Đồ thị thể hiện kích thước hồng cầu của chuột ti các nghiệm thức thử nghiệm qua các tần nuôi 36 Hin 3.7.8 thi thể hiện số lượng bạch cầu của chuột tai các nghiệm thie thứ nghiệm qua các
Trang 1(Mus musculus var albino)
KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HQC NGÀNH SƯ PHẠM SINH HỌC
THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH - 2024
Trang 2TRUONG DAI HQC SU PHAM TP HO CHi MINH ola
HA VAN PHUOC
KHAO SAT ANH HUONG DOC TINH CADMIUM DEN DO TANG TRONG CO THE VA CAC CHI SO HUYET HOC CUA CHUOT NHAT TRANG
(Mus musculus var albino)
KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC NGÀNH SƯ PHẠM SINH HỌC
NGƯỜI HƯỚNG ĐÀN KHOA HỌC PGS TS Nguyễn Thị Thương Huyền
Trang 3Đề tài “Khảo sát ảnh hướng độc tính Cadmium đến độ tăng trọng cơ thể và các chỉ số huyết học của chuột nhất trắng (Mus musculus var, albino) * là nội dung mà tôi
đã nghiên cửu và hoàn thành khoá luận tắt nghiệp Trong quả trình nghiên cứu và hoàn
bạn bè và người thân Qua đây, tôi xin giới lời cảm ơn chân thành và sâu sắc đến những
người đã giúp đỡ tôi trong thời gian qua
Đầu tiên, tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Có - PGS TS Nguyễn Thị Thương Huyền — người Cô tâm huyết, đã tận tâm hướng dẫn, hỗ trợ tôi toàn bộ kính phí giúp
đờ tôi trong suốt quả trình nghiên cửu và thực hiện đề tài khoả luận tốt nghiệp Tôi xin
gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến toàn bộ Quỷ Thây Có Khoa Sinh học, Trường Đại
kinh nghiệm quý báu cho tôi trong suốt 4 năm học tập và rẻn luyện tại trường Tôi xin
Hà Thị Bẻ Tư đã nhiệt tình chỉ dẫn, giúp đỡ tỏi trong suốt quả trình thực hiện đề tải tại
Phòng thí nghiệm Giải phẫu ~ Sinh li người và động vật
Tôi xin chân thành cảm ơn Viện Pasteur Thành phổ Hỗ Chí Minh đầ cung cấp nguồn chuột để tôi thực hiện và hoàn thành đẻ tài khoá luận tốt nghiệp Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình, bạn bè đã luôn tìng hồ tôi trong suỗt quãng thai gian thực hiện đề tài khoả luận tối nghiệp Cảm ơn chị Nguyễn Thị Thanh Hằng,
Nguyễn Kim Mi, ban Pham Anh Hào, bạn Võ Hoàng Bảo Ngọc, bạn Tổng Tuyết Linh
quả trình thực hiện khoá luận
TP Hà Chỉ Minh ngày 08 tháng 05 năm 2024 SINH VIÊN
Trang 4Khoá luận tốt nghiệp với tên đề tài “Kháo sát ảnh hưởng độc tinh Cadmium dén
tăng trọng cơ thể và các chỉ số huyết học của chuột nhắt trắng (Mus musculus var albino)"
do tôi thực hiện dưới sự hướng dẫn của Cô ~ PGS.TS Nguyễn Thị Thương Huyền Tôi xin cam đoan các kết quả trong khoá luận là trung thực và chưa từng được ai công bề trong bắt kì công trình nào khác
Hà Văn Phước.
Trang 5LỠI CẢM ƠN "w ÔÔ
III Đối tượng nghiên cứu
1V Nội dung nghiên cứu
1.1.3 Ảnh hưởng của Cadmium đối với cơ thể con người và động vật 1.1.4 Cơ chế sinh lí của việc ảnh hưởng Cdmium đến các chỉ số huyết học
1.2 Tông quan về chuột nhắt trắng
1.2.1 Vị trí phân loại
1.2.2 Đặc điểm hình thái và sinh lí
1.2.3 Đặc điểm sinh lí miu
1.3 Các công trình nghiên cửu trên thể giới và ở Việt Nam liên quan đến ảnh hưởng
wD
ca die tinh Cadmium
1.3.1 Tình hình nghiên cứu trên thé giới
Trang 6Chương 2 VẬT LIỆU VẢ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2,1 Thời gian vả địa điểm nghiên cứu
3.3.1 Phương pháp chăm sóc chuột
2.3.4 Phương pháp nghiền cứu
2.3.4.1 Phương pháp chuẩn bị dung dịch cadmium chloride I6 2.3.4.2 Phương pháp cho chuột tống dung dich cadmium chloride 3.3.4.3 Phương pháp khảo sắt độ tăng trọng
2.3.4.4 Phương pháp thu nhận mẫu máu chuột
2.3.4.5 Phương pháp xác định số lượng hong cau, bach cau, tiéu cau va ham lượng Hb
2.3.4.6 Phương pháp xác định thời gian đông máu
2.3.4.7 Phương pháp xác định hematocriL
2.3.4.8 Phương pháp làm tiêu bản máu sử 2.3.4.9 Phương pháp xác định kich thước hông cẳu 23 2.3.4.10 Phương pháp xử li số liệu
Chương 3 KÉT QUÁ VÀ BẢN LUẬN
3.2.1 Số lượng hông cầu mae bình
3.22 Hàm
Trang 73.2.5 Kích thước hồng cầu
3.3 Ảnh hưởng độc tính Cadmium lên số lượng bạch cầu
3.4 Ảnh hưởng độc tính Cadmium lên số tiểu cầu và tốc độ đông máu 3.4.1 Số lượng tiểu cầu
3.4.2 Tốc độ đông má
3.5 Kết quả tổng hợp tác động của Cadmium
Phụ lục 2 - Chỉ số sinh lí máu chuột
Phụ lục 3 - Chấp thuận của hội đồng đạo đức trong nghiên cứu trên động vật PLI8
Trang 8voi
binh
Standart deviation -
Trang 9
Bang 1.1 Một số chỉ số huyết học của chuột - a 7
Bang 2.1 Dụng cụ, thiết bị chăm sóc chuột J3 Bảng 2.2 Dụng cụ, thiết bị lấy máu chuột và quan sát 13
Bảng 2.3, Hoá chất pha dung dịch thí nghiệm 14 Bảng 3.1 Kết quả tổng hợp về tác động của cadmium lên độ tăng trọng và một số chỉ
số huyết học của chuột nhất trắng 44
Trang 10DANH MỤC HÌNH ANH Hình 2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng thé
Hình 2.2 Bồ tri chuồng nuôi chuột thí nghiệm ở các nghiệm thức
Hình 2.3 Thao tác cho chuột trống ssa ni Hình 2.4 Hình ảnh minh hoạ cân iii lượng cơ thể chuột Hình 2.5 Minh hoa thao tic lay máu chuột
Hình 2.6 Minh hoạ thao tác xác định số lượng, Si daw và bạch cầu Hình 2.7 Minh hoạ thao tác xác định hảm lượng Hb
Hình 2.8 Minh hoạ thao tác xác định tốc độ đông máu
Hình 2.9 Minh hoạ thao tác xác định chỉ số hematocriL
Hình 2.10 Minh hoạ thao tic lim tiêu bản máu chuột
Hình 2.11, Minh hoạ đo kích thước hỗng cầu bằng phần mễn S - Eye Hình 3.1 Đỗ thị thể hiện độ tăng trọng của chuột tai các nghiệm thức thử shi qua
