Phân lập một số dẫn xuất isocoumarin từ phân Đoạn ea3 của nấm nuôi cấy Địa y nigrovothelium inspersotropicum

Thực vật tiếp tục đóng vai trò quan trong trong việc phát hiện ra nhiều loại thuốc mới, các nghiên cứu về thành phần hoá học các loài địa y và nắm nuôi cấy địa y mang lại tiềm năng về h

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

‘TRUONG DAI HQC SU’ PHAM THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH KHOA HOÁ HỌC

anne

KHOA LUAN TOT NGHIEP

PHAN LAP MOT SO DAN XUAT ISOCOUMARIN

TU PHAN DOAN EA3 CUA NAM NUOI CAY

DIA Y NIGROVOTHELIUM INSPERTROPICUM

“Chuyên ngành: Hoá hữu cơ

Giảng viên hướng dẫn: TS Phạm Đức Dũng Sinh viên thực hiện: Nguyễn Phi Hùng

Mã sổ sinh viên: 46.01.201.040

“Thành phố Hỗ Chí Minh, tháng 05 năm 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

‘TRUONG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH KHOA HOÁ HỌC

——EEee-

lữ=

KHOÁ LUẬN TÓT NGHIỆP

PHAN LAP MOT SO DAN XUAT ISOCOUMARIN

TU PHAN DOAN EA3 CUA NAM NUOI CAY

DIA Y NIGROVOTHELIUM INSPERTROPICUM

“Chuyên ngành: Hoá hữu cơ

Giảng viên hướng dẫn: TS Phạm Đức Dũng Sinh viên thực hiện: Nguyễn Phi Hùng

“Mã số sinh viên: 46.01.201.040

Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 5 năm 2024

“Trong quá trình rèn luyện và học tập tại trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ

lí Minh, nhờ sự chỉ dạy và giúp đỡ tận tỉnh của quý Thấy, Cô khoa Hoá học mà em

đã ích luỹ được ắt nhiều kiến thức, ử năng cằn thiết, giáp ch cho công việc và cuộc

sống sau nay, Dé tri an những điều đó, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến:

“Thấy Phạm Đức Dũng đã tận tâm hướng dẫn, hỗ trợ, đưa ra những định hướng thực hiện đề i,chịa sẻ kiến thức và kinh nghiệm nghiền cứu khoa học đễ em có thể

hoàn thành đề tài khoá luận tốt nghiệp của mình

‘Tha: Cô Bộ môn Hoá hữu cơ đã giảng dạy những kiến thức chuyên môn, nhiệt

tình hỗ trợ, giám sát, truyền đạt kinh nghiệm trong quá trình thực hiện đề tải

“Thầy, Cô khoa Hoá học trường Đại học Sư phạm Thành phổ Hồ Chí Minh đã

trang bị cho em những kiến thức cẩn thiết và tạo điều kiện cho em có thể thực hiện để

tải của mình

“Tuy đã đành nhiều thời gian để hoàn thành bãi luận văn, nhưng do trình độ lí luận

cũng như kinh nại sm thực hiện vẫn còn han cl em khó có thể tránh khôi sa s

Em mong sẽ nhận được sự quan tâm cũng như ý' én dong gop của quý thầy, cô để em

có thể hoàn hign bai luận văn của mình, qua đó, học hỏi thêm được nhiều kinh nghiệm,

kiến thức cần hết cho công việc sau này

“Cuối cùng, em xin gửi đến quý Thầy, Cô lời chúc sức khoẻ, bạnh phúc và thành công

Em xin chân thành cảm ơn Sinh viên thực hiện

121 Mota nghiện cứ vệ hành phì ho học củ đ về thành phần hoá học của nắm nuôi củy địa ý 3 4

Ls Moise hehe cứu về thành phần hoá học của họ Trypetheliaccae 10

14 Tổng quan về nắm nui edy dia y Nigrovorhelium inspersotropicwn 10

2.4, Quy trình thực nghiệm phân lập hop chất NHI, NI2§, CHƯƠNG 3: KÉT QUÁ VÀ THẢO LUẬN

| Bookmark not defined Error! Bookmark not defined

u trúc hóa học của hợp chất NI11 Error! Bookmark not

trúc ho họ củ hợp chit NI2S Error! Bookmark not defined

la hợp chit NI Error! Bookmark not defined 3.2.2, Biện luận cấu trúc hoá es của hợp chit NI2S Error! Bookmark not defined

3.3 Khảo sát cấu trúc hoá học cia hgp chit NIIS Error! Bookmark not defined 3.3.1, Dac điểm cia hgp chét NUS Error! Bookmark not defined 3.3.2 Bign luận cầu trúc hoá học của hợp chất NHE Error! Bookmark not

: KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ

16 ror! Bookmark not defined

Carbon Nuclear Magnetic Resonance

Proton Nuclear Magnetic Resonance

High Resolution Beewospay Tonization-

Part per million

Half-maximal inhibitory concentration

Tiếng Việt

Tia cue tím Sắc kí cột Phổ cộng hưởng từ hạc carbon l3 Phổ cộng hưởng từ hạc nhân proton Phổ khối

Hằng số ghép pin Mũi đơn Mũi đơn rộng Mãi đôi Mũi đôi rộng Mũi đôi đôi Mũi đôi bốn Mũi bạ

Độ dịch chuyển hoi học Phần triệt

Nông độ ức ch ối đa một nửa

Bing 3.1 So sinh dit ligu phd "H-NMR và !°C-NMR cia NIL1 véi cdc hop chất Bảng 3.2 So sánh dữ liệu phổ 'H-NMR và !°C-NMR cita NI2S voi NH1 Bang 3.3 So sánh dữ liệu phổ "H-NMR và '°C-NMR của NI25 với các hợp chất Bang 3.4, So sánh dữ liệu phổ 'H-NMR và !°C-NMR của NH§ với NI2§ và NH1 Bang 3.5 So sánh dữ liệu phổ H-NMR va C-NMR của NH5 với các hợp c

Hinh 1.2 Một số hợp chất phân lập từ các loi địa y 6

“Hình 1.3 Một số hợp chất phân lập từ các loài địa y thuộc ho Trypetheliaceae 10

DANH MỤC PHỤ LỤC

"Phụ lục 1 Phố HR-ESI-MS của hợp chất NIL

"Phụ lục 2 Phô ‘H-NMR (Acetone-ds, 500 MHz) của hợp chất NH1 'Phụ lục 3 Phổ '°C-NMR (Acetone-do, 125 MHz) cia hợp chất NHI

"Phụ lục 4 Phd HSQC (Acetone-ds) của hợp chất NIL Phụ lục 5 Phé HMBC (Acctone-de) của hợp chất NHI Phụ lục 6 Phố HR-ESI-MS của hợp chit NI2S Phụ lục 7 Phé ‘H-NMR (Acetone-ds, 500 MHz) cia hop chat NI2S Phụ lục 8, Phé C-NMR (Acetone-de, 125 MHz) cua hop chit NI2S Phu Iyc 9 Phd HMBC (Acetone-<s) cia hop chit NI2S Phy Iye 10 Phé "H-NMR (DMSO-ds, 500 MH) ctia hgp ehit NIIS Phụ lục 11 Phổ !"C-NMR (DMSO-d, 125 MH7) cia hop chit NS Phụ lục 12 Phd HSQC (DMSO-ds) ciia hợp chất NHI Phy Iye 13 Phd HMBC (DMSO-de) cia hgp chit NIIS Phy lục 14 Phd COSY (DMSO-de) ciia hợp chất NIIS Phy lục 15 Phd 'H-NMR (Acetone-ds, 500 MHz) cia hgp chit NIIS Phy lye 16 Phd COSY (Acetone-d) ciia hgp chit NLS

"Ngày nay, với sự phát triển của nên y học trong nước và quốc tế, con người đã có

những tiến bộ vượt bậc trong điều trị các bệnh lí phức tạp liên quan đến vi khuẩn, vi-

“Các sản phẩm tự nhiên có nguồn gốc ừ thực vậ Tà nguồn cung cắp quan trọng một

sé chit chéng ung thư có ch rên lâm săng, làm biện pháp thay thể hiệu quả một số loại

thuốc trị liệu và kháng sinh hiện nay [2] Thực vật tiếp tục đóng vai trò quan trong trong

việc phát hiện ra nhiều loại thuốc mới, các nghiên cứu về thành phần hoá học các loài

địa y và nắm nuôi cấy địa y mang lại tiềm năng về hoạt tính sinh bọc rất lớn, Cụ th, kháng khuẩn, kháng vi-rít chống ung thư, gây độc tế bào ng thư, giảm dau, và hạ sốt 12,3] Trong đó, các dẫn x

sồ khả năng kháng nắm, gây độc tẾ bào, và khng khuẩn [4] 1 isocoumarin phân lập từ nắm địa y đã được nghiên cứu là

“Tại Việt Nam, nơi có thiên nhiên đa dạng, phong phú với hơn 12,000 loại thực vật,

kết hợp với nn y học cổ truyền phát iển, tạo điều kiện thie dy việc nghiên cứu hợp chất tự nhiên từ các loại thực vật, diay, va nim địa y [Ấ]- Tuy nhiên, trn th giới và

