khảo sát đặc điểm vi sinh của các tác nhân gây nhiễm trùng huyết tại bệnh viện bệnh nhiệt đới

Theo tác gi Lowell S... Ngoài ra c ng có các lo in m nh Cryptococcus neoformans, Penicillium marneffei ho c Candida spp c nglà tác nhân hay gây nhi m trùng huy t.2.1... Vi khu n S.aureus

I C M N

Xin chân thành c m n ThS BS Nguy n V n V nh Châu, BS Tô Song

Di p ã h t lòng truy n t ki n th c cho tôi.

Xin chân thành c m n TS BS Tr n Ph M nh Siêu, BS Nhiên và các

cô chú, anh ch khoa vi sinh B nh vi n B nh Nhi t i ã nhi t tình gíup t o m i u ki n cho tôi hoàn thành khóa lu n này.

Xin chân thành c m n th y cô khoa công ngh sinh tr ng i h c M Tp.HCM ã d y d , ch b o t n tình cho tôi hoàn thành khóa lu n này.

i t t c lòng kính tr ng và bi t n sâu s c

T V N

B nh nhi m trùng nói chung và nhi m trùng huy t (NTH) nói riêng còn là

m t v n l n c nghiên c u trên toàn th gi i T n su t m c b nh NTH gia

ng trong vòng h n 30 n m qua Ch riêng Hoa K thì m i n m có kho ng750.000 m c b nh và 215.000 tr ng h p t vong chi m 9,3% t ng s t vong t i

t n c này M c dù có nhi u ti n b v t b c trong hi u bi t c ch sinh lý b nh

c a nhi m trùng huy t c ng nh s phát tri n c a các ph ng ti n và k thu t h i

s c tích c c nh ng t l m c b nh c ng nh t l t vong ngày càng t ng cao u

n trong nh ng th p k v a qua.[14]

T th p niên 1970, ng i ta ã ghi nh n tác nhân gây NTH chi m a s là vikhu n gram âm, vi khu n gram d ng ch tìm th y d i 10% [1], u này cùngphù h p v i s li u thu th p c t i BV Bênh Nhi t i trong n m 2008 (vi khu ngram âm chi m 78% trong t ng s vi khu n phân l p c t c y máu)

T lúc phát hi n tr ng h p nhi m HIV/AIDS u tiên n nay, trên th gi i

ã có hàng tri u ng i m c b nh và t vong Cùng v i s xu t hi n c a b nh nhi mHIV/AIDS, các tác nhân gây nhi m trùng c h i c ng gia t ng M t trong nh ng tácnhân th ng g p g n ây c phân l p t máu là n m (g m các lo i nh

Cryptococcus neoformans, Penicillium marneffei…).

làm gi m t l t vong, m t trong nh ng bi n pháp hi u qu là i u tr

s m v i kháng sinh thích h p L a ch n kháng sinh ban u tùy thu c vào c a

c a t ng b nh nhân, ngõ vào, tình hình kháng kháng sinh khu v c b nh nhân ang

ng Hi n nay v n kháng thu c là m t v n n i b t trong u tr b nhnhi m trùng nói chung và trong b nh NTH nói riêng T l kháng kháng sinh c acác vi trùng th ng g p không ng ng gia t ng Trong m t nghiên c u c a tác gi Lê

ng Hà n m 1998 th c hi n các b nh vi n trong toàn qu c cho th y t l kháng

kháng sinh c a Staphylococcus aureus v i Oxacilline t 39% - 49%, i v i vitrùng gram âm mà th ng g p nh t là Escherichia coli t l kháng v i nh ng thu c

th ng dùng u tri nh Gentamycine t 41% n 50%, Cephalosporin th hIII t 16% n 25% [1]

Vì v y, tài này c th c hi n d a vào k thu t phân l p, nh danh vàlàm kháng sinh nh m m c ích:

1 Kh o sát c m vi sinh c a các tác nhân gây b nh th ng g p ã phân

l p c th ng kê trong tài, t ó so sánh v i các k t qu ghi nh n c c a các

m tr c

2 Tìm hi u, ánh giá tình hình kháng kháng sinh c a các vi khu n cphân l p Trên c s ó, phân tích, so sánh v i tình hình kháng kháng sinh c acác ch ng phân l p c t nh ng n m tr c Qua ó, hy v ng s óng góp ph nnào cho vi c ch n oán và i u tr c n b nh khá ph bi n này

c u Trong t n y h c c a Stedman (1990) c ng ã nh ngh a nh sau: “NTH(septicemia) là m t b nh toàn thân gây ra do s lan tràn c a vi sinh v t và c t

c a nó trong máu” Tuy nhiên thu t ng này c s d ng trên lâm sàng và trong y

n theo nhi u cách khác nhau d gây nh m l n và gây khó kh n trong vi c phântích d li u Ngoài ra nó không mô t y toàn b ph tác nhân gây b nh trongmáu Chính vì v y nhi u tác gi ngh b thu t ng này Vào tháng 8 n m 1991

h i th o các th y thu c l ng ng c Hoa K /H i y h c s n sóc tích c c (American College

ch c Chicago ã a n th ng nh t t s thu t ng nh sau :

Nhi m trùng (Infection): Ph n ng viêm c a t ch c i v i s hi n di n c a visinh v t ho c s xâm nh p c a vi sinh v t vào các t ch c bình th ng v n vôtrùng

Vãng khu n huy t (Bacteremia): Có s hi n di n c a vi khu n s ng trong máu.

H i ch ng áp ng viêm h th ng (Systemic Inflammatory Response Syndrome

-SIRS): áp ng viêm h th ng c a c th i v i các tác nhân c p tính n ng khácnhau, c tr ng b i hai hay nhi u các tri u ch ng lâm sàng sau:

• Nhi t t ng > 38ºC ho c < 36°C

• T n s tim > 90 l n/phút (Trên + 2SD so v i giá tr bình th ng theo tu i

tr em)

• T n s th > 20 l n/phút ho c PaCO2 < 32 mmHg (t th ) (Trên + 2SD so

v i giá tr bình th ng theo tu i tr em)

• B ch c u > 12.000 ho c < 4.000/mm3, ho c > 10% b ch c u non (b ch c u

d ng a)

Nhi m trùng huy t (Sepsis): Ph n ng h th ng i v i nhi m trùng bi u hi n

b ng hai hay nhi u các tri u ch ng sau ây

• Nhi t t ng > 38ºC ho c < 36°C

• T n s tim > 90 l n/phút ( tr em trên + 2SD so v i l a tu i)

• T n s th > 20 l n/phút ho c PaCO2 < 32 mmHg (t th ) ( tr em trên +2SD so v i l a tu i)

• B ch c u > 12 000 ho c < 4000/ mm3, ho c > 10% b ch c u non (b ch c u

d ng a)

Nhi m trùng huy t n ng (Severe Sepsis): Nhi m trùng huy t kèm v i r i lo n

ch c n ng c quan, gi m t i máu Gi m t i máu và b t th ng t i máu có thbao g m h huy t áp, r i lo n phân b máu, thi u ni u ho c thay i t ng t tình

d Có ít nh t m t trong các d u hi u sau:

• Thay i ch c n ng não (r i lo n ý th c)

• PaO2< 75 mmHg (th b ng không khí phòng, b nh nhân không có b nh lý

ph i t c ngh n m n tính (COPD) tr c ó)

• ng cao n ng lactate huy t thanh

• Thi u ni u: < 30 ml/h hay < 0,5 ml/kg/h kéo dài trên 1 gi

1.2 Tri u ch ng

Các tri u ch ng lâm sàng c a NTH th ng không c hi u c bi t là tronggiai o n s m c a b nh S thay i v thân nhi t, huy t áp, nh p th , tri giác b nhnhân… là nh ng d u hi u s m cho NTH Theo tác gi Lowell S Young [1], các