Hình 3.2 Dỗ thị thể hiện số lượng hồng cầu của chuột tại các nghiệm thức thử nghiệm
Hình 3.3 Đỗ thị thể hiện hảm lượng hemoglobin của chuột tại các nghiệm thức thử
Hình 3.4 Đề thị thể hiện chí số hematoerit của chuột tại các nghiệm thức thử nghiệm qua các tuần nuôi 32
Trang 1136 :ác nghiệm thức thử nghiệm
lu của chuột tại các nghiệm thức thử nghiệm
nghiệm qua các tuần nuôi
Hình 3.7 Đỗ thị thể hiện số lượng bạch c
Hình 3.9 Đỗ thị thể hiện thời gian đông máu của chuột tại các nghiệm thức thử
Trang 12I Lido chon dé tai
Quá trình công nghiệp hoá, hiền đại hod mang lai sy tiến bộ tích cực trong đời sống, nhưng cũng mang đến những ánh hướng về môi trường và sức khỏe con người,
người ngày cảng nhiều đã làm tình trạng ô nhiễm môi trưởng ngày cảng trở nên
tâm hàng đẳu vì nó có khả năng gây độc và độc tính này có xu hướng tích lũy sinh
kim loại không thiết yếu hiện ở vị trí thứ 7 trong danh sách ưu tiên các chất của Cơ
quan Đăng kỉ Chất độc và Bệnh tật (ATSDR 2019), được coi là một trong những
Cđ có thể gây ung thư, gây đột biến hoặc gây quải thai cho các loài khác nhau tủy thuộc vào liều lượng vả thời gian tiếp xúc [1]
Cd có thể tích ty nhiều ớ máu, gan, phối, thận
cứu dịch tể học chứng minh rằng việc tiếp xúc lâu dài với lượng Cd thấp góp phẩn
inh hoàn và xương, Các nghiên
gây ra bệnh tật và tử vong do các bệnh tìm mạch, xơ vữa động mạch, bệnh động mạch:
quan khác nhau ở các sinh vật khác nhau là rắt phức tạp và đến nay vẫn chưa được
giải thích đầy đủ [2] Hiện nay, cũng chưa cỏ phương pháp điều trị hiệu quả đồi với
ngộ độc Cd vì nó cỏ những biểu hiện và triệu chứng khác nhau trên người nhiễm ít
điều trị chính có liên quan đến việc sử dụng chất thải kim loại nhưng điều này lại gây
ra một số tác dụng không mong muốn, chẳng hạn như tải phân phối/chuyển vị trí của
Cả để có những kết luận rõ rằng, từ đó đưa ra những phương pháp điều trị cụ thẻ, phù hợp là vô cùng cần thiết
Trang 13độc tính Cadmium đến độ tăng trọng cơ thể và các chỉ số huyết học của chuột
nhất trắng (Mws musculus var, albine)* được thực hiện 1H Mục tiêu nghiên cứu
Khảo sát được mức độ ảnh hưởng của độc tính Cadmium đến sức khoẻ chuột
nhất trắng đực thông qua độ tăng trọng cơ thể và một số chỉ số huyết học nhằm cung
nhất trắng nói riêng và động vật chung, góp phần bảo vệ sức khỏe cộng đồng vả môi
trường
IIL Đối tượng nghiên cứu
Chuột nhất trắng đực 6 tuần tuổi (19 - 21 g)
1V, Nội dung nghiên cứu
Khảo sát ảnh hưởng của độc tính Cadmium lên:
Độ tăng trọng của chuột;
Một số chỉ số huyết học của chuột: số lượng tế bào máu (hồng cầu, bạch cầu,
tiểu cầu); kích thước hồng cầu; hàm lượng hemoglobin, chỉ số hematocrit, nông độ
huyết sắc tố trung bình hông cầu; tốc độ đông máu
ế áu; kích ông cầu; him
độ huyết sắc tổ trung bình hồng cẳu; tốc độ đông máu)
Trang 141.1 Tông quan về Cadmium
111 Tạng wna ea te cet ne Bing te Comins ee HAE
C¡ y còn được gọi là Cadimi (C: é
từ 112,41) thuộc nhóm XII trong bảng tuần hoàn các nguyên tố hoá học, là một
1817 Dây là một kim loại nặng cỏ trong đắt có nguồn gốc từ quá trình đốt, tỉnh chế, Khai tha à đốt nhiên liệu hoá thạch Trong tự nhién, Cadmi thác tại các mó Đông, Chi va Kẽm, thường ít gặp ở dạng tỉnh chất vì Cả không tổn
chất khác nhau Một số dang hợp chất Cadmium phd
cadmium chloride, cadmium sulfate va cadmium sulfide [4], [5]
n nhu cadmium oxide, Cadmium là một kim loại nặng và hiểm trên Trái Đắt Ở thể rắn, Cadmium có
màu trắng ảnh xanh, tương đổi mềm, dẻo, đễ uôn và để cắt bảng dao, không bị rỉ sết
những hợp chất phức tạp hơn Trong tự nhiên, Cả được sử dụng lảm chất mảu, chất
hợp chất của Cd được dùng đẻ tạo màu cho thúy tỉnh và trong nghề làm đẻn Một
kinh quang học hỗng ngoại [5]
1.1.2 Các nguồn phát thải ô nhiễm Cadmium và các con đường phơi nhiễm Cadmium
Viée tiép xtc voi Cd xay ra théng qua hut thuốc lá, nước hoặc thực phẩm bi 6 nhiễm, không khí bis nhiễm do đốt nhiên liệu hoá thạch hoặc ô nhiễm nghề nghiệp
ốc tiếp xúc ớn nhất với Cd đối tgười là thông qua chuỗi thức ăn [6], [7] Ni lượng Cd cao còn được tìm thấy trong các loài giáp xác, nhuyễn thể hai mảnh vỏ, hàu, động vật chân đầu và cua; nó cũng được tìm thấy
Trang 15đậu và một số loại nắm dại ai ẳn gốc từ thực vật, tùy theo độ ö nhị của đất, thường chứa nồng độ Cd cao hơn thịt trứng, sữa và các sản phẩm từ sữa
Trong số nảy, gạo và lúa mi, rau lá xanh, khoai tây, cả rốt vả cẳn tây có thể chửa
nhiều hơn [5] Ở những khu vực có đắt bị õ nhiễm, bụi là một con đường tiểm năng
để tiếp xúc với Cadmium [S] Các nguồn Cd do con người tạo ra trong môi trường có phân lần Cadmium cũng có mặt như một chất gay 6 nhiễm trong các lò luyện kim mon dan din cua da va dat, cháy rừng cùng lả một trong những lý do làm tăng nồng,
độ Cả trong môi trường sống (khí quyển, đắt và nước) [9] Một trong những con đường phơi nhiễm chính của Cadmium ở người là thông qua việc tiêu thụ gạo [10] Cd thể hiện các đặc tính thủy hoá cụ thể, gây ra khả năng
dì chuyển của nó trong nước ngắm Ở độ pH gần trung tính (<6,5) Cả vẫn ở dang
dụng dich, trái ngược với khả năng cố định điển hỉnh của các kim loại nặng khác {1 1] đới Cd là sử dị ốc 14, phơi nhiém Cadmium do hat thud
