cách tiêm măng bụng với nồng độ lần lượt là 0.5, 1.5 sắc tế bảo nội mô tăng lên đáng kể và các protein liên quan đến mạch máu cũng tăng

lên khi tiếp xúc Cd, đặc biệt là ở nồng độ 2,5 mg/kg/ngày Nhóm này cho rằng có thể

ự tiếp xúc Cả đã kích thích sự tăng sinh của các tế bảo thành và tế bảo nội mô của

mạch máu, dẫn đến tỉnh trùng hoạt động bắt thường Ngoài ra, trọng lượng tinh hoàn

và hoạt động của tổ bảo leydig cũng giảm dáng kể khi gây nhiễm Cả [72] Năm 2022, Poli và cộng sự đã nghiên cứu nhằm đánh giá khả năng cải thiện tổn thương oxy hod do Cử gây m ở chuột Wintr bằng viamin C, kẽm và N- nước tổng với nồng độ 10 m1 trong 4Š ngày đã gây ắc ảnh hưởng so với nhóm

sinh hoá của huyết thanh như albumin, urea, ereatinine, AST và ALT tăng đáng kể

ồng thời CdCd2 (10 mg/L) và vitamin C (100 mg/kg thé trong) cho thy sự cải thiện khả năng cải thiện tổn thương,

so với lô chuột đối chứng Ở nghiệm thức được xử lí

ảo độc tính cadimi gây ra [73]

1.42 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam

in Thị Thương Huyền (2019) đã tiễn hành nghiên cứu nhằm đánh giá tác

dụng kháng độc New lh asen (450 ug/L) của tôi và sơ rỉ (250 mg/kg thể trọng) lên một

xố chỉ tiêu sinh lí của chuột nhất trắng đực Sau 30 ngày cho thấy: dịch ép tỏi Lý son

vi dich p Sơ có tiềm năng trong việ giữ ẳn định tẾ bào mẫu trong quế tình phơi nhiễm asen Phân ích mô học cho thấy dịch ép tỏi Lý Sơn và dịch p sơ rỉ có iểm cũng giúp gan và thân đào thải lượng Astích tụ tại đây [74]

Cho đến hiện nay, ở Việt Nam vẫn chưa có nhiều Công trình khoa học nghiên

cửu về khả năng kháng độc tính Củ của vitamin C (aseorbie sei4) cũng như địch ép

quả sơ rỉ lên các chỉ số huyết học chuột nhắt trắng trong thời gian dài (trên 30 ngày)

Vĩ vậy, việc thực hiện đ ti này góp phần cung cắp dẫn liệu khoa học cổ thể lâm cơ

sở cho các bước nghiên cứu tiếp theo

1.4.3 Nhận định tình hình nghiên cứu

Các nghiên cứu đã thể hiệ rằng viamin C có thể đồng vai trỏ quan trọng rong

việc bảo vệ cơ thể khỏi độc hại Cd thông qua các thông số huyết học ở chuột thí

nghiệm Theo đỏ, cần có thêm các nghiễn cửu vỀ vai trỏ của vitamin C nồi chưng và

vitamin C từ các nguồn cây trái tự nhiên trong việc bảo vệ cơ thể khỏi độc hại của

thăm dò khả năng kháng độc tỉnh của địch ép quả sơ í, một nguồn vitamin C tự nhiên,

đối với các chỉ số huyết học của chuột nhất trắng Điều này sẽ cung cấp thông tin quan

trọng và đăng giá về tiềm năng của dich ép so ri kim một phương tiện bảo vệ hiệu quả khỏi tác động độc bại của Cd, mở ra cơ hội cho các phát hiện mới trong lĩnh vực nghiên cứu này

Chương 2 V/ T LIỆU VÀ PHƯƠNG 2.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU

2.1.1 Thời gian nghiên cứu:

Khoá luận được tiễn hành từ tháng 10/2023 đến tháng 04/2024

2.12, Bia diém nghiên cứu:

Khoá luận được thực biện tại Phòng thí nghiệm Giải phẫu — Sinh

Động vat (M103), Trung Dai học Sư phạm Thành phố Hỗ Chí Minh lgười & XXết nghiệm sinh hoá được thực hiện tại ở Trung tâm Y khoa Medie Hoà Hảo, Quận 10, Thành phố Hồ Chí Minh

