Dung môi được thêm vào sẽ thâm nhập, hòa tan các chất phân tích có trong mẫu kết hợp với sóng siêu âm đánh vỡ các thành tế bào, đẩy nhanh quá trình giải phóng và khuếch tán các chất này
Nguyên vật liệu
Mẫu Cỏ Lào đã được sấy khô và nghiền nhỏ.
Thiết bị, dụng cụ - hoá chất
Thiết bị
Dụng cụ - hoá chất
- Dụng cụ: cốc thủy tinh, phễu thủy tinh, erlen, ống nhỏ, đĩa petri, giấy lọc, chén thủy tinh
- Hoá chất: Acetone, Ethyl acetate.
Tiến hành thí nghiệm
Thí nghiệm 1: Ly trích chất chiết thô trong mẫu Cỏ Lào bằng các dung môi khác nhau
Bước 1: Cân 2 lần 1 g mẫu bột Cỏ Lào cho vào erlen
Hình 1.2 Cân mẫu bột lá Cỏ Lào
Bước 2: Cho 15 ml dung môi Acetone, Ethyl acetate lần lượt vào 2 erlen, sau đó cho vào máy siêu âm 15 phút với tần số 50/60 Hz, công suất 465 W
Bước 3: Cân giấy lọc, sau đó lọc dịch chiết
Bước 4: Sau đó thêm tiếp 15 ml vào bã và chiết tiếp lần 2, cho vào máy siêu âm
Bước 5: Lọc hết bã trong bình qua giấy lọc Sấy khô cả bã và giấy lọc trong tủ sấy
Bước 6: Sau sấy, cân để biết khối lượng bã còn lại
Hình 1.3 Thêm dung môi vào erlen
Hình 1.4 Lọc dịch chiết (a) Acetone ; (b) Ethyl acetate
Hàm lượng chất chiết thô được tính theo công thức:
H (%)=m o - m 1 m o x 100 Trong đó: mo: khối lượng nguyên liệu khô ban đầu (g) m1: khối lượng bã khô còn lại trên giấy lọc (g).
Thí ngiệm 2: Xác định độ ẩm của nguyên liệu mẫu Cỏ Lào
Mục đích: xác định được độ ẩm nguyên liệu bột Cỏ Lào trong quá trình bảo quản
Thí nghiệm được tiến hành với hai lần lặp lại, quy trình thực hiện gồm các bước sau:
Bước 1: Cân 2 g mẫu cho vào chén thủy tinh đã sấy khô (105 o C) và làm nguội trong bình hút ẩm Cân khối lượng chén a b
Hình 1.5 Bã khô sau khi sấy (a) Acetone; (b) Ethyl Acetate
Bước 2: Đem sấy chén và mẫu ở 105 o C đến khối lượng không đổi
Bước 3: Để nguội trong bình hút ẩm và cân tổng khối lượng chén và mẫu, tính độ ẩm bằng công thức:
W (%) =w 1 - w 2 m x 100 Trong đó: w1: khối lượng mẫu thử và chén trước khi sấy (g) w2: khối lượng mẫu thử và chén sau khi sấy (g) m: khối lượng của mẫu thử trước khi sấy (g).
Kết quả
Thí nghiệm 1
Khối lượng bã sau khi sấy khô, sau khi trừ đi khối lượng mẫu giấy lọc tương ứng với dung môi Acetone và Ethyl acetate lần lượt là 0,8414 g và 0,8549 g Áp dụng công thức tính hàm lượng chất chiết thô, chúng ta có thể xác định được giá trị cụ thể cho các mẫu này.
- Đối với dung môi Acetone:
- Đối với dung môi Ethyl acetate:
Nhận xét: Hiệu suất chiết nguyên liệu mẫu Cỏ Lào của dung môi acetone là
Hình 1.6 Khối lượng mẫu trước khi sấy
15,99% cao hơn dung môi ethyl acetate là 14,71% với cùng một khối lượng mẫu bột
Cỏ Lào Vì vậy hàm lượng chất chiết thô từ dung môi acetone lớn hơn hàm lượng chất chiết thô từ dung môi ethyl acetate.