lá có thể khác nhau tùy thuộc vào loại thuốc lá Một điều thudc chia 1-2 wg Cd; mot
người hút 20 điều thuốc mỗi ngảy sẽ hắp thụ khoảng 1 wg Cả Khoảng 10% Cd được
hít vào với tỉ lệ hắp thụ ở phỏi lả 40%-50% Cadmium hít phải có liên quan đến các
thư phổi [5]
1.1.3 Anh hưởng của Cadmium đối với cơ thể con người và động vật Cadmium can thiệp vào các kim loại sinh học thiết yếu của cơ thể như Kèm, Magnesium, Calcium va Sat, lim thay déi cân bằng nội môi và xảo trộn chức năng,
mức độ nhỏ qua đường tiêu hỏa-ruột sự hắp thụ qua da là khả ít Khi Cadmium đi
được tích lũy ở thận, gan vả ruột [13] Sự bải tiết cadmium ra khỏi cơ thể chậm và
xảy ra qua thận, nước tiểu, nước bọt vã sữa trong thời kỳ cho con bú Việc tiếp xúc với Cả ở mức độ thấp có thể dẫn đến tồn thương thận, gan, hệ xương và hệ tìm mạch,
Trang 16nam và nữ [14] Điều này là do sự thay đơi biểu hiện của nhiều gen trong phơi, dẫn
do cadmium gây ra cĩ liên quan đến khả năng dễ dàng liên kết với thiol khi làm cạn
là thay đổi hoạt động enzyme methyltransferase DNA, cĩ thể gây ra rối loạn phát triển nhau thai và thai nhỉ [5]
Cadmium gây ra sự thay đổi steroid, rối loạn chu kỳ kinh nguyệt và hormone sinh sản, trì hỗn tuổi dậy thì và kinh nguyệt, sảy thai, sinh non và giảm cân khi sinh,
Cadmium đường ruột tăng lên khi dự trữ sắt cơ thể cạn kiệt và thiểu sắt, tình trạng truyền tín hiệu nội tiết tố khác nhau vả được coi là một chất gây rối loạn nội tiết cĩ
đường tín hiệu estrogen vi MAPK Cả liều thấp ảnh hưởng đến hệ tìm mạch [15]
các bệnh cơ xương, chẳng hạn như lộng xương viêm khớp dạng thắp (RA) và viêm xương khớp (OA) [17]
1.1.4 Cơ chế sinh lí của việc ánh hưởng Cdmium đến các chỉ số huyết học
Sau khi và cơ thể, một lượng lớn Củ trong hồng cầu liền kết với các protein cĩ trọng lượng phân tử cao, trong khi một lượng nhỏ liên kết với huyết sắc tố Hệ thống
tạo máu lả một trong những hệ thống nhạy cảm nhất và nĩ là mục tiêu gây độc quan
máu (giảm số lượng tế bảo hỗng cầu trong máu và nơng độ hemoglobin) va gia ting
thấy, phơi nhiễm Cú cĩ liên quan đến rồi loạn mạch máu Các nhĩm malondialdehyd
đối tượng tiếp xúc với Cd [18] Phơi nhiễm cadmium gay ting huyết áp vả tổn thương
Trang 17đường cyclooxygenase 2 trong động mạch [1 1]
BO: Gam nhắm Rodentia
Phân bộ Rang don hang Simplicidentata
Họ: Chuột Muridea
Gidng: Chugt Mus Linnacus, 1785
Loai: Chut tring Mus musculus Linnaeus, 1785
Nòi: Chuột nhất tring Mus musculus var albino Linnaeus, 1785
1.2.2 Đặc điểm hình thái và sinh lí
Chudt nhat tring — Mus musculus var albino 1a loai chudt thi nghiém rat phd
biến trong các các lĩnh vực như y học, sinh học, tâm li học và nhiều lĩnh vực khác
46, migng thuyén, tai vừa phải vả đuôi iL lông Thân của chuột trưởng thành dải
Cân nặng của chuột mới sinh dao động khoáng 0,9 - 1,5 g, trong khi chuột trưởng
tuôi, tuổi sinh sản từ 6 - 7 tuần tuổi, chu kỳ động dục là 4 - 5 ngày (tự phát), thời gian
mang thai tir 19 - 21 ngày, mỗi lứa sinh từ 6 - 8 con, khoảng cách giữa hai lứa là
con khi mới sinh ra chưa mở mắt, chưa có lông, da hồng, đến ngày thứ 9, chúng được
Trang 18lành, cỏ tập tỉnh chải chuốt bộ lông, làm tổ, lẻo trẻo, đảo 6, gặm nhắm, và các hành
vi xã hội [20] Chúng thường hoạt động mạnh về đêm, rất nhạy cảm đến sự chuyển
động và thay đối cường độ ánh sáng [21]
1.2.3 Đặc điểm sinh lí máu
Máu ngoại vỉ ở chuột bao gồm huyết tương, hồng cầu, bạch cầu vả tiểu cầu Nó
có chức năng tường tự như con người là cung cắp oxygen, chất đinh dường và vận
máu (hồng cẩu, bạch cầu và tiểu cầu) đều bắt nguồn từ tủy xương Một số thông số
số huyết học của chúng được mô tả ở Bảng I.1 [I2]
Bảng 1.1 Một số chỉ số huyết học của chuột
hồng cầu trong máu)
12,2 - 16,2
MCH (pg)
Số lượng bạch cầu - WBC (trên mỗi uL)
Trang 19ử người Ở chuột con (dưới 4 tuần tuổi), hỏng cầu lưới có thể được nhìn thấy chiếm
bình nhỏ hơn so với các loài khác, nhưng vì số lượng hỏng cầu của chúng cao hơn
bao hồng cầu thường được sản xuất trong tủy xương vả lách, quá trình sản xuất xảy
ra ngay cả ở những con trưởng thành Điều này trái ngược với các loài khác trong đó
loài động vật có vú khác, hồng cầu chuột có tuổi thọ khá ngắn, ước tính khoáng 30 -
tế bảo hông cầu có thê liên quan đến vẫn đẻ mắt nước của cơ thể xuất huyết, tăng tan máu hoặc giảm sản xuất tế bào máu [21]
Số lượng bạch cầu (WBC) trung bình ở chuột là 5 000 - 12 000 tế bảo/JtL, bao gồm: bạch cầu Iympho (chiếm 70 - 75%), bạch cầu đơn nhân (chiếm 2 - 6%), bach
basc (c
đặc biệt là trong phản ứng viêm và nhiễm trùng [22], Giảm bạch cầu có thể do các vin dé trong tủy xương làm giám sản xuất bạch cẩu rồi loạn quả trình điều hỏa miễn m0 - 0,19) Bạch cầu có chức năng quan trong trong hệ thống miễn dich,
dịch, căng thẳng, tăng cưởng đi vảo mô hoặc tăng phá hủy Chuột thường tăng số lượng tế bào bạch cầu để phản ứng với các chứng viêm [2]] 'Ở chuột các tiểu cầu thường tập hợp lại với nhau, đường kính của tiểu cầu dao động từ 1 - 4 wm Các cạnh của tiểu cầu không đều, với các sợi nhọn và xúc tu lồi
cắm máu, chúng phản ứng với tôn thương tế bảo nội mô bằng cách kích hoạt, kết tụ
s lị bổ rãi S66 lãt chó QG S& 16 đống ndụ [D2] Chuột có sổ lưag tiêu đ cao hơn bắt kỳ loài động vật thí nghiệm nảo (khoáng 300 000 - 1 000 000 tế bảo/gL.)