X Ph i : Tím tai, toan hô h p

X Th n : Thi u ni u, vô ni u, toan máu

X Gan : Vàng da

X Tim : Suy tim

1.3 Ch n oán

T t c nh ng d u hi u nêu trên là nh ng g i ý khám xét và làm các xétnghi m Các xét nghi m khác c n ph i làm là:

2 TÍNH CH T VI SINH H C C A CÁC TÁC NHÂN CHÍNH

Cáctác nhân chính gây nhi m trùng huy t th ng g p là các tr c trùng gram

âm thu c h vi khu n ng ru t (Enterobacteriaceae) mà chi m t l cao nh t là

Escherichia coli, k n là Salmonella typhi, Klebsiella pneumoniae… và nhóm

tr c trùng gram âm không lên men ng g m Pseudomonas aeruginosa,

Acinetobacter spp… Trong nhóm c u trùng gram d ng, tác nhân th ng g p nh t

là Staphylococcus aureus, k n là Streptococcus spp và ôi khi c ng phân l p

c m t s tr ng h p là Streptococcus pneumoniae Ngoài ra c ng có các lo i

n m nh Cryptococcus neoformans, Penicillium marneffei ho c Candida spp c ng

là tác nhân hay gây nhi m trùng huy t

2.1 vi khu n ng ru t (Enterobacteriaceae)

Enterobacteriaceae là m t h g m nhi u lo i tr c khu n gram âm, s ng

ng tiêu hóa c a ng i và v t, có th gây b nh hay không gây b nh

Chúng có chung m t s tính ch t nh :

- Không bào t

- Di ng hay không di ng

- Hi u khí hay k khí tùy ý

- M c d trên các môi tr ng thông th ng

- Lên men ng glucose

- Có sinh h i hay không sinh h i

- Kh Nitrate thành Nitrite

- Oxidase âm

Escherichia coli ( E.coli)

Là lo i vi khu n c xem là ông o nh t trong nhóm c ng sinh ng

ru t Tuy là lo i c ng sinh giúp ích cho tiêu hóa, vi khu n có kh n ng gây b nhquan tr ng khi xâm nh p vào các c quan khác ru t Tr c khu n gram âm, dài hay

ng n tùy thu c môi tr ng nuôi c y M t s di ng, m t s l i không di ng

ng M t s có nang Vi khu n không sinh bào t Ph n ng sinh hoá c tr ng

c a E.coli là cho Indol d ng và Methyl red d ng

Thu c lo i vi khu n hi u khí hay hi u khí tùy nghi, nhi t thích h p là

370C, tuy nhiên có th t ng tr ng t 100C - 460C M t s hóa ch t c ch s t ng

tr ng c a E.coli nh chlorine và d n xu t, mu i m t, brilliant green, sodium deoxycholate, E.coli lên men nhi u lo i ng

Klebsiella pneumoniae (K.pneumoniae)

Th ng ho i sinh trong trong các ngu n c cung c p, m t vài g c c ngsinh ng ru t c a ng i Gây viêm thùy ph i n ng và các b nh nhi m khu n

ng hô h p trên, gây viêm m i, nhi m khu n huy t Ngoài ra K.pneumoniae còn

gây nhi m khu n ng ti u, viêm ni u o, viêm màng tim, nhi m khu n v t

th ng

Trên ph t nhu m gram kh o sát qua kính hi n vi tr c ti p, K.pneumoniae là

nh ng tr c khu n gram âm ng n, m p, có nang r t dày ng m t mình hay thành

ôi K.pneumoniae c m không di ng, ph n ng sinh hoá c tr ng là Citrat

ng , Ure ng

Salmonella [2]

Tr c n m 1983, Salmonella c chia thành 34 nhóm nh A, B, C,… Cácnhóm khác nhau ch y u d a vào kháng nguyên O, h

Sau n m 1983, d a vào ph ng pháp mã di truy n AND, La Monin và c ng

s (1987) chia Salmonella làm 2 nhóm chính trong ó có 6 nhóm ph Hai nhóm chính là Salmonella enterica (bao g m các Salmonella gây b nh) và Salmonella

bongori (g m các Salmonella không gây b nh).