Thí nghiệm 2
Áp dụng công thức tính phần trăm độ ẩm ta có:
Nhận xét: Như vậy, sau khi sấy ở 2 lần lặp lại đều có kết quả phần trăm độ ẩm không quá 13%
THÍ NGHIỆM 2 PHÂN TÁCH SẮC TỐ THỰC VẬT BẰNG KỸ
Giới thiệu
Tổng quan về cây Ngũ sắc
Tên Khoa học: Lantana camara L
Tên tiếng Việt: Ngũ sắc; Trâm ổi; Thơm ổi, bông ổi, ổi nho, nhá khí mu (Tày)…
Tên khác: Lantana aculeata L.; Đại sơn (Malaysia); ngải hoang, ngải đỏ, ngải trắng (ở vùng Caribe) và tick berry (Nam Phi)
2.1.1.2 Nguồn gốc và phân bố
Cây Ngũ sắc (Lantana camara L.), còn được gọi là Trâm Ổi, thuộc họ roi ngựa (Verbenaceae) và chi Lantana Loài cây này lần đầu tiên được Linnaeus mô tả vào năm 1753 trong tác phẩm Species Plantarum, bao gồm bảy loài, trong đó sáu loài có nguồn gốc từ Nam Mỹ và một loài từ Ethiopia (Munir, 1996) Tên gọi "Lantana" có thể xuất phát từ tên Latin cổ của cây.
Lantana, một chi thực vật có hình dáng lá và cụm hoa tương tự như Viburnum, chủ yếu xuất xứ từ các khu vực cận nhiệt đới và nhiệt đới châu Mỹ, nhưng cũng có một số loài từ châu Á và châu Phi nhiệt đới Vào cuối thế kỷ 17, các nhà thám hiểm Hà Lan đã đưa Lantana từ Brazil về Hà Lan, sau đó khám phá thêm ở các khu vực nhiệt đới, cận nhiệt đới và ôn đới Trong thế kỷ 18 và 19, nhiều giống Lantana với màu sắc rực rỡ đã được thương mại hóa và trở nên phổ biến toàn cầu như một loại cây cảnh.
Lantana camara L là loài thực vật phổ biến ở nhiều quốc gia, đặc biệt tại châu Mỹ và châu Phi, nhưng cũng được tìm thấy ở nhiều nơi khác trên thế giới, đặc biệt là khu vực Úc - Thái Bình Dương Hiện nay, loài này đã xuất hiện ở khoảng 50 quốc gia và trở thành loài xâm lấn Tại Việt Nam, hoa ngũ sắc là cây bụi mọc hoang và thường được sử dụng làm cây cảnh Số lượng loài Lantana được ghi nhận có sự khác biệt, dao động từ 50 đến 270, nhưng ước tính hợp lý hơn là khoảng 150 loài Việc phân loại chi này gặp khó khăn do tính không ổn định của các loài, sự lai tạo phổ biến, cùng với sự thay đổi hình dạng cụm hoa và màu sắc hoa theo tuổi và giai đoạn trưởng thành.
The Lantana genus contains a rich and diverse array of chemical components, with nearly two hundred organic compounds isolated to date, including flavonoids, terpenoids, saponins, steroids, carbohydrates, glycosides, and coumarins, as detailed in the study by Ganatra & Gurubaxani (2016) Flavonoids are found in n-hexane extracts, while glycosides and coumarins are present in acetone extracts Additionally, terpenoids, saponins, steroids, and carbohydrates have been reported in extracts from both n-hexane and acetone.
Flavonoid là các hợp chất phenol thực vật có màu sắc, chủ yếu là màu vàng, và đóng vai trò quan trọng trong việc tạo màu cho rau, quả, và hoa Chúng thuộc nhóm polyphenol với khả năng chống oxy hóa mạnh mẽ, đồng thời có tính chất chống viêm và chống ung thư Flavonoid thường là các hợp chất phân cực trung bình, dễ hòa tan trong các dung môi phân cực như methanol và ethanol.
Terpenoid là nhóm hợp chất hữu cơ không phân cực, dễ hòa tan trong các dung môi không phân cực như hexane Chúng chủ yếu được sử dụng như một tác nhân bảo vệ chống lại các bệnh do stress oxy hóa gây ra, theo nghiên cứu của Grassmann (2005) và González-Burgos cùng Gómez-Serranillos (2012).
Saponin là hợp chất amphiphilic, có khả năng tạo bọt nhờ vào phần phân cực và không phân cực Nó không chỉ đóng vai trò là chất chống oxy hóa tự nhiên mà còn kích thích quá trình apoptosis trong các tế bào khối u (Podolak và ctv, 2010; Tapondjou và ctv, 2011; Bi và ctv, 2012).
