Microsoft Word KLTN Nguyễn Phương Thảo docx BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN PHƯƠNG THẢO NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ RỄ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM (P.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN PHƯƠNG THẢO NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ RỄ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM (Paris vietnamensis (Takht.) H.Li), HỌ TRỌNG LÂU (Trilliaceae) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN PHƯƠNG THẢO NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ RỄ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM (Paris vietnamensis (Takht.) H.Li), HỌ TRỌNG LÂU (Trilliaceae) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Cán hướng dẫn: PGS TS Đỗ Thị Hà PGS TS Hoàng Việt Dũng HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Khoa Hóa Phân tích & Tiêu chuẩn – Viện Dược liệu Bộ môn Dược liệu & Dược học cổ truyền – Học viện Quân y, em nhận hướng dẫn, giúp đỡ tận tình từ Thầy Cơ, gia đình bạn bè để em hồn thành khóa luận cách tốt Trước hết, em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến: PGS TS Đỗ Thị Hà, người tạo điều kiện, dẫn dắt em tham gia nghiên cứu từ ngày đầu thực khóa luận PGS TS Hoàng Việt Dũng, người thầy tận tụy hướng dẫn, bảo động viên em suốt thời gian thực khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới ThS Nguyễn Thị Thu nhà khoa học Khoa Hóa Phân tích & Tiêu chuẩn – Viện Dược liệu hỗ trợ tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình học tập hoàn thành đề tài Cuối cùng, em xin cảm ơn hỗ trợ kinh phí từ Đề tài nghiên cứu cấp sở – Viện Dược liệu – Bộ Y tế: “Nghiên cứu thành phần hóa học lồi Paris vietnamensis, họ Trilliaceae” để em thực khố luận Mặc dù có nhiều cố gắng, song khả kinh nghiệm thân có hạn, nên khóa luận khơng tránh khỏi tồn tại, hạn chế thiếu sót Vì em mong nhận góp ý chân thành Thầy giáo, Cơ giáo Hội đồng chấm khóa luận để khóa luận em hồn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 11 tháng 07 năm 2022 Học viên Nguyễn Phương Thảo MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 TÊN GỌI VÀ PHÂN LOẠI THỰC VẬT 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Phân loại thực vật 1.2 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 1.3 PHÂN BỐ VÀ SINH THÁI 1.4 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC 1.5 TÁC DỤNG SINH HỌC 13 1.5.1 Tác dụng tế bào tim 13 1.5.2 Gây độc tế bào ung thư 13 1.5.3 Tác dụng tế bào u nguyên bào thần kinh đệm 14 1.5.4 Tác dụng chống viêm 15 1.5.5 Tác dụng kháng khuẩn 15 1.5.6 Tác dụng cầm máu 16 CHƯƠNG II NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 17 2.1 NGUYÊN LIỆU 17 2.2 HĨA CHẤT, DUNG MƠI 17 2.3 THIẾT BỊ, DỤNG CỤ NGHIÊN CỨU 18 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.4.1 Phương pháp chiết xuất phân lập 20 2.4.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 22 2.5 ĐỊA ĐIỂM THỰC HIỆN 23 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 3.1 CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT TỪ RỄ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM 24 3.1.1 Chiết xuất phân đoạn từ thân rễ Bảy hoa Việt Nam 24 3.1.2 Phân lập hợp chất 25 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CỦA CÁC CHẤT PHÂN LẬP ĐƯỢC 33 3.2.1 Hợp chất PV-1 33 3.2.2 Hợp chất PV-2 37 KẾT LUẬN 43 KIẾN NGHỊ 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG BẢNG TÊN BẢNG TRANG 1.1 Các saponin phân lập Bảy hoa Việt Nam (P vietnamensis (Takht.) H.Li) 10 1.2 Hoạt động kháng khuẩn ba saponin chủng vi khuẩn khác 16 2.1 Các dung mơi, hố chất dùng nghiên cứu 17 2.2 Các thiết bị, dụng cụ dùng nghiên cứu 18 3.1 Các phân đoạn thu sau tiến hành sắc ký cột phần tủa 27 3.2 Dữ liệu phổ NMR hợp chất PV-1 stigmasterol-3O-β-D-galactopyranosid 34 3.3 Dữ liệu phổ NMR hợp chất PV-2 polyphyllin D 39 DANH MỤC HÌNH HÌNH TÊN HÌNH TRANG 1.1 Bản vẽ thực vật Bảy hoa Việt Nam (Paris vietnamensis (Takht.) H Li.) 1.2 Cây Bảy hoa Việt Nam (P vietnamensis (Takht.) H.Li) 1.3 Cấu trúc hoá học saponin Tsuneo Namba cộng phân lập 1.4 Cấu trúc hoá học saponin Yun Huang cộng phân lập 1.5 Một số saponin Li-ping Kanga cộng phân lập 1.6 Cấu trúc hoá