Việt Nam có rất sác công tình nghiên cứu liên quan đến nằm mudi cấy dia y Nigrovothelium inspersotropicum thuộc họ Trypetheliaceae Các nghiên cứu về thành phần hoá học của thực vật thuộc họ Trypetheliaceae cho thấy một số dẫn xuất xocoumarin đã được phân lập có giá trị hoạt tính sinh học cao và có nhỉ ứng dụng trong thực tiễn |6, 7

Viyệ

những hợp chất tự nhiên à dẫn xuất isocoumarin có hoạt tính sinh học cao từ loài nắm với mong muốn m hiểu sâu hơn về thành phần hoá học cũng như tìm kiểm

nuôi cấy địa y Nigrovothelium imspersotropicum, đề tài "Phân lập một số dẫn xuất

ocoumarin từ phân đoạn EA3 của nắm nuôi cấy di y Nigrovothelium inspersotropicum” di duge thye hign Qua 46, góp phần nang cao giá trị sử dụng dược liệu này trong y hoc, tạo điều kiện thực biện các nghiên cứu tiếp theo về khảo sất hoạt

tính và tổng hợp các hoạt chất mới có giá tr hoạt tính sinh học cao,

jay va nim nuôi cấy địa y

1.1 Tổng quan về

Địa y là một loài sinh vật cộng sinh với sự kết hợp giữa nắm (mycobionD) và một thành phần có thể quang hợp (phycobionD, từ đổ sản xuất ra các chất chuyển hoá thứ cấp có hoạt tính sinh học cao Chúng được phân bổ trên toàn th giới từ Bắc cực đến các Hình

sm trở khác nhau Cho đến nay, đã có hơn 18,500 loài địa y được phát hiện

thấy và là loài sinh vật cộng sinh độc đáo [S] Dựa vào hình thái và môi trường sống, địa y được chỉa làm năm nhóm

"báo cáo trên thể giới, chiếm khoảng 21% số nắm được

chính gồm erustose (A), foliose (B), fru icose (C), leprose (D), va filamentose (B) (3)

Với các địc điểm nhận dạng như: địay crustose tạo thành lớp vỏ bám rên b mặt, không

s6 lớp ngân cách ở giữa; địa y foliose phẳng nhiễu á, tạo thành các mảng ngân cách rên

b mặt chúng sinh sống; địa y rueieose có dạng bụi râm, dựng đúng, kéo di, thường

trên bể mặt; địa y filamentose có dạng sợi, bám xung quanh bẻ mặt [3]

Nhiễu loài dia y trên th giới đã được nghiên cửu về hoá thực vật và chứng mình

các hoạt tính sinh học liên quan như kháng khuẩn, chống oxy hoá, gây độc tế bào ung

thư [2, 3] Theo ng!

phân lập từ địa y thuộc rắt nhiều khung khác nhau như depsidone, quinone, xanthone, cửu của Dayan va Romani vio nim 2001, các hợp chất được

trterpene, polysachaide, cho thấy sự đa dạng về hoá thực vật của địa [9], Cho đến

hơn B00 chất chuyển hoá thứ cấp đã được xác định [I0],

“Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng hầu hết các chất chuyển hoá thứ cắp được tạo ra

bởi nắm ở trạng thát công sinh Do đó, các nhà khoa học đã chuyển sang nghiên cứu

thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của ác loài địa y nuôi cấy [9, I0] Khác với

ịa y tự nhiên, nắm nuôi cấy địa y tạo ra các hợp chất có phần độc đáo và da dạng khung

carbon hơn, đặc thăng chất này có liên quan mật tiết với các chất chuyên hoá thứ

sắp của nắm Các nghiên cứu về hoạt tính inh học cũng cho thấy nắm nuôi cấy của địa

y có tiềm năng phát triển lớn hơn rất nhiều so với địa y tự nhiên và đây cũng là một nguồn nghiên cứu có giá trị về mặt khoa học ứng dung rit cao [3, 10] 1.2, Một số nghiên cứu về thành phần hoá học của địa y và nắm nuôi cấy địa y

12, lột số nghiên cứu về thành phần hoá học của địa y

Năm 2000, Ems-Russell và các cộng sự đã phân lập được hai hợp chất

naphthopyrone là cuplectin (1) và concuplectin (2) tir loai dia y foliose Flavoparmelia

‘euplecta Đây là hai hợp chất lần đầu tiên phát hiện trong địa y có chứa gốc indenone

va indanone trong cầu trúc [1]