Steroid là hợp chất không phân cực, thường tan trong các dung môi không phân cực Chúng hoạt động như chất cho điện tử, tác động lên các gốc tự do và chuyển đổi chúng thành các hợp chất ổn định hơn, từ đó kết thúc phản ứng dây chuyền một cách hiệu quả (Yen và Chen).
Carbohydrates Đây là hợp chất phân cực, dễ tan trong nước, đóng vai trò quan trọng trong năng lượng và dinh dưỡng
Glycosides là hợp chất có cấu trúc gồm hai phần: phần đường (phân cực) và phần không đường (không phân cực) gọi là aglycon, thường tan tốt trong ethanol Chúng được sử dụng trong điều trị suy tim và loạn nhịp tim thông qua cơ chế ức chế bơm Na+/K+, từ đó làm tăng nồng độ ion canxi và cải thiện khả năng co bóp của cơ tim.
Coumarin là một hợp chất có tính chất không phân cực hoặc phân cực nhẹ, dễ hòa tan trong dung môi hữu cơ như ethanol Hợp chất này sở hữu nhiều hoạt tính sinh học quan trọng, bao gồm khả năng kháng khuẩn, chống oxy hóa, chống viêm và chống ung thư, theo nghiên cứu của Garazd và cộng sự (2007; 2009), He J và cộng sự (2011), He K và cộng sự (2011), cùng Al-Amiery và cộng sự (2012).
Lá ngũ sắc trong dân gian được sử dụng để đắp lên vết thương và vết loét, nhờ vào các hợp chất chống ung thư như lantaden B, icterogenin và β-sitosterol (Nguyễn Văn Đậu và Lê Thị Huyền, 2009) Đặc biệt, dịch chiết nước và dịch chiết cồn từ thân lá ngũ sắc cũng mang lại nhiều lợi ích cho sức khỏe.
10 còn có tác dụng hạ glucose huyết trên mô hình thực nghiệm (Nguyễn Minh Hà và ctv.,
Cây ngũ sắc có nhiều bộ phận với những đặc tính riêng biệt: rễ có vị ngọt đắng và tính lạnh, giúp thanh nhiệt; lá mát, có tác dụng tiêu viêm và chữa ngứa, vết thương do rắn cắn; hoa có vị ngọt nhạt, tính mát, có khả năng cầm máu Các bộ phận như lá, hoa và cành có thể được thu hái, phơi khô để làm thuốc chữa bệnh hoặc sử dụng tươi khi cần thiết.
Cây ngũ sắc, được sử dụng rộng rãi ở Nam Trung Quốc, Indonesia và Philippines, có tác dụng chữa trị nhiều loại bệnh Dịch chiết từ hoa ngũ sắc được dùng để tắm chữa ghẻ, trong khi lá và hoa giã nát được đắp lên vết thương hở, lở loét và sưng tấy Ngoài ra, cây còn được coi là biện pháp hỗ trợ sau khi mắc bệnh ung thư, với trà từ lá và hoa phơi khô giúp chữa cúm, sốt và đau dạ dày Tại Trung và Nam Mỹ, lá tươi được nghiền nát để điều trị vết loét, thủy đậu và các vết thương nhỏ Cây ngũ sắc cũng được sử dụng để chữa sốt, cảm lạnh, hen suyễn và cao huyết áp Ở Ghana, toàn cây được dùng để chữa viêm phế quản, trong khi nhiều quốc gia châu Á áp dụng cây này để điều trị vết cắt, loét và làm thuốc tẩy giun.
Tổng quan về sắc ký cột
2.1.2.1 Lịch sử phương pháp sắc ký
Nhà thực vật học người Nga Mikhail Tswett (Mikhail Semyonovich Tsvet) phát minh ra kĩ thuật sắc kí vào năm 1903 khi ông đang nghiên cứu về chlorophyll
Sắc ký, hay còn gọi là chromatography, có nguồn gốc từ tiếng Hy Lạp với từ "chroma" nghĩa là màu sắc và "graphein" nghĩa là viết Tên gọi này được đặt bởi Tsvet, người đã phân tích các sắc tố thực vật, mặc dù hiện nay phương pháp này cũng được sử dụng để tách các chất không màu Vào năm 1938, Izmailov và Schraiber đã phát triển phương pháp sắc ký lớp mỏng, và đến năm 1958, Stahl đã hoàn thiện phương pháp này.
