Đề tài Nghiên cứu chiết xuất, phân lập một số hợp chất từ lá cây Mơ tam thể (Paederia lanuginosa Wall.) nghiên cứu nhằm chiết xuất, phân lập được một số hợp chất từ lá cây Mơ tam thể; xác định được cấu trúc các hợp chất đã phân lập.
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC ====== ====== NGUYỄN ĐỨC LONG NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ LÁ CÂY MƠ TAM THỂ (Paederia lanuginosa Wall.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội – 2022 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC ====== ====== NGUYỄN ĐỨC LONG NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ LÁ CÂY MƠ TAM THỂ (Paederia lanuginosa Wall.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA: QH.2017.Y NGƯỜI HƯỚNG DẪN: PGS.TS VŨ ĐỨC LỢI ThS NGUYỄN THÚC THU HƯƠNG Hà Nội – 2022 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Vũ Đức Lợi – Phó trưởng Khoa Dược kiêm Trưởng Bộ môn Dược cổ truyền, Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam ThS Nguyễn Thúc Thu Hương – Giảng viên Bộ môn Dược liệu – Dược học cổ truyền Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội – người thầy, người tận tâm hướng dẫn, hết lịng bảo tạo điều kiện giúp đỡ em suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khố luận Em xin chân thành cảm ơn Thầy cô Bộ môn Dược liệu – Dược cổ truyền Trường Đại học Y Dược, ĐHQG Hà Nội tạo điều kiện, giúp đỡ em trình học tập, nghiên cứu để hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn đến tất quý Thầy cô, ban Lãnh đạo Trường Đại học Y Dược dạy dỗ, trang bị kiến thức, tạo điều kiện cho em suốt năm theo học trường Con xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè người ln theo sát động viên, quan tâm tạo điều kiện để hồn thành khóa luận Do kiến thức cịn hạn hẹp, thời gian nghiên cứu thực khóa luận khơng dài nên Khố luận em khơng tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận lời nhận xét, góp ý Q thầy để Khố luận tốt nghiệp Dược sĩ em hồn thiện Cuối cùng, em xin kính chúc Thầy cô sức khỏe, hạnh phúc, thành công sống, vững bước đường trồng người Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 31 tháng 05 năm 2022 Sinh viên Nguyễn Đức Long DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, VIẾT TẮT Ký hiệu STT 1 13 H - NMR Ý nghĩa Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (Carbon 13 Nuclear C - NMR Magnetic Resonance Spectroscopy) DEPT Phổ DEPT (Detortionless Enhancement by Polarization Transfer) HMBC Phổ HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) HSQC Phổ HSQC (Heteronuclear Single Quantum Correlation) br s d Doublet dd Doublet of doublets ddd Doublet of doublets of doublets 10 DMSO Dimethyl sulfoxid 11 ESI-MS Phổ khối ion hóa phun điện tử (Electrospray ionization mass spectrometry) 12 m/z 13 MeOH 14 MIC Nồng độ ức chế tối thiểu (Minimal inhibitory concentration) 15 IC50 Nồng độ ức chế 50% (50% inhibitory concentration) 16 ppm 10-6 (parts per million) 17 s 18 v/v Broad singlet Khối lượng/điện tích (Mass to charge ratio) Methanol Singlet Thể tích/thể tích DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng biểu Bảng 1.1 Bảng 1.2 Tên bảng biểu Phân bố loài thuộc chi Paederia Việt Nam Một số hợp chất phân lập từ Mơ tam thể, Nhật Bản (2011) Trang 11 Bảng 3.2 Số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR LT3 chất tham khảo 21 Bảng 3.3 Số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR LT4 chất tham khảo 24 DANH MỤC HÌNH Hình Tên hình Trang Hình 1.1 Mơ tam thể (Paederia lanuginosa) Hình 1.2 Đặc điểm quan sinh dưỡng Mơ tam thể Hình 1.3 Đặc điểm quan sinh sản Mơ tam thể Hình 1.4 Một số iridoid glucosid Hình 1.5 hợp chất anthraquinon từ rễ Mơ tam thể 10 Hình 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân đoạn từ Mơ tam thể 19 Hình 3.2 Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn ethyl acetat Mơ tam thể 20 Hình 3.3 Cấu trúc hóa học hợp chất LT3 21 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học hợp chất LT4 24 MỤC LỤC CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Paederia 1.1.1 Vị trí phân loại