Năm 2015, Dương Thúc Huy và các cộng sự đã phân lập được mười bảy hợp chất trong đó có năm hợp chất meta-depsidone và hai hợp chat diphenyl ether mới gồm

cm protoeetrarde acid (10), 8-O-methylprotocetraric acid (11), methyÌ baematomrnate (12).atranorin (13) methyl/-orselinate (14), methyl orselinate (15), virensie acid (16), Parmotrema tsavoense C&e hop chit nay đã được thử hoạt tỉnh gây độc tế bảo ung thư san (HepG2), phổi (NCI-H460), và tế bảo ung thư vũ (MCF-7) [12] Năm 2018, từ cao chiết của loài địa y E/snea baileyi (Si) Zahlbr, Nguyễn Văn Kiều cùng cộng sự đã phân lập được hai mươi bay hop chét gém bai chất mới là

bailexamthone (20), bailesidone (21), và hai mươi lâm hợp chất đã được báo cáo gdm

methylmenegazziaic acid (29), virensic acid (30),

protocetrarie acid (32), barbatie acid (33), diffractaie acid (34), 4-O-demethylbarbatic betulonic acid (39), usnic acid (40), dasypogalactone (41), 7-hydroxy-5-methoxy-6-

-methylprotocetraric acid (31),

‘methylphthalide (42), methyl 4-O-methyIhaematomate (43), methyl orcinolearboxylate (44), aưanol (48), và eumitrin Aa (46) [13]

Năm 2020, Bai Văn Mười cùng các cộng sự đã phân lập được năm depsidone

trong đồ có một hợp chất mới từ cao chiết của loài địa y Uaneu cenatina Anch gm

ceratinalone (47), bailesidone (21), sietie acid (22), 8'-Ø-methylstictic acid (48), và 8'-

<imethyldibenzofuran (85), 3-bydroxy-7-methoxy-1,9-dimethyldibenzofuran (56), 2- Lecanora cinereocarnea (16)

'Năm 2005, Yukiko Takenaka ciing các cộng sự đã phân lập được mười một hợp chit, trong đổ có bốn hợp chất mới gồm 4-chloro-37-dihydroxy-L9- (69), lecanorafuran A (60), lecanorafuran B (61) và bảy hợp chất đã biết là 7-dihydroxy- 2.4-dichloronorlichexanthone (65), 4,5-dichloronorlichexanlhone (66) arhothelin (67),

và thiophanie acid (68) từ nắm nuôi cẮy địa y Lecanora iseana (171

Năm 2005, năm hợp chất thuộc Khung fmol2.†iisoguinoline gồm

panaefluoroline D-H (69-73) đã được phân lập và xác định cầu trúc boi Kaoru Kinoshita

và các công sự từ nắm nuôi cấy đa y Amygdalaria panueolu [18]

Năm 2013, Hari Datta Bhattarai và các cộng sự đã phân lập được ba hợp chất

depsidone mới từ nắm nuôi cấy địa y tereocaulon alpinum Balhgp chit depsidone méi i4 04), lobastin (15), va methy lobain (76) đã được thứhoạttính kháng

khuẩn và hoạt tinh chéng oxy hoá Kết quá cho thấy lobarie acid (74) va lobastin (75)

Năm 2020, Dương Thúc Huy cing cá

gồm subnudatone A (77) subnudatone B (78), I-(2-hydroxy-l 1,24a,5.6.7.8,8a-octabydronaphthalen-L-yDethanone (79), libertalide C (80),

công sự đã phân lập được sấu hợp chất

trimethyl-

on ewe

1.3, Mật số nghiên cứu về thành phần hoá học của họ Trypetheliacene

Năm 2019, năm hợp chất naphthoquinone gồm: (—) rypethelone methyl ether

(87 ©)-2'8-8-methoxytrypethelone methyl ether (88, )+(2'5,3'S)

hydroxytrypethelone (89), (—)-(25,3#)-4-hydroxy-R-methoxy trypethelone methyl

methoxytrypethelone (97), trypethelone (98), 4'-hydroxy-

mehosytrypethelone mathylether (99), và Š°-hydnocy-Reetiosotrypethelone (100), Các họp chất đều th hiện

khả năng kháng khuẩn cao đối với vi khuẩn lao H37Rv và các vi khuẩn gây bệnh khác

Hình 1.3, Một số hợp chất phân lập từ các loài địa y thuộc họ Trypetheliaceae

1.4 Tổng quan về nắm nuôi cấy địa y Nigrovofhelium inspersotropicum Địa y Nigrovothelium inspersotropicum thuộc chỉ Nigrovothelium trong họ

‘Trypetheliaceae, e6 dang nhánh cây, nhẫn bao phủ các vùng có đường kính lên tới 8 em,

day khoảng 1 mm có màu xanh đến hơi nâu được bao quanh bởi một đường giao tử

“dương xỉ mầu sẵm đến hơi đen rộng 0.6-1 mm (hình 1.4) [24]