học saponin Yang Liu cộng phân lập 1.7 Cấu trúc hoá học saponin Vu Thi Thu Thuy cộng phân lập 2.1 Dược liệu thân rễ loài Paris vietnamensis (Takht.) H.Li 17 3.1 Quy trình chiết xuất phân đoạn Bảy hoa Việt Nam 25 3.2 Sắc ký đồ phân đoạn từ thân rễ Bảy hoa Việt Nam 26 3.3 Sắc ký đồ hợp chất PV-1 hệ dung môi DCM : MeOH (9:1) 29 3.4 Sắc ký đồ hợp chất PV-2 hệ dung môi n-butanol : nước : acid acetic (40:50:10) 31 3.5 Sơ đồ quy trình phân lập hai hợp chất PV-1 PV-2 32 3.6 Phổ 1H-NMR (600 MHz, CDCl3) hợp chất PV-1 33 3.7 Phổ 13C-NMR (150 MHz, CDCl3) hợp chất PV-1 34 3.8 Hợp chất PV-1 hay stigmasterol-3-O-β-Dgalactopyranosid 36 3.9 Phổ 1H-NMR (600 MHz, pyridin-d5) hợp chất PV-2 37 3.10 Phổ 13C-NMR (150 MHz, pyridin-d5) hợp chất PV-2 38 3.11 Hợp chất PV-2 hay polyphyllin D 41 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ P vietnamensis Paris vietnamensis 13 C-NMR 1D-NMR Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13) One-demensional Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều) H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) Distortionless Enhancement By Polarization DEPT APCI-MS HMBC HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation (Tương tác dị hạt nhân qua liên kết) NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 10 d Doublet 11 s Singlet 12 δ Độ dịch chuyển hóa học (đơn vị ppm) 13 J Hằng số tương tác (đơn vị Hz) 14 v/v Thể tích/thể tích 15 OMe Methoxy 16 Rha Rhamnopyranosyl Transfer (Phổ DEPT) Atmospheric Pressure Chemical IonizationMass spectrometry (Phổ khối) Heteronuclear Multiple Bond Correlation (Tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết) 17 Xyl Xylopyranosyl 18 Araf Arabinofuranosyl 19 Fruc Fructopyranosyl 20 Gal Galactopyranosyl 21 Glc Glucopyranosyl 22 Na+-K+/ATPase Kênh vận chuyển Na+-K+ có sử dụng ATP 23 IC50 24 STT Số thứ tự 25 TLC Thin Layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) 26 TLTK Tài liệu tham khảo 27 SKĐ Sắc ký đồ 28 DĐVN V Dược điển Việt Nam V Inhibitory Concenration 50% (Nồng độ ức chế 50%) PHỤ LỤC 1: PHIẾU GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM PHỤ LỤC 2: DỮ LIỆU PHỔ CỦA HỢP CHẤT PV-1 Cấu trúc hợp chất PV-1 Phụ lục 2.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, CDCl3) hợp chất PV-1 Phụ lục 2.2 Phổ 13C-NMR (150 MHz, CDCl3) hợp chất PV-1 Phụ lục 2.3 Phổ khối APCI-MS hợp chất PV-1 Phụ lục 2.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, CDCl3) hợp chất PV-1 Phụ lục 2.2 Phổ 13C-NMR (150 MHz, CDCl3) hợp chất PV-1 Phụ lục 2.3 Phổ khối APCI-MS hợp chất PV-1 PHỤ LỤC 3: DỮ LIỆU PHỔ CỦA HỢP CHẤT PV-2 (PV5A42) Cấu trúc hợp chất PV-2 Phụ lục 3.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.2 Phổ 13C-NMR (150 MHz, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.3 Phổ COSY (600/600, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.4 Phổ DEPT hợp chất PV-2 Phụ lục 3.5 Phổ HMBC (600/150, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.6 Phổ HSQC (600/150, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.7 Phổ khối APCI-MS hợp chất PV-2 Phụ lục 3.1 Phổ 1H-NMR (600 MHz, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.2 Phổ 13C-NMR (150 MHz, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.3 Phổ COSY (600/600, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.4 Phổ DEPT hợp chất PV-2 Phụ lục 3.5 Phổ HMBC (600/150, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.6 Phổ HSQC (600/150, pyridin-d5) hợp chất PV-2 Phụ lục 3.7 Phổ khối APCI-MS hợp chất PV-2 ... ? ?Nghiên cứu chiết xuất, phân lập số hợp chất từ rễ Bảy hoa Việt Nam (Paris vietnamensis (Takht.) H.Li), họ Trọng lâu (Trilliaceae)? ?? thực với mục tiêu sau: Chiết xuất, phân lập hợp chất từ rễ Bảy. .. BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN PHƯƠNG THẢO NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ RỄ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM (Paris vietnamensis (Takht.) H.Li), HỌ TRỌNG LÂU (Trilliaceae). .. Dược, Học viện Quân y Viện Hóa học, Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam 23 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT TỪ RỄ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA VIỆT NAM 3.1.1 Chiết