tuổi thọ của tiểu cầu khoảng 4 - 5 ngảy, Tiểu cẩu giảm có thể do các vẫn để trong tủy
xương lảm giảm sản xuất hoặc gia tăng sự phá hủy [21]
Trang 20trạng thía sinh lí và sinh sản Cụ thể, chuột đực trưởng thành có tỉ lệ phần trăm thê
ích của tế bào hằng cả ~T) cao hơn và tổng số bạch cằu (tế bảo lymph
và bạch cầu hat) nhiều bơn so với con cái; số lượng tế bảo hồng cầu (RBC), HCT và
ỏ i HC ấ ji à
Các chỉ số tế bào máu đóng vai trò chỉa khoá quan trọng trong việc đánh giá tỉnh trạng sức khỏe của động vật vả con người Khi chúng bị tác động bởi các yếu tố bên túy |hường tiềế động dùng kê Sự lng hoặc giám đội gội 5 Ss như số lượng hồng cầu, bạch cẩu, hoặc tiểu cẳu, có thể là đấu hiệu của mức độ nhiễm
suy giảm hay tăng số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu [23] [24] Do đó, việc đo
quá trình chẩn đoán vả theo dõi tinh trang sức khỏe, đặc biệt lả trong trường hợp nghỉ
ngờ về nhiễm độc kim loại nặng như Cadmium
1.3 Các công trình nghiên cứu trên thể giới và ở Việt Nam liên quan đến ảnh hưởng ctia déc tinh Cadmium
1.3.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới
'Viswanadh và cộng sự (2010) đã nghiên cứu về tác dụng kháng độc tổ của
mangiferin (MNG) đối với sự thay đổi các nông độ CdCl›, Chuột được tiêm một liều
MGN tối ưu trong phúc mạc (2,5 mg/kg thể trọng) trước khi thứ nghiệm với các nồng
độ CdCI; khác nhau (6, 7, 8, 9 và 10 mg/kg thể trọng) Việc thứ nghiệm chuột bằng
cầu đa sắc vi nhân (MnPCE) và hồng cầu binh thưởng (MnNCE) Hơn nữa, việc tiền
lại thấy sự gia tăng đáng kể ở hoạt động của Giutathione (GSH), glutathione-§-
Trang 21trạng thái chống oxy hoá [25]
Dhir vả cộng sự (201 1) đã tập trung vào việc đánh giá độc tinh va các tương tác hoá li giữa các phân tử sinh học với một loạt cation nhu Pb, Cd, Các thí nghiệm
được tiến hành trên chuột cái trưởng thành (/Raứs Norvegicus) bằng cách sử dụng ở
liễu cấp tính này đã gây ra một số tác động tiêu cực đáng kế đối với sức khoẻ chuột
phosphatase acid, phosphatase kiém, alanine aminotransferase vả aspartate
acetylcholinesterase trong tắt cả các mô, làm chậm tốc độ tăng trưởng vả gây ra việc
teo nhỏ của buồng trứng ở tất cả các giai đoạn hình thành nang trứng, dẫn đến khả
năng sinh sản giảm sút [26]
Hounkpatin vả cộng sự (2012) đã thực hiện nghiên cứu nhằm xác định độc tỉnh huyết học của Cd, thủy ngân và đánh giá vai trò kháng oxy hoá của vitamin C véi hai
con, được thành 2 nhỏm Các nhóm này được gây nhiễm với hai liễu lượng khác nhau
độ đã được chuẩn bị cho thí nghiệm (0.25 mg/kg, 2.5 mg/kg) đối với CdCl;; (0,12 mgikg, I2 mg/kg) đổi với HgCl› vả vitamin C (150 mg/kg) Kết quả nghiền cứu cho thấy Cd ở liễu thấp (0,25 mg/kg b.w) làm giảm các số lượng bach cau, héng cau,
liễu cao (2,5 mg/kg b.w), Cd tác động tiếp tục làm giảm số lượng bạch cầu, hồng cẩu, tăng nhẹ HGB, HCT vả vẫn tăng mạnh đối với tiêu cầu [27] Horiguchi và cộng sự (1026) gây nhiễm bằng cách tiêm Cd vào chuột BALBíc
ở liễu 2,5 mg/kg ip và LPS ở mức 0,5 mg/kg ip Kết quả cho thấy, ở chuột được nhiễm
trị bằng LPS cho thấy bạch cầu tăng nhanh hơn, đỉnh điểm là 12 giờ Những kết quá
Trang 22viêm toàn thân kèm theo bạch cầu trung tính kéo dải [28]
Sharaf và cộng sự (2017) tập trung vào việc xác định độc tính huyết học và những thay đổi sinh hoá ớ chuột nhất đực bị ảnh hưởng khi uống một liều duy nhất
lượng cơ thể chuột đáng so với nhóm chuột đối chứng không uống Cd (106 g so với
tiểu cầu tăng mạnh so với đối chửng; hồng cầu và HGB giảm mạnh (p < 0,05) [23] Trong năm này, Atanbaeva và cộng sự đã nghi cửu sự nhiễm độc một số kim loại nặng gây tổn thương các tế bào máu trong cơ thể động vật và làm suy yếu khả năng
đã có dấu hiệu ngộ độc mạnh, cuối cùng toàn bộ chuột thí nghiệm đều chết trong
vòng 5-6 ngảy Ngoài ra, kết quả còn cho thấy bạch cầu trung tính chuột thí nghiệm
cứu ảnh hướng của việc tiếp xúc lâu dải với thủy ngân và cadmium đơn thuần vả kết
hợp lên hệ thống đông máu của chuột Sprague-Dawley 4 con chuột đực Spraguc-
Dawley được tiếp xúc với cadmium (Cd) và thủy ngân (Hg), đơn độc hoặc kết hợp,
trong 28 ngảy với liều lượng tương đương 1000 lần giới hạn của Tỏ chức Y tế Thế
và hình thành các cặn lắng dày đặc (DMD) Hg làm giảm sự hình thành mạng lưới fibrin [30]
1.3.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam
Cho đến hiện nay, ở Việt Nam vẫn chưa có nhiều công trình khoa học nghiên
