Phân lập một số hợp chất từ phân Đoạn ea3 của Địa tiễn marchantia polymorpha l

Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến các thầy, cô trong khoa Hóa Học trường "Đại học Sư phạm Thành phổ Hỗ Chí Minh đã truyền đạt những mảng kiến thức lý thuyết, kỹ năng thực nghiệm tron

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRUONG DAI HQC SU PHAM THANH PHO HO CHi MINH KHOA HOA HOC

SP TP, HO CHI MINH

NGUYEN HOANG PHUONG NAM

PHAN LAP MOT SO HOP CHAT TU PHAN

DOAN EA3 CUA DIA TIEN

MARCHANTIA POLYMORPHA L

KHOA LUAN TOT NGHIEP

‘Thanh phố Hồ Chí Minh - 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRUONG DAI HQC SU PHAM THANH PHO HO CHi MINH KHOA HOA HOC

SP TP, HO CHI MINH

NGUYEN HOANG PHUONG NAM

PHAN LAP MOT SO HOP CHAT TU PHAN DOAN EA3 CUA DIA TIEN

MARCHANTIA POLYMORPHA L

KHOA LUAN TOT NGHIEP

Giảng viên hướng dẫn: PGS TS DƯƠNG THÚC HUY Chuyên ngành: HOÁ HỌC HỮU CƠ

‘Thanh phé Hd Chi Minh - 2024

Đầu tên, cm xin gửi lời cảm ơn chân thình đến PGS TS, Dương Thúc Huy, giảng iên đã hướng dẫn đề ti khoá luận tốt nghiệp của em Thầy luôn tận nh giáp đỡ, chỉ

tân tụy và vốn hiễu biết sâu rộng của Thầy là một trong những động lực to lớn giúp em

có thể hoàn thành được để tài khóa luận tốt nghiệp như ngày hôm nay

Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến các thầy, cô trong khoa Hóa Học trường

"Đại học Sư phạm Thành phổ Hỗ Chí Minh đã truyền đạt những mảng kiến thức lý thuyết,

kỹ năng thực nghiệm trong suốt những năm qua và tạo cho em những điều kiện thuận

lợi để giúp em hoàn thành ốt bài khóa luận tốt nghiệp ny

Em cũng xin gửi lời trí ăn đến các anh, chị và các bạn trong phòng thí nghiệm Hóa

Hữu cơ đã giúp đỡ, hướng dẫn, chỉa sẻ những kinh nghiệm học tập, nghiên cứu và tạo động lực để em hoàn thành bài khóa luận tốt nghiệp một ch thành công nhất

Cuối cùng, em xin cảm on gia đình, bạn bè đã quan tâm giúp đỡ và động viên em trong thời gian học tập và nghiên cứu

“Thành phổ Hỗ Chí Minh, tháng 03 năm 2024 Nguyễn Hoàng Phương Nam

LOICAM ON,

MUC LUC

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU

DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU VÀ SƠ ĐỎ

1.1.1 Đặc điểm của chỉ Marchantia

1.1.2 Đặc điểm của địa tiễn Marchamtia polymorpha L

1.2 Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học,

12.7

lành phần hóa học

1.2.2 Hoạt tính sinh học của địa tiễn Manelanuia polymorpha L

.a Các nghiên cứu của địa tiễn Marchamtia polsmorpha L trên thể giới

b Các nghiên cứu của địa tiễn Marchanria polunorpha L tại Việt Nam CHƯƠNG2: THỰC NGHIỆM

2.1, Hod chất, thiết bị

2.1.1 Hoá chất và nguyên liệu

2.12 Thiếtbị

3.2 Phương pháp tiến hành

2.3 Quy tinh thye nghiệm

CHUONG 3 KẾT QUÁ VÀ THẢO LUẬN

3.1 Khảo

cấu trúc hoá học của hợp chất (1)

3.11 Đặc điểm hợp chất (1)

3.12 Biện luận cầu trúc hoá học của hợp chất )

3.2 Khảo sắt cầu trúc hoá học của hợp chất (2)

3:21 Đặc điểm hợp chất 2)

3.2.2 Biện luận cấu trúc hoá học của hợp chat (2)

33 Khio átsắu rác hoá học của bợp chất Œ)

3.3.1 Đặc điểm hợp chất (3) 3.3.2 Biện luận cấu trúc hoá học của hợp chất (3) 'CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ 4.1 Kết luận

42 Kiến nghị

“TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC.