Sắc ký đã có những bước tiến vượt bậc nhờ vào nghiên cứu của Archer John Porter Martin và Richard Laurence Millington Synge trong thập niên 40 và 50 của thế kỷ 20 Hai nhà khoa học này đã phát triển các nguyên tắc và kỹ thuật cơ bản của sắc ký phân bố, từ đó thúc đẩy sự phát triển của nhiều phương pháp sắc ký khác nhau, bao gồm sắc ký giấy (PC), sắc ký khí (GC) và sắc ký lỏng cao áp (HPLC).
Sắc ký khí đã phát triển mạnh mẽ từ những năm 1960, và sự ra đời của sắc ký lỏng cao áp vào cuối thập niên 60 đánh dấu một bước ngoặt quan trọng trong lịch sử sắc ký Hiện nay, cả hai phương pháp này được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm hiện đại trên toàn thế giới Sắc ký là một kỹ thuật vật lý giúp tách biệt các hợp chất trong một hỗn hợp dựa vào độ ái lực khác nhau của chúng đối với một hệ thống gồm hai pha: pha động và pha tĩnh.
Pha tĩnh là chất rắn hoặc chất lỏng, được sử dụng để tách riêng các hợp chất trong một hỗn hợp nhờ vào tính chất hấp thu của nó Chất rắn thường là alumin hoặc silicagel đã được xử lý, có thể được nạp vào cột trong sắc ký cột hở hoặc được tráng thành lớp mỏng trên bề mặt kính, nhôm hoặc nhựa trong sắc ký lớp mỏng.
Pha động có thể tồn tại dưới dạng chất lỏng hoặc khí Trong kỹ thuật sắc ký khí, chất khí được gọi là pha mang hoặc vectơ Ngược lại, trong các phương pháp sắc ký như sắc ký giấy, sắc ký lớp mỏng và sắc ký cột, chất lỏng được sử dụng được gọi là dung môi giải ly.
Sắc ký cột hoạt động dựa trên nguyên lý tách biệt các cấu tử trong mẫu thử khi được nạp lên cột chứa chất hấp phụ như silica gel hoặc nhôm oxyt Chất hấp phụ này đóng vai trò là pha tĩnh, trong khi dung môi khai triển (pha động) di chuyển dọc theo cột, giúp các cấu tử trong mẫu thử di chuyển với tốc độ khác nhau Sự khác biệt về độ phân cực của các cấu tử dẫn đến ái lực khác nhau với pha tĩnh, từ đó tạo ra các dãy riêng biệt và vị trí khác nhau khi chúng ra khỏi cột Quá trình này là cơ sở cho việc phân tích định tính và định lượng trong sắc ký.
Có thể được sử dụng trong cả hai lĩnh vực phân tích và điều chế
Sắc ký cột không chỉ được sử dụng để xác định số lượng các thành phần trong một hỗn hợp, mà còn có khả năng tách và tinh chế các thành phần phân tích Điều này khác biệt so với sắc ký giấy, vốn chỉ là một phương pháp phân tích đơn thuần.
Pha tĩnh và các dụng cụ thí nghiệm rẻ tiền, dễ kiểm, có thể triển khai với một lượng lớn mẫu chất
Khi vận hành cột sắc ký, việc theo dõi liên tục mức dung môi là rất quan trọng Nếu không chú ý, có thể xảy ra hiện tượng bọt khí, dẫn đến tắc cột, nứt cột và làm biến dạng đường đi của dung môi.
Chạy cột là một công việc tốn thời gian và thường xuyên lặp lại, đặc biệt khi sử dụng các mẫu Quá trình tách chiết diễn ra chậm và hiệu quả thấp hơn so với sắc ký lỏng cao áp.
Phân tách các thành phần trong hỗn hợp
Cô lập hợp chất dẫn đến nghiên cứu các hợp chất mới
Tinh sạch hợp chất quan tâm
Khái quát về chất diệp lục (chlorophyll) và carotenoit (xanthophyl và carotene)
2.1.3.1 Chất diệp lục (diệp lục tố, chlorophyll)
Có 5 loại chlorophyll là chlorophyll a, b, c1, c2 và d (có tài liệu chia thành chlorophyll a,b,c,d và e), ở thực vật bậc cao chlorophyll a và b rất phổ biến
Công thức của chlorophyll a (C55H72O5N4Mg)
Công thức của chlorophyll b là (C55H70O6N4Mg), diệp lục b chỉ khác diệp lục a là nhóm CH3 ở nhân pyron thứ hai được thay bằng nhóm CH=O
Chlorophyll không hòa tan trong nước mà chỉ tan trong các dung môi hữu cơ như ete, cồn, benzen và axeton Do đó, để tách chlorophyll khỏi lá, cần sử dụng một trong các dung môi hữu cơ này.