Salmonella typhi (Sal.typhi) ch y u gây b nh th ng hàn và phó th ng hàn

(Salmonella paratyphi) ây là nhóm Salmonella th ng phân l p c trong máu

b nh nhân

c m nh n d ng Sal.typhi rõ ràng nh t là có kh n ng s n sinh H2S và

c bi t là tìm nh ng kháng nguyên c hi u: kháng nguyên v (kháng nguyên O,Vi) và kháng nguyên lông (kháng nguyên H) qua ph n ng ng ng k t khángnguyên-kháng th

2.1.1 c tính hình th :

Enterobacteriaceae là nh ng tr c khu n gram âm th ng s p x p r i rác

ho c ng thành ôi; có kích th c thay i trung bình kho ng 1 – 1,5 x 2 - 6 µm,

không bào t , m t s di ng nh nh ng tim mao và m t s khác không di ng

2.1.2 c tính nuôi c y:

Nhóm vi khu n ng ru t cho cùng m t c tính t ng tr ng trên các môi tr ng:

- Trên th ch máu: Khu n l c t ng i l n, bóng, xám có th tiêu huy t hay không

- Trên th ch dinh d ng NA (Nutrient agar): khu n l c có màu tr ng xám,trong và h i l i

- Trên môi tr ng phân bi t MC (Mac Conkey), vi khu n ng ru t c

nh n di n ra 2 nhóm :

+ Lên men ng lactose: khúm vi khu n có màu h ng

+ Không lên men ng lactose: khúm vi khu n không màu ho c có màu

h ng nh t

Th ch MC Th ch BA NHÓM LÊN MEN LACTOSE

E coli Khúm l n biên u màu h ng,

KHÔNG LÊN MEN LACTOSE

E coli Khúm nh trong, không màu

ho c h ng nh t, biên u

Khúm nh , tr ng sáng, t ngtiêu huy t

Enterobacter sp.

Sal.typhi

Khúm v a, màu h ng nh t,biên u

Khúm khu n trong, b không

u, không mùi

Khúm v a, tr ng sáng, biênu

Tr ng xám, b u, không mùi

B ng I.1: B ng tóm t t c tính l a c y c a vi khu n ng ru t trên các lo i môi tr ng

Hình I.1: Tr c nghi m sinh hóa K pneumoniae

Hình I.2: Tr c nghi m sinh hóa c a S.typhi

Hình I.3: Tr c nghi m sinh hóa c a E.coli lên men lactose

Hình I.4: Tr c nghi m sinh hóa c a E.coli không lên men lactose

2.2 tr c khu n Gram âm không lên men ng

(Non - Enterobacteriaceae)

2.2.1 Pseudomonas aeruginosa (P.aeruginosa )

2.2.1.1 N i c trú và tính gây b nh

P.aeruginosa (còn g i là tr c khu n m xanh) có kh p n i nh trong t,

c, không khí Ngoài ra còn có th g p ng tiêu hóa c a ng i

P.aeruginosa gây b nh : nhi m khu n tai, m t, v t th ng, v t ph ng, ng

ti u, ng hô h p Chúng c ng gây nhi m khu n huy t và viêm màng não

Tr c khu n m xanh có s c t màu xanh l c do s c t pyocyanin, ho c màunâu en do s c t pyomelanin

P.aeruginosa là tác nhân gây nhi m khu n b nh vi n Vi khu n này có th

c tìm th y trong các túi máu, huy t t ng nhi m khu n c a ngân hàng máu vàtrong các dung d ch sát trùng nh zepheran, benzal konium chloride hay các lo i xàphòng có hexachlorophene

2.2.1.2 c tính hình th

Tr c khu n gram âm, di ng, không bào t , ng m t mình, hay thành ôi,hay thành chu i ng n Hình th thay i trong l a c y già