cứu về ảnh hướng của độc tính Cadmium lên các chí số huyết học chuột nhất trắng
trong thời gian dài (trên 30 ngảy) Vì vậy, việc thực hiện đẻ tải này góp phẩn cung cấp dẫn liệu khoa học có thể làm cơ sở cho các bước nghiên cứu tiếp theo
Trang 232.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Khoá luận được tiền hành tử tháng 09/2023 đến tháng 04/2024 tại Phòng thí nghiệm Giải phẫu - Sinh lí Người & Động vật (M103), Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chỉ Minh
Trang 24
11 | Lamella Heinz Herenz Hamburg Đức
12 | Kimtrích máu Vinahankook Việt Nam
15 | Kim tiém 1 mL Vinahankook Việt Nam
2.2.2 Hoá chất và dung dịch thí nghiệm
Các hoá chất chính sử dụng cho đề tải được thể hiện ở Bảng 2.3
Bang 2.3 Hoá chất pha dung dịch thí nghiệm
STT | Tên hoá chất Hãng sản xuất Xuất xứ
1 | Cadmium chloride ngậm nước Merck Đức (CdCh.2,5H20)
2_| Natri sulfate Scharlab S.L _ | Tây Ban Nha
3 |Naiclorua Scharlab S.L _ | Tây Ban Nha
4 | Acetic acid Scharlab S.L | Tay Ban Nha
6 _ | Magnesium sulfate Scharlab S.L | Tây Ban Nha
7 | Methanol Xilong Scientific | Trung Quéc
8 | Glycerin Xilong Scientific | Trung Quéc
9 | Giemsa (bét) Án Độ
10 | Xanh methylen (bột) Merck Đức
Các dung dịch thí nghiệm để thu nhận tế bảo máu chuột được pha theo hướng dẫn của [21] trước một ngày, bảo quản ở ngăn mát tủ lạnh (4°C) và ghi rõ thông tin
về tên dung dịch, thời gian pha
Dung dịch hồng cầu Hayem: 5 g Na;SO¿ + 1 g NaCl + nước cắt vừa đủ 100 mL dung dich
Dung dich bạch cdu Lazarus: 5 mL acid acetic nguyén chit + 20 giot xanh
Trang 25Dung dich Giemsa: 7,6 g Giemsa + 750 mL methanol + 250 mL glycerin Dung dich chống đông 5%: 5,0 g natri citrate; nước cắt vira dit 100 mL 2.3 Phương pháp nghiên cứu
2.3.1 Bố trí thí nghiệm
Cơ sở chọn các nông độ Cd: (() theo Acharya và cộng sự (2008) cho thấy liều 1,0
mg CdCb/kg/ngày trong 5 - 8 tuần thí nghiệm đã ảnh hướng đến chức năng sinh sản của chuột đực [31]; (ii) theo Sharaf vả cộng sự (2017) cho thấy chuột rat bị nhiễm độc Cd (3,0 my/kg b.w) trong 30 ngày bị giảm khối lượng cơ thé, giám số lượng hồng cầu, Hb nhưng
protein tổng số; làm thận bị phủ [23]; (ii) theo nghiên cứu của Ali và cộng sự (2012), LD«›
của Cả từ CdCl› là 5.98 mg/kg b.w theo đường tiêm [32]: (iv) kế thừa kết quả nghiên cứu
CdCl›.2,5H2O la 70 mg/kg baw Nhur vay, liều chọn để gây tác động độc tính bản trường
diễn khoảng 1/10 LD50 hoặc nhỏ hơn để đảm bảo chỉ số điều trị TI (Therapeutic index),
tỉ số giữa liễu gây chế Dạ và liễ lệ i de
> 10133] Vi thế, các nồng độ Cứ?" I mg/kg b.w, 3 mg/kg b.w và 6 me/kẹ b.w được chọn
để khảo sắt trong thí nghiệm này
Bồ tri thi nghiệm: 36 chuột đạt tiêu chuẩn làm thí nghiệm được phân chia vào 3
nghiệm thức thí nghiệm ứng với 3 nỗng độ Cả khảo sát và 1 nghiệm thức đối chứng (không gây nhiễm Cd) Mỗi nghiệm thức gồm 9 chuột và được đánh dẫu theo thứ tự
cổ định ở đuôi cho từng con ở từng nghiệm thức Cụ thẻ từng nghiệm thức như sau: Nghiệm thức 1 - Đối chứng (ĐC): chuột uỗng nước máy khử clo bình thường Nghiệm thức 2 (Cd1): chuột uống CdẺ" với nồng độ 1 mg/kg b.w Nghiệm thức 3 (Cd3): chuột uống CdÊ” với nồng độ 3 mgikg b.w
Để tài được Hội đồng đạo đức trong nghiên cứu trên động vật (ACUCUS) chấp
thuận với mã số hồ số 1211/KHTN - ACUCUS ngày 11 tháng 12 năm 2023 (Phụ lục 2)
Trang 26Các thí nghiệm của khoá luận được bổ trí theo sơ đỗ Hình 2.1 vả Hình 2.2
huột Tảo lạc? và 7g viap wey ——
Hình 2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tống thế DC: Đổi chứng, NT: Nghiệm thức
Trang 27nước uống là gồm nước sinh hoạt của phòng thí nghiệm Chuột được cho ãn bỗ sung,
ngày/lần,
2.3.4 Phương pháp nghiên cứu
2.3.4.1 Phương pháp chuẩn bị dung dịch cadmium chloride Pha dung dich mudi cad: hloride ngậm nước (CdCL:.2,SH›O) đạt nông độ
60 mg/kg bw:
Tit dung dich muối cadmium chloride ngậm nước (CdCl›.2,SH:O) có nỗng độ
60 mg/kg b.w, tính toán để pha ra lượng dung dich cin cho từng chuột trong từng
3ingikg thé trong va Cd?” 6 mg/kg bw
2.3.4.2 Phương pháp cho chuột ung dung djch cadmium chloride
Nước nhiễm Cd?' được cho chuột uống
bảng cách dùng xỉ lanh 1 mL gắn với đầu kim
xuống thực quản (Hình 2.3) Thời gian cho uống
chuột ăn 30 phút Theo dõi vả ghi nhận các dấu
hiệu bắt thường hằng ngày vào số nhật kí
Hình 2.3 Thao tác cho chuột uống
Trang 28Cân khỏi lượng cơ thẻ từng con chuột
tương ứng với mỗi nông độ theo từng nghiệm