Utraviotet Tia exe tim

Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng Proton Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân

proton

Carbon Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân

carbon 13 Coupling constant Hằng số ghép spin singlet Mũi đơn doublet

Chemical shift Độ địch chuyển hoá học

Part per milion Phan trigu

Minimum inhibitory concentration Nông độ ức chế tối thiểu Percentage Inhibition Phần trăm ức chế

Minimum bactericidal concentration Nông độ điệt khuẩn tôi thiêu

Half-maximal efficiency concentration Nang độ hiệu quả tối đa một nửa

Half-maximal inhibitory concentration Nẵng độ ức chế tối đa một nửa

+ Danh mục bằng

Bảng 1.1 Danh pháp và phân loại khoa học của địa tiễn Marchamia polymorpha L 2

Bảng 31 So sánh dữ liệu phố 'H và '"C-NMR của hợp chất (1) vàvitevlactone 19 Bing 3.2 So sánh dữ liệu phổ 'H và "C-NMR của hợp chất (2) và 12-oleunene-3,11-

Phy Iye 1 Phố 'H-NMR của hợp chất (1) (acetone-ds)

Phụ lục 2 Phổ "C-NMR của hợp chất) (acetone) Phụ lục 3 Phố HMBC của hợp chit (1) (acetone)

Phụ lục 4 Phố 'H-NMR của hợp chất (2) (acetone-d,)

Phụ lụ 5 C-NMR cia hop chit (2) (acetone-d)

'Phụ lục 6 Phố HMBC của hợp chất (2) (acetone-de)

Phụ lục 7 Phố HMBC của hợp chất (2) (acetone)

Phy lye 8 Phd ‘H-NMR cua hgp chit (3) (CDCI),

Phy Iue 9 Phổ '°C-NMR của hgp chat (3) (acctone-d)

"ngành hóa học các hợp chất thiên nhiên phát triển [1]

Marchantia polymorpla L là là địa tiễn điễn hình thuộc ngành Marchantiophyta,

phân bổ rộng khắp thể giới và chủ yếu ở các vùng đá âm, bở suối Gần đây, những công

trình nghiên cứu về loi thực vật này đã cho thấy dược tính của chúng rất đa dạng và

phong phú Tir lau, chúng đã được sử dụng trong dân gian ở các nước Án Độ, Trung

“Quốc, dùng điều trị các trường hợp viêm, vất thương hở, vết cắn của côn trùng, rắn độc, Vang Himalaya sir dung hỗn hợp làm từ loài địa tiễn M polymorpha và Marchantia

‘palmata, trộn với mật ong và một lượng nhỏ chất béo để chữa vết thương hở, vết bông các vết thương ngoài đa khác [6} Các hợp chất machantin cô lập được từ loài này còn bảo ung thư Bên cạnh đó, các vi khuẩn nội sinh M polymorpha cho thay khả năng [I8] Các nghiên cứu chỉ ra rằng loài M polymorpha L thu hai ở những quốc gia khác nhau thường có những thành phần hoá học khác nhau [23]

Ở Việt Nam, do điều kiện khí hậu tự nhiên thuận lợi giúp loài địa tiễn được phân

bố rộng rãi và đa đạng trên khắp đất nước Tuy nbién, dja tién Marchantia polymorpha

1 chưa cỏ nhiều nghiên cứu về thành phần hóa học của loài này Chính vì vậy, khoá

luận tốt nghiệp "Phân lập một số hợp chất từ phân đoạn EA3 của địa tiễn Âfarchantie

polymorpha L.” được thực hiện với mong muốn làm rõ được thành phần hỏa học của

học cũng như đóng góp vào kho ting hợp chất tự nhiên Việt Nam,

2

CHONG 1 TONG QUAN

1.1 M6 tả thực vật

1.1.1 Đặc điểm của chỉ Marchantia

Có § ch và 75 loài trong họ Rêu tản Marchantiaceae Ở Việt Nam có 2 chỉ và 4 loài Chỉ Marchamria được nhà thực vật học người Pháp Jean Marchan đặt tên vào năm 1713