2.2.1.3 c tính l a c y

Hi u khí tuy t i, d nuôi c y và t ng tr ng t t trên môi tr ng thông th ng

Tr c khu n m xanh t o c s c t hòa tan trong môi tr ng làm môi tr ng

có màu xanh l c hay nâu L a c y t a mùi th m nh

Trên BA: khúm vi khu n l n, ph ng hay h i l i, biên không u, tiêu huy t beta.Trên MC: không lên men ng lactose, khúm vi khu n không màu hay cómàu xanh xám, biên nh n hay có hình r ng c a

Trong canh c y l ng: là lo i vi khu n hi u khí tuy t i nên m c thành váng

n i lên trên m t môi tr ng

- Tr c nghi m oxidase: d ng tính Dùng phân bi t khúm tr c khu n mxanh v i các khúm tr c khu n gram âm không lên men glucose.

2.2.2 Acinetobacter spp

Nh ng vi khu n này tr c ây th ng có nhi u tên khác nhau nay c gomchung v m t h Vi khu n th ng trú trong ng hô h p, có th gây viêm nhi m

ng hô h p, nhi m khu n huy t

Acinetobacter spp là nh ng tr c khu n gram âm, hi u khí, m c d dàng trên

các môi tr ng phân l p bình th ng, không lên men h u h t các lo i ng, các

tr c nghi m sinh hóa c b n khác h u h t u âm tính

Tr c nghi m oxidase: âm tính

Trên MC th ng có màu h ng nh t, ôi khi ng qua màu cam nh Trên BA

khúm tr ng xám, h i nhày nh ng nh h n khúm K.pneumoniae.

P.aeruginosa và Acinetobacter spp là tác nhân gây NTH, th ng g p trongnhi m trùng b nh vi n nh ng ng i b suy gi m mi n d ch ho c n m vi n dàingày nh b nh AIDS, b nh ung th , ng i già suy ki t, …

Th nghi m P aeruginosa Acinetobacter spp

2.3 Nhóm c u trùng gram d ng

2.3.1 Staphylococcus aureus (S.aureus )

2.3.1.1 N i c trú và tính gây b nh

S.aureus có th gây các b nh t nhi m khu n thông th ng nh m n, m n

nh t, m n b c, viêm l tai và xoang m i n nhi m khu n tr m tr ng nh s ng

ph i, nhi m khu n huy t, viêm màng não, viêm màng trong tim và nhi m khu n

ng ti u

Ngoài ra, m t s lo i t c u nhi m khu n vào th c n, khi vào c th s ti t

ra c t ng ru t (enterotoxin) làm ng i n b nôn m a, tiêu ch y d d i ngaysau vài gi

2.3.1.2 c tính hình th và nhu m

C u khu n, ng kính kho ng 1µm, có th ng riêng r , ôi hay chu i

ng n (nh ng không quá 4 n 5 t bào) Cách s p x p ch y u là thành hình chùmnho, không di ng, không bào t , gram d ng , nh ng ôi khi thành gram âmtrong l a c y già

2.3.1.3 c tính nuôi c y

Hi u khí, k khí tùy ý

M c d trên môi tr ng BA Sau 18 – 24h, 37oC, các khúm vi khu n cóhình tròn ng kính kho ng 2 – 4mm, l i (gi ng nh m t kính ng h ) biên u,

c, có màu t tr ng, vàng chanh n vàng kim Màu bi n m t khi c y y m khí và

xu t hi n khi cho l a c y ti p xúc v i không khí

T c u t ng tr ng c trên môi tr ng ch a 7,5% NaCl; trong khi c ng

Cách ch n oán phân bi t khúm khu n S.aureus v i khúm khu n

Streptococcus spp: T c u khu n có enzym catalase s làm phóng thích O2 t n coxy già t o hi n t ng s i b t

K thu t (trên kính):