2 tuằn/lần (Hình 2.4) Ghi chép thông số theo
tăng trọng của chuột sau mỗi hai nuôi ở từng,
nghiệm thức Độ tăng trọng của chuột tại thời
lượng cơ thể chuột tại thời điểm khảo sát trử đi
khối lượng cơ thể chuột tại thời điểm tuần Hình 2.4 Hình ảnh minh hoạ
cân khối lượng cơ thế chuột
trước đó
2.3.4.4 Phương pháp thu nhận mẫu máu chuột
Trước khi lấy máu, cho chuột nhịn đói một đêm hôm trước, sảng hôm sau tiến
bảnh lấy máu, Chủ kì 4 tuẫn/lẳn, lắy máu ở tĩnh mạch đuôi chuột để đánh giá một số
lượng hồng câu, bach cau, tiểu câu, Hb, thời gian đông máu và chỉ số huyết họ
kích thước hỗng cầu Cách lấy máu chuột như sau:
+ Cho chuột vào | falcon nhựa 50 mL, để lộ đuôi chuột ra phia ngoải
+ Dùng bông gỏn tắm cồn 70° sắt trùng, dùng kim trích lấy máu ở tĩnh mạch
đuôi chuột để thực hiện kháo sát các chỉ số huyết học nêu trên (Hình 2.5)
Hình 2.5 Minh hoạ thao tác lấy máu chuột
Trang 29lamella trên lưới đếm của buồng đếm và đua lên kinh hiển vi kiểm tra ở vật kinh X10,
Bước 2: Lẫy mẫu máu và pha lỗng mắu
Dùng cồn sát trùng vị trí lấy máu, chờ cho khơ, Dùng kim trích máu vơ trùng
để lấy máu Lẫy bơng gịn lau sạch giọt máu đầu tiên, dùng tay nặn và chờ cho máu tiếp tục chảy ra để lấy máu
Dùng ống trộn hồng cẳu/bạch cầu hút máu đến vạch 0,5 Nếu máu lên quá vạch thì đùng bơng gịn thắm nhẹ ở đầu ống Thao tác phải đứt khốt, tránh bọt khí vào ống trộn
Tiếp tục hút thêm dung dịch hỗng cẩu vào ống trộn hồng cầu đến vạch 101 (với ng trộn bạch cầu lả vạch 11) Như vậy, máu đã được pha lỗng 200 lằn (với máu trong ống trộn bạch cầu là được pha lỗng 20 lần) Nếu muốn pha lỗng máu 100 lần, ta hút máu đến vạch số 1, rồi tiếp tục hút hung dịch pha lộng đến vạch 101 Dùng ngĩn tay cái và ngĩn giữa bịt hai đầu ống trộn và lắc đều đề trộn máu với dung dịch pha lỗng
Trang 30Bỏ vài giọt đầu trong ống trộn, đặt đầu ống trộn vào cạnh của lamelle tiếp giáp với buồng đếm, nhờ lực mao dẫn, máu pha loãng sẽ tràn đều vào buồng đếm (tránh
vi và tiếng hành đêm số lượng hằng cầu/bạch cẩu
B x 4000 x 20
——————=Bx30 40
"Phương pháp xác định số lượng tiểu cầu - Phương pháp Fomio
Nguyễn tắc: Trên tiêu bán máu nhuộm, đếm số lượng tiểu cẩu có trong 1000
hông cầu, căn cử vào số lượng hồng cầu có trong 1 mm” máu để tỉnh ra số lượng tiêu
cau trong | mm? mau,
Phương pháp xác định hàm lượng hemoglobim
Dung dạ HC 0.1N được thêm vào pone sắc kế Sahli tới vạch thấp nhất lo theo, sử Ích máu lẫy máu ở hud
đến vạch 0,02 mL Mẫu máu sau đỏ được chuyển vào day huyét sắc kế Sahli cỏ sẵn
hút máu
Trang 31thủy tỉnh, mẫu được đề yên trong 5 phút để HCI tác dụng với máu thành dung dịch
hematin chlohydrate có màu nâu sẫm
Ông sau đó được đặt vào giá, từng giọt nước cất được thêm vào mẫu và khuấy
đều bằng đũa thủy tinh Việc thêm nước cất tiếp tục cho đến khi quan sát thấy màu của
3 ống trên giá đồng nhất Tại thời điểm nảy, chỉ số tương ứng trên bàng chia độ thứ
máu từ tĩnh mạch chuột nhỏ vảo mỗi lame kinh 1 giọt (đường kinh 1 cm), bam đồng
hỗ ngay khi chảy máu Đặt 2 lame kính vào đĩa petri và đậy lại (Hình 2.) Sau 2 phút,
nhắc lame 1 rồi nghiêng một góc 45° xem giọt máu đã đông chưa, cứ 30 giãy kiếm
tra cho đến khi nghiêng lame kính giọt máu không thay đổi hình dạng là máu đã đông
Lame thứ 2 cũng quan sắt như vậy cho tới khi máu đông Bắm đồng hồ dừng lại Thời
gian đông máu tính cho đến khi máu đông ở phiến kinh thử 2
Trang 32
2.3.4.7 Phương pháp xác định hematoerit
Cho một lượng máu vào ống mao dẫn hematocrit, do độ dài của phần máu trong
éng mao quan bằng thước kẹp điện tử (HI); lí tâm ống mao quán chứa mẫu máu ở
tốc độ (3200 vòng/phút) trong 15 phút Dùng thước kẹp điện từ đo phẩn huyết thanh
H2)/H1*100%
Hình 2.9 Minh hoạ thao tác xác định chỉ số hematoerit
Trang 33Các bước làm tiêu bản máu được thực hiện theo bướng dẫn trong giáo trình thực hành Sinh lí học người và động vật [34], cụ thể gôm 4 bước (Hình 2.10); Bước 1: Chuẩn bị mẫu máu: dùng côn sắt trùng vị trí lấy máu, chở cho khô Nhỏ giọt dung dich MgSOv 14% lên vị trí lấy máu vừa sắt trùng Dùng kim trích máu
này làm tiêu ban va nhudm Giemsa,
Bước 2: Dàn móng mau máu: lẫy mẫu máu đã chuẩn bị ở bước 1 bỏ vài giọt
đầu, chắm nhẹ I giọt máu lên cuối lame thử nhất Lấy lame 2 chạm vào giọt máu với
góc nghiêng 30 - 45°, dé giọt máu lan theo cạnh lame rồi kéo lame 2 từ đầu nảy sang
ta đã dân đều giọt máu thành lớp mong trên lame, Dé tiêu bản máu khỏ tự nhiên hoặc