BI

“rên thể giới Marchantia L, (Marchantiaceae) 1s mt chỉ nỗi bật thuộc họ Rêu tản

và bao gém 75 loài Tên của chúng bắt nguồn từ hình dạng giống như thủy của cơ thể thực vật mâu xanh lá cây (tản) [3]

(Chi Marcharia chiém mt iti quan trong trong phít sinh thực vật trên đất iễn và ddo đồ rất hữu ích để khẩm phá sự đa dạng và tính phổ quát của cúc hiện tượng inh học

"khác nhau từ quan điểm tiến hóa [4]

1-12 Đặc điểm của dja tif Marchantia polymorpha L

Bảng I.1 Danh pháp và phân loại khoa học của địa tiễn Marchamia polymorpha L

Địa tiễn M polymorpha được phân bổ rộng rãi ở phía tây dầy Hìmalaya và các ngọn đổi khác ở Ấn Độ Địa tiễn là loài phổ biễn nhất được tìm thấy ở các khu vực như đá âm

và bờ suối ở khắp thể giới [5]

Địa tiễn Marchania polynorpha L có dạng tân lớn màu xanh, đôi khi có mẫu đỏ túa hoặc nâu ở những cây giả hơn, trên các cảnh phân nhánh đài khoảng 10 em vả rộng trú sinh sản được gọi là thể giao tử Cây giao tử cái chứa một thân cây với các ta chứa : giao từ tạo ra trứng Cây giao từ đục túi giao từ hình dạng như đĩa phẳng phát triển tỉnh trùng [6]

Trong thời trừng cỗ ở châu Âu, M polymorpha được cho là có ích trong việc điều

trị các bệnh về gan Vao thé ky 19, M polymorpha la mét trong những loài được nghiên

cứu nhiều nhất trong ngành khoa học thực vật 3],

Từ lâu, chúng đã được sử dụng trong dân gian ở các nước Án Độ, Trune Quốc, dùng điều tr các trường hợp viêm, vết thương hở, vết cắn của côn trăng, rắn độc, lợi tiễu và một số chứng bệnh về gan 2]

1.2 Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học

1.2.1 Thành phần hóa học

Dựa trên các nghiên cứu trước đây thành phần hoá học của địa tifa M polymorpha đến nay cho thấy sự hiện diện của hợp chất nhur bis-bibenzyl, sesquterpenoid,

flavonoid, phenolic, coumarin, va glycoside

[Nam 1974, Markham va Porter (7]khi khio st thinh phan héa hoe eta dia tiễn A/ polimorphe đã cô lập được 10 hợp chất: apigenin (1), apigenin 7-glucuronide (2), 3-0:/-D-glueuronide (6), lueolin 7.3-diglucuronide (7), luteolin 7,4" (8), lueolin 3⁄4-0://0-diglucuronide (9), và lueolin 7314 (0)

liglucuronide

tri-0:/-D-glueuronide

Nam 1985, Mavjo và công sự I8] đã phân lập được 10 sesquiterpenoid từ địa tễn

AM polymorpha th hái tại đảo Miyajima-Ho, Nhật Bản: ()-eymnomitrene (1H), ()- euparene (12), (+)-/-chamigrene (18), (+)-thujopsene (14) () cuprenene (15), (+)- ~

ccuprenene (16), (-)-widdrol (17), (~)-6-cuparenol (18), (-)-f-herbertenol (19), va (-)- thujopsenone (20)

Năm 1987, Asakawa và cộng sự [9] đã phân lập được 9 hợp chất bic bibenzyl tử cao methanol của địa tiễn Af polymozpha thu hái ở vùng Shillong, Meghalaya, Ấn Độ marchanin D (25), marchantin (26), marchantin G (27), rieeardin © (28), và perrotttin E (29),

Nam 1990, Asakawa và cộng sự [10] tir cao methanol eta dia tiga M polymorpha thụ bái tai Đúc đã phân lập 5 hợp ch sesquiterpenoid: ent- 9-oxo-a-chamigrene (30), cent-thujopsan-7f-ol (31), ent-a-cyperone (32), ent-thujopsenone (33), (-)-cyclopropane