- Nh m t gi t oxy già 3% trên m t kính ng v t s ch

- Ch m nh khuyên c y nh a vô khu n vào khúm vi khu n tinh khi t mu n

th , r i cho khuyên ch m vào H2O2

- Tránh không c khuyên c y ch m vào th ch máu l y theo h ng c u trong

th ch, vì h ng c u này s làm ph n ng d ng gi Ngoài ra khuyên c y khu n

b ng platin c ng s cho ph n ng d ng gi

- Kh n ng t ng tr ng và lên men trên môi tr ng M.S.A (Chapman)

- Các lo i t c u khu n u t ng tr ng c trên môi tr ng MSA ch a 7,5%

NaCl Riêng g c b nh S.aureus do có kh n ng lên men c ng Mannitolnên t o m t vùng màu vàng quanh khóm vi khu n

- Tr c nghi m coagulase: d ng tính ây là tr c nghi m c dùng nh danh

S.aureus Vi khu n S.aureus có ch a enzyme coagulase có kh n ng làm ông

huy t t ng

2.3.2 Streptococcus pneumoniae (S.pneumoniae)

2.3.2.1 N i c trú và tính gây b nh

S.pneumoniae d b ly gi i b i nh ng ch t ho t ng b m t (surface-active

agents) nh mu i m t S.pneumoniae th ng trú ng hô h p trên c a ng i và

có th gây viêm ph i, viêm xoang, viêm ph qu n, viêm màng não và nhi m trùnghuy t Kh n ng gây b nh là do s t ng tr ng tràn lan vào các mô Vi khu n không

s n xu t c t c tính vi khu n m t ph n do nang, vì nang có tác d ng ng n

S.pneumoniae khó m c môi tr ng thông th ng nh th ch dinh d ng

NA mà ph i dùng môi tr ng giàu dinh d ng nh th ch máu BA, th ch nâu CA(chocolate agar) … Vi khu n k khí tu nghi, m c d dàng u ki n có 10% CO2,

nhi t thích h p 37 oC Cho tiêu huy t anpha trên th ch máu

2.3.2.4 nh danh

Th nghi m tan trong mu i m t, nh y c m v i optochin, c tính trên chu t(tiêm 0.5 - 1ml canh c y vi khu n 24h vào màng b ng chu t, chu t s ch t trongvòng 18 - 48h)

2.4. m Candida

nh ng ng i bình th ng kh e m nh, ng i ta tìm th y Candida spp

Trong mi ng, ru t, âm o, các n p x p c a da quanh h u môn, ph qu n Trong

tr ng thái ho i sinh, s l ng vi n m r t ít, soi t i các d ch sinh h c t niêm m cmay m n l m m i th y m t n hai t bào n m h t men n y búp ây, vi n m gi

m t th cân b ng v i các vi khu n cùng s ng v i nó, t t c t o thành vi sinh ch ngbình th ng c a c th

Trong m t s u ki n nh t nh, vi n m Candida spp chuy n t tr ng thái

ho i sinh sang ký sinh (gây b nh), lúc này s l ng vi n m t ng lên r t nhi u, có s

t o thành nh ng s i t n m gi cho phép vi n m len l i gi a nh ng t bào ký ch vàxâm nh p sâu h n

Vi n m gây b nh ch y u là Candida albicans, ôi khi có th là Candida

tropicalis, …

N m Candida thu c lo i n m h t men, hình oval Trên th ch sabouraud

khúm có màu tr ng c, nhão, có th m c t t nhi t phòng ho c 35 – 370C /

24 – 72h

nh danh:

- Tr c nghi m sinh m m: hòa tan vài khúm n m ã m c trên môi tr ngsabouraud vào 0.5 ml huy t thanh th , 370C trong 2h L y m t gi t huy t

thanh xem trên kính hi n vi: n u th y ng m m là Candida albicans, không sinh

ng m m là Candida spp ho c là n m h t men khác không ph i Candida.