có thể dùng giỏ, tủ ẩm, hơ nhẹ trên đèn côn lảm khô tiêu bản,
Bước 3: Cổ định tiêu bản: sử dụng cồn methylic nhỏ đều trên tiểu ban mau, sau
đỏ để đứng tiêu bản trên giá cho alcohol cháy bết và để tiêu bản khô tự nhiên Bước 4: Nhuộm tiêu bản: tuỳ vào phương pháp sử dụng thuốc nhuộm, người ta
có thể tiến hành nhuộm đơn hoặc nhuộm kép Tiêu bản máu đã được cổ định bằng
lắc đều) trong 15 - 20 phút (cỏ thể nhỏ dung dịch Giemsa phú đều trên mẫu máu của
thủy tỉnh nằm ngang trên miệng một chậu thủy tỉnh, tránh hoá chất chạm vào tay và
quần áo người làm Rửa tiêu bán bằng nước cất một góc nghiêng (không dé nude
chảy vào chỗ có tiêu bản máu) đến khi nước trong, không còn phai màu Để khô mẫu
tự nhiên (hoặc sấy khô nhẹ trong tủ ấm hay trên ngọn đèn côn)
Hình 2.10 Minh hoạ thao tác làm tỉ bản máu chuột
Trang 34Quan sát mẫu tiêu bản máu dưới kính hiển vỉ Sử dụng phần mém S - Eye đo bán kinh của các hồng cầu Mỗi nghiệm thức lấy ngẫu nhiên các lame vả tiển hành đo bán
(Hình 2.11)
Hình 2.11 Minh hoa do kích thước hằng cầu bằng phần mền S —
2.3.4.10 Phương pháp xử lí số liệu
Tắt cả số liệu của đẻ tài được xử lí theo các thuật toán xác suất thống kê trên mắy vỉ
tinh bằng phẩn mễm Graphpad Prism 9.2, Các số liệu trung bình được trình bảy ở dạng số liệu trung bình (TB) và độ lệch chuẩn (Standard Deviation - SD) C: trong phân tích phương sai một vả hai yéu 6 (ANOVA) déu sir dung thir nghigm Tukey
so sánh khác biệt
với mức ý nghĩa là 0,05 (p < 0,05 thì sự sai khác có ÿ nghĩa thông kẻ)
Trang 353.1 Ảnh hưởng độc tính Cadmium lên độ tăng trọng cơ thể chuột
Trước khi tiến hành thí nghiệm, tổng số có 36 con chuột được kiếm tra cân nặng
và kết quả cân nặng trung bình của chuột đưa vào thí nghiệm đạt 21,32 + 0,66 g (p=
Điều này đảm bảo các điều kiện thi nghiệm đồng nhất và làm cơ sở đánh giá kết
quả của thí nghiệm vẻ sau Từ phụ lục 1.2, kết quả vẻ độ tăng trọng trung bình của
các nghiệm thức khảo sát qua mỗi 2 tuẳn thí nghiệm được thẻ hiện ở Hình 3.1
Thời gian danj
Hình 3.1 Biểu đỗ thể hiện độ tăng trọng của chuột tại
các nghiệm thức thử nghiệm qua các tuần nuôi Kết quả từ Phụ lục 1.3 cho thấy:
Sau 2 tuần khảo sát, khối lượng cơ thể của chuột tăng rắt mạnh ở nghiệm thức
ĐC, nghiệm thức CdI cũng tăng nhưng chỉ bằng 1/2 lần nghiệm thức ĐC, độ tăng trọng
giảm rất mạnh ở nghiệm thức Cd3 và Cd6, độ giám trọng dao động trung bình trong
của chuột ở nghiệm thức Cd6 là thấp nhất và khác biệt có ý nghĩa (p = 0.0014) so với
Trang 36thấy, nồng độ Cđ?* 3 mg/kg b.w và 6 mg/kg b.w làm giảm độ tăng trong co thé của chuột sau 2 tuần thí nghiệm trong đỏ nỗng 6 6 mg/kg b.w lam giám độ tăng trọng của chuột
sau 2 tuần thí nghiệm mạnh nhất
Sau 4 twin thi nghiệm, độ tăng trọng ở nghiệm thức Cd3 là cao nhất (gấp 3 lần
so với nghiệm thức ĐC) và ở nghiệm thức Cd6 là thấp nhất (gắp 2 lần so với nghiệm
nay đều không có ý nghĩa thống kê Kết quả nảy cho thấy, nồng độ Cd°” 6 mgkg b.w lam giảm độ tăng trọng cơ thể của chuột sau 4 tuần thí nghiệm; nỗng độ Cử?" 3 mg/kg b.w lảm tăng độ tăng trọng cơ thể cúa chuột sau 4 tuần thí nghiệm tuy nhiên sự tương quan tăng - giảm này không đảng kể
Sau 6 tuần thí nghiệm, trọng lượng của chuột có xu hướng giảm ở tất cả các
nghiệm thức so với 2 tuần trước đó, riêng nghiệm thức Cdó cỏ độ tăng trong giảm
mạnh nhất (gắp 2 lần nghiệm thức ĐC) Độ tăng trọng ở nghiệm thức Cd1 là cao nhất
(gấp 1,5 lần nghiệm thức ĐC) Sự khác
thức trong thời gian này đều không có ý nghĩa thống kê Kết quả này cho thấy, nông
độ Cd?" 6 mg/kg b.w lảm giảm độ tăng trọng cơ thể của chuột sau 4 tuần thí nghiệm:
+ về độ tăng trọng trung bình ở các nghiệm
nghiệm, tuy nhiên sự tương quan tăng - giảm nảy không đáng kẻ Sau § tuần thí nghiệm, khối lượng cơ thể của chuột có xu hướng giảm ở các nghiệm thức Nhìn chung, sau 8 tuẳn nuôi, độ tăng trọng của chuột ở các nghiệm thức
ấp xếp theo thức tự nh: ip irc tyr dé tng trong dan): Cdl <Cd6
< Cđ3 < ĐC (Hình 3.1) Sự khác biệt về độ tăng trọng trung bình ở các nghiệm thức trong thời gian nảy đều không có ý nghĩa thống kê
Nhìn chung, kết quả của nghiên cứu này cho thấy, trong 6 tuần đầu, tốc độ tăng
trọng của chuột giảm dẫn theo sự tăng dẫn nông độ Cd khảo sát sò với nghiệm thức
đối chứng, trong dé 2 tuin dau la the hiện rõ sự cách biệt ở nông độ 3 và 6 mg/kg bw
Trang 37đương nỗng độ 6 mg/kg b.w, tức làm giảm độ tăng trọng của chuột Như vậy 3 nông