chi Paederia 1.1.2 Số lượng loài phân bố loài thuộc chi Paederia 1.1.3 Đặc điểm thực vật chi Paederia 1.2 Tổng quan Mơ tam thể (Paederia lanuginosa) 1.2.1 Đặc điểm thực vật Mơ tam thể 1.2.2 Phân bố sinh thái Mơ tam thể 1.2.3 Thành phần hóa học 1.2.4 Tác dụng dược lí 12 1.2.5 Công dụng theo Y học cổ truyền 14 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.1 Nguyên liệu 16 2.1.2 Hóa chất, thiết bị 16 2.2 Phương pháp nghiên cứu 17 2.2.1 Phương pháp chiết xuất phân lập hợp chất có Mơ tam thể 17 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất phân lập 18 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 19 3.1 Kết chiết xuất, phân lập số hợp chất 19 3.1.1 Chiết phân đoạn từ Mơ tam thể 19 3.1.2 Phân lập hợp chất sắc ký cột 20 3.2 Kết xác định cấu trúc hợp chất phân lập 21 3.2.1 Hợp chất LT3: Betulin 21 3.2.2 Hợp chất LT4: 7-O-methylmangiferin 24 3.3 Bàn luận 27 3.3.1 Betulin 27 3.3.2 7-O-methylmangiferin 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 30 ĐẶT VẤN ĐỀ Từ xa xưa, tài nguyên thuốc đóng vai trị quan trọng việc chăm sóc sức khỏe, đặc biệt nước có truyền thống sử dụng dược liệu Nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa vị trí địa lý thuận lợi, Việt Nam sở hữu nguồn tài nguyên thực vật vô phong phú đa dạng Theo ước tính nước ta có 12.000 lồi thực vật bậc cao, chiếm khoảng - 5% tổng số loài thực vật bậc cao biết giới Trong số đó, điều tra khoảng 3.850 lồi sử dụng làm thuốc thuộc 309 họ [10] Đây kho tài nguyên vô tận cho nghiên cứu phát triển thuốc Ngày nay, xuất bệnh truyền nhiễm gia tăng bệnh rối loạn chuyển hóa thúc đẩy quan tâm việc nghiên cứu phát hợp chất tiềm từ thảo dược Các nhà khoa học, tập đoàn dược phẩm lớn trọng vào sàng lọc từ thiên nhiên để tìm hoạt chất sinh học có dược tính mạnh hơn, độc với chi phí cho nghiên cứu phát triển thấp so với tổng hợp hóa học Chi Paederia (họ cà phê Rubiaceae) chi nhỏ với 31 loài phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới cận nhiệt đới [19, 30] Ở nước ta có lồi thuộc chi Paederia thân leo với tên gọi quen thuộc như: mơ tam thể, mơ tròn, mơ leo,…[3, 6] Chúng sử dụng nhiều địa phương loại rau sống ăn kèm nhiều món, giúp hỗ trợ đường tiêu hóa, dùng có nhiều đạm hay tươi sống dễ gây đầy bụng, khó tiêu, mẩn ngứa tiêu chảy [2] Tuy nhiên lồi có số khác đặc điểm thực vật tác dụng trị liệu Nghiên cứu chúng cần thiết để nhận biết loài xác định tiềm nâng cao giá trị sử dụng Cây Mơ tam thể (Paederia lanuginosa Wall.) hay gọi mơ lông trồng nhiều địa phương nước ta từ đồng miền núi [3] Các phận đặc biệt sử dụng thuốc dân gian giúp lợi tiểu, chữa nhiễm trùng, nhiễm giun sán Nhưng thông dụng chữa bệnh đường tiêu hoá kiết lỵ, tiêu chảy [3, 9] Theo nghiên cứu công bố, anthraquinon Mơ tam thể cho hoạt tính kháng khuẩn mạnh [31] Một số tác dụng khác chống oxi hóa [1], kháng virus [29], bảo vệ gan [5, 11] xác nhận Tuy nhiên, việc nghiên cứu thành phần hóa học, đánh giá tác dụng sinh học Mơ tam thể nhiều hạn chế Ở nước ta, có số nghiên cứu Mơ tam thể, ví dụ khóa luận tốt nghiệp Trần Quang Hưng nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Mơ tam thể [8] Để góp phần đưa Mơ tam thể có nhiều ứng dụng thực tiễn chăm sóc sức khỏe, chúng tơi lựa chọn thực đề tài: “Nghiên cứu chiết xuất, phân lập số hợp chất từ Mơ tam thể (Paederia lanuginosa Wall.)” với mục tiêu sau: Chiết xuất, phân lập số hợp chất từ Mơ tam thể Xác định cấu trúc hợp chất phân lập ... ====== NGUYỄN ĐỨC LONG NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ LÁ CÂY MƠ TAM THỂ (Paederia lanuginosa Wall.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA: QH.2017.Y NGƯỜI HƯỚNG... dưỡng Mơ tam thể Hình 1.3 Đặc điểm quan sinh sản Mơ tam thể Hình 1.4 Một số iridoid glucosid Hình 1.5 hợp chất anthraquinon từ rễ Mơ tam thể 10 Hình 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân đoạn từ Mơ tam thể. .. xuất phân lập hợp chất có Mơ tam thể 17 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất phân lập 18 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 19 3.1 Kết chiết xuất, phân lập số hợp chất