32 DỤNG CỤ, THIẾT BỊ VA HOA CHAT

2.2.1 Dụng cụ, thiết bị dùng chăm sóc chuột và thu mẫu máu chuột

Các dụng cụ và thiết bị chính sử dụng chăm sóc chuột và thu mẫu máu chuột

trong khoá luận được thể hiện ở Bang 2.1 va Bảng 2.2

Bảng 2.1 Dụng cụ, thiết bị chăm sóc chuột

STT Tên dụng cụ, thiết bị Xuất xứ

1 | Phòng nuôi động vật thí nghiệm Việt Nam

2 | Chuồng nuôi chuột Việt Nam

3 | Bình đựng nude uéng cho chuột (120 mL.) Việt Nam

4 | Man che Việt Nam

5 [Máy nh Nhật Bán

6 | Nhiệt kế điện tử đo nhiệt độ và độ âm Đức

STT “Tên dụng cụ, thiết bị Hãng sản xuất Xuất xứ

1 | Kính hiễn vi soi nỗi Nikon Nhật

2 | Kinh hién vi quang học Olympus Nhật

3 | Kínhhiễn vi đảo ngược Nikon Nhật

4 | Cân phân tích Shimadzu Nhật

5 | Buống đếm hồng cầu, bạch cầu | Heinz Herenz Hamburg | Đức

6 |Ôngtrộnhồng cầu bạchcầu | Heinz Heren Hamburg | Đức

7 [Ong mao quan Hirschmann Đức

Labogrerate

8 |B dung ev Huyat sic ké Sahli Marienfald Đức C9 [Mihm | — HBTTICH Đức

10 | Lame Greetmed Trung Quốc

11 | Lamella Heinz Herenz Hamburg | Đức

12 | Kim tich méu Vinahancook Vigt Nam

13 | Pipetman ISOLAB Đức

14 | Fancol 50 ‘Kartel Spa Pháp

15 | Bia peti Steriplan ‘Ban Mach

16 | Đồng hồ đếm giờ Việt Nam

17 |Ông nghiệm tách huyết thanh | máu URI USM Việt Nam 'Việt Nam

Các hoá

Bảng 2.3, Hoá chất và dung dịch thí nghiệm

ci ung địch thí nghiệm chính sử dụng cho để ti th hiện ở Bảng 23

STT 'Tên hoá chất Hing sin xuất Xuất xứ

1 | Cadmium (Cd) chloride Sigma Mỹ

2 | Nate sulfate Scharlab SL | Tay Ban Nha

3 | Nats clorua Scharlab SL | Tây Ban Nha

4 | Acid acetie Scharlab SL | Tây Ban Nha

5 | Acid hydrochloric Merch Đức

6 | Magnesium sulfate Scharlab SL | Tây Ban Nha

7 | Kali dihydrogen phosphate Merck Bite

8 | di-Natri hydrogen phosphate Merck Đức

9 | Methanot Xilong Scientific | Trung Quốc

13 | LeAseotbie acid (bội, Scharlab S1 | Tây Ban Nha

14 | Xanh mehylen (bộ), Merck Đức

Các dung dịch thí nghiệm được pha theo hướng dẫn của Giáo trình thực hành

Sinh li học người và động vật [75], bao gồm

- Dụng địch Hayem (NazSO¿: 5,0 g; NaCl: 1,0 g; nước cất vừa đủ 100 mL);

- Dung địch bạch cầu Lazarus (acid acetic nguyên chất: 5 mL; xanh methylen 1%: 20 giọt: nước cất vừa đủ 100 mL);

~ Dụng dịch tiểu cầu Magie sulite 14% (MgSO+: 14 g; nước cắt vừa đủ 100 mL);

- Dung dịch Giemsa (Giemsa: 7,6 g; methanol: 750 mĨ.; glycerin: 250 mL);

~ Vitamin C tỉnh khiết (80 mgykg thé trong): 30 mg L-Ascorbie acid (dang b6t) + nước cất vừa đủ $ mb

2.23 Vật liệu

~ Sơ rỉ chua giống Brazil mua tại Gò Công, Tiền Giang (Hình 2.1) dùng để thu

4p thit quả Dũng dich ép này để cho chuột uống -? ry

Hinh 2.1 Sơ ri chua giống Brazil mua l Gò Công, Tiền Giang

3.8.1 Phương pháp chăm sóc chuột

CChuộtnhắt trắng đực (Mue musrvlue vác albino) 4 tan tuổi, mua ừ Viện Pasler Thành phố Hồ Chí Minh Chuột được nuôi ổn định ở diễu kiện phòng thí nghiệm

trong 2 tuần để đạt trọng lượng 19 ~ 21 g (6 tuần tuổi) trước khi tiễn hành thí nghiệm

Điều kiện nuôi chuột như sau: chuột được nuối trong lồng kinh có kích thước

trấu sau mỗi 2 - 3 ngày

23.2 Cơ sở chọn nồng độ chỉ, dịch áp quả Sơ rỉ và vitamin C thương mại Cơ sở chọn nồng độ cadmium

Căn cứ vào Công bổ của Wang và cộng sự (2020), cho thấy tiếp xúc cadmium

clorua ở nồng độ | mg/kg va 2 mg/kg thé trọng trong 35 ngày liên tiếp đã gây ra ảnh