- C y khúm n m trên sabouraud ho c m u c y máu nghi ng nhi m n m lên môi

tr ng nh danh Candida (CHRom agar), 24h – 48h nhi t phòng, quansát màu s c c a khúm n m: (hình I.7)

+ Màu xanh lá: Candida albicans

+ Màu xanh d ng: Candida tropicalis

+ Màu tím nh t: Candida spp

Hình I.5: N m Candida soi t i d i kính hi n vi

Hình I.6: N m Candida nhu m lam d i kính hi n vi

Hình I.7: Candida albicans (trái) và Candida tropicalis (ph i),

trên môi tr ng th ch dùng nh danh n m Candida

2.5. m Cryptococcus neoformans: (C neoformans)

Vi n m h t men này ph bi n kh p n i, c tìm th y trong t, nh t làtrong phân c a chim b câu Ng i b nhi m do hít ph i bào t trong không khí Vi

n m này ít khi gây b nh cho ng i bình th ng B nh th ng th y trên nh ng

ng i b b nh ung th , Hodgkin, ti u ng, dùng thu c corticoide lâu ngày ho cthu c c ch mi n d ch và ng i b suy gi m mi n d ch do AIDS B nh c phát

hi n ngày càng nhi u v i s gia t ng c a b nh AIDS N m có ái tính v i mô th nkinh B nh c nh lâm sàng th ng g p là viêm màng não, nh c u và s t là haitri u ch ng th ng g p nh t 50% các tr ng h p m m b nh phát tán ra nhi u cquan khác nh ph i và da

N m C neoformans có ba lo i: C neoformans var gattii, C neoformans var

grubii và C neoformans var neoformans.

nh danh:

- Soi t i v i m c tàu D i kính hi n vi n m C neoformans có vòng chi t quang

do c u t o t bào có bao dày nên m c tàu không th m qua c

- Sinh hoá: ure d ng

- nh danh b ng ph n ng Latex

Hình I.8: N m Cryptococcus neoformans

2.6. m Penicillium marneffei: (P.marneffei)

Là m t lo i n m gây b nh chu t tre, c phát hi n Vi t Nam vào nh ng

m 1950, g n ây l i c ghi nh n trên nh ng b nh nhân s ng vùng ông Nam

Á P.marneffei gây viêm ph i, s t, n i h ch và san th ng da

nh danh:

- Phân l p n m P.marneffei t m u tu x ng, da, máu và àm

- C y m u ra a Sabouraud, 300C ho c 370C trong t 48h - 72h 300C vi

n m s m c d ng n m m c, 370C s m c d ng n m men

- a 300C s xu t hi n khu n l c sau 2 ngày, khu n l c có màu tr ng sau ó

hình thành bào t chuy n sang màu xanh.Trong quá trình phát tri n, P.marneffei

sinh ra m t ch t màu có kh n ng hoà tan c trong n c, khu ch tán trong

a th ch Sabouraud làm cho th ch có màu ho c h ng vùng ngo i vi c a

n m m c có kh n ng xu t hi n màu cam

- Khi soi t i d i kính hi n vi, P.marneffei có d ng tiêu bi u c a n m s i (trong

su t, có vách ng n, phân nhánh)

- a 370C khu n l c phát tri n d i d ng n m men Nh ng khu n l c này có

d ng não (cerebriform), xo n ho c nh n Khu n l c có th xu t hi n v i màukem, nâu nh t ho c h ng nh t

Hình I.9: N m Penicillium marneffei

3 KHÁNG KHÁNG SINH C A VI KHU N

3.1 S kháng thu c kháng sinh c a vi khu n

Tr c ây khi thu c kháng sinh m i c phát hi n thì nói chung các vikhu n r t nh y c m v i thu c kháng sinh T khi các thu c kháng sinh c s

d ng r ng r i trong ch a b nh thì nh y c m c a vi khu n i v i thu c khángsinh thay i r t nhi u, nh ng ch ng lo i thu c kháng sinh ngày càng t ng lên