Nhóm carotenoit gồm 2 nhóm nhỏ là Carotene và xanthophyl
Carotene (C40H56) là một hiđrocacbon chưa bão hoà, không tan trong nước nhưng hòa tan trong các dung môi hữu cơ, với màu vàng da cam đặc trưng Trong thực vật, có ba loại carotene chính: alpha, beta và gamma carotene.
Xanthophyl (C40H56On, n = 1-6) là dẫn xuất oxi hoá của carotene, với các nguyên tử oxi liên kết trong các nhóm như hidroxy, cacboxy, axetoxy, metoxy và epoxy Sự đa dạng của số nguyên tử oxi từ 1 đến 6 tạo ra nhiều loại xanthophyl khác nhau, bao gồm Cripthoxanthin, Lutein, Violaxanthin và Neoxanthin.
Màu sắc và mức độ phân cực của phân tử các chất đó tăng dần theo thứ tự từ trên xuống như sau:
Bảng 2.1 Bảng màu sắc và thứ tự phân cực của các chất
Pheophytin màu xanh lá cây ô liu Chlorophyll a màu xanh lam lục Chlorophyll b màu vàng xanh
Tổng quan về dung môi
Bản chất của dung môi hữu cơ có vai trò quan trọng trong quá trình chiết tách, vì tính chất của chất cần phân lập quyết định loại dung môi phù hợp Các chất cần chiết thường có tính phân cực khác nhau, do đó, việc lựa chọn dung môi hữu cơ với độ phân cực tương ứng là cần thiết Nguyên tắc chung là các chất tương đồng sẽ hòa tan vào nhau: dung môi không phân cực hòa tan hợp chất không phân cực, dung môi phân cực trung bình hòa tan hợp chất phân cực trung bình, và dung môi phân cực mạnh hòa tan hợp chất có tính phân cực.
Dung môi được phân loại thành hai loại chính: phân cực và không phân cực, với hằng số điện môi phản ánh mức độ phân cực Nước, với hằng số điện môi 78,5 ở 25 °C, được coi là chuẩn cho tính phân cực mạnh Những dung môi có hằng số điện môi nhỏ hơn 15 thường được xem là không phân cực Độ phân cực, moment lưỡng cực, hệ số phân cực và khả năng tạo liên kết hydro của dung môi ảnh hưởng đến khả năng hòa tan và trộn lẫn với các hợp chất và dung môi khác.
Vật liệu và phương pháp
Vật liệu
Bột lá Ngũ sắc (Lantana camara L.) được phòng thí nghiệm cung cấp
Thiết bị và dụng cụ
- Bể siêu âm nha nhiệt (Selecta 3000867 Ultrasons-HD, Spain)
- Cân phân tích 4 số (OHAUS, USA)
- Ống nghiệm thủy tinh có nắp
Hình 2.2 Tính chất của một số dung môi
Phương pháp nghiên cứu
Để chuẩn bị dịch chiết sắc tố, cân 1 gram bột lá Ngũ sắc và pha loãng với 10 ml dung môi hexane: aceton (tỉ lệ 8:2), sau đó chiết bằng siêu âm trong 5 phút và lọc lấy dịch chiết Để chuẩn bị cột, sử dụng pipet Pasteur, đặt 1 lớp bông thủy tinh dưới đáy, cân 0,5 gram silica gel 60 (kích thước hạt 230 − 400 mesh) vào cốc thủy tinh khô, thêm 5 ml hexane và ngâm trong 5 – 10 phút để nhồi cột ướt Nạp hỗn hợp vào pipet Pasteur, gõ nhẹ để không khí không bị giữ lại khi silica gel lắng xuống Khi pha động cách bề mặt pha tĩnh 1 mm, thêm khoảng 1 mL hỗn hợp sắc tố vào cột dọc theo thành, tránh làm xao động bề mặt pha tĩnh, rồi tiếp tục cho n-hexane qua cột và đảm bảo cột không bị khô, để tốc độ nhỏ giọt ổn định.