độ Cd khảo sát đã ảnh hưởng đến tốc độ tăng trọng của chuột, thể hiện rồ ở 6 tuần đầu gây nhiễm
Bàn luận
Kết quả dé tài này tương đồng với một số nghiên cứu trước đó, Nghiên cửu [35] cho thấy rằng, chuột được tiêm CdẺ' qua mảng bụng sau 8 ngày dẫn đếntốc độ tăng trọng cơ thể bị chậm lại so với nhỏm đổi chứng Theo [36], những con chuột đực được cho ăn gạo bị nhiễm Cd (0,005 va 0,74 mg/kg b.w), đã giảm trọng lượng cơ thể
chuột bằng cách tiêm Pb-Cd dưới da với tỉ lệ 50: 1 trong 35 ngày lim cho chuột chán
ăn, thường xuyên bj stress, hoạt động giảm sút rõ rột, khối lượng giảm va lông bị kích
trong nước uống từ tuôi bố mẹ cho đến khi đạt 10 tuần tuổi sau ra đời, đã dẫn đến
là đối voi Cd (10 va 100 ug/L) Theo [39], Chuột đực Sprague-Dawley được cho
3-4 ngày đầu, đặc biệt la ở nhỏm dùng liễu cao
Khôi lượng cơ thể lả thông số quan trong dùng để đánh giá tỉnh trạng sức khỏe của
ng vt thí nghiệm, Kết quá để ti áy rà : tăng trọng cơ thể chuột ở các nghiệm thức được gây nhiễm Củ trong 6 tuần đầu, đặc biệt
vi sinh vật ở niềm mạc ruột, tử đỏ làm chậm quả trình chuyển hoa các chất, dẫn đến khỏi lượng cơ thể chuột bị giảm đáng ké [40]
Trang 38hemoglobin, chi s6 hematocrit, nong độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu
và kích thước hồng cầu
3.2.1 Số lượng hồng cầu trung bình
Từ Phụ lục 2.1.2, kết quả về số lượng hồng cầu trung bình của các nghiệm thức khảo sát qua mỗi 4 tuần thí nghiệm được thể hiện ở Hình 3.2 Số lượng tế bảo hồng
các nghiệm thức thử nghiệm dao động trong khoảng 8,75 ~ 9,67x10° tế
nghiệm) ứ
bào/mm” máu (p = 0.9927) Như vậy, số chuột đưa vào thí nghiệm có số lượng hồng,
tế bào/mmẺ [12]) Điều lảm cơ sở đánh giá kết quả của thí nghiệm về sau
i pe E1 Cải
Tuan “Tuần 4 Tuan 8
‘Thoi gian (twin)
Hình 3.2 Biểu đồ thể hiện số lượng hồng cầu của chuột tại các nghiệm thức thử nghiệm qua các tuần nuôi
Trang 39a uN Ee ở nghiệm thức CdI số lượn; Saw ed i ạ
ở tuần 4 và tuần §, sự thay đối này cỏ ÿ nghĩa thống kế (p = 0,0003) Ở nghiệm thức
ý nghĩa thống kê (p = 0,047) Ở nghiệm thức Cđó, số lượng hồng cầu giảm mạnh ở
tuần 4 (gấp đôi nghiệm thức ĐC) nhưng tăng mạnh ở tuần 8, sự thay đổi này cũng có
Ý nghĩa thông kê (p < 0.0001)
Tit Phy lục 2.1.3 cho thấy:
Theo nghiệm thức thử nghiệm qua mỗi 4 tuần nuôi, sau 4 tuần thí nghiệm, số lượng hồng cầu của chuột ở nghiệm thức Cd là cao nhất, sự khác biệt này có ý nghĩa
thức Cd6 là thấp nhất và có sự khác biệt có ý nghĩa thông kê với các nghiệm thức còn
hồng cầu của chuột sau 4 tuan thi nghiém, trong khi d6, Cd* 6 mg/kg b.w lam giảm
số lượng hồng cầu của chuột sau 4 tuần thí nghiệm
Sau 8 tuần thí nghiệm, số lượng hồng cầu của chị ở nghiệm thức Cd1 và Cd3 vẫn là cao nhất, tuy nhiên khác biệt không có ý nghĩa so với các nghiệm thức còn lại
có ý nghĩa so với các nghiệm thức cỏn lạ Kết qua nay cho thdy, Co" 1 mg/kg bw
lâm tăng nhẹ số lượng hồng cầu của chuột sau § tuần thí nghiệm
Kết quả trên cho thấy, nỗng độ Cđ°” 1 mg/kg b.w làm tăng mạnh số lượng hong cầu của chuột sau 4 tuần thí nghiệm vả 8 tuần thí nghiệm, nồng độ Cd? 6 mg/kg b.w
làm giảm số lượng hồng cầu của chuột sau 4 tuần thí nghiệm và tăng nhẹ sau § tuần
thí nghiệm
3.2.2 Hàm lượng hemoglobin
Từ phụ lục 2.2.2, kết quả về hàm lượng hemoglobin trung bình của các nghiệm thức khảo sát qua mỗi 4 tuần thí nghiệm được thể hiện ở Hinh 3.3 Hảm lượng
Trang 40đầu tương đương nhau vả nằm trong khoảng giới bạn tham chiéu (12,2 - 16,2 g/dL [12]) Điều làm cơ sở đánh giá kết quả của thí nghiệm về sau
Thời gian (tuần)
Hình 3.3 Biểu đồ thể hiện hàm lượng hemoglobin cúa chuột tại các nghiệm thức thử nghiệm qua các tuần nuôi Kết quả từ Hình 3.3 cho thấy
Theo thời gian khảo sắt, ở nghiệm thức Cd1, hàm lượng hemoglobin có xu hướng tăng nhanh ở tuần 4 sau đó tăng nhẹ ở tuần 8, sự khác biệt này có ý nghĩa
giảm nhẹ ở tuẫn 4 sau đó tăng mạnh ở tuần 8 sự thay đối này có ÿ nghĩa thống kề (p
< 00001); Ở nghiệm thức Cdó, hảm lượng hemoglobin giảm mạnh ở tuần 4 sau đó tăng mạnh ở tuần 8, sự thay đối này có ý nghĩa thông kê (p < 0,0001) Theo nghiệm thức thử nghiệm qua mỗi 4 tuần nuôi, Sau 4 tuần thí nghiệm, hảm lượng hemoglobin của chuột ở nghiệm thức Cd1 là cao nhất, sự khác biệt nảy có ý
nghĩa thống kê với các nghiệm thức cỏn lại (p lần lượt = 0,00318, < 0.0001, <0,0001)
và ở nghiệm thức Cd6 là thấp nhất, sự khác biệt này có ÿ nghĩa thông kê với các