Trong nh ng n m u s d ng Penicillin u tr nhi m trùng do t c u thì ít khiphân l p c ch ng t c u kháng thu c, nh ng khi thu c này c s d ng r ng r ithì s ch ng t c u kháng thu c ngày càng t ng, n m c n n m 1950 các b nh do t

c u phân l p c các b nh vi n trên th gi i a s do t c u gây nên

Các tr c khu n gram âm có r t nhi u ch ng kháng thu c, áng chú ý là các

lo i vi khu n ng ru t và tr c khu n m xanh

Ng c l i có m t s vi khu n ít kháng thu c nh liên c u tiêu huy t nhóm Agây b nh th p kh p c p, viêm c u th n c p, c u khu n ph i, c u khu n màng não, c ukhu n l u,… Liên c u nhóm D (c u khu n ru t) l i kháng kháng sinh khá m nh

S di n bi n này làm thay i nguyên nhân b nh sinh và hình nh lâm sàngcác b nh nhi m khu n Ngày nay các b nh nhi m khu n còn nh y c m v i thu cngày càng gi m, trong khi ó các b nh tr m tr ng do t c u, c u khu n và tr ckhu n ng ru t, tr c khu n m xanh l i t ng lên làm cho vi c u tr g p khó

kh n nhi u h n

3.2 C ch kháng thu c c a VSV gây b nh[6]

3.2.1 Vi khu n s n xu t enzyme phá h y ho t tính c a thu c

Thí d S.aureus kháng penicillin G là do s n xu t c -lactamase, m t s

tr c khu n gram âm c ng s n xu t c enzyme này Các vi khu n gram âm kháng

c aminoglycosides là nh enzyme adenylylase, phosphorylase hay acetylase,còn kháng v i chloramphenicol là do vi khu n ti t chloramphenicolacetyltransferase

3.2.2 Vi khu n làm thay i kh n ng th m th u c a màng t bào v i thu c

Thí d tetracycline thì tích t bên trong nh ng vi khu n nh y c m, trong khi

ó nh ng vi khu n kháng thì thu c không tích t bên trong t bào c Các vikhu n kháng polymixins, amikacin và m t s aminoglycosides khác c ng là dothi u kh n ng th m th u c a màng t bào

3.2.3 i m g n c a thu c có c u trúc b thay i

M t s vi khu n kháng aninoglycosides do t bi n nhi m s c th , làm m t

ho c thay i m t lo i protein c bi t n v 30S c a ribo th vi khu n, c s

d ng nh là i m g n c a thu c nh ng vi khu n nh y c m Nh ng vi khu nkháng erythromycin c ng là do nh ng th th trên ti u n v 50S ã b thay i,còn kháng penicillin là do vi khu n có th m t hay ã làm thay i các PBPs

3.2.4 Vi khu n thay i ng bi n d ng làm m t tác d ng c a thu c

Thí d , m t s vi khu n kháng sulfonamides, không còn c n PABA ngoài

t bào n a t ng h p acid folic mà có th s d ng acid folic có s n cho quá trình

bi n d ng

3.2.5 Vi khu n có enzyme ã b thay i

Enzyme b thay i v n còn th c hi n c ch c n ng bi n d ng, nh ng ít

b nh h ng c a thu c so v i enzyme vi khu n nh y c m Thí d : vi khu n

nh y c m sulfonamides, tetrahydropteroic acid synthetase có ái l c v isulfonamides cao h n nhi u so v i PABA, còn vi khu n kháng sulfonamides do

t bi n thì ng c l i

PH N II: V T LI U VÀ PH NG PHÁP

NGHIÊN C U

- Chai c y máu Bactec và máy Bactec (hình II.1)

- Lam, thu c nhu m Gram (g m crystal violet, Iodin, alcool acetol và safarin),kính hi n vi;

- Môi tr ng BA (Blood Agar), MC (Mac conkey agar), MH (Mueller hintonagar), MH máu (Mueller hinton blood agar);

- B shortset th các ph n ng sinh hóa: KIA, IM, MR, Citrate, Urea;

- API 20E, 20NE; (hình II.2)

- c c t và ng tiêm ho c pipette vô trùng;