Hounkgatin và cộng sự [71] dã nghiên cửu nhằm khảo ft tac dung bao vé cia vitamin

€ đối với các thông số huyết học ở chuột Wisar bị nhiễm cadini clorua (025 mg/kg

kể cả ở liều cao hay iều thấp; giảm số lượng bạch cầu khi được xử íở liễu cao: nồng

độ Hồ và HCT giảm khi được xử lí ở

hợp vitamin C cho thấy tiềm năng bảo vệ của vitamin C khỏi kim loại độc hai nay thấp Ở nghiệm thức được xử lí bởi Cử kết

"Với nghiên cứu thực hiện kéo dài (60 ngày), nồng độ cadmium chloride 1 mg/kg thé

y

trọng được chọn để sử dụng cho nghiên cứu

Cơ sở chọn nông độ dịch ép thịt qua sor ri

Sharaf và cộng sự (2017) cho thấy với nồng độ 30 mg vitamin Cikg trong thời gian 30 ngày có thể cải thiện tác dụng có hại của cadmium đối với các thông số huyết

học [70] Do đó, đề tải cũng lựa chọn nồng độ 30 mg/kự thé trọng lảm đối chứng

dương cho thí nghiệm Dựa vào nghiên cứu của Van và công sự (2023), việc sử dụng

dung dịch ép chanh dây cho thấy có tiềm năng trong việc giảm/hạn chế độc tính của

kẽm (90 mg/kự thể trọng) gây ra cho chuột, trong đồ nồng độ dịch ép chanh dây 30 nông độ dịch ép sơ là 10, 20 và 30 mg/kg thể trọng để thực hiện khảo sắt rong để ti này 2.3.3 BG tri thí nghiệm

“Chuột đạt tiêu chuẩn lảm thí nghiệm được phan chia vào các nghiệm thức và

đánh dấu theo thứ tự ịnh ở đuôi cho từng con ở từng nghiệm thức Thí nghiệm gồm 54 chuột, chia làm 6 nghiệm thức (9 con/nghiệm thức) (Hình 2.3), bao gồm:

~ Nghiệm thức 2 — Đối chứng âm (C4): chuột uống nước nhiễm Cử từ CdCL,.2,5

HO với nồng độ 1 mg/kg thể trọng;

- Nghiệm thức 3 - Đối chứng dương (CdC): chuột uồng nước nhiễm Cú tir 'CúCI;2.5 HạO với nồng độ 1 mg/kg thể trọng kết hợp với vitamin C tỉnh khiết (30 mg/kg thé trong);

- Nghiệm thức 4 (CđSI): chuột uống nước nhiễm cadmium từ CdCI; 2.5 H;O

với nồng độ 1 mg/kg thể trọng kết hợp lượng dịch ép quả sơ rỉ tương đương nông độ

10mg vitamin C/kg thể trọng, gọi tắt là nông độ 10 mg/kg thé trong,

~ Nghiệm thức 5 (Cd2): chuột uống nước nhiễm Cú từ CúCb,2,5 HO với nồng

độ 1 mg/kg thể trọng kết hợp lượng dịch ép quả sơ rỉ trơng đương nồng độ 20 mg vitamin C/kg thé trọng, gọi tắt là nồng độ 20 mg/kg thể trọng

~ Nghiệm thức 6 (CđS3): chuột uống nước nhiễm Cử từ CdCI 2,5 H;O với nồng

{46 1 mg/kg thé trong kết hợp lượng địch ép quả sơ rỉ tương đương nồng độ 30 mg vitamin C/kg thể trọng, gọi tắt là nồng độ 30 mg/kg thể trọng

Dé tải được Hội đồng đạo đức trong nghiền cứu trên động vật (ACUCUS) chấp thuận với mã số I211/KHTN-ACUCUS ngày I8 tháng 01 năm 2023 (Phụ lục 5)

"Hình 2.3 Bồ trí chuồng nuôi chuột thí nghiệm ở các nghiệm thức 2.3.4 Phương pháp nghiên cứ

3.3.4.1 Phương pháp chuẩn bị dung địch Cả tie CdCl22,5 H20, dich áp quả

sơ rỉ và vitamin C tinh khiết

Pha dung dich Ca tir CdCl.2,5 H20 vio nước cắt đến nồng độ 60 mg/baw và

bao quản trong 1 tuần Mỗi ngày, sử dụng dung địch này để pha thành nông độ 1

mg/b.w Lượng dung địch Cd được tính toán dé pha vita da ding,