1 giọt mỗi giây Lưu ý: Không để cột (sắc ký) bị khô Tuyệt đối không để mức dung môi rơi xuống thấp hơn mức của pha tĩnh (alumina)!
Tiến hành rửa giải: Sử dụng pha động 5 mL hexane, dải đầu tiên đi qua cột là carotene, có màu vàng đến cam
Hình 2.3 Mẫu trước và sau khi thêm vào cột sắc kí a) Dịch chiết sắc tố, b) Tách sắc tố bằng sắc ký cột a) b)
Sau khi thu được dải carotene, dung môi rửa giải được chuyển sang dung môi phân cực hơn với tỷ lệ 10 mL hexan/aceton (7:3) để tách các sắc tố phân cực còn lại Dải đầu tiên chứa diệp lục a có màu xanh lam lục, trong khi dải thứ hai chứa diệp lục b với màu vàng xanh lục sáng.
Kết quả
Từ 1 gram bột lá Ngũ sắc tiến hành sắc ký cột tách ra 2 sắc tố thực vật là carotene và chất diệp lục tố (chlorophyll a,b)
Hình 2.4 Sản phẩm tách chiết
Vàng: carotene; Xanh: chất diệp lục tố
Hình 2.5 Kết quả phân tách sắc tố lá Ngũ Sắc bằng kỹ thuật sắc ký cột
Thảo luận
Trong thí nghiệm sắc ký cột tách sắc tố từ bột lá Ngũ sắc, carotene và diệp lục (chlorophyll a, b) được tách ra dựa trên độ phân cực khác nhau Hexane (5 mL) được sử dụng làm pha động để rửa giải carotene, hợp chất có màu vàng đến cam, cho thấy tính chất kém phân cực của nó Điều này cho thấy rằng các hợp chất không phân cực, như carotene, dễ dàng bị rửa giải bởi dung môi không phân cực như hexane.
Sau khi thu thập carotene, dung môi rửa giải được chuyển sang hỗn hợp phân cực hơn gồm hexan và aceton (tỉ lệ 7:3) với tổng thể tích 10 mL Trong quá trình này, các sắc tố phân cực hơn như diệp lục a và diệp lục b được rửa giải lần lượt Diệp lục a, có màu xanh lam lục, bị rửa giải trước do ít phân cực hơn so với diệp lục b, có màu vàng xanh lục sáng và bị rửa giải sau cùng Sự thay đổi dung môi giúp phá vỡ các tương tác mạnh giữa các hợp chất phân cực và pha tĩnh (alumina), cho phép các sắc tố này được tách ra khỏi cột.
Kết luận, carotene có độ phân cực thấp nhất, tiếp theo là diệp lục a và diệp lục b có độ phân cực cao nhất Điều này cho thấy rằng các hợp chất với độ phân cực khác nhau sẽ có tốc độ rửa giải khác nhau khi thay đổi độ phân cực của pha động, trong đó các hợp chất ít phân cực hơn sẽ được rửa giải trước bằng các dung môi không phân cực.
THÍ NGHIỆM 3 PHÂN TÁCH SẮC TỐ THỰC
VẬT BẰNG KĨ THUẬT TLC
Thiết bị, dụng cụ và hóa chất
Quy trình thực hiện
Chuẩn bị dịch chiết sắc tố
- Bước 1 Cân 1 g bột cỏ ngũ sắc vào cốc thủy tinh
- Bước 2 Cho 10ml hexan: acetone (8:2), sau đó ly tâm trong 5 phút
- Bước 3 Lọc lấy dịch chiết
Hình 3.1 Dịch chiết từ lá Ngũ Sắc.
Dung dịch ly giải (pha động)
Phân tách sắc tố thực vật bằng kĩ thuật TLC
- Bước 1 Dùng bút chỉ kẻ vị trí xuất phát và chấm điểm dịch chiết lên bảng nhôm phủ silicagel 60 F254
- Bước 2 Dùng đầu tip pipet chứa dịch chiết chấm lên điểm đã đánh dấu trên bảng mỏng
- Bước 3 Đem hai bảng mỏng vào 2 dung dịch ly giải
- Bước 4 Sau khi ly giải xong, lấy hai bảng mỏng và thu kết quả