JL (36-38), va marchantin G (27),

‘Nam 1994, Adam vi Becker [11] khi nghién ettu thinh phin h6a hoe eta dia tién

AM polumorpha đã phân lập được 5 hop chit biphenanthrene: 2,3-dimethoxy-7-

hydroxyphenanthrene (39), 2,7-dimethoxy-3-hydroxyphenanthrene (40), 3,3 dimethoxy-2,2',7,7'-tetrahydroxy-1,1/-biphenanthrene (41), 3-methoxy-

pentahydroxy.LI“biphenanthrene (42), 2.2',3,317.7'-hexahydroxy-L!-biphenanthrene hydroxyisocoumarin (44)

Năm 2001, Fang và công sự [12] đã phân lập được 3 hợp chất bis:bibenzyl mãi: polymorphatin A (48) isoricardin D (46), và 2-[3-(hydroxymethyl)phenoxy}-3-[(4- tinh Tứ Xuyên, Trung Quốc

Nim 2007, Qu và cộng sự [13] đã phân lập được 7 hợp chất glycoside từ cao nước

dia tifn M polymorpha thu hi tai ving nti Lạc Sơn, inh Tir Xuyén, Trung Quéc Trong

đố có 4 hợp chit glycoside mới «,f-dihydrostilbene-2, Sto 2 glueopyranoside) (49) shikimic acid 4-f-D-xylopyranoside (8U), dihydroxyphenyl)ethyl-O-a-L-charmopyranosyl-(1—2)-p-D-allopyranoside 2(3.4-dihydroxyphenylethyI-O-f-b-xylopyranosyl(1+6)-f-D-allopyranosi

03

3 hop chit glycoside da bi -dihydroxyphenyl)ethyl-/: -allopyranoside (S8)

(S4-dhydroxyphenyDetbyÌ/D-glueopyranoside (8), và tetrahydroxyisoflavone 7-(f-D-glucopyranoside) (88)

Xăm 2012, lensen và cộng sự [I4]đã cô lập được 3 hop chit tr sinh khối nuôi cấy

cciia M polymorpha: marchantin A (23), marchantin C (24), va combrerastatin A (48)

Xăm 2020, Nguyen và cộng sự I5] đã nghiên cứu thành phần hóa học từ cao chiết ethyl acetate cia M polymorpha thu hai tai tinh Lim Đồng thu được ba hợp chất

dihydrostilbenoid là lunularin (56), marchantin A (23), isoriecardin C (22) va hai hợp chit flavonoid Ia luteolin (4), va apigenin (1)

[Nam 2022, Nguyen và cộng sự [I6] đã nghién cia thin phin héa hoc ea dia tén

M polymorpha tr cao chit n-hexane, két qui nghiên cứu đã phân lập được 6 hợp chất indole-3-carboxylie acid (60), va sitosterol 3-O- -D-glucopyranoside (61), [Nam 2023, Chau và cộng sự [17] đã cô lập được 5 hợp chất từ M polymorpha L thủ hái hạ tại tỉnh Lam Dang, Vigt Nam: (Z)-dimethomorph (62) (E)-dimethomorph (63), methyl 34-dihydroxylbenzoic acid (64), marchantin A (23), va quercetin ($7)

Nam 2023, Mateusz Stelmasiewicz và cộng sự [8] đã xác định được 6 thành phần

chính cổ trong cao chiết chyl seetale của vĩ khuẩn nội sinh M polymorpha bao gm:

Leu-L-Pro) (67), cylo(D-

eyeloL-Phe-t-Pro) (68), eyelo(D-Phe-D-Pro) (66), eyelot

Leu-D-Pro) (68), N-phenetylacetamide (69), va oleic acid amide (70)

6

CÁC HỢP CHẤT CÔ LẬP ĐƯỢC TỪ: ĐỊA TIỀN MARCHANTIA POLYMORPHA L

ì a Son -£Cuprenene (16) (+1 Cuprenene (16) (.wtdarl a7) (1-6 Cuparenol (18)

°

J = jon

- th

(:bHerboronel (18) (9-Thujopserone (2) Hình 1.2 Một

hoá học của các hợp chất cô lập được từ địa tiến Marchantia polymorpha L

OH Al Machin PM MadaninC A 20 24)

H tem ben RcH Marchantin % G (27) Ho PorrottinE (29), *S “on

CH Matehantin ReCHs Riccardin G (28)

4hrups X6, DBL topes 1x Enea-yperone (32) Entthujopsenone (88) - (L©/comonnne ‘uparenol (38) sn)

Ral i Rha RN Mc 5) Macarn Mardanin L8) Hình 1.2 Một số cấu trúc hoá học của các hợp, cát cô lập được từ địa tiễn ‘Marchantia polymorpha

oH Be0Cts 29-dmeno07 -2lyfonphetatfehe 8) 3/04-dhydogphon/)91yđoxieeoumsin (6) TY đmetosy 3 hycrosfpnenantrens (30)

Ho: afcinycrostivene-2.45-101:2-aif.0-qucopyranesde) 49) Shikiic acs 4D xylopyranoside (60)

UẦAmnBĐ — R-ĐHOasngmiSD —— Ngashuobd.— leer RcH: Kaemptedl(68) ac

"Hình 1.2 Một số cấu trúc hoá học của các hợp chất cô lập được từ địa tiễn Marchantia polymorpha L.

(ELJndiotonh (6) — ay ydoqeemdossid crt oho rey crty he he

nN Ỹ a ĩ t W Cjbt-PeL Po} 65) Giosofhebfil 69 ˆ GielcLsrcPol6)- orslbtsrori]@89)

1.3.2 Hoạt tính sinh học của ja tién Marchantia polymorpha L

4 Cie nghiem ci ita da tin Marchant polymorpha L,trén thể giới [Nim 2008, Mewar va céng si [19] 43 nghién cứu về hoại tính kháng khuẩn ở loài dia tin M polymorpha cho thấy ring cao chit methanol vi flavonoid thô có thể kháng

lại cả ba ching vi khudn: Escherichia coli, Proteus mirabilis (Gram âm) và

Staphylococcus aureus (Gram im) via 4 chimg nim: Aspergillus flavus, A niger fiavonoid thô cho thấy khả năng kháng hiệu quả Š ucus (ần lượt tương ứng với các

it 1Z 20.60 va 19.60 mm, MIC 0.28 va 0.31 mg/mL, MBC 1.13 vi 031 mg/ml) [Nam 2011, Gahtori va céng si {5} di chỉ ra rằng cao chiết methanol va chloroform

của loài địa tiễn M polymorpha có khả năng kháng 2 chủng vi khuén: Xanthomonas

pzae và Pavturclla multocida [PT 11.S&fZ va 12.55%, MIC 2.50 va 1.25 mg/mL; MBC 2.75 vi 1.25 mg/mL} Bén canh 46, cao chiét methanol vi chloroform cũng cho thấy

khả năng kháng 2 chủng nắm: Sclerotiưm rolfsii và Fusarium oxysporum (PI 32.65% và

33.442: MIC 2.50 và 065 mg/mL; MEC 4.50 và 0.65 mg/mL]

Năm 2012, Gökbulut và cộng sự [20] đã nghiên cứu hoạt tính chống oxy hóa của

cao chiết methanol và cao ethyi aeetate của M paltmorplua bằng phương pháp DPPH

chiết đều thể hiện khả năng kháng oxy hóa với giá trị ICso gần so với kết quả thu được

với Trolox (chất đối chứng) Khả năng kháng gốc tự do DPPH giá tị ICs của cao chiết

methanol la 0.45 + 0.03 mg/mL va cao chiết ethyl acetate là 0.28 + 0.01 mg/mL, trong

Ikhi Trolox thé hign ICs 18 0.042 + 0.002 mg/ml Con ket qui host ding ching oxy hóa ABTS, gif tri (Cw eta eao chiét methanol là 0.24 + 0.009 mg/ml va cao chiét ethyl mg/m

‘Nam 2023, Asif và cộng sự [6] đã nghiên cứu về khả năng tăng cường chức năng

san tit cao chiết chloroform của loài địa tiễn M polymorpha bằng nghiên cứu in vivo ở

loài chuột trắng bị tổn thương gan do paracefamol gây ra Kết quả nghiền cứu cho thấy được chứng mình bằng sự cải thiện các dấu hiệu căng thẳng ở gan như AST